CN110818810A - 一种连续相变萃取灵芝多糖的方法及基于在线电导率评价其提取工艺的方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种连续相变萃取灵芝多糖的方法及基于在线电导率评价其提取工艺的方法。将干燥后的块状灵芝，烘干后粉碎，用孔径为1～8mm的筛网过筛，得到灵芝粉末；于萃取温度60～100℃、萃取压力0.02～0.20MPa的条件下，料液比为1：10～100g/mL，萃取流速为20～100L/h，连续萃取60～300min，得到萃取液。本发明与传统的热水浸提法相比，灵芝多糖提取率提高10％～30％，萃取时间缩短40％～60％。而且本发明将电导率在线监控系统与连续相变萃取技术相结合，能有效测定萃取液的电导率，为提取物质量控制以及提取物分离、制备的在线监控提供了一种新方法。

Description

一种连续相变萃取灵芝多糖的方法及基于在线电导率评价其 提取工艺的方法

技术领域

本发明属于萃取分离技术领域。更具体地，涉及一种连续相变萃取灵芝多糖的方法及基于在线电导率评价其提取工艺的方法。

背景技术

灵芝是一类大型真菌，在真菌分类中属于担子菌纲、多孔菌目、多孔菌科、灵芝属，灵芝中的活性成分多且组成复杂，当前已分离得到的有150多种化合物，主要有多糖类、三萜类化合物、甾醇类、生物碱类、呋喃衍生物、氨基多肽类以及无机元素等。其中，灵芝多糖是灵芝重要的化学成分之一，至今已经从灵芝中分离得到两百余种多糖(肽)，其化学结构和药理活性研究表明，多糖具有的多种生物活性与其结构、构象等有着密切的关系，灵芝多糖具有抗肿瘤、免疫调节、降血糖、抗衰老、抗氧化清除自由基等作用。

从灵芝中提取多糖类物质主要根据灵芝多糖类物质能溶于水、稀碱、稀酸而不溶于醇、醚以及丙酮等有机溶剂的性质进行提取分离。传统工业提取主要采用热水浸提法，而多糖类物质多存在于灵芝子实体细胞壁中，在提取过程中较难渗出导致提取时间长、提取不完全和提取率低，现代科学的发展已逐渐将超声波法、微波法应用于灵芝多糖类物质的提取。超声波提取以及微波提取处理量小、成本高、工艺较复杂，且工业应用成本较高。

专利号为CN1560072A的专利公开了一种从灵芝中制备灵芝三萜和灵芝多糖的方法，将干燥的灵芝实体破碎后采用超临界CO₂提取技术提取灵芝三萜，然后使用低温提取和快速浓缩技术获得灵芝多糖，但是采用超临界CO₂提取技术所需的设备投入较大，操作难度高，生产成本高昂。专利号为CN105294875B的专利公开了一种从灵芝子实体中提取灵芝多糖的方法，将灵芝子实体粉碎后通过与亚氯酸钠-冰醋酸的氧化体系反应，将组成细胞壁的纤维素和木质素消解断裂，使更多的活性物质释放出来，大大提高了多糖的提取效率，但是灵芝三萜与多糖多用于医药保健用途，亚氯酸钠具有强致癌性，用该方法提取产品易产生安全隐患。

同时，灵芝因产地、生长年限、采收年份以及采收时间的差异，会导致灵芝中有效活性成分如多糖、三萜等含量有所变化，而工业生产过程中往往固定提取时间、料液比以及温度等参数，易导致不同批次提取液的质量波动，导致不同批次所得提取液固形物含量、多糖以及三萜含量差异，同时会引起时间、人力和物力的浪费。

现有有关多糖提取工艺的文献或专利公开的评定方法，多数采用HPLC法分析，采用已知分子量的标准物质位，判断提取物是否存在或者用于标定分子量的分布区间，该方法在生物化学领域是常规方法，在中药提取过程由于较为复杂而较少采用，且该方法由于采用高效液相法，进样量相对较少而导致检测的灵敏度相对较低。目前普遍采用的对个别“活性成分(或指标性成分)”定量的“单一下限值”的评价方法，完全借鉴天然药物的研究思路，不适合中药提取过程的评价。

因此，研究灵芝多糖提取过程的快速评定方法，有助于解决提取过程中关键工艺环节的质量控制问题，有效缩短提取时间以及减少能量消耗，有助于解决中药产品工艺和成分的稳定性、可靠性问题，对于植物提取物、天然药物和中药行业的工业技术进步和产品质量具有重大现实意义。

电导率是物质传输电流的能力，它表示的是物质的导电性能，是物质的本身属性。在植物细胞中，无机盐、多糖、蛋白等物质在提取过程中会透过细胞壁和细胞间质向提取介质中扩散并在提取介质中以盐的形式存在,使提取介质显示电信号，因此通过关联电信号与有效成分含量间的关系,可对提取过程进行快速、在线监控。若能在提取技术领域引入电导率快速、在线监控方法，既能克服传统提取检测手段耗时长、效率低的局限性，又可以通过检测提取液的电导率，来预知其中固形物含量以及多糖含量，有利于提高灵芝多糖提取过程中的控制水平，具有重要的科学价值以及应用前景。

发明内容

本发明的目的在于克服现有灵芝多糖提取技术的不足，提供一种提取率高、可操作性强、环保、节能、适合于大规模中试以及工业生产的连续相变萃取灵芝多糖的方法。

本发明的另一目的在于提供一种基于在线电导率评价连续相变萃取灵芝多糖工艺的方法。所述电导率检测方法系统包括：提取罐上端外循环管路、旁通手动分流阀、检测池以及电导率检测探头，检测目标包括灵芝萃取液中的电导率值、固形物含量以及灵芝多糖含量的测定。采用该方法能快速判定萃取过程的终点，为灵芝多糖萃取工艺的优化以及萃取物的制备提供一种新的在线监控方法。

本发明通过以下技术方案实现：

一种连续相变萃取灵芝多糖的方法，包括以下步骤：

S1.将干燥后的块状灵芝，烘干后粉碎，用孔径为1～8mm的筛网过筛，得到灵芝粉末；

S2.将上述灵芝粉末于萃取温度60～100℃、萃取压力0.02～0.20MPa的条件下，加入萃取剂并控制灵芝粉末与萃取剂的料液比为1：10～100g/mL，萃取流速为20～100L/h，连续萃取60～300min，得到萃取液；

S3.萃取液流经解析釜，设置解析温度65～90℃，解析压力-0.10～0.10MPa，萃取剂通过加热减压汽化为气体，再通过冷凝回流重新液化回到萃取釜，使灵芝多糖与萃取剂分离并积淀在解析釜底部；其中所述萃取剂为水。

本发明整个萃取过程中，萃取剂的由液态到气态再到液态的相变过程是即时、连续的，萃取剂是进行连续相变，循环使用的，萃取的灵芝多糖保存在解析釜中，萃取完后放出收集。

优选地，步骤S3，与灵芝多糖分离后的萃取溶剂，通过冷凝水冷凝，液化为纯水进入萃取釜中，对物料再次萃取，萃取条件与前一次萃取条件相同，如此循环多次。

在本发明较佳的实施例中，所述灵芝粉末与萃取剂的料液比为1：20～40g/mL，优选为1：30g/mL。

在本发明较佳的实施例中，所述筛网的孔径为1～2mm。

在本发明较佳的实施例中，所述萃取温度为60～100℃，萃取时间为180～240min，萃取流速为40～80L/h，萃取流速优选为40～60L/h。

在本发明较佳的实施例中，所述萃取温度为80℃，萃取时间为240min，萃取流速为40L/h，萃取压力0.10MPa。

在本发明较佳的实施例中，所述萃取温度为100℃，萃取时间为180min，萃取流速为60L/h，萃取压力0.08MPa。同时在160～180min的时间间隔内测定电导率数值变化率小于5％。

在本发明较佳的实施例中，所述萃取温度为100℃，萃取时间为300min，萃取流速为60L/h，萃取压力0.15MPa。

在本发明较佳的实施例中，所述烘干温度为50～65℃，水分含量控制在8％～15％。

在本发明较佳的实施例中，将灵芝在55℃温度下烘干，水分含量控制在13％。

在本发明较佳的实施例中，所述解析温度75℃，解析压力-0.08MPa。

在本发明较佳的实施例中，所述萃取剂pH为5.0～7.5的三级水。

本发明所采用的连续相变技术是指萃取剂在一定的压力以及温度条件下流经萃取釜对物料进行萃取后，经解析装置相变为气体，其中萃取到的物质落放入解析釜，解析后的气体再经过冷凝成液体，再次流经萃取釜，对物料进行反复萃取的过程，可连续多次对物料进行动态、高效萃取。与传统的热水浸提法相比具有有效成分提取率高且在提取过程中溶剂几乎无消耗、无污染，作用效果快，能耗小、处理量大、生产成本低等特点。

本发明还涉及了一种基于在线电导率评价连续相变萃取灵芝多糖工艺的方法，包括以下步骤：

S21.将提取罐上端外循环管路与检测池连接，检测池再内接电导率检测探头；萃取过程中，按一定时间间隔5～30min测定萃取液的电导率，同时使用水分测定仪测定萃取液中的固形物含量，并使用紫外分光光度法测定萃取液中的多糖含量；

S22.建立电导率、固形物含量以及多糖含量之间的线性拟合方程(y＝kx+b)，其中x为电导率，y为固形物含量或多糖含量；

S23.测定不同萃取时间、不同萃取温度、不同萃取压力及不同萃取流速条件下萃取液中的电导值、固形物含量及多糖含量数据，使用数据处理软件进行数据拟合，优化矫正模型。

本发明首次将电导率在线监控系统与连续相变萃取技术相结合，有效的测定萃取液的电导率，并与文献上测定固形物含量、多糖含量方法进行计算机数据拟合，使得通过电导率数据可以快速了解萃取液中的固形物含量以及多糖含量；可有效的判定提取工艺终点并缩短了提取时间，为提取物质量控制以及提取物分离、制备的在线监控提供了一种新方法。

在本发明较佳的实施例中，所述数据处理软件为Graphpad prism5.0。

优选地，步骤S21中电导率测定时间间隔设置为20min，以20min内电导率变化率小于5％作为提取工序终点；

优选地，步骤S21中电导率探头可接在提取罐内壁或者解析釜内壁中，交错排列。

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

1.本发明所采用的连续相变技术可连续多次对物料进行动态、高效萃取，同时提取过程中料液即时分离，后期无需采用过滤分离等操作。

2.本发明提取率高、可操作性强、环保、节能、适合于大规模中试以及工业生产。与传统的热水浸提法相比，灵芝多糖提取率提高10％～30％，萃取时间缩短40％～60％。

3.萃取过程中使用三级水作为萃取溶剂，成本低可以循环利用且环保无污染。

4.采用的为药食两用的灵芝作为提取原料，目前市场上食品以及制药行业对灵芝的需求巨大，因此，从灵芝中提取灵芝多糖实现药用价值，具有广阔的应用前景与优势。

5.本发明将电导率在线监控系统与连续相变萃取技术相结合，能有效测定萃取液的电导率，使得通过电导率数据可以快速了解萃取液中的固形物含量以及多糖含量；可有效的判定萃取工艺终点，并预知固形物含量以及多糖含量，为提取物质量控制以及提取物分离、制备的在线监控提供了一种新方法。

附图说明

图1为萃取时间对灵芝多糖提取含量的影响。

图2为萃取温度对灵芝多糖提取含量的影响。

图3为萃取料液比对灵芝多糖提取含量的影响。

图4为灵芝粉末的颗粒度对灵芝多糖提取含量的影响。

图5为灵芝多糖提取液中固形物含量与电导值的关系图。

图6为灵芝多糖提取液中多糖含量与电导值的关系图。

具体实施方式

以下结合具体实施例来进一步说明本发明，但实施例并不对本发明做任何形式的限定。实施方式中简单参数的替换不能一一在实施例中赘述，但并不因此限制本发明，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，应被视为等效的置换方式，都应包含在本发明范围内。

除非特别说明，本发明采用的试剂、方法和设备为本技术领域常规试剂、方法和设备。

除非特别说明，以下实施例所用试剂和材料均为市购。

实施例1一种连续相变萃取灵芝多糖与热水浸提灵芝多糖提取方法的比较

1、连续相变萃取灵芝多糖的方法

(1)干燥后的块状灵芝，在55℃温度下烘干，水分含量控制在10％，粉碎至10目(筛网孔径为2mm)，得到灵芝粉末；

(2)将2000g灵芝粉末加入到20L萃取釜中，设置萃取温度100℃、萃取压力0.10MPa、萃取流速60L/h将纯水注入萃取釜中，连续萃取240min；

(3)萃取完成后，萃取液流经解析釜中，解析温度设置75℃，解析压力-0.08MPa，在解析釜中放出灵芝多糖提取液，回收收集纯水，检测灵芝固形物以及多糖含量。

2、热水浸提灵芝多糖的提取方法

(1)干燥后的块状灵芝，在55℃温度下烘干，水分含量控制在10％，粉碎至10目(筛网孔径为2mm)，得到灵芝粉末；

(2)取200g灵芝粉末，加入2400mL三级水后置于烧杯中在电炉上加热提取，设置提取温度100℃，提取时间240min，提取结束后检测灵芝固形物以及多糖含量。

3、固形物以及多糖含量得率对比

表1不同提取工艺所得固形物得率以及多糖得率对比

由表1可知，结果表明，对比热水浸提工艺，连续相变萃取灵芝其固形物及多糖得率分别提升15％、24％；连续相变萃取工艺其固形物以及多糖得率要显著高于热水浸提法。

实施例2连续相变萃取灵芝多糖方法的研究

本发明根据灵芝原料的特性，不断分析确定和调节工艺条件。参照以下步骤操作：

(1)干燥后的块状灵芝，在55℃温度下烘干，水分含量控制在10％，粉碎至适当目数，得到灵芝粉末；

(2)将适量的灵芝粉末加入到20L萃取釜中，确定萃取压力为0.10MPa，设置萃取温度、萃取流速，将纯水注入萃取釜中，连续萃取一定时间；

(3)萃取完成后，萃取液流经解析釜中，解析温度设置75℃，解析压力-0.08MPa，在解析釜中放出灵芝多糖提取液，回收收集纯水，检测灵芝固形物以及多糖含量。

附图1～4提供了萃取时间、萃取温度、萃取料液比、灵芝粉末颗粒度对灵芝多糖提取率影响的结果。表2为萃取流速对灵芝多糖提取率影响的结果。

萃取时间对灵芝多糖提取率的影响如图1所示，萃取时间为60～300min。当萃取时间为60～300min之间时，随着萃取时间的增加，灵芝多糖提取率显著增加(p<0.05)，在萃取时间为300min时多糖提取率达到最大值，为39.10％。但是本发明研究发现，并不是萃取时间越长越好，随着提取时间的延长，多糖提取率增加不显著(p>0.10)且灵芝多糖会发生分解，同时工艺成本会显著提高。

萃取温度对灵芝多糖提取率的影响如图2所示，萃取时间为60～100℃。萃取温度对灵芝多糖提取率的影响是当温度范围在60～100℃之间时，随着萃取温度的增加，灵芝多糖提取率显著增加(p<0.05)，同一萃取时间300min下，在萃取温度为100℃时多糖提取率达到最大值，为39.10％。但是本发明研究发现，并不是萃取温度越高越好，过高温度会破坏灵芝多糖的三螺旋缠绕结构方式同时会使灵芝多糖分子量排布发生不可逆改变。

萃取料液比对灵芝多糖提取率的影响如图3所示，料液比为1：20～40g/mL。料液比对灵芝多糖提取率的影响是当料液比范围在为1：20～40g/mL之间时，随着料液比的增加，灵芝多糖提取率显著增加(p<0.05)，同一萃取时间300min下，在料液比为1：30g/mL时多糖提取率达到最大值，为37.56％。当料液比大于1：30g/mL时，多糖提取率显著下降(p<0.05)。

萃取颗粒度对灵芝多糖提取率的影响如图4所示，当筛网孔径在1～8mm之间时，随着筛网孔径(即萃取颗粒度)的减小，灵芝多糖的提取率随之显著增加(p<0.05)，同一萃取时间300min下，在筛网孔径在2mm时，多糖提取率最大，为36.89％。随着筛网孔径(即萃取颗粒度)继续减小，灵芝多糖的提取率随之略有增加，但是增加的幅度很小，对多糖提取率的影响并不大。当萃取时间大于180min，且萃取颗粒度为1mm时，多糖提取率开始明显下降。这是因为原料的粉碎度越大，颗粒度就越小，其表面积越大，与萃取溶剂接触面积也越大，溶剂渗入越快，因而有利于提取；但是，原料粉碎度过细，则会增大原料堆积密度，使通透性变差，增加了传质阻力，不利于萃取，如萃取不均匀、多糖萃取率降低等。

表2萃取流速对灵芝多糖提取率的影响

由表2可知，不同萃取流速对固形物得率有一定影响，固形物得率随流速提高而增加，但无显著性差异。三个流速下，多糖提取率呈现先增加后减少趋势，40L/h、60L/h的萃取流速多糖提取率较高，为34.06％、35.29％。故选择40L/h、60L/h为萃取流速。

实施例3一种连续相变萃取灵芝多糖的方法

(1)干燥后的块状灵芝，在55℃温度下烘干，水分含量控制在13％，粉碎至20目(筛网孔径为1mm)，得到灵芝粉末；

(2)将2000g灵芝粉末加入到20L萃取釜中，设置萃取温度80℃、压力0.10MPa、萃取流速40L/h将pH为7.0的三级纯水注入萃取釜中，连续萃取240min；控制灵芝粉末与萃取剂的料液比为1：30g/mL；

(3)萃取完成后，萃取液流经解析釜中，解析温度设置75℃，解析压力0.08MPa，萃取结束后在解析釜中放出灵芝多糖提取液，回收收集纯水，其多糖提取率为41.20％。

实施例4一种连续相变萃取灵芝多糖的方法

(1)干燥后的块状灵芝，在55℃温度下烘干，水分含量控制在13％，粉碎至10目(筛网孔径为2mm)，得到灵芝粉末；

(2)将2000g灵芝粉末加入到20L萃取釜中，设置萃取温度100℃、压力0.08MPa、萃取流速60L/h将pH为7.2的三级纯水注入萃取釜中，连续萃取180min；控制灵芝粉末与萃取剂的料液比为1：30g/mL；

(3)萃取完成后，萃取液流经解析釜中，解析温度设置75℃，解析压力-0.08MPa，萃取结束后在解析釜中放出灵芝多糖提取液，回收收集纯水，其多糖提取率为40.05％。

实施例5一种连续相变萃取灵芝多糖的方法

(1)干燥后的块状灵芝，在50℃温度下烘干，水分含量控制在8％，粉碎至10目(筛网孔径为2mm)，得到灵芝粉末；

(2)将2000g灵芝粉末加入到20L萃取釜中，设置萃取温度100℃、压力0.15MPa、萃取流速60L/h将pH为7.2的三级纯水注入萃取釜中，连续萃取300min；控制灵芝粉末与萃取剂的料液比为1：30g/mL；

(3)萃取完成后，萃取液流经解析釜中，解析温度设置75℃，解析压力-0.08MPa，萃取结束后在解析釜中放出灵芝多糖提取液，回收收集纯水，其多糖提取率为39.00％。

实施例6一种连续相变萃取灵芝多糖的方法

(1)干燥后的块状灵芝，在55℃温度下烘干，水分含量控制在15％，粉碎至20目(筛网孔径为1mm)，得到灵芝粉末；

(2)将2000g灵芝粉末加入到20L萃取釜中，设置萃取温度80℃、压力0.10MPa、萃取流速60L/h将纯水注入萃取釜中，连续萃取240min；控制灵芝粉末与萃取剂的料液比为1：40g/mL；

(3)萃取完成后，萃取液流经解析釜中，解析温度设置80℃，解析压力-0.10MPa，萃取结束后在解析釜中放出灵芝多糖提取液，回收收集纯水，其多糖提取率为31.54％。

实施例7一种连续相变萃取灵芝多糖的方法

(1)干燥后的块状灵芝，在60℃温度下烘干，水分含量控制在10％，粉碎至3目(筛网孔径为8mm)，得到灵芝粉末；

(2)将2000g灵芝粉末加入到20L萃取釜中，设置萃取温度100℃、压力0.05MPa、萃取流速80L/h将纯水注入萃取釜中，连续萃取240min；控制灵芝粉末与萃取剂的料液比为1：20g/mL；

(3)萃取完成后，萃取液流经解析釜中，解析温度设置70℃，解析压力-0.09MPa，萃取结束后在解析釜中放出灵芝多糖提取液，回收收集纯水，其多糖提取率为31.81％。

实施例8一种连续相变萃取灵芝多糖的方法

(1)干燥后的块状灵芝，在65℃温度下烘干，水分含量控制在8％，粉碎至10目(筛网孔径为2mm)，得到灵芝粉末；

(2)将2000g灵芝粉末加入到20L萃取釜中，设置萃取温度60℃、压力0.02MPa、萃取流速20L/h将纯水注入萃取釜中，连续萃取60min；控制灵芝粉末与萃取剂的料液比为1：10g/mL；

(3)萃取完成后，萃取液流经解析釜中，解析温度设置65℃，解析压力-0.10MPa，萃取结束后在解析釜中放出灵芝多糖提取液，回收收集纯水，其多糖提取率为22.03％。

实施例9一种连续相变萃取灵芝多糖的方法

(1)干燥后的块状灵芝，在50℃温度下烘干，水分含量控制在15％，粉碎至10目(筛网孔径为2mm)，得到灵芝粉末；

(2)将2000g灵芝粉末加入到20L萃取釜中，设置萃取温度100℃、压力0.20MPa、萃取流速100L/h将纯水注入萃取釜中，连续萃取120min；控制灵芝粉末与萃取剂的料液比为1：100g/mL；

(3)萃取完成后，萃取液流经解析釜中，解析温度设置90℃，解析压力0.10MPa，萃取结束后在解析釜中放出灵芝多糖提取液，回收收集纯水，其多糖提取率为25.77％。

实施例10一种基于在线电导率评价提取工艺的方法

(1)干燥后的块状灵芝，在60℃温度下烘干，水分含量控制在12％，粉碎至20目(筛网孔径为1mm)，得到灵芝粉末；

(2)将灵芝粉末2000g加入到20L萃取釜中，设置萃取温度80℃、压力0.10MPa、萃取流速40L/h将纯水注入萃取釜中；控制灵芝粉末与萃取剂的料液比为1：30g/mL；

(3)萃取180min后，精确取若干提取液并配制成固形物含量为1000μg/mL的溶液，取10mL测定其电导率；再分别称取浓度为1000μg/mL的溶液，配成体积为10mL含提取液的量依次为500、200、100、0μg/mL的稀释液，并测定其电导率；

(4)固形物含量分别为1000、500、200、100、0μg/mL时对应的电导率结果分别是224、128、62、35.2、0μs/cm，将电导率结果与固形物含量结果进行方程拟合，得到方程y＝4.5453x-48.349，R²＝0.9914，表明电导值与固形物含量间有良好的相关性。

实施例11一种基于在线电导率评价提取工艺的方法

(1)干燥后的块状灵芝，在50℃温度下烘干，水分含量控制在15％，粉碎至10目(筛网孔径为2mm)，得到灵芝粉末；

(2)将灵芝粉末2000g加入到20L萃取釜中，设置萃取温度60℃、压力0.15MPa、萃取流速60L/h将纯水注入萃取釜中；控制灵芝粉末与萃取剂的料液比为1：30g/mL；

(3)萃取240min后，精确取若干提取液并配制成多糖含量为298.8μg/mL的溶液，取10mL测定其电导率；再分别称取浓度为298.8μg/mL的溶液，配成体积为10mL含提取液的量依次为153.2、59.8、29.2、0μg/mL的稀释液，并测定其电导率；

(4)多糖含量分别为298.8、153.2、59.8、29.2、0μg/mL时对应的电导率结果分别是224、128、62、35.2、0μs/cm，将电导率结果与多糖含量结果进行方程拟合，得到方程y＝1.3639x-14.334，R²＝0.9925，表明电导值与多糖含量间有良好的相关性。

实施例12一种基于在线电导率评价提取工艺的方法

(1)干燥后的块状灵芝，在65℃温度下烘干，水分含量控制在10％，粉碎至10目(筛网孔径为2mm)，得到灵芝粉末；

(2)将灵芝粉末2000g加入到20L萃取釜中，设置萃取温度100℃、压力0.08MPa、萃取流速60L/h将纯水注入萃取釜中；控制灵芝粉末与萃取剂的料液比为1：30g/mL；

(3)萃取过程中，在提取第10、30、50、70、90、110、130、150、170min时分别取样测定提取液的电导率，同时使用苯酚-硫酸法测定提取液中多糖含量；

(4)提取第10、30、50、70、90、110、130、150、170min测定电导率结果分别是67.10、45.80、38.40、32.65、29.00、26.50、25.45、23.25、22.05μs/cm，同时检测多糖含量分别是58.62、41.42、33.64、26.64、22.31、19.91、20.79、17.33、16.84μg/mL，将电导率结果与多糖含量结果进行方程拟合，得到方程y＝0.9568x-4.367，R²＝0.9933(如图5和图6所示)，表明电导值与多糖含量间有良好的相关性。

申请人声明，以上具体实施方式为便于理解本发明而说明的较佳实施例，但本发明并不局限于上述实施例，即不意味着本发明必须依赖上述实施例才能实施。所属技术领域的技术人员应该明了，对本发明的任何改进，对本发明所选用原料的等效替换及辅助成分的添加、具体方式的选择等，均落在本发明的保护范围和公开范围之内。

Claims (10)

1.一种连续相变萃取灵芝多糖的方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1.将干燥后的块状灵芝，烘干后粉碎，用孔径为1～8mm的筛网过筛，得到灵芝粉末；

S2.将上述灵芝粉末于萃取温度60～100℃、萃取压力0.02～0.20MPa的条件下，加入萃取剂并控制灵芝粉末与萃取剂的料液比为1：10～100g/mL，萃取流速为20～100L/h，连续萃取60～300min，得到萃取液；

S3.萃取液流经解析釜，设置解析温度65～90℃，解析压力-0.10～0.10MPa，萃取剂通过加热减压汽化为气体，再通过冷凝回流重新液化回到萃取釜，使灵芝多糖与萃取剂分离并积淀在解析釜底部；其中所述萃取剂为水。

2.根据权利要求1所述连续相变萃取灵芝多糖的方法，其特征在于，所述灵芝粉末与萃取剂的料液比为1：20～40g/mL。

3.根据权利要求1所述连续相变萃取灵芝多糖的方法，其特征在于，所述筛网的孔径为1～2mm。

4.根据权利要求2或3所述连续相变萃取灵芝多糖的方法，其特征在于，所述萃取温度为60～100℃，萃取时间为180～240min，萃取流速为40～80L/h。

5.根据权利要求4所述连续相变萃取灵芝多糖的方法，其特征在于，所述萃取温度为80℃，萃取时间为240min，萃取流速为40L/h，萃取压力0.10MPa。

6.根据权利要求4所述连续相变萃取灵芝多糖的方法，其特征在于，所述萃取温度为100℃，萃取时间为180min，萃取流速为60L/h，萃取压力0.08MPa。

7.根据权利要求4所述连续相变萃取灵芝多糖的方法，其特征在于，所述萃取温度为100℃，萃取时间为300min，萃取流速为60L/h，萃取压力0.15MPa。

8.根据权利要求1所述连续相变萃取灵芝多糖的方法，其特征在于，所述烘干温度为50～65℃，水分含量控制在8％～15％。

9.一种基于在线电导率评价连续相变萃取灵芝多糖工艺的方法，其特征在于，包括以下步骤：

S21.将提取罐上端外循环管路与检测池连接，检测池再内接电导率检测探头；萃取过程中，按一定时间间隔测定萃取液的电导率，同时使用水分测定仪测定萃取液中的固形物含量，并使用紫外分光光度法测定萃取液中的多糖含量；

S22.建立电导率、固形物含量以及多糖含量之间的线性拟合方程(y＝kx+b)，其中x为电导率，y为固形物含量或多糖含量；

S23.测定不同萃取时间、不同萃取温度、不同萃取压力及不同萃取流速条件下萃取液中的电导值、固形物含量及多糖含量数据，使用数据处理软件进行数据拟合，优化矫正模型。

10.根据权利要求9所述基于在线电导率评价连续相变萃取灵芝多糖工艺的方法，其特征在于，所述数据处理软件为Graphpad prism5.0。

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