CN110870856A - 一种gabaa受体变构增强剂在医药上的应用 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种GABA_A受体变构增强剂在医药上的应用。具体的说，本发明提供了式(I)所示GABA_A受体变构增强剂在制备镇静、催眠、治疗或预防焦虑、抑郁、失眠、恶心、呕吐、偏头痛、精神分裂、惊厥和癫痫药物中的用途：

Description

一种GABAA受体变构增强剂在医药上的应用

技术领域

本发明涉及医药领域，具体的说，本发明涉及一种GABA_A受体变构增强剂在医药上的应用。

背景技术

癫痫是大脑神经元突发性异常放电，导致短暂的大脑功能性障碍的一种慢性疾病。而癫痫发作是指脑神经元异常和过度超同步化放电所造成的临床现象。由于目前国内外癫痫患者患病率越来越高，因此成为社会日益关注的健康问题。统计显示：癫痫患者约占世界人口的0.5％～1％。尽管对癫痫进行了持续深入的研究，但是对癫痫病的发病原理依然所知甚少，而且目前所使用的药物仅能部分缓解癫痫患者的病情，对发展性大发作病人的有效率也只有60％～70％。

近年来，随着人们对癫痫研究的深入，发现GABAA受体与癫痫的发作息息相关。GABAA受体是人体中枢组织最重要的中枢抑制性受体，脑内GABAA受体的激活可使神经元超极化，降低神经细胞的兴奋性。传统抗癫痫药物苯二氮卓类，巴比妥类以及新开发上市的丙戊酸钠，左乙拉西坦等药物，均和增强GABAA受体作用或提高组织GABA浓度相关。

中国专利ZL201010160034.9中公开的二联苯酚(3,3’,5,5’-四异丙基-4,4’-二联苯酚，结果如图2)为西安力邦制药有限公司开发的抗癫痫新药，是一种新型GABAA受体变构调节增强剂，用于治疗多种癫痫发作包括癫痫持续状态。该化合物临床前研究表现出良好的抗癫痫活性以及较小的副作用，目前已进入临床研究阶段。但临床前研究发现，该化合物静脉注射后入脑速度较慢，药物在脑内达到治疗阈值浓度需要一定时间，对于正处于发作中的癫痫不能立即起效，因此开发一种起效速度快，药效更高的抗癫痫药是本发明的目的。

发明内容

本发明的一个目的在于提供一种GABA_A受体变构增强剂在医药上的应用。

为达上述目的，一方面，本发明提供了一种式(I)所示GABA_A受体变构增强剂在制备与GABA_A受体相关疾病的药物中的用途：

根据本发明一些具体实施方案，其中，所述GABA_A受体相关疾病包括镇静、催眠、治疗或预防焦虑、抑郁、失眠、恶心、呕吐、偏头痛、精神分裂、惊厥和癫痫。

根据本发明一些具体实施方案，其中，所述癫痫为能够导致海马神经元丢失的癫痫。

根据本发明一些具体实施方案，其中，所述癫痫为颞叶癫痫。

附图说明

图1为大鼠给药后不同时间点脑组织中的化合物1和二联苯酚浓度变化图。

图2为实验例1的KA诱导的慢性癫痫模型的自发性癫痫发作次数。

图3为实验例1的KA诱导的慢性癫痫模型的神经元细胞存活率。

具体实施方式

以下通过具体实施例详细说明本发明的实施过程和产生的有益效果，旨在帮助阅读者更好地理解本发明的实质和特点，不作为对本案可实施范围的限定。

实施例1 4,4’-二羟基-3,3’-二异丙基-5,5’-二丙基联苯(化合物1)的制备

(1)于25mL的圆底烧瓶中依次加入邻异丙基苯酚(1.0g，7.3mmol)和烯丙基溴(14.6mmol)，并用二氯甲烷溶解；

(2)于另一50mL的烧瓶中加入苄基三丁基溴化铵(0.26g，0.73mmol)，并用1M NaOH溶液溶解；

(3)室温下，将(1)中所得溶液缓慢加入(2)中所得溶液，室温搅拌2h，分离出有机相，水相用二氯甲烷萃取，合并有机相，用水、饱和氯化钠洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩得无色液体。该液体在氮气保护下，于250℃加热2h，冷却，柱层析得无色液体；将该无色液体溶于无水乙醇中，加入Pd/C还原，还原后抽滤，将得到的母液浓缩，获得2-异丙基-6-丙基苯酚；

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.06(dd,J＝7.6,1.6Hz,1H),6.97(dd,J＝7.5,1.6Hz,1H),6.85(t,J＝7.6Hz,1H),4.75(s,1H),3.22–3.13(m,1H),2.59–2.54(m,2H),1.72–1.59(m,2H),1.26(d,J＝6.9Hz,6H),0.99(t,J＝7.3Hz,3H)；

(4)将2-异丙基-6-丙基苯酚(1.0g，5.6mmol)溶于20mL二氯甲烷中，加入催化剂Cu(OH)Cl.TMEDA(N,N,N,N-四甲基乙二胺碱式氯化铜)(50mg，0.1mmol)，室温搅拌，得红色固体醌，然后用保险粉还原得4,4’-二羟基-3,3’-二异丙基-5,5’-二丙基联苯(1.1g，55.5％)。

4,4’-二羟基-3,3’-二异丙基-5,5’-二丙基联苯：¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ7.29(s,4H),6.52(s,2H),3.13-3.08(m,2H),2.43-2.40(m,4H),1.51-1.43(m,4H),1.03(d,12H),0.84-0.81(m,6H)。

实验例1

1、化合物1和二联苯酚(3,3’,5,5’-四异丙基-4,4’-二联苯酚)静脉给药后大鼠药物脑组织分布对比试验。

SD大鼠72只，体重200～220g，随机分成12组(每一时间组6只)，给药前禁食12h。45mg/kg的剂量分别静注给药化合物1或二联苯酚，分别于给药后5min、15min、30min、1h、2h和4h处死，立即取脑组织，用冰冷蒸馏水进行冲洗，吸干，-40℃冷冻保存。采用LC-MS/MS法测定大鼠给药后不同时间点脑组织中的化合物1或二联苯酚浓度，结果如表1和图1所示。

表1

化合物1静脉注射后5min脑组织浓度是二联苯酚的2.75倍，化合物1脑组织内浓度峰值时间为15min，而二联苯酚的浓度峰值在给药后30min。化合物1的脑组织AUC_0-4h约为二联苯酚的1.31倍。

上述结果显示，相同剂量静脉给药后，化合物1的入脑速度和入脑量明显高于二联苯酚。

2、体外GABAA受体靶点亲和力试验。

采用放射性配体([³⁵S]TBPS)受体竞争结合试验，评价待测化合物(10uM)与GABAA受体的亲和力，结果如下表2所示。

表2

结果表明，化合物1与GABAA受体均有较高的亲和力，且亲和力与二联苯酚相当。

3、化合物1和二联苯酚(3,3’,5,5’-四异丙基-4,4’-二联苯酚)抗PTZ诱导大鼠癫痫发作试验。

实验采用雄性SD雄性大鼠(西安交通大学)，体重200-250g，分别静脉给予45mg/kg的二联苯酚注射液、化合物1注射液以及等体积的空白溶媒。在静脉给药后1、3、5、10、15、30、60、90min，120min，70mg/kg腹腔注射PTZ诱导大鼠强直阵挛性癫痫发作。每个药物组每个时间点7只大鼠，大鼠发作强度依照Racine分级标准，记录Ⅲ-Ⅴ级发作状态。并根据发作的强度记录分值：发作Ⅴ级记5分，Ⅳ级记4分，Ⅲ级记3分，Ⅲ级以下记0分。每组动物发作强度为7只动物得分总和，结果如下表3所示。

表3预防给药后各时间点动物癫痫发作等级及强度评分

实验结果表明，化合物1静脉注射后3～5min即可完全抑制PTZ诱导的癫痫大发作，并可维持该药效至给药后120min以上。而二联苯酚静脉注射后至15min才可以完全抑制PTZ诱导的癫痫大发作，且药效在给药90min后开始衰减。从上述结果可以看出，本发明化合物给药后的起效速度明显优于二联苯酚，而峰值药效维持时间也高于后者。

4、KA诱导的慢性癫痫模型

采用海马微量注射红藻氨酸(KA)法制作慢性癫痫动物模型：利用脑立体定位仪将0.2ug(2ul)KA注入小鼠海马内，造模后6h内，小鼠出现癫痫发作。在造模后3周内，小鼠陆续出现自发性癫痫发作。将造模后出现自发性癫痫发作的小鼠分为两组(n＝10)：化合物1给药组和生理盐水给药组，造模后第二天分别每天静脉给予化合物1(100mg/kg)，以及等体积生理盐水。从造模3周后起观察小鼠的自发性癫痫发作次数，观察2周时间(图2)。观察结束后处死小鼠，取海马组织切片，NeuN染色统计CA1区神经元细胞存活率(图3)。

结果显示，本发明化合物给药KA诱导慢性癫痫模型动物不仅能够明显抑制发自发性癫痫发作，还能够显著抑制该癫痫模型诱导的海马神经元死亡。

Claims (4)

1.式(I)所示GABA_A受体变构增强剂在制备与GABA_A受体相关疾病的药物中的用途：

2.根据权利要求1所述的用途，其中，所述GABA_A受体相关疾病包括式(I)所示GABA_A受体变构增强剂在制备镇静、催眠、治疗或预防焦虑、抑郁、失眠、恶心、呕吐、偏头痛、精神分裂、惊厥和癫痫。

3.根据权利要求2所述的用途，其中，所述癫痫为导致海马神经元丢失的癫痫。

4.根据权利要求2所述的用途，其中，所述癫痫为颞叶癫痫。

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