CN110809574A - 杂芳基二氢嘧啶衍生物和治疗乙型肝炎感染的方法 - Google Patents

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Abstract

本文提供了可用于在有需要的受试者中治疗HBV感染的化合物，其药物组合物以及在所述受试者中抑制、阻遏或预防HBV感染的方法。

Description

杂芳基二氢嘧啶衍生物和治疗乙型肝炎感染的方法
背景技术
慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染是一个严重的全球性健康问题，影响了超过5％的世界人口(全球超过3.5亿人，美国1.25亿人)。
尽管有预防性HBV疫苗可供使用，但慢性HBV感染的负担仍然是重大的未得到满足的全球医学问题，原因是发展中国家大多数地区的治疗选择并不理想，而且新感染率持续不变。目前的治疗不能治愈，并且仅限于两类药剂(干扰素α和核苷类似物/病毒聚合酶抑制剂)；抗药性、疗效低和耐受性问题限制了其影响。HBV的治愈率低至少部分归因于用单一抗病毒剂难以完全抑制病毒产生的事实。然而，持续抑制HBV DNA减缓了肝脏疾病的进展并有助于预防肝细胞癌。目前HBV感染患者的治疗目标是将血清HBV DNA降至低水平或不可检测水平，并最终减少或预防肝硬化和肝细胞癌的发展。
HBV衣壳蛋白在病毒的生命周期中起着重要的作用。HBV衣壳/核心蛋白形成亚稳病毒颗粒或蛋白质壳，其在细胞间传代期间保护病毒基因组，并且还在病毒复制过程中发挥核心作用，包括基因组衣壳化、基因组复制和病毒体形态发生和外出。衣壳结构还对环境提示作出反应，以便在病毒进入后允许不包被。一致地，已经发现衣壳组装和拆卸的适当时机、适当的衣壳稳定性和核心蛋白的功能对于病毒感染性是至关重要的。
本领域需要可增加对病毒产生的抑制并可治疗、改善或预防HBV感染的治疗剂。将此类治疗剂作为单一疗法或与其他HBV治疗或辅助治疗组合向HBV感染患者施用将导致显著降低的病毒载量、改善的预后、减少的疾病进展和增强的血清转化率。
用于治疗HBV的二氢嘧啶的背景技术包括WO 2013/102655和WO 9954326。
发明内容
本文提供了可用于在有需要的受试者中治疗HBV感染的化合物。因此，一方面，本文提供具有式I的化合物：
Figure BDA0002341655160000021
包括其任何可能的氘代异构体、立体异构体或互变异构形式，其中：
R1选自芳基或杂芳基，各自任选地被一个或多个卤素取代；
R2选自由以下组成的组：4-7元未被取代的饱和环，3-7元的被取代的饱和环和5-12元稠合的、螺环、或桥联的双环的未被取代的或被取代的饱和环，这些饱和环各自任选地包含一个或多个杂原子，并且其中所述取代的饱和环被一个或多个取代基取代，所述取代基各自独立地选自由以下组成的组：卤素、氧代、羟基、氰基、C1-C3烷基、C1-C3烷氧基、羟基C1-C3烷基或-X-R7。
R3是C1-C4烷基；
R4、R5和R6独立地选自由以下组成的组：氢、C1-C3烷基和卤素；
-X-R7选自由以下组成的组：-SO2-R7、-SO2-R8-(CH2)n-R7、-SO2NR8R7、-NR8S(＝O)(＝NH)-R7、-NR8S(＝O)NR8-R7、-NR8C(＝O)NR8-R7、-S(＝O)(＝NH)NR8-R7、-S(＝O)(＝NH)-R7、-NR8-(CH2)n-SO2-R7、-NR8SO2-NR8R7、-OC(＝O)-R7、-C(＝O)-R7、-(CH2)n-C(＝O)O-R7、-C(＝O)NR8-R7、-NR8C(＝O)-R7、-NR8C(＝O)O-R7、-OC(＝O)NR8-R7和-NR8-R7；
R7和R8各自独立地选自氢或选自取代基，所述取代基选自由以下组成的组：C1-C4烷基、芳基、杂芳基和任选地包含一个或多个杂原子的3-7元饱和环，来自该组的每个这样的取代基可以任选地被一个或多个R9和R10取代；
或R7和R8当与氮相连时可以合在一起形成3-7元饱和环；
R9和R10各自独立地选自-OR11、氧代、任选地被一个或两个R11取代的C1-C4烷基、-NHC(＝O)OR11、-C(＝O)R11、-(CH2)n-C(＝O)OR11、-C(＝O)NH2、-CN、卤素(更具体地是氟)、或苯基；
每个R11独立地是C1-C4烷基、-(CH2)n-OR11或氢；
每个n独立地是0至4的整数；
或其药学上可接受的盐或溶剂化物。
在一个实施例中，R2选自由以下组成的组：3-7元饱和环和5-12元的稠合的、螺环的或桥联的双环的饱和环，这些饱和环各自任选地包含一个或多个杂原子，并且每个这样的饱和环任选地被一个或多个取代基取代，所述取代基各自独立地选自由以下组成的组：卤素、氧代、羟基、氰基、C1-C3烷基、C1-C3烷氧基、羟基C1-C3烷基或-X-R7；
-X-R7选自由以下组成的组：-SO2-R7、-SO2NR8R7、-NR8S(＝O)(＝NH)-R7、-NR8SO2NR8R7、-NR8C(＝O)NR8-R7、-S(＝O)(＝NH)NR8-R7、-S(＝O)(＝NH)-R7、-NR8SO2-R7、-OC(＝O)-R7、-C(＝O)-R7、-C(＝O)O-R7、-C(＝O)NR8-R7、-NR8C(＝O)-R7、-NR8C(＝O)O-R7、-OC(＝O)NR8-R7和-NR8-R7；
R9表示-OR10、氧代、C1-C4烷基、-NHC(＝O)OR10、-C(＝O)R10、-C(＝O)OR10；
R10是C1-C4烷基或氢。
在另一个方面，本文提供了药物组合物，该药物组合物包含至少一种具有化学式I的化合物或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的载体。
在另一个方面，本文提供了药物组合物，该药物组合物包含至少一种披露的化合物以及药学上可接受的载体。在另一个方面，本文提供了治疗有需要的个体的HBV感染的方法，该方法包括向该个体施用治疗有效量的具有化学式I的化合物或其药学上可接受的盐。
在另一个方面，本文提供了抑制或减少有需要的个体体内的含HBV DNA颗粒或含HBV RNA颗粒的形成或存在的方法，该方法包括向该个体施用治疗有效量的具有化学式I的化合物或其药学上可接受的盐。
在一个实施例中，本文提供的任何方法可以进一步包括向该个体施用至少一种选自下组的另外的治疗剂，该组由以下各项组成：HBV聚合酶抑制剂、免疫调节剂、干扰素、病毒进入抑制剂、病毒成熟抑制剂、衣壳组装调节剂、逆转录酶抑制剂、亲环蛋白/TNF抑制剂、TLR激动剂、HBV疫苗及其任何组合。
具体实施方式
本文提供了可用于治疗和预防受试者的HBV感染的化合物，例如具有I的化合物或其药学上可接受的盐。
不受限于任何特定的作用机制，认为这些化合物调节或破坏HBV复制或感染性颗粒产生所必需的HBV组装和其他HBV核心蛋白功能和/或可以破坏HBV衣壳组装，产生具有大大降低的感染性或复制能力的空衣壳。换句话说，本文提供的化合物可以充当衣壳组装调节剂。
本文提供的化合物具有有效的抗病毒活性，表现出有利的代谢特性、组织分布、安全性和药物谱，并且适用于人类。披露的化合物可以调节(例如，加速、延迟、抑制、破坏或减少)正常病毒衣壳组装或拆卸，结合衣壳或改变细胞多蛋白和前体的代谢。当衣壳蛋白成熟时或在病毒感染期间可以进行调节。披露的化合物可以用于调节HBV cccDNA的活性或特性、或HBV RNA颗粒从感染细胞内产生或释放的方法中。
在一个实施例中，本文所述的化合物适用于单一疗法，并且针对自然或天然HBV株和对当前已知药物具有抗性的HBV株是有效的。在另一个实施例中，本文所述的化合物适用于组合疗法。
定义
下文列出了用于描述本发明的各个术语的定义。这些定义适用于如它们在整个说明书和权利要求书中使用的术语，除非在特定情况下另行限制，单独地或作为更大基团的一部分。
除非另外定义，本文使用的所有技术和科学术语通常具有与本发明所属领域的普通技术人员通常理解的含义相同的含义。一般而言，本文使用的命名法和细胞培养、分子遗传学、有机化学和肽化学中的实验室程序是本领域众所周知且常用的那些。
如本文所用，冠词“一个”和“一种”是指一个/种或多于一个/种(即，至少一个/种)该冠词的语法宾语。举例来说，“一个要素”意指一个要素或多于一个要素。此外，术语“包括(including)”以及其他形式如“包括(include)”、“包括(includes)”和“包括(included)”的使用不是限制性的。
如本文所用，术语“约”将是本领域普通技术人员所理解的，并且将在一定程度上根据其使用的上下文而变化。如本文所用，当涉及如量、持续时间等的可测量值时，术语“约”意在包括相对于指定值的±20％或±10％(包括±5％、±1％和±0.1％)的变化，因为此类变化适于执行披露的方法。
如本文所用，术语“衣壳组装调节剂”是指破坏或加速或抑制或阻碍或延迟或减少或修饰正常衣壳组装(例如，在成熟期间)或正常衣壳拆卸(例如，在感染期间)或扰动衣壳稳定性从而诱导异常的衣壳形态和功能的化合物。在一个实施例中，衣壳组装调节剂加速衣壳组装或拆卸，从而诱导异常的衣壳形态。在另一个实施例中，衣壳组装调节剂与主要的衣壳组装蛋白(CA)相互作用(例如在活性位点与其结合，在变构位点与其结合，修改或阻碍折叠等)，从而破坏衣壳组装或拆卸。在又另一个实施例中，衣壳组装调节剂引起CA的结构或功能(例如，CA组装、拆卸、与底物结合、折叠成合适构象等的能力)的扰动，这减弱了病毒感染性或对病毒是致命的。
如本文所用，术语“治疗(treatment或treating)”被定义为向患者施用或施用治疗剂，即披露的化合物(单独地或与另一种药剂组合)，或向来自患者的分离的组织或细胞系施用或施用治疗剂(例如，用于诊断或离体应用)，该患者患有HBV感染、HBV感染的症状或患上HBV感染的可能性，目的是治愈、痊愈、减轻、缓解、改变、补救、改善、改进或影响HBV感染、HBV感染的症状或患上HBV感染的可能性。基于从药物基因组学领域获得的知识，此类治疗可以具体定制或修改。
如本文所用，术语“预防(prevent或prevention)”意指没有障碍或疾病发展(如果没有发生障碍或疾病)、或没有进一步的障碍或疾病发展(如果已经患上了该障碍或疾病)。还考虑到了预防与障碍或疾病相关的一些或全部症状的能力。
如本文所用，术语“患者”、“个体”或“受试者”是指人或非人类哺乳动物。非人类哺乳动物包括例如家畜以及宠物，如绵羊、牛、猪、犬科动物、猫科动物和鼠科哺乳动物。优选地，患者、受试者或个体是人。
如本文所用，术语“有效量”、“药学有效量”和“治疗有效量”是指无毒但足够提供期望的生物学结果的药剂量。该结果可以是疾病征象、症状或原因的减少和/或减轻，或任何其他期望的生物系统变化。本领域普通技术人员使用常规实验可以确定任何个体情况下的适当治疗量。
如本文所用，术语“药学上可接受的”是指不消除化合物的生物学活性或特性且相对无毒的材料(如载体或稀释剂)，即该材料可以向个体施用而不会引起不希望的生物学效应或以有害的方式与包含所述材料的组合物的任何组分相互作用。
如本文所用，术语“药学上可接受的盐”是指披露的化合物的衍生物，其中通过将现存的酸或碱部分转化为其盐形式而对母体化合物进行修饰。药学上可接受的盐例子包括碱性残基的矿物质或者有机酸盐类，如胺类；酸性残基如羧酸等的碱性或者有机盐类。本发明的药学上可接受的盐包括例如从无毒的无机酸或有机酸形成的母体化合物的常规无毒盐。本发明的药学上可接受的盐可以通过常规化学方法从含有碱性或酸性部分的母体化合物合成。通常，此类盐可以通过将游离酸或碱形式的这些化合物在水中或在一种有机溶剂中、或者在这二者的混合物中与化学计算量的适当的碱或酸进行反应来制备；通常优选非水性介质，例如醚、乙酸乙酯、乙醇、异丙醇、或乙腈。合适的盐的清单见于Remington'sPharmaceutical Sciences[雷明顿的药物科学],第17版,Mack Publishing Company[马克出版公司],伊斯顿,宾夕法尼亚州,1985,第1418页和Journal ofPharmaceutical Science[药物科学杂志],66,2(1977)中，将其各自通过引用以其全文并入本文。
如本文所用，术语“组合物”或“药物组合物”是指可用于本发明的至少一种化合物与药学上可接受的载体的混合物。药物组合物有助于将化合物向患者或受试者施用。本领域存在多种施用化合物的技术，包括但不限于静脉内、口服、气雾剂、肠胃外、眼部、肺部和局部施用。
如本文所用，术语“药学上可接受的载体”意指药学上可接受的材料、组合物或载体，如液体或固体填充剂、稳定剂、分散剂、悬浮剂、稀释剂、赋形剂、增稠剂、溶剂或囊封材料，这些材料涉及将可用于本发明的化合物在患者体内载运或输送或载运或输送到患者体内，使得它可以发挥预期功能。典型地，此类构建体从身体的一个器官或部分载运或输送到身体的另一个器官或部分。每种载体在与配制品的其他成分(包括可用于本发明的化合物)相容且对患者无害的意义上必须是“可接受的”。可用作药学上可接受的载体的材料的一些实例包括：糖，例如乳糖，葡萄糖以及蔗糖；淀粉，如玉米淀粉以及马铃薯淀粉；纤维素及其衍生物，如羧甲基纤维素钠，乙基纤维素以及乙酸纤维素；粉状黄蓍胶；麦芽；明胶；滑石；赋形剂，如可可脂以及栓剂蜡；油，例如花生油，棉籽油，红花油，芝麻油，橄榄油，玉米油以及大豆油；二醇类，如丙二醇；多元醇，例如甘油，山梨醇，甘露糖醇以及聚乙二醇；酯，如油酸乙酯以及月桂酸乙酯；琼脂；缓冲剂如氢氧化镁以及氢氧化铝；表面活性剂；海藻酸；无热原水；等渗盐水；林格氏溶液；乙醇；磷酸盐缓冲溶液；以及药物制剂中使用的其他无毒相容物质。
如本文所用，“药学上可接受的载体”还包括与可用于本发明的化合物的活性相容并且对于患者来说在生理上是可接受的任何和所有的涂层剂、抗细菌剂和抗真菌剂以及吸收延迟剂等。补充活性化合物也可以掺入组合物中。“药学上可接受的载体”可以进一步包括可用于本发明的化合物的药学上可接受的盐。可以包括在用于实践本发明的药物组合物中的其他另外成分在本领域是已知的，并且例如描述于Remington's PharmaceuticalSciences[雷明顿的药物科学](Genaro编辑，马克出版公司(Mack Publishing Co.)，1985，伊斯顿，宾夕法尼亚州)，将其通过引用并入本文。
如本文所用，除非另有说明，术语“烷基”本身或作为另一个取代基的一部分意指具有指定碳原子数的直链或支链烃(即，C1-C3烷基意指具有1至3个碳原子的烷基，C1-C4烷基意指具有1至4个碳的烷基)，并且包括直链和支链。实例包括甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、叔丁基。
如本文所用，除非另有说明，术语“卤代”或“卤素”单独的或作为另一个取代基的一部分意指氟、氯、溴或碘原子，优选氟、氯或溴，更优选氟或氯。
如本文所用，术语“3-7元饱和环”是指单环非芳族饱和基团，其中形成环的每个原子(即，骨架原子)是碳原子，除非此环含有一个或多个杂原子，如果这样进一步定义的话。3-7元饱和环包括具有3至7个环原子的基团。单环3-7元饱和环包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基。
如本文所用，任选地包含一个或多个杂原子的3-7元饱和环是指含有一个或多个，更特别是一个、两个或三个，甚至更特别是一个或两个，且最特别是一个各自选自O、S和N的环杂原子的杂脂环族基团。在一个实施例中，每个杂环基基团在其环体系中具有从3至7个原子，条件是所述基团的环不含两个相邻的O或S原子。除非另有说明，杂环系统可以在提供稳定结构的任何杂原子或碳原子处附接至分子的其余部分。
3元杂环基基团的实例包括但不限于氮杂环丙烷。4元杂环烷基基团的实例包括但不限于吖丁啶和β内酰胺。5元杂环基基团的实例包括但不限于吡咯烷、噁唑烷和噻唑烷二酮。6元杂环烷基基团的实例包括但不限于哌啶、吗啉和哌嗪。
杂环基基团的其他非限制性实例包括单环基团，如氮杂环丙烷、环氧乙烷、环硫乙烷、氮杂环丁烷、氧杂环丁烷、硫杂环丁烷、吡咯烷、吡咯啉、吡唑烷、咪唑啉、二氧戊环、环丁砜、四氢呋喃、噻吩烷、哌啶、哌嗪、吗啉、硫代吗啉。
如本文所用，术语“芳族”是指具有一个或多个多不饱和环并且具有芳族特征的碳环或杂环，即具有(4n+2)个离域π(pi)电子，其中n是整数。
如本文所用，除非另有说明，单独使用或与其他术语组合使用的术语“芳基”意指含有一个或多个环(通常为一个、两个或三个环)的碳环芳族系统，其中此类环可以按悬垂方式附接在一起(如联苯)，或者可以稠合(如萘)。芳基基团的实例包括苯基、蒽基和萘基。优选实例是苯基(例如，C6-芳基)和联苯基(例如，C12-芳基)。在一些实施例中，芳基基团具有从6至16个碳原子。在一些实施例中，芳基基团具有从6至12个碳原子(例如，C6-C12-芳基)。在一些实施例中，芳基基团具有6个碳原子(例如，C6-芳基)。
如本文所用，术语“杂芳基”或“杂芳族”是指具有芳族特征的杂环。杂芳基取代基可以由碳原子数定义，例如C1-C9-杂芳基指示杂芳基基团中所含的碳原子数而不包括杂原子数。例如，C1-C9-杂芳基将包括另外的1至4个杂原子。多环杂芳基可以包括一个或多个部分饱和的环。杂芳基的非限制性实例包括吡啶基、吡嗪基、嘧啶基(包括例如，2-和4-嘧啶基)、哒嗪基、噻吩基、呋喃基、吡咯基(包括例如，2-吡咯基)、咪唑基、噻唑基、噁唑基、吡唑基(包括例如，3-和5-吡唑基)、异噻唑基、1,2,3-三唑基、1,2,4-三唑基、1,3,4-三唑基、四唑基、1,2,3-噻二唑基、1,2,3-噁二唑基、1,3,4-噻二唑基和1,3,4-噁二唑基。
多环杂环和杂芳基的非限制性实例包括吲哚基(包括例如，3-、4-、5-、6-和7-吲哚基)、二氢吲哚基、喹啉基、四氢喹啉基、异喹啉基(包括例如，1-和5-异喹啉基)、1,2,3,4-四氢异喹啉基、噌啉基、喹喔啉基(包括例如，2-和5-喹喔啉基)、喹唑啉基、酞嗪基、1,8-萘啶基、1,4-苯并二噁烷基、香豆素、二氢香豆素、1,5-萘啶基、苯并呋喃基(包括例如，3-、4-、5-、6-和7-苯并呋喃基)、2,3-二氢苯并呋喃基、1,2-苯并异噁唑基、苯并噻吩基(包括例如，3-、4-、5-、6-和7-苯并噻吩基)、苯并噁唑基、苯并噻唑基(包括例如，2-苯并噻唑基和5-苯并噻唑基)、嘌呤基、苯并咪唑基(包括例如，2-苯并咪唑基)、苯并三唑基、硫代黄嘌呤基、咔唑基、咔啉基、吖啶基、吡咯双烷基和喹嗪基。
如本文所用，术语“取代”意指原子或原子基团替换氢作为附接至另一个基团的取代基。
如本文所用，术语“选自…”(例如，“R4选自A、B和C”)应理解为等同于术语“选自下组，该组由以下各项组成：…”(例如，“R4选自下组，该组由以下各项组成：A、B和C”)。
一个实施例涉及如本文所定义的具有式I的化合物，其中-X-R7表示-SO2-R7、-SO2NH-R7或-C(＝O)O-R7。
一个实施例涉及如本文所定义的具有式I的化合物，其中R4、R5和R6独立地选自氟、氯或溴。
一个实施例涉及如本文所定义的具有式I的化合物，其中R4和R5中的至少一个是氟并且R6是氢。
一个实施例涉及如本文所定义的具有式I的化合物，其中R1是噻唑基。
一个实施例涉及如本文所定义的具有式I的化合物，其中R2选自包括3-7元饱和环的组，所述饱和环任选地包含一个或多个杂原子并且任选地被一个或多个卤素、氧代、羟基或-X-R7取代。
一个实施例涉及如本文所定义的具有式I的化合物，其中R2选自包括4-6元饱和环的组，所述饱和环任选地包含一个或多个杂原子并且任选地被一个或多个卤素、氧代、羟基或-X-R7取代。
一个实施例涉及如本文所定义的具有式I的化合物，其中R2是任选地包含一个或多个杂原子的5元或6元饱和环，所述饱和环进一步被-X-R7取代，更具体地，其中所述饱和环包含氮或氧。
一个实施例涉及如本文所定义的具有式I的化合物，其中R3是甲基。
一个实施例涉及化合物，所述化合物选自由满足以下式的化合物组成的组：
Figure BDA0002341655160000101
Figure BDA0002341655160000111
Figure BDA0002341655160000121
Figure BDA0002341655160000131
Figure BDA0002341655160000151
Figure BDA0002341655160000171
Figure BDA0002341655160000181
披露的化合物可以具有一个或多个立构中心，并且每个立构中心可以独立地以R或S构型存在。在一个实施例中，本文所述的化合物以光学活性或外消旋形式存在。应当理解，本文所述的化合物包括具有本文所述的治疗上有用的特性的外消旋、光学活性、区域异构和立体异构形式或其组合。
光学活性形式的制备以任何合适的方式实现，包括作为非限制性实例，通过用重结晶技术拆分外消旋形式、由光学活性起始材料合成、手性合成或使用手性固定相的色谱分离。在一个实施例中，一种或多种异构体的混合物用作本文所述的披露的化合物。在另一个实施例中，本文所述的化合物含有一个或多个手性中心。这些化合物通过任何方式制备，包括立体选择性合成、对映体选择性合成或对映异构体或非对映异构体混合物的分离。化合物及其异构体的拆分通过任何方式实现，包括作为非限制性实例，化学方法、酶促方法、分步结晶、蒸馏以及色谱法。
当不能确定化合物的绝对R或S立体化学时，可以通过如由色谱柱、洗脱液等确定的具体色谱条件下的色谱法之后的保留时间来确定。
在一个实施例中，披露的化合物可以作为互变异构体存在。所有互变异构体都包括在本文提供的化合物的范围内。
本文所述的化合物还包括同位素标记的化合物，其中一个或多个原子被具有相同原子序数，但原子质量或质量数不同于自然界中常见的原子量或质量数的原子替换。适合包含在本文所述化合物中的同位素的实例包括但不限于2H、3H、11C、13C、14C、36Cl、18F、123I、125I、13N、15N、15O、17O、18O、32P和35S。在一个实施例中，同位素标记的化合物可用于药物和/或底物组织分布研究。在另一个实施例中，用较重的同位素如氘取代提供了较高的代谢稳定性(例如，增加的体内半衰期或降低的剂量需求)。
在又另一个实施例中，用正电子发射同位素如11C、18F、15O和13N取代可用于检查底物受体占据的正电子发射断层成像(PET)研究。同位素标记的化合物通过任何合适的方法或通过使用适当的同位素标记的试剂代替另外使用的未标记的试剂的方法来制备。
在一个实施例中，本文所述的化合物通过其他手段标记，包括但不限于使用发色团或荧光部分、生物发光标记或化学发光标记。
使用本文所述的技术和材料以及本领域技术人员已知的技术合成本文所述的化合物和具有不同取代基的其他相关化合物。用于制备本文所述的化合物的通用方法通过使用适当的试剂和条件来修改，以便引入如本文提供的化学式中所示的各个部分。
由可从商业来源获得或者使用本文所述的程序制备的化合物开始，使用任何合适的程序合成本文所述的化合物。
方法
本文提供了治疗有需要的个体的HBV感染的方法，该方法包括向该个体施用治疗有效量的披露的化合物。
本文还提供了根除有需要的个体的HBV感染的方法，该方法包括向该个体施用治疗有效量的披露的化合物。
本文提供了减少有需要的个体体内与HBV感染相关的病毒载量的方法，该方法包括向该个体施用治疗有效量的披露的化合物。
另外，本文提供了减少有需要的个体的HBV感染复发的方法，该方法包括向该个体施用治疗有效量的披露的化合物。
本文提供了抑制或减少有需要的个体体内的含HBV DNA颗粒或含HBV RNA颗粒的形成或存在的方法，该方法包括向该个体施用治疗有效量的披露的化合物。
在某些方面，本文所述的方法和/或组合物对于抑制或减少在体外或在体内(例如，在细胞中、在组织中、在器官中(例如，在肝脏中)、在生物体等中)HBV相关颗粒的形成或存在是有效的。HBV相关颗粒可以含有HBV DNA(即，线性和/或共价闭合的环状DNA(cccDNA))和/或HBV RNA(即，前基因组RNA和/或亚基因组RNA)。因此，HBV相关颗粒包括含HBV DNA颗粒或含HBV RNA颗粒。
如本文所用，“HPV相关颗粒”是指感染性HBV病毒体(即，丹氏粒)和非感染性HBV亚病毒颗粒(即，HBV丝和/或HBV球)两者。HBV病毒体包含包括表面蛋白的外包膜、包含核心蛋白的核衣壳、至少一种聚合酶蛋白和HBV基因组。HBV丝和HBV球包含HBV表面蛋白，但缺乏核心蛋白、聚合酶和HBV基因组。HBV丝和HBV体也统称为表面抗原(HBsAg)颗粒。HBV球包含中和小HBV表面蛋白。HBV丝还包括中、小和大HBV表面蛋白。
HBV亚病毒颗粒可以包括非颗粒状或分泌型HBeAg，其作为HBV活性复制的标记。
本文提供了减少有需要的个体体内的HBV感染的不良生理影响的方法，该方法包括向该个体施用治疗有效量的披露的化合物。
本文还提供了减少、减缓或抑制有需要的个体的HBV感染的方法，该方法包括向该个体施用治疗有效量的披露的化合物。
本文提供了在有需要的个体体内诱导来自HBV感染的肝损伤逆转的方法，该方法包括向该个体施用治疗有效量的披露的化合物。
本文提供了减少有需要的个体体内的HBV感染的长期抗病毒治疗的生理影响的方法，该方法包括向该个体施用治疗有效量的披露的化合物。
本文提供了预防性地治疗有需要的个体的HBV感染的方法，其中所述个体患有潜伏性HBV感染，该方法包括向该个体施用治疗有效量的披露的化合物。
在一个实施例中，该个体是其他治疗类别的HBV药物(例如，HBV聚合酶抑制剂、干扰素、病毒进入抑制剂、病毒成熟抑制剂、文献描述的衣壳组装调节剂、不同或未知机制的抗病毒化合物等或其组合)难治的。在另一个实施例中，与其他治疗类别的HBV药物减少患有HBV感染的个体体内的病毒载量的程度相比，披露的方法以更大的程度或以更快的速度减少该个体体内的病毒载量。
在一个实施例中，与在预防性地治疗有需要的个体的HBV感染中获得相似结果所需的至少一种另外的治疗剂的单独施用相比，披露的化合物或其药学上可接受的盐的施用允许以更低的剂量或频率施用至少一种另外的治疗剂。
在一个实施例中，与选自下组的化合物的施用相比，披露的化合物或其药学上可接受的盐的施用以更大的程度或以更快的速度减少该个体体内的病毒载量，该组由以下各项组成：HBV聚合酶抑制剂、干扰素、病毒进入抑制剂、病毒成熟抑制剂、不同的衣壳组装调节剂、不同或未知机制的抗病毒化合物及其任何组合。
在一个实施例中，披露的方法减少患有HBV感染的个体体内的病毒载量，从而允许使用较低的剂量或不同方案的组合疗法。
在一个实施例中，与其他类别的HBV药物相比，披露的方法使得病毒突变或病毒抗性的发生率更低，从而允许长期治疗并最小化对治疗方案改变的需要。
在一个实施例中，与选自下组的化合物的施用相比，本发明的化合物或其药学上可接受的盐的施用使得病毒突变或病毒抗性的发生率更低，该组由以下各项组成：HBV聚合酶抑制剂、干扰素、病毒进入抑制剂、病毒成熟抑制剂、不同的衣壳组装调节剂、不同或未知机制的抗病毒化合物及其组合。
在一个实施例中，披露的方法将从HBV感染至非HBV感染或从可检测HBV病毒载量至不可检测HBV病毒载量的血清转化率提高至超出当前治疗方案的血清转化率。如本文所用，“血清转化”是指产生HBV抗体并变得可检测的时间段。
在一个实施例中，披露的方法增加或正常化或恢复正常健康，引起正常健康的完全恢复，恢复预期寿命，或解决有需要的个体体内的病毒感染。
在一个实施例中，披露的方法消除或减少从HBV感染的细胞释放的HBV RNA颗粒的数量，从而增强、延长或增加披露的化合物的治疗益处。
在一个实施例中，披露的方法根除被HBV感染的个体的HBV，从而避免了长期或终身治疗的需要，或缩短了治疗的持续时间，或允许减少其他抗病毒剂的给药。
在另一个实施例中，披露的方法进一步包括监测或检测受试者的HBV病毒载量，并且其中将该方法进行一段时间，包括直到HBV病毒不可检测为止。
因此，在一个实施例中，本文提供了治疗有需要的个体的HBV感染的方法，该方法包括向该个体施用治疗有效量的具有化学式I的化合物或其药学上可接受的盐。
因此，在一个实施例中，本文提供了治疗有需要的个体的HBV感染的方法，该方法包括向该个体施用治疗有效量的具有化学式I的化合物或其药学上可接受的盐。
在另一个实施例中，本文提供了治疗有需要的个体的HBV感染的方法，该方法包括向该个体施用治疗有效量的表1的化合物或其药学上可接受的盐。
在本文提供的任何方法的一个实施例中，该方法可以进一步包括监测受试者的HBV病毒载量，其中将该方法进行一段时间，使得HBV病毒不可检测。
组合疗法
披露的化合物可以与用于治疗HBV感染的一种或多种另外的化合物组合使用。这些另外的化合物可以包括其他披露的化合物和/或已知用于治疗、预防或减少HBV感染的症状或影响的化合物。此类化合物包括但不限于HBV聚合酶抑制剂、干扰素、病毒进入抑制剂、病毒成熟抑制剂、文献描述的衣壳组装调节剂、逆转录酶抑制剂、免疫调节剂、TLR激动剂以及具有不同或未知的影响HBV生命周期或影响HBV感染后果的机制的其他药剂。
在非限制性实例中，披露的化合物可以与选自下组的一种或多种药物(或其盐)组合使用，该组包括：
HBV逆转录酶抑制剂、及DNA和RNA聚合酶抑制剂，包括但不限于拉米夫定(3TC、Zeffix、Heptovir、Epivir和Epivir-HBV)、恩替卡韦(Baraclude、Entavir)、阿德福韦酯(adefovir dipivoxil)(Hepsara、Preveon、双-POM PMEA)、替诺福韦富马酸酯(tenofovirdisoproxil fumarate)(Viread、TDF或PMPA)；
干扰素，包括但不限于干扰素α(IFN-α)、干扰素β(IFN-β)、干扰素λ(IFN-λ)和干扰素γ(IFN-γ)；
病毒进入抑制剂；
病毒成熟抑制剂；
文献描述的衣壳组装调节剂，如但不限于BAY 41-4109；
逆转录酶抑制剂；
免疫调节剂，例如TLR激动剂；和
不同或未知机制的药剂，如但不限于AT-61((E)-N-(1-氯-3-氧代-1-苯基-3-(哌啶-1-基)丙-1-烯-2-基)苯甲酰胺)、AT-130((E)-N-(1-溴-1-(2-甲氧基苯基)-3-氧代-3-(哌啶-1-基)丙-1-烯-2-基)-4-硝基苯甲酰胺)和类似的类似物。
在一个实施例中，另外的治疗剂是干扰素。术语“干扰素”或“IFN”是指抑制病毒复制和细胞增殖并调节免疫应答的高度同源物种特异性蛋白的家族中的任何成员。人类干扰素分为三类：I型，其包括干扰素-α(IFN-α)、干扰素-β(IFN-β)和干扰素-ω(IFN-ω)；II型，其包括干扰素-γ(IFN-γ)；和III型，其包括干扰素-λ(IFN-λ)。如本文所用的术语“干扰素”包括已经开发并且可商购的干扰素的重组形式。如本文所用的术语“干扰素”也包括干扰素的亚型，如化学修饰或突变的干扰素。化学修饰的干扰素可以包括聚乙二醇化干扰素和糖基化干扰素。干扰素的实例还包括但不限于干扰素-α-2a、干扰素-α-2b、干扰素-α-n1、干扰素-β-1a、干扰素-β-1b、干扰素-λ-1、干扰素-λ-2和干扰素-λ-3。聚乙二醇化干扰素的实例包括聚乙二醇化干扰素-α-2a和聚乙二醇化干扰素α-2b。
因此，在一个实施例中，具有化学式I的化合物可以与选自下组的干扰素组合施用，该组由以下各项组成：干扰素α(IFN-α)、干扰素β(IFN-β)、干扰素λ(IFN-λ)和干扰素γ(IFN-γ)。在一个具体实施例中，干扰素是干扰素-α-2a、干扰素-α-2b或干扰素-α-n1。在另一个具体实施例中，干扰素-α-2a或干扰素-α-2b是聚乙二醇化的。在一个优选实施例中，干扰素-α-2a是聚乙二醇化干扰素-α-2a(PEGASYS)。
在另一个实施例中，另外的治疗剂选自免疫调节剂或免疫刺激剂疗法，其包括属于干扰素类别的生物制剂。
此外，另外的治疗剂可以是不同或未知机制的药剂，包括破坏HBV复制或持久性所需的其他一种或多种必需病毒蛋白或宿主蛋白的功能的药剂。
在另一个实施例中，另外的治疗剂是阻断病毒进入或成熟或靶向HBV聚合酶的抗病毒剂，如核苷或核苷酸或非核苷(核苷酸)聚合酶抑制剂。在组合疗法的另一实施例中，逆转录酶抑制剂或DNA或RNA聚合酶抑制剂是齐多夫定、去羟肌苷、扎西他滨、ddA、司他夫定、拉米夫定、阿巴卡韦、恩曲他滨、恩替卡韦、阿立他滨、阿替韦拉平(Atevirapine)、病毒唑、阿昔洛韦、泛昔洛韦、伐昔洛韦、更昔洛韦、缬更昔洛韦、替诺福韦、阿德福韦、PMPA、西多福韦、依法韦仑、奈韦拉平、地拉夫定或埃曲韦林。
在一个实施例中，另外的治疗剂是免疫调节剂，其诱导天然的有限的免疫应答，导致诱导针对不相关病毒的免疫应答。换句话说，免疫调节剂可以影响抗原呈递细胞的成熟、T细胞的增殖和细胞因子释放(例如，IL-12、IL-18、IFN-α、IFN-β和IFN-γ及TNF-α等)。
在另一实施例中，另外的治疗剂是TLR调节剂或TLR激动剂，如TLR-7激动剂或TLR-9激动剂。在组合疗法的另外的实施例中，TLR-7激动剂选自下组，该组由以下各项组成：SM360320(9-苄基-8-羟基-2-(2-甲氧基-乙氧基)腺嘌呤)和AZD 8848([3-({[3-(6-氨基-2-丁氧基-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)丙基][3-(4-吗啉基)丙基]氨基}甲基)苯基]乙酸甲酯)。
在本文提供的任何方法中，该方法可进一步包括向该个体施用至少一种HBV疫苗、核苷HBV抑制剂、干扰素或其任何组合。在一个实施例中，HBV疫苗是RECOMBIVAX HB、ENGERIX-B、ELOVAC B、GENEVAC-B或SHANVAC B中的至少一种。
在一个实施例中，本文所述的方法进一步包括施用至少一种选自下组的另外的治疗剂，该组由以下各项组成：核苷酸/核苷类似物、进入抑制剂、融合抑制剂以及这些或其他抗病毒机制的任何组合。
在另一个方面，本文提供了治疗有需要的个体的HBV感染的方法，该方法包括通过以下方式减少HBV病毒载量：向该个体施用治疗有效量的披露的化合物，单独地或与逆转录酶抑制剂组合；并且向该个体进一步施用治疗有效量的HBV疫苗。逆转录酶抑制剂可以是齐多夫定、去羟肌苷、扎西他滨、ddA、司他夫定、拉米夫定、阿巴卡韦、恩曲他滨、恩替卡韦、阿立他滨、阿替韦拉平、病毒唑、阿昔洛韦、泛昔洛韦、伐昔洛韦、更昔洛韦、缬更昔洛韦、替诺福韦、阿德福韦、PMPA、西多福韦、依法韦仑、奈韦拉平、地拉夫定或埃曲韦林中的至少一种。
在另一个方面，本文提供了治疗有需要的个体的HBV感染的方法，该方法包括通过以下方式减少HBV病毒载量：向该个体施用治疗有效量的披露的化合物，单独地或与靶向HBV核酸的反义寡核苷酸或RNA干扰剂组合；并且向该个体进一步施用治疗有效量的HBV疫苗。反义寡核苷酸或RNA干扰剂与靶HBV核酸具有足够的互补性以抑制病毒基因组的复制、病毒RNA的转录或病毒蛋白的翻译。
在另一个实施例中，披露的化合物和至少一种另外的治疗剂是共配制的。在又另一个实施例中，披露的化合物和至少一种另外的治疗剂是共施用的。
对于本文所述的任何组合疗法，可以使用合适的方法计算协同效应，例如Sigmoid-Emax方程(Holford&Scheiner,19981,Clin.Pharmacokinet.[临床药物动力学]6:429-453)、Loewe加和性方程(Loewe&Muischnek,1926,Arch.Exp.Pathol Pharmacol.[实验病理学与药理学档案]114:313-326)和中值效应方程(Chou&Talalay,1984,Adv.EnzymeRegul.[酶调节进展]22:27-55)。上面提到的每个方程都可以应用于实验数据，以生成相应的图表以帮助评估药物组合的效果。与上述方程相关的对应图表分别是浓度-效应曲线、等效线图曲线和联合指数曲线。
在本文提供的施用组合疗法的任何方法的一个实施例中，该方法可以进一步包括监测或检测受试者的HBV病毒载量，其中将该方法进行一段时间，包括直到使得HBV病毒不可检测的时间为止。
施用/剂量/配制品
在另一个方面，本文提供了药物组合物，该药物组合物包含至少一种披露的化合物或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的载体。
本发明的药物组合物中的活性成分的实际剂量水平可以改变以便获得对于具体患者、组合物和施用模式有效实现所希望的治疗应答，而对该患者无毒的活性成分的量。
具体地说，选择的剂量水平将取决于多种因素，包括所利用的具体组合物的活性、施用时间、该化合物的排泄速率、治疗持续时间、与该化合物组合使用的其他药物、化合物或材料、所治疗的患者的年龄、性别、体重、病状、一般健康状况和以前病史以及医学领域熟知的类似因素。
具有本领域普通技能的医生(例如，医师或兽医)可以容易地确定并且开出所需药物组合物的有效量。例如，医师或兽医能以低于实现期望的治疗效果所需的水平开始施用药物组合物以施用披露的化合物，并且逐渐增加剂量直到实现期望的效果。
在具体实施例中，以便于施用和剂量均一性的剂量单位形式来配制化合物是特别有利的。如本文所用的剂量单位形式是指适合作为待治疗患者的单位剂量的物理上离散的单位；每个单位含有经计算与所要求的药物载体联合产生所希望的治疗效果的预定量的本披露化合物。本发明的剂量单位形式由以下因素决定并且直接取决于以下因素：(a)披露的化合物的独特特征和待实现的特定治疗效果、和(b)混配/配制用于治疗患者的HBV感染的这种披露的化合物的领域中固有的限制。
在一个实施例中，使用一种或多种药学上可接受的赋形剂或载体来配制本发明的组合物。在一个实施例中，本发明的药物组合物包含治疗有效量的披露的化合物以及药学上可接受的载体。
在一些实施例中，披露的化合物的剂量是从约1mg至约2,500mg。在一些实施例中，用于本文所述的组合物中的披露的化合物的剂量小于约10,000mg、或小于约8,000mg、或小于约6,000mg、或小于约5,000mg、或小于约3,000mg、或小于约2,000mg、或小于约1,000mg、或小于约500mg、或小于约200mg、或小于约50mg。类似地，在一些实施例中，如本文所述的第二化合物(即，用于HBV治疗的另一种药物)的剂量小于约1,000mg、或小于约800mg、或小于约600mg、或小于约500mg、或小于约400mg、或小于约300mg、或小于约200mg、或小于约100mg、或小于约50mg、或小于约40mg、或小于约30mg、或小于约25mg、或小于约20mg、或小于约15mg、或小于约10mg、或小于约5mg、或小于约2mg、或小于约1mg、或小于约0.5mg及其任何和所有全部或部分增量。
在一个实施例中，本发明涉及包装的药物组合物，该药物组合物包含容纳治疗有效量的披露的化合物的容器，该化合物是单独的或与第二药剂组合；以及使用该化合物治疗、预防或减少患者的HBV感染的一种或多种症状的说明书。
本发明任何组合物的施用途径包括口服、鼻腔、直肠、阴道内、肠胃外、口腔、舌下或局部。用于本发明的化合物可以配制用于通过任何合适的途径施用，如用于口服或肠胃外，例如经皮、经粘膜(例如，舌下、舌、(经)口腔、(经)尿道、阴道(例如，经阴道和阴道周围)、鼻(内)和(经)直肠)、膀胱内、肺内、十二指肠内、胃内、鞘内、皮下、肌肉内、皮内、动脉内、静脉内、支气管内、吸入和局部施用。
合适的组合物和剂型包括例如片剂、胶囊、囊片、丸剂、胶丸、锭剂、分散剂、悬浮剂、溶液剂、糖浆剂、颗粒剂、珠剂、经皮贴剂、凝胶剂、散剂、丸粒、乳浆剂、糖锭、乳膏、糊剂、膏药、洗剂、圆片、栓剂、用于鼻或口服施用的液体喷雾剂、用于吸入的干粉或雾化配制品、用于膀胱内施用的组合物和配制品等。应该理解，可用于本发明的配制品和组合物不限于本文所述的具体配制品和组合物。
对于口服施用，特别合适的是片剂、糖衣丸、液体、滴剂、栓剂或胶囊、囊片和胶丸。旨在用于口服的组合物可以根据本领域已知的任何方法制备，并且此类组合物可以含有一种或多种选自下组的药剂，该组由以下各项组成：适合于制造片剂的惰性、无毒的药学赋形剂。此类赋形剂包括例如惰性稀释剂，如乳糖；造粒剂和崩解剂，如玉米淀粉；粘合剂，如淀粉；以及润滑剂，如硬脂酸镁。片剂可以是未包衣的或者它们可以通过已知的技术包衣以精致或延迟活性成分的释放。用于口服的配制品也可以呈现为硬明胶胶囊，其中活性成分与惰性稀释剂混合。
对于肠胃外施用，可以将披露的化合物配制成用于注射或输注，例如静脉内、肌肉内或皮下注射或输注，或用于以推注剂量或连续输注施用。可以使用任选地含有其他配制剂(如悬浮剂、稳定剂或分散剂)的油性或水性载体中的悬浮液、溶液或乳液。
本领域的技术人员将认识到，或仅仅使用例行实验就能够确定本文所述的具体程序、实施例、权利要求和实例的许多等效物。此类等效物被认为在本发明的范围内，并且由所附的权利要求书涵盖。例如，应当理解，仅仅使用例行实验，使用本领域认可的替代物对于反应条件(包括但不限于反应时间、反应大小/体积)和实验试剂如溶剂、催化剂、压力、气氛条件例如氮气气氛和还原剂/氧化剂)进行修改，在本申请的范围内。
应当理解，无论在本文何处提供数值和范围，这些值和范围所涵盖的所有值和范围都意图被包括在本发明的范围内。此外，落入这些范围内的所有值以及值范围的上限或下限也是本申请所预期的。
以下实例进一步说明本发明的方面。然而，它们决不是对本文所述的本发明的教导或披露的限制。
实例
现在将参考以下用于其一般制备的说明性合成方案和随后的具体实例来描述可用于本发明方法的示例性化合物。技术人员将认识到，为了获得本文中的各种化合物，可以适当地选择起始材料，使得最终所需的取代基将在带有或没有合适的保护下被携带通过反应方案以产生所需产物。或者，可能有必要或希望使用合适的基团代替最终所需的取代基，所述合适的基团可被携带通过反应方案并适当地用所需的取代基代替。除非另有说明，否则变量如上文参考式(I)所定义。反应可以在溶剂的熔点和回流温度之间进行，优选在0℃和溶剂的回流温度之间进行。可以采用常规加热或微波加热来加热反应。反应也可以在高于溶剂的正常回流温度的密封压力容器中进行。
制备实例
现在将参考以下用于其一般制备的说明性合成方案和随后的具体实例来描述可用于本发明方法的示例性化合物。
通用方案
具有通式I的化合物的通用合成描述在方案1和方案2中。具有通式III的化合物可以如方案1(方法A或方法B)中所述合成，所使用的条件取决于具有通式III的化合物上的取代基R2和R3。如方法A中所述，具有通式II的酸通过与N,N-羰基二咪唑CDI反应而转化成活性酯，然后在碱性条件所述活性酯与丙二酸单甲酯钾盐偶联以生成中间体，所述中间体进而经历脱羧以产生具有通式III的酮酯。或者，如方法B中所述，具有通式III的化合物可以通过与方法A相似的转化顺序从具有通式II的酸和2,2-二甲基-1,3-二噁烷-4,6-二酮制备。具有通式I的最终产物可以如方案2中所述(方法C或方法D)合成。前者是与具有通式III、IV和V的化合物在选择的溶剂(但不限于乙醇EtOH)中，在碱(但不限于乙酸钠NaOAc)的存在下的多组分反应的常用化学方法。可替代地，提供了如方法D中所述的逐步方法。具有通式III和IV的化合物进行缩合以产生具有式X的缀合中间体，所述中间体然后在碱性反应介质中在高温下与具有通式V的化合物反应，从而产生具有通式I的最终产物二氢嘧啶。
方案1
方法A1
Figure BDA0002341655160000292
在室温下向乙腈中的具有通式II的酸(1当量)中添加N,N-羰基二咪唑(1.1当量)。将混合物在氮气气氛下在室温下搅拌2小时(混合物A)。在室温下向丙二酸单甲酯钾盐(2当量)在乙腈中的悬浮液中添加氯化镁(2.5当量)和三乙胺(3.2当量)。在氮气气氛下搅拌2小时后，向其添加混合物A，并在80℃-100℃下搅拌过夜。将所得反应混合物冷却至室温并浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法纯化，得到具有通式III的酮酯。
方法A2
在方法A1中，使用丙二酸单乙酯钾盐代替丙二酸单甲酯钾盐。
方法B
Figure BDA0002341655160000301
在室温下向具有通式II的酸(1当量)、2,2-二甲基-1,3-二噁烷-4,6-二酮(1.2当量)和4-二甲基氨基吡啶(1.5当量)在二氯甲烷中的溶液中添加N-乙基-N'-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(1.2当量)。在氮气气氛下搅拌过夜后，将混合物用二氯甲烷稀释，用5％wt硫酸氢钾水溶液洗涤，随后用盐水洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到具有通式IIa的中间体。
将具有通式IIa的中间体在甲醇中的溶液在90℃下搅拌3小时。冷却至室温后，将混合物减压浓缩，得到具有通式Ⅲ的酮酯。
方案2
方法C
Figure BDA0002341655160000302
向乙醇中的具有通式III的酮酯(1当量)的溶液中加入具有通式IV的醛(1当量)、具有通式V的盐酸甲脒(1当量)和乙酸钠(1-1.2当量)。将混合物升至80℃-100℃，并在氮气气氛下搅拌过夜。冷却至室温后，将其浓缩至干燥。将残余物吸收进二氯甲烷中，用水、盐水洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。将滤液在减压下浓缩以得到残余物，将该残余物通过硅胶柱色谱法纯化以提供具有通式I的二氢嘧啶产物。当适用时，使用手性色谱法分离和纯化具有通式I的二氢嘧啶产物的立体异构体。
方法D
Figure BDA0002341655160000311
在室温下在氮气气氛下，向具有通式III的酮酯(1当量)在异丙醇中的溶液中添加具有通式IV的醛(1-1.5当量)、哌啶(0.1当量)和冰乙酸(数滴)。搅拌过夜后，将混合物减压浓缩，剩下残余物，将其通过硅胶柱色谱纯化，得到具有通式X的中间体。
向具有通式X的中间体在N,N-二甲基甲酰胺中的溶液中添加具有通式V的盐酸甲脒(1-1.2当量)和碳酸氢钠(3-4当量)。在100℃-110℃下搅拌4小时至过夜的反应时间后，将混合物冷却至室温并减压浓缩，剩下残余物，将其通过硅胶柱色谱纯化，得到具有通式I的二氢嘧啶产物。
当适用时，使用手性色谱法分离和纯化具有通式I的二氢嘧啶产物的立体异构体。
具有通式II的酸，芳基醛(P1)和甲脒(P2)的制备：
部分I：具有通式II的酸的制备
酸1
Figure BDA0002341655160000312
中间体A1：叔丁基1-((2-甲氧基-2-氧代乙基)磺酰基)哌啶-4-甲酸酯
在0℃下在氮气气氛下向哌啶-4-甲酸盐酸盐(500mg，2.26mmol)和三乙胺(2.29g，22.6mmol)在1,2-二氯乙烷(50mL)中的溶液中添加2-(氯磺酰基)乙酸甲酯(1.17g，6.78mmol)。在0℃下搅拌4小时后，将混合物倒入水(40mL)中，并用二氯甲烷(50mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤两次，经Na2SO4(s)干燥，过滤并减压浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝9:1至3:1)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物(475mg，65％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ3.92(s,2H),3.79(s,3H),3.75-3.70(m,2H),3.04-2.98(m,2H),2.39-2.32(m,1H),1.98-1.92(m,2H),1.81-1.71(m,2H),1.44(s,9H)。
中间体A2：1-(2-甲氧基羰基-丙烷-2-磺酰基)-哌啶-4-甲酸叔丁基酯
在氮气气氛下在0℃下，向1-((2-甲氧基-2-氧代乙基)磺酰基)哌啶-4-甲酸叔丁基酯中间体A1(100mg，0.312mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中的溶液中添加在矿物油中的60％wt氢化钠(31mg，0.780mmol)和碘甲烷(111mg，0.780mmol)。在室温下搅拌4小时后，将混合物倒入水(20mL)中，然后用乙酸乙酯(20mL)萃取四次。将合并的有机层用盐水(30.0mL)洗涤两次，经Na2SO4(s)干燥，过滤并减压浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝4:1)纯化，得到呈褐色油的标题化合物(114mg，>100％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝1.71min，C15H27NO6S的计算质量349.2，m/z发现值294.1[M+H-56]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ3.77(s,3H),3.73-3.70(m,2H),3.02(t,J＝13.2Hz,2H),2.38-2.31(m,1H),1.91-1.87(m,2H),1.76-1.68(m,2H),1.60(s,6H),1.43(s,9H)。
酸1：1-((1-甲氧基-2-甲基-1-氧代丙烷-2-基)磺酰基)哌啶-4-甲酸
在室温下向1-(2-甲氧基羰基-丙烷-2-磺酰基)-哌啶-4-甲酸叔丁酯中间体A2(1.23g，3.52mmol)在二氯甲烷(50mL)中的溶液中添加三氟乙酸(50mL)。在室温下搅拌1小时后，将混合物减压浓缩，得到呈黄色固体的粗标题化合物(1.20g，>100％产率)，将其直接用于下一步。LC-MS(ESI)：RT＝0.26min，C11H19NO6S的计算质量293.1，m/z发现值294.0[M+H]+。
酸2
中间体A3：3-氧杂双环[3.3.1]壬烷-2,4-二酮
在120℃下将环己烷-1,3-二甲酸(10.0g，58.1mmol)在乙酸酐(100mL)中的溶液搅拌1.5小时。将溶剂除去，得到呈黄色固体的残余物(11.8g，粗品)。残余物无需进一步纯化即可用于下一步。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ2.35-2.27(m,1H),2.26-2.22(m,1H),1.88-1.85(m,2H),1.82-1.70(m,4H),1.66-1.60(m,0.5H),1.53-1.44(m,0.5H),1.30-1.17(m,1H)。
酸2：cis-3-(甲氧基羰基)环己烷甲酸
将3-氧杂双环[3.3.1]壬烷-2,4-二酮中间体A3(12.9g，83.8mmol)在甲醇(100mL)中的溶液在70℃下搅拌过夜。将溶剂除去，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝10:1至3:1)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物(8.3g，54％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ3.68(s,3H),2.38-2.30(m,2H),2.28-2.25(m,1H),2.05-1.98(m,2H),1.93-1.89(m,1H),1.62-1.52(m,1H),1.42-1.30(m,3H)。
类似地使用类似程序，如下所示制备酸酯：
Figure BDA0002341655160000331
酸3：3-(甲氧基羰基)环戊烷甲酸
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.10(s,1H),3.60(s,3H),2.90-2.70(m,2H),2.16-1.65(m,6H)。
酸4
Figure BDA0002341655160000332
中间体A4：4-(2-乙氧基-2-氧代亚乙基)环己烷甲酸
在氮气气氛下向室温下向4-氧代环己烷甲酸(2.0g，14mmol)在无水乙醇(100mL)中的溶液中添加甲醇钠(0.9g，16mmol)，然后添加2-(二乙氧基磷酰基)乙酸乙酯(3.5g，15mmol)。将反应混合物在冰浴中冷却至4℃，然后添加另一批甲醇钠(800mg，15mmol)。在氮气气氛下在4℃搅拌1小时后，使反应混合物升至室温，并用冰醋酸(3ml)调节至pH 5。将酸化的混合物浓缩，并将剩余的油在乙酸乙酯(100ml)和1M盐酸水溶液(100mL)之间分配。将有机相分离，用水(100mL)洗涤两次，经无水Na2SO4(s)干燥，过滤并浓缩，得到呈黄色油的标题化合物(3.0g，100％产率)，无需进一步纯化即可直接用于下一反应。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.12(s,1H),5.65(s,1H),4.06(q,J＝7.2Hz,2H),3.45(dt,J＝13.6,4.0Hz,1H),2.54-2.50(m,1H),2.36-2.26(m,1H),2.24-2.15(m,2H),1.97-1.94(m,2H),1.57-1.41(m,2H),1.19(t,J＝7.2Hz,3H)。
酸4：4-(2-乙氧基-2-氧代乙基)环己烷甲酸
向4-(2-乙氧基-2-氧代亚乙基)环己烷甲酸中间体A4(3.2g，14mmol)在乙醇(150mL)中的溶液中添加10％wt钯炭(0.4g)。随后在30℃下添加甲酸铵(2.4g，37mmol)。将混合物在50℃下搅拌1小时。然后将其冷却至室温，并通过硅藻土过滤除去催化剂。将滤液浓缩，得到残余物，将其在乙酸乙酯(100mL)和1M盐酸水溶液(30mL)之间分配。将有机相分离，用水(100mL)洗涤三次，经无水Na2SO4(s)干燥，过滤并浓缩，得到呈黄色油的标题化合物(3.1g，96％产率)，无需进一步纯化即可直接用于下一反应。LC-MS(ESI)：RT＝0.266min，C11H18O4的计算质量214.1，m/z发现值213.0[M-H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.02(s,1H),4.04(q,J＝7.2Hz,2H),2.46-2.42(m,0.3H),2.20-2.15(m,2H),2.10(tt,J＝12.0,3.6Hz,0.7H),1.91-1.81(m,2H),1.73-1.70(m,2H),1.66-1.60(m,1H),1.54-1.46(m,1H),1.35-1.22(m,2H),1.17(t,J＝7.2Hz,3H),0.98(tq,J＝12.0,3.2Hz,1H)。
酸5
Figure BDA0002341655160000341
中间体A5：3-甲烷磺酰基-3-氮杂-双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸甲基酯
在0℃向3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸甲酯盐酸盐(600mg，2.93mmol)在二氯甲烷(10mL)中的溶液中添加三乙胺(1.18g，11.7mmol)和甲磺酰氯(500mg，4.39mmol)。在室温下搅拌过夜后，将混合物用水(40mL)淬灭，并用二氯甲烷(30mL)萃取两次。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤两次，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到呈白色固体的标题化合物(700mg，97％产率)。LC-MS(ESI)：对于MS RT＝1.37min，C10H17NO4S的计算质量247.1，m/z发现值248.4[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ3.67(s,1.6H),3.61(s,1.4H),3.31(d,J＝2.4Hz,1H),3.21(d,J＝4.0Hz,0.4H),3.18(d,J＝3.2Hz,0.6H),3.04(s,0.6H),3.01(s,0.4H),2.92(s,0.5H),2.89(s,0.5H),2.84(s,1.4H),2.81(s,1.6H),2.70(t,J＝4.0Hz,0.6H),2.62(s,0.4H),2.56(br s,1H),2.47(br s,1H),1.74-1.50(m,4H)。
酸5：3-(甲基磺酰基)-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸
在室温下向3-甲磺酰基-3-氮杂-双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸甲酯中间体A5(440mg，1.76mmol)在四氢呋喃(3mL)、甲醇(1mL)和水(1mL)中的溶液中添加氢氧化锂水合物(150mg，3.57mmol)。搅拌过夜后，将混合物减压浓缩，得到残余物，将其稀释于水(6mL)中并用乙酸乙酯(6mL)萃取。将剩余的水层用1M盐酸水溶液调节至pH 1～2，并用乙酸乙酯(20mL)萃取三次。将合并的后一有机层减压浓缩，得到呈白色固体的标题化合物(400mg，98％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.33(s,1H),3.32(d,J＝4.0Hz,0.6H),3.30(d,J＝3.2Hz,0.4H),3.20(d,J＝3.2Hz,0.4H),3.17(d,J＝3.6Hz,0.6H),3.08(s,0.6H),3.05(s,0.4H),2.90(s,0.5H),2.87(s,0.5H),2.83(s,1.5H),2.80(s,1.5H),2.62(t,J＝4.8Hz,0.5H),2.54(br s,1H),2.51-2.50(m,0.5H),2.43(br s,1H),1.72-1.64(m,2H),1.58-1.48(m,2H)。
类似地使用类似程序，制备了以下酸：
Figure BDA0002341655160000351
酸6：8-甲磺酰基-8-氮杂-双环[3.2.1]辛烷-3-甲酸
LC-MS(ESI)：RT＝0.29min，C9H15NO4S的计算质量233.1，m/z发现值233.8[M+H]+。1HNMR(300MHz,CDCl3)δ4.31(s,2H),2.94(s,3H),2.82-2.71(m,1H),2.13-2.09(m,2H),2.02-1.92(m,4H),1.79-1.72(m,2H)。
酸7：(甲基磺酰基)脯氨酸
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.70(br s,1H),4.23-4.19(m,1H),3.37-3.35(m,1H),3.32-3.29(m,1H),2.95(s,3H),2.26-2.19(m,1H),1.95-1.81(m,3H)
酸8
Figure BDA0002341655160000352
中间体A6：2-(甲氧基羰基)哌啶-4-甲酸
在室温下在氮气气氛下，向2-(甲氧基羰基)异烟碱酸(4.20g，23.2mmol)在甲醇(500mL)中的溶液中添加10％wt钯炭(420mg)。用氢气代替内部氮气气氛后，将混合物在氢气气氛(50psi)下于40℃搅拌过夜。冷却至室温并将内部压力释放至常压后，排空烧瓶，并充入氮气气氛三次。将催化剂滤出，并将滤液减压浓缩，得到呈灰色固体的标题化合物(4.30g，99％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝0.31min，C8H13NO4的计算质量187.1，m/z发现值185.9[M-H]-。1H NMR(400MHz,D2O)δ4.13(dd,J＝12.4,2.8Hz,1H),3.87(s,3H),3.63-3.60(m,1H),3.16-3.09(m,1H),2.64-2.56(m,2H),2.20-2.17(m,1H),1.83-1.72(m,2H)。
酸8：1-(叔丁氧基羰基)-2-(甲氧基羰基)哌啶-4-甲酸
在室温下向2-(甲氧基羰基)哌啶-4-甲酸中间体A6(4.30g，23.0mmol)在1,4-二噁烷(60mL)中的溶液中添加水(60mL)、碳酸氢钠(5.80g，为69.0mmol)和二碳酸二叔丁酯(10.0g，46.0mmol)。在室温搅拌过夜后，将反应混合物在乙酸乙酯(50mL)和饱和碳酸氢钠水溶液(100mL)中分配。将水层用乙酸乙酯(100mL)萃取三次，然后滴加0.5N盐酸水溶液以将pH值调节至4～5。将水层减压浓缩，得到残余物，将其通过C18纯化(乙腈:水＝5％至50％，波长：205nm)纯化，得到呈无色油的标题化合物(5.24g，79％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝1.610min，C13H21NO6的计算质量287.1，m/z发现值286.1[M-H]-。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ4.63-4.56(m,1H),3.87-3.80(m,1H),3.69(s,3H),3.37-3.28(m,1H),2.73-2.69(m,1H),2.54-2.45(m,1H),2.09-2.03(m,2H),1.82-1.71(m,1H),1.43(s,9H)。
酸9
Figure BDA0002341655160000361
中间体A7：吡啶-3,4-二甲酸二甲基酯
在0℃向吡啶-3,4-二甲酸(7.00g，41.9mmol)和4-二甲氨基吡啶(80mg，0.65mmol)在甲醇(230mL)中的溶液中添加亚硫酰氯(24.9g，210mmol)。将混合物在0℃下搅拌30分钟。然后将反应温度升高至回流并不断搅拌过夜。冷却至室温后，将反应混合物减压浓缩，得到残余物，将其重新溶于水(200mL)中。在0℃将制备的溶液用饱和的碳酸氢钠水溶液调节至pH 8～9。然后将水层用乙酸乙酯(150mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(200mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到呈黄色油的标题化合物(5.26g，64％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝1.27min，C9H9NO4的计算质量195.1，m/z发现值196.4[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.02(d,J＝0.8Hz,1H),8.91(d,J＝5.2Hz,1H),7.70(d,J＝5.2,0.8Hz,1H),3.87(s,6H)。
中间体A8：吡啶-3,4-二甲酸3-甲基酯
在0℃向吡啶-3,4-二甲酸二甲酯中间体A7(5.26g，27.0mmol)在水(50mL)中的悬浮液中添加氢氧化钠(1.08g，27.0mmol)在水(16mL)中的溶液。将混合物在室温搅拌过夜，在此期间混合物变得均匀。用氯仿萃取除去未消耗的二酯，并且将剩余的水层用浓盐酸酸化至pH约1。将所得溶液在30℃在减压下蒸发至干。用热的四氢呋喃萃取生成的残余物，得到粗单酯，将其从甲醇中重结晶(1.0g的粗单酯在3mL甲醇中，从80℃升至室温)，得到呈灰色固体的标题化合物(2.0g，34％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝0.25min，C8H7NO4的计算质量181.0，m/z发现值182.3[M+H]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.94(s,1H),8.86(d,J＝4.8Hz,1H),7.68(d,J＝4.8Hz,1H),3.85(s,3H)。
中间体A9：cis-哌啶-3,4-二甲酸3-甲基酯盐酸盐
向吡啶-3,4-二甲酸3-甲酯中间体A8(1.04g，4.79mmol)在甲醇(30mL)中的溶液中添加氧化铂(IV)(0.12g，0.53mmol)和在甲醇溶液中的7M盐酸(1.0mL，7.0mmol)。将混合物在氢气气氛(50psi)下于室温搅拌24小时。将催化剂滤出，并将滤液减压浓缩，得到呈白色固体的标题化合物(1.26g，>100％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝0.25min，C8H13NO4的计算质量187.1，m/z发现值188.5[M+H]+。1H NMR(400MHz,D2O)δ3.80(s,3H),3.75-3.62(m,1H),3.57-3.46(m,1H),3.42-3.39(m,1H),3.34-3.22(m,2.7H),3.18-3.11(m,0.3H),2.27-2.16(m,1.8H),1.98-1.91(m,0.2H)。
酸9：cis-哌啶-1,3,4-三甲酸1-叔丁基酯3-甲基酯
在0℃向cis-哌啶-3,4-二甲酸3-甲酯盐酸盐中间体A9(1.26g，5.65mmol)在水(19mL)中的溶液中添加碳酸钠(1.50g，14.1mmol)在水(5ml)中的溶液，随后添加在1,4-二噁烷(6ml)中的焦碳酸二叔丁酯(2.46g，11.3mmol)。将混合物在室温搅拌20小时。将其用水(20mL)稀释并用乙酸乙酯(20mL)萃取两次。将分离的水层在水中用2M柠檬酸酸化至pH 1～2，然后用乙酸乙酯(40mL)萃取三次。将合并的有机层用水(50mL)、盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到呈无色油的标题化合物(1.37g，85％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝1.49min，C13H21NO6的计算质量287.1，m/z发现值233.5[M+H-55]+。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ4.13-4.07(m,1H),3.70-3.63(m,4H),3.45(dd,J＝13.8,3.3Hz,1H),3.22-3.13(m,1H),2.96-2.79(m,2H),2.21-2.08(m,1H),1.94-1.80(m,1H),1.46(s,1.4H),1.44(s,7.6H)。
酸10
中间体A10：cis-四氢呋喃-2,5-二甲酸
在室温下在氮气气氛下，向呋喃-2,5-二甲酸(8.0g，51.3mmol)在乙酸(150mL)中的溶液中添加10％wt钯炭(1.0g)。在氢气气氛(5MPa)下在140℃下搅拌过夜后，将混合物冷却至室温并滤出催化剂。将滤液减压浓缩，得到呈绿色固体的标题化合物(7.1g，87％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝0.30min，C6H8O5的计算质量160.0，m/z发现值161.1[M+H]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.85(br s,2H),4.47(s,2H),2.26-2.16(m,2H),2.02-1.90(m,2H)。
中间体A11：cis-3,8-二氧杂双环[3.2.1]辛烷-2,4-二酮
将cis-四氢呋喃-2,5-二甲酸中间体A10(8.67g，54.2mmol)在三氟乙酸酐(60mL)中的溶液在45℃搅拌过夜，然后在55℃搅拌2天。冷却至室温后，将混合物减压浓缩，得到呈绿色固体的标题化合物(8.8g，>100％产率)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ5.18(s,2H),2.27-2.14(m,4H)。
中间体A12：cis-5-(甲氧基羰基)四氢呋喃-2-甲酸
在0℃向cis-3,8-二氧杂双环[3.2.1]辛烷-2,4-二酮中间体A11(8.8g，54.2mmol)在甲醇(170mL)中的溶液中添加三乙胺(7.12g，70.5mmol)。将混合物在室温搅拌20小时。然后将其减压浓缩至干。将残余物溶于水(40mL)中，用2M盐酸水溶液调节至pH 1～2，并用乙酸乙酯(300mL)萃取三次。将合并的有机层用水(200mL)洗涤两次，用盐水(200mL)洗涤两次，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到呈黄色油的标题化合物(6.19g，66％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝0.27min，C7H10O5的计算质量174.1，m/z发现值175.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.61(br s,1H),4.53-4.50(m,1H),4.43-4.40(m,1H),3.64(s,3H),2.22-2.11(m,2H),2.03-1.94(m,2H)。
中间体A13：cis-2-苄基5-甲基四氢呋喃-2,5-二甲酸酯
在室温下向cis-5-(甲氧基羰基)四氢呋喃-2-甲酸中间体A12(5.0g，28.7mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(50mL)中的溶液中添加碳酸钾(15.8g，114mmol)和(溴甲基)苯(9.8g，57.3mmol)。在30℃下搅拌过夜后，将混合物倒入水(200mL)中，并用乙酸乙酯(200mL)萃取两次。将合并的有机层用水(200mL)洗涤两次，然后用盐水(200mL)洗涤两次，经Na2SO4(s)干燥，过滤并浓缩。将残余物通过C18柱(乙腈:水＝60％)纯化，得到呈无色油的标题化合物(5g，66％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝1.54min，C14H16O5的计算质量264.1，m/z发现值265.1[M+H]+。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.37-7.35(m,5H),5.25-5.15(m,2H),4.66-4.59(m,2H),3.70(s,3H),2.32-2.17(m,4H)。
酸10：cis-5-(甲氧基羰基)四氢呋喃-2-甲酸
在室温下在氮气下向cis-2-苄基5-甲基四氢呋喃-2,5-二甲酸酯中间体A13(5.0g，18.9mmol)在甲醇(60mL)中的溶液中添加10％wt钯炭(500mg)。在氢气的气囊压力下于25℃搅拌过夜后，将混合物过滤并将滤液减压浓缩，得到呈无色油的标题化合物(3.2g，97％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝0.24min，C7H10O5的计算质量174.1，m/z发现值175.1[M+H]+。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.56(br s,1H),4.51(t,J＝6.3Hz,1H),4.41(t,J＝6.3Hz,1H),3.64(s,3H),2.17-1.91(m,4H)。
酸11
Figure BDA0002341655160000391
中间体A14：3-亚甲基-环丁烷甲酸
向3-亚甲基-环丁烷甲腈(11.2g，120mmol)在乙醇(30mL)和水(30mL)中的溶液中添加氢氧化钾(33.7g，602mmol)。将混合物在105℃下搅拌过夜。冷却后，将其浓缩。将含水残余物用浓盐酸中和，并用乙酸乙酯(50mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤两次，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到呈无色油的标题化合物(13.0g，96％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.21(s,1H),4.79-4.76(m,2H),3.10-3.01(m,1H),2.85-2.82(m,4H)。
中间体A15：3-亚甲基-环丁烷甲酸叔丁基酯
向3-亚甲基-环丁烷甲酸中间体A14(13.0g，116mmol)在四氢呋喃(150mL)中的溶液中添加二碳酸二叔丁酯(33.0g，151mmol)和4-二甲基胺吡啶(2.83g，23.2mmol)。在室温下搅拌过夜后，将混合物用乙酸乙酯(200mL)稀释，用水(50mL)、盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(100％石油醚)纯化，得到呈无色油的标题化合物(9.4g，48％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ4.79-4.77(m,2H),3.07-2.99(m,1H),2.88-2.77(m,4H),1.40(s,9H)。
中间体A16：3-羟基甲基-环丁烷甲酸叔丁基酯
将3-亚甲基-环丁烷甲酸叔丁酯中间体A15(2.0g，11.9mmol)在四氢呋喃(20mL)中的溶液冷却至-20℃。然后在氮气气氛下缓慢添加在二甲基硫醚中的10M硼烷-甲基硫醚络合物(0.36mL，3.57mmol)。在室温下搅拌4小时后，将混合物冷却至-20℃至-10℃。依次添加甲醇(2mL)和30％过氧化氢水溶液(400mg，11.9mmol)。搅拌15分钟后，添加3M氢氧化钠水溶液(1.59mL，4.76mmol)。将获得的混合物在-20℃至-10℃下搅拌2小时。添加饱和的亚硫酸钠水溶液(20mL)。将混合物用水(20mL)稀释，然后用乙酸乙酯(30mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝10:1)纯化，得到呈无色油的标题化合物(1.53g，69％产率)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ3.38(d,J＝6.6Hz,0.8H),3.28(d,J＝6.0Hz,1.2H),2.99-2.81(m,1H),2.34-2.24(m,1H),2.15-2.04(m,2H),1.94-1.77(m,2H),1.40(s,3.6H),1.38(s,5.4H)。
中间体A17：环丁烷-1,3-二甲酸
向包含一滴发烟硝酸的热浓硝酸(5mL)中滴加3-羟甲基-环丁烷甲酸叔丁酯中间体A16(1.0g，5.38mmol)在2M硝酸水溶液中的溶液(1.0mL)。将该混合物加热至120℃并搅拌3小时，直到溶液变成几乎无色并且气体停止逸出。将完成的反应混合物冷却至室温。在减压下除去大部分过量的硝酸，并通过添加甲酸(2mL)破坏痕量的硝酸。将所得溶液浓缩，得到呈黄色油的标题化合物(800mg，粗品)，其无需进一步纯化即可直接用于下一步。LC-MS(ESI)：RT＝0.28min，C6H8O4的计算质量144.0，m/z发现值145.0[M+H]+。
中间体A18：环丁烷-1,3-二甲酸二甲基酯
向环丁烷-1,3-二甲酸中间体A17(560mg，3.9mmol)在甲醇(10mL)中的溶液中添加一滴浓硫酸。将该混合物加热至75℃并搅拌过夜。然后将其冷却至室温，并减压浓缩。将残余物溶于乙酸乙酯(50mL)中，并用饱和碳酸氢钠水溶液(20mL)洗涤，然后用盐水(20mL)洗涤。将剩余的有机层经Na2SO4(s)干燥，过滤并浓缩，得到呈无色油的标题化合物(600mg，90％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ3.71(s,6H),3.28-3.17(m,2H),2.53(t,J＝7.8Hz,4H)。
酸11：环丁烷-1,3-二甲酸单甲基酯
向环丁烷-1,3-二甲酸二甲酯中间体A18(600mg，3.49mmol)在甲醇(15mL)和水(1.5mL)中的溶液中添加氢氧化钠(142mg，3.55mmol)。将该混合物在室温下搅拌过夜。然后将其减压浓缩并将残余物溶于水(15mL)。将所得溶液用乙醚(15mL)萃取。将水层用2M盐酸水溶液酸化至pH约2，并且然后用乙酸乙酯(20mL)萃取三次。将合并的有机层经Na2SO4(s)干燥并浓缩，得到呈无色油的标题化合物(478mg，87％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝0.26min，C7H10O4的计算质量158.1，m/z发现值157.4[M-H]-。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.19(br s,1H),3.62(s,3H),3.16-3.00(m,2H),2.37(t,J＝7.8Hz,4H)。
酸12
中间体A19：trans-甲基2-(2-(叔丁氧基)-2-氧代乙基)环丙烷-1-甲酸酯
在-78℃下在氮气气氛下，向二异丙胺(7.80g，77.4mmol)的无水四氢呋喃(40mL)中的溶液中添加n-丁基锂(31mL，77.4mmol，在己烷中2M)。在-78℃下搅拌1小时后，添加乙酸叔丁酯(10.0g，86.0mmol)。将反应混合物再搅拌1小时，然后在-78℃将4-溴丁-2-烯酸酯(14.3g，60.2mmol)在无水四氢呋喃(20mL)中的溶液添加到反应混合物中。使所得混合物升至室温，并搅拌过夜。然后将其用饱和氯化铵水溶液(100mL)淬灭，用乙酸乙酯(500mL)萃取两次。将合并的有机层用盐水(400mL)洗涤三次，用无水Na2SO4(s)干燥并浓缩，得到呈棕色油的标题化合物(12.8g，100％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ3.67(s,3H),2.24-2.21(m,2H),1.70-1.60(m,1H),1.45-1.44(m,10H),1.27-1.23(m,1H),0.87-0.75(m,1H)。
酸12：trans-2-(2-(叔丁氧基)-2-氧代乙基)环丙烷-1-甲酸
向trans-甲基2-(2-(叔丁氧基)-2-氧代乙基)环丙烷-1-甲酸酯中间体A19(5.00g，23.3mmol)在四氢呋喃/甲醇/水(60mL/30mL/30mL)中的溶液中添加氢氧化锂水合物(980mg，23.3mmol)。将反应混合物在室温搅拌2小时。然后将其浓缩以在室温下减压除去大部分溶剂。将含水残余物用水(60mL)稀释，并用盐酸水溶液(1M)将pH调节至3。将获得的混合物用乙酸乙酯(200mL)萃取三次，经无水Na2SO4(s)干燥并浓缩，得到呈无色油的标题化合物(3.30g，70％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.14(br s,1H),2.42-2.38(m,1H),2.34-2.28(m,1H),2.25-2.15(m,1H),1.78-1.74(m,1H),1.40(s,9H),1.01-0.96(m,1H),0.78-0.73(m,1H)。
酸13：4-(甲氧基羰基)环庚烷甲酸
中间体A20：2-(3-氧代-3-苯基丙基)环戊酮
在室温下向3-(二甲基氨基)-1-苯基丙-1-酮盐酸盐(5.00g，23.4mmol)在二噁烷(50mL)中的悬浮液中添加4-(环戊-1-烯-1-基)吗啉(3.58g，23.4mmol)。将混合物加热至110℃，并在氮气气氛下搅拌过夜。然后将其冷却并浓缩。将残余物溶于乙酸乙酯(100mL)中，并用1N盐酸水溶液(50mL)洗涤。将水层用乙酸乙酯(100mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液浓缩并通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝10:1)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物(2.3g，46％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝1.36min，C14H16O2的计算质量216.1，m/z发现值217.1[M+H]+。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.98(d,J＝7.5Hz,2H),7.57(t,J＝7.5Hz,1H),7.47(d,J＝7.5Hz,2H),3.22-3.05(m,2H),2.38-1.99(m,6H),1.88-1.73(m,2H),1.63-1.53(m,1H)。
中间体A21：4-苯基环庚-3-烯甲酸和4-苯基环庚-4-烯甲酸的混合物
在室温下向2-(3-氧代-3-苯基丙基)环戊酮中间体A20(1.00g，4.63mmol)在乙酸(8mL)中的溶液中添加浓盐酸(2mL)。将混合物加热至110℃，并搅拌4小时。冷却后，将混合物减压浓缩。将残余物溶于水(30mL)中，并用二乙醚(30mL)萃取。将分离的醚层用6N氢氧化钠水溶液(10mL)萃取。将分离的水层用浓盐酸酸化至pH约1，然后用二乙醚(30mL)萃取两次。将合并的有机层经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液浓缩，得到呈黄色油的标题化合物的混合物(750mg，75％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝1.24min，C14H16O2的计算质量216.1，m/z发现值215.3[M-H]-。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.12(br s,1H),7.31-7.28(m,4H),7.25-7.20(m,1H),6.08-6.02(m,1H),2.68-2.54(m,2H),2.46-2.33(m,2H),2.27-2.20(m,0.5H),2.11-1.78(m,3H),1.61-1.42(m,1.5H)。
中间体A22：甲基4-苯基环庚-3-烯甲酸酯和甲基4-苯基环庚-4-烯甲酸酯的混合物
向4-苯基环庚-3-烯甲酸和4--苯基环庚-4-烯甲酸的混合物中间体A21(750mg，3.47mmol)在干甲醇(10mL)中的溶液中添加一滴浓硫酸。将混合物加热至70℃并搅拌过夜。冷却后，将混合物浓缩并将残余物溶于乙酸乙酯(50mL)中。将所得溶液用饱和碳酸氢钠水溶液(30mL)和盐水(30mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液浓缩，得到呈黄色油的标题化合物的混合物(740mg，93％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝1.83min，C15H18O2的计算质量230.1，m/z发现值231.3[M+H]+。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.29-7.15(m,5H),6.05(t,J＝6.0Hz,0.5H),6.00(t,J＝6.4Hz,0.5H),3.66(s,1.5H),3.65(s,1.5H),2.74-2.38(m,4.5H),2.30-1.84(m,3H),1.72-1.49(m,1.5H)。
中间体A23：甲基4-苯基环庚烷甲酸酯
向甲基4-苯基环庚-3-烯甲酸酯和甲基4-苯基环庚-4-烯甲酸酯的混合物中间体A22(1.64g，7.13mmol)在甲醇(50mL)中的溶液中添加10％wt钯炭(160mg)。然后将所得的反应混合物在氢气气氛下在30℃下搅拌过夜。然后将催化剂过滤。将滤液浓缩，得到呈黄色油的标题化合物(1.6g，97％产率)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.25-7.09(m,5H),3.66(s,3H),2.74-2.63(m,2H),2.09-1.46(m,10H)。
酸13：4-(甲氧基羰基)环庚烷甲酸
向高碘酸钠(26.6g，124mmol)的乙腈(13mL)和水(26mL)溶液中添加甲基4-苯基环庚烷甲酸酯中间体A23(1.6g，6.90mmol)在四氯化物碳(13mL)和三氯化钌(29mg，0.14mmol)中的溶液。在室温下搅拌过夜后，将混合物过滤，并使用饱和碳酸氢钠水溶液将滤液调节至pH 8～9。将所得溶液用二氯甲烷(20mL)冲洗，用1N盐酸水溶液酸化至pH 2～3，并用乙酸乙酯(30mL)萃取两次。将合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液浓缩，得到呈黄色油的标题化合物(1.2g，87％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝0.29min(MS峰)，C10H16O4的计算质量200.1，m/z发现值199.1[M-H]-。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ3.66(s,3H),2.59-2.47(m,2H),2.07-1.44(m,10H)。
酸36：4-(N-甲基氨磺酰基)环己烷甲酸
Figure BDA0002341655160000441
中间体24：苄基4-羟基环己烷-1-甲酸酯
在室温下向4-羟基环己烷甲酸(24.8g，172mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(125mL)中溶液中添加碳酸钾(25.0g，184mmol)和苄基溴(28.0g，163mmol)。在氮气气氛下搅拌过夜后，将混合物倒入水(200mL)中，用乙酸乙酯(150mL)萃取两次。将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥，过滤并浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝5:1)纯化，得到呈无色油的标题化合物(36.0g，89％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝1.50min，C14H18O3的计算质量234.1，m/z发现值235.3[M+H]+。
中间体25：苄基4-((甲基磺酰基)氧基)环己烷甲酸酯
在0℃向苄基4-羟基环己烷甲酸酯中间体24(27.0g，115mmol)和N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(22.3g，173mmol)在二氯甲烷(300mL)中的溶液中缓慢添加甲磺酰氯(14.5g，127mmol)。在室温搅拌1小时后，将混合物在二氯甲烷(500mL)中稀释，用水(100mL)、盐水(100mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥，过滤并浓缩，得到呈浅黄色固体的标题化合物(36.5g，粗品)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.40-7.31(m,5H),5.11(s,1H),5.09(s,1H),4.88-4.78(m,0.4H),4.64-4.53(m,0.6H),3.17(s,3H),2.57-2.52(m,0.4H),2.45-2.37(m,0.6H),2.11-2.03(m,1H),2.00-1.92(m,1H),1.88-1.80(m,1H),1.75-1.69(m,3H),1.60-1.47(m,2H)。
中间体26：苄基4-(乙酰基硫代)环己烷甲酸酯
向苄基4-((甲基磺酰基)氧基)环己烷甲酸酯中间体25(36.5g，粗品，约115mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(350mL)中的溶液中添加乙硫醇钾(15.8g，139mmol)。将混合物在氮气气氛下在80℃下搅拌5小时。冷却至室温后，将混合物在水(500mL)中稀释。将获得的混合物用乙酸乙酯(200mL)萃取三次。将合并的有机层用水(100mL)、盐水(100mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥，过滤并浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝5:1)纯化，得到呈棕色油的标题化合物(26.0g，77％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.40-7.30(m,5H),5.10(s,1.4H),5.09(s,0.6H),3.71-3.65(m,0.8H),3.30-3.23(m,0.2H),2.58-2.52(m,1H),2.30(s,2H),2.29(s,1H),1.97-1.88(m,1H),1.84-1.72(m,3H),1.69-1.57(m,3H),1.50-1.37(m,1H)。
中间体27：苄基4-(N-甲基氨磺酰基)环己烷甲酸酯
在0℃向苄基4-(乙酰基硫代)环己烷甲酸酯中间体26(2.00g，6.85mmol)在乙腈(20mL)中的溶液中添加2M盐酸盐水溶液(1mL)。然后添加1-氯吡咯烷-2,5-二酮(3.66g，27.4mmol)。在氮气气氛下于0℃下搅拌1小时后，将混合物稀释于乙醚(100mL)中，用水(30mL)、盐水(30mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥，过滤并浓缩，得到残余物，将其溶于四氢呋喃(10mL)中，并冷却至0℃。然后添加在四氢呋喃中的2M甲胺(17mL，34.3mmol)。在0℃下搅拌1小时后，将混合物在水(50mL)中稀释并用乙酸乙酯(50mL)萃取三次。将合并的有机层用水(20mL)、0.5M盐酸盐水溶液(20mL)、盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥，过滤并浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝2:1)纯化，得到呈白色固体的标题化合物(2.00g，94％产率)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.43-7.29(m,5H),6.91-6.81(m,1H),5.13(s,1H),5.19(s,1H),3.13-2.96(m,1H),2.77-2.70(m,0.5H),2.57-2.53(m,3H),2.44-2.32(m,0.5H),2.18-2.05(m,3H),1.92-1.79(m,1H),1.65-1.34(m,4H)。
酸36：4-(N-甲基氨磺酰基)环己烷甲酸
向苄基4-(N-甲基氨磺酰基)环己烷甲酸酯中间体27(2.45g，7.88mmol)在甲醇(50mL)中的溶液中添加10％wt钯炭(245mg)。将反应混合物在氢气气氛(50psi)下在室温下搅拌过夜。将完成的反应混合物过滤，并将滤饼用甲醇(20mL)洗涤。将滤液浓缩，得到呈浅黄色固体的标题化合物(1.50g，86％产率)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ6.89-6.77(m,1H),3.04-2.89(m,1H),2.57-2.55(m,3H),2.20-1.79(m,4H),1.62-1.28(m,4H)。
酸37：4-(吡咯烷-1-基磺酰基)环己烷-1-甲酸
Figure BDA0002341655160000461
中间体28：苄基4-(吡咯烷-1-基磺酰基)环己烷甲酸酯
在0℃向苄基4-(乙酰基硫代)环己烷甲酸酯中间体26(2.70g，9.25mmol)在乙腈(40mL)中的溶液中添加2M盐酸盐水溶液(1.4mL，2.78mmol)、1-氯-吡咯烷-2,5-二酮(4.90g，37.0mmol)。在0℃下搅拌1小时后，将反应混合物倒入水(200mL)中，用乙酸乙酯(100mL)萃取两次。将合并的有机层用水(100mL)，盐水(100mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥，过滤并浓缩，得到粗产物(3.37g)，将其无需进一步纯化即可用于下一步。在0℃向粗产物(1.70g)在四氢呋喃(20mL)中的溶液中添加吡咯烷(1.60g，23.2mmol)。在0℃下搅拌1小时后，将溶剂除去，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝10:1至3:1)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物(1.60g，99％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝1.89min，C18H25NO4S的计算质量351.2，m/z发现值352.4[M+H]+。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.42-7.31(m,5H),5.17(s,0.9H),5.13(s,1.1H),3.42-3.35(m,4H),3.03-2.90(m,1H),2.75-2.67(m,0.4H),2.41-2.33(m,1.4H),2.25-2.17(m,2.2H),2.07-2.00(m,1H),1.96-1.88(m,4H),1.85-1.71(m,1H),1.67-1.47(m,3H)。
酸37：4-(吡咯烷-1-基磺酰基)环己烷-1-甲酸向苄基4-(吡咯烷-1-基磺酰基)环己烷甲酸酯中间体28(1.60g，4.56mmol)在甲醇(40mL)中的溶液中添加5％wt钯炭(160mg)。在氢气(50psi)气氛下在25℃下搅拌过夜后，将反应混合物通过硅藻土过滤。将滤液浓缩，得到呈黄色固体的标题化合物(1.40g，粗品)，其无需进一步纯化即可用于下一步。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.12(br s,1H),3.33-3.11(m,6H),2.60-2.54(m,0.4H),2.28-2.14(m,0.6H),2.10-1.95(m,3H),1.89-1.80(m,4H),1.60-1.34(m,4H)。
酸38：3-(N-甲基乙酰胺基)环戊烷甲酸
中间体29：苄基3-氧代环戊烷甲酸酯
向3-氧代环戊烷甲酸(5.00g，39.1mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(50mL)中的溶液中添加添加碳酸钾(16.2g，117mmol)和苄基溴(13.4g，78.2mmol)。在室温下搅拌过夜后，将混合物倒入水(200mL)中，并用乙酸乙酯(200mL)萃取两次。将合并的有机层用水(200mL)和盐水(200mL)洗涤，经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液浓缩，并通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝10:1至8:1)纯化，得到呈无色油的标题化合物(8.00g，94％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.43-7.33(m,5H),5.18(s,2H),3.25-3.14(m,1H),2.61-2.10(m,6H)。
中间体30：苄基3-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)环戊烷-甲酸酯
向苄基3-氧代环戊烷甲酸酯EO8495_514.2(4.20g，19.3mmol)在1,2-二氯乙烷(50mL)中的溶液中添加甲胺盐酸盐(1.90g，28.6mmol)和N,N-二异丙基乙胺(3.70g，28.7mmol)。将混合物在室温搅拌1小时，然后添加氰基硼氢化钠(3.00g，47.8mmol)。将反应混合物在室温搅拌过夜后，添加N,N-二异丙基乙胺(7.40g，57.4mmol)和二碳酸二叔丁酯(10.5g，48.2mmol)。在室温下搅拌3小时后，将混合物用二氯甲烷(100mL)稀释，并用水(100mL)洗涤两次和用盐水(100mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液浓缩并通过C18柱(乙腈:水＝70％至75％)纯化，得到呈黄色油的标题化合物(1.70g，22％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝1.52min，C19H27NO4的计算质量333.2，m/z发现值334.3[M+H]+。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.40-7.30(m,5H),5.13(s,2H),2.96-2.77(m,1H),2.73(s,3H),2.20-2.03(m,2H),1.95-1.67(m,5H),1.45(s,9H)。
中间体31：苄基3-(N-甲基乙酰胺基)环戊烷甲酸酯
向苄基3-((叔丁氧基羰基)甲基氨基)环戊烷甲酸酯中间体30(1.70g，5.04mmol)在二氯甲烷(15mL)中的溶液中添加三氟乙酸(15mL)。在室温搅拌1小时后，将混合物减压浓缩以除去挥发物。将残余物溶于二氯甲烷(20mL)中，并添加三乙胺(1.27g，12.6mmol)和乙酸酐(771mg，7.56mmol)。在室温搅拌2小时后，将混合物用二氯甲烷(30mL)稀释并用水(30mL)和盐水(30mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液浓缩并通过C18柱(乙腈:水＝55％至60％)纯化，得到呈无色油的标题化合物(1.07g，76％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝1.49min，C16H21NO3的计算质量275.2，m/z发现值276.4[M+H]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.51-7.30(m,5H),5.11(s,2H),4.91-4.82(m,0.5H),4.33-4.22(m,0.5H),3.04-2.86(m,1H),2.79(s,1.5H),2.65(s,1.5H),2.03-1.52(m,9H)。
酸38：3-(N-甲基乙酰胺基)环戊烷甲酸
向苄基3-(N-甲基乙酰胺基)环戊烷甲酸酯中间体31(1.07g，3.89mmol)在甲醇(10mL)中的溶液中添加10％wt钯炭(107mg)。在室温下在氢气气氛下搅拌过夜后，将混合物过滤。将滤液浓缩，得到呈白色固体的标题化合物(710mg，99％产率)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.13(s,1H),4.91-4.78(m,0.5H),4.32-4.17(m,0.5H),2.87-2.67(m,4H),2.03-1.50(m,9H)。
酸39：(cis)-4-甲基四氢呋喃-2-甲酸
Figure BDA0002341655160000481
中间体32：甲基4-甲基呋喃-2-甲酸酯
在室温下在氮气气氛下向甲基4-溴呋喃-2-甲酸酯(2.00g，9.75mmol)在1,4-二噁烷(50mL)中的溶液中添加2,4,6-三甲基-1,3,5,2,4,6-三氧杂三硼烷(1.84g，14.6mmol)和碳酸钾(4.04g，29.3mmol)在水(10mL)中的溶液。将混合物用氮气脱气10分钟，然后在室温下添加双(二-叔丁基(4-二甲基氨基苯基)膦)-二氯化钯(II)(690mg，0.975mmol)。在氮气气氛下于100℃搅拌过夜后，将混合物冷却至室温，并用乙酸乙酯(100mL)稀释。将分离的有机层用水(60mL)洗涤三次，经Na2SO4(s)干燥，过滤并减压浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝8:1)纯化，得到呈黄色油的标题化合物(760mg，56％产率)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.72(s,1H),7.18(s,1H),3.80(s,3H),2.03(s,3H)。
中间体33：(cis)-甲基4-甲基四氢呋喃-2-甲酸酯
在室温下在氮气气氛下向甲基4-甲基呋喃-2-甲酸酯32(760mg，5.42mmol)在丙-2-醇(50mL)中的溶液中添加5％wt钌炭(100mg)。在用氢气代替惰性氮气气氛后，将混合物在使用气囊的氢气气氛下在100℃下搅拌过夜。将催化剂滤出，并将滤液减压浓缩，得到呈黄色油的标题化合物(780mg，99％产率)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ4.43-4.38(m,1H),3.92-3.87(m,1H),3.64(s,3H),3.33-3.28(m,1H),2.45-2.19(m,2H),1.52-1.42(m,1H),0.97(d,J＝6.6Hz,3H)。
酸39：(cis)-4-甲基四氢呋喃-2-甲酸
向(cis)-甲基4-甲基四氢呋喃-2-甲酸酯33(780mg，5.42mmol)在四氢呋喃(20mL)中的溶液中添加氢氧化锂一水合物(2.27g，54.2mmol)在水(20mL)中的溶液。将反应混合物在室温搅拌2小时。然后将反应混合物用乙酸乙酯(100mL)稀释，并用浓盐酸盐水溶液(约20mL)酸化至pH＝1。将水相分离，并用乙酸乙酯(20mL)萃取三次。将合并的有机层经无水Na2SO4(s)干燥，过滤并浓缩，得到呈黄色油的标题化合物(300mg，43％产率)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.28(s,1H),4.29(t,J＝7.8Hz,1H),3.88(t,J＝7.2Hz,1H),3.30(t,J＝8.1Hz,1H),2.43-2.36(m,1H),2.26-2.16(m,1H),1.50-1.41(m,1H),0.97(d,J＝6.6Hz,3H)。
酸40：4-((叔丁氧基羰基)氨基)环庚烷甲酸
Figure BDA0002341655160000491
中间体34：甲基4-((叔丁氧基羰基)氨基)环庚烷甲酸酯
在室温下向4-(甲氧基羰基)环庚烷甲酸EO8495_393.7(6.10g，30.5mmol)在叔-丁醇(300mL)中的溶液中添加三乙胺(9.20g，91.4mmol)和二苯基磷酰基叠氮化物(9.10g，33.5mmol)。将混合物加热至105℃，并在氮气气氛下在105℃下搅拌16小时。冷却至室温后，将混合物浓缩，并向残余物添加饱和碳酸氢钠水溶液(300mL)，并用乙酸乙酯(200mL)萃取三次。将合并的有机层经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝5:1)纯化，得到呈黄色油的标题化合物(6.20g，75％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝2.220min，C14H25NO4的计算质量271.2，m/z发现值216.1[M+H-56]+和172.1[M+H-Boc]+。
中间体35：苄基4-((叔丁氧基羰基)氨基)环庚烷甲酸酯
在0℃向甲基4-((叔丁氧基羰基)氨基)环庚烷甲酸酯34(6.20g，22.8mmol)在甲醇(40mL)中的溶液中添加氢氧化锂一水合物(1.90g，45.6mmol)在水(10mL)中的溶液。在室温下搅拌过夜后，将混合物减压浓缩以除去挥发物并添加水(30mL)，用乙酸乙酯(30mL)萃取三次。用饱和柠檬酸(20mL)将水层酸化至pH 2-3，用乙酸乙酯(30mL)萃取三次。将较后有机层用盐水(30mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液浓缩，得到残余物，将其溶于N,N-二甲基甲酰胺(50mL)中，然后在0℃下添加碳酸钾(8.00g，58.0mmol)和苄基溴(6.70g，39.0mmol)。在室温搅拌过夜后，向混合物添加水(500mL)，并用乙酸乙酯(50mL)萃取四次。将合并的有机层经Na2SO4(s)干燥，过滤并浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝50:1至30:1至20:1)纯化，得到呈浅黄色油的标题化合物(3.50g，53％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝2.516min，C20H29NO4的计算质量347.2，m/z发现值292.1[M+H-56]+,248.1[M+H-100]+。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.48-7.30(m,5H),5.14(s,2H),4.64-4.30(m,1H),3.77-3.49(m,1H),2.69-2.43(m,1H),2.20-1.54(m,8H),1.45(s,9H),1.40-1.20(m,2H)。
酸40：4-((叔丁氧基羰基)氨基)环庚烷甲酸
向苄基4-((叔丁氧基羰基)氨基)环庚烷甲酸酯35(3.50g，10.0mmol)在甲醇(50mL)中的溶液中添加10％wt钯炭(350mg)，将混合物在室温在氢气气氛下搅拌过夜。过滤后，将滤液浓缩，得到呈浅黄色油的标题化合物(2.58g，100％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝1.67min，C13H23NO4的计算质量257.2，m/z发现值202.4[M+H-56]+。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ4.74-4.30(m,1H),3.76-3.52(m,1H),2.74-2.39(m,1H),2.13-1.60(m,8H),1.49(s,9H),1.41-1.28(m,2H)。
酸41：3-((叔丁氧基羰基)氨基)双环[1.1.1]戊烷-1-甲酸
Figure BDA0002341655160000501
中间体36：甲基3-((叔丁氧基羰基)氨基)双环[1.1.1]戊烷-1-甲酸酯
在室温下向3-(甲氧基羰基)双环[1.1.1]戊烷-1-甲酸(1.00g，5.90mmol)在叔丁醇(10mL)中的溶液中添加二苯基磷酰基叠氮化物(1.60g，5.90mmol)和三乙胺(596mg，5.90mmol)。在氮气气氛下在105℃下搅拌24小时，然后冷却至室温后，将反应混合物减压浓缩，得到残余物，将其用乙酸乙酯(20mL)稀释。将混合物用饱和氯化铵水溶液(20mL)，饱和碳酸氢钠水溶液(20mL)和盐水(20mL)洗涤三次，然后经Na2SO4(s)干燥，过滤并浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝5:1)纯化，得到呈白色固体的标题化合物(0.91g，76％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝1.844min，C12H19NO4的计算质量241.1，m/z发现值242.2[M+H]+。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ4.96(br s,1H),3.70(s,3H),2.30(s,6H),1.46(s,9H)。
酸41：3-((叔丁氧基羰基)氨基)双环[1.1.1]戊烷-1-甲酸
向甲基3-((叔丁氧基羰基)氨基)双环[1.1.1]戊烷-1-甲酸酯中间体36(850mg，3.52mmol)在四氢呋喃(10mL)、甲醇(3mL)和水(3mL)中的溶液中，添加氢氧化锂一水合物(296mg，7.04mmol)。在室温下搅拌过夜后，将混合物倒入水(30mL)中，并用1M盐酸盐水溶液(8mL)将pH调节至3-4。将获得的水溶液用乙酸乙酯(20mL)萃取三次。将合并的有机层经Na2SO4(s)干燥，过滤并浓缩，得到呈白色固体的标题产物(720mg，90％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝0.661min，C11H17NO4的计算质量227.1，m/z发现值226.0[M-H]-。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.35(s,1H),7.58(s,1H),2.10(s,6H),1.37(s,9H)。
酸42：(cis)-5-(乙氧基羰基)四氢呋喃-3-甲酸
Figure BDA0002341655160000511
在室温下向5-(乙氧基羰基)呋喃-3-甲酸(7.00g，38mmol)在异丙醇(50mL)中的溶液中添加5％wt钌炭(1.40g)将混合物在氢气气氛(5.0MPa)下于100℃搅拌过夜。冷却至室温后，将悬浮液过滤并将滤液真空浓缩，得到呈无色油的所需产物(7.10g，粗品)。LC-MS(ESI)：RT＝0.710min，C8H12O5的计算质量188.1，m/z发现值187.1[M-H]-。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ9.15(br s,1H),4.55-4.50(m,1H),4.25-4.14(m,4H),3.25-3.15(m,1H),2.59-2.40(m,2H),1.29(t,J＝7.2Hz,3H)。
酸43：1,4-二氧杂螺[4.5]癸烷-7-甲酸
Figure BDA0002341655160000512
中间体37：乙基1,4-二氧杂螺[4.5]癸烷-7-甲酸酯
在室温下向乙基3-氧代环己烷甲酸酯(5.00g，29.4mmol)在甲苯(15mL)中的溶液中添加乙烷-1,2-二醇(6.38g，103mmol)和4-甲基苯磺酸水合物(67mg，0.353mmol)。在25℃搅拌20小时后，将反应混合物减压浓缩，并将残余物重新溶于乙酸乙酯(50mL)和水(60mL)中。将有机层分离，并且将水相用乙酸乙酯(150mL)萃取。将合并的有机层用饱和碳酸钠水溶液(100mL)、盐水(50mL)洗涤两次，经Na2SO4(s)干燥，过滤并减压浓缩，得到呈无色油的标题化合物(5.50g，87％产率)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ4.15-4.08(m,2H),3.94(s,4H),2.62-2.53(m,1H),2.04-1.34(m,8H),1.26-1.21(m,3H)。
酸43：1,4-二氧杂螺[4.5]癸烷-7-甲酸
在室温下向乙基1,4-二氧杂螺[4.5]癸烷-7-甲酸酯中间体37(2.00g，9.35mmol)在四氢呋喃(15mL)和甲醇(5mL)中的溶液中添加氢氧化锂一水合物(1.18g，28.1mmol)在水(5mL)中的溶液。在室温下在氮气气氛下搅拌过夜后，将反应混合物减压浓缩，用2M盐酸水溶液酸化直到pH＝3-4，并且用乙酸乙酯(20mL)萃取)两次。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤两次，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝8:1至3:1)纯化，得到呈白色固体的标题化合物(1.70g，98％产率)。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.12(s,1H),3.85-3.83(m,4H),2.41-2.33(m,1H),1.86-1.21(m,8H)。
酸44：(cis)-4-(((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)甲基)四氢呋喃-2-甲酸
Figure BDA0002341655160000521
中间体38：(cis)-乙基4-(羟基甲基)四氢呋喃-2-甲酸酯
在0℃向(cis)-5-(乙氧基羰基)四氢呋喃-3-甲酸42(4.50g，24.0mmol)在四氢呋喃(150mL)中的溶液中添加在四氢呋喃中的10M硼烷-甲基硫醚络合物(2.9mL，28.8mmol)。在室温下在氮气气氛下搅拌4小时后，将混合物用甲醇(30mL)淬灭并真空浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(二氯甲烷:甲醇＝100:1)，得到呈无色油的所需产物(3.77g，90％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝1.115min，C8H14O4的计算质量174.1，m/z发现值175.1[M+H]+。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ4.47-4.42(m,1H),4.24-4.12(m,2H),4.03-3.98(m,1H),3.87-3.83(m,1H),3.66-3.57(m,2H),2.58-2.37(m,2H),1.84-1.76(m,1H),1.29(t,J＝6.9Hz,3H)。
中间体39：(cis)-乙基4-(((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)甲基)-四氢呋喃-2-甲酸酯
向(cis)-乙基4-(羟甲基)四氢呋喃-2-甲酸酯38(3.77g，21.7mmol)、咪唑(2.95g，43.4mmol)和4-二甲基氨基吡啶(53mg，0.434mmol)在二氯甲烷(100mL)中的溶液中向添加叔丁基氯二苯基硅烷(8.95g，32.6mmol)。在室温下在氮气气氛下搅拌过夜后，将混合物在真空中浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝10:1)纯化，得到呈黄色油的所需产物(3.28g，37％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝2.901min，C24H32O4Si的计算质量412.2，m/z发现值430.2[M+NH4]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.73-7.65(m,4H),7.47-7.38(m,6H),4.46(t,J＝7.8Hz,1H),4.20(q,J＝7.2Hz,2H),4.07-4.02(m,1H),3.87(t,J＝7.8Hz,1H),3.65(d,J＝6.0Hz,2H),2.62-2.53(m,1H),2.43-2.33(m,1H),1.85-1.75(m,1H),1.28(t,J＝7.2Hz,3H),1.06(s,9H)。
酸44：(cis)-4-(((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)甲基)四氢呋喃-2-甲酸
在0℃向(cis)-乙基4-(((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)甲基)四氢呋喃-2-甲酸酯中间体39(3.28g，7.96mmol)在四氢呋喃(40mL)和水(5mL)中的溶液中添加氢氧化锂一水合物(504mg，12.0mmol)在水(5mL)中的溶液。在0℃下搅拌2小时后，将混合物倒入水(20mL)中，并用2M盐酸盐水溶液(6mL)将pH调节至5-6。将获得的水溶液用乙酸乙酯(30mL)萃取三次。浓缩合并的有机层，得到呈黄色油的所需产物(2.75g，90％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.66-7.63(m,4H),7.48-7.37(m,6H),4.52-4.47(m,1H),4.15-4.03(m,1H),3.92-3.87(m,1H),3.69-3.56(m,2H),2.63-2.55(m,1H),2.51-2.41(m,1H),1.92-1.83(m,1H),1.06(s,9H)。
酸45：4-(N,N-二甲基氨磺酰基)环己烷甲酸
Figure BDA0002341655160000531
中间体40：苄基4-(氯磺酰基)环己烷甲酸酯
在氮气气氛下在0℃下向苄基4-(乙酰基硫代)环己烷甲酸酯中间体26(1.70g，5.82mmol)在乙腈(30mL)中的溶液中添加2M盐酸盐水溶液(1mL)和1-氯吡咯烷-2,5-二酮(3.10g，23.3mmol)。在室温下搅拌1小时后，将混合物在室温下减压浓缩，得到残余物，将其用水(50mL)稀释并用乙酸乙酯(50mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤两次，经Na2SO4(s)干燥，过滤并减压浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝4:1)纯化，得到呈白色固体的标题化合物(2.80g，根据1H NMR的纯度为65％，66％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.40-7.33(m,5H),5.17(s,2H),3.56-3.48(m,1H),2.43-2.38(m,2H),2.29-2.24(m,2H),2.04-1.93(m,2H),1.69-1.57(m,3H)。
中间体41：苄基4-(N,N-二甲基氨磺酰基)环己烷甲酸酯
在氮气气氛下在0℃下向苄基4-(氯磺酰基)环己烷甲酸酯中间体40(1.40g，65％纯度，2.88mmol)在干四氢呋喃(20mL)中的溶液中添加在四氢呋喃中的2M二甲基胺(16mL，32mmol)。在室温搅拌过夜后，将混合物用水(50mL)淬灭，并用乙酸乙酯(50mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝2:1)纯化，得到呈白色固体的标题化合物(810mg，77％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.36-7.34(m,5H),5.16(s,0.9H),5.11(s,1.1H),3.02-2.95(m,1H),2.91(s,3.5H),2.87(s,2.5H),2.39-2.32(m,1.5H),2.19-2.17(m,2.5H),2.00-1.96(m,1H),1.81-1.71(m,1H),1.67-1.60(m,1H),1.55-1.43(m,2H)。
酸45：4-(N,N-二甲基氨磺酰基)环己烷甲酸
向苄基4-(N,N-二甲基氨磺酰基)环己烷甲酸酯中间体41(810mg，2.49mmol)在甲醇(20mL)中的溶液中添加10％wt钯炭(81mg)。在室温在气囊的氢气气氛下搅拌过夜后，将反应混合物过滤。将滤液减压浓缩，得到呈白色固体的标题化合物(500mg，85％产率)。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ3.04-2.96(m,1H),2.93-2.92(m,6H),2.37-2.31(m,1.5H),2.22-2.19(m,2.5H),2.02-1.98(m,1H),1.87-1.76(m,1H),1.68-1.47(m,3H)。
酸46：4-(N-异丙基氨磺酰基)环己烷甲酸
Figure BDA0002341655160000551
中间体42：苄基4-(N-异丙基氨磺酰基)环己烷甲酸酯
在氮气气氛下在0℃下向苄基4-(乙酰基硫代)环己烷甲酸酯中间体26(700mg，2.40mmol)在乙腈(12mL)中的溶液中添加2M盐酸盐水溶液(0.4mL)和1-氯吡咯烷-2,5-二酮(1.28g，9.60mmol)。在室温下搅拌1小时后，将混合物减压浓缩以在室温下得到残余物。将其用水(10mL)稀释，然后用乙酸乙酯(10mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤两次，经Na2SO4(s)干燥，过滤并减压浓缩，得到残余物，将其在干四氢呋喃(20mL)中稀释，然后将在四氢呋喃(6mL)中的2M异丙胺(709mg，12.0mmol)添加进入所得的溶液中，并在0℃搅拌4小时。将混合物减压浓缩，用水(10mL)淬灭，并用乙酸乙酯(10mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝4:1至2:1)纯化，得到呈白色固体的标题化合物(630mg，77％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.42-7.33(m,5H),5.16(s,0.7H),5.13(s,1.3H),3.88-3.73(m,1H),3.67-3.57(m,1H),2.91-2.78(m,1H),2.76-2.69(m,0.3H),2.42-2.18(m,4H),2.11-2.06(m,0.7H),1.84-1.70(m,0.7H),1.66-1.45(m,3.3H),1.26-1.21(m,6H)。
酸46：4-(N-异丙基氨磺酰基)环己烷甲酸
向苄基4-(N-异丙基氨磺酰基)环己烷甲酸酯(630mg，1.86mmol)在甲醇(20mL)中的溶液中添加10％wt钯炭(70mg)。在室温在气囊的氢气气氛下搅拌过夜后，将反应混合物过滤。将滤液减压浓缩，得到呈白色固体的标题化合物(440mg，95％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ4.10-3.99(m,1H),3.67-3.57(m,1H),2.91-2.79(m,1H),2.73-2.70(m,0.3H),2.37-2.19(m,4H),2.11-2.06(m,0.7H),1.84-1.73(m,0.7H),1.64-1.44(m,3.3H),1.25-1.22(m,6H)。
酸47：(cis)-4-((叔丁氧基羰基)氨基)四氢呋喃-2-甲酸
中间体43：乙基4-((叔丁氧基羰基)氨基)呋喃-2-甲酸酯
向5-(乙氧基羰基)呋喃-3-甲酸(4.00g，21.7mmol)在叔丁醇(100mL)中的溶液中添加三乙胺(2.40g，23.8mmol)和二苯基磷酰基叠氮化物(7.00g，25.5mmol)。在氮气气氛下在100℃搅拌24小时后，将其冷却至室温并减压浓缩，得到残余物，将其悬浮在乙酸乙酯(50mL)与饱和碳酸氢钠水溶液(50mL)中。将有机层分离，并且将水相用乙酸乙酯(50mL)萃取。将合并的有机层用饱和氯化铵水溶液(50mL)和盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥，并过滤。将滤液减压浓缩，得到粗产物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝20:1)纯化，得到呈淡黄色固体的所需产物(4.00g，73％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝2.179min，C12H17NO5的计算质量255.11，m/z发现值200.1[M+H-56]+。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.88(br s,1H),7.03(s,1H),6.35(br s,1H),4.36(q,J＝7.2Hz,2H),1.52(s,9H),1.38(t,J＝7.2Hz,3H)。
中间体44：(cis)-乙基4-((叔丁氧基羰基)氨基)四氢呋喃-2-甲酸酯
向乙基4-((叔丁氧基羰基)氨基)呋喃-2-甲酸酯中间体43(4.00g，15.7mmol)在异丙醇(80mL)中的溶液中添加5％wt钌/炭(200mg)。在氢气气氛(3Mpa)下于100℃搅拌过夜后，将反应混合物冷却至室温并通过硅藻土过滤。将滤饼用异丙醇(200mL)和甲醇(100mL)洗涤。将滤液浓缩，得到呈黑色固体的所需产物(4.00g，98.5％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝2.001min，C12H21NO5的计算质量259.14，m/z发现值160.1[M+H-100]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ6.97(br s,1H),4.41(t,J＝7.2Hz,1H),4.11(q,J＝7.2Hz,2H),4.03-3.94(m,1H),3.87(t,J＝6.9Hz,1H),3.54(t,J＝6.9Hz,1H),2.47-2.40(m,1H),1.91-1.82(m,1H),1.37(s,9H),1.20(t,J＝6.9Hz,3H)。
酸47：(cis)-4-((叔丁氧基羰基)氨基)四氢呋喃-2-甲酸
向(cis)-乙基4-((叔丁氧基羰基)氨基)四氢呋喃-2-甲酸酯中间体44(4.00g，15.4mmol)在乙醇(40mL)中的溶液中添加在水(10mL)中的氢氧化锂一水合物(970mg，23.1mmol)。在室温下搅拌2小时后，将溶液倒入水(100mL)中，并添加质子型阳离子交换树脂(Amberlyst 15离子交换树脂，3g)酸化至pH＝5-6。然后将树脂过滤并用乙腈(100mL)洗涤三次。将滤液浓缩，得到呈黄色固体的所需产物(3.60g，粗品)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.06-7.04(m,1H),4.28-4.24(m,1H),4.02-3.97(m,1H),3.84-3.80(m,1H),3.53-3.49(m,1H),2.42-2.35(m,1H),1.81-1.75(m,1H),1.37(s,9H)。
酸48：(cis)-4-(甲基氨甲酰基)四氢呋喃-2-甲酸
Figure BDA0002341655160000571
中间体45：(cis)-乙基4-(甲基氨甲酰基)四氢呋喃-2-甲酸酯
在氮气气氛下在-20℃下向(cis)-5-(乙氧基羰基)四氢呋喃-3-甲酸(2.50g，13.3mmol)和三乙胺(2.01g，20.0mmol)在二氯甲烷(60mL)中的溶液中添加氯甲酸乙酯(1.87g，17.3mmol)。在-20℃下搅拌10分钟后，在-20℃下添加在四氢呋喃中的2M甲胺(10mL，20.0mmol)，并将混合物在室温下搅拌3小时。然后将其浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(二氯甲烷:甲醇＝50:1)纯化，得到呈黄色油的标题化合物(1.70g，66％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝0.716min，C9H15NO4的计算质量201.1，m/z发现值202.1[M+H]+。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ6.23(br s,1H),4.50-4.45(m,1H),4.23(q,J＝6.9Hz,2H),4.12-4.00(m,2H),3.04-2.94(m,1H),2.80(s,1.5H),2.78(s,1.5H),2.60-2.49(m,1H),2.35-2.27(m,1H),1.29(t,J＝7.2Hz,3H)。
酸48：(cis)-4-(甲基氨甲酰基)四氢呋喃-2-甲酸
在室温下向(cis)-乙基4-(甲基氨基甲酰基)四氢呋喃-2-甲酸酯中间体45(1.07g，5.32mmol)在四氢呋喃(20mL)和水(5mL)中的溶液中添加氢氧化锂一水合物(300mg，7.14mmol)。在室温下在氮气气氛下搅拌2小时后，将混合物浓缩，得到残余物，将其用水(10mL)稀释。用2M盐酸盐水溶液(4mL)将水溶液的pH调节至5-6，并用乙酸乙酯(20mL)萃取三次。将合并的有机层浓缩，得到呈白色固体的所需产物(660mg，粗品)。LC-MS(ESI)：RT＝0.273min，C7H11NO4的计算质量173.1，m/z发现值174.1[M+H]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.99-7.95(m,1H),4.36-4.31(m,1H),3.97-3.90(m,1H),3.71-3.64(m,1H),2.95-2.89(m,1H),2.57(s,1.5H),2.55(s,1.5H),2.41-2.31(m,1H),2.11-2.01(m,1H)。
酸49：6-(叔丁氧基羰基)四氢-2H-吡喃-3-甲酸
Figure BDA0002341655160000581
中间体46：乙基2-羟基戊-4-烯酸酯
在0℃向乙基2-氧代乙酸酯(50.0g，490mmol)、烯丙基三甲基硅烷(100g，882mmol)在二氯甲烷(1L)中的溶液中滴加三氟化硼醚合(104g，735mmol)。在室温搅拌2小时后，添加饱和碳酸氢钠水溶液(1L)，然后将有机层分离，经Na2SO4(s)干燥，过滤并减压浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝5:1)纯化，得到呈黄色油的标题产物(41.0g，58％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ5.85-5.76(m,1H),5.18-5.13(m,2H),4.28-4.21(m,3H),2.91(d,J＝6.0Hz,1H),2.62-2.55(m,1H),2.48-2.41(m,1H),1.35-1.24(m,3H)。
中间体47：乙基2-((2-(乙氧基羰基)烯丙基)氧基)戊-4-烯酸酯
在0℃向乙基2-羟基戊-4-烯酸酯中间体46(41.0g，285mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(500mL)中的溶液中添加在矿物油中的60％wt氢化钠(13.7g，342mmol)。然后滴加乙基2-(溴甲基)丙烯酸酯(55.0g，285mmol)。在室温搅拌过夜后，添加水(500mL)，然后将有机层分离，经Na2SO4(s)干燥，过滤并减压浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝5:1)纯化，得到呈白色油的标题产物(16.0g，22％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.31(d,J＝1.2Hz,1H),5.94(d,J＝1.6Hz,1H),5.88-5.78(m,1H),5.16-5.08(m,2H),4.39(d,J＝13.6Hz,1H),4.22(q,J＝7.2Hz,4H),4.14(d,J＝14.0Hz,1H),4.01(t,J＝6.4Hz,1H),2.56-2.52(m,2H),1.32-1.27(m,6H)。
中间体48：二乙基3,6-二氢-2H-吡喃-2,5-二甲酸酯
在室温下向乙基2-((2-(乙氧基羰基)烯丙基)氧基)戊-4-烯酸酯中间体47(15.0g，58.6mmol)在二氯甲烷(6L)中的溶液中添加GrubbsII催化剂(4.90g，5.86mmol)。在室温搅拌过夜后，添加水(3L)，然后将有机层分离，经Na2SO4(s)干燥，过滤并减压浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝5:1)纯化，得到呈白色油的标题产物(8.9g，66％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.05-7.03(m,1H),4.64(dd,J＝16.8,1.6Hz,1H),4.37(dd,J＝16.8,2.4Hz,1H),4.29-4.15(m,5H),2.56-2.54(m,2H),1.33-1.26(m,6H)。
中间体49：5-(乙氧基羰基)-3,6-二氢-2H-吡喃-2-甲酸锂
向二乙基3,6-二氢-2H-吡喃-2,5-二甲酸酯中间体48(8.90g，39.0mmol)在四氢呋喃(160mL)中的溶液中添加氢氧化锂水合物(1.50g，35.1mmol)在水(40mL)中的溶液。将反应混合物在室温搅拌2小时。添加水(200mL)和乙酸乙酯(200mL)后，将水相分离并减压浓缩，得到呈白色固体的标题产物(6.4g，80％产率)，其无需进一步纯化即可直接用于下一步。LC-MS(ESI)：RT＝0.323min，C9H11LiO5的计算质量206.1，m/z发现值199.1[M-Li]-。
中间体50：2-苄基5-乙基3,6-二氢-2H-吡喃-2,5-二甲酸酯
向5-(乙氧基羰基)-3,6-二氢-2H-吡喃-2-甲酸锂中间体49(6.40g，31.0mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(100mL)中的溶液中添加苄基溴(15.9g，93.0mmol)。在25℃下搅拌过夜后，将混合物减压浓缩，得到残余物，将所述通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝5:1)纯化，得到产物，将所述产物进一步通过C18柱(乙腈:水＝10％至95％)纯化，得到呈白色固体的标题化合物(6.4g，71％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.36(br s,5H),7.02(s,1H),5.23(s,2H),4.64(dd,J＝16.4,1.2Hz,1H),4.36(dd,J＝16.8,2.4Hz,1H),4.23-4.18(m,3H),2.56-2.55(m,2H),1.29(t,J＝6.8Hz,3H)。
中间体51：5-(乙氧基羰基)四氢-2H-吡喃-2-甲酸
向2-苄基5-乙基3,6-二氢-2H-吡喃-2,5-二甲酸酯中间体50(6.40g，22.1mmol)在四氢呋喃(200mL)中的溶液中添加10％wt钯炭(1.30g)。将反应混合物在室温在氢气气氛下搅拌过夜。将完成的反应混合物过滤，将滤液浓缩，得到呈白色油的标题化合物(4.40g，98％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝0.313min，C9H14O5的计算质量202.1，m/z发现值201.1[M-H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.68(br s,1H),4.40(dd,J＝11.2,2.4Hz,0.7H),4.31(d,J＝8.8Hz,0.3H),4.23-4.13(m,2.7H),3.99(d,J＝9.2Hz,0.3H),3.79(dd,J＝11.6,3.2Hz,0.8H),3.56(t,J＝11.2Hz,0.2H),2.64(t,J＝11.6Hz,0.3H),2.55(t,J＝4.0Hz,0.7H),2.35-2.14(m,1.5H),1.98-1.96(m,1H),1.88-1.82(m,1H),1.78-1.64(m,0.5H),1.27(t,J＝6.8Hz,3H)。
中间体52：2-叔丁基5-乙基四氢-2H-吡喃-2,5-二甲酸酯
在室温下向5-(乙氧基羰基)四氢-2H-吡喃-2-甲酸中间体51(2.80g，13.9mmol)、二碳酸二叔丁酯(5.99g，27.8mmol)在叔丁醇(20mL)中的溶液中添加4-二甲基氨基吡啶(169mg，1.39mmol)。在40℃下搅拌过夜后，将混合物冷却至室温。将混合物减压浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝10:1)纯化，得到呈黄色油的标题产物(3.10g，86％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ4.31(dd,J＝11.6,5.6Hz,1H),4.18-4.12(m,2H),4.01(dd,J＝7.6,3.6Hz,0.8H),3.82-3.76(m,1H),3.50(t,J＝11.6Hz,0.2H),2.63(t,J＝11.6Hz,0.3H),2.52(t,J＝3.6Hz,0.7H),2.22-2.18(m,0.4H),2.07-2.05(m,0.6H),2.03-1.95(m,1H),1.85-1.83(m,1H),1.75-1.71(m,0.4H),1.64-1.58(m,0.6H),1.48(s,9H),1.27(t,J＝7.2Hz,3H)。
酸49：6-(叔丁氧基羰基)四氢-2H-吡喃-3-甲酸
向2-叔丁基2-叔丁基5-乙基四氢-2H-吡喃-2,5-二甲酸酯中间体52(4.00g，15.5mmol)在甲醇(80mL)和水(20mL)中的溶液中添加氢氧化钡八水合物(2.40g，7.75mmol)。在25℃下搅拌过夜后，将混合物减压浓缩，得到残余物，并添加水(50mL)和乙酸乙酯(200mL)。向分离的水相中添加大孔树脂(amberlyst)15铁交换树脂(约200g)，并用乙酸乙酯(200mL)萃取三次。将分离的有机层经Na2SO4(s)干燥，过滤并减压浓缩，得到残余物，其无需进一步纯化即可直接用于下一步。LC-MS(ESI)：RT＝0.29min，C11H18O5的计算质量230.1，m/z发现值229.2[M-H]-。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.41(br s,1H),4.08--3.97(m,2H)，3.84--3.79(m,0.3H),3.68--3.60(m,0.7H),2.50--2.41(m,1H),2.04--1.99(m,1H),1.91--1.83(m,1H),1.78--1.72(m,2H),1.41(s,9H)。
酸50：5-氧代-1-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-吡咯烷-3-甲酸
Figure BDA0002341655160000601
中间体53：甲基5-氧代-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)吡咯烷-3-甲酸酯
在0℃向甲基5-氧代吡咯烷-3-甲酸酯(1.0g，7.0mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(20mL)中的溶液中添加在矿物油中的60％wt氢化钠(336mg，8.4mmol)。在0℃下搅拌30分钟后，缓慢添加(2-(氯甲氧基)乙基)三甲基硅烷(1.40g，8.4mmol)，并将混合物在0℃下在氮气气氛下搅拌3小时。然后将其倒入冰水(50mL)中，并用乙酸乙酯(30mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤两次，经Na2SO4(s)干燥，过滤并减压浓缩，得到残留物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝2:1)纯化，得到呈无色油的标题化合物(786mg，41％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ4.73(s,2H),3.76(s,3H),3.72-3.69(m,2H),3.50(t,J＝9.0Hz,2H),3.30-3.21(m,1H),2.82-2.64(m,2H),0.92(t,J＝8.4Hz,2H),0.01(s,9H)。
酸50：5-氧代-1-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-吡咯烷-3-甲酸
在氮气气氛下，向甲基5-氧代-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)吡咯烷-3-甲酸酯中间体53(500mg，1.83mmol)在甲醇(1mL)、四氢呋喃(3mL)和水(1mL)中的溶液中添加氢氧化锂一水合物(154mg，3.66mmol)。在室温下搅拌1小时后，将混合物浓缩，得到残余物，将其用水(10mL)稀释，并用饱和柠檬酸水溶液酸化至pH 5～6，用乙酸乙酯(50mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤两次，经Na2SO4(s)干燥，过滤并减压浓缩，得到呈无色油的标题化合物(470mg，99％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ4.75(s,2H),3.79-3.73(m,2H),3.52(t,J＝8.4Hz,2H),3.36-3.25(m,1H),2.85-2.75(m,2H),0.93(t,J＝8.1Hz,2H),0.01(s,9H)。
酸51：4-(N-(2-乙氧基-2-氧代乙基)氨磺酰基)环己烷甲酸
Figure BDA0002341655160000611
中间体54：苄基4-(N-(2-乙氧基-2-氧代乙基)氨磺酰基)-环己烷甲酸酯
在0℃向苄基4-(乙酰基硫代)环己烷甲酸酯(2.92g，10.0mmol)在乙腈(30mL)中的溶液中添加2M盐酸盐水溶液(1.25mL，2.5mmol)和1-氯吡咯烷-2,5-二酮(5.30g，40.0mmol)。在0℃下搅拌1小时后，将混合物用水(100mL)淬灭，并用乙醚(100mL)萃取两次。将合并的有机层经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液在30℃下减压浓缩，得到残余物，将其溶于干二氯甲烷(20mL)中。向上述溶液中添加乙基2-氨基乙酸酯盐酸盐(4.20g，30.0mmol)和三乙胺(5.05g，50.0mmol)。在25℃下搅拌1小时后，将混合物浓缩并用二氯甲烷(150mL)稀释。将所得溶液用1M盐酸盐水溶液(100mL)和盐水(100mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝4:1至2:1)纯化，得到呈浅黄色油的标题化合物(1.40g，88％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝1.64min，C18H25NO6S的计算质量383.1，m/z发现值384.4[M+H]+。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.42-7.31(m,5H),5.15(d,J＝12.3Hz,2H),4.71-4.62(m,1H),4.25(q,J＝7.2Hz,2H),3.91(dd,J＝13.5,5.7Hz,2H),3.00-2.87(m,1H),2.75-2.69(m,0.5H),2.41-2.31(m,2.5H),2.23-2.16(m,1H),2.13-2.08(m,1H),1.84-1.67(m,2H),1.56-1.49(m,2H),1.33-1.27(m,3H)。
酸51：4-(N-(2-乙氧基-2-氧代乙基)氨磺酰基)环己烷甲酸
向苄基4-(N-(2-乙氧基-2-氧代乙基)氨磺酰基)环己烷甲酸酯中间体54(1.40g，3.65mmol)在甲醇(20mL)中的溶液中添加10％wt钯炭(300mg)。在25℃在气囊的氢气气氛下搅拌过夜后，将混合物过滤并将滤液浓缩，得到呈白色固体的标题化合物(1.00g，94％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ4.91-4.78(m,1H),4.27-4.24(m,2H),3.94(s,2H),3.01-2.90(m,1H),2.72-2.70(m,0.5H),2.38-2.33(m,2H),2.25-2.11(m,2H),1.84-1.48(m,.3.5H),1.33-1.28(m,3H)。
酸52：(R)-4-((3-(甲氧基羰基)吡咯烷-1-基)磺酰基)-环己烷甲酸
Figure BDA0002341655160000621
中间体55：(R)-甲基1-((4-((苄基氧基)羰基)环己基)磺酰基)-吡咯烷-3-甲酸酯
在0℃向苄基4-(氯磺酰基)环己烷甲酸酯(2.2g，6.94mmol)和三乙胺(2.10g，20.8mmol)在二氯甲烷(30mL)中的溶液中添加(R)-甲基吡咯烷-3-甲酸酯盐酸盐(1.50g，9.03mmol)。在室温下搅拌16小时后，将混合物用水(30mL)洗涤两次，然后用盐水(30mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝8:1至3:1)纯化，得到呈无色油的标题化合物(2.30g，82％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.42-7.28(m,5H),5.16(s,1H),5.11(s,1H),3.72(s,3H),3.69-3.62(m,1H),3.59-3.40(m,3H),3.17-3.05(m,1H),3.02-2.89(m,1H),2.73-2.65(m,0.5H),2.42-2.29(m,1.5H),2.27-2.11(m,4H),2.08-1.94(m,1H),1.84-1.71(m,1H),1.60-1.42(m,3H)。
酸52：(R)-4-((3-(甲氧基羰基)吡咯烷-1-基)磺酰基)-环己烷甲酸
在室温下向(R)-甲基1-((4-((苄氧基)羰基)环己基)磺酰基)吡咯烷-3-甲酸酯中间体55(2.30g，5.62mmol)在甲醇(80mL)中的溶液中添加10％wt钯活性炭(595mg，0.562mmol)。在室温在氢气气氛(1atm)下搅拌过夜后，将混合物通过硅藻土垫过滤。将滤液减压浓缩，得到呈白色固体的标题化合物(1.79g，99％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ3.73(s,3H),3.71-3.66(m,1H),3.62-3.43(m,3H),3.19-3.08(m,1H),3.05-2.90(m,1H),2.75-2.67(m,0.5H),2.40-2.28(m,1.5H),2.27-2.15(m,4H),2.10-1.98(m,1H),1.90-1.74(m,1H),1.71-1.44(m,3H)。
酸53：3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)环丁烷甲酸
Figure BDA0002341655160000631
中间体56：甲基3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)环丁烷甲酸酯
在0℃将叔丁基氯二苯基硅烷(8.66g，31.5mmol)缓慢添加到甲基3-羟基环丁烷甲酸酯(3.90g，30.0mmol)和1H-咪唑(2.45g，36.0mmol)在四氢呋喃(50mL)中的溶液中。在室温搅拌16小时后，将混合物用饱和碳酸氢钠水溶液(150mL)洗涤，然后用盐水(150mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥，过滤并浓缩，得到呈无色油的标题化合物(10.5g，95％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝1.87min，C22H28O3Si的计算质量368.2，m/z发现值369.4[M+H]+。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.67-7.65(m,4H),7.44-7.28(m,6H),4.15-4.10(m,1H),3.68(s,3H),2.37-2.34(m,5H),1.04(s,9H)。
酸53：3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)环丁烷甲酸
在氮气气氛下在0℃向甲基3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)环丁烷甲酸酯中间体56(3.50g，9.50mmol)在四氢呋喃(12mL)、甲醇(4mL)和水(4mL)中的溶液中添加氢氧化锂一水合物(798mg，19.0mmol)。在室温下搅拌4小时后，将混合物用水(150mL)稀释，在室温下减压浓缩，用1M盐酸水溶液(20mL)酸化，然后用乙酸乙酯(150mL)萃取。将有机层用盐水(150mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到呈无色油状的粗标题化合物(3.10g，87％产率)，其无需进一步纯化即可直接使用。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.68-7.66(m,4H),7.45-7.37(m,6H),4.16-4.13(m,1H),2.44-2.37(m,5H),1.05(s,9H)。
酸54：4-(N-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)甲基磺酰胺基)-环己烷甲酸
Figure BDA0002341655160000641
中间体54a：苄基4-((2-羟基乙基)氨基)环己烷甲酸酯
在氮气气氛下在0℃向苄基4-氧代环己烷甲酸酯(4.80g，20.7mmol)和2-氨基乙醇(12.6g，210mmol)在甲醇(40mL)中的溶液中添加氰基硼氢化钠(2.60g，41.4mmol)。在室温搅拌过夜后，将混合物减压浓缩，得到残余物，将其溶于二氯甲烷(50mL)中，用水(20mL)洗涤两次，然后用盐水(20mL)洗涤两次，经Na2SO4(s)干燥并进行过滤。将滤液减压浓缩，得到呈黄色油的标题化合物(5.40g，93％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.38-7.31(m,5H),5.11-5.08(m,2H),4.69-4.62(m,0.5H),4.45-4.31(m,0.5H),3.50-3.46(m,1H),3.44-3.40(m,2H),2.62-2.53(m,2H),2.39-2.26(m,1H),2.11-1.82(m,4H),1.66-1.49(m,2H),1.45-1.31(m,2H),1.06-0.96(m,1H)。
中间体54b：苄基4-((2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)氨基)-环己烷甲酸酯
在氮气气氛下在0℃向苄基4-((2-羟乙基)氨基)苄基甲酸酯中间体54a(5.40g，19.5mmol)在二氯甲烷(50mL)中的溶液中添加N,N-二异丙基乙胺(3.80g，29.3mmol)和叔丁基二甲基甲硅烷基氯(3.60g，23.4mmol)。在室温下搅拌24小时后，将混合物减压浓缩，得到残余物，将其溶于二氯甲烷(50mL)中。将溶液用水(20mL)洗涤两次，然后用盐水(20mL)洗涤两次，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到呈黄色油的标题化合物(6.27g，70％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.35-7.31(m,5H),5.27(br s,0.3H),5.10-5.07(m,1.7H),3.65-3.58(m,1.5H),3.50-3.44(m,1.5H),2.64-2.55(m,2H),2.45-2.24(m,1H),2.11-1.83(m,4H),1.57-1.24(m,3.5H),1.08-0.84(m,1.5H),0.86(s,9H),0.03(s,6H)。
中间体54c：苄基4-(N-(2-(叔丁基二甲基甲硅烷基)乙基)-甲基磺酰胺基)环己烷甲酸酯
在氮气气氛下在0℃向苄基4-((2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)氨基)环己烷甲酸酯中间体54b(6.27g，16.0mmol)在四氢呋喃(50mL)中的溶液中添加三乙胺(4.85g，48.0mmol)和甲磺酰氯(2.21g，19.0mmol)。在室温搅拌2小时后，将混合物减压浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝5:1)纯化，得到呈黄色油的标题化合物(3.80g，51％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.37-7.32(m,5H),5.13(s,.0.8H),5.08(s,1.2H),3.66-3.48(m,3H),3.17-3.12(m,1H),3.05-3.00(m,0.5H),2.93(s,3H),2.74-2.69(m,0.5H),2.40-2.30(m,0.7H),2.13-2.08(m,1H),1.99-1.94(m,1.3H),1.83-1.72(m,1.5H),1.62-1.42(m,4.5H),0.87(s,9H),0.05-0.04(m,6H)。
酸54：4-(N-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)甲基磺酰胺基)-环己烷甲酸
向苄基4-(N-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-甲基磺酰胺基)环己烷甲酸酯中间体54c(1.35g，2.87mmol)在甲醇(20mL)中的溶液中添加10％wt钯炭(200mg)。在室温在气囊的氢气气氛下搅拌过夜后，将反应混合物过滤。将滤液减压浓缩，得到呈白色固体的标题化合物(900mg，82％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ3.75-3.70(m,2H),3.63-3.57(m,1H),3.25-3.18(m,1.5H),2.89-2.88(s,3H),2.65-2.62(m,0.5H),2.29-2.09(m,3H),1.90-1.88(m,1H),1.72-1.52(m,5H),0.91-0.88(m,9H),0.07(s,6H)。
酸55：4-(N-(2-甲氧基乙基)氨磺酰基)环己烷甲酸
Figure BDA0002341655160000651
中间体55a：苄基4-(N-(2-乙氧基乙基)氨磺酰基)环己烷甲酸酯
在0℃向苄基4-(乙酰基硫代)环己烷甲酸酯中间体26(1.0g，3.42mmol)在乙腈(25mL)中的溶液中添加2M盐酸盐水溶液(0.5mL，1.0mmol)和1-氯吡咯烷-2,5-二酮(1.83g，13.7mmol)。在0℃下搅拌1小时后，将混合物用水(50mL)淬灭，浓缩并用乙醚(50mL)萃取两次。将合并的有机层经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液在30℃下减压浓缩，得到残余物，将其溶于无水二氯甲烷(35mL)中。向上述溶液中添加2-甲氧基乙胺(1.54g，20.6mmol)。在室温下搅拌过夜后，将所得溶液用1M盐酸盐水溶液(30mL)和盐水(30mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯)＝10:1至5:1)纯化，得到呈浅色黄色油的标题化合物(1.35g，92％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝1.262min，C17H25NO5S的计算质量355.2，m/z发现值356.1[M+H]+。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.42-7.33(m,5H),5.16-5.13(m,2H),4.59-4.48(m,1H),3.51-3.46(m,2H),3.37(s,3H),3.32-3.23(m,2H),2.98-2.85(m,1H),2.72(br s,0.4H),2.39-2.18(m,3.6H),2.08-2.04(m,1H),1.83-1.74(m,1H),1.63-1.43(m,3H)。
酸55：4-(N-(2-甲氧基乙基)氨磺酰基)环己烷甲酸
向苄基4-(N-(2-甲氧基乙基)氨磺酰基)环己烷甲酸酯中间体55a(1.35g，3.79mmol)在甲醇(50mL)中的溶液中添加10％wt钯炭(300mg)。在25℃在气囊的氢气气氛下搅拌过夜后，将混合物过滤并将滤液浓缩，得到呈白色固体的标题化合物(970mg，97％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ4.74-4.68(m,0.5H),4.65-4.61(m,0.5H),3.53-3.49(m,2H),3.38(s,3H),3.34-3.30(m,2H),3.00-2.87(m,1H),2.72(br s,0.5H),2.39-2.07(m,4.5H),1.85-1.73(m,1H),1.65-1.47(m,3H)。
酸56：4-(N-(3-(叔丁氧基)-2,2-二甲基-3-氧代丙基)氨磺酰基)-环己烷甲酸
Figure BDA0002341655160000661
中间体56a：苄基4-(N-(3-(叔丁氧基)-2,2-二甲基-3-氧代丙基)氨磺酰基)环己烷甲酸酯
在0℃向叔丁基3-氨基-2,2-二甲基丙酸酯盐酸盐(710mg，3.40mmol)在二氯甲烷(15mL)中的溶液中添加三乙胺(1.70g，17.0mmol)。在0℃下搅拌20分钟后，添加苄基4-(氯磺酰基)环己烷甲酸酯(1.06g，3.40mmol)在二氯甲烷(15mL)中的溶液。将获得的混合物在室温搅拌过夜。之后，将其减压浓缩，得到残余物，将所述残余物溶于乙酸乙酯(10mL)中，用水(8mL)洗涤两次，用盐水(8mL)洗涤两次，经Na2SO4(s)干燥，过滤并减压浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝15:1至8:1)纯化，得到呈黄色油的所需的化合物(700mg，46％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.36(br s,5H),5.17(s,0.7H),5.13(s,1.3H),4.91-4.80(m,1H),4.18-4.09(m,0.7H),3.11-3.07(m,2H),2.95-2.83(m,1H),2.76-2.68(m,0.3H),2.42-2.28(m,2H),2.26-2.17(m,2H),2.09-2.01(m,1.4H),1.89-1.71(m,0.6H),1.46(s,9H),1.39-1.24(m,2H),1.21(s,6H)。
酸56：4-(N-(3-(叔丁氧基)-2,2-二甲基-3-氧代丙基)氨磺酰基)-环己烷甲酸
向苄基4-(N-(3-(叔丁氧基)-2,2-二甲基-3-氧代丙基)氨磺酰基)环己烷甲酸酯中间体56a(700mg，1.54mmol)在甲醇(20mL)中的溶液中添加10％wt钯炭(240mg)。将反应混合物在氢气气氛气囊下在50℃下搅拌过夜。冷却至室温后，将混合物过滤并将滤液浓缩，得到呈白色固体的化合物(640mg，80％纯度，91％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ6.98-6.93(m,1H),3.04-3.00(m,2H),2.96-2.89(m,1H),2.55-2.54(m,0.3H),2.20-2.14(m,0.7H),2.09-2.04(m,2H),2.00-1.97(m,1.4H),1.87-1.84(m,0.6H),1.59-1.45(m,2H),1.39(s,9H),1.36-1.24(m,2H),1.05(s,6H)。
酸57R和57S：5-(乙氧基羰基)四氢-2H-吡喃-2-甲酸
Figure BDA0002341655160000671
中间体57R-A和57S-A：2-苄基5-乙基3,6-二氢-2H-吡喃-2,5-二甲酸酯
将(3.36g，11.6mmol)的外消旋混合物通过手性制备型HPLC分离(柱：ChiralpakIF 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH＝60:40，以10mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到标题化合物57R-A(1.37g，41％产率)和57S-A(1.34g，40％产率)。
酸57R：5-(乙氧基羰基)四氢-2H-吡喃-2-甲酸
向2-苄基5-乙基3,6-二氢-2H-吡喃-2,5-二甲酸酯57R-A(610mg，2.10mmol)在四氢呋喃(30mL)中的溶液中添加10％wt钯炭(180mg)。将反应混合物在室温在气囊的氢气气氛下搅拌过夜。然后将反应混合物过滤并浓缩，得到呈白色固体的标题化合物(456mg，粗品)。LC-MS(ESI)：无RT，C9H14O5的计算质量202.1，m/z发现值203.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.69(br s,1H),4.13-4.02(m,3H),3.88(dd,J＝11.6,2.8Hz,0.6H),3.67(dd,J＝11.6,3.6Hz,1H),3.45-3.40(m,0.4H),2.59-2.53(m,1H),2.06-2.01(m,0.2H),1.99-1.92(m,0.8H),1.88-1.82(m,3H),1.21-1.16(m,3H)。
酸57S：5-(乙氧基羰基)四氢-2H-吡喃-2-甲酸
酸57S类似于酸57R从中间体57S-A制备，LC-MS(ESI)：无RT，C9H14O5的计算质量202.1，m/z发现值203.1[M+H]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.72(br s,1H),4.15-4.03(m,3.6H),3.88(dd,J＝8.1,1.8Hz,0.3H),3.67(dd,J＝8.7,2.4Hz,0.7H),3.43(t,J＝8.1Hz,0.4H),2.59-2.54(m,1H),2.05-2.00(m,0.3H),1.91-1.88(m,1H),1.80-1.44(m,2.7H),1.21-1.16(m,3H)。
酸58：(trans)-1-(叔丁氧基羰基)-2-(((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)甲基)-哌啶-4-甲酸
Figure BDA0002341655160000681
中间体58a：叔丁基4-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)哌啶-1-甲酸酯
向叔丁基4-(羟甲基)哌啶-1-甲酸酯(20.0g，93.0mmol)在二氯甲烷(200mL)中的溶液中添加叔丁基氯二甲基硅烷(20.9g，139mmol)、咪唑(12.7g，186mmol)和4-二甲基氨基吡啶(227mg，1.86mmol)。在室温下在氮气气氛下搅拌过夜后，将混合物用水(50mL)淬灭，并用二氯甲烷(100mL)萃取两次。将合并的有机层用盐水(250mL)洗涤两次，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝20:1)纯化，得到呈无色油的标题化合物(22.5g，74％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝2.521min，C17H35NO3Si的计算质量329.2，m/z发现值274.2[M+H-56]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ4.13-4.08(m,2H),3.42(d,J＝6.4Hz,2H),2.69-2.64(m,2H),1.68-1.64(m,2H),1.62-1.53(m,1H),1.44(s,9H),1.13-1.03(m,2H),0.87(s,7H),0.85(s,2H),0.02(s,5H),0.01(s,1H)。
中间体58b：(trans)-叔丁基4-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-2-甲酰基哌啶-1-甲酸酯
向叔丁基4-(((叔丁基-丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)哌啶-1-甲酸酯中间体58a(15.0g，45.6mmol)在无水四氢呋喃(150mL)中的溶液中添加四甲基乙二胺(75.6g，68.0mmol)。在-78℃下搅拌1小时后，在氮气气氛下在-78℃下添加在四氢呋喃中的1.3M仲丁基锂(52.5mL，68.0mmol)。搅拌1小时后，在-78℃下添加N,N-二甲基甲酰胺(5.25mL，68.0mmol)在无水四氢呋喃(20mL)中的溶液。将所得混合物在-78℃下搅拌2小时。然后将其升至室温，并用饱和氯化铵水溶液(100mL)淬灭，用乙酸乙酯(200mL)萃取两次。将合并的有机层用盐水(400mL)洗涤三次，经无水Na2SO4(s)干燥并浓缩，得到粗化合物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝30:1)纯化，得到呈无色油的标题化合物(7.47g，40％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝2.294min，C18H35NO4Si的计算质量357.2，m/z发现值302.2[M+H-56]+。1HNMR(300MHz,CDCl3)δ9.62-9.59(m,0.8H),9.45-9.43(m,0.2H),4.89-4.84(m,0.4H),4.67-4.63(m,0.3H),4.23-4.04(m,1H),3.87-3.62(m,0.3H),3.48-3.41(m,2H),2.91-2.69(m,1H),2.32-2.24(m,0.8H),1.89-1.82(m,0.2H),1.71-1.64(m,2H),1.49(s,3H),1.46(s,6H),1.36-1.24(m,1H),1.17-1.05(m,1H),0.89-0.88(m,9H),0.04(s,6H)。
中间体58c：(trans)-叔丁基4-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-2-(羟基甲基)哌啶-1-甲酸酯
向(trans)-叔丁基4-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-2-甲酰基哌啶-1-甲酸基中间体58b(7.47g，21.0mmol)在无水四氢呋喃(100mL)中的溶液中添加硼氢化钠(2.38g，63.0mmol)。在室温下在氮气气氛下搅拌过夜后，将反应混合物用水(50mL)淬灭，并用乙酸乙酯(100mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(200mL)洗涤三次，经无水Na2SO4(s)干燥并浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝3:1)纯化，得到呈无色油的标题化合物(6.49g，86％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ4.64-4.60(m,1H),4.03-3.98(m,1H),3.87-3.77(m,1H),3.43-3.38(m,2H),3.35-3.32(m,1H),2.81-2.64(m,1H),1.78-1.67(m,2H),1.62-1.52(m,1H),1.36(s,9H),1.07-0.99(m,1H),0.99-0.89(m,1H),0.84(s,9H),0.00(s,6H)。
中间体58d：(trans)-叔丁基4-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-2-(((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)甲基)哌啶-1-甲酸酯
向(trans)-叔丁基4-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-2-(羟甲基)哌啶-1-甲酸酯中间体58c(6.49g，18.0mmol)在二氯甲烷(200mL)中的溶液中添加叔丁基氯二苯基硅烷(7.46g，27.0mmol)、咪唑(2.46g，36.0mmol)和4-二甲基氨基吡啶(44mg，0.36mmol)。在室温下在氮气气氛下搅拌过夜后，将反应混合物用水(100mL)淬灭，并用二氯甲烷(50mL)萃取两次。将合并的有机层用盐水(150mL)洗涤两次，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝30:1)纯化，得到呈无色油的标题化合物(9.39g，87％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝5.380min，C34H55NO4Si2的计算质量597.4，m/z发现值498.3[M+H-Boc]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.68-7.65(m,2H),7.61-7.59(m,3H),7.45-7.35(m,5H),4.35-4.21(m,1H),3.88-3.79(m,1H),3.70-3.51(m,3H),3.43-3.39(m,1H),2.69-2.57(m,1H),2.03-2.00(m,0.5H),1.89-1.86(m,0.5H),1.68(br s,1H),1.57-1.54(m,1H),1.35(s,3H),1.29(s,6H),1.13-1.07(m,2H),0.96(s,6H),0.93(s,3H),0.83(s,9H),0.00(s,6H)。
中间体58e：(trans)-叔丁基2-(((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)甲基)-4-(羟基甲基)哌啶-1-甲酸酯
向(trans)-叔丁基4-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-2-(((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)甲基)哌啶-1-甲酸酯中间体58d(9.39g，15.7mmol)在乙醇(80mL)中的溶液中添加4-甲苯磺酸吡啶鎓(1.15g，4.00mmol)。在氮气气氛下于50℃搅拌过夜后，将混合物冷却至室温，并减压浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱(石油醚:乙酸乙酯＝5:1)纯化，得到呈无色油的标题化合物(5.40g，71％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝2.173min，C28H41NO4Si的计算质量483.3，m/z发现值384.3[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.66(br s,4H),7.43-7.37(m,6H),4.59-4.56(m,0.5H),4.37-4.36(m,0.5H),4.15-4.07(m,0.5H),3.96-3.90(m,0.5H),3.72-3.61(m,2H),3.48-3.35(m,2H),2.71-2.60(m,1H),2.05-1.97(m,0.5H),1.86-1.84(m,0.5H),1.74-1.64(m,1H),1.60-1.52(m,1H),1.42(s,9H),1.37-1.17(m,2H),1.05(s,9H)。
酸58：(trans)-1-(叔丁氧基羰基)-2-(((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)-甲基)哌啶-4-甲酸
向(trans)-叔丁基2-(((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)甲基)-4-(羟甲基)哌啶-1-甲酸酯中间体58e(4.00g，8.30mmol)在二氯甲烷(30mL)中的溶液中添加戴斯-马丁高碘烷(10.4g，24.8mmol)在室温下在氮气气氛下搅拌过夜后，将溶液用饱和亚硫酸钠(250mL)淬灭，并用二氯甲烷(100mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(150mL)洗涤两次，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到残余物，将其通过C18柱(乙腈:水＝50％至95％)纯化，得到呈浅黄色油的标题化合物(3.07g，75％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝2.428min，C28H39NO5Si的计算质量497.3，m/z发现值398.2[M+H-Boc]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.25(s,1H),7.63-7.61(m,4H),7.48-7.41(m,6H),4.41-4.29(m,1H),3.93-3.83(m,1H),3.74-3.62(m,2H),3.32(s,1H),2.78-2.63(m,1H),2.16-2.00(m,1H),1.83-1.76(m,1H),1.55-1.46(1,1H),1.33(s,9H),1.28-1.19(m,1H),0.99(s,9H)。
酸59：(trans)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)环己烷甲酸
Figure BDA0002341655160000711
中间体59a：(trans)-甲基4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-环己烷甲酸酯
在氮气气氛下在0℃下向(trans)-甲基4-羟基环己烷甲酸酯(865mg，6.00mmol)和咪唑(1.02g，15.0mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中的混合物中添加叔丁基氯二甲基硅烷(1.09g，7.20mmol)。将反应混合物在室温搅拌过夜，然后倒入水(30mL)中，并用乙酸乙酯(30mL)萃取三次。将合并的有机层用水(30mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥并浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝100:1至20:1)纯化，得到呈无色油的标题化合物(1.34g，86％产率)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ3.58-3.51(m,4H),2.24-2.17(m,1H),1.91-1.81(m,4H),1.45-1.36(m,2H),1.29-1.20(m,2H),0.82(s,9H),0.01(s,6H)。
酸59：(trans)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)环己烷甲酸
在氮气气氛下向(trans)-甲基4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)环己烷甲酸酯
中间体59a(681mg，2.50mmol)在甲醇(6mL)和水(1.5mL)中的溶液中添加氢氧化锂一水合物(210mg，5.00mmol)。在室温搅拌过夜后，将溶剂除去，并将残余物用水(10mL)稀释，用1M盐酸盐水溶液酸化至pH 2，然后过滤。将固体用水(10mL)洗涤，并在真空中干燥，得到呈白色固体的标题化合物(510mg，79％产率)。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ3.64-3.59(m,1H),2.24-2.19(m,1H),2.03-1.86(m,4H),1.50-1.27(m,4H),0.90-0.89(m,9H),0.08-0.01(m,6H)。
酸60：1,4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸
Figure BDA0002341655160000721
中间体60a：乙基1,4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸酯
在室温下在氮气气氛下向乙基4-氧代环己烷甲酸酯(5.00g，29.4mmol)在甲苯(20mL)中的溶液中添加对-甲苯磺酸(1.50g，8.80mmol)和乙烷-1,2-二醇(6.00g，103mmol)。在室温下搅拌过夜后，将混合物减压浓缩，得到残余物，将其溶于二乙醚(20mL)中。将上述溶液用水(30mL)洗涤两次，然后用饱和碳酸氢钠水溶液(20mL)洗涤两次，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到呈黄色油的标题化合物(5.50g，99％产率)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ4.10(q,J＝9.6Hz,2H),3.92(s,4H),2.34-2.30(m,1H),1.95-1.89(m,2H),1.85-1.74(m,4H),1.58-1.50(m,2H),1.23(t,J＝9.6Hz,3H)。
酸60：1,4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸
向乙基1,4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸酯中间体60a(5.60g，26.1mmol)在四氢呋喃(56mL)、甲醇(28mL)和水(28mL)中的溶液中添加氢氧化锂一水合物(3.29g，78.3mmol)。在室温下搅拌过夜后，将反应混合物在室温下减压浓缩。将所得残余物用0.5M盐酸盐水溶液酸化至pH 3～4，并用二氯甲烷(200mL)萃取两次。将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到呈黄色油的标题化合物(4.10g，84％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ3.94(s,3.4H),3.77-3.74(m,0.6H),2.42-2.33(m,1H),2.00-1.94(m,2H),1.87-1.77(m,4H),1.61-1.51(m,2H)。
酸61：4-(氮杂环丁烷-1-基磺酰基)环己烷甲酸
Figure BDA0002341655160000731
中间体61a：苄基4-(氮杂环丁烷-1-基磺酰基)环己烷甲酸酯
在氮气气氛下在0℃下向苄基4-(乙酰基硫代)环己烷甲酸酯(300mg，1.03mmol)在乙腈(10mL)中的溶液中添加2M盐酸盐水溶液(0.2mL)和1-氯吡咯烷-2,5-二酮(550mg，4.12mmol)。在室温搅拌2小时后，将反应混合物减压浓缩，得到残余物。将其在水(50mL)中稀释并用醚(30mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤两次，经Na2SO4(s)干燥，过滤并减压浓缩，得到残余物。将残余物用干四氢呋喃(10mL)和二氯甲烷(5mL)稀释，然后将氮杂环丁烷盐酸盐(480mg，5.15mmol)和三乙胺(1.21g，12.0mmol)添加到所得溶液中，并在室温下搅拌4小时。将混合物浓缩，用水(50mL)淬灭，并用1M氢氯化物水溶液酸化至pH约2，然后用乙酸乙酯(50mL)萃取三次。将合并的有机层经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到呈黄色油的标题化合物(230mg，58％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.38-7.32(m,5H),5.16(s,1H),5.11(s,1H),3.99-3.90(m,4H),2.81-2.78(m,1H),2.31-2.20(m,5H),2.04-1.99(m,1H),1.73-1.55(m,5H)。
酸61：4-(氮杂环丁烷-1-基磺酰基)环己烷甲酸
向苄基4-(氮杂环丁烷-1-基磺酰基)环己烷甲酸酯中间体61a(230mg，0.682mmol)在甲醇(5mL)中的溶液中添加10％wt钯炭(35mg)。在室温下在氢气气氛下搅拌过夜后，将反应混合物过滤。将滤液减压浓缩，得到呈白色固体的标题化合物(160mg，95％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ4.00-3.95(m,4H),2.84-2.72(m,1H),2.34-2.18(m,6H),2.07-2.03(m,1H),1.78-1.75(m,1H),1.61-1.43(m,3H)。
酸62：3-((叔丁氧基羰基)氨基)-2,2-二甲基环丁烷甲酸
中间体62a：甲基2,2-二甲基-3-氧代环丁烷甲酸酯
在N2气氛下向1-氯-N,N,2-三甲基丙-1-烯-1-胺(45mL，0.340mol)和丙烯酸甲酯(384mL，0.425mol)的混合物中添加双(((三氟甲基)
磺酰基)氧基)锌(30.6g，0.084mol)。在室温下搅拌30分钟后，将混合物在35℃下再搅拌6小时，然后用水(400mL)淬灭并用二氯甲烷(300mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到残余物，将其通过硅胶色谱(石油:乙酸乙酯＝15:1至5:1)纯化，得到呈黄色油的标题化合物(24g，46％产率)。1HNMR(300MHz,CDCl3)δ3.76(s,3H),3.59-3.51(m,1H),3.15-3.06(m,1H),2.99-2.93(m,1H),1.32(s,3H),1.12(s,3H)。
中间体62b：(Z)-3-(羟基亚氨基)-2,2-二甲基环丁烷甲酸
在N2气氛下向甲基2,2-二甲基-3-氧代环丁烷甲酸酯中间体62a(10.0g，64.1mmol)在甲醇(200mL)中的溶液中添加盐酸羟胺(8.80g，128.2mmol)和碳酸氢钠(14.7g，175mmol)。在室温下搅拌过夜后，将混合物过滤并在压力下浓缩，得到呈无色油的标题化合物(10.6g，97％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ3.78(s,0.5H),3.74(s,2.5H),3.35-3.24(m,1H),3.20-3.01(m,1H),2.96-2.82(m,1H),1.56-1.53(m,0.8H),1.45-1.41(m,2.2H),1.32-1.29(m,0.8H),1.23-1.20(m,2.2H)。
中间体62c：甲基3-氨基-2,2-二甲基环丁烷甲酸酯
在氮气气氛下向(Z)-3-(羟基亚氨基)-2,2-二甲基环丁烷甲酸中间体62b(8.60g，50.3mmol)在甲醇(100mL)中的溶液中添加雷尼镍(1.0g)和氢氧化铵(3mL)。在室温下在氢气气氛下搅拌过夜后，将混合物过滤并浓缩，得到呈无色油的标题化合物(6.0g，77％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ3.70(s,0.5H),3.66(s,2.5H),3.42-2.84(m,1H),2.66-2.45(m,1.3H),2.24(br s,0.7H),1.90(br s,1H),1.19(s,1.8H),1.14(s,1.2H),1.00(s,1H),0.88(s,2H)。
中间体62d：甲基3-((叔丁氧基羰基)氨基)-2,2-二甲基环丁烷甲酸酯
在N2气氛下向甲基3-氨基-2,2-二甲基环丁烷甲酸酯中间体62c(6.00g，38.2mmol)在二氯甲烷(100mL)中的溶液中添加二碳酸二叔丁酯(16.5g，76.4mmol)和N,N-二甲基吡啶-4-胺(466mg，3.82mmol)。在室温下搅拌过夜后，将混合物浓缩，得到残余物，将其用混合溶剂(石油:乙酸乙酯10:1，50mL)洗涤，然后用石油(50mL)洗涤两次，得到呈白色固体的标题化合物(5.0g，51％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ4.64(br s,1H),3.88-3.78(m,1H),3.67(s,3H),2.59-2.53(m,1H),2.37-2.27(m,1H),2.08-1.97(m,1H),1.43(s,9H),1.28(s,3H),0.89(s,3H)。
酸62：3-((叔丁氧基羰基)氨基)-2,2-二甲基环丁烷甲酸
在室温下向甲基3-((叔丁氧基羰基)氨基)-2,2-二甲基环丁烷甲酸酯
中间体62d(2.50g，9.70mmol)在四氢呋喃(40mL)中的溶液中添加氢氧化锂一水合物(817mg，19.4mmol)在水(10mL)中的溶液。在室温下在氮气气氛下搅拌过夜后，将混合物浓缩并用乙酸乙酯(50mL)稀释，用2M盐酸盐水溶液(5mL)酸化至pH约5。然后通过过滤收集所得固体，并用水(50mL)洗涤，干燥，得到呈白色固体的标题化合物(2.20g，93％产率)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.96(s,1H),6.97-6.94(m,1H),3.65-3.56(m,1H),2.45-2.42(m,1H),2.08-1.99(m,2H),1.38(s,9H),1.16(s,3H),0.82(s,3H)。
酸63：4-(N-(3-甲氧基-3-氧代丙基)氨磺酰基)环己烷甲酸
Figure BDA0002341655160000751
中间体63a：苄基4-(N-(3-甲氧基-3-氧代丙基)氨磺酰基)-环己烷甲酸酯
在0℃向苄基4-(乙酰基硫代)环己烷甲酸酯中间体26(3.00g，10.3mmol)在乙腈(45mL)中的溶液中添加2M盐酸盐水溶液(1.5mL，3.00mmol)。然后添加1-氯吡咯烷-2,5-二酮(5.35g，40.1mmol)。在氮气气氛下于0℃下搅拌1小时后，将混合物稀释于乙醚(100mL)中，用水(30mL)、盐水(30mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥，过滤并浓缩，得到残余物A。在0℃下向甲基3-氨基丙酸酯盐酸盐在二氯甲烷(40mL)中的溶液中添加三乙胺(5.19g，51.4mmol)和残余物A(溶于20mL二氯甲烷中)。将混合物在氮气气氛下搅拌过夜。向混合物中添加二氯甲烷(200mL)，并用水(50mL)、0.5M盐酸盐水溶液(50mL)、盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥，过滤并浓缩，得到将残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝5:1至3:1)纯化，得到呈黄色油的标题化合物(2.40g，57％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝1.60min，C18H25NO6S的计算质量383.1，m/z发现值384.4[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.39-7.27(m,5H),5.15(s,1H),5.12(s,1H),4.84-4.81(m,0.5H),4.77-4.74(m,0.5H),3.71(s,3H),3.39-3.31(m,2H),2.94-2.84(m,1H),2.64-2.58(m,2H),2.39-2.02(m,4H),1.79-1.69(m,1H),1.63-1.44(m,3H)。
酸63：4-(N-(3-甲氧基-3-氧代丙基)氨磺酰基)环己烷甲酸
向苄基4-(N-(3-甲氧基-3-氧代丙基)氨磺酰基)-环己烷甲酸酯中间体63a(2.40g，6.26mmol)在甲醇(25mL)中的溶液中添加10％wt钯炭(400mg)。将反应混合物在室温在氢气气氛(气囊)下搅拌过夜。将完成的反应混合物过滤，并将滤饼用甲醇(20mL)洗涤。将滤液浓缩，得到呈浅白色固体的标题化合物酸63(1.60g，87％产率)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.10(s,1H),3.60(s,3H),3.21-3.12(m,4H),3.05-2.89(m,1H),2.59-2.52(m,1H),2.18-1.84(m,4H),1.59-1.33(m,4H)。
部分II：芳基醛(P1)的制备
醛1，Al1：2-氯-4-氟-苯甲醛
醛2，Al2：2-氯-3-氟-苯甲醛
醛3，Al3：4-氯-2-氟苯甲醛
醛4，Al4：2-溴-4-氟苯甲醛
醛5，Al5：4-氯-3-氟苯甲醛
醛6，Al6：2-氯-3,4-二氟苯甲醛
醛7，Al7：2-氯苯甲醛
醛8，Al8：2-溴苯甲醛
醛9，Al9：2-溴-3-氟苯甲醛
醛10，Al10：3,4-二氟-2-甲基苯甲醛
醛11，Al11：2-溴-3,4-二氟-苯甲醛
醛12，Al12：2-甲基-4-二氟-苯甲醛
醛13：Al13：2-甲基-3-二氟-苯甲醛
中间体B1：2-氯-3,4-二氟苯甲酸
将四氢呋喃(45mL)中的N1,N1,N2,N2-四甲基乙烷-1,2-二胺(3.7g，69.6mmol)的溶液在氮气气氛下冷却至-70℃，然后滴加己烷中的1.3M仲丁基锂((60mL，75.9mmol)，随后经10分钟加入四氢呋喃(20mL)中的3,4-二氟苯甲酸(5.0g，31.6mmol)的溶液。将所得混合物在-70℃下搅拌1小时，并且然后滴加THF(45mL)中的1,1,1,2,2,2-六氯乙烷(26g，110.8mmol)的溶液。继续在-70℃下搅拌2小时。将混合物温热至-10℃，用水(125mL)淬灭，加入乙醚(60mL)，并且然后分离两相。将水层通过使用浓盐酸水溶液酸化至pH 1并用乙醚(125mL)萃取两次。将合并的有机萃取物在真空中浓缩以得到黄色固体，将该固体用乙酸乙酯(30mL)重结晶，以提供呈黄色固体的标题化合物(2.7g，45％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.69(br s,1H),7.75-7.71(m,1H),7.55-7.48(m,1H)。
中间体B2：2-氯-3,4-二氟-N-甲氧基-N-甲基-苯甲酰胺
在室温下在氮气气氛下，向2-氯-3,4-二氟苯甲酸中间体B1(1.0g，5.2mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中的溶液中添加1-羟基苯并三唑(1.1g，7.8mmol)、N,N-二异丙基乙胺(4.6mL，26mmol)和N-(3-二甲基氨基丙基)-N'-乙基碳二亚胺盐酸盐(1.5g，7.8mmol)。将所得的混合物在室温搅拌10分钟。加入O,N-二甲基-盐酸羟胺(0.5g，5.2mmol)并在室温下继续搅拌过夜。用水(20mL)淬灭后，将混合物用乙酸乙酯(20mL)萃取三次。将合并的有机层用水(20mL)、盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4(固体)干燥，过滤并浓缩以留下残余物，将该残余物通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝4:1至2:1)纯化，以得到呈黄色固体的标题化合物(1.06g，87％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.60-7.53(m,1H),7.42-7.38(m,1H),3.80-3.45(m,3H),3.39-3.06(m,3H)。
醛6：2-氯-3,4-二氟苯甲醛
在氮气气氛下在-78℃向2-氯-3,4-二氟-N-甲氧基-N-甲基-苯甲酰胺中间体B2(500mg，2.13mmol)在四氢呋喃(8mL)中的溶液中滴加在甲苯中的1M氢化二异丁基铝(2.8mL，2.8mmol)。加入之后，将混合物在-78℃下搅拌1小时。然后将其用水(15mL)淬灭并用乙酸乙酯(25mL)萃取三次。将合并的有机层用1M盐酸水溶液(10mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥，过滤并减压蒸发，剩下黄色残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油乙醚:乙酸乙酯＝20:1)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物(200mg，53％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.23(s,1H),7.80-7.76(m,1H),7.69-7.62(m,1H)。
中间体B3：2-溴-3,4-二氟-N-甲氧基-N-甲基苯甲酰胺
在室温下在氮气气氛下，向2-溴-3,4-二氟苯甲酸(2.50g，10.6mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(25mL)中的溶液中添加1-羟基苯并三唑(2.15g，15.9mmol)、N,N-二异丙基乙胺(6.84g，53.0mmol)和N-乙基-N’-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(3.05g，15.9mmol)。将混合物搅拌10分钟，并添加N,O-二甲基羟胺盐酸盐(1.04g，10.6mmol)。在室温搅拌过夜后，将混合物倒入水(80mL)中，并用乙酸乙酯(75mL)萃取两次。将分离的有机层用水(100mL)洗涤两次，用盐水(50mL)洗涤两次，经Na2SO4(s)干燥，过滤，浓缩，并通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝10:1至5:1)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物(1.9g，66％产率)。1HNMR(300MHz,CDCl3)δ7.26-7.17(m,1H),7.14-7.09(m,1H),3.93-3.16(m,6H)。
醛12：2-溴-3,4-二氟苯甲醛
在氮气气氛下在-78℃向2-溴-3,4-二氟-N-甲氧基-N-甲基-苯甲酰胺中间体B3(1.90g，6.81mmol)在四氢呋喃(30mL)中的溶液中滴加在甲苯中的1.5M氢化二异丁基铝(5.90mL，8.85mmol)。在-78℃下搅拌1小时后，将混合物用水(40mL)淬灭，用乙酸乙酯(75mL)萃取三次。将分离的有机层用2M盐酸盐水溶液(30mL)、水(40mL)、盐水(20mL)洗涤两次，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝10:1至5:1)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物(1.0g，67％产率)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.12(s,1H),7.81-7.65(m,2H)。
部分III：羧酰胺(P2)的制备
羧酰胺1，Ca1：噻唑-2-甲酰胺盐酸盐
羧酰胺2，Ca2：2,4,6-三氟苯甲酰胺
在室温下向2,4,6-三氟苄腈(2.00g，12.7mmol)在甲苯(50mL)中的溶液中添加在甲苯中的2M三甲基铝(7.00mL，14.0mmol)和氯化铵(0.76g，14.0mmol)。在120℃下搅拌过夜后，将混合物冷却至室温并过滤。将滤液减压浓缩，得到残余物，将其溶于甲醇/二氯甲烷(10/1，50mL)的混合溶剂中。向获得的混合物中添加硅胶(100-200目，3g)，并在室温下再搅拌1小时。然后将其过滤，并将滤液减压浓缩，得到残余物，将所述残余物通过从石油醚/乙酸乙酯(5/1，20mL)中重结晶进行纯化，得到呈白色固体的标题化合物(1.00g，45％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝0.88min，C7H5F3N2的计算质量174.0，m/z发现值175.0[M+H]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.04(br s,3H),7.55(t,J＝9.6Hz,2H)。
羧酰胺3，Ca3：3,5-二氟吡啶甲酰亚胺盐酸盐
在氮气气氛下在0℃下向甲苯(100mL)中的氯化铵(1.89g，35.7mmol)的搅拌悬浮液中滴加甲苯中的2M三甲基铝(21mL，42.8mmol)。然后将所得混合物升至室温并继续搅拌30分钟。加入甲苯(50mL)中的3,5-二氟吡啶甲腈(5.00g，35.7mmol)的溶液，随后将反应混合物在80℃下搅拌过夜。冷却至室温后，将混合物倒入二氯甲烷(50mL)中的硅胶的浆液中。搅拌10分钟后，将浆液过滤并用甲醇洗涤。将滤液在真空中浓缩，得到呈白色固体的标题化合物(1.90g，34％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝0.357min，C6H6ClF2N3的计算质量193.0，m/z发现值157.9[M+H-HCl]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.77(br s,2H),9.60(br s,2H),8.79(d,J＝1.6Hz,1H),8.41-8.35(m,1H)。
羧酰胺4，Ca4：4-甲基噻唑-2-羧酰亚胺酰胺盐酸盐
向4-甲基噻唑-2-甲腈(3.90g，31.5mmol)在甲醇(30mL)中的溶液中添加1M甲醇钠水溶液(44mL，44.0mmol)。在室温下搅拌30分钟后，向混合物中添加氯化铵(2.50g，47.2mmol)，并在室温下继续搅拌48小时。然后将反应混合物过滤并用甲醇(50mL)洗涤。将滤液浓缩，得到残余物，将所述残余物通过硅胶柱色谱法(二氯甲烷:甲醇＝5:1)纯化，得到粗产物，将所述粗产物进一步通过C18柱(乙腈:水＝2％至40％)纯化，得到呈白色固体的标题化合物(3.00g，54％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝0.409min，C5H8ClN3S的计算质量177.0m/z发现值142.0[M+H-HCl]+。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ7.78(d,J＝0.9Hz,1H),2.57(s,3H)。
部分IV：磺酰氯的制备
磺酰氯1：2-(三甲基甲硅烷基)乙基4-(氯磺酰基)-1-甲基环己烷-1-甲酸酯
Figure BDA0002341655160000801
中间体1a：2-(三甲基甲硅烷基)乙基4-氧代环己烷甲酸酯
在室温下向(10.0g，70.3mmol)在四氢呋喃(250mL)溶液中添加2-(三甲基甲硅烷基)乙醇(11.0g，93.0mmol)、N1-((乙基亚氨基)亚甲基)-N3,N3-二甲基丙烷-1,3-二胺盐酸盐(20.0g，104mmol)和N,N-二甲基吡啶-4-胺(15.5g，127mmol)。搅拌过夜后，将混合物浓缩，得到残余物，将其用水(50mL)稀释，用乙酸乙酯(150mL)萃取两次。将合并的有机层用2M盐酸盐水溶液(150mL)、盐水(150mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥，过滤并浓缩，得到呈浅黄色油的所需产物(14.1g，90％纯度，74％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ4.25-4.19(m,2H),2.79-2.68(m,1H),2.56-2.45(m,2H),2.41-2.31(m,2H),2.27-2.17(m,2H),2.08-1.97(m,2H),1.05-0.98(m,2H),0.07(s,9H)。
中间体1b：2-(三甲基甲硅烷基)乙基1,4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸酯
在室温下向2-(三甲基甲硅烷基)乙基4-氧代环己烷甲酸酯1a(14.1g，90％纯度，52.4mmol)在甲苯(180mL)中的溶液中添加乙烷-1,2-二醇(13.0g，209mmol)和对甲苯磺酸一水合物(390mg，2.05mmol)，然后将其在共沸除去下回流过夜。将混合物冷却至室温，用乙酸乙酯(200mL)稀释，用水(200mL)洗涤两次，用盐水(200mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥，过滤并浓缩，得到呈浅黄色油的所需产物(11g，90％纯度，66％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ4.21-4.12(m,2H),3.95(s,4H),2.37-2.26(m,1H),2.00-1.90(m,2H),1.86-1.72(m,4H),1.63-1.48(m,2H),1.02-0.94(m,2H),0.53(s,9H)。
中间体1c：2-(三甲基甲硅烷基)乙基8-甲基-1,4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸酯
在-78℃向2-(三甲基甲硅烷基)乙基1,4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸酯1b(4.0g，90％纯度，12.6mmol)在四氢呋喃(60mL)中的溶液中添加在四氢呋喃中的2M二异丙基氨基锂(13mL，26.0mmol)。在-78℃下搅拌2小时后，添加碘甲烷(3.8g，26.8mmol)。然后将混合物温热至室温并搅拌1小时。将混合物倒入水(60mL)中，用乙酸乙酯(60mL)萃取两次。将合并的有机层用盐水(60mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥，过滤并浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝20:1)纯化，得到呈浅黄色油的所需产物(3.1g，纯度90％，74％产率)。1HNMR(300MHz,CDCl3)δ4.20-4.17(m,2H),3.94(s,4H),2.19-2.08(m,2H),1.68-1.64(m,4H),1.57-1.44(m,2H),1.19(s,3H),1.02-0.97(m,2H),0.05(s,9H)。
中间体1d：2-(三甲基甲硅烷基)乙基1-甲基-4-氧代环己烷甲酸酯
向2-(三甲基甲硅烷基)乙基8-甲基-1,4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸酯1c(4.20g，90％纯度，12.6mmol)在丙酮(50mL)和水(50mL)中的溶液中添加对甲苯磺酸吡啶鎓(6.30g，25.1mmol)，然后将反应在65℃加热过夜。向混合物中添加水(80mL)，用乙酸乙酯(80mL)萃取两次。将合并的有机层用2M盐酸盐水溶液(60mL)、饱和碳酸钠水溶液(40mL)、盐水(60mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥，过滤并浓缩，得到呈无色油的所需产物(3.5g，90％纯度，98％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ4.28-4.22(m,2H),2.52-2.27(m,6H),1.75-1.62(m,2H),1.30(s,3H),1.06-1.00(m,2H),0.06(s,9H)。
中间体1e：2-(三甲基甲硅烷基)乙基4-羟基-1-甲基环己烷-甲酸酯
在0℃向2-(三甲基甲硅烷基)乙基1-甲基-4-氧代环己烷甲酸酯1d(2.50g，90％纯度，8.78mmol)在四氢呋喃(30mL)和水(3mL)中的溶液中添加硼氢化钠(0.996g，26.3mmol)。在室温搅拌2小时后，将反应浓缩，得到残余物，向其添加水(50mL)并用乙酸乙酯(50mL)萃取两次。将合并的有机层用1M盐酸盐水溶液(50mL)和盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥，过滤并浓缩，得到呈浅黄色油的所需产物(2.30g，90％纯度，91％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ4.22-4.16(m,2H),3.87-3.80(m,0.3H),3.65-3.56(m,0.7H),2.27-2.19(m,2H),1.92-1.80(m,2H),1.75-1.45(m,2H),1.45-1.21(m,2H),1.15(s,3H),1.05-0.98(m,2H),0.06(s,9H)。
中间体1f：2-(三甲基甲硅烷基)乙基1-甲基-4-(甲苯磺酰基氧基)环己烷-甲酸酯
在室温下向2-(三甲基甲硅烷基)乙基4-羟基-1-甲基环己烷甲酸酯1e(2.30g，90％纯度，8.01mmol)在二氯甲烷(30mL)中的溶液中添加4-甲基苯-1-磺酰氯(1.83g，9.60mmol)、N,N-二甲基吡啶-4-胺(1.52g，12.4mmol)。搅拌过夜后，将混合物用二氯甲烷(80mL)稀释，用水(50mL)、2M盐酸盐水溶液(50mL)、盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥，过滤并浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝20:1)纯化，得到呈浅黄色油的所需产物(3.20g，纯度90％，87％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.79(d,J＝8.1Hz,2H),7.34(d,J＝8.1Hz,2H),4.67-4.61(m,0.2H),4.50-4.38(m,0.8H),4.19-4.14(m,2H),2.46(s,3H),2.24-2.19(m,2H),1.94-1.73(m,2H),1.65-1.51(m,2H),1.25-1.12(m,2H),1.12(s,3H),1.01-0.95(m,2H),0.06(s,9H)。
中间体1g：2-(三甲基甲硅烷基)乙基4-(乙酰基硫代)-1-甲基环己烷甲酸酯
在室温下向2-(三甲基甲硅烷基)乙基1-甲基-4-(甲苯磺酰基氧基)环己烷甲酸酯1f(3.20g，90％纯度，6.98mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(20mL)中的溶液中添加乙硫醇钾(3.20g，28.0mmol)，然后将反应在85℃加热3小时。冷却至室温后，将混合物倒入水(100mL)中，用乙酸乙酯(60mL)萃取两次。将合并的萃取物用水(100mL)、盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥，过滤并浓缩，得到呈棕色油的所需产物(2.40g，90％纯度，98％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ4.23-4.16(m,2H),3.61-3.48(m,1H),2.19(s,3H),2.15-2.01(m,4H),1.96-1.83(m,4H),1.27(s,3H),1.04-0.97(m,2H),0.07(s,9H)。
磺酰氯1：2-(三甲基甲硅烷基)乙基4-(氯磺酰基)-1-甲基环己烷甲酸酯
在0℃向2-(三甲基甲硅烷基)乙基4-(乙酰基硫代)-1-甲基环己烷甲酸酯1g(1.30g，90％纯度，3.70mmol)在乙腈(15mL)中的溶液中添加1M盐酸盐水溶液(0.5mL)和1-氯吡咯烷-2,5-二酮(1.60g，12.0mmol)。在0℃下搅拌1小时后，将混合物用乙酸乙酯(100mL)稀释，用盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥，过滤并浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝10:1)纯化，得到呈浅棕色油的所需产物(800mg，纯度90％，57％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ4.28-4.08(m,2H),3.96-3.80(m,0.3H),3.63-3.47(m,0.7H),2.53-2.24(m,3H),2.14-2.06(m,2H),2.01-1.78(m,3H),1.28-1.24(m,3H),1.03-0.96(m,2H),0.07(s,9H)。
磺酰氯2：叔丁基3-(氯磺酰基)-2,2-二甲基丙酸酯
Figure BDA0002341655160000831
中间体2a：1-叔丁基3-甲基2,2-二甲基丙二酸酯
在0℃向在矿物油中的60％wt氢化钠(1.56g，39.0mmol)在四氢呋喃(40mL)中的悬浮液中滴加丙二酸甲基叔丁酯(3.50g，20.0mmol)。在该温度下搅拌30分钟后，滴加碘甲烷(5.54g，39.0mmol)，并在室温下继续搅拌另外5小时。然后将混合物用水(30mL)淬灭，并用乙酸乙酯(50mL)萃取两次。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到呈棕色油的标题化合物(3.80g，94％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ3.72(s,3H),1.44(s,9H),1.40(s,6H)。
中间体2b：叔丁基3-羟基-2,2-二甲基丙酸酯
在-78℃在氮气气氛下向1-叔丁基3-甲基2,2-二甲基丙二酸酯2a(5.00g，24.7mmol)在四氢呋喃(30mL)中的溶液中滴加在甲苯中的1.5M二异丁基氢化铝(41.3mL，61.9mmol)。在该温度下在氮气气氛下搅拌2小时并且在室温下过夜后，将混合物用水(50mL)淬灭，并用乙酸乙酯(100mL)萃取三次。将合并的有机层用水(200mL)和盐水(100mL)洗涤三次，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到呈白色油标题化合物(2.00g，47％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ3.52(d,J＝5.4Hz,2H),2.58(br s,1H),1.47(s,9H),1.16(s,6H)。
中间体2c：叔丁基2,2-二甲基-3-(甲苯磺酰基氧基)丙酸酯
在0℃向叔丁基3-羟基-2,2-二甲基丙酸酯2b(2.00g，11.5mmol)在吡啶(8mL)和二氯甲烷(20mL)中的溶液中添加甲苯磺酰氯(5.49g，28.7mmol)。在室温下在氮气气氛下搅拌过夜后，将混合物浓缩并溶解在乙酸乙酯(40mL)和水(40mL)中，然后添加0.5M盐酸盐水溶液(24mL)并分离。将水层用乙酸乙酯(40mL)萃取两次。将合并的有机层用0.5M盐酸盐水溶液(20mL)和盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液浓缩并通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝10:1)纯化，得到呈白色固体的标题化合物(1.80g，48％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.79(d,J＝8.1Hz,2H),7.35(d,J＝8.1Hz,2H),3.98(s,2H),2.46(s,3H),1.40(s,9H),1.14(s,6H)。
中间体2d：叔丁基3-(乙酰基硫代)-2,2-二甲基丙酸酯
在室温下向叔丁基2,2-二甲基-3-(甲苯磺酰基氧基)丙酸酯2c(1.80g，5.49mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(30mL)中的溶液中添加硫代乙酸钾(1.25g，11.0mmol)。在氮气气氛下在100℃下搅拌4小时后，将反应混合物冷却至室温，吸收于水(100mL)中，并用乙酸乙酯(100mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(80mL)洗涤，经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到呈黄色油的标题化合物(1.2g，96％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ3.11(s,2H),2.33(s,3H),1.43(s,9H),1.18(s,6H)。
磺酰氯2：叔丁基3-(氯磺酰基)-2,2-二甲基丙酸酯
在0℃向叔丁基3-(乙酰基硫代)-2,2-二甲基丙酸酯EO8495_522.5(1.20g，5.57mmol)在乙腈(28mL)中的溶液中添加2M盐酸盐水溶液(1mL)和1-氯吡咯烷-2,5-二酮(2.97g，22.3mmol)。在该温度下在氮气气氛下搅拌2小时后，将混合物用水(30mL)淬灭，并用乙酸乙酯(80mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液浓缩并通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝40:1)纯化，得到呈白色油的标题化合物(250mg，18％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ4.14(s,2H),1.48(s,9H),1.43(s,6H)。
磺酰氯3：叔丁基3-(氯磺酰基)氮杂环丁烷-1-甲酸酯
Figure BDA0002341655160000841
中间体3a：叔丁基3-(甲苯磺酰基氧基)氮杂环丁烷-1-甲酸酯
在0℃在氮气气氛下向叔丁基3-羟基氮杂环丁烷-1-甲酸酯EO8495_681.1(2.00g，11.5mmol)和吡啶(2.73g，34.5mmol)在干二氯甲烷(20mL)中的溶液中添加甲苯磺酰氯(4.41g，23.1mmol)在干二氯甲烷(10mL)中的溶液。将混合物在0℃下搅拌30分钟并且然后在室温下搅拌48小时。将其减压浓缩，剩下残余物，将所述残余物通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝8:1)纯化，得到呈无色油的标题化合物(3.75g，99％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝2.364min，C15H21NO5S的计算质量327.1，m/z发现值349.9[M+Na]+。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.79(d,J＝8.1Hz,2H),7.38(d,J＝8.1Hz,2H),5.06-4.96(m,1H),4.14-4.08(m,2H),3.95-3.92(m,2H),2.47(s,3H),1.42(s,9H)。
中间体3b：叔丁基3-(乙酰基硫代)氮杂环丁烷-1-甲酸酯
向叔丁基3-(甲苯磺酰基氧基)氮杂环丁烷-1-甲酸酯EO8495_681.2(3.25g，9.93mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(30mL)中的溶液中添加硫代乙酸钾(2.27g，19.9mmol)。在100℃下搅拌过夜后，将混合物冷却至室温，倒入水(90mL)中，并用乙酸乙酯(20mL)萃取三次。将合并的有机层用水(30mL)洗涤三次，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液浓缩，得到呈棕色油的标题化合物(2.24g，97％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝1.703min，C10H17NO3S的计算质量231.1，m/z发现值176.0[M+H-56]+。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ4.41-4.37(m,2H),4.22-4.12(m,1H),3.93-3.77(m,2H),2.35(s,3H),1.45(s,9H)。
磺酰氯3：叔丁基3-(氯磺酰基)氮杂环丁烷-1-甲酸酯
在0℃向叔丁基3-(乙酰基硫代)氮杂环丁烷-1-甲酸酯EO8495_681.3(2.24g，9.69mmol)在乙腈(20mL)中的溶液中添加2M盐酸盐水溶液(0.8mL)和N-氯琥珀酰亚胺(5.17g，38.7mmol)。在0℃下搅拌1小时后，将混合物用水(60mL)淬灭，并用乙醚(30mL)萃取三次。将合并的有机层经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液浓缩并通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝8:1)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物(910mg，37％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝1.895min，C8H14ClNO4S的计算质量255.0，m/z发现值199.9[M+H-56]+。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ4.59-4.47(m,1H),4.43-4.31(m,4H),1.47(s,9H)。
磺酰氯4：1-环丙基-1H-吡唑-4-磺酰氯
Figure BDA0002341655160000851
中间体4a：1-环丙基-4-碘-1H-吡唑
在氮气气氛下向4-碘-1H-吡唑(7.00g，36.0mmol)在1,4-二噁烷(30mL)中的溶液中添加环丙基硼酸(6.20g，72.0mmol)、乙酸铜一水合物(9.40g，47.0mmol)、4-二甲基氨基吡啶(108mg，43.0mmol)和吡啶(3.50g，43.0mmol)。在110℃下搅拌过夜后，将反应混合物冷却至室温并用水稀释(50mL)，用乙酸乙酯(60mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(40mL)洗涤，经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到粗产物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝4:1)纯化，得到呈浅黄色油的标题化合物(1.80g，21％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.49(s,1H),7.47(s,1H),3.62-3.57(m,1H),1.13-1.08(m,2H),1.05-0.99(m,2H)。
中间体4b：4-(苄基硫代)-1-环丙基-1H-吡唑
在氮气气氛下向1-环丙基-4-碘-1H-吡唑中间体4a(500mg，2.13mmol)在1,4-二噁烷(10mL)中的溶液中添加苄硫醇(527mg，4.30mmol)、N,N-二异丙基乙胺(554g，4.30mmol)、三(二苯亚甲基丙酮)二钯(20mg，0.020mmol)和9,9-二甲基-4,5-双(二苯基膦)呫吨(23mg，0.040mmol)。在110℃下搅拌过夜后，将反应混合物冷却至室温并用水(20mL)稀释，用乙酸乙酯(20mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到粗产物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝10:1)纯化，得到呈无色油的标题化合物(330mg，67％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝2.358min，C13H14N2S的计算质量230.1，m/z发现值230.9[M+H]+。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.32-7.17(m,4H),7.13-7.07(m,3H),3.78(s,2H),3.57-3.46(m,1H),1.07-0.92(m,4H)。
磺酰氯4：1-环丙基-1H-吡唑-4-磺酰氯
在0℃在氮气气氛下向4-(苄基硫代)-1-环丙基-1H-吡唑EO8495_729.3(330mg，1.43mmol)在乙腈(6mL)中的溶液中添加乙酸(0.7mL)、水(0.5mL)合1,3-二氯-5,5-二甲基乙内酰脲(570mg，2.87mmol)。在0℃下搅拌2小时后，将反应混合物用水(10mL)稀释，并用乙酸乙酯(20mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到呈无色油的标题化合物(320mg，粗品)。LC-MS(ESI)：RT＝1.457min，C6H7ClN2O2S的计算质量206.0，m/z发现值206.9[M+H]+。
磺酰氯5：(trans)-叔丁基3-(氯磺酰基)环丁烷甲酸酯
Figure BDA0002341655160000871
中间体5a：(cis)-叔丁基3-羟基环丁烷甲酸酯
在一个1L的三颈瓶中充入氮气，0°条件，在氮气气氛下在20分钟内向硼氢化钠(2.389g，63.158mmol)在THF(108mL，0.886g/mL，1327.029mmol)中的悬浮液中逐滴添加3-氧代环丁烷甲酸酯(21.5g，126.316mmol)在MeOH(52mL，0.791g/mL，1283.684mmol)和THF(160mL，0.886g/mL，1965.969mmol)中的溶液。[警告！放气反应！][监控内部反应系统温度不超过20°。]将反应混合物在0℃下搅拌2小时，TLC((3:1＝HEX:EA)显示起始材料的消耗。将混合物减压浓缩，得到残余物，向其添加饱和Na2CO3溶液(200mL)，并用EA(300mL X 3)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤，并且将滤液浓缩，得到粗产物(21.5g，98.83％产率)，其无需进一步纯化即可用于下一步。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ4.73-4.69(m,1H),4.16-4.14(m,1H),2.64-2.40(m,3H),2.27-2.06(m,2H),1.44(s,9H)。
中间体5b：(cis)-叔丁基3-(甲苯磺酰基氧基)环丁烷甲酸酯
在0℃将4-甲基-苯磺酰氯(93g，488mmol)缓慢添加至(cis)-叔丁基3-羟基环丁烷甲酸酯5a(42g，244mmol)在吡啶(150mL)和二氯甲烷(400mL)中的溶液中。在室温下搅拌16小时后，将混合物用水(200mL，0℃)稀释，并在室温下搅拌0.5小时。将水相用二氯甲烷(200mL x 2)萃取，合并有机层，并用0.5N HCl(200mL)、盐水(100mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥，过滤并浓缩，得到呈白色固体的标题化合物(79.6g，92％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.80(d,J＝8.1Hz,2H),7.35(d,J＝7.5Hz,2H),4.74-4.69(m,1H),2.56-2.30(m,8H),1.42(s,9H)。
中间体5c：(trans)-叔丁基3-(乙酰基硫代)环丁烷甲酸酯
在氮气气氛下向一个1L的三颈瓶中充入氮气，在室温条件下，向(cis)-叔丁基3-(甲苯磺酰基氧基)环丁烷甲酸酯5b(41.36g，126.71mmol)在DMF(400mL，0.944g/mL，5165.903mmol)中的溶液中添加硫代乙酸钾(24.8g，217.145mmol)。将反应体系在氮气气氛下于100°搅拌过夜(12小时)。TLC(10:1＝PE:EA)显示所有起始材料的消耗。将大部分溶剂减压蒸发，将残余物重新溶于EA(1L)中，用水(200mL)、饱和NaCl水溶液(100mL X 10)洗涤，经Na2SO4干燥，蒸发以将溶剂除去，得到残余物，将其经受快速柱(PE:EA＝100:1至50:1)，得到呈黄色油的标题化合物(22.5g，77.094％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ4.16-4.06(m,1H),3.19-3.11(m,1H),2.79-2.70(m,2H),2.29-2.20(m,5H),1.46(s,9H)。
磺酰氯5：(trans)-叔丁基3-(氯磺酰基)环丁烷甲酸酯
在0℃向(trans)-叔丁基3-(乙酰基硫代)环丁烷甲酸酯5c(25g，109mmol)和2M盐酸盐水溶液(13mL，27mmol)在乙腈(400mL)中的溶液中缓慢添加1-氯吡咯烷-2,5-二酮(58g，435mmol)。在0℃下搅拌30分钟后，将反应混合物在真空中浓缩以除去乙腈(25℃浴)。并且将残余物在乙酸乙酯(800mL)和饱和碳酸氢钠水溶液(400mL)之间分配。将分离的有机层用饱和硫代硫酸钠水溶液(400mL)洗涤，然后用盐水(400mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液浓缩并将残余物通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝150:1)纯化，得到呈白色固体的标题化合物(19g，71％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ4.49-4.41(m,1H),3.29-3.21(m,1H),2.93-2.86(m,2H),2.80-2.73(m,2H),1.47(s,9H)。
磺酰氯6：1,4-二氧杂螺[4.5]癸-2-基甲烷磺酰氯
中间体6a：1,4-二氧杂螺[4.5]癸-2-基甲醇
在室温下向丙三醇(18.2g，0.2mol)和环己酮(13.0g，0.13mol)在甲苯(13mL)中的溶液中添加4-甲苯磺酸(1.30g，7.80mmol)。在105℃下搅拌16小时后，将反应混合物冷却至室温。将混合物减压浓缩，得到残余物，将其用水(150mL)和乙酸乙酯(100mL)稀释。将水层用乙酸乙酯(100mL)萃取两次。将合并的有机层用盐水(250mL)洗涤，经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到呈黄色油状的粗标题化合物(21.4g，95％产率)，其无需进一步纯化即可直接使用。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ4.02-3.87(m,2H),3.64-3.55(m,1H),3.45-3.26(m,2H),1.97-1.20(m,10H)。
中间体6b：1,4-二氧杂螺[4.5]癸-2-基甲基4-甲基苯磺酸酯
在0℃将4-甲基苯-1-磺酰氯(44.0g，231mmol)缓慢添加至1,4-二氧杂螺[4.5]癸-2-基甲醇中间体6a(10.0g，58mmol)在吡啶(10mL)和二氯甲烷(100mL)中的溶液中。在室温下搅拌16小时后，将混合物用水(100mL)稀释，并在室温下搅拌30分钟。将水层用二氯甲烷(100mL)萃取两次，将合并的有机层用0.5N盐酸盐水溶液(200mL)和盐水(100mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥，过滤并减压浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝30:1)纯化，得到呈白色固体的标题化合物(15.0g，79％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.87-7.76(m,2H),7.42-7.36(m,2H),4.34-4.24(m,1H),4.09-3.92(m,3H),3.83-3.72(m,1H),2.47(s,3H),1.59-1.55(m,10H)。
中间体6c：S-(1,4-二氧杂螺[4.5]癸-2-基甲基)乙硫醇酯
在室温下向1,4-二氧杂螺[4.5]癸-2-基甲基4-甲基苯磺酸酯中间体6b(15.0g，45.9mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(150mL)中的溶液中添加硫代乙酸钾(21g，183mmol)。在100℃下搅拌16小时后，将反应混合物冷却至室温，减压浓缩，添加5％氯化钠水溶液(500mL)并用乙酸乙酯(150mL)萃取两次。将合并的有机层经Na2SO4(s)干燥，过滤并浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝30:1)纯化，得到呈黄色油的标题化合物(9g，86％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ4.25-4.22(m,1H),4.10-4.06(m,1H),3.68-3.62(m,1H),3.11-3.10(m,2H),2.36(s,3H),1.64-1.58(m,10H)。
磺酰氯6：1,4-二氧杂螺[4.5]癸-2-基甲烷磺酰氯
在0℃向S-(1,4-二氧杂螺[4.5]癸-2-基甲基)乙硫醇酯中间体6c(920mg，4mmol)和2N盐酸盐水溶液(0.5mL，1.00mmol)在乙腈(30mL)中的溶液中缓慢添加1-氯吡咯烷-2,5-二酮(1.07g，8.00mmol)。在0℃下搅拌30分钟后，将反应混合物在真空中浓缩以除去乙腈(25℃浴)。并且将残余物在乙酸乙酯(50mL)和饱和碳酸氢钠水溶液(50mL)之间分配。将合并的有机层用饱和硫代硫酸钠水溶液(50mL)洗涤，然后用盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝10:1)纯化，得到呈黄色油的标题化合物(380mg，40％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ4.76-4.68(m,0.2H),4.67-4.58(m,0.4H),4.46-4.37(m,0.4H),4.25-4.31(m,3H),3.60-3.48(m,0.3H),3.39-3.33(m,0.7H),1.70-1.51(m,8H),1.47-1.32(m,2H)。
磺酰氯7：叔丁基3-(氯磺酰基)环戊烷甲酸酯
Figure BDA0002341655160000901
中间体7a：叔丁基3-氧代环戊烷甲酸酯
向3-氧代环戊烷甲酸(5.00g，39.1mmol)和二碳酸叔丁酯(17.0g，78.0mmol)在叔丁醇(100mL)中的溶液中添加4-二甲基氨基吡啶(1.40g，11.5mmol)。在室温下搅拌过夜后，将混合物浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝20:1至10:1)纯化，得到呈黄色油的标题化合物(4.60g，64％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ3.09-2.99(m,1H),2.54-2.07(m,6H),1.47(s,9H)。
中间体7b：叔丁基3-羟基环戊烷甲酸酯
在0℃将硼氢化钠(946mg，25.0mmol)缓慢添加至叔丁基3-氧代环戊烷甲酸酯中间体7a(4.60g，25.0mmol)在甲醇(50mL)中的溶液中。在10℃下搅拌1小时后，将混合物用水(50mL)稀释，浓缩并用乙酸乙酯(80mL)萃取两次。将合并的有机层经Na2SO4(s)干燥，过滤并浓缩，得到呈无色油粗产物(4.50g，粗品)，其无需进一步纯化即可用于下一步。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ4.45(br s,0.2H),4.30(br s,0.8H),3.01-2.76(m,2H),2.09-1.68(m,6H),1.46-1.45(m,9H)。
中间体7c：叔丁基3-(甲苯磺酰基氧基)环戊烷甲酸酯
在0℃4-甲基-苯磺酰氯(5.50g，29mmol)缓慢添加至叔丁基3-羟基环戊烷甲酸酯中间体7b(4.50g，24mmol)、4-二甲基氨基吡啶(30mg，0.24mmol)和三乙胺(4.9g，48mmol)在二氯甲烷(45mL)中的溶液中。在室温搅拌16小时后，将混合物用饱和碳酸氢钠水溶液(30mL)洗涤，然后用盐水(30mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥，过滤并浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝20:1至10:1)纯化，得到呈无色油的标题化合物(5.60g，68％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.79(d,J＝7.8Hz,2H),7.34(d,J＝7.8Hz,2H),5.02(s,0.2H),4.96-4.89(m,0.8H),2.95-2.77(m,0.2H),2.69-2.59(m,0.8H),2.46(s,3H),2.21-1.76(m,6H),1.43(s,9H)。
中间体7d：叔丁基3-(乙酰基硫代)环戊烷甲酸酯
在室温下向叔丁基3-(甲苯磺酰基氧基)环戊烷甲酸酯中间体7c(4.60g，13.5mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(50mL)中的溶液中添加硫代乙酸钾(6.20g，54.1mmol)。在80℃下搅拌16小时后，将反应混合物冷却至室温，用5％氯化钠水溶液(50mL)淬灭，并用乙酸乙酯(100mL)萃取两次。将合并的有机层经Na2SO4(s)干燥，过滤并浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝50:1至30:1)纯化，得到呈棕色油的标题化合物(3.50g，87％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ3.92-3.78(m,0.8H),3.72-3.67(m,0.2H),2.88-2.73(m,1H),2.42-2.13(m,5H),2.07-1.80(m,3H),1.62-1.53(m,1H),1.45(s,9H)。
磺酰氯7：叔丁基3-(氯磺酰基)环戊烷甲酸酯
在0℃向叔丁基3-(乙酰基硫代)环戊烷甲酸酯中间体7d(3.00g，12mmol)和2N盐酸盐水溶液(1.8mL，3.6mmol)在乙腈(80mL)中的溶液中添加1-氯吡咯烷-2,5-二酮(6.60g，49mmol)。在0℃下搅拌1小时后，将混合物添加进入水(30mL)中，减压浓缩，并用乙酸乙酯(50mL)萃取两次。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝20:1至10:1)纯化，得到呈白色固体的标题化合物(2.9g，88％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ4.32-4.22(m,0.8H),4.18-4.07(m,0.2H),3.08-2.98(m,0.8H),2.91-2.79(m,0.2H),2.57-2.46(m,2H),2.38-1.90(m,4H),1.46(s,9H)。
磺酰氯8：叔丁基4-(氯磺酰基)环己烷甲酸酯
中间体8a：叔丁基4-羟基环己烷甲酸酯
在0℃将硼氢化钠(611mg，16.0mmol)缓慢添加至叔丁基4-氧代环己烷甲酸酯EO8495_830.1(3.20g，16.0mmol)在甲醇(30mL)中的溶液中。在10℃下搅拌1小时后，将混合物添加进入水(50mL)中，减压浓缩并用乙酸乙酯(40mL)萃取两次。将合并的有机层经Na2SO4(s)干燥，过滤并浓缩，得到呈无色油粗产物(3.20g，粗品)，其无需进一步纯化即可用于下一步。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ3.91-3.85(m,0.4H),3.65-3.57(m,0.6H),2.30-2.27(m,0.4H),2.18-2.10(m,0.6H),2.04-1.89(m,3H),1.66-1.60(m,3H),1.53-1.35(m,10H),1.30-1.21(m,2H)。
中间体8b：叔丁基4-(甲苯磺酰基氧基)环己烷甲酸酯
在0℃4-甲基-苯磺酰氯(3.7g，19mmol)缓慢添加至叔丁基4-羟基环己烷甲酸酯中间体8a(3.2g，16mmol)、4-二甲基氨基吡啶(20mg，0.16mmol)和三乙胺(3.2g，32mmol)在二氯甲烷(30mL)中的溶液中。在室温搅拌16小时后，将混合物用饱和碳酸氢钠水溶液(15mL)洗涤，然后用盐水(15mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥，过滤并浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝20:1至10:1)纯化，得到呈无色油的标题化合物(4.0g，72％产率)。1HNMR(300MHz,CDCl3)δ7.80(d,J＝8.1Hz,2H),7.34(d,J＝8.1Hz,2H),4.70(br s,0.3H),4.41(br s,0.7H),2.46(s,3H),2.25-2.13(m,1H),1.98-1.79(m,4H),1.71-1.42(m,13H)。
中间体8c：叔丁基4-(乙酰基硫代)环己烷甲酸酯
在室温下向叔丁基4-(甲苯磺酰基氧基)环己烷甲酸酯中间体8b(3.00g，8.50mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(30mL)中的溶液中添加硫代乙酸钾(3.90g，33.8mmol)。在80℃下搅拌16小时后，将反应混合物冷却至室温，用5％氯化钠水溶液(50mL)淬灭，并用乙酸乙酯(100mL)萃取两次。将合并的有机层经Na2SO4(s)干燥，过滤并浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝50:1至30:1)纯化，得到呈棕色油的标题化合物(1.9g，65％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ3.75(s,1H),2.30-2.29(m,3.7H),2.21-2.14(m,0.3H),2.01-1.94(m,0.7H),1.81-1.72(m,6.7H),1.56-1.52(m,0.3H),1.43(s,9H),1.38-1.33(m,0.3H)。
磺酰氯8：叔丁基4-(氯磺酰基)环己烷甲酸酯
在0℃向叔丁基4-(乙酰基硫代)环己烷甲酸酯中间体8c(1.4g，5.4mmol)和2M盐酸盐水溶液(0.8mL，1.6mmol)在乙腈(50mL)中的溶液中添加1-氯吡咯烷-2,5-二酮(2.9g，21.7mmol)。在0℃下搅拌1小时后，将混合物用水(20mL)稀释，减压浓缩，并用乙酸乙酯(40mL)萃取两次。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝20:1至10:1)纯化，得到呈白色固体的标题化合物(1.2g，78％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ3.59-3.49(m,1H),2.62-2.49(m,1H),2.39-2.22(m,4H),2.09-1.95(m,2H),1.86-1.63(m,1H),1.57-1.54(m,1H),1.48-1.45(m,9H)。
磺酰氯9：2-(三甲基甲硅烷基)乙基3-(氯磺酰基)-1-甲基环丁烷甲酸酯
Figure BDA0002341655160000931
中间体9a：1-甲基-3-氧代环丁烷甲酸
向乙基1-甲基-3-氧代环丁烷甲酸酯EO8495_670.1(4.00g，25.6mmol)在甲醇(50mL)和水(10mL)中的溶液中添加氢氧化锂一水合物(2.15g，51.2mmol)。在室温下搅拌过夜后，将混合物用2M盐酸盐水溶液酸化至pH约2，然后减压浓缩，得到残余物，将其溶于水(50mL)中，并用乙酸乙酯(30mL)萃取三次。将合并的有机层经Na2SO4(s)干燥并浓缩，得到呈黄色油的标题化合物(4.10g，90％纯度，100％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ3.67-3.62(m,2H),2.99-2.93(m,2H),1.62(s,3H)。
中间体9b：2-(三甲基甲硅烷基)乙基1-甲基-3-氧代环丁烷甲酸酯
在氮气下向1-甲基-3-氧代环丁烷甲酸中间体9a(4.10g，纯度90％，28.8mmol)和2-(三甲基甲硅烷基)乙醇(3.75g，31.7mmol)、N,N-二甲基吡啶-4-胺(3.50g，28.6mmol)在四氢呋喃(100mL)中的溶液中添加1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(8.30g，43.2mmol)。在室温下搅拌过夜后，将混合物用水(50mL)淬灭，然后减压浓缩以除去挥发物，用乙酸乙酯(80mL)萃取三次。将合并的有机层用2M盐酸盐水溶液(100mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥并浓缩，得到呈黄色油的标题化合物(5.10g，80％纯度，100％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ4.21-4.17(m,2H),3.54-3.49(m,2H),2.85-2.80(m,2H),1.52(s,3H),0.99-0.95(m,2H),0.07(s,9H)。
中间体9c：2-(三甲基甲硅烷基)乙基3-羟基-1-甲基环丁烷-甲酸酯
在室温下向2-(三甲基甲硅烷基)乙基1-甲基-3-氧代环丁烷甲酸酯中间体9b(5.10g，80％纯度，17.9mmol)在四氢呋喃(100mL)和水(10mL)中的溶液中滴加四氢硼酸钠(2.70g，71.5mmol)。在室温下搅拌过夜后，将混合物用水(20mL)淬灭，然后减压浓缩，得到残余物。将残余物用水(50mL)吸收，并用乙酸乙酯(50mL)萃取三次。将合并的有机层经Na2SO4(s)干燥并浓缩，得到呈黄色油的标题化合物(3.80g，90％纯度，100％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ4.38-4.22(m,1H),4.16-4.10(m,2H),3.71-3.67(m,1H),2.80-2.71(m,1H),2.32-2.21(m,2H),1.85-1.77(m,1H),1.35(s,1.5H),1.30(s,1.5H),0.97-0.89(m,2H),0.07(s,9H)。
中间体9d：2-(三甲基甲硅烷基)乙基1-甲基-3-(甲苯磺酰基氧基)环丁烯-甲酸酯
在氮气下向2-(三甲基甲硅烷基)乙基3-羟基-1-甲基环丁烷甲酸酯中间体9c(3.70g，90％纯度，14.5mmol)和N,N-二甲基吡啶-4-胺(2.90g，23.7mmol)在二氯甲烷(100mL)中的溶液中添加4-甲基苯-1-磺酰氯(3.3g，17.3mmol)。在室温下搅拌过夜后，将反应溶液用水(40mL)洗涤，用Na2SO4(s)干燥，并减压浓缩，得到残余物。将残余物通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝8:1)纯化，得到呈浅黄色油的标题化合物(3.10g，纯度95％，48％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.74(d,J＝8.4Hz,2H),7.30(d,J＝8.0Hz,2H),4.87-4.83(m,1H),4.14-4.10(m,1H),2.72-2.66(m,0.8H),2.56-2.52(m,1.2H),2.42(s,3H),2.17-2.11(m,1.2H),2.08-2.03(m,0.8H),1.33(s,1H),1.28(s,2H),0.95-0.91(m,2H),0.01(s,9H)。
中间体9e：2-(三甲基甲硅烷基)乙基3-(乙酰基硫代)-1-甲基环丁烷甲酸酯
在室温下向2-(三甲基甲硅烷基)乙基1-甲基-3-(甲苯磺酰基氧基)环丁烷甲酸酯中间体9d(3.10g，95％纯度7.26mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(70mL)中的溶液中添加硫代乙酸钾(3.00g，26.3mmol)。在100℃下搅拌6小时后，将反应混合物冷却并倒入水(200mL)中，并用乙酸乙酯(80mL)萃取三次。将合并的有机层用水(100mL)洗涤三次，经Na2SO4(s)干燥并浓缩，得到呈黄色油的标题化合物(2.30g，90％纯度，99％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ4.27-4.21(m,2H),4.19-4.08(m,1H),3.06-3.00(m,1H),2.59-2.50(m,1H),2.41-2.36(m,1H),2.32(s,3H),2.04-1.99(m,1H),1.50(s,1.2H),1.44(s,1.8H),1.08-1.01(m,2H),0.07(s,9H)。
磺酰氯9：2-(三甲基甲硅烷基)乙基3-(氯磺酰基)-1-甲基环丁烷甲酸酯
在0℃向2-(三甲基甲硅烷基)乙基3-(乙酰基硫代)-1-甲基环丁烷甲酸酯中间体9e(1.10g，90％纯度7.52mmol)在乙腈(50mL)中的溶液中添加2M盐酸盐水溶液(0.2mL)和1-氯吡咯烷-2,5-二酮(1.35g，10.1mmol)。在0℃下搅拌1小时后，将所得混合物减压浓缩，并将所得粗产物倒入水(30mL)中，用乙酸乙酯(30mL)萃取三次。将合并的有机层用水(20mL)洗涤三次，经Na2SO4(s)干燥并浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝10:1)纯化，得到呈浅黄色油的标题化合物(820mg，纯度95％，73％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ4.48-4.33(m,1H),4.26-4.19(m,2H),3.16-3.10(m,0.8H),2.97-2.91(m,1.2H),2.63-2.57(m,1.2H),2.41-2.36(m,0.8H),1.48(s,3H),1.04-0.99(m,2H),0.07(s,9H)。
磺酰氯10：3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)环丁烷-1-磺酰氯
Figure BDA0002341655160000951
中间体10a：N-甲氧基-N-甲基-3-氧代环丁烷甲酰胺
在0℃向3-氧代环丁烷甲酸(11.4g，100mmol)和1-羟基苯并三唑(17.9g，150mmol)在二氯甲烷(200mL)中的溶液中添加N-甲氧基甲胺盐酸盐(9.70g，105mmol)、N'-(乙基碳酰亚胺基)-N,N-二甲基丙-1,3-二胺盐酸盐(28.8g，150mmol)和三乙胺(30.1g，300mmol)。在室温下搅拌16小时后，将混合物在水(200mL)中稀释，并在室温下搅拌0.5小时。将有机层分离，并将水相用二氯甲烷(200mL)萃取两次。将合并的有机层用盐水(200mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥，过滤并浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝30:1)纯化，得到呈黄色油的标题化合物(13.9g，88％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝1.02min，C7H11NO3的计算质量157.1，m/z发现值158.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ3.73(s,3H),3.63-3.55(m,1H),3.51-3.44(m,2H),3.26-3.17(m,5H)。
中间体10b：3-羟基-N-甲氧基-N-甲基环丁烷甲酰胺
在0℃将硼氢化钠(3.30g，88.0mmol)缓慢添加至N-甲氧基-N-甲基-3-氧代环丁烷甲酰胺中间体10a(13.9g，31.6mmol)在四氢呋喃(90mL)和甲醇(30mL)中的溶液中。在0℃下搅拌2小时后，将混合物用水(200mL)稀释，并用乙酸乙酯(300mL)萃取。将分离的有机层经干燥，过滤并浓缩，得到呈黄色油的粗标题化合物(7.20g，51％产率)，其无需进一步纯化即可用于下一步。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ4.23-4.12(m,1H),3.65(s,3H),3.17(s,3H),3.06-2.95(m,1H),2.59-2.50(m,2H),2.24-2.15(m,2H)。
中间体10c：3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)-N-甲氧基-N-甲基环丁烷甲酰胺在0℃将叔丁基二苯基氯硅烷(18.5g，67.5mmol)缓慢添加至3-羟基-N-甲氧基-N-甲基环丁烷甲酰胺中间体10b(7.20g，45.0mmol)和咪唑(6.10g，90.0mmol)在二氯甲烷(100mL)中的溶液中。在室温搅拌16小时后，将混合物用饱和碳酸氢钠水溶液(200mL)洗涤，然后用盐水(200mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥，过滤并浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝3:1)纯化，得到呈黄色油的标题化合物(15.0g，85％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.68-7.62(m,4H),7.43-7.33(m,6H),4.19-4.10(m,1H),3.60-3.57(m,3H),3.18-3.12(m,3H),2.76-2.72(m,1H),2.37-2.29(m,4H),1.03-1.00(m,9H)。
中间体10d：1-(3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)环丁基)乙酮
在0℃将1M甲基溴化镁在四氢呋喃(53mL，105mmol)中的溶液缓慢添加至3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)-N-甲氧基-N-甲基环丁烷甲酰胺中间体10c(14.0g，35.2mmol)在四氢呋喃(100mL)中的溶液。在室温下搅拌2小时后，将混合物用水(150mL)稀释，并用乙酸乙酯(150mL)萃取。将分离的有机层用盐水(150mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥，过滤并浓缩，得到呈白色固体的标题化合物(12.0g，97％产率)，其无需进一步纯化即可用于下一步。LC-MS(ESI)：RT＝2.09min，C22H28O2Si的计算质量352.2，m/z发现值353.4[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.66-7.60(m,4H),7.45-7.35(m,6H),4.18-4.10(m,1H),2.56-2.47(m,1H),2.35-2.31(m,2H),2.29-2.17(m,2H),2.04(s,3H),1.03(s,9H)。
中间体10e：3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)环丁基乙酸酯
在0℃向1-(3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)环丁基)乙酮中间体10d(7.06g，20.0mmol)和3-氯过氧苯甲酸(10.3g，60.0mmol)在二氯甲烷(100mL)中的溶液中添加碳酸氢钠(5.04g，60.0mmol)。在室温下搅拌16小时后，将混合物在水(200mL)中稀释，并在室温下搅拌0.5小时。将有机层分离，并将水相用二氯甲烷(100mL)萃取两次。将合并的有机层用盐水(200mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥，过滤并浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝30:1)纯化，得到呈黄色油的标题化合物(6.00g，81％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.65-7.62(m,4H),7.43-7.34(m,6H),4.46-4.35(m,1H),3.96-3.87(m,1H),2.69-2.59(m,2H),2.20-2.10(m,2H),2.03(s,3H),1.00(s,9H)。
中间体10f：3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)环丁醇
在氮气气氛下在0℃向3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)环丁基乙酸酯中间体10e(6.00g，16.3mmol)在四氢呋喃(30mL)、甲醇(30mL)和水(30mL)中的溶液中添加氢氧化锂一水合物(1.37g，32.5mmol)。在室温下搅拌2小时后，将混合物在室温下减压浓缩以除去挥发物，并用乙酸乙酯(200mL)萃取。将分离的有机层用水(150mL)和盐水(150mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥，过滤并浓缩，得到呈无色油的标题化合物(4.00g，75％产率)，其无需进一步纯化即可用于下一步。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.66-7.63(m,4H),7.40-7.37(m,6H),3.87-3.78(m,1H),3.77-3.67(m,1H),2.64-2.56(m,2H),2.07-1.97(m,2H),1.04(s,9H)。
中间体10g：3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)环丁基4-甲基苯磺酸酯
在0℃将4-甲基-苯磺酰氯(4.40g，22.9mmol)缓慢添加至3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)环丁醇中间体10f(4.00g，11.5mmol)在吡啶(2.70g，34.5mmol)和二氯甲烷(100mL)中的溶液中。在室温下搅拌16小时后，将混合物在水(100mL)中稀释，并在室温下搅拌0.5小时。将有机层分离，并将水相用二氯甲烷(100mL)萃取两次。将合并的有机层用0.5M盐酸盐水溶液(200mL)、盐水(100mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥，过滤并浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝20:1)纯化，得到呈黄色油的标题化合物(5.10g，92％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.77-7.69(m,2H),7.61-7.44(m,4H),7.35-7.27(m,8H),4.25-4.16(m,1H),3.82-3.72(m,1H),2.53-2.37(m,5H),2.29-2.19(m,2H),1.01-0.96(m,9H)。
中间体10h：S-(3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)环丁基)乙硫醇酯
在室温下向3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)环丁基4-甲基苯磺酸酯中间体10g(2.40g，5.00mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(50mL)中的溶液中添加硫代乙酸钾(2.30g，20.0mmol)。在100℃下搅拌16小时后，将反应混合物冷却至室温并浓缩，得到残余物，将其用5％wt氯化钠水溶液(200mL)稀释，并用乙酸乙酯(100mL)萃取两次。将合并的有机层经Na2SO4(s)干燥，过滤并浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝10:1)纯化，得到呈黄色油的标题化合物(1.60g，81％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.63-7.61(m,4H),7.44-7.35(m,8H),4.51-4.45(m,1H),3.92-3.86(m,1H),2.67-2.59(m,2H),2.26(s,3H),2.23-2.14(m,2H),1.04(s,9H)。
磺酰氯10：3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)环丁烷-1-磺酰氯
在0℃向S-(3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)环丁基)乙硫醇酯中间体10h(1.60g，4.20mmol)和2M盐酸盐水溶液(0.5mL，1.00mmol)在乙腈(20mL)中的溶液中缓慢添加N-氯琥珀酰亚胺(1.70g，12.5mmol)。在0℃下搅拌30分钟后，将反应混合物在25℃下在真空中浓缩，得到残余物，将其在乙酸乙酯(50mL)和饱和碳酸氢钠水溶液(50mL)之间分配。将分离的有机层用饱和硫代硫酸钠水溶液(50mL)洗涤，然后用盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝10:1)纯化，得到呈无色油的标题化合物(1.20g，70％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.62-7.57(m,4H),7.49-7.27(m,6H),4.69-4.61(m,1H),4.39-4.29(m,1H),2.87-2.75(m,2H),2.67-2.56(m,2H),1.06(s,6H),1.04(s,3H)。
磺酰氯11：乙基4-(氯磺酰基)环己烷甲酸酯
Figure BDA0002341655160000981
中间体11a：乙基4-羟基环己烷甲酸酯
在0℃向乙基4-氧代环己烷甲酸酯(30.0g，176mmol)在四氢呋喃(200mL)和甲醇(70mL)中的溶液中添加硼氢化钠(3.40g，88.0mmol)。然后将混合物在0℃下搅拌1小时。之后，将其用水(150mL)淬灭，并用乙酸乙酯(250mL)萃取两次。将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到呈无色油的标题化合物(29.5g，98％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ4.14-4.05(m,2H),3.89-3.81(m,0.3H),3.65-3.52(m,0.7H),2.39-2.31(m,0.3H),2.25-2.15(m,0.7H),2.02-1.90(m,4H),1.69-1.60(m,1.7H),1.54-1.40(m,1.3H),1.31-1.19(m,4H)。
中间体11b：乙基4-(甲苯磺酰基氧基)环己烷甲酸酯
在室温下向乙基4-羟基环己烷甲酸酯中间体11a(30.0g，174mmol)在二氯甲烷(500mL)中的溶液中添加N,N-二甲基吡啶-4-胺(2.12g，17.4mmol)、三乙胺(20.0g，192mmol)和4-甲基苯-1-磺酰氯(36.0g，192mmol)。在室温下在氮气气氛下搅拌过夜后，将混合物用0.5M盐酸盐水溶液(300mL)洗涤两次并且用盐水(500mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液在减压下浓缩，以得到呈棕色油的标题化合物(55.0g，96％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.79(d,J＝8.1Hz,2H),7.33(d,J＝8.4Hz,2H),4.74-4.68(m,0.3H),4.46-4.37(m,0.7H),4.15-4.06(m,2H),2.45(s,3H),2.35-2.20(m,1H),2.04-1.82(m,4.2H),1.74-1.68(m,0.8H),1.55-1.46(m,3H),1.28-1.20(m,3H)。
中间体11c：乙基4-(乙酰基硫代)环己烷甲酸酯
在室温向乙基4-(甲苯磺酰基氧基)环己烷甲酸酯中间体11b(10.0g，31.0mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(35mL)中的溶液中添加乙硫醇钾(7.00g，61.0mmol)。在氮气气氛下于110℃搅拌8小时后，将混合物冷却至室温，倒入水(300mL)中，用乙酸乙酯(150mL)萃取两次。将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到呈棕色油的标题化合物(5.00g，71％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ4.16-4.10(m,2H),3.80-3.73(m,1H),2.43-2.36(m,1H),2.31-2.25(m,4H),1.81-1.77(m,5H),1.61-1.59(m,2H),1.27-1.22(m,3H)。
磺酰氯11：乙基4-(氯磺酰基)环己烷甲酸酯
在0℃向乙基4-(乙酰基硫代)环己烷甲酸酯中间体11c(5.00g，21.7mmol)在乙腈(50mL)和水(1mL)中的溶液中添加2M盐酸盐水溶液(3.5mL，7.0mmol)和1-氯吡咯烷-2,5-二酮(11.6g，86.9mmol)。在氮气气氛下于0℃下搅拌2小时后，将混合物用水(50mL)淬灭，并用乙酸乙酯(50mL)萃取两次。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到呈无色油的标题化合物(5.00g，91％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ4.19(d,J＝7.2Hz,2H),3.59-3.49(m,1H),2.69-2.67(m,0.7H),2.54-2.51(m,0.3H),2.41-2.37(m,2H),2.31-2.27(m,2H),2.07-1.97(m,2H),1.69-1.62(m,2H),1.30-1.26(t,J＝7.2Hz,3H)。
磺酰氯12：叔丁基氯磺酰基氨基甲酸酯
在0℃向硫异氰基氯化物(1.14g，7.80mmol)在甲苯(2mL)中的溶液中添加2-甲基丙-2-醇(0.59g，7.80mmol)在甲苯(2mL)中的溶液。在0℃下搅拌1小时后，将混合物用石油醚(5mL)稀释并过滤。将获得的固体干燥，得到呈白色固体的标题化合物(810mg，48％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.49(s,1H),1.62-1.25(m,9H)。
磺酰氯13：trans-甲基-4-((氯磺酰基)甲基)环己烷-1-甲酸酯
Figure BDA0002341655160001002
中间体13a：trans-甲基-4-(羟基甲基)环己烷-1-甲酸酯
在-78℃向trans-4-(甲氧基羰基)环己烷-1-甲酸(5.0g，26.9mmol)在THF(50mL)中的溶液中添加硼烷-四氢呋喃络合物(34.9mL，1M，34.9mmol)，添加后，将混合物缓慢温热至室温，并在室温搅拌4小时。将混合物用MeOH(25mL)淬灭，并在室温搅拌1小时。然后将混合物在真空中浓缩，得到呈无色油的trans-甲基-4-(羟甲基)环己烷-1-甲酸酯(6g，粗品)，其无需进一步纯化即可用于下一步。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ3.66(s,3H),3.64-3.46(m,2H),2.35-2.20(m,1H),2.13-1.97(m,2H),1.93-1.79(m,1H),1.60-1.33(m,4H),1.05-0.86(m,2H)。
中间体13b：trans-甲基-4-((甲苯磺酰基氧基)甲基)环己烷-1-甲酸酯
在0℃向trans-甲基-4-(羟基甲基)环己烷-1-甲酸酯中间体13a(6g，34.8mmol)和4-甲基苯磺酰氯(6.6g，34.8mmol)在DCM(60mL)中的溶液中添加吡啶(2.806mL，0.982g/mL，34.8mmol)。在室温搅拌16小时后，将混合物用饱和碳酸氢钠水溶液(15mL)洗涤，然后用盐水(15mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥，过滤并浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法(己烷:乙酸乙酯＝10:1)纯化，得到呈无色油的标题化合物(4.5g，39.5％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.78(d,J＝8.0Hz,2H),7.35(d,J＝8.0Hz,2H),3.83(d,J＝8.0Hz,2H),3.85(s,3H),2.45(s,3H),2.25-2.16(m,1H),2.02-1.94(m,2H),1.83-1.75(m,2H),1.69-1.61(m,1H),1.47-1.36(m,2H),1.04-0.91(m,2H)。
中间体13c：trans-甲基-4-((乙酰基硫代)甲基)环己烷-1-甲酸酯
在室温向trans-甲基-4-((甲苯磺酰基氧基)甲基)环己烷-1-甲酸酯中间体13b(4.5g，13.8mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(45mL)中的溶液中添加硫代乙酸钾(3.10g，27.6mmol)。在80℃下搅拌16小时后，将反应混合物冷却至室温，用5％氯化钠水溶液(50mL)淬灭，并用乙酸乙酯(100mL)萃取两次。将合并的有机层经Na2SO4(s)干燥，过滤并浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(己烷:EtOAc＝20:1)纯化，得到呈棕色油的标题化合物(2.5g，78％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ3.66(s,3H),2.80(d,J＝8.0Hz,2H),2.34(s,3H),2.26-2.19(m,1H),2.04-1.94(m,2H),1.94-1.84(m,2H),1.51-1.34(m,3H),1.02-0.96(m,2H)。
磺酰氯13：trans-甲基-4-((氯磺酰基)甲基)环己烷-1-甲酸酯
在0℃向trans-甲基-4-((乙酰基硫代)甲基)环己烷-1-甲酸酯中间体13c(2.5g，10.8mmol)和2M盐酸盐水溶液(8.1mL，16.2mmol)在乙腈(25mL)中的溶液中添加1-氯吡咯烷-2,5-二酮(5.8g，43.4mmol)。在0℃下搅拌1小时后，将混合物用水(20mL)稀释，用乙酸乙酯(20mL)萃取两次。将合并的有机层用饱和NaHCO3(100mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝20:1至10:1)纯化，得到呈无色油的标题化合物(1.5g，54％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ3.68(s,3H),3.63(d,J＝6.2Hz,2H),2.30-2.22(m,1H),2.15-2.03(m,4H),1.55-1.47(m,2H),1.29-1.13(m,3H)。
磺酰氯14：(trans)-甲基4-((氯磺酰基)甲基)环己烷-甲酸酯
Figure BDA0002341655160001011
中间体14a：(trans)-甲基4-((甲苯磺酰基氧基)甲基)环己烷甲酸酯
在室温向(1r,4r)-甲基4-(羟基甲基)环己烷甲酸酯(5.00g，29.0mmol)在二氯甲烷(80mL)中的溶液中添加N,N-二甲基吡啶-4-胺(355mg，2.91mmol)、三乙胺(3.23g，31.9mmol)和对甲苯磺酰氯(6.0g，31.5mmol)。在室温下在氮气气氛下搅拌过夜后，将混合物用0.5M盐酸盐水溶液(80mL)洗涤两次并且用水(80mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到呈白色固体的标题化合物(8.0g，根据NMR的纯度为85％，72％产率)。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.78(d,J＝8.0Hz,2H),7.35(d,J＝8.4Hz,2H),3.83(d,J＝6.4Hz,2H),3.65(s,3H),2.46(s,3H),2.04-1.77(m,5H),1.49-1.34(m,3H),1.04-0.92(m,2H)。
中间体14b：(trans)-甲基4-((乙酰基硫代)甲基)环己烷甲酸酯
在室温向(1r,4r)-甲基4-((甲苯磺酰基氧基)甲基)环己烷甲酸酯中间体14a(8.00g，85％纯度，20.8mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(50mL)中的溶液中添加硫代乙酸钾(5.00g，43.8mmol)。在氮气气氛下在100℃搅拌4小时后，将混合物冷却并吸收于水(200mL)中，用乙酸乙酯(80mL)萃取两次。将合并的有机层用盐水(80mL)洗涤，经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液在减压下浓缩，以得到呈棕色油的标题化合物(5.40g，96％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ3.60(s,1.2H),3.59(s,1.8H),2.73(d,J＝6.8Hz,2H),2.27(s,3H),1.99-1.91(m,5H),1.44-1.32(m,5H)。
磺酰氯14：(trans)-甲基4-((氯磺酰基)甲基)环己烷-甲酸酯
在0℃向(1r,4r)-甲基4-((乙酰基硫代)甲基)环己烷甲酸酯中间体14b(2.0g，85％纯度，7.38mmol)在乙腈(50mL)中的溶液中添加2M盐酸盐水溶液(1.5mL)和1-氯吡咯烷-2,5-二酮(4.6g，34.4mmol)。在该温度下在氮气气氛下搅拌2小时后，将混合物用水(30mL)淬灭，并用乙酸乙酯(30mL)萃取两次。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到呈黄色固体的标题化合物(1.10g，根据NMR的纯度为90％，53％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ3.68(s,3H),3.64(d,J＝6.0Hz,2H),2.30-2.18(m,2H),2.14-2.05(m,4H),1.57-1.47(m,2H),1.25-1.16(m,2H)。
磺酰氯15：甲基4-((氯磺酰基)甲基)-4-甲基环己烷甲酸酯
Figure BDA0002341655160001031
中间体15a：8-甲基-1,4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸酯
在-78℃在氮气气氛下向乙基1,4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸酯(3.00g，95％纯度，13.3mmol)在干四氢呋喃(30mL)中的溶液中滴加在四氢呋喃中的2.0M二异丙基酰胺锂(8.0mL，16.0mmol)。添加后，将混合物在相同温度下搅拌30分钟。在-78℃滴加碘甲烷(1.3mL，20.9mmol)。在-78℃下搅拌1小时，然后在室温下再搅拌1小时后，将反应用饱和氯化铵水溶液(30mL)淬灭，并用乙酸乙酯(30mL)萃取两次。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液浓缩并通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝20:1)纯化，得到呈浅黄色油的标题化合物(2.40g，纯度95％，75％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝1.61min，C12H20O4的计算质量228.1，m/z发现值229.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ4.14(q,J＝7.2Hz,2H),3.94(s,4H),2.16-2.11(m,2H),1.69-1.60(m,3.6H),1.59-1.57(m,0.4H),1.54-1.47(m,2H),1.25(t,J＝7.2Hz,3H),1.19(s,3H)。
中间体15b：(8-甲基-1,4-二氧杂螺[4.5]癸-8-基)甲醇
在0℃向乙基8-甲基-1,4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸酯中间体15a(2.40g，95％纯度，9.99mmol)在干四氢呋喃(12mL)中的溶液中缓慢添加氢化铝锂(379mg，9.99mmol)。然后将混合物在0℃下搅拌2小时。将反应用水(0.38mL)和15％氢氧化钠水溶液(0.38mL)淬灭。将得到的悬浮液通过硅藻土过滤，并用四氢呋喃(10mL)和乙酸乙酯(10mL)洗涤。将滤液浓缩，得到呈白色固体的标题化合物(2.00g，90％纯度，97％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ4.47(t,J＝5.2Hz,1H),3.82(s,4H),3.13(d,J＝5.2Hz,2H),1.52-1.41(m,6H),1.24-1.19(m,2H),0.83(s,3H)。
中间体15c：8-((苄基氧基)甲基)-8-甲基-1,4-二氧杂螺[4.5]癸烷
在0℃向(8-甲基-1,4-二氧杂螺[4.5]癸-8-基)甲醇中间体15b(2.00g，90％纯度，9.67mmol)在干四氢呋喃(15mL)中的溶液中缓慢添加氢化钠(在矿物油中60％，464mg，11.6mmol)。添加后，将悬浮液在0℃下搅拌20分钟。滴加苄基溴(1.7mL，14.3mmol)后，将混合物在室温搅拌过夜。将反应混合物用水(30mL)淬灭，并用乙酸乙酯(30mL)萃取两次。将合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液浓缩，并通过硅胶色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝30:1至20:1)纯化，得到呈白色固体的标题化合物(2.20g，纯度95％，78％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝1.54min，C17H24O3的计算质量276.2，m/z发现值277.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.36-7.28(m,5H),4.52(s,2H),3.93(s,4H),3.21(s,2H),1.69-1.60(m,4H),1.58-1.55(m,2H),1.45-1.40(m,2H),1.00(s,3H)。
中间体15d：4-((苄基氧基)甲基)-4-甲基环己酮
将8-((苄基氧基)甲基)-8-甲基-1,4-二氧杂螺[4.5]癸烷中间体15c(2.20g，95％纯度，7.56mmol)在二氯甲烷(20mL)和三氟乙酸(20mL)中的溶液在30℃下搅拌过夜。将混合物减压浓缩以除去挥发物。将获得的残余物溶于二氯甲烷(50mL)中，并用饱和碳酸氢钠水溶液(50mL)洗涤两次并用盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液浓缩并通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝20:1)纯化，得到呈无色油的标题化合物(1.75g，纯度95％，95％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝1.27min，C15H20O2的计算质量232.1，m/z发现值233.0[M+H]+。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.38-7.27(m,5H),4.54(s,2H),3.31(s,2H),2.41-2.28(m,4H),1.85-1.81(m,2H),1.71-1.65(m,2H),1.14(s,3H)。
中间体15e：(((4-(甲氧基亚甲基)-1-甲基环己基)甲氧基)-甲基)苯
在0℃向(甲氧基甲基)三苯基鏻氯化物EO8495_1093.5(3.80g，11.1mmol)在干四氢呋喃(20mL)中的悬浮液中缓慢添加叔丁醇钾(1.25g，11.1mmol)以保持内部温度低于5℃。加入之后，将混合物在0℃下搅拌30分钟。添加4-((苄基氧基)甲基)-4-甲基环己酮中间体15d(1.70g，95％纯度，6.95mmol)在干四氢呋喃(5mL)中的溶液。然后将混合物温热至室温，并在室温搅拌过夜。将混合物用水(30mL)淬灭，并用乙酸乙酯(30mL)萃取两次。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液浓缩并通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝50:1至30:1)纯化，得到呈浅黄色油的标题化合物(1.70g，纯度95％，89％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.36-7.28(m,5H),5.75(s,1H),4.51(s,2H),3.53(s,3H),3.20(s,2H),2.33-2.27(m,1H),2.10-1.96(m,2H),1.93-1.87(m,1H),1.47-1.30(m,4H),1.00(s,3H)。
中间体15f：4-((苄基氧基)甲基)-4-甲基环己烷甲醛
在0℃向(((4-(甲氧基亚甲基)-1-甲基环己基)甲氧基)甲基)
苯中间体15e(1.70g，95％纯度，6.20mmol)在四氢呋喃(12mL)中的溶液中缓慢添加6M盐酸盐水溶液(3.1mL，18.6mmol)。在室温搅拌2小时后，将反应混合物用盐水(30mL)淬灭，并用乙酸乙酯(30mL)萃取两次。将合并的有机层经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液浓缩，得到呈浅黄色油的标题化合物(1.60g，90％纯度，94％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.65(d,J＝1.2Hz,0.6H),9.63(d,J＝0.8Hz,0.4H),7.37-7.27(m,5H),4.51(s,1.2H),4.49(s,0.8H),3.22(s,0.8H),3.15(s,1.2H),2.27-2.13(m,1H),1.83-1.72(m,2H),1.67-1.61(m,1H),1.59-1.37(m,4H),1.24-1.17(m,1H),0.99(s,1.2H),0.93(s,1.8H)。
中间体15g：4-((苄基氧基)甲基)-4-甲基环己烷甲酸
在0℃向4-((苄基氧基)甲基)-4-甲基环己烷甲醛中间体15f(1.60g，90％纯度，5.85mmol)在丙酮(45mL)和水(9mL)中的溶液中添加高锰酸钾(2.30g，14.6mmol)。在0℃至室温搅拌1小时后，添加固体亚硫酸氢钠(3.10g，29.8mmol)，然后将混合物用丙酮(50mL)和水(50mL)稀释。将所得悬浮液在室温下搅拌15分钟并通过硅藻土过滤。将滤液在室温下在减压下浓缩以除去丙酮。用固体柠檬酸将所得水溶液酸化至pH约3，并用乙酸乙酯(50mL)萃取两次。将合并的有机层经Na2SO4(s)干燥并浓缩，得到呈黄色油的标题化合物(1.5g，70％纯度，68％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.06(s,1H),7.37-7.26(m,5H),4.47(s,0.8H),4.46(s,1.2H),3.23(s,0.8H),3.11(s,1.2H),2.20-2.05(m,1H),1.71-1.56(m,3H),1.53-1.43(m,2H),1.39-1.25(m,2H),1.13-1.05(m,1H),0.90(s,1.2H),0.89(s,1.8H)。
中间体15h：甲基4-((苄基氧基)甲基)-4-甲基环己烷甲酸酯
向4-((苄基氧基)甲基)-4-甲基环己烷甲酸中间体15g(1.50g，70％纯度，4.00mmol)在干甲醇(40mL)中的溶液中添加2滴浓硫酸。在75℃下搅拌过夜后，将混合物浓缩并通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝30:1)纯化，得到呈浅黄色油的标题化合物(1.00g，纯度95％，86％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝1.35min，C17H24O3的计算质量276.2，m/z发现值294.0[M+NH4]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.36-7.27(m,5H),4.51(s,2H),3.67(s,1.8H),3.66(s,1.2H),3.29(s,0.8H),3.13(s,1.2H),2.32-2.18(m,1H),1.81-1.52(m,4.8H),1.48-1.45(m,1.2H),1.39-1.32(m,1.2H),1.19-1.11(m,0.8H),0.97(s,1.2H),0.96(s,1.8H)。
中间体15i：甲基4-(羟基甲基)-4-甲基环己烷甲酸酯
向甲基4-((苄基氧基)甲基)-4-甲基环己烷甲酸酯中间体15h(1.00g，95％纯度，3.44mmol)在甲醇(30mL)中的溶液中添加10％钯炭(250mg)。在30℃在氢气气氛(50psi)下搅拌过夜后，将混合物过滤并将滤液浓缩，得到呈无色油的标题化合物(670mg，95％纯度，99％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ3.68(s,1.8H),3.67(s,1.2H),3.48(s,0.8H),3.31(s,1.2H),2.35-2.18(m,1H),1.85-1.73(m,2H),1.69-1.58(m,2H),1.45-1.42(m,1H),1.32-1.24(m,2H),1.20-1.13(m,1H),0.94(s,1.8H),0.93(s,1.2H)。
中间体15j：甲基4-甲基-4-(((甲基磺酰基)氧基)甲基)-环己烷甲酸酯
在室温向甲基4-(羟基甲基)-4-甲基环己烷甲酸酯中间体15i(670mg，95％纯度，3.42mmol)在二氯甲烷(5mL)中的溶液中添加N,N-二异丙基乙胺(650mg，5.03mmol)和甲烷磺酰氯(500mg，4.37mmol)。在氮气气氛下于30℃搅拌过夜后，将混合物浓缩并用水(10mL)稀释，并用乙酸乙酯(20mL)萃取两次。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液浓缩，得到呈棕色油的标题化合物(1.07g，80％纯度，95％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ4.06(s,0.8H),3.89(s,1.2H),3.69(s,1.4H),3.68(s,1.6H),3.02(s,3H),2.36-2.20(m,1H),1.87-1.80(m,1.8H),1.69-1.63(m,3H),1.52-1.49(m,1.2H),1.37-1.23(m,2H),1.02(s,1.8H),1.01(s,1.2H)。
中间体15k：甲基4-((乙酰基硫代)甲基)-4-甲基环己烷甲酸酯
向甲基4-甲基-4-(((甲基磺酰基)氧基)甲基)环己烷
甲酸酯中间体15j(1.07g，80％纯度，3.24mmol)在N,N-二甲基
甲酰胺(10mL)中的溶液中添加硫代乙酸钾(1.20g，10.5mmol)。在氮气气氛下于80℃搅拌5小时后，将混合物倒入水(40mL)中，并用乙酸乙酯(30mL)萃取两次。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液浓缩并通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝50:1至20:1)纯化，得到呈棕色油的标题化合物(340mg，纯度90％，39％产率)。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ3.67(s,1.6H),3.66(s,1.4H),2.99(s,1H),2.86(s,1H),2.35(s,1.6H),2.34(s,1.4H),2.28-2.19(m,1H),1.81-1.58(m,5.6H),1.49-1.46(m,1.1H),1.26-1.19(m,1.3H),0.94(s,1.4H),0.89(s,1.6H)。
磺酰氯15：甲基4-((氯磺酰基)甲基)-4-甲基环己烷甲酸酯
在0℃向甲基4-((乙酰基硫代)甲基)-4-甲基环己烷甲酸酯中间体15k(340mg，90％纯度，1.25mmol)在乙腈(5mL)中的溶液中添加2M盐酸盐水溶液(0.2mL)和N-氯琥珀酰亚胺(0.68g，4.99mmol)。在0℃下搅拌2小时后，将混合物用水(20mL)稀释，并且用乙酸乙酯(20mL)萃取两次。将合并的有机层浓缩，并通过硅胶色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝30:1至10:1)纯化，得到呈黄色油的标题化合物(280mg，90％纯度，75％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ3.91(s,1H),3.78(s,1H),3.69(s,1.6H),3.68(s,1.4H),2.38-2.25(m,1H),1.90-1.48(m,8H),1.32(s,1.6H),1.31(s,1.4H)。
磺酰氯16：甲基3-((氯磺酰基)甲基)双环[1.1.1]戊烷-1-甲酸酯
中间体16a：甲基3-(羟基甲基)双环[1.1.1]戊烷-1-甲酸酯
在-60℃在氮气气氛下向3-(甲氧基羰基)双环[1.1.1]戊烷-1-甲酸(5.00g，29.4mmol)在四氢呋喃(80mL)中的溶液中添加10M硼烷-二甲基硫醚络合物(5mL，50.0mmol)。在氮气气氛下于室温搅拌2小时后，将混合物减压浓缩，得到残余物，将其溶于二氯甲烷(20mL)中，并用饱和碳酸氢钠水溶液(20mL)洗涤两次。将合并的水层用二氯甲烷(60mL)萃取两次。将合并的有机层经Na2SO4(s)干燥，过滤并减压浓缩，得到呈无色油的标题化合物(4.00g，根据1H NMR的纯度为90％，78％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ3.68(s,3H),3.63(s,2H),2.00(s,6H)。
中间体16b：甲基3-((甲苯磺酰基氧基)甲基)双环[1.1.1]戊烷-1-甲酸酯
在室温向甲基4-(羟基甲基)双环[1.1.1]戊烷-2-甲酸酯中间体16a(1.00g，90％纯度，5.77mmol)在二氯甲烷(10mL)中的溶液中添加4-甲基苯-1-磺酰氯(1.20g，6.30mmol)和N,N-二甲基吡啶-4-胺(1.40g，11.5mmol)。在室温下搅拌3小时后，将混合物减压浓缩，得到残余物，将其在水(10mL)中稀释，用1M盐酸盐水溶液(2mL)酸化至pH约7，并用乙酸乙酯(50mL)萃取两次。将合并的有机层用水(20mL)洗涤两次并且用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝5:1至2:1)纯化，得到呈白色固体的标题化合物(1.70g，根据1H NMR的纯度为90％，86％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.78(d,J＝8.4Hz,2H),7.35(d,J＝8.0Hz,2H),4.03(s,2H),3.66(s,3H),2.46(s,3H),1.97(s,6H)。
中间体16c：甲基3-((乙酰基硫代)甲基)双环[1.1.1]戊烷-1-甲酸酯
在室温向甲基4-(羟基甲基)双环[1.1.1]戊烷-2-甲酸酯中间体16b(1.70g，90％纯度，4.93mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中的溶液中添加硫代乙酸钾(1.20g，10.5mmol)。在100℃下搅拌2小时后，将混合物溶于乙酸乙酯(40mL)中，并用饱和碳酸氢钠(60mL)洗涤两次。将合并的水层用乙酸乙酯(80mL)萃取两次。将合并的有机层用水(30mL)洗涤两次并且用盐水(30mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到呈棕色油的标题化合物(1.10g，根据1H NMR的纯度为90％，94％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ3.66(s,3H),3.03(s,2H),2.35(s,3H),1.96(s,6H)。
磺酰氯16：甲基3-((氯磺酰基)甲基)双环[1.1.1]戊烷-1-甲酸酯
向甲基3-((乙酰基硫代)甲基)双环[1.1.1]戊烷-1-甲酸酯中间体16c(1.10g，90％纯度，4.62mmol)在乙腈(5mL)中的溶液中添加2M盐酸盐水溶液(0.5mL，1.00mmol)和1-氯吡咯烷-2,5-二酮(2.46g，18.4mmol)。在0℃下搅拌1小时后，将混合物浓缩，得到残余物，将其用稀水(10mL)稀释，并用乙酸乙酯(40mL)萃取两次。将合并的有机层用水(15mL)洗涤两次并且用盐水(15mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝10:1)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物(1.10g，根据1H NMR的纯度为90％，90％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ3.93(s,2H),3.70(s,3H),2.31(s,6H)。
磺酰氯17：1-(3-羟基-3-甲基丁基)-1H-吡唑-4-磺酰氯
Figure BDA0002341655160001091
中间体17a：甲基3-(4-碘-1H-吡唑-1-基)丙酸酯
在0℃向甲基4-碘-1H-吡唑(3.00g，15.5mmol)在乙腈(45mL)中的溶液中添加1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一烯-7-烯(1.17g，7.73mmol)，随后添加丙烯酸甲酯(2.65g，30.9mmol)。在室温下搅拌2小时后，将反应混合物用1M盐酸盐水溶液(30mL)淬灭，并用乙酸乙酯(30mL)萃取两次。将合并的有机层用水(20mL)和盐水(20mL)洗涤两次，经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到呈棕色固体的标题化合物(1.00g，77％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.50(s,2H),4.42(t,J＝6.4Hz,2H),3.69(s,3H),2.88(t,J＝6.4Hz,2H)。
中间体17b：甲基3-(4-(苄基硫代)-1H-吡唑-1-基)丙酸酯
在氮气气氛下向甲基3-(4-碘-1H-吡唑-1-基)丙酸酯中间体17a(3.30g，11.8mmol)和苯基-甲硫醇(2.20g，17.7mmol)在1,4-二噁烷(50mL)中的溶液中添加N,N-二异丙基乙胺(2.30g，17.8mmol)，随后在氮气气氛下添加4,5-双(二苯基膦)-9,9-二甲基呫吨(102mg，0.177mmol)和三(二苯亚甲基丙酮)二钯(162mg，0.177mmol)。在80℃下搅拌6小时后，将反应混合物冷却至室温并减压浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝4:1)纯化，得到呈棕色油的标题化合物(1.60g，50％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝2.275min，C14H16N2O2S的计算质量276.1，m/z发现值277.1[M+H]+。
中间体17c：4-(4-(苄基硫代)-1H-吡唑-1-基)-2-甲基丁-2-醇
在0℃向甲基3-(4-(苄基硫代)-1H-吡唑-1-基)丙酸酯中间体17b(500mg，1.80mmol)在四氢呋喃(20mL)中的溶液中添加在四氢呋喃中的3M甲基溴化镁(3mL，9.00mmol)。在0℃下搅拌1小时后，将反应混合物用1M盐酸盐水溶液(20mL)淬灭，并用乙酸乙酯(30mL)萃取两次。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤两次，经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到粗产物，将其通过C18柱(乙腈:水＝40％至60％)纯化，得到呈无色油的标题化合物(200mg，40％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝2.089min，C15H20N2OS的计算质量276.1，m/z发现值277.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.32(s,1H),7.25-7.20(m,2H),7.17-7.10(m,4H),4.18(t,J＝7.2Hz,2H),3.76(s,2H),2.26(br s,1H),1.96(t,J＝7.2Hz,2H),1.24(s,6H)。
磺酰氯17：1-(3-羟基-3-甲基丁基)-1H-吡唑-4-磺酰氯
在0℃在氮气气氛下向4-(4-(苄基硫代)-1H-吡唑-1-基)-2-甲基丁-2-醇中间体17c(200mg，0.722mmol)在乙腈(10mL)和水(0.2mL)中的溶液中添加乙酸(0.2mL)和1,3-二氯-5,5-二甲基乙内酰脲(284mg，1.44mmol)。在0℃下搅拌1小时后，将混合物用水(20mL)稀释，并用乙酸乙酯(20mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤两次，经Na2SO4(s)干燥，过滤并减压浓缩，得到呈无色油的标题化合物(200mg，50％纯度，55％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝2.038min，C8H13ClN2O3S的计算质量252.0，m/z发现值252.9[M+H]+。
磺酰氯18：2-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)乙烷磺酰氯
中间体18a：2-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)乙基4-甲基苯磺酸酯
在室温向2-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)乙醇(5.00g，30.5mmol)在二氯甲烷(70mL)中的溶液中添加N,N-二甲基吡啶-4-胺(366mg，3.00mmol)、三乙胺(3.30g，32.7mmol)和4-甲基苯-1-磺酰氯(6.30g，33.1mmol)。在室温在氮气气氛下搅拌过夜后，将混合物用1M盐酸盐水溶液(50mL)和盐水(80mL)洗涤三次，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到呈白色油标题化合物(8.30g，86％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.82-7.79(m,2H),7.36-7.34(m,2H),4.17(s,2H),3.69-3.54(m,10H),3.38(s,3H),2.46(s,3H)。
中间体18b：S-(2-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)乙基)乙硫醇酯
在室温向2-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)乙基4-甲基苯磺酸酯中间体18a(1.50g，4.71mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(25mL)中的溶液中添加乙硫醇钾(1.08g，9.47mmol)。在氮气气氛下于100℃搅拌5小时后，将其冷却至室温，倒入水(100mL)中，用乙酸乙酯(50mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(80mL)洗涤，经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到呈棕色油的标题化合物(1.10g，根据1H NMR的纯度为90％，95％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ3.62-3.54(m,10H),3.37(s,3H),3.08(br s,2H),2.32(s,3H)。
磺酰氯18：2-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)乙烷磺酰氯
在0℃向S-(2-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)乙基)乙硫醇酯中间体18b(873mg，90％纯度，3.54mmol)在乙腈(10mL)中的溶液中添加2M盐酸盐水溶液(0.5mL和1-氯吡咯烷-2,5-二酮(1.89g，14.2mmol)。在该温度下在氮气气氛下搅拌2小时后，将混合物用水(30mL)淬灭，并用乙酸乙酯(30mL)萃取两次。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到呈白色油的标题化合物(900mg，根据1H NMR的纯度为94％，97％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ4.15-4.09(m,2H),4.02-3.99(m,2H),3.73-3.71(m,2H),3.67-3.64(m,4H),3.57-3.55(m,2H),3.38(d,J＝1.2Hz,3H)。
磺酰氯19：2,5,8,11-四氧杂三癸烷-13-磺酰氯
Figure BDA0002341655160001111
中间体19a：2,5,8,11-四氧杂三癸-13-基4-甲基苯磺酸酯
在氮气气氛下向2,5,8,11-四氧杂三癸-13-醇(1.50g，7.21mmol)、三乙胺(2.18g，21.6mmol)和N,N-二甲基吡啶-4-胺(88mg，0.720mmol)在二氯甲烷(30mL)中的溶液中添加4-甲基苯-1-磺酰氯(1.37g，7.19mmol)。在室温下搅拌过夜后，将反应混合物用水(30mL)洗涤三次，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到呈无色油的标题化合物(1.80g，86％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.82-7.79(m,2H),7.36-7.27(m,2H),4.16(s,2H),3.70-3.56(m,14H),3.38(s,3H),2.45(s,3H)。
中间体19b：S-2,5,8,11-四氧杂三癸-13-基乙硫醇酯
在室温向2,5,8,11-四氧杂三癸-13-基4-甲基苯磺酸酯中间体19a(1.00g，2.76mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(20mL)中的溶液中添加硫代乙酸钾(670mg，5.88mmol)。在100℃下搅拌4小时后，将反应混合物冷却至室温，倒入水(20mL)中，并用乙酸乙酯(40mL)萃取三次。将合并的有机层用水(20mL)洗涤三次，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液浓缩，得到呈无色油的标题化合物(800mg，95％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ3.67-3.55(m,14H),3.39-3.67(m,3H),3.12-3.06(m,2H),2.34-2.32(sm,3H)。
磺酰氯19：2,5,8,11-四氧杂三癸烷-13-磺酰氯
在0℃向S-2,5,8,11-四氧杂三癸-13-基乙硫醇酯中间体19b(600mg，2.26mmol)在乙腈(8mL)中的溶液中添加2M盐酸盐水溶液(0.35mL)和1-氯吡咯烷-2,5-二酮(1.10g，8.24mmol)。在0℃下搅拌2小时后，将混合物减压浓缩，得到残余物，将其用水(30mL)稀释，用乙酸乙酯(20mL)萃取三次。将合并的有机层用水(20mL)洗涤三次，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液浓缩，得到呈无色油的标题化合物(400mg，64％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ4.07-3.87(m,4H),3.63-3.41(m,12H),3.35(s,3H)。
磺酰氯20：2,2-二甲基-3,3-二苯基-4,7,10-三氧杂-3-硅十二烷-12-磺酰氯
Figure BDA0002341655160001121
中间体20a：12-氯-2,2-二甲基-3,3-二苯基-4,7,10-三氧杂-3-硅十二烷
在0℃向2-(2-(2-氯乙氧基)乙氧基)乙醇(5.04g，29.9mmol)在四氢呋喃(45mL)中的溶液中添加1H-咪唑(2.55g，37.5mmol)和叔丁基氯二苯基硅烷(9.06g，33.0mmol)。在室温搅拌过夜后，向混合物添加水(20mL)，并用乙酸乙酯(20mL)萃取三次。将合并的有机层经Na2SO4(s)干燥，过滤并浓缩，得到呈无色油粗产物(13g，粗品)，其无需进一步纯化即可用于下一步。LC-MS(ESI)：RT＝2.180min，C22H31ClO3Si的计算质量406.2，m/z发现值424.1[M+NH4]+。
中间体20b：12-氯-2,2-二甲基-3,3-二苯基-4,7,10-三氧杂-3-硅十二烷
在室温向12-氯-2,2-二甲基-3,3-二苯基-4,7,10-三氧杂-3-硅十二烷中间体20a(12g，29.5mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(50mL)中的溶液中添加乙硫醇钾(6.74g，59.1mmol)。在80℃下搅拌过夜后，将混合物冷却至室温，倒入水(200mL)中，并用乙酸乙酯(200mL)萃取两次，将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥，过滤并浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝40:1至20:1)纯化，得到呈黄色油的标题化合物(7.50g，56％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.70-7.67(m,4H),7.42-7.36(m,6H),3.81(t,J＝5.2Hz,2H),3.64-3.58(m,8H),3.08(t,J＝6.4Hz,2H),2.32(s,3H),1.05(s,9H)。
磺酰氯20：2,2-二甲基-3,3-二苯基-4,7,10-三氧杂-3-硅十二烷-12-磺酰氯
在0℃向12-氯-2,2-二甲基-3,3-二苯基-4,7,10-三氧杂-3-硅十二烷中间体20b(2.23g，5.00mmol)在乙腈(20mL)中的溶液中添加2N盐酸盐水溶液(0.75mL，1.5mmol)和N-氯琥珀酰亚胺(2.67g，20.0mmol)。在0℃下搅拌1小时后，将混合物用水(50mL)淬灭，并用二氯甲烷(50mL)萃取两次，将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4(s),干燥，过滤并浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝30:1至20:1)纯化，得到呈黄色油的标题化合物(0.50g，20％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.67-7.63(m,4H),7.39-7.25(m,6H),4.09-4.03(m,2H),3.91-3.85(m,2H),3.81-3.77(m,2H),3.65-3.58(m,6H),1.04(s,9H)。
磺酰氯21：(trans)-叔丁基3-(4-(氯磺酰基)-1H-吡唑-1-基)环丁烷甲酸酯
Figure BDA0002341655160001131
中间体21a：叔丁基3-氧代环丁烷甲酸酯
在0℃在氮气气氛下向3-氧代环丁烷甲酸(8.0g，70mmol)和焦碳酸二叔丁酯(31.0g，140mmol)在叔丁醇(150mL)中的溶液中添加4-二甲基氨基吡啶(3.4g，28mmol)。在室温下搅拌过夜后，将混合物用水(80mL)淬灭，然后减压浓缩以除去挥发物，用乙酸乙酯(200mL)萃取三次。将合并的有机层用2M盐酸盐水溶液(100mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥并浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝10:1)纯化，得到呈浅黄色油的标题化合物(10g，70％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ3.34-2.96(m,5H),1.40(s,9H)。
中间体21b：(cis)-叔丁基3-羟基环丁烷甲酸酯
在氮气气氛下向叔丁基3-氧代环丁烷甲酸酯中间体21a(10g，46.7mmol)在四氢呋喃(60mL)和甲醇(20mL)中的溶液中滴加硼氢化钠(900mg，23.0mmol)。在0℃下搅拌2小时后，将混合物用水(20mL)淬灭，并用乙酸乙酯(100mL)萃取三次。将合并的有机层经Na2SO4(s)干燥并浓缩，得到呈黄色油的标题化合物(7g，70％产率)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ5.22-5.14(m,1H),4.04-3.92(m,1H),2.55-2.31(m,3H),2.08-1.88(m,2H),1.43(s,9H)。
中间体21c：(cis)-叔丁基3-((甲基磺酰基)氧基)环丁烷甲酸酯
在氮气气氛下向(cis)-叔丁基3-羟基环丁烷甲酸酯中间体21b(5.0g，23mmol)在二氯甲烷(30mL)中的溶液中添加甲烷磺酰氯(5.3g，46mmol)和三乙胺(7.0g，69mmol)。在室温下搅拌过夜后，将反应混合物用水(40mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥，并减压浓缩，得到呈白色固体的标题化合物(7g，85％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ4.89-4.80(m,1H),2.95(s,3H),2.67-2.41(m,5H),1.39(s,9H)。
中间体21d：(trans)-叔丁基3-(4-碘-1H-吡唑-1-基)环丁烷甲酸酯
在室温向(cis)-叔丁基3-((甲基磺酰基)氧基)环丁烷甲酸酯中间体21c(3.5g，14mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(30mL)中的溶液中添加4-碘-1H-吡唑(2.7g，14mmol)和碳酸钾(3.9g，28mmol)。在100℃下搅拌过夜后，将反应混合物冷却至室温，倒入水(100mL)中，并用乙酸乙酯(80mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(80mL)洗涤三次，经Na2SO4(s)干燥并浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝20:1)纯化，得到呈白色固体的标题化合物(2.8g，60％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.53(s,1H),7.44(s,1H),5.04-4.86(m,1H),3.09-2.94(m,1H),2.87-2.60(m,4H),1.49-1.38(m,9H)。
中间体21e：(trans)-叔丁基3-(4-(苄基硫代)-1H-吡唑-1-基)环丁烷甲酸酯
在氮气气氛下将(trans)-叔丁基3-(4-碘-1H-吡唑-1-基)环丁烷甲酸酯中间体21d(2.80g，7.24mmol)在二噁烷(20mL)中的溶液依顺序用苯基甲硫醇(1.80g，14.5mmol)和N,N-二异丙基乙胺(2.80g，21.7mmol)处理。并且在氮气气氛下向反应混合物添加三(二苯亚甲基丙酮)二钯(67mg，0.073mmol)和9,9-二甲基-4,5-双(二苯基膦)呫吨(42mg，0.073mmol)。加热至110℃过夜后，将反应混合物冷却至室温，用水(20mL)稀释，用乙酸乙酯(20mL)萃取两次。将合并的萃取物用盐水(40mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥，过滤并浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝5:1)纯化，得到呈白色固体的所需化合物(1.7g，纯度90％，61％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.40-7.29(m,5H),7.17-7.07(m,2H),4.93-4.80(m,1H),3.78(s,2H),3.11-2.96(m,1H),2.80-2.57(m,4H),1.49(s,9H)。
磺酰氯21：(trans)-叔丁基3-(4-(氯磺酰基)-1H-吡唑-1-基)环丁烷甲酸酯
在0℃向(trans)-叔丁基3-(4-(苄基硫代)-1H-吡唑-1-基)环丁烷甲酸酯中间体21e(1.5g，3.919mmol)在乙腈(20mL)中的溶液中添加乙酸(5mL)和水(3mL)。然后经10分钟分批添加1,3-二氯-5,5-二甲基乙内酰脲(1.5g，7.613mmol)。在0℃下搅拌2小时后，将反应混合物用水(20mL)淬灭，减压浓缩以除去挥发物，并用乙酸乙酯(30mL)萃取。将有机相用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥，过滤并浓缩，得到残余物，将其通过C18柱纯化(乙腈:水＝60％至80％)纯化，得到呈白色固体的所需化合物(800mg，57％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.05(s,1H),8.02(s,1H),5.10-5.00(m,1H),3.21-3.05(m,1H),2.91-2.69(m,4H),1.49(s,9H)。
磺酰氯22：(trans)-乙基2-(4-(氯磺酰基)环己基)乙酸酯
中间体22a：乙基2-(4-羟基环己基)乙酸酯
在0℃在氮气气氛下向乙基2-(4-氧代环己基)乙酸酯(5.00g，26.6mmol)在乙醇(50mL)中的溶液中缓慢添加四氢硼酸钠(2.10g，55.5mmol)。在氮气气氛下于0℃下搅拌2小时后，将反应在0℃下用饱和氯化铵水溶液(150mL)淬灭，然后在室温下减压浓缩，得到残余物，将其溶于水(100mL)中，并用乙酸乙酯(150mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到呈无色油的标题化合物中间体22a(4.80g，根据1H NMR的纯度为95％，92％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ4.15-4.07(m,2H),4.00-3.92(m,0.3H),3.59-3.48(m,0.7H),2.24-2.08(m,2H),1.98-1.40(m,7H),1.35-0.96(m,6H)。
中间体22b：乙基2-(4-(甲苯磺酰基氧基)环己基)乙酸酯
在0℃向乙基2-(4-羟基环己基)乙酸酯中间体22a(4.80g，95％纯度，24.5mmol)在二氯甲烷(100mL)中的溶液中添加三乙胺(3.80g，37.6mmol)、二甲基氨基吡啶(153mg，1.30mmol)和对甲苯磺酰氯(5.20g，27.3mmol)。使所得混合物缓慢温热至室温，并搅拌过夜。将反应混合物减压浓缩，得到残余物，将其用乙酸乙酯(100mL)稀释，并用20％wt柠檬酸水溶液(55mL)洗涤两次，用水(50mL)和盐水(50mL)洗涤，并且过滤。将滤液减压浓缩，得到呈无色油的标题化合物中间体22b(4.70g，根据1H NMR的纯度为95％，53％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.78(d,J＝8.1Hz,2H),7.32(d,J＝7.8Hz,2H),4.72(br s,0.1H),4.41-4.31(m,0.9H),4.09(q,J＝7.2Hz,2H),2.43(s,3H),2.20-2.12(m,2H),1.98-1.85(m,2H),1.82-1.69(m,3H),1.56-1.43(m,2H),1.24-1.20(m,3H),1.06-0.82(m,2H)。
中间体22c：乙基2-(4-(乙酰基硫代)环己基)乙酸酯
在室温向乙基2-(4-(甲苯磺酰基氧基)环己基)乙酸酯中间体22b(1.70g，95％纯度，4.74mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(17mL)中的溶液中添加硫代乙酸钾(1.09g，9.54mmol)。在100℃搅拌2小时后，将混合物冷却至室温，向混合物中添加水(50mL)并且将其用乙酸乙酯(50mL)萃取三次，将合并的有机层用水(50mL)洗涤两次，用盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱(石油醚:乙酸乙酯＝100:1至50:1)纯化，得到呈棕色油的标题化合物中间体22c(650mg，95％纯度，53％产率)。1HNMR(300MHz,CDCl3)δ4.12(q,J＝7.2Hz,2H),3.91-3.86(m,1H),2.31-2.30(m,3H),2.22(d,J＝7.2Hz,2H),1.93-1.73(m,5H),1.70-1.61(m,2H),1.30-1.19(m,5H)。
磺酰氯22：(trans)-乙基2-(4-(氯磺酰基)环己基)乙酸酯
在0℃向1-氯吡咯烷-2,5-二酮(1.35g，10.1mmol)在乙腈(13mL)中的溶液中添加2N盐酸盐水溶液(0.4mL，0.8mmol)和乙基2-(4-(乙酰基硫代)环己基)乙酸酯中间体22c(0.65g，2.5mmol)。在0℃下搅拌30分钟后，将反应混合物用水(10mL)淬灭并减压浓缩，得到残余物，将其溶于乙酸乙酯(50mL)中并用水(30mL)洗涤两次，用盐水(30mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥，过滤。将滤液减压浓缩，得到粗产物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝10:1)纯化，得到呈无色油的标题化合物(600mg，根据1H NMR纯度为95％，84％产率)。1HNMR(300MHz,CDCl3)δ4.13(q,J＝7.2Hz,2H),3.69-3.61(m,1H),2.36-2.31(m,2H),2.24-2.08(m,5H),1.81-1.63(m,4H),1.25(t,J＝7.2Hz,3H)。
磺酰氯23：叔丁基2-(3-(氯磺酰基)环丁基)乙酸酯
Figure BDA0002341655160001171
中间体23a：3-(2-二氮杂乙酰基)环丁酮
在0℃向3-氧代环丁烷甲酸(4.00g，35.1mmol)在乙酸乙酯(55mL)中的溶液中添加亚硫酰氯(5.1mL，70.1mmol)并且在氮气气氛下将该混合物在60℃下搅拌4小时。冷却至室温后，将反应浓缩并与甲苯共沸，得到白色固体，将其溶于四氢呋喃(33mL)和乙腈(33mL)中。在0℃向其中添加在己烷中的2.0M三甲基甲硅烷基二氮杂甲烷溶液(26.3mL，52.6mmol)(在四氢呋喃(33mL)和乙腈(33mL)中)。在氮气气氛下于室温搅拌过夜后，将混合物在0℃下用乙酸(5mL)和水(20mL)淬灭。然后将其浓缩，得到残余物，将所述残余物用饱和碳酸氢钠水溶液(100mL)稀释。将获得的混合物用乙酸乙酯(100mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(100％二氯甲烷，然后石油醚:乙酸乙酯＝1:1)纯化，得到呈黄色油的标题化合物(4.00g，根据1H NMR的纯度为90％，74％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ5.38(s,1H),3.51-3.38(m,2H),3.30-3.12(m,3H)。
中间体23b：2-(3-氧杂环丁基)乙酸
在室温约20分钟将3-(2-二氮杂乙酰基)环丁酮中间体23a(4.00g，90％纯度，26.1mmol)在四氢呋喃(40mL)和水(4mL)中的溶液滴加至三氟乙酸银(288mg，1.30mmol)和三乙胺(7.91g，78.2mmol)在四氢呋喃(70mL)和水(7mL)中的溶液中。在室温搅拌过夜后，将混合物浓缩，得到残余物，将其用水(50mL)稀释，用1M盐酸盐水溶液酸化至pH 1～2，用乙酸乙酯(80mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(80mL)洗涤，经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到呈棕色油的标题化合物(3.20g，根据1H NMR的纯度为80％，77％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ3.46-3.20(m,4H),2.88-2.75(m,2H),2.70-2.68(m,1H)。
中间体23c：叔丁基2-(3-氧代环丁基)乙酸酯
在室温向2-(3-氧代环丁基)乙酸中间体23b(3.20g，80％纯度，20.0mmol)和焦碳酸二叔丁酯(6.54g，30.0mmol)在叔丁醇(70mL)中的溶液中添加N,N-二甲基吡啶-4-胺(733mg，5.99mmol)。在室温搅拌24小时后，将反应混合物浓缩，得到残余物，将其溶于乙酸乙酯(150mL)中。将有机相用水(80mL)、0.2M盐酸盐水溶液(80mL)、水(80mL)和盐水(80mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝40:1至20:1)纯化，得到呈无色油的标题化合物(750mg，根据1H NMR的纯度为90％，18％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ3.27-3.17(m,2H),2.84-2.69(m,3H),2.54-2.52(m,2H),1.41(s,9H)。
中间体23d：叔丁基2-(3-羟基环丁基)乙酸酯
在0℃向叔丁基2-(3-氧代环丁基)乙酸酯中间体23c(730mg，90％纯度，3.57mmol)在甲醇(2mL)和四氢呋喃(11mL)中的溶液中添加硼氢化钠(68mg，1.78mmol)。在室温下搅拌3小时后，将混合物用水(10mL)缓慢淬灭，然后用饱和碳酸钠水溶液(3mL)淬灭。然后将其浓缩，得到残余物，将所述残余物用乙酸乙酯(20mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到呈无色油的标题化合物(730mg，根据1H NMR的纯度为85％，89％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ4.41-4.36(m,0.1H),4.16-4.06(m,0.9H),2.54-2.45(m,2H),2.34-2.22(m,3H),2.09-1.99(m,2H),1.41(s,9H)。
中间体23e：叔丁基2-(3-(甲苯磺酰基氧基)环丁基)乙酸酯
在0℃向叔丁基2-(3-羟基环丁基)乙酸酯中间体23d(730mg，85％纯度，3.33mmol)在二氯甲烷(14mL)中的溶液中添加吡啶(2.5mL)和4-甲基苯-1-磺酰氯(1.59g，8.33mmol)。在室温下搅拌过夜后，将反应混合物减压浓缩，得到残余物，将其溶于乙酸乙酯(30mL)中，用0.5M盐酸水溶液(50mL)洗涤。将水相用乙酸乙酯(30mL)萃取两次。将合并的有机层用饱和碳酸氢钠水溶液(30mL)、盐水(30mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝20:1至10:1)纯化，得到呈无色油的标题化合物(1.20g，根据1H NMR的纯度为90％，95％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝1.76min，C17H24O5S的计算质量340.1，m/z发现值358.5[M+H2O]+。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.77(d,J＝7.8Hz,2H),7.33(d,J＝8.1Hz,2H),4.96-4.87(m,0.2H),4.70-4.61(m,0.8H),2.47-2.36(m,5.3H),2.31-2.29(m,2H),2.19-2.04(m,1H),1.89-1.79(m,1.7H),1.39(s,9H)。
中间体23f：叔丁基2-(3-(乙酰基硫代)环丁基)乙酸酯
在室温向叔丁基2-(3-(甲苯磺酰基氧基)环丁基)乙酸酯中间体23e(1.20g，90％纯度，3.17mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(12mL)中的溶液中添加硫代乙酸钾(724mg，6.34mmol)。在100℃下搅拌6小时后，将反应混合物冷却至室温，用水(30mL)稀释，并用乙酸乙酯(30mL)萃取三次。将合并的有机层用水(40mL)和盐水(40mL)洗涤，经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝100:1至50:1)纯化，得到呈棕色油的标题化合物(680mg，根据1H NMR的纯度为90％，79％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝1.74min，C12H20O3S的计算质量244.1，m/z发现值262.3[M+H2O]+。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ4.11-4.00(m,0.9H),3.98-3.88(m,0.1H),2.84-2.70(m,0.9H),2.67-2.48(m,0.7H),2.43-2.40(m,1.6H),2.33-2.15(m,6.8H),1.45-1.42(m,9H)。
磺酰氯23：叔丁基2-(3-(氯磺酰基)环丁基)乙酸酯
在0℃向叔丁基2-(3-(乙酰基硫代)环丁基)乙酸酯中间体23f(680mg，90％纯度，2.51mmol)在乙腈(14mL)中的溶液中添加2M盐酸盐水溶液(0.4mL，0.80mmol)和1-氯吡咯烷-2,5-二酮(1.34g，10.0mmol)。在0℃下搅拌1小时后，将反应混合物用水(30mL)淬灭，并用乙酸乙酯(30mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液浓缩，并且将残余物通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝40:1至20:1)纯化，得到呈色油的标题化合物(600mg，根据1H NMR的纯度为90％，80％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ4.41-4.27(m,1H),2.99-2.85(m,2.5H),2.73-2.65(m,0.5H),2.46-2.43(m,2H),2.41-2.32(m,2H),1.44(s,9H)。
磺酰氯24：叔丁基3-((氯磺酰基)甲基)环丁烷甲酸酯
Figure BDA0002341655160001191
中间体24a：叔丁基3-((甲苯磺酰基氧基)甲基)环丁烷甲酸酯
在0℃向叔丁基3-(羟基甲基)环丁烷甲酸酯(3.50g，18.8mmol)在吡啶(10mL)和二氯甲烷(50mL)中的溶液中缓慢添加4-甲基-苯磺酰氯(7.20g，37.6mmol)。在室温下搅拌16小时后，将混合物用水(150mL)稀释，并在室温下继续搅拌0.5小时。将所得混合物用二氯甲烷(150mL)萃取两次。将合并的有机层用0.5N盐酸盐水溶液(200mL)、盐水(150mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥，过滤并浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝30:1)纯化，得到呈白色固体的标题化合物(3.60g，56％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.81-7.78(m,2H),7.38-7.27(m,2H),4.04-3.96(m,3H),2.99-2.84(m,1H),2.70-2.49(m,1H),2.46(s,3H),2.35-2.19(m,2H),2.02-1.84(m,2H),1.44(s,9H)。
中间体24b：叔丁基3-((乙酰基硫代)甲基)环丁烷甲酸酯
在室温向叔丁基3-((甲苯磺酰基氧基)甲基)环丁烷甲酸酯中间体24a(1.10g，3.20mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(20mL)中的溶液中添加硫代乙酸钾(1.50g，12.9mmol)。在100℃下搅拌16小时后，将反应混合物冷却至室温并浓缩，得到残余物，将其用5％氯化钠水溶液(200mL)稀释，并用乙酸乙酯(100mL)萃取两次。将合并的有机层经Na2SO4(s)干燥，过滤并浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝30:1)纯化，得到呈红黄色油的标题化合物(450mg，62％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ3.02-2.92(m,2.2H),2.88-2.78(m,0.8H),2.57-2.50(m,0.5H),2.42-2.27(m,5.5H),2.02-1.84(m,2H),1.93-1.83(m,2H),1.44(s,9)。
磺酰氯24：叔丁基3-((氯磺酰基)甲基)环丁烷甲酸酯
在0℃向叔丁基3-((乙酰基硫代)甲基)环丁烷甲酸酯中间体24b(450mg，1.85mmol)在2M盐酸盐水溶液(0.25mL)和乙腈(10mL)中的溶液中缓慢添加1-氯吡咯烷-2,5-二酮(984mg，7.30mmol)。在0℃下搅拌30分钟后，将反应混合物在25℃下在真空中浓缩以除去乙腈。将获得的残余物在乙酸乙酯(50mL)和饱和碳酸氢钠水溶液(50mL)之间分配。将有机层分离，并用饱和硫代硫酸钠水溶液(50mL)洗涤，然后用盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝30:1)纯化，得到呈无色油的标题化合物(380mg，80％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ3.86-3.79(m,2H),3.29-3.20(m,0.5H),3.10-2.94(m,1.5H),2.65-2.51(m,2H),2.29-2.12(m,2H),1.47(s,9)。
磺酰氯25：3-(2-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)乙氧基)丙烷-1-磺酰氯
Figure BDA0002341655160001211
中间体25a：2-(2-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)乙氧基)乙醇
在0℃向2,2'-氧基二乙醇(5.00g，47.2mmol)在二氯甲烷(100mL)中的溶液中添加1H-咪唑(6.42g，94.2mmol)和叔丁基氯二苯基硅烷(14.2g，51.8mmol)。在室温下搅拌过夜后，将混合物用水(100mL)淬灭，并用二氯甲烷(100mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝6:1至3:1)纯化，得到呈无色油的标题化合物(6.51g，95％纯度，38％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝1.85min，C20H28O3Si的计算质量344.2，m/z发现值362.4[M+H2O]+。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.72-7.67(m,4H),7.46-7.35(m,6H),3.84-3.79(m,2H),3.73-3.67(m,2H),3.64-3.56(m,4H),2.22(s,1H),1.06-1.05(m,9H)。
中间体25b：2-(2-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)乙氧基)乙基4-甲基苯磺酸酯
在0℃向2-(2-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)乙氧基)乙醇中间体25a(6.51g，95％纯度，18.0mmol)在二氯甲烷(35mL)中的溶液中添加吡啶(14mL)和4-甲基苯-1-磺酰氯(8.56g，44.9mmol)。在室温下搅拌过夜后，将反应混合物减压浓缩，得到残余物，将其溶于乙酸乙酯(100mL)中，用0.5M盐酸水溶液(50mL)洗涤，用乙酸乙酯(80mL)萃取两次。将合并的有机层用饱和碳酸氢钠水溶液(50mL)、盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝20:1至10:1)纯化，得到呈无色油的标题化合物(7.61g，根据1H NMR的纯度为90％，77％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.81-7.75(m,2H),7.68-7.63(m,4H),7.45-7.35(m,6H),7.31-7.27(m,2H),4.16-4.12(m,2H),3.76-3.72(m,2H),3.70-3.66(m,2H),3.55-3.51(m,2H),2.42(s,3H),1.04(s,9H)。
中间体25c：S-(2-(2-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)乙氧基)乙基)乙硫醇酯
在室温向2-(2-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)乙氧基)乙基4-甲基苯磺酸酯中间体25b(7.61g，90％纯度，13.7mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(60mL)中的溶液中添加硫代乙酸钾(3.14g，27.5mmol)。在100℃下搅拌过夜后，将反应混合物冷却至室温，用水(150mL)稀释，并用乙酸乙酯(100mL)萃取三次。将合并的有机层用水(100mL)洗涤两次，用盐水(100mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝40:1至30:1)纯化，得到呈棕色油的标题化合物(5.73g，90％纯度，93％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝2.13min，C22H30O3SSi的计算质量402.2，m/z发现值420.5[M+H2O]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.70-7.68(m,4H),7.45-7.36(m,6H),3.81-3.78(m,2H),3.63-3.57(m,4H),3.09-3.06(m,2H),2.33(s,3H),1.06(s,9H)。
磺酰氯25：3-(2-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)乙氧基)丙烷-1-磺酰氯
在0℃向S-(2-(2-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)乙氧基)乙基)乙硫醇酯中间体25c(1.00g，90％纯度，2.24mmol)在乙腈(15mL)中的溶液中添加2M盐酸盐水溶液(0.4mL)和1-氯吡咯烷-2,5-二酮(1.19g，8.94mmol)。在0℃下搅拌1小时后，将反应混合物用水(30mL)淬灭，并用乙酸乙酯(30mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝20:1至10:1)纯化，得到呈无色油的标题化合物(350mg，根据1H NMR的纯度为85％，31％产率)。1HNMR(300MHz,CDCl3)δ7.75-7.68(m,4H),7.47-7.37(m,6H),4.10-4.06(m,2H),3.90-3.82(m,4H),3.66-3.63(m,2H),1.09-1.07(m,9H)。
表1中示出了通过连续的两个反应步骤(分别从方案1和方案2中选择一种方法)具有通式I的二氢嘧啶与具有通式II的酸、芳基醛(P1)和甲脒(P2)结合的组装：
Figure BDA0002341655160001231
Figure BDA0002341655160001241
Figure BDA0002341655160001251
Figure BDA0002341655160001271
Figure BDA0002341655160001281
Figure BDA0002341655160001291
Figure BDA0002341655160001311
Figure BDA0002341655160001321
Figure BDA0002341655160001331
Figure BDA0002341655160001341
Figure BDA0002341655160001351
Figure BDA0002341655160001361
Figure BDA0002341655160001371
Figure BDA0002341655160001381
Figure BDA0002341655160001401
Figure BDA0002341655160001411
Figure BDA0002341655160001421
Figure BDA0002341655160001441
Figure BDA0002341655160001451
Figure BDA0002341655160001461
Figure BDA0002341655160001471
Figure BDA0002341655160001491
Figure BDA0002341655160001501
Figure BDA0002341655160001511
Figure BDA0002341655160001521
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Figure BDA0002341655160001541
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Figure BDA0002341655160001561
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Figure BDA0002341655160001631
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具有通式II的酮酯：
酮酯1：甲基3-(1-甲基-2-氧代哌啶-4-基)-3-氧代丙酸酯
LC-MS(ESI)：RT＝1.040min，C10H15NO4的计算质量213.1，m/z发现值213.9[M+H]+；1HNMR(300MHz,CDCl3)δ3.84-3.74(m,3H),3.66-3.55(m,2H),3.42-3.33(m,2H),3.13-3.07(m,1H),3.03-2.94(m,3H),2.59-2.45(m,2H),2.22-2.17(m,1H),1.92-1.83(m,1H)。
酮酯2：甲基3-(1-乙酰基哌啶-4-基)-3-氧代丙酸酯
LC-MS(ESI)：RT＝1.148min，C11H17NO4的计算质量227.1，m/z发现值228.1[M+H]+。
酮酯3：甲基3-氧代-3-(2-氧代哌啶-4-基)丙酸酯
LC-MS(ESI)：RT＝0.52min，C9H13NO4的计算质量199.1，m/z发现值200.0[M+H]+。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.51(s,1H),3.78(d,J＝16.8Hz,1H),3.71(d,J＝16.8Hz,1H),3.63(s,3H),3.17-3.16(m,1H),3.13-3.09(m,2H),3.08-2.98(m,1H),2.32-2.26(m,1H),2.05-1.97(m,1H),1.67-1.57(m,1H)。
酮酯4：叔丁基4-(3-甲氧基-3-氧代丙酰基)哌啶-1-甲酸酯
LC-MS(ESI)：RT＝2.484min，C14H23NO5的计算质量285.2，m/z发现值230.0[M+H-t-Bu]+。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ4.96(s,0.2H),4.10-4.06(m,2H),3.71(s,3H),3.49(s,1.8H),3.77(t,J＝16Hz,2H),2.60(tt,J＝11.3,3.83Hz,1H),1.84-1.80(m,2H),1.58-1.46(m,2H),1.44(s,9H)。
酮酯5：甲基3-(1-((1-甲氧基-2-甲基-1-氧代丙-2-基)磺酰基)哌啶-4-基)-3-氧代丙酸酯
LC-MS(ESI)：RT＝1.42min，C14H23NO7S的计算质量349.1，m/z发现值350.5[M+H]+。
酮酯6：4-(2-乙氧基羰基-乙酰基)-哌啶-1-甲酸叔丁基酯
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ12.17(s,0.2H),4.99(s,0.2H),4.26-4.03(m,4H),3.50(s,1.6H),2.87-2.72(m,2H),2.68-2.58(m,1H),1.94-1.76(m,2H),1.63-1.49(m,2H),1.46(s,9H),1.28(t,J＝10.5Hz,3H)。
酮酯7：甲基3-(trans-4-((叔丁氧基羰基)氨基)环己基)-3-氧代丙酸酯
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ4.47-4.31(m,1H),3.73(s,3H),3.49(s,2H),3.44-3.29(m,1H),2.40(t,J＝12.3Hz,1H),2.09(d,J＝11.1Hz,2H),1.96(d,J＝13.5Hz,2H),1.65-1.47(m,1H),1.43(s,9H),1.11(q,J＝13.5Hz,2H)。
酮酯8：甲基3-(cis-4-((叔丁氧基羰基)氨基)环己基)-3-氧代丙酸酯
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ4.71-4.37(m,1H),3.71(s,3H),3.67-3.59(m,1H),3.48(s,2H),1.75-1.60(m,8H),1.41(s,9H)
酮酯9：trans-甲基4-(3-甲氧基-3-氧代丙酰基)环己烷甲酸酯
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ3.66-3.53(m,8H),2.45-2.40(m,1H),2.33-2.24(m,1H),1.95-1.87(m,4H),1.35-1.18(m,4H)。
酮酯38：trans-甲基4-(3-乙氧基-3-氧代丙酰基)环己烷-甲酸酯
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ4.20(q,J＝7.2Hz,2H),3.68(s,3H),3.49(s,2H),2.54-2.43(m,1H),2.34-2.23(m,1H),2.14-1.95(m,5H),1.49-1.37(m,3H),1.28(t,J＝7.2Hz,3H)。
酮酯10：cis-甲基3-(3-甲氧基-3-氧代丙酰基)环己烷甲酸酯
LC-MS(ESI)：RT＝1.67min，C12H18O5的计算质量242.1，m/z发现值242.9[M+H]+。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ12.04(s,0.1H),4.98(s,0.1H),3.72(s,2.7H),3.71(s,0.3H),3.68(s,0.4H),3.66(s,2.6H),3.51(s,0.2H),3.50(s,1.4H),2.84-2.78(m,0.1H),2.75-2.72(m,0.1H),2.54-2.46(m,0.8H),2.38-2.26(m,1H),2.21-2.10(m,1H),2.03-1.87(m,2.7H),1.83-1.75(m,0.3H),1.54-1.43(m,1H),1.39-1.24(m,3H)。
酮酯11：甲基3-(4-(2-乙氧基-2-氧代乙基)环己基)-3-氧代丙酸酯
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ4.07-4.01(m,2H),3.72-3.65(m,2H),3.63-3.50(m,3H),2.63-2.60(m,0.3H),2.39(tt,J＝12.0,3.2Hz,0.6H),2.21-2.16(m,2H),1.91-1.82(m,2H),1.74(dd,J＝13.2,3.2Hz,2H),1.67-1.46(m,2H),1.30-1.22(m,2H),1.19-1.15(m,3H),0.99(tq,J＝13.2,3.2Hz,1H)。
酮酯12：叔丁基3-(3-甲氧基-3-氧代丙酰基)哌啶-1-甲酸酯
LC-MS(ESI)：RT＝1.58min，C14H23NO5的计算质量285.2，m/z发现值286.1[M+H]+。1HNMR(300MHz,CDCl3)δ5.00-4.96(m,0.2H),4.12-3.77(m,2H),3.70(s,3H),3.52-3.51(m,1.3H),3.43(s,0.3H),3.19-3.02(m,1H),2.95-2.85(m,1H),2.64-2.58(m,1H),1.97-1.88(m,1H),1.69-1.42(m,12H)。
酮酯13：叔丁基4-氟-4-(3-甲氧基-3-氧代丙酰基)哌啶-1-甲酸酯
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ12.10(d,J＝2.4Hz,0.15H),5.39(d,J＝2.8Hz,0.15H),4.04(br s,2H),3.75(d,J＝6.0Hz,3H),3.67(d,J＝4.4Hz,1.7H),3.04(br s,2H),1.99-1.82(m,4H),1.45(d,J＝3.2Hz,9H)。
酮酯14：甲基3-(3-(甲基磺酰基)-3-氮杂双环[3.2.1]辛-8-基)-3-氧代丙酸酯
LC-MS(ESI)：RT＝1.32min，C12H19NO5S的计算质量289.1，m/z发现值290.4[M+H]+。1HNMR(300MHz,CDCl3)δ3.75-3.74(m,3H),3.63(dd,J＝11.1,3.0Hz,1H),3.53(d,J＝11.1Hz,2H),3.38(dd,J＝10.8,3.3Hz,1H),3.18(d,J＝10.8Hz,1H),2.85(d,J＝11.1Hz,1H),2.76(d,J＝11.1Hz,3H),2.66(s,1H),2.61(s,2H),1.83(s,2H),1.71(m,2H)。
酮酯15：3-(8-甲烷磺酰基-8-氮杂-双环[3.2.1]辛-3-基)-3-氧代-丙酸甲基酯
LC-MS(ESI)：RT＝1.26min，C12H19NO5S的计算质量289.1，m/z发现值290.4[M+H]+。1HNMR(300MHz,CDCl3)δ4.35(s,2H),3.75(s,3H),3.50(s,2H),2.94(s,3H),
酮酯16：(1R,5S,6r)-叔丁基6-(3-乙氧基-3-氧代丙酰基)-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-甲酸酯
LC-MS(ESI)：RT＝1.38min，C15H23NO5的计算质量297.2，m/z发现值242.1[M-56+H]+。1HNMR(300MHz,CDCl3)δ4.21(q,J＝7.2Hz,2H),3.70-3.62(m,2H),3.57(s,2H),3.45-3.41(m,2H),2.18(s,2H),1.92(s,1H),1.45(s,9H),1.29(t,J＝7.2Hz,3H)。
酮酯17：1-叔丁基2-甲基4-(3-甲氧基-3-氧代丙酰基)哌啶-1,2-二甲酸酯
LC-MS(ESI)：RT＝2.537min，C16H25NO7的计算质量343.2，m/z发现值342.1[M-H]-。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ5.06-5.02(m,0.5H),4.87-4.83(m,0.5H),4.18-4.12(m,0.5H),4.06-4.02(m,0.5H),3.75-3.71(m,7H),3.55-3.48(m,2H),3.03-2.96(m,0.5H),2.91-2.85(m,0.5H),2.51-2.41(m,1H),1.94-1.72(m,2H),1.47(s,4H),1.44(s,9H)。
酮酯18：cis-4-(2-甲氧基羰基-乙酰基)-哌啶-1,3-二甲酸1-叔丁基酯3-甲基酯
LC-MS(ESI)：RT＝1.59min，C16H25NO7的计算质量343.2，m/z发现值244.0[M+H-100]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ4.19(dd,J＝13.6,5.6Hz,1H),3.79-3.62(m,7H),3.58(s,2H),3.45(dd,J＝13.6,2.8Hz,1H),3.17-3.12(m,1H),2.99(q,J＝4.4Hz,1H),2.92-2.87(m,1H),2.12-2.05(m,1H),1.94-1.85(m,1H),1.44(s,9H)。
酮酯19：乙基3-环己基-3-氧代丙酸酯
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ12.15(br s,0.2H),4.96(br s,0.2H),4.19(q,J＝7.2Hz,2H),3.48(s,1.6H),2.50-2.42(m,1H),1.91-1.66(m,5H),1.42-1.17(m,8H)。
酮酯20：甲基3-氧代-3-(四氢-2H-吡喃-3-基)丙酸酯
LC-MS(ESI)：RT＝1.15min，C9H14O4的计算质量186.1，m/z发现值187.5[M+H]+。1HNMR(300MHz,CDCl3)δ12.02(s,0.2H),4.99(s,0.2H),4.04-3.94(m,1H),3.91-3.78(m,1H),3.72(s,2.4H),3.71(s,0.6H),3.55-3.35(m,3.6H),2.81-2.72(m,0.8H),2.48-2.38(m,0.2H),2.04-1.91(m,1H),1.76-1.62(m,3H)。
酮酯21：甲基3-氧代-3-(四氢-2H-吡喃-2-基)丙酸酯
LC-MS(ESI)：RT＝1.764min，C9H14O4的计算质量186.1，m/z发现值187.0[M+H]+。1HNMR(300MHz,CDCl3)δ4.01(dd,J＝11.4,2.1Hz,1H),3.84(dd,J＝10.8,2.1Hz,1H),3.71(s,3H),3.65(s,0.2H),3.59(d,J＝6.3Hz,1.6H),3.52(s,0.2H),3.49-3.41(m,1H),1.91-1.88(m,2H),1.59-1.36(m,4H)。
酮酯22：3-氧代-3-(四氢-吡喃-4-基)-丙酸甲基酯
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ12.06(s,0.1H),4.98(s,0.1H),4.01-3.97(m,2H),3.71(s,3H),3.50(s,1.8H),3.41(td,J＝11.4,2.4Hz,2H),2.74-2.64(m,0.8H),2.40-2.30(m,0.2H),1.80-1.67(m,4H)。
酮酯23：3-(3-叔丁氧基羰基氨基-环戊基)-3-氧代-丙酸甲基酯
LC-MS(ESI)：RT＝1.52min，C14H23NO5的计算质量285.2，m/z发现值286.2[M+H]+。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ4.85(br s,0.8H),4.54(br s,0.2H),4.10-3.96(m,1H),3.71(s,3H),3.50(s,1.5H),3.47(s,0.5H),3.17-3.04(m,1H),2.17-2.08(m,1H),1.96-1.80(m,3H),1.72-1.63(m,1H),1.58-1.50(m,1H),1.44(s,9H)。
酮酯24：(9H-芴-9-基)甲基3-(3-甲氧基-3-氧代丙酰基)吡咯烷-1-甲酸酯
LC-MS(ESI)：RT＝1.67min，C23H23NO5的计算质量393.2，m/z发现值394.5[M+H]+。1HNMR(300MHz,CDCl3)δ12.13(d,J＝5.7Hz,0.2H),7.78(d,J＝7.5Hz,2H),7.62(d,J＝7.2Hz,2H),7.42(t,J＝7.2Hz,2H),7.33(t,J＝7.2Hz,2H),5.09(s,0.2H),4.48-4.35(m,2H),4.28-4.24(m,1H),3.78-2.95(m,10H),2.24-2.15(m,2H)。
酮酯25：叔丁基3-(3-甲氧基-3-氧代丙酰基)吡咯烷-1-甲酸酯
LC-MS(ESI)：RT＝2.053min，C3H21NO5的计算质量271.1，m/z发现值294.1[M+Na]+。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ12.06(s,0.2H),5.03(s,0.2H),3.73(s,3H),3.61-3.47(m,4.4H),3.38-3.25(m,2H),2.90(br s,0.2H),2.14-2.00(m,2H),1.44(s,9H)。
酮酯26：甲基3-(1-(甲基磺酰基)吡咯烷-2-基)-3-氧代丙酸酯
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ12.01(s,0.2H),5.32(s,0.2H),4.45(dd,J＝8.4,4.8Hz,0.8H),4.33(dd,J＝7.6,3.6Hz,0.2H),3.75(s,3H),3.74(s,0.2H),3.70(s,0.6H),3.65(s,0.6H),3.63(s,0.1H),3.61(s,0.2H),3.53-3.43(m,2H),2.93(s,2.5H),2.88(s,0.5H),2.27-2.12(m,2H),2.02-1.95(m,2H)。
酮酯27：甲基3-氧代-3-(四氢呋喃-2-基)丙酸酯
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ4.37-4.32(m,1H),3.79(t,J＝8.4Hz,2H),3.68-3.62(m,5H),2.16-2.05(m,1H),1.92-1.76(m,3H)。
酮酯29：cis-甲基5-(3-甲氧基-3-氧代丙酰基)四氢呋喃-2-甲酸酯
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ11.89(s,0.15H),5.69(s,0.15H),4.61(dd,J＝7.2,4.2Hz,1H),4.53(t,J＝7.2Hz,1H),4.00-3.76(m,1.7H),3.73(s,6H),2.30-2.02(m,4H)。
酮酯30：甲基3-氧代-3-(四氢呋喃-3-基)丙酸酯
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ3.95-3.93(m,2H),3.91-3.78(m,2H),3.75(s,3H),3.54(s,2H),3.38-3.33(m,1H),2.17-2.10(m,2H)。
酮酯31：甲基3-氧代-3-(5-氧代吡咯烷-2-基)丙酸酯
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ11.85(br s,0.2H),8.15(br s,0.4H),7.34(s,0.4H),7.17(s,0.2H),5.19(s,0.2H),4.39(t,J＝6.9Hz,0.6H),4.21-4.14(m,0.4H),3.73(s,3H),3.57(d,J＝3.6Hz,1H),3.38(s,0.6H),2.54-2.36(m,2H),2.26-2.10(m,0.9H),1.91(s,0.1H),1.47-1.42(m,0.4H),1.32(s,0.2H),1.11(s,0.2H)。
酮酯28：甲基3-(3-甲氧基-3-氧代丙酰基)环戊烷甲酸酯
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ3.69-3.65(m,1H),3.63(s,1.4H),3.60-3.59(m,5.6H),3.15-3.03(m,0.4H),2.92-2.78(m,1.6H),2.19-2.07(m,1H),1.97-1.69(m,5H)。
酮酯34：trans-甲基3-(3-((叔丁氧基羰基)氨基)环丁基)-3-氧代丙酸酯
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ4.71(br s,1H),4.19-4.02(m,1H),3.72(s,3H),3.45(s,2H),3.35-3.25(m,1H),2.68-2.51(m,2H),2.22-2.07(m,2H),1.43(s,9H)。
酮酯36：trans-乙基3-(2-(2-(叔丁氧基)-2-氧代乙基)环丙基)-3-氧代丙酸酯
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ4.22-4.15(m,2H),3.56-3.54(m,2H),2.06-2.02(m,2H),1.94-1.89(m,1H),1.73-1.64(m,1H),1.43-1.42(m,9H),1.29-1.21(m,4H),0.93-0.86(m,1H)。
酮酯32：叔丁基3-(3-甲氧基-3-氧代丙酰基)氮杂环丁烷-1-甲酸酯
LC-MS(ESI)：RT＝1.44min，C12H19NO5的计算质量257.1，m/z发现值258.2[M+H]+。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ12.11(s,0.2H),5.09(s,0.2H),4.13-4.03(m,4H),3.75(s,3H),3.65-3.57(m,1H),3.49(s,1.6H),1.43(s,9H)。
酮酯37：甲基4-(3-甲氧基-3-氧代丙酰基)环庚烷甲酸酯
LC-MS(ESI)：RT＝1.28min，C13H20O5的计算质量256.1，m/z发现值257.1[M+H]+。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ3.66(s,2H),3.60(s,3H),3.56(s,3H),2.70-2.61(m,1H),2.50-2.43(m,1H),1.96-1.33(m,10H)。
酮酯39：3-(2-甲氧基羰基-乙酰基)-环丁烷甲酸甲基酯
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ12.07(s,0.05H),11.97(s,0.05H),5.02(s,0.05H),5.00(s,0.05H),3.74-3.68(m,6H),3.52-3.48(m,0.5H),3.44-3.43(m,1.8H),3.35-3.03(m,1.5H),2.58-2.38(m,4H)。
酮酯40：甲基3-(4-(N-甲基氨磺酰基)环己基)-3-氧代丙酸酯
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ6.93-6.82(m,1H),3.69(s,2H),3.65(s,0.4H),3.62(s,2.4H),3.53(s,0.2H),3.08-2.94(m,1H),2.77-2.70(m,0.5H),2.57-2.54(m,3H),2.47-2.41(m,0.5H),2.13-1.94(m,3H),1.85-1.76(m,1H),1.63-1.26(m,4H)。
酮酯41：甲基3-氧代-3-(4-(吡咯烷-1-基磺酰基)环己基)丙酸酯
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ3.68(s,2H),3.64-3.60(m,3H),3.31-3.19(m,6H),2.08-1.95(m,4H),1.88-1.81(m,4H),1.54-1.40(m,2H),1.35-1.21(m,2H)。
酮酯42：甲基3-(3-(N-甲基乙酰胺基)环戊基)-3-氧代丙酸酯
LC-MS(ESI)：RT＝1.17min，C12H19NO4的计算质量241.1，m/z发现值242.3[M+H]+。1HNMR(300MHz,CDCl3)δ5.12-5.00(m,0.5H),4.30-4.18(m,0.5H),3.75(s,3H),3.52-3.51(m,2H),3.25-3.03(m,1H),2.89-2.80(m,3H),2.14-1.53(m,9H)。
酮酯43：(cis)-甲基3-(4-甲基四氢呋喃-2-基)-3-氧代丙酸酯，作为粗品使用酮酯44：叔丁基(cis)-5-(3-甲氧基-3-氧代丙酰基)六氢-环戊二烯并[c]吡咯-2(1H)-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝1.54min，C16H25NO5的计算质量311.2，m/z发现值256.2[M+H-56]+。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ12.04(s,0.1H),5.01(s,0.1H),3.73(s,2.7H),3.72(s,0.3H),3.48(s,1.8H),3.47-3.43(m,2H),3.28-3.07(m,3H),2.77-2.71(m,0.2H),2.69-2.58(m,1.8H),2.21-2.04(m,2H),1.68-1.56(m,2H),1.44(s,9H)。
酮酯45：甲基3-(4-((叔丁氧基羰基)氨基)环庚基)-3-氧代丙酸酯，LC-MS(ESI)：C16H27NO5的计算质量313.2，m/z发现值336.2[M+Na]+。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ4.59-4.41(m,1H),3.74(s,3H),3.70-3.53(m,1H),3.50(s,2H),2.78-2.62(m,1H),2.17-1.49(m,9H),1.44(s,9H),1.43-1.23(m,1H)。
酮酯46：甲基3-(3-((叔丁氧基羰基)氨基)双环[1.1.1]戊-1-基)-3-氧代丙酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝1.753min，C14H21NO5的计算质量283.1，m/z发现值227.9[M+H-56]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ11.78(s,0.2H),4.99(s,0.2H),4.96(br s,1H),3.73(s,3H),3.49(s,1.6H),2.30(s,4.5H),.2.21(s,1.5H),1.45(s,9H)。
酮酯47：乙基(cis)-4-(3-甲氧基-3-氧代丙酰基)四氢呋喃-2-甲酸酯,1H NMR(400MHz,CDCl3)δ12.09(s,0.1H),12.05(s,0.1H),5.08(s,0.1H),5.07(s,0.1H),4.63-4.49(m,1H),4.27-4.19(m,2.4H),4.16-4.14(m,0.6H),4.11-4.06(m,0.5H),4.01-3.92(m,0.2H),3.75(s,3H),3.65-3.64(m,0.3H),3.53(s,1.6H),3.49-3.40(m,0.8H),3.11-3.01(m,0.1H),2.96-2.88(m,0.1H),2.59-2.37(m,1.4H),2.30-2.20(m,0.6H),1.31-1.24(m,3H)。
酮酯48：甲基3-(氧杂环丁烷-3-基)-3-氧代丙酸酯,1H NMR(300MHz,CDCl3)12.13(s,0.2H),5.06(s,0.2H),4.81-4.76(m,2.6H),4.15-4.05(m,0.5H),3.95-3.92(m,0.5H),3.90-3.76(m,1H),3.73(s,1.5H),3.72(s,1.5H),3.71-3.63(m,0.7H),3.47(s,1H),3.22-3.15(m,0.3H)。
酮酯49：甲基3-氧代-3-(1,4-二氧杂螺[4.5]癸-7-基)丙酸酯
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ12.06(s,0.1H),4.99(s,0.1H),3.96(s,4H),3.74(s,3H),3.52(s,1.8H),2.82-2.74(m,1H),1.94-1.65(m,5.2H),1.56-1.26(m,2.8H)。
酮酯50：(cis)-甲基3-(4-(((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)甲基)-四氢呋喃-2-基)-3-氧代丙酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝2.808min，C25H32O5Si的计算质量440.2，m/z发现值458.2[M+NH4]+。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.69-7.61(m,4H),7.46-7.38(m,6H),4.43-4.37(m,1H),4.04-3.99(m,1H),3.81-3.72(m,4H),3.66-3.49(m,4H),2.63-2.53(m,1H),2.34-2.25(m,1H),1.79-1.70(m,1H),1.06(s,9H)。
酮酯52：甲基3-(4-(N-异丙基氨磺酰基)环己基)-3-氧代丙酸酯,1H NMR(300MHz,CDCl3)δ12.29(s,0.1H),12.08(s,0.1H),5.09(s,0.1H),5.00(s,0.1H),4.19-4.09(m,1H),3.79(s,0.4H),3.75(s,2.6H),3.69-3.56(m,1H),3.53(s,1.3H),3.44(s,0.3H),3.17-3.09(m,0.2H),2.97-2.73(m,1.2H),2.54-2.46(m,0.6H),2.34-2.23(m,1.7H),2.18-1.95(m,2.3H),1.87-1.75(m,0.6H),1.67-1.54(m,1.9H),1.48-1.36(m,1.5H),1.29-1.23(m,6H)。
酮酯53：甲基3-(3-甲氧基-3-氧代丙酰基)双环[1.1.1]戊烷-1-甲酸酯,1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.11(s,0.3H),4.99(s,0.3H),3.74(s,3H),3.70(s,3H),3.50(s,1.4H),2.33(s,4H),2.25(s,2H)。
酮酯54：(cis)-乙基3-(4-((叔丁氧基羰基)氨基)四氢呋喃-2-基)-3-氧代丙酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝2.019min，C14H23NO6的计算质量301.1，m/z发现值202.1。[M+H-100]+。1HNMR(300MHz,CDCl3)δ12.08(s,0.2H),5.33(s,0.2H),4.99(br s,1H),4.57-4.52(m,0.2H),4.47-4.42(m,0.8H),4.25-4.21(m,2H),3.98-3.93(m,1H),3.82-3.71(m,1.6H),3.57-3.52(m,1H),2.55-2.44(m,1H),2.18-2.05(m,1H),1.44(s,9H),1.32-1.28(m,3H)。
酮酯55：(cis)-甲基3-(4-(甲基氨基甲酰基)四氢呋喃-2-基)-3-氧代丙酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝0.961min和1.236min，C10H15NO5的计算质量229.1，m/z发现值230.1[M+H]+。
酮酯56：叔丁基5-(3-乙氧基-3-氧代丙酰基)四氢-2H-吡喃-2-甲酸酯,1H NMR(300MHz,CD3OD)δ4.30-4.19(m,3H),4.15-4.02(m,1H),3.92-3.79(m,1H),3.52-3.44(m,1H),2.91-2.81(m,0.4H),2.76-2.69(m,0.6H),2.50-2.42(m,0.3H),2.24-2.16(m,0.5H),2.11-2.01(m,1.2H),1.91-1.78(m,2H),1.71-1.54(m,1H),1.48(s,9H),1.27(t,J＝7.2Hz,3H)。
酮酯57：甲基3-氧代-3-(5-氧代-1-((2-三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)吡咯烷-3-基)丙酸酯,1H NMR(300MHz,CDCl3)δ4.71(s,2H),3.76(s,3.5H),3.72-3.46(m,6.5H),2.71-2.65(m,2H),0.92(t,J＝8.4Hz,2H),0.01(s,9H)。
酮酯58：甲基3-(4-(N-(2-乙氧基-2-氧代乙基)氨磺酰基)环己基)-3-氧代丙酸酯,1H NMR(300MHz,CDCl3)δ4.86-4.73(m,1H),4.28-4.09(m,2H),3.96-3.92(m,2H),3.77(s,3H),3.53(s,2H),3.01-2.87(m,1H),2.78-2.73(m,0.4H),2.58-2.47(m,0.6H),2.40-2.25(m,2H),2.15-2.06(m,1H),1.92-1.77(m,1H),1.71-1.57(m,2H),1.50-1.40(m,1H),1.33-1.27(m,3H)。
酮酯59：(R)-甲基1-((4-(3-甲氧基-3-氧代丙酰基)环己基)-磺酰基)吡咯烷-3-甲酸酯,1H NMR(300MHz,CDCl3)δ12.27(s,0.1H),12.06(s,0.1H),5.08(s,0.1H),4.98(s,0.1H),3.74(s,3H),3.73(m,3H),3.70-3.63(m,1H),3.60-3.44(m,4.6H),3.18-3.08(m,1H),3.04-2.90(m,1H),2.77-2.69(m,0.5H),2.56-2.43(m,0.5H),2.32-2.16(m,4H),2.15-2.06(m,1H),2.04-1.94(m,1H),1.91-1.77(m,1H),1.71-1.55(m,2H),1.50-1.36(m,1H)。
酮酯60：甲基3-(3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)环丁基)-3-氧代丙酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝1.94min，C24H30O4Si的计算质量410.2，m/z发现值411.5[M+H]+。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.66-7.61(m,4H),7.47-7.37(m,6H),4.21-4.11(m,1H),3.73(s,3H),3.41(s,2H),2.75-2.62(m,1H),2.39-2.21(m,4H),1.04(s,9H)。
酮酯61：甲基4-(3-乙氧基-3-氧代丙酰基)环庚烷甲酸酯,1H NMR(300MHz,CDCl3)δ12.14(s,0.1H),4.96(s,0.1H),4.19(q,J＝6.9Hz,2H),3.67(s,3H),3.48(s,1.8H),2.75-2.61(m,1H),2.59-2.45(m,1H),2.12-1.80(m,5.4H),1.75-1.53(m,4H),1.49-1.37(m,0.6H),1.28(t,J＝6.9Hz,3H)。
酮酯62：甲基3-(4-(N-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-甲基磺酰胺基)环己基)-3-氧代丙酸酯,1H NMR(400MHz,CDCl3)δ3.75-3.72(m,5H),3.52-3.50(m,2H),3.27-3.17(m,2H),2.89(s,3H),2.27-2.20(m,0.7H),2.06-1.92(m,3.3H),1.69-1.63(m,4.5H),1.55-1.45(m,1.5H),0.91(s,9H),0.08(s,6H)。
酮酯63：甲基3-(4-(N-(2-甲氧基乙基)氨磺酰基)环己基)-3-氧代丙酸酯,1H NMR(300MHz,CDCl3)δ4.55(br s,1H),3.75(s,3H),3.52-3.50(m,4H),3.38(s,3H),3.31-3.30(m,2H),2.99-2.84(m,1H),2.75(br s,0.4H),2.56-2.48(m,0.6H),2.33-2.24(m,2H),2.15-2.02(m,2H),1.87-1.57(m,3H),1.49-1.38(m,1H)。
酮酯64：叔丁基3-(4-(3-甲氧基-3-氧代丙酰基)-环己烷磺酰胺基)-2,2-二甲基丙酸酯,1H NMR(300MHz,CDCl3)δ4.94-4.86(m,1H),3.77(s,1.5H),3.75(s,1.5H),3.53(s,1.4H),3.41(s,0.6H),3.10(d,J＝6.3Hz,2H),2.97-2.88(m,1H),2.56-2.46(m,1H),2.36-2.23(m,2H),2.19-1.97(m,2H),1.88-1.79(m,0.4H),1.70-1.53(m,2H),1.46(s,9H),1.31-1.25(m,0.6H),1.21(s,6H)。
酮酯65R：乙基6-(3-乙氧基-3-氧代丙酰基)四氢-2H-吡喃-3-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝2.151min，C13H20O6的计算质量272.1，m/z发现值273.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ4.47-3.83(m,6H),3.75-3.54(m,2H),3.49-3.28(m,1H),2.76-2.57(m,1H),2.26-1.99(m,1H),1.93-1.65(m,2H),1.62-1.37(m,1H),1.32-1.04(m,6H)。
酮酯65S：乙基6-(3-乙氧基-3-氧代丙酰基)四氢-2H-吡喃-3-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝1.962min，C13H20O6的计算质量272.1，m/z发现值290.2[M+NH4]+。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ4.50-4.38(m,1H),4.28-4.10(m,4.3H),3.94-3.82(m,1H),3.70-4.46(m,2.7H),2.64-2.51(m,1H),2.32-2.20(m,1H),2.10-2.03(m,0.4H),1.87-1.68(m,2.2H),1.56-1.46(m,0.4H),1.31-1.24(m,6H)。
酮酯66：(trans)-叔丁基2-(((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)甲基)-4-(3-乙氧基-3-氧代丙酰基)哌啶-1-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝2.574min，C32H45NO6Si的计算质量567.3，m/z发现值468.3[M+H-Boc]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.15-12.12(m,0.1H),7.63(t,J＝5.6Hz,4H),7.48-7.42(m,6H),5.09-5.03(m,0.2H),4.50-4.29(m,1H),4.17-4.12(m,1H),4.07-4.04(m,2H),3.97-3.86(m,1H),3.73-3.63(m,3.7H),2.82-2.66(m,2H),2.08-2.02(m,0.5H),1.97-1.91(m,0.5H),1.87-1.69(m,1H),1.62-1.49(m,1H),1.39(s,4H),1.33(s,5H),1.27-1.14(m,3H),0.99(s,9H)。
酮酯67：(trans)-甲基3-(4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)环己基)-3-氧代丙酸酯,1H NMR(300MHz,CD3OD)δ3.70(s,3H),3.65-3.57(m,1H),3.34-3.29(m,2H),2.51-2.44(m,1H),2.00-1.86(m,4H),1.45-1.27(m,4H),0.90(s,9H),0.08(s,6H)。
酮酯68：叔丁基4-(3-甲氧基-3-氧代丙酰基)氮杂环庚烷-1-甲酸酯,1H NMR(400MHz,CDCl3)δ12.06(s,0.1H),4.96(s,0.1H),3.72(s,3H),3.61-3.38(m,4H),3.34-3.11(m,1.8H),2.60-2.55(m,1H),2.18-1.85(m,3H),1.74-1.51(m,3H),1.44(s,9H)。
酮酯69：甲基3-氧代-3-(1,4-二氧杂螺[4.5]癸-8-基)丙酸酯,1H NMR(400MHz,CDCl3)δ3.95-3.91(m,4H),3.73(s,3H),3.50(s,2H),2.52-2.45(m,1H),1.92-1.87(m,2H),1.82-1.77(m,2H),1.74-1.63(m,2H),1.59-1.53(m,2H)。
酮酯70：甲基3-(4-(氮杂环丁烷-1-基磺酰基)环己基)-3-氧代丙酸酯
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ12.27(s,0.1H),12.06(s,0.1H),5.07(s,0.1H),4.97(s,0.1H),4.00-3.95(m,4H),3.75(s,2H),3.74(s,1H),3.52(s,0.7H),3.50(s,0.7H),2.91-2.70(m,1.5H),2.53-2.44(m,0.5H),2.30-2.21(m,4H),2.11-2.07(m,1H),2.02-1.92(m,1H),1.83-1.73(m,2H),1.64-1.51(m,2H),1.46-1.33(m,1H)。
酮酯：71：乙基3-(3-((叔丁氧基羰基)氨基)-2,2-二甲基环丁基)-3-氧代丙酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝1.662min，C16H27NO5的计算质量313.2，m/z发现值258.0[M-tBu+H]+。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.70(s,0.3H),7.10(s,0.7H),4.59(br s,0.5H),4.24-4.15(m,2H),3.86-3.83(m,0.5H),3.38-3.27(m,2H),2.89-2.83(m,0.6H),2.21-2.04(m,1.4H),1.69(brs,1H),1.43-1.38(m,9H),1.30-1.25(m,6H),0.91-0.86(s,3H)。
酮酯72：甲基3-(4-(N-(3-甲氧基-3-氧代丙基)氨磺酰基)环己基)-3-氧代丙酸酯,1H NMR(300MHz,CDCl3)δ12.07(s,0.2H),4.99(s,0.2H),4.91-4.79(m,1H),3.74(s,3H),3.72(s,3H),3.52(s,1.6H),3.40-2.31(m,2H),2.98-2.81(m,1H),2.78-2.71(m,0.4H),2.65-2.60(m,1.6H),2.57-2.46(m,0.5H),2.34-1.94(m,3.5H),1.37-1.36(m,4H)。
具有通式I的二氢嘧啶：
化合物1：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(1-甲基-2-氧代哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯(4种立体异构体的混合物)
化合物1(600mg，1.29mmol)进一步通过手性制备型HPLC分离(第一分离条件：柱：Chiralpak IB 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH＝90:10，以15mL/min；温度：30℃；波长：214nm，随后是第二分离条件：Chiralpak IC5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH＝50:50，以10mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到立体异构体化合物1A(10.6mg，1.8％产率)，化合物1C(77.2mg，13％产率)，化合物1B(71.8mg，12％产率)，和化合物1D(117mg，20％产率)。
化合物1A：LC-MS(ESI)：RT＝3.863min，C21H20ClFN4O3S的计算质量462.1，m/z发现值462.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝50:50，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm；RT＝9.256min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.62(d,J＝3.6Hz,0.9H),9.30(s,0.1H),8.02-7.99(m,1.9H),7.94(d,J＝3.2Hz,0.1H),7.42(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),7.39-7.36(m,1H),7.22(td,J＝8.4,2.8Hz,1H),6.03(s,0.1H),5.93(d,J＝4.0Hz,0.9H),4.32-4.22(m,0.1H),4.12-4.04(m,0.9H),3.53(s,2.7H),3.51(s,0.3H),3.32-3.26(m,2H),2.87(s,3H),2.66-2.60(m,1H),2.40-2.32(m,1H),2.06-1.96(m,1H),1.91-1.81(m,1H)。
化合物1B：LC-MS(ESI)：RT＝3.846min，C21H20ClFN4O3S的计算质量462.1，m/z发现值462.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝50:50，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm；RT＝10.048min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.59(d,J＝3.6Hz,0.9H),9.26(s,0.1H),8.02-8.00(m,1.9H),7.93(d,J＝3.2Hz,0.1H),7.43(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),7.40-7.37(m,1H),7.22(td,J＝8.4,2.4Hz,1H),6.01(s,0.1H),5.93(d,J＝3.6Hz,0.9H),4.30-4.25(m,0.1H),4.12-4.01(m,0.9H),3.52(s,2.7H),3.51(s,0.3H),3.39-3.36(m,2H),2.87(s,3H),2.47-2.40(m,1H),2.22(dd,J＝16.8,4.0Hz,1H),2.17-2.06(m,1H),2.00-1.94(m,1H)。
化合物2：甲基6-(1-乙酰基哌啶-4-基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯(2种立体异构体的混合物)
化合物2(190mg，0.400mmol)进一步通过手性制备型HPLC分离(柱：Chiralpak OD-H 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH＝90:10，以15mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，随后是制备型HPLC分离(柱：Xbrige C18 5μm19*150mm，流动相A：水(0.1％盐酸)，流动相B：乙腈，流速：20mL/min，梯度：30％-50％(％B))，得到呈黄色固体的立体异构体化合物2A(19.6mg，16％产率)和化合物2B(19.4mg，15.4％产率)。
化合物2B：LC-MS(ESI)：RT＝4.331min，C22H22ClFN4O3S的计算质量476.1，m/z发现值477.1[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak OD-H 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝80:20，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm,100％ee,RT＝7.351min)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ8.32(d,J＝2.8Hz,1H),8.27(d,J＝3.2Hz,1H),7.58-7.55(m,1H),7.40(dd,J＝8.0,2.4Hz,1H),7.22(td,J＝8.4,2.8Hz,1H),6.33(s,1H),4.74(d,J＝13.2Hz,1H),4.21-4.14(m,2H),3.69(s,3H),3.31-3.24(m,1H),2.83-2.74(m,1H),2.23(s,1.5H),2.21(s,1.5H),2.15-1.85(m,4H)。
化合物3：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(2-氧代哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢-嘧啶-5-甲酸酯(4种立体异构体的混合物)
化合物3(250mg，0.56mmol)进一步通过手性制备型HPLC分离(分离条件：第一分离(柱：Chiralpak ID 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH＝70:30，以12mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，随后是第二分离：方法A(柱：Chiralpak IC 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH＝50:50，以8mL/min；温度：30℃；波长：214nm)和方法B(柱：Chiralpak IF 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝60:40:0.3，以10mL/min；温度：30℃；波长：214nm))，得到立体异构体化合物3A(20.5mg，8％产率)，化合物3B(41.1mg，16％产率)，化合物3C(24.6mg，10％产率)和化合物3D(27.9mg，11％产率)。
化合物3A：LC-MS(ESI)：RT＝3.647min，C20H18ClFN4O3S的计算质量448.1，m/z发现值448.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝50:50，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝10.135min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.84(d,J＝3.2Hz,1H),7.51(d,J＝2.8Hz,1H),7.50-7.49(m,1H),7.28-7.27(m,1H),7.16-7.13(m,1H),6.96(td,J＝8.0,2.4Hz,1H),6.07(d,J＝2.8Hz,1H),5.81(br s,1H),4.37-4.32(m,1H),3.62(s,3H),3.51-3.48(m,0.4H),3.43-3.39(m,1.6H),3.00-2.93(m,1H),2.65-2.59(m,1H),2.14-2.07(m,1H),1.96-1.91(m,1H)。
化合物3C：LC-MS(ESI)：RT＝3.643min，C20H18ClFN4O3S的计算质量448.1，m/z发现值448.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IF 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝60:40，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝10.646min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.83(d,J＝3.2Hz,1H),7.52(d,J＝2.8Hz,1H),7.46(br s,1H),7.29-7.27(m,1H),7.16(dd,J＝8.4,2.8Hz,1H),6.95(td,J＝8.4,2.4Hz,1H),6.11(d,J＝2.8Hz,1H),5.80(br s,1H),4.31-4.29(m,1H),3.61(s,3H),3.53-3.50(m,2H),2.87-2.80(m,1H),2.46-2.40(m,1H),2.29-2.24(m,1H),2.13-2.09(m,1H)。
化合物4：甲基4-(2-氯-3-氟苯基)-6-(1-甲基-2-氧代哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯(4种立体异构体的混合物)
化合物4(0.51g，1.1mmol)进一步通过手性制备型HPLC分离(分离条件：柱：Chiralpak IA 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝80:20:0.3，以20mL/min；温度：30℃；波长：230nm和柱：Chiralpak IB 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝90:10:0.3，以15mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到立体异构体化合物4A(107mg，83％产率)，化合物4B(54mg，42％产率)，化合物4C(58mg，45％产率)和化合物4D(109mg，85％产率)。
化合物4B：LC-MS(ESI)：RT＝3.975min，C21H20ClFN4O3S的计算质量462.1，m/z发现值462.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IB 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝90:10:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm；RT＝11.927min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.66(br s,0.9H),9.32(br s,0.1H),8.03-8.00(m,1.9H),7.94(d,J＝3.6Hz,0.1H),7.42-7.32(m,2H),7.25-7.21(m,0.9H),7.18-7.14(m,0.1H),6.09(s,0.1H),5.98(s,0.9H),4.33-4.23(m,0.1H),4.14-4.04(m,0.9H),3.53(s,2.7H),3.51(s,0.3H),3.32-3.28(m,2H),2.87(s,3H),2.66-2.60(m,1H),2.39-2.34(m,1),2.07-1.97(m,1H),1.90-1.81(m,1H)。
化合物8：甲基4-(2-氯-3-氟苯基)-6-(1-((1-甲氧基-2-甲基-1-氧代丙-2-基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
LC-MS(ESI)：RT＝4.436min，C25H28ClFN4O6S2的计算质量598.1，m/z发现值598.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝70:30:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝6.361min和10.935min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.62(d,J＝3.6Hz,0.8H),9.39(s,0.2H),8.00(s,1.8H),7.93(d,J＝2.8Hz,0.2H),7.40-7.31(m,2H),7.22-7.15(m,1H),6.06(s,0.2H),5.97(d,J＝3.6Hz,0.8H),4.08-3.98(m,0.2H),3.80-3.74(m,5.8H),3.53(s,3H),3.06-2.98(m,2H),2.08-2.00(m,1H),1.87-1.85(m,2H),1.72-1.61(m,7H)。
化合物37：甲基4-(2-氯-3-氟苯基)-6-(3-(甲基磺酰基)-3-氮杂双环[3.2.1]辛-8-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯(2种立体异构体的混合物)
化合物37(30mg，0.060mmol)进一步通过手性制备型HPLC分离(柱：Chiralpak IF5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH＝50:50，以8mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到呈黄色固体的立体异构体化合物37A(3.1mg，10％产率)和化合物37B(3.0mg，10％产率)。
化合物37B：LC-MS(ESI)：RT＝3.099min，C23H24ClFN4O4S2的计算质量538.1，m/z发现值538.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IF 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝50:50，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝14.052min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.35(s,0.2H),7.84(d,J＝3.2Hz,0.7H),7.82(d,J＝3.2Hz,0.3H),7.52(d,J＝3.2Hz,1.5H),7.46(d,J＝2.8Hz,0.3H),7.24-7.20(m,0.8H),7.18-7.15(m,0.2H),7.11-7.08(m,1.8H),7.05-7.00(m,0.2H),6.28(s,0.3H),6.14(d,J＝2.8Hz,0.7H),3.86(s,0.2H),3.74-3.65(m,2.8H),3.60(s,2.1H),3.59(s,0.9H),3.18-3.12(m,1H),3.08-3.04(m,1H),2.82(s,3H),2.68(br s,0.7H),2.63-2.61(m,0.6H),2.55(br s,0.7H),2.14-2.01(m,2.5H),1.87-1.77(m,1.5H)。
化合物38：4-(2-氯-4-氟-苯基)-6-(8-甲烷磺酰基-8-氮杂-双环[3.2.1]辛-3-基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氢-嘧啶-5-甲酸甲基酯(2种立体异构体的混合物)
化合物38(100mg，0.186mmol)进一步通过手性制备型HPLC分离(柱：Chiralpak IA5μm 20*250mm，流动相：Hex:EtOH＝85:15，以20mL/min，温度：30℃，波长：230nm)，得到立体异构体化合物38A(19.7mg，20％产率)和化合物38B(19.4mg，19％产率)。
化合物38B：LC-MS(ESI)：RT＝3.995min，C23H24ClFN4O4S2的计算质量538.1，m/z发现值538.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝85:15，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝14.787min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.52(d,J＝3.6Hz,0.8H),9.05(s,0.2H),8.00-7.98(m,1.8H),7.93(d,J＝2.8Hz,0.2H),7.44-7.40(m,1H),7.34-7.28(m,1H),7.23-7.16(m,1H),6.01(s,0.2H),5.92(d,J＝3.6Hz,0.8H),4.49-4.40(m,0.2H),4.27-4.15(m,2.8H),3.54(s,3H),2.99(s,3H),2.20-1.94(m,4H),1.85-1.66(m,3.2H),1.52-1.49(m,0.8H)。
化合物39：4-(2-氯-3-氟-苯基)-6-(8-甲烷磺酰基-8-氮杂-双环[3.2.1]辛-3-基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氢-嘧啶-5-甲酸甲基酯(2种立体异构体的混合物)
化合物39(74mg，0.137mmol)进一步通过手性制备型HPLC分离(柱：Chiralpak IA5μm 20*250mm，流动相：Hex:IPA:DEA＝90:10:0.3，以20mL/min，温度：30℃，波长：230nm)，得到立体异构体化合物39A(15.8mg，21％产率)和化合物39B(18.4mg，25％产率)。
化合物39B：LC-MS(ESI)：RT＝3.899min，C23H24ClFN4O4S2的计算质量538.1，m/z发现值538.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:IPA:DEA＝90:10:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝17.400min)；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.61(d,J＝3.6Hz,0.8H),9.12(s,0.2H),8.00-7.94(m,2H),7.40-7.29(m,2H),7.19-7.13(m,1H),6.06(s,0.2H),5.97(d,J＝3.2Hz,0.8H),4.50-4.41(m,0.2H),4.27-4.21(m,2.8H),3.54(s,3H),3.00(s,3H),2.21-1.95(m,4H),1.87-1.67(m,3.2H),1.53-1.50(m,0.8H)。
化合物47：乙基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-环己基-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢-嘧啶-5-甲酸酯(2种立体异构体的混合物)
化合物47(150mg，0.33mmol)进一步通过手性制备型HPLC分离(柱：Chiralpak IA5μm 20*250mm；流动相：Hex:IPA:DEA＝98:2:0.3，以15mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到呈黄色固体的立体异构体化合物47A(31.4mg，21％产率)和化合物47B(32.1mg，21％产率)。
化合物47A：LC-MS(ESI)：RT＝4.304min，C22H23ClFN3O2S的计算质量447.1，m/z发现值448.1[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:IPA:DEA＝95:5:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝5.332min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.40(d,J＝2.8Hz,0.5H),8.79(s,0.5H),7.99-7.94(m,2H),7.44-7.41(m,1H),7.36-7.32(m,1H),7.24-7.19(m,1H),6.02(s,0.5H),5.90(d,J＝3.2Hz,0.5H),3.99-3.92(m,2H),3.87-3.81(m,0.5H),3.61(br s,0.5H),1.82-1.56(m,7H),1.33-1.23(m,3H),1.09-1.03(m,3H)。
化合物48：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(四氢-2H-吡喃-3-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯(4种立体异构体的混合物)
化合物48(300mg，0.690mmol)进一步通过手性制备型HPLC分离(分离条件：柱：Chiralpak IE 5μm 20*250mm，流动相：Hex:EtOH＝85:15，以11mL/min，温度：30℃，波长：214nm)，得到呈黄色固体的立体异构体化合物48A(7.7mg，3％产率)，化合物48B(10.4mg，3％产率)，化合物48C(87.5mg，29％产率)和化合物48D(88mg，29％产率)。
化合物48A：LC-MS(ESI)：RT＝4.273min，C20H19ClFN3O3S的计算质量435.1，m/z发现值435.9[M+H]+。手性HPLC(Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm，流动相：Hex:EtOH:DEA＝90:10:0.2，以1.0mL/min，温度：30℃，波长：230nm，RT＝7.397min)；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.87(s,0.4H),9.48(d,J＝3.6Hz,0.6H),8.00-7.98(m,1.5H),7.93(d,J＝3.6Hz,0.5H),7.45-7.40(m,1.4H),7.35-7.31(m,0.6H),7.22-7.14(m,1H),6.02(s,0.4H),5.91(d,J＝3.6Hz,0.6H),4.17(dd,J＝11.6,8.0Hz,0.5H),3.94-3.79(m,3H),3.68-3.59(m,1H),3.53(s,1.8H),3.50(s,1.2H),3.36-3.34(m,0.5H),1.99-1.86(m,1.5H),1.73-1.53(m,2.5H)。
化合物48D：LC-MS(ESI)：RT＝4.124min，C20H19ClFN3O3S的计算质量435.1，m/z发现值435.9[M+H]+。手性HPLC(Chiralpak IE 5μm 4.6*250mm，流动相：Hex:EtOH＝80:20，以1.0mL/min，温度：30℃，波长：230nm，RT＝9.849min)；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.77(s,0.4H),9.50(d,J＝3.6Hz,0.6H),8.01-7.98(m,1.5H),7.92(d,J＝3.2Hz,0.5H),7.44-7.40(m,1H),7.38-7.33(m,1H),7.24-7.19(m,1H),6.04(s,0.4H),5.91(d,J＝3.6Hz,0.6H),4.03(dd,J＝10.0,3.6Hz,0.4H),3.92-3.72(m,3H),3.64-3.56(m,1H),3.53(s,1.8H),3.49(s,1.2H),3.37-3.34(m,0.6H),2.09-1.61(m,4H)。
化合物49：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(四氢-2H-吡喃-2-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯(4种立体异构体的混合物)
化合物49(450mg，1.03mmol)进一步通过手性制备型HPLC分离(柱：Chiralpak IF5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH＝90:10，以15mL/min；温度：30℃；波长：230nm)，得到立体异构体化合物49A(100mg，22％产率，两种立体异构体的混合物)和化合物49B(41.0mg，10％产率)，化合物49C(54.0mg，12％产率)。
化合物49C：LC-MS(ESI)：RT＝4.296min，C20H19ClFN3O3S的计算质量435.1，m/z发现值435.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IF 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝90:10，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝8.252min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.91(s,1H),8.00(d,J＝3.2Hz,1H),7.96(d,J＝3.2Hz,1H),7.43(dd,J＝8.8,3.2Hz,1H),7.32(dd,J＝8.8,6.2Hz,1H),7.23-7.18(m,1H),6.06(s,1H),5.15(d,J＝8.0Hz,1H),4.13(d,J＝10.0Hz,1H),3.63-3.57(m,1H),3.53(s,3H),2.01-1.99(m,1H),1.94-1.88(m,1H),1.70-1.56(m,4H)。
化合物51：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯(2种立体异构体的混合物)
化合物51(150mg，0.35mmol)进一步通过手性制备型HPLC分离(柱：Chiralpak IE5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH＝90:10，以15mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到呈黄色固体的立体异构体化合物51A(45.6mg，30％产率)和化合物51B(59.7mg，40％产率)。
化合物51B：LC-MS(ESI)：RT＝3.957min，C20H19ClFN3O3S的计算质量435.1，m/z发现值435.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IE 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝85:15，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝9.116min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.48(d,J＝3.6Hz,0.8H),8.95(s,0.2H),8.00(s,1.8H),7.94(d,J＝3.6Hz,0.2H),7.45-7.41(m,1H),7.37-7.32(m,1H),7.23-7.17(m,1H),6.02(s,0.2H),5.92(d,J＝3.2Hz,0.8H),4.13-4.06(m,0.2H),4.02-3.82(m,2.8H),3.53(s,2.1H),3.52(s,0.9H),3.39(q,J＝10.4Hz,2H),2.10-2.00(m,1H),1.98-1.87(m,1H),1.72(d,J＝11.2Hz,0.2H),1.63-1.57(m,1H),1.42(d,J＝13.2Hz,0.8H)。
化合物50：4-(2-氯-3-氟-苯基)-6-(四氢-吡喃-4-基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氢-嘧啶-5-甲酸甲基酯(2种立体异构体的混合物)
化合物50(150mg，0.35mmol)进一步通过手性制备型HPLC分离(柱：Chiralpak IE5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH＝90:10，以15mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到呈黄色固体的立体异构体化合物50A(54.8mg，37％产率)和化合物50B(52.1mg，35％产率)。
化合物50B：LC-MS(ESI)：RT＝3.715min，C20H19ClFN3O3S的计算质量435.1，m/z发现值435.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IE 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝85:15，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝9.537min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.57(d,J＝3.6Hz,0.8H),9.00(s,0.2H),8.01(s,1.7H),7.94(d,J＝3.2Hz,0.3H),7.40-7.29(m,2H),7.21-7.16(m,1H),6.07(s,0.3H),5.97(d,J＝3.6Hz,0.7H),4.14-4.08(m,0.2H),4.01-3.84(m,2.8H),3.52(s,3H),3.46-3.37(m,2H),2.10-2.00(m,1H),1.98-1.88(m,1H),1.72(d,J＝13.2Hz,0.2H),1.59(t,J＝13.4Hz,1H),1.41(d,J＝15.6Hz,0.8H)。
化合物69：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(1-(甲基磺酰基)吡咯烷-2-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯(4种立体异构体的混合物)
化合物69进一步通过制备型HPLC纯化(柱：Gilson X-bridge C18(5μm 19*150mm)；流动相A：水(0.1％碳酸氢铵)，流动相B：乙腈，UV：214nm，流速：15mL/min梯度：40％-70％(％B))，得到呈黄色固体的两种混合物化合物69X(60mg，6％产率，2种立体异构体的混合物)和化合物69Y(60mg，6％产率，2种立体异构体的混合物)。
化合物69Y(60mg，0.12mmol)进一步通过手性制备型HPLC分离(柱：Chiralpak IC5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝60:40:0.3，以12mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到呈黄色固体的立体异构体化合物69C(11.0mg，18％产率)和化合物69D(9.6mg，16％产率)。
化合物69C：LC-MS(ESI)：RT＝3.901min，C20H20ClFN4O4S2的计算质量498.1，m/z发现值498.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝80:20:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝8.394min)；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.62(d,J＝3.6Hz,0.3H),8.89(s,0.6H),7.99(dd,J＝20.4,2.8Hz,2H),7.58(t,J＝6.4Hz,0.3H),7.51(dd,J＝8.2,6.6Hz,0.7H),7.43(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),7.10(td,J＝8.4,2.0Hz,1H),6.00(s,0.7H),5.87(d,J＝3.6Hz,0.3H),5.75-5.72(m,0.3H),5.44(t,J＝7.2Hz,0.7H),3.62-3.50(m,5H),3.12(s,2H),2.95(s,1H),2.67-2.60(m,1H),2.30-2.25(m,0.2H),2.19-2.10(m,0.3H),2.00-1.77(m,2.5H)。
化合物70：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(四氢呋喃-2-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯(4种立体异构体的混合物)
化合物70(300mg，0.71mmol)进一步通过手性制备型HPLC分离(分离条件：柱：Chiralpak IE 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH＝80:20，以10ml/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到立体异构体化合物70C(25mg，8.3％产率)，化合物70D(26mg，8.6％产率)和化合物70A和化合物70B的混合物(120mg)。将混合物(120mg)通过手性制备型HPLC分离(分离条件：柱：Chiralpak ID 5μm 20*250mm；流动相：Hex:IPA＝80:20，以12mL/min；温度：30℃；波长：230nm)，得到立体异构体化合物70A(14mg，4.6％产率)和化合物70B(20mg，6.6％产率)。
化合物70D：LC-MS(ESI)：RT＝3.558min，C19H17ClFN3O3S的计算质量421.1，m/z发现质量421.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IE 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:IPA＝80:20，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝11.261min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.97(s,1H),8.01(d,J＝2.8Hz,1H),7.96(d,J＝2.8Hz,1H),7.43(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),7.35-7.32(m,1H),7.20(td,J＝8.4,2.0Hz,1H),6.06(s,1H),5.40(t,J＝7.2Hz,1H),4.12-4.09(m,1H),3.95-3.91(m,1H),3.53(s,3H),2.61-2.55(m,1H),2.02-1.88(m,3H)。
化合物74：甲基4-(2-氯-3-氟苯基)-6-(四氢呋喃-3-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯(4种立体异构体的混合物)
化合物74(300mg，0.710mmol)进一步通过手性制备型HPLC分离(第一分离条件(柱：Chiralpak IC 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝50:50:0.3，以8mL/min；温度：30℃；波长：230nm)随后第二分离条件：方法A(柱：Chiralpak IA 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝90:10:0.2，以12mL/min；温度：30℃；波长：214nm)和方法B:(柱：ChiralpakIE 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝90:10:0.3，以12mL/min；温度：30℃；波长：214nm))，得到呈黄色固体的立体异构体化合物74A(27mg，9％产率)，化合物74B(32mg，11％产率)，化合物74C(26mg，9％产率)和化合物74D(23mg，8％产率)。
化合物74A：LC-MS(ESI)：RT＝3.603min，C19H17ClFN3O3S的计算质量421.1，m/z发现值422.1[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝90:10:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝8.120min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.67(d,J＝3.6Hz,0.6H),8.89(s,0.4H),8.01-7.99(m,1.6H),7.95-7.94(m,0.4H),7.40-7.30(m,2H),7.24-7.20(m,1H),6.08(s,0.4H),5.96(d,J＝3.6Hz,0.6H),4.70-4.65(m,0.4H),4.41-4.33(m,0.6H),4.17-4.13(m,0.5H),4.07-4.04(m,0.5H),3.96-3.90(m,1.3H),3.87-3.82(m,0.7H),3.74-3.68(m,0.3H),3.66-3.62(m,0.7H),3.53-3.51(m,3H)2.37-2.29(m,1H),2.14-2.05(m,1H)。
化合物74C：LC-MS(ESI)：RT＝3.600min，C19H17ClFN3O3S的计算质量421.1，m/z发现值422.1[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝90:10:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝10.731min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.67(s,0.6H),8.88(s,0.4H),8.01(s,1.8H),7.95(s,0.2H),7.41-7.32(m,2H),7.25-7.22(m,1H),6.08(s,0.4H),5.96(s,0.6H),4.71-4.65(m,0.3H),4.42-4.33(m,0.6H),4.16-3.81(m,2.7H),3.73-3.57(m,1.4H),3.53(s,3H),2.35-2.30(m,1H),2.14-2.04(m,1H)。
化合物74D：LC-MS(ESI)：RT＝3.704min，C19H17ClFN3O3S的计算质量421.1，m/z发现值421.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝90:10:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝14.190min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.63(s,0.6H),8.98(s,0.4H),8.01(s,1.8H),7.95(s,0.2H),7.38-7.15(m,3H),6.08(s,0.4H),6.00(s,0.6H),4.67-4.61(m,0.3H),4.39-4.20(m,1H),4.07-4.03(m,1H),3.95-3.66(m,2.7H),3.53(s,3H),2.22-2.16(m,1H),1.98-1.90(m,1H)。
化合物75：甲基4-(2-氯-3-氟苯基)-6-(5-氧代吡咯烷-2-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯(4种立体异构体的混合物)
化合物75(400mg，0.920mmol)进一步通过手性制备型HPLC分离(柱：ChiralpakIB,Hex:EtOH＝85:15；13mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到产物，将其接着通过C18纯化(乙腈:水＝5％至100％)，得到呈黄色固体的立体异构体化合物75A(66mg，17％产率)，化合物75B(20mg，5％产率)，化合物75C(130mg，33％产率)和化合物75D(25mg，6％产率)。
化合物75A：LC-MS(ESI)：RT＝1.842min，C19H16ClFN4O3S的计算质量434.1，m/z发现值435.1[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IB 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝85:15，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝8.614min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.56(s,0.2H),7.81(d,J＝2.8Hz,0.8H),7.71(d,J＝2.8Hz,0.3H),7.49(s,0.7H),7.46(d,J＝3.2Hz,1H),7.42(d,J＝2.8Hz,0.2H),7.24-7.17(m,0.9H),7.14-7.03(m,1.9H),6.22(s,0.3H),6.14(d,J＝7.2Hz,1.7H),5.80(t,J＝8.4Hz,0.3H),5.55(d,J＝6.8Hz,0.7H),3.62(d,J＝4.8Hz,3H),2.90-2.80(m,0.2H),2.76-2.67(m,0.8H),2.53-2.25(m,2.8H),2.06-1.96(m,0.2H)。
化合物75D：LC-MS(ESI)：RT＝2.560min min，C19H16ClFN4O3S的计算质量434.1，m/z发现值435.1[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IB 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝85:15，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝15.809min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.61(s,0.3H),7.83(d,J＝2.4Hz,0.7H),7.81(s,0.3H),7.52(s,1.4H),7.45(s,0.3H),7.24-7.16(m,1H),7.13-7.04(m,2H),6.27(s,0.3H),6.12(s,0.7H),5.83-5.72(m,1.3H),5.59(d,J＝7.2Hz,0.7H),3.63(s,2H),3.60(s,1H),2.94-2.84(m,0.3H),2.80-2.71(m,0.7H),2.65-2.37(m,2.8H),2.21-2.10(m,0.2H)。
化合物90：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-环丙基-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物90(140mg，0.358mmol)进一步通过手性制备型HPLC分离(分离条件：柱：Chiralpak IA 5μm 20*250mm；流动相：Hex:IPA＝95:5，以11mL/min；温度：30℃；波长：230nm)，得到呈黄色固体的立体异构体化合物90A(46.2mg，33％产率)和化合物90B(46.6mg，33％产率)。
化合物90A：LC-MS(ESI)：RT＝3.429min，C18H15ClFN3O2S的计算质量391.1，m/z发现值391.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:IPA＝95:5，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝7.842min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.48(d,J＝3.2Hz,1H),7.99-7.97(m,2H),7.40(dd,J＝8.8,2.8Hz,1H),7.33(dd,J＝8.8,J＝6.4Hz,1H),7.21(td,J＝8.4,2.4Hz,1H),5.91(d,J＝3.2Hz,1H),3.54(s,3H),3.22-3.18(m,1H),1.23-1.18(m,1H),1.01-1.00(m,1H),0.87-0.83(m,1H),0.81-0.77(m,1H)。
具有通式I的主要二氢嘧啶的转化(来自表1)：
具有通式I的主要二氢嘧啶：
化合物5：6-(1-叔丁氧基羰基-哌啶-4-基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氢-嘧啶-5-甲酸甲基酯(2种立体异构体的混合物)
化合物5(7.00g，13.1mmol)进一步通过手性制备型HPLC分离(柱：Chiralpak IA 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH＝90:10，以23mL/min；温度：30℃；波长：230nm)，得到立体异构体化合物5A(2.44g，35％产率)和化合物5B(1.56g，22％产率)。
化合物5A：SFC(分析条件：柱：Chiralpak IG；流动相：CO2:MeOH＝70:30，以1.0mL/min；温度：41℃；波长：230nm，RT＝2.59min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.12(s,0.5H),7.81(t,J＝3.2Hz,1H),7.48(d,J＝3.2Hz,0.6H),7.44(d,J＝3.6Hz,0.4H),7.41(br s,0.5H),7.30-7.27(m,1H),7.15-7.11(m,1H),6.96-6.88(m,1H),6.19(s,0.4H),6.06(d,J＝2.8Hz,0.6H),4.35-4.21(m,2H),4.20-4.12(m,0.4H),3.96-3.89(m,0.6H),3.60(s,2.4H),3.59(s,0.6H),2.94-2.78(m,2H),2.10-1.79(m,3H),1.74-1.63(m,1H),1.50(s,9H)。
化合物5B：LC-MS(ESI)：RT＝2.191min，C25H28ClFN4O4S的计算质量534.2m/z发现值534.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝85:15，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝6.154min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.12(s,0.5H),7.82(t,J＝3.2Hz,1H),7.47(dd,J＝20.4,3.0Hz,1H),7.41(br s,0.5H),7.30-7.28(m,1H),7.15-7.11(m,1H),6.96-6.88(m,1H),6.19(s,0.4H),6.06(d,J＝2.4Hz,0.6H),4.36-4.22(m,2H),4.20-4.12(m,0.4H),3.96-3.88(m,0.6H),3.60(s,2.4H),3.59(s,0.6H),2.95-2.79(m,2H),2.09-1.74(m,3H),1.63-1.58(m,1H),1.50(s,9H)。
化合物10：甲基6-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-3-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯(2种立体异构体的混合物)
化合物10(1.02g，1.91mmol)进一步通过手性制备型HPLC分离(柱：Chiralpak IA5μm 20*250mm；流动相：Hex:IPA＝95:5，以20mL/min；温度：30℃；波长：230nm)，得到立体异构体化合物10A(420mg，42％产率)和化合物10B(384mg，38％产率)。
化合物10A：LC-MS(ESI)：RT＝1.68min，C25H28ClFN4O4S的计算质量534.2m/z发现值535.5[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:IPA:DEA＝95:5:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝10.336min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.84(d,J＝2.8Hz,1H),7.50(d,J＝2.4Hz,1H),7.21-7.12(m,2H),7.06(t,J＝8.4Hz,1H),6.20(s,1H),4.28(br s,2H),4.06(br s,1H),3.60(s,3H),2.92-2.82(m,2H),1.89-1.74(m,4H),1.50(s,9H)。
化合物12：甲基4-(2-溴-4-氟苯基)-6-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
LC-MS(ESI)：RT＝1.61min，C25H28BrFN4O4S的计算质量578.1m/z发现值579.4[M+H]+。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.46(d,J＝3.2Hz,0.8H),9.10(s,0.2H),7.99-7.97(m,1.7H),7.92(d,J＝3.2Hz,0.3H),7.58-7.54(m,1H),7.37-7.21(m,2H),5.98(s,0.3H),5.89(d,J＝3.2Hz,0.7H),4.18-3.98(m,2H),3.83-3.75(m,1H),3.53(s,2.1H),3.51(s,0.9H),2.82-2.71(m,2H),1.99-1.62(m,4H),1.44(s,9H)。
化合物13：6-(1-叔丁氧基羰基-哌啶-4-基)-4-(2-氯-3-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氢-嘧啶-5-甲酸甲基酯
LC-MS(ESI)：RT＝2.793min，C25H28ClFN4O4S的计算质量，m/z发现值534.7[M+H]+。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.22(s,1H),7.85-7.83(m,1H),7.54(d,J＝2.8Hz,0.2H),7.49(d,J＝3.6Hz,0.8H),7.35-7.29(m,1H),7.16-7.05(m,2H),5.78(s,0.8H),5.60(d,J＝2.8Hz,0.2H),4.29(br s,2H),4.15-4.08(m,1H),3.67(s,2.4H),3.65(s,0.6H),2.91-2.80(m,2H),1.90-1.82(m,2H),1.73-1.65(m,1H),1.59-1.54(m,1H),1.50(s,9H)。
化合物14：甲基6-(trans-4-((叔丁氧基羰基)氨基)环己基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.46(d,J＝3.2Hz,0.6H),9.07(s,0.4H),8.00-7.99(m,1.6H),7.93(d,J＝3.2Hz,0.4H),7.44-7.40(m,1H),7.36-7.29(m,1H),7.24-7.18(m,1H),6.82-6.75(m,1H),6.00(s,0.4H),5.90(d,J＝3.6Hz,0.6H),3.84-3.76(m,0.4H),3.60-3.54(m,0.6H),3.51(s,1.8H),3.50(s,1.2H),3.29-3.08(m,1H),1.94-1.73(m,6H),1.40(s,9H),1.30-1.18(m,2H)。
化合物15：甲基6-(cis-4-((叔丁氧基羰基)氨基)环己基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
LC-MS(ESI)：RT＝3.371min，C26H30ClFN4O4S的计算质量548.2，m/z发现值548.8[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.47-9.44(m,0.3H),9.25(s,0.7H),8.02-8.00(m,1.3H),7.95(d,J＝3.2Hz,0.7H),7.43(dd,J＝8.8,2.8Hz,1H),7.32(dd,J＝8.4,6.0Hz,1H),7.21(td,J＝8.4,2.4Hz,1H),7.17-7.15(m,0.3H),6.81-6.75(m,0.7H),6.01(s,0.7H),5.90(t,J＝4.0Hz,0.3H),3.90-3.85(m,1H),3.51(s,0.9H),3.50(s,2.1H),3.30-3.06(m,1H),1.88-1.60(m,8H),1.45(s,9H)。
化合物16：甲基4-(2-氯-3-氟苯基)-6-(trans-4-(甲氧基羰基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯(2种立体异构体的混合物)
化合物16(300mg，0.08mmol)进一步通过手性制备型分HPLC离(分离条件：柱：Chiralpak IC 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝90:10:0.2，以12mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到呈黄色固体的立体异构体化合物16X(90mg，30％产率)和化合物16Y(180mg，60％产率)。
化合物16X：LC-MS(ESI)：RT＝4.874min，C23H23ClFN3O4S的计算质量491.1，m/z发现值491.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝90:10:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝10.425min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.47(d,J＝3.2Hz,0.6H),8.95(s,0.4H),7.99-7.98(m,1.6H),7.93(d,J＝3.2Hz,0.4H),7.39-7.28(m,2H),7.20-7.15(m,1H),6.06(s,0.4H),5.96(d,J＝3.6Hz,0.6H),3.86-3.78(m,0.4H),3.62-3.61(m,3H),3.59-3.54(m,0.6H),3.52-3.51(m,3H),2.35-2.31(m,0.6H),2.08-1.96(m,2H),1.91-1.79(m,2H),1.76-1.63(m,2H),1.48-1.41(m,2H)。(0.4H在DMSO溶剂中重叠)
化合物18：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-trans-4-(甲氧基羰基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯(2种立体异构体的混合物)
化合物18(459mg，0.93mmol)进一步通过手性制备型HPLC分离(分离条件：柱：Chiralpak IC 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH＝80:20，以13mL/min；温度：30℃；波长：230nm)，得到立体异构体化合物18X(194mg，85％产率)和化合物18Y(172mg，75％产率)。
化合物18X：LC-MS(ESI)：RT＝4.176min，C23H23ClFN3O4S的计算质量491.1，m/z发现值491.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝80:20，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝6.660min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.41(s,0.6H),8.92(s,0.4H),7.99(s,1.6H),7.93(s,0.4H),7.45-7.40(m,1H),7.38-7.31(m,1H),7.23-7.18(m,1H),6.01(s,0.4H),5.92(s,0.6H),3.87-3.78(m,0.4H),3.62(s,3H),3.58-3.56(m,0.6H),3.53-3.52(m,3H),2.37-2.30(m,0.6H),2.08-1.88(m,3H),1.81-1.61(m,3H),1.47-1.36(m,2H)。(0.4H在DMSO溶剂中重叠)
化合物20：乙基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(trans-4-(甲氧基羰基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯(两种立体异构体的混合物)
化合物20(300mg，0.59mmol)进一步通过手性制备型HPLC分离(柱：Chiralpak IC5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH＝80:20，以20mL/min；温度：30℃；波长：254nm)，得到呈黄色固体的立体异构体化合物20X(108mg，36％产率)和化合物20Y(103mg，34％产率)。
化合物20X：LC-MS(ESI)：RT＝3.193min，C24H25ClFN3O4S的计算质量505.1m/z发现值506.1[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝80:20，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm,100％ee,RT＝6.130min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.09(s,0.6H),7.82(t,J＝3.6Hz,1H),7.49(d,J＝3.2Hz,0.4H),7.45(d,J＝3.6Hz,0.5H),7.33-7.28(m,1.5H),7.14-7.11(m,1H),6.96-6.88(m,1H),6.20(s,0.6H),6.07(d,J＝2.8Hz,0.4H),4.06(q,J＝6.8Hz,2H),4.02-3.96(m,0.5H),3.79-3.72(m,0.5H),3.70(s,3H),2.45-2.38(m,1H),2.21-1.91(m,4H),1.80-1.63(m,3H),1.55-1.47(m,1H),1.14(t,J＝7.2Hz,3H)。
化合物22：乙基4-(2-氯-3-氟苯基)-6-(trans-4-(甲氧基羰基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯(2种立体异构体的混合物)
化合物22(290mg，0.574mmol)进一步通过SFC分离(柱：Chiralpak IC 5μm 20*250mm；流动相：CO2:MeOH:DEA＝60:40:0.3，以50g/min；共溶剂：MeOH；柱温：39.8℃；波长：214nm，背压：100巴)，得到呈淡黄色固体的立体异构体化合物22X(95mg，22％产率)和化合物22Y(100mg，34％产率)。
化合物22Y：LC-MS(ESI)：RT＝3.946min，C24H25ClFN3O4S的计算质量505.1，m/z发现值506.1[M+H]+。SFC分析条件：(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：CO2:MeOH＝60:40，以3mL/min；共溶剂：MeOH(0.2DEA)；柱温：40.2℃；波长：214nm，背压：100巴，RT＝3.92min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.50(d,J＝3.6Hz,0.6H),8.93(s,0.4H),7.99(d,J＝3.2Hz,1.5H),7.94(d,J＝3.6Hz,0.5H),7.38-7.29(m,2H),7.21-7.17(m,1H),6.08(s,0.5H),5.97(d,J＝3.6Hz,0.5H),4.00-3.93(m,2H),3.87-3.79(m,0.5H),3.62(s,3.5H),2.38-2.31(m,0.7H),2.05-1.98(m,2H),1.91-1.62(m,4.3H),1.45-1.39(m,2H),1.09-1.02(m,3H)。
化合物24：cis-甲基4-(2-氯-3-氟苯基)-6-(3-(甲氧基羰基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯(4种立体异构体的混合物)
将化合物24(1.91g)进一步通过硅胶柱色谱法(石油醚:二氯甲烷:乙酸乙酯＝10:10:1)纯化，得到两组可分离的立体异构体，组1(964mg)和组2(942mg)。组1(964mg)通过手性制备型HPLC分离(第一分离条件：柱：Chiralpak IA 5μm 20*250mm；流动相：MeOH:DCM:DEA＝60:40:0.3，以10mL/min；温度：30℃；波长：254nm；第二分离：柱：Chiralpak IC 5μm20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝90:10:0.3，以15mL/min；温度：30℃；波长：254nm)随后进一步通过制备型HPLC纯化(柱：Xbrige C18(5μm 19*150mm)，流动相A：水(0.1％氢氧化铵)，流动相B：乙腈，UV：214nm，流速：15mL/min，梯度：40％-80％(％B))，得到立体异构体化合物24M(247mg，26％产率)和化合物24N(297mg，31％产率)。组2(942mg)通过手性制备型HPLC分离(第一分离条件：柱：Chiralpak IE 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝90:10:0.3，以15mL/min；温度：30℃；波长：230nm；第二分离：柱：Chiralpak IC 5μm 20*250mm；流动相：Hex:IPA:DEA＝80:20:0.3，以15mL/min；温度：30℃；波长：230nm)随后进一步通过制备型HPLC纯化(柱：Xbrige C18(5μm 19*150mm)，流动相A：水(0.1％氢氧化铵)，流动相B：乙腈，UV：214nm，流速：15mL/min，梯度：40％-80％(％B))，得到立体异构体化合物24P(212mg，23％产率)和化合物24Q(190mg，20％产率)。
化合物24Q：LC-MS(ESI)：RT＝3.789min，C23H23ClFN3O4S的计算质量491.1，m/z发现值491.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IE 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝90:10:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝13.390min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.55(d,J＝3.6Hz,0.6H),9.18(s,0.4H),8.00-7.98(m,1.6H),7.94(d,J＝3.2Hz,0.4H),7.40-7.29(m,2H),7.21-7.15(m,1H),6.06(s,0.4H),5.96(d,J＝4.0Hz,0.6H),3.99-3.91(m,0.4H),3.72-3.66(m,0.6H),3.61-3.59(m,3H),3.52-3.51(m,3H),2.44-2.37(m,1H),1.94-1.86(m,3H),1.79-1.69(m,3H),1.50-1.30(m,2H)。
化合物26：甲基4-(2-氯-3-氟苯基)-6-(4-(2-乙氧基-2-氧代乙基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
LC-MS(ESI)：RT＝4.219min，C25H27ClFN3O4S的计算质量519.1，m/z发现值519.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.51-9.39(m,0.6H),8.97(s,0.4H),8.00-7.97(m,1.6H),7.93(d,J＝3.2Hz,0.4H),7.39-7.27(m,2H),7.20-7.15(m,1H),6.06(s,0.4H),5.96(s,0.6H),4.07(q,J＝6.8Hz,2H),3.87-3.77(m,0.6H),3.62-3.55(m,0.4H),3.51(s,1.6H),3.50(s,1.4H),2.25-2.19(m,2H),1.96-1.51(m,8H),1.20(t,J＝6.8Hz,3H),1.14-1.04(m,1H)。
化合物27：叔丁基5-甲基6-(2-氯-3-氟苯基)-4-(4-(2-乙氧基-2-氧代乙基)环己基)-2-(噻唑-2-基)嘧啶-1,5(6H)-二甲酸酯(4种立体异构体的混合物)
向甲基4-(2-氯-3-氟苯基)-6-(4-(2-乙氧基-2-氧代乙基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯化合物26(850mg，2.0mmol)在1,4-二噁烷(20mL)中的溶液中添加二碳酸二叔丁酯(713mg，3.0mmol)、4-二甲基氨基吡啶(210mg，2.0mmol)和三乙胺(329mg，3.0mmol)。在67℃搅拌过夜后，除去溶剂，得到残留物，将其通过制备型HPLC纯化(柱：waters Xbrige C18(5μm 19*150mm)流动相A：水(0.2％乙酸铵)，流动相B：乙腈，UV：214nm，流速：15mL/min，梯度：75％-90％(％B))，得到呈黄色固体的标题化合物(674mg，67％产率)。
化合物27(670mg，1.08mmol)进一步通过手性制备型HPLC分离(分离条件：柱：Chiralpak IE 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH＝90:10，以15ml/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到立体异构体化合物27X(333mg，50％产率，3种立体异构体的混合物)和化合物27Y(216mg，32％产率)。
化合物27Y：LC-MS(ESI)：RT＝3.244min，C30H35ClFN3O6S的计算质量619.2，m/z发现值620.2[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IE 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝90:10，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝9.770min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.99(s,2H),7.38-7.34(m,1H),7.31-7.25(m,1H),6.87(d,J＝7.6Hz,1H),6.59(s,1H),4.07(q,J＝7.2Hz,2H),3.66(s,3H),3.49-3.43(m,1H),2.23(d,J＝6.8Hz,2H),1.95-1.50(m,8H),1.21-0.99(m,13H)。
化合物30：甲基6-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-3-基)-4-(2-氯-3-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
LC-MS(ESI)：RT＝3.002min，C25H28ClFN4O4S的计算质量534.2，m/z发现值534.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.62(d,J＝3.2Hz,0.8H),9.26(d,J＝18.4Hz,0.2H),8.00(s,1.5H),7.99-7.93(m,0.5H),7.40-7.31(m,2H),7.23-7.12(m,1H),6.07(s,0.2H),5.98(dd,J＝8.0,3.6Hz,0.8H),4.07-3.83(m,2H),3.70-3.60(m,1H),3.53-3.50(m,3H),3.32-3.30(m,1H),3.15-3.00(m,1H),2.81-2.63(m,1H),1.92-1.85(m,1H),1.78-1.71(m,2H),1.40(s,9H)。
化合物9：乙基6-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-3-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.11(br s,0.4H),7.82(d,J＝3.2Hz,1H),7.54-7.41(m,1H),7.35-7.29(m,0.6H),7.25-7.12(m,2H),7.10-7.00(m,1H),6.27(s,0.5H),6.14(s,0.5H),4.38-4.18(m,3H),4.08-3.90(m,2H),2.95-2.76(m,2H),2.01-1.61(m,4H),1.50(s,9H),1.11(t,J＝7.2Hz,3H)。
化合物11：6-(1-叔丁氧基羰基-哌啶-4-基)-4-(4-氯-2-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氢-嘧啶-5-甲酸甲基酯
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.46(d,J＝3.2Hz,0.8H),9.08(s,0.2H),8.00-7.98(m,1.8H),7.92(d,J＝3.2Hz,0.2H),7.44-7.42(m,1H),7.37-7.31(m,1H),7.23-7.18(m,1H),6.01(s,0.2H),5.92(d,J＝3.6Hz,0.8H),4.18-3.96(m,2H),3.82-3.74(m,1H),3.53(s,2.4H),3.52(s,0.6H),2.86-2.69(m,2H),1.87-1.66(m,3H),1.52-1.49(m,1H),1.44(s,9H)。
化合物31：甲基6-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-3-基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
LC-MS(ESI)：RT＝2.454min，C25H28ClFN4O4S的计算质量534.1m/z发现值535.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.44(d,J＝18.4Hz,0.3H),7.82(d,J＝3.2Hz,0.7H),7.79-7.78(m,0.3H),7.49(d,J＝2.8Hz,0.7H),7.42(d,J＝5.6Hz,1H),7.33-7.25(m,1H),7.15-7.11(m,1H),6.97-6.88(m,1H),6.18(d,J＝8.0Hz,0.3H),6.08(d,J＝2.8Hz,0.4H),6.02(s,0.3H),4.38-3.95(m,2H),3.87-3.74(m,1H),3.62(s,2.1H),3.60(s,0.9H),3.33-3.10(m,1H),2.77(br s,1H),2.11-1.92(m,1H),1.88-1.68(m,3H),1.49(d,J＝4.4Hz,9H)。
化合物34：甲基6-(1-(叔丁氧基羰基)-4-氟哌啶-4-基)-4-(2-氯-3-氟-苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
LC-MS(ESI)：RT＝3.138min，C25H27ClF2N4O4S的计算质量552.1，m/z发现值552.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.24(d,J＝2.4Hz,1H),8.00(s,2H),7.44-7.35(m,2H),7.25(d,J＝7.2Hz,1H),5.82(d,J＝2.8Hz,1H),4.22(t,J＝6.6Hz,0.1H),3.94-3.91(m,1.9H),3.50(s,3H),2.95(br s,2H),2.25-2.04(m,2H),1.88(t,J＝12.4Hz,1H),1.77(t,J＝12.4Hz,1H),1.44(s,9H)。
化合物40：(1R,5S,6r)-叔丁基6-(6-(2-氯-4-氟苯基)-5-(乙氧基羰基)-2-(噻唑-醇-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-甲酸酯
LC-MS(ESI)：RT＝1.78min，C26H28ClFN4O4S的计算质量546.2，m/z发现值547.3[M+H]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.59(s,1H),7.98(s,2H),7.43-7.32(m,2H),7.25-7.14(m,1H),5.91(s,1H),3.96(q,J＝6.9Hz,2H),3.58-3.34(m,4H),2.96(s,1H),2.30(s,1H),2.10(s,1H),1.39(m,9H),1.05(t,J＝6.3Hz,3H)。
化合物42：1-叔丁基2-甲基4-(6-(2-氯-4-氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1,2-二甲酸酯(4种立体异构体的混合物)
LC-MS(ESI)：RT＝4.148min，C27H30ClFN4O6S的计算质量592.2，m/z发现值592.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.09(br s,0.2H),7.83-7.80(m,1H),7.49(d,J＝2.8Hz,0.8H),7.44-7.39(m,1H),7.31-7.27(m,1H),7.13(dd,J＝8.4,2.4Hz,1H),6.98-6.87(m,1H),6.18(d,J＝4.0Hz,0.2H),6.05(s,0.8H),5.09-5.04(m,0.5H),4.92-4.86(m,0.5H),4.24-4.02(m,1H),3.82-3.78(m,4H),3.59(s,2.4H),3.57(s,0.6H),3.29-3.06(m,1H),2.50-2.31(m,1H),2.21-2.14(m,1H),2.08-2.02(m,0.5H),1.94-1.80(m,1.5H),1.51(s,4H),1.47(s,5H)。
化合物43：cis-4-[6-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氢-嘧啶-4-基]-哌啶-1,3-二甲酸1-叔丁基酯
LC-MS(ESI)：RT＝1.54min，C26H28ClFN4O6S的计算质量578.1，m/z发现值579.5[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.83(br s,0.1H),11.99(br s,0.4H),9.56(dd,J＝11.6,3.6Hz,0.7H),9.06-8.96(m,0.3H),8.01-7.91(m,2H),7.59(dd,J＝8.8,6.4Hz,0.3H),7.43-7.31(m,1.7H),7.25-7.06(m,1H),6.06(s,0.2H),5.99(s,0.2H),5.94(dd,J＝5.6,3.2Hz,0.6H),4.49-4.36(m,0.3H),4.23-3.78(m,2.7H),3.59-3.44(m,3.6H),3.40-3.34(m,0.4H),3.22-3.09(m,0.6H),3.00-2.92(m,0.4H),2.84-2.75(m,0.6H),2.68-2.63(m,0.4H),2.42-2.35(m,0.3H),2.14-1.94(m,0.7H),1.84-1.66(m,0.8H),1.60-1.55(m,0.2H),1.45-1.37(m,9H)。
化合物44：cis-1-叔丁基3-甲基4-(6-(2-氯-4-氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1,3-二甲酸酯(4种立体异构体的混合物)
在室温向cis-4-[6-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氢-嘧啶-4-基]-哌啶-1,3-二甲酸1-叔丁基酯化合物43(0.28g，0.48mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(6mL)中的溶液中添加碳酸钾(74mg，0.53mmol)随后添加碘甲烷(76mg，0.53mmol)。将混合物在室温搅拌3小时。将其用水(40mL)稀释，并用乙酸乙酯(30mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到残余物，将其通过制备型HPLC纯化(柱：Xbrige C18(5μm 19*150mm)，流动相A：水(0.1％碳酸氢铵)，流动相B：乙腈，流速：15mL/min，梯度：60％-80％(％B))，得到呈黄色固体的两种混合物化合物44A(104mg，36％产率，2种立体异构体的混合物)和化合物44B(84mg，29％产率，2种立体异构体的混合物)。
化合物44A：LC-MS(ESI)：RT＝4.446min，C27H30ClFN4O6S的计算质量592.2，m/z发现值592.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.61(d,J＝3.6Hz,0.8H),8.67(s,0.2H),8.01-7.99(m,1.8H),7.94-7.93(m,0.2H),7.75-7.67(m,0.1H),7.44-7.35(m,1.9H),7.25-7.14(m,1H),5.99(s,0.2H),5.93(d,J＝3.2Hz,0.8H),4.23-4.66(m,2H),3.74-3.38(m,9H),2.78(dd,J＝10.8,4.4Hz,1H),2.30-2.15(m,1H),1.82-1.68(m,1H),1.42(s,9H)。
化合物52：甲基6-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
LC-MS(ESI)：RT＝2.658min，C28H28ClF4N3O4的计算质量581.2m/z发现值581.7[M+H]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.48(s,0.8H),9.41(s,0.2H),7.41-7.35(m,2H),7.28-7.20(m,3H),5.95(s,0.8H),5.85(s,0.2H),4.13-4.04(m,3H),3.50(s,3H),2.78-2.66(m,2H),1.71-1.59(m,4H),1.38(s,9H)。
化合物55：乙基6-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(3,5-二氟-吡啶-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
LC-MS(ESI)：RT＝2.571min，C28H30ClF3N4O4的计算质量578.2，m/z发现值578.7[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.35(d,J＝3.2Hz,1H),8.61(s,1H),8.10-8.07(m,1H),7.59-7.55(m,1H),7.29-7.23(m,1H),7.21-7.15(m,1H),5.70(s,0.4H),5.51(d,J＝3.2Hz,0.6H),4.10-4.00(m,4.5H),3.78-3.77(m,0.5H),2.75-2.70(m,2H),1.72-1.59(m,4H),1.41(s,9H),1.19-1.15(m,3H)。
化合物57：甲基6-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-3,4-二氟-苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
LC-MS(ESI)：RT＝1.83min，C25H27ClF2N4O4S的计算质量552.1m/z发现值553.4[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.64(s,0.8H),9.23(s,0.2H),8.00(s,1.8H),7.94(s,0.2H),7.48-7.42(m,1H),7.21-7.15(m,0.8H),6.98(s,0.2H),6.01(s,0.2H),5.91(s,0.8H),4.08-4.00(m,2H),3.82-3.76(m,1H),3.52(s,2H),3.48(m,1H),2.82-2.69(m,2H),1.86-1.63(m,4H),1.43(s,5H),1.39-1.38(m,4H)。
化合物60：甲基6-(3-((叔丁氧基羰基)氨基)环戊基)-4-(2-氯-3-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯(8种立体异构体的混合物)
将化合物60进一步通过C18柱(乙腈:水＝75％-85％)纯化，得到两组立体异构体，即组1(1.11g)和组2(2.57g)。
组1(1.61g，3.01mmol)通过手性制备型HPLC分离(柱：Chiralpak AD 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝85:15:0.3，以15mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到级分1(526mg)，化合物60C(165mg，10％产率，100％de)和化合物60D(182mg，11％产率，100％de)。级分1(526mg)进一步通过手性制备型HPLC分离(柱：Chiralpak IA 5μm 20*250mm；流动相：Hex:IPA:DEA＝90:10:0.2，以20mL/min；温度：30℃；波长：230nm)，得到立体异构体化合物60A(150mg，9％产率，96.3％de)和化合物60B(120mg，7％产率，100％de)。
组2(2.56g，4.79mmol)通过手性制备型HPLC分离(柱：Chiralpak IC 5μm 20*250mm；流动相：CO2:IPA＝70:30，以45g/min；共溶剂：IPA；柱温：40℃；波长：214nm，背压：100巴)，得到级分2(846mg)和级分3(1.1g)。级分2(846mg)进一步通过手性制备型HPLC分离(柱：Chiralpak IC 5μm 20*250mm；流动相：CO2:IPA:DEA＝70:30:0.3，以45g/min；共溶剂：IPA；柱温：39.6℃；波长：214nm，背压：100巴)，得到立体异构体化合物60E(286mg，11％产率，100％de)和化合物60F(343mg，13％产率，100％de)。级分3(664mg)进一步通过手性制备型HPLC分离(柱：Chiralpak AS 5μm 20*250mm；流动相：Hex:IPA:DEA＝80:20:0.3，以13mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到立体异构体化合物60G(155mg，10％产率，100％de)和化合物60H(255mg，17％产率，100％de)。
化合物60B：LC-MS(ESI)：RT＝1.72min，C25H28ClFN4O4S的计算质量534.2，m/z发现值535.4[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak AD-H 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝85:15:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝6.604min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.10(s,0.4H),7.81(t,J＝2.8Hz,1H),7.49(d,J＝2.8Hz,0.6H),7.44(d,J＝2.8Hz,0.4H),7.41(br s,0.6H),7.24-7.14(m,1H),7.10-7.00(m,2H),6.24(s,0.4H),6.09(d,J＝2.4Hz,0.6H),4.72-4.55(m,1H),4.48-4.41(m,1H),4.35-4.22(m,1H),3.60(s,2H),3.59(s,1H),2.45-2.38(m,1H),2.32-2.20(m,1H),2.17-2.07(m,1.5H),1.94-1.83(m,2.5H),1.46(s,9H)。
化合物60D：LC-MS(ESI)：RT＝1.69min，C25H28ClFN4O4S的计算质量534.2，m/z发现值535.8[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak AD-H 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝85:15:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝10.882min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.10(s,0.4H),7.81(t,J＝3.2Hz,1H),7.49(d,J＝3.6Hz,0.6H),7.44(d,J＝3.2Hz,0.4H),7.41(br s,0.6H),7.23-7.00(m,3H),6.24(s,0.4H),6.10(d,J＝2.4Hz,0.6H),4.71-4.53(m,1H),4.48-4.39(m,1H),4.27(br s,1H),3.60(s,2H),3.59(s,1H),2.362.18(m,2H),2.16-1.95(m,2H),1.77-1.66(m,2H),1.46(s,9H)。
化合物60E：LC-MS(ESI)：RT＝1.78min，C25H28ClFN4O4S的计算质量534.2，m/z发现值535.5[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：CO2:MeOH＝75:25，以3.0mL/min；柱温：38.9℃；波长：214nm，背压100巴，RT＝3.22min，100％de)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.29(s,0.1H),7.86-7.81(m,0.9H),7.57-7.44(m,2H),7.24-7.20(m,1H),7.10-7.03(m,2H),6.23(s,0.2H),6.13-6.10(m,1.8H),4.79-4.71(m,0.1H),4.55-4.47(m,0.9H),4.27-4.19(m,0.7H),4.13-4.05(m,0.3H),3.61(s,2H),3.59(s,1H),2.58-2.50(m,0.1H),2.39-2.31(m,0.7H),2.17-2.10(m,0.2H),2.02-1.67(m,5H),1.45(s,9H)。
化合物60G：LC-MS(ESI)：RT＝1.79min，C25H28ClFN4O4S的计算质量534.2，m/z发现值535.6[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak As-H 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:IPA:DEA＝80:20:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，100％de，RT＝5.098min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.24(s,0.1H),7.86-7.81(m,0.9H),7.56-7.44(m,2H),7.24-7.20(m,1H),7.13-7.07(m,2H),6.25-6.23(m,1H),6.13(d,J＝2.8Hz,1H),4.52-4.42(m,1H),4.24-4.16(m,0.8H),4.11-4.03(m,0.2H),3.61(s,2H),3.58(s,1H),2.50-2.41(m,0.1H),2.26-2.08(m,1.9H),2.01-1.91(m,2H),1.81-1.71(m,2H),1.46(s,9H)。
化合物63：甲基6-(1-(((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)吡咯烷-3-基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
LC-MS(ESI)：RT＝3.965min，C34H28ClFN4O4S的计算质量642.2，m/z发现值643.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.64-9.59(m,1H),8.02-7.87(m,4H),7.69-7.61(m,2H),7.45-7.17(m,7H),6.03-5.93(m,1H),4.37-4.26(m,4H),3.74-3.54(m,6H),3.48-3.36(m,1H),2.27-2.06(m,2H)。
化合物64：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(吡咯烷-3-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
向甲基6-(1-(((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)吡咯烷-3-基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯化合物63(400mg，0.623mmol)在四氢呋喃(10mL)中的溶液中添加哌啶(2mL)。将混合物在室温搅拌2小时。将其浓缩以得到残余物，将所述残余物通过硅胶柱色谱法(二氯甲烷:甲醇＝30:1至10:1)纯化，得到呈黄色固体的标题产物(220mg，84％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝1.39min，C19H18ClFN4O2S的计算质量420.1，m/z发现值421.4[M+H]+。
化合物66：甲基6-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-3-基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯(4种立体异构体的混合物)
化合物66(2.80g，5.39mmol)进一步通过手性制备型HPLC分离(第一分离条件(柱：Chiralpak IC 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH＝90:10，以20mL/min，温度：30℃；波长：230nm)随后第二分离条件(柱：Chiralpak IA,5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH＝70:30，以10mL/min，温度：30℃；波长：214nm))，得到立体异构体化合物66A(416mg，15％产率)，化合物66B(474mg，17％产率)，化合物66C(518mg，19％产率)，和化合物66D(441mg，16％产率)。
化合物66A：LC-MS(ESI)：RT＝4.485min，C24H26ClFN4O4S的计算质量520.1，m/z发现值521.0[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝90:10，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝9.495min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.56(s,0.8H),9.21(s,0.2H),8.05-8.00(m,1.8H),7.98-7.89(m,0.2H),7.42(dd,J＝9.2,2.8Hz,1H),7.38-7.34(m,1H),7.24-7.19(m,1H),5.94(d,J＝3.2Hz,0.8H),5.75(s,0.2H),4.58-4.40(m,0.1H),4.34-4.23(m,0.9H),3.53(s,5H),3.33-3.20(m,2H),2.19-1.89(m,2H),1.43(s,9H)。
化合物66D：LC-MS(ESI)：RT＝4.174min，C24H26ClFN4O4S的计算质量520.1，m/z发现值521.0[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝70:30，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝7.464min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.58(s,0.9H),9.30(s,0.1H),8.02-8.00(m,1.8H),7.94-7.92(m,0.2H),7.42(dd,J＝8.8,2.8Hz,1H),7.39-7.32(m,1H),7.24-7.19(m,1H),5.93(d,J＝3.2Hz,0.8H),5.75(s,0.2H),4.61-4.52(m,0.1H),4.37-4.24(m,0.9H),3.54-3.52(m,3H),3.47-3.37(m,2H),3.31-3.20(m,2H),2.30-2.00(m,2H),1.43-1.41(m,9H)。
化合物71：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(3-(甲氧基羰基)环戊基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢-嘧啶-5-甲酸酯(8种立体异构体的混合物)
化合物71(2.3g，4.8mmol)进一步通过手性制备型HPLC分离(分离条件：柱：Chiralpak IC 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH＝80:20，以15mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到立体异构体化合物71A(251mg，11％产率)，化合物71G(217mg，9％产率)，化合物71H(120mg，5％产率)，化合物71E和化合物71F的混合物(419mg，18％产率)，以及化合物71B、化合物71C和化合物71D的另一混合物(526mg，23％产率)。化合物71E和化合物71F的混合物(419mg，0.900mmol)通过手性制备型HPLC分离(分离条件：柱：Chiralpak IA 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH＝80:20，以10mL/min；温度：30℃；波长：230)，得到立体异构体化合物71E(135mg，32％产率)和化合物71F(207mg，49％产率)。化合物71B、化合物71C和化合物71D的混合物(526mg，1.10mmol)通过手性制备型HPLC分离(分离条件：柱：Chiralpak IA5μm 5.0*250mm；流动相：EtOH＝100％，以51mL/min；温度：35℃；波长：254nm)，得到立体异构体化合物71d(94mg，18％产率)以及化合物71B和化合物71C的混合物(433mg，82％产率)。化合物71B和化合物71C的混合物(433mg，0.900mmol)通过手性制备型HPLC分离(分离条件：柱：Chiralpak AS 50mm*250mm；流动相：MeOH＝100％，以58mL/min；温度：35℃；波长：UV214nm)，得到立体异构体化合物71B(105mg，24％产率)和化合物71C(127mg，29％产率)。
化合物71C:(柱：Chiralpak AS-H 5μm 4.6*150mm；流动相：MeOH＝100％，以1.0mL/min；温度：35℃；波长：254nm；RT＝3.508min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.48(d,J＝3.2Hz,0.8H),9.11(s,0.2H),7.99(q,J＝3.2Hz,1.8H),7.93(d,J＝2.8Hz,0.2H),7.44-7.40(m,1H),7.37-7.29(m,1H),7.22(td,J＝8.4,2.4Hz,1H),6.00(s,0.2H),5.90(d,J＝3.2Hz,0.8H),4.35-4.29(m,0.2H),4.26-4.18(m,0.8H),3.64(s,0.6H),3.63(s,2.4H),3.52(s,2.4H),3.51(s,0.6H),3.17-3.09(m,1H),2.26-2.19(m,1H),2.12-2.02(m,2H),1.90-1.72(m,3H)。
化合物71F：LC-MS(ESI)：RT＝3.370min，C22H21ClFN3O4S的计算质量477.1，m/z发现值478.1[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝80:20，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm；RT＝6.327min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.47(d,J＝3.6Hz,0.8H),9.05(s,0.2H),8.00(q,J＝2.8Hz,1.8H),7.93(d,J＝2.8Hz,0.2H),7.41(dd,J＝8.4,2.8Hz,1H),7.35-7.29(m,1H),7.21(td,J＝8.4,2.8Hz,1H),6.00(s,0.2H),5.91(d,J＝3.6Hz,0.8H),4.36-4.30(m,0.2H),4.26-4.18(m,0.8H),3.63(s,0.6H),3.62(s,2.4H),3.52(s,2.4H),3.51(s,0.6H),3.14-3.07(m,1H),2.17-1.99(m,3H),2.03-1.88(m,2H),1.85-1.76(m,1H)。
化合物73：cis-甲基4-(2-氯-3-氟苯基)-6-(5-(甲氧基羰基)四氢-呋喃-2-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯(4种立体异构体的混合物)
化合物73(320mg，0.67mmol)进一步通过手性制备型HPLC分离(柱：Chiralpak ID5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH＝80:20，以15mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到呈黄色固体的立体异构体化合物73E(31mg，10％产率)，化合物73F(32mg，10％产率)，化合物73G(70mg，22％产率)和化合物73H(83mg，26％产率)。
化合物73H：LC-MS(ESI)：RT＝3.649min，C21H19ClFN3O5S的计算质量479.1，m/z发现值479.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak ID 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝80:20，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝14.785min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.05(s,1H),7.89(d,J＝3.2Hz,1H),7.42(d,J＝3.2Hz,1H),7.18-7.09(m,2H),7.05-7.01(m,1H),6.29(s,1H),5.83(dd,J＝9.2,6.4Hz,1H),4.74(dd,J＝9.2,2.8Hz,1H),3.89(s,3H),3.58(s,3H),2.75-2.68(m,1H),2.53-2.43(m,1H),2.28-2.23(m,1H),2.01-1.90(m,1H)。
化合物76：甲基4-(2-氯-3-氟苯基)-6-(3-(甲氧基羰基)环戊基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
LC-MS(ESI)：RT＝3.038min，C22H21ClFN3O4S的计算质量477.1，m/z发现值477.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.58-9.53(m,0.8H),9.21-9.11(m,0.2H),8.01-7.98(m,1.8H),7.95-7.93(m,0.2H),7.43-7.29(m,2H),7.20-7.12(m,1H),6.07-6.04(m,0.2H),5.97-5.93(m,0.8H),4.41-4.34(m,0.3H),4.26-4.20(m,0.3H),4.15-4.09(m,0.4H),3.68-3.59(m,3H),3.51-3.49(m,3H),3.16-3.09(m,0.4H),3.03-2.98(m,0.2H),2.92-2.85(m,0.4H),2.20-1.77(m,6H)。
化合物78：甲基6-(1-(叔丁氧基羰基)氮杂环丁烷-3-基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯(2种立体异构体的混合物)
化合物78(9.00g，17.8mmol)进一步通过手性制备型HPLC分离(柱：Chiralpak IC5μm 20*250mm；流动相：MeOH:EtOH＝70:30，以20mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到立体异构体化合物78A(3.5g，39％产率)和化合物78B(3.58g，40％产率)。
化合物78A：LC-MS(ESI)：RT＝1.55min，C23H24ClFN4O4S的计算质量506.1，m/z发现值507.6[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝70:30，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝6.015min)；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.65(d,J＝3.6Hz,1H),8.04-7.93(m,2H),7.42-7.38(m,2H),7.21(dt,J＝8.8,3.2Hz,Hz,1H),5.94(d,J＝3.2Hz,1H),4.48-4.40(m,1H),4.14-3.99(m,4H),3.52(s,3H),1.42(s,9H)。
化合物85：4-(2-氯-4-氟-苯基)-6-(3-甲氧基羰基-环丁基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氢-嘧啶-5-甲酸甲基酯(4种立体异构体的混合物)
化合物85进一步通过制备型HPLC纯化(柱：Gilson C18 5μm 19*150mm，流动相A：水(0.1％碳酸氢铵)，流动相B：乙腈，流速：20mL/min，梯度：35％-75％(％B))，得到呈黄色固体的两种混合物化合物85A(35mg，8％产率，2种立体异构体的混合物)和化合物85B(86mg，20％产率，2种立体异构体的混合物)。
化合物85A(90mg，0.19mmol)通过手性制备型HPLC分离(分离条件：柱：ChiralpakIC 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH＝80:20，以15mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到呈黄色固体的立体异构体化合物85C(36mg，40％产率)和化合物85D(40mg，44％产率)。
化合物85C：LC-MS(ESI)：RT＝4.350min，C21H19ClFN3O4S的计算质量463.1，m/z发现值463.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝80:20，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝6.994min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.55(d,J＝3.6Hz,0.9H),9.05(s,0.1H),8.02-8.01(m,1.8H),7.94(d,J＝2.8Hz,0.2H),7.43-7.32(m,2H),7.23-7.17(m,1H),5.99(s,0.1H),5.91(d,J＝3.6Hz,0.9H),4.63-4.57(m,0.1H),4.41-4.33(m,0.9H),3.68(s,0.5H),3.65(s,2.5H),3.51(s,3H),3.29-3.24(m,0.9H),3.19-3.13(m,0.1H),2.67-2.52(m,2H),2.49-2.32(m,2H)。
化合物87(trans)：trans-甲基6-(3-((叔丁氧基羰基)氨基)环丁基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
LC-MS(ESI)：RT＝3.707min，C24H26ClFN4O4S的计算质量520.1，m/z发现值520.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.38(br s,0.2H),7.83(d,J＝3.2Hz,1H),7.51(d,J＝3.2Hz,0.8H),7.45(s,1H),7.28-7.21(m,1H),7.13(d,J＝8.4,2.4Hz,1H),6.93(td,J＝8.4,2.4Hz,1H),6.18(s,0.2H),6.05(d,J＝2.4Hz,0.8H),5.07-4.84(m,1H),4.54-4.46(m,1.4H),4.24-4.06(m,0.6H),3.61(s,0.6H),3.58(s,2.4H),2.85-2.58(m,2H),2.41-2.16(m,2H),1.47(s,9H)。
化合物87(cis)：(cis)-甲基6-(3-((叔丁氧基羰基)氨基)环丁基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝3.379min，C24H26ClFN4O4S的计算质量520.1，m/z发现值520.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.60(brs,0.2H),7.85-7.83(m,1H),7.52-7.51(m,0.8H),7.45(s,1H),7.28-7.22(m,1H),7.13(d,J＝8.0Hz,1H),6.95-6.91(m,1H),6.17(s,0.3H),6.05(s,0.7H),5.06-4.85(m,1H),4.54-4.08(m,2H),3.61(s,2.2H),3.59(s,0.8H),2.75-2.58(m,2H),2.37-2.21(m,2H),1.47(s,9H)。
化合物91：乙基6-(2-(2-(叔丁氧基)-2-氧代乙基)环丙基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯(4种立体异构体的混合物)
将化合物91通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝10:1)纯化，得到呈黄色固体的两种混合物化合物91E(360mg，12％产率，2种立体异构体的混合物)和化合物91F(250mg，8％产率，2种立体异构体的混合物)。
化合物91E(360mg，0.629mmol)进一步通过手性制备型HPLC分离(分离条件：柱：Chiralpak IA 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH＝90:10，以12mL/min；温度：30℃；波长：230nm)，得到立体异构体化合物91G(44mg，1.5％产率)和化合物91H(46mg，1.5％产率)。
化合物91H：手性HPLC(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝90:10，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm；RT＝7.059min)。
化合物91F(250mg，0.481mmol)进一步通过手性制备型HPLC分离(分离条件：柱：Chiralpak IA 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH＝90:1，以12mL/min；温度：30℃；波长：230nm)，得到立体异构体化合物91I(51mg，1.7％产率)，和化合物91J(49mg，1.7％产率)。
化合物91J：手性HPLC(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝90:10，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm；RT＝8.766min)。
化合物6：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(1-((1-甲氧基-2-甲基-1-氧代丙-2-基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯(2种立体异构体的混合物)
化合物6(230mg，0.385mmol)进一步通过手性制备型HPLC分离(柱：Chiralpak IE5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH＝60:40，以9mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到立体异构体化合物6A(78mg，34％产率)和化合物6B(50mg，22％产率)。
化合物6B：LC-MS(ESI)：RT＝1.55min，C25H28ClFN4O6S2的计算质量598.1，m/z发现值598.9。手性HPLC(柱：Chiralpak IE 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝60:40，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝13.955min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.17(s,0.3H),7.83(t,J＝2.8Hz,1H),7.51(d,J＝3.2Hz,0.7H),7.45-7.43(m,1H),7.29-7.24(m,1H),7.15-7.11(m,1H),6.96-6.88(m,1H),6.18(s,0.3H),6.06(d,J＝2.4Hz,0.7H),4.24-4.15(m,0.3H),4.01-3.89(m,2.7H),3.82-3.81(m,3H),3.60(s,2H),3.59(s,1H),3.19-3.06(m,2H),2.25-2.15(m,1H),2.09-1.98(m,1H),1.91-1.75(m,2H),1.67(s,4H),1.65(s,2H)。
化合物94：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(4-(甲氧基羰基)环庚基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
LC-MS(ESI)：RT＝3.021min和3.150min，C24H25ClFN3O4S的计算质量505.1，m/z发现值505.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.93-7.87(m,1H),7.74(s,1H),7.40-7.36(m,1H),7.24-7.20(m,1H),7.07-7.01(m,1H),6.12(s,0.6H),6.04(s,0.4H),4.12(br s,0.6H),3.93(br s,0.4H),3.69-3.68(m,3H),3.59(s,1.2H),3.58(s,1.8H),2.71-2.61(m,1H),2.17-1.48(m,10H)。
94R的外消旋混合物(870mg，1.72mmol)通过手性制备型HPLC分离(分离条件：柱：Chiralpak IC 5μm 20*250mm；流动相：Hex:IPA:DEA＝80:20:0.3，以13mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到呈黄色固体两组立体异构体，即组1(400mg)和组2(120mg)。
组1(400mg，0.792mmol)通过手性制备型HPLC分离(分离条件：柱：Chiralpak AD-H5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH＝90:10，以15mL/min；温度：30℃；波长：254nm)，得到呈黄色固体的级分1(200mg)，94P(25mg，3产率，100％立体纯)和94Q(25mg，3产率，98.3％立体纯)。级分1(200mg，0.396mmol)通过手性制备型HPLC分离(分离条件：柱：Chiralpak IC 10μm 50*250mm；流动相：Hex:IPA:DEA＝95:5:0.1，以60mL/min；温度：35℃；波长：254nm)，得到呈黄色固体的级分2和94J(60mg，7％产率，97.8％立体纯)和纯94N(68mg，8％产率，96.7％立体纯)。级分2通过手性制备型HPLC分离(分离条件：柱：Chiralpak IE 10μm 50*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝95:5:0.1，以60mL/min；温度：35℃；波长：254nm)，得到呈黄色固体的标题化合物94K(25mg，3产率，97.3％立体纯)和94M(20mg，2产率，97.3％立体纯)。
组2通过手性制备型HPLC分离(分离条件：柱：Chiralpak OJ 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝97:3:0.1，以30mL/min；温度：35℃；波长：254nm)，得到呈黄色固体的标题化合物94S(30mg，3产率，99.4％立体纯)和94T(25mg，3产率，98.8％立体纯)。
化合物94J：手性分析(柱：Chiralpak IE 4.6*150mm；流动相：Hex:IPA:DEA＝95:5:0.1，以1mL/min；温度：35℃；波长：254nm，RT＝6.900min)。
化合物94K：手性分析(柱：Chiralpak IE 4.6*150mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝95:5:0.1，以1mL/min；温度：35℃；波长：254nm，RT＝10.427min)。
化合物94M：手性分析(柱：Chiralpak IE 4.6*150mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝95:5:0.1，以1mL/min；温度：35℃；波长：254nm，RT＝13.160min)。
化合物94N：手性分析(柱：Chiralpak IE 4.6*150mm；流动相：Hex:IPA:DEA＝95:5:0.1，以1mL/min；温度：35℃；波长：254nm，RT＝12.257min)。
化合物94P：LC-MS(ESI)：RT＝4.480min，C24H25ClFN3O4S的计算质量505.1，m/z发现值505.9[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak AD-H 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝90:10:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝9.150min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.41(d,J＝3.2Hz,0.5H),9.07(s,0.5H),7.99-7.97(m,1.5H),7.93(d,J＝2.8Hz,0.5H),7.44-7.40(m,1H),7.36-7.29(m,1H),7.24-7.18(m,1H),6.00(s,0.4H),5.90(d,J＝3.6Hz,0.6H),4.00-3.92(m,0.4H),3.84-3.75(m,0.6H),3.61(s,1.2H),3.60(s,1.8H),3.52(s,1.8H),3.51(s,1.2H),2.74-2.66(m,0.5H),2.59-2.55(m,0.5H),2.06-1.65(m,9H),1.62-1.52(m,1H)。
化合物94Q：LC-MS(ESI)：RT＝4.495min，C24H25ClFN3O4S的计算质量505.1，m/z发现值505.9[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak AD-H 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝90:10:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝11.406min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.41(d,J＝3.6Hz,0.5H),9.03(s,0.5H),8.00-7.97(m,1.5H),7.93(d,J＝3.2Hz,0.5H),7.44-7.40(m,1H),7.36-7.29(m,1H),7.24-7.18(m,1H),5.99(s,0.4H),5.89(d,J＝3.6Hz,0.6H),3.99-3.91(m,0.4H),3.84-3.76(m,0.6H),3.63(s,1.2H),3.61(s,1.8H),3.52(s,1.8H),3.51(s,1.2H),2.70-2.63(m,0.5H),2.60-2.55(m,0.5H),2.07-1.60(m,9H),1.50-1.40(m,1H)。
化合物94S：LC-MS(ESI)：RT＝4.406min，C24H25ClFN3O4S的计算质量505.1，m/z发现值505.9[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝95:5:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝17.041min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.38(d,J＝3.2Hz,0.5H),9.04(s,0.5H),7.99-7.96(m,1.5H),7.92(d,J＝3.2Hz,0.5H),7.43-7.39(m,1H),7.35-7.29(m,1H),7.23-7.17(m,1H),6.00(s,0.4H),5.90(d,J＝3.6Hz,0.6H),4.02-3.91(m,0.5H),3.84-3.75(m,0.5H),3.61(s,1.2H),3.60(s,1.8H),3.52(s,1.8H),3.51(s,1.2H),2.74-2.65(m,0.7H),2.59-2.58(m,0.3H),2.04-1.55(m,10H)。
化合物94T：LC-MS(ESI)：RT＝4.414min，C24H25ClFN3O4S的计算质量505.1，m/z发现值505.9[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝95:5:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝20.533min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.39(d,J＝4.0Hz,0.5H),9.01(s,0.5H),7.99-7.97(m,1.5H),7.92(d,J＝2.8Hz,0.5H),7.43-7.39(m,1H),7.36-7.31(m,1H),7.24-7.18(m,1H),5.99(s,0.4H),5.89(d,J＝3.6Hz,0.6H),3.99-3.90(m,0.4H),3.84-3.75(m,0.6H),3.62(s,1.2H),3.61(s,1.8H),3.52(s,1.8H),3.51(s,1.2H),2.80-2.71(m,0.5H),2.62-2.58(m,0.5H),2.09-1.58(m,10H)。
化合物143：乙基6-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基)-4-(2-氯苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯(立体异构体的混合物)
化合物143(1.10g，96％纯度)通过手性制备型SFC分离(柱：chiralpak IG 5μm20*250mm；流动相：CO2:MeOH＝70:30，以50g/min；柱温：30℃；波长：230nm；背压：100巴)，得到化合物143A(500mg，45％产率，100％立体纯)和化合物143B(592mg，54％产率，100％立体纯)。
化合物143B：手性分析(柱：Chiralpak IG 5μm 4.6*250mm；流动相：CO2:MeOH＝70:30，以3.0g/min；柱温：40℃；波长：230nm；背压：100巴，RT＝3.88min)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.35(d,J＝3.3Hz,0.8H),8.97(s,0.2H),7.96-7.94(m,1.8H),7.90-7.88(m,0.2H),7.43-7.39(m,1H),7.32-7.25(m,3H),6.05-6.03(m,0.2H),5.94-5.91(m,0.8H),4.11-3.88(m,4.2H),3.81-3.73(m,0.8H),2.84-2.65(m,2H),1.91-1.67(m,3H),1.50-1.37(m,10H),1.07-1.02(m,3H)。
化合物147：乙基4-(2-溴苯基)-6-((trans)-4-(甲氧基羰基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝8.237min，C24H26BrN3O4S的计算质量531.1，m/z发现值531.8[M+H]+。
化合物147A：(trans)-乙基4-(2-溴苯基)-6-(4-(甲氧基羰基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯147(507mg，0.929mmol)通过手性SFC分离(柱：ChiralpakIC 5μm 20*250mm；流动相：CO2:MeOH＝70:30，以50g/min；柱温：40℃；波长：230nm，背压：100巴)，得到呈黄色固体的147A(260mg，48％产率)和147B(240mg，47％产率)。
化合物147A：LC-MS(ESI)：RT＝3.989min，C24H26BrN3O4S的计算质量531.1，m/z发现值534.1[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：CO2:MeOH＝70:30，以2.999g/min；柱温：41.2℃；波长：230nm，背压：100巴，RT＝4.39min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.23(d,J＝3.6Hz,0.5H),8.84(s,0.5H),7.99-7.98(m,1.5H),7.93(d,J＝3.6Hz,0.5H),7.61(d,J＝7.6Hz,1H),7.37-7.31(m,2H),7.22-7.16(m,1H),6.03(s,0.4H),5.92(d,J＝3.6Hz,0.6H),4.01-3.93(m,2H),3.86-3.82(m,0.5H),3.63(s,3H),3.60-3.56(m,0.5H),2.57-2.54(m,0.4H),2.38-2.32(m,0.6H),2.08-1.99(m,2H),1.91-1.63(m,4H),1.50-1.37(m,2H),1.10-1.03(m,3H)。
化合物149：乙基4-(2-溴-3-氟苯基)-6-((1r,4r)-4-(甲氧基羰基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝4.647min，C24H25BrFN3O4S的计算质量549.1，m/z发现值552.0[M+H]+。化合物149A：(trans)-乙基4-(2-溴-3-氟苯基)-6-(4-(甲氧基羰基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯149(920mg，1.67mmol)通过手性制备型SFC分离(柱：Chiralpak IC 5μm 20*250mm；流动相：CO2:MeOH＝70:30，以50g/min；柱温：40℃；波长：230nm，背压：100巴)，得到呈黄色固体的标题化合物149A(280mg，30％产率)和149B(320mg，34％产率)。
化合物149A：LC-MS(ESI)：RT＝2.842min，C24H25BrFN3O4S的计算质量549.1，m/z发现值552.1[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：CO2:MeOH＝70:30，以3.0g/min；柱温：40℃；波长：230nm，背压：100巴，RT＝4.04min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.42(s,0.5H),8.93(s,0.5H),7.99(d,J＝2.8Hz,1.5H),7.93(d,J＝2.8Hz,0.5H),7.44-7.36(m,1H),7.29-7.26(m,1H),7.20-7.12(m,1H),6.06(s,0.5H),5.96(s.0.5H),3.99-3.94(m,2H),3.88-3.79(m,0.5H),3.62(s,1.5H),3.61(s,1.5H),3.59-3.32(m,0.5H),2.38-2.27(m,1H),2.08-1.97(m,2H),1.89-1.61(m,4H),1.47-1.36(m,2H),1.09-1.01(m,3H)。
化合物151：甲基4-(2-溴-3-氟苯基)-6-((1r,4r)-4-(甲氧基羰基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝1.84min，C23H23BrFN3O4S的计算质量535.1，m/z发现值538.8[M+H]+。
化合物151A：(trans)-甲基4-(2-溴-3-氟苯基)-6-(4-(甲氧基羰基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯151(420mg，0.780mmol)通过手性制备型SFC分离(柱：Chiralpak IC 5μm 20*250mm；流动相：CO2:MeOH＝70:30，以50g/min；柱温：30℃；波长：230nm；背压：100巴)，得到标题化合物151B(176mg，42％产率)和151A(176mg，42％产率)。
化合物151A：LC-MS(ESI)：RT＝4.439min，C23H23BrFN3O4S的计算质量535.1，m/z发现值535.8[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm，流动相：Hex:EtOH:DEA＝80:20:0.2，以1.0mL/min；柱温：30℃；波长：230nm，RT＝7.003min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.12(s,0.7H),7.83-7.80(m,1H),7.49(d,J＝3.2Hz,0.5H),7.47(s,0.3H),7.44(d,J＝3.2Hz,0.5H),7.25-7.17(m,1H),7.12(d,J＝7.6Hz,1H),7.06-6.98(m,1H),6.24(s,0.5H),6.08(d,J＝2.8Hz,0.5H),4.05-3.97(m,0.4H),3.81-3.73(m,0.6H),3.70(s,3H),3.61(s,1H),3.59(s,2H),2.45-2.39(m,1H),2.21-1.92(m,4H),1.80-1.63(m,3H),1.56-1.45(m,1H)。
化合物153：LC-MS(ESI)：RT＝3.874min，C25H27F2N3O4S的计算质量503.2，m/z发现值504.1[M+H]+。化合物153(300mg，0.596mmol)通过手性制备型HPLC分离(分离条件：柱：Chiralpak IC 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH＝85:15，以15mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到呈黄色固体的标题化合物153B(125mg，42％产率)和153A(120mg，40％产率)。
化合物153A：LC-MS(ESI)：RT＝4.904min，C25H27F2N3O4S的计算质量503.2，m/z发现值504.1[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝85:15，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝6.281min)。
化合物155：乙基4-(2-溴-4-氟苯基)-6-(4-(甲氧基羰基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝4.000min，C24H25BrFN3O4S的计算质量549.1，m/z发现值552.0[M+H]+。
化合物155(300mg，约90％纯度)通过手性制备型SFC分离(柱：chiralpak IC 5μm20*250mm；流动相：CO2:MeOH＝70:30，以50g/min；柱温：30℃；波长：230nm，背压：100巴)，得到组1(137mg，46％产率，100％立体纯)和组2(143mg，48％产率，100％立体纯)呈黄色固体。组1(45mg)和组2(45mg)的部分进一步通过制备型HPLC纯化(柱：Gilson X-bridge C18(5μm19*150mm)，流动相A：水(0.1％碳酸氢铵)，流动相B：乙腈，UV：254nm，流速：15mL/min，梯度：70％-95％(％B))，得到呈黄色固体的标题化合物155B(18.0mg，40％产率)和155A(19.5mg，43％产率)。
化合物155A：LC-MS(ESI)：RT＝3.279min，C24H25BrFN3O4S的计算质量549.1，m/z发现值550.0[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IC,5μm 4.6*250mm；流动相：CO2:MeOH＝70:30，以2.999g/min；柱温：40℃；波长：230nm；背压：100巴，RT＝3.67min)。
化合物159：甲基4-(2-溴-3,4-二氟苯基)-6-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝1.96min，C25H27BrF2N4O4S的计算质量596.1，m/z发现值599.3[M+H]+。
化合物159A：化合物159(950mg，1.59mmol)进一步通过手性制备型SFC分离(柱：Chiralpak IG 5μm 20*250mm；流动相：CO2:MeOH:DEA＝70:30:0.2，以50g/min；柱温41.1℃；波长：214nm；背压：100巴)，得到呈黄色固体的标题化合物159B(450mg，47％产率)和159A(460mg，48％产率)。对于159A，LC-MS(ESI)：RT＝1.85min，C25H27BrF2N4O4S的计算质量596.1，m/z发现值597.5[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IG 5μm 4.6*250mm；流动相：CO2:MeOH:DEA＝70:30:0.2，以2.999g/min；温度：40℃；波长：230nm，RT＝3.99min)。
化合物167A：甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-((trans)-4-(N-甲基氨磺酰基)环己基)-2-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，分离条件：C18柱(乙腈:水＝20％至95％)，得到黄色固体(65mg，19％产率)，将其通过手性制备型HPLC分离(柱：Chiralpak IA5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH＝90:10，以25mL/min；温度：30℃；波长：214nm)。LC-MS(ESI)：RT＝3.492min，C25H23ClF5N3O4S的计算质量591.1，m/z发现值592.0[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝85:15，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝7.243min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.44(s,1H),7.57-7.44(m,1H),7.30-7.24(m,2.3H),7.20-7.16(m,0.7H),6.99-6.95(m,0.8H),6.85-6.81(m,0.2H),5.96(s,0.8H),5.87(d,J＝3.2Hz,0.2H),3.94-3.85(m,0.8H),3.64-3.57(m,0.2H),3.52(s,1H),3.51(s,2H),3.06-2.96(m,0.2H),2.88-2.79(m,0.8H),2.59(d,J＝4.8Hz,2H),2.57(d,J＝4.8Hz,1H),2.20-2.04(m,2H),1.92-1.61(m,4H),1.54-1.40(m,2H)。
化合物168A：甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-2-(3,5-二氟吡啶-2-基)-6-((trans)-4-(N-甲基氨磺酰基)环己基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯：(分离条件：柱：Chiralpak IA 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH＝70:30，以25mL/min；温度：30℃；波长：214nm)
LC-MS(ESI)：RT＝3.676min，C24H23ClF4N4O4S的计算质量574.1，m/z发现值575.0[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝70:30，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝6.312min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.20-9.17(m,1H),8.56(d,J＝2.0Hz,1H),8.09-8.04(m,1H),7.51-7.42(m,1H),7.25-7.16(m,1H),6.98-6.94(m,0.7H),6.87-6.83(m,0.3H),6.04(s,0.7H),5.93(d,J＝3.6Hz,0.3H),3.92-3.83(m,0.7H),3.62-3.57(m,0.3H),3.53(s,1H),3.52(s,2H),3.05-2.95(m,1H),2.61-2.59(m,3H),2.22-2.06(m,2H),2.00-1.92(m,0.6H),1.88-1.66(m,3.4H),1.56-1.42(m,2H)。
化合物169A：(trans)-甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(4-(吡咯烷-1-基磺酰基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯:(分离条件，柱：chiralpak IE 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝50:50:0.3，以10mL/min；温度：30℃；波长：214nm)。LC-MS(ESI)：RT＝4.293min，C25H27ClF2N4O4S2的计算质量584.1，m/z发现值584.7[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IE,5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝50:50:0.2，以1mL/min；温度：30℃；波长：230nm；RT＝12.642min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.55(d,J＝3.6Hz,0.6H),8.89(s,0.4H),8.01-7.98(m,1.6H),7.95(d,J＝3.2Hz,0.4H),7.48-7.42(m,1H),7.20-7.14(m,1H),6.02(s,0.4H),5.92(d,J＝3.2Hz,0.6H),3.88-3.81(s,0.4H),3.61-3.57(m,0.6H),3.53(s,1.8H),3.52(s,1.2H),3.31-3.26(m,4H),3.24-3.18(m,1H),2.19-2.09(m,2H),1.97-1.85(m,7H),1.76-1.69(m,1H),1.59-1.51(m,2H)。
化合物170：甲基4-(2-氯-3-氟苯基)-6-(3-(N-甲基乙酰胺基)环戊基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝3.858min，C23H24ClFN4O3S的计算质量490.1，m/z发现值491.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.55(s,0.8H),9.42-9.29(br s,0.2H),8.01-7.94(m,2H),7.41-7.31(m,2H),7.22-7.17(m,1H),6.06(br s,0.2H),5.97(s,0.8H),5.23(br s,0.2H),4.99(br s,0.3H),4.62-4.54(m,0.2H),4.32-4.16(m,1.3H),3.52(s,3H),2.98-2.96(m,1H),2.88-2.83(m,1.4H),2.74-2.73(m,0.6H),2.14-1.62(m,9H)。
化合物171：(cis)-甲基4-(2-氯-3-氟苯基)-6-(4-甲基四氢呋喃-2-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝4.839min，C20H19ClFN3O3S的计算质量435.1，m/z发现值436.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.27-8.90(m,1H),8.02-8.00(m,1H),7.98-7.95(m,1H),7.43-7.29(m,2H),7.25-7.18(m,0.4H),7.16-7.09(m,0.6H),6.11(s,0.7H),6.06(s,0.3H),5.58-5.53(m,0.2H),5.50-5.41(m,0.8H),4.26-4.18(m,0.2H),4.11-4.04(m,0.8H),3.64-3.58(m,1H),3.52(s,3H),2.82-2.69(m,1H),2.47-2.36(m,1H),1.63-1.53(m,0.6H),1.44-1.35(m,0.4H),1.08(d,J＝6.8Hz,2H),1.01(d,J＝6.8Hz,1H)。
化合物172：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-((cis)-3-(甲氧基羰基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
LC-MS(ESI)：RT＝4.317min，C23H23ClFN3O4S的计算质量491.1，m/z发现值491.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.15-8.12(m,0.5H),7.82(d,J＝3.2Hz,1H),7.49(d,J＝2.8Hz,0.5H),7.44(d,J＝3.2Hz,0.5H),7.41-7.38(m,0.5H),7.32-7.28(m,1H),7.15-7.11(m,1H),6.97-6.88(m,1H),6.18(d,J＝4.0Hz,0.5H),6.04(d,J＝2.8Hz,0.5H),4.11-4.04(m,0.5H),3.89-3.82(m,0.5H),3.76-3.67(m,3H),3.63(s,1.5H),3.59(s,1.5H),2.63-2.50(m,1H),2.26-2.11(m,3H),1.96-1.84(m,1H),1.72-1.62(m,1H),1.57-1.40(m,3H)。
化合物174A：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(3,5-二氟吡啶-2-基)-6-((trans)-4-(甲氧基羰基)环己基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
外消旋化合物174(1.30g，2.50mmol)通过手性制备型HPLC分离(柱：Chiralpak IG5μm 20*250mm；流动相：CO2:MeOH:DEA＝75:25:0.2，以50g/min；柱温：40℃；波长：214nm，背压：100巴)，得到呈黄色固体的标题化合物174A(202mg，16％产率，100％立体纯)和174B(170mg，13％产率，97.7％立体纯)。
化合物174A：LC-MS(ESI)：RT＝2.716min，C25H23ClF3N3O4的计算质量521.1，m/z发现值521.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：CO2:MeOH:DEA＝80:20:0.2，以3.0g/min；柱温：40.1℃；波长：230nm，背压：100巴，RT＝3.01min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.22(br s,0.6H),9.03(br s,0.4H),8.57(br s,1H),8.06(t,J＝9.6Hz,1H),7.41(d,J＝8.0Hz,1H),7.35(t,J＝7.2Hz,1H),7.22(t,J＝8.0Hz,1H),6.03(s,0.7H),5.92(s,0.3H),3.90-3.79(m,1H),3.61(s,3H),3.52(s,3H),2.39-2.29(m,1H),2.08-1.98(m,2H),1.89-1.66(m,4H),1.50-1.35(m,2H)。
化合物175：(cis)-叔丁基5-(3-甲氧基-3-氧代丙酰基)六氢-环戊二烯并[c]吡咯-2(1H)-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝1.54min，C16H25NO5的计算质量311.2，m/z发现值256.2[M+H-56]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ12.04(s,0.1H),5.01(s,0.1H),3.73(s,2.7H),3.72(s,0.3H),3.48(s,1.8H),3.47-3.43(m,2H),3.28-3.07(m,3H),2.77-2.71(m,0.2H),2.69-2.58(m,1.8H),2.21-2.04(m,2H),1.68-1.56(m,2H),1.44(s,9H)。
化合物188：甲基6-(4-((叔丁氧基羰基)氨基)环庚基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝2.816min，C27H32ClFN4O4S的计算质量562.2，m/z发现值563.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.05(br s,0.5H),7.83-7.81(m,1H),7.49(d,J＝2.4Hz,0.4H),7.44-7.43(m,0.6H),7.37-7.31(m,0.5H),7.31-7.28(m,1H),7.14-7.11(m,1H),6.93-6.89(m,1H),6.17(s,0.5H),6.03(d,J＝2.8Hz,0.5H),4.69-4.49(m,0.6H),4.01-3.94(m,1H),3.94-3.86(m,0.4H),3.77-3.68(m,1H),3.59(s,3H),2.20-2.16(m,1.4H),2.09-1.54(m,8.6H),1.46(s,9H)。
化合物191：乙基6-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-2-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
LC-MS(ESI)：RT＝2.294min，C29H29ClF5N3O4的计算质量613.2，m/z发现值614.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.16-7.03(m,2H),6.70-6.64(m,2H),6.23(s,0.7H),5.99(d,J＝2.8Hz,1H),4.33-3.99(m,4.6H),3.92-3.86(m,0.4H),2.90-2.66(m,2H),1.91-1.83(m,2H),1.74-1.60(m,0.5H),1.56-1.49(m,1H),1.46-1.42(m,9.5H),1.18-1.12(m,3H)。
化合物196：乙基4-(2-溴-3,4-二氟苯基)-6-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS:RT＝2.02min，C26H29BrF2N4O4S的计算质量610.1，m/z发现值613.5[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.53(d,J＝2.8Hz,0.7H),9.08(s,0.3H),7.99-7.96(m,1.7H),7.92(d,J＝3.2Hz,0.3H),7.52-7.44(m,1H),7.22-7.14(m,1H),6.02(s,0.3H),5.92(d,J＝3.2Hz,0.7H),4.11-3.93(m,4.3H),3.82-3.76(m,0.7H),2.86-2.69(m,2H),1.90-1.67(m,3H),1.53-1.50(m,1H),1.44(s,9H),1.09-1.03(m,3H)。
外消旋化合物196通过手性制备型HPLC分离(柱：Chiralpak IC 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝95:5:0.2，以25mL/min；温度：30℃；波长：230nm)，得到呈黄色固体的标题化合物196A(400mg，27％产率，100％立体纯)和196B(500mg，33％产率，97.7％立体纯)。
化合物196A：手性分析(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝95:5:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝10.303min)。
化合物202：甲基6-(3-((叔丁氧基羰基)氨基)双环[1.1.1]戊-1-基)-4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝2.397min，C25H25ClF2N4O4S的计算质量550.1，m/z发现值551.1[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IG 5μm4.6*250mm；流动相：CO2:MeOH＝70:30，以2.999g/min；柱温：40℃；波长：230nm，背压：100巴RT＝2.71min和3.94min)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.93(br s,0.8H),7.84-7.81(m,1H),7.51-7.50(m,0.2H),7.46(d,J＝3.0Hz,0.8H),7.42-7.40(m,0.2H),7.09-7.02(m,2H),6.16(s,0.8H),6.03(br s,0.2H),5.04(br s,1H),3.66(s,0.5H),3.61(s,2.5H),2.55(s,5H),2.47(s,1H),1.49(s,9H)。
外消旋化合物202(700mg，1.27mmol)通过手性制备型HPLC分离(柱：Chiralpak IG5μm 20*250mm；流动相：CO2:MeOH＝70:40，以50g/min；柱温：40℃；波长：214nm，背压：100巴)，得到呈黄色固体的标题化合物202A(330mg，47％产率，100％立体纯)和202B(340mg，49％产率，100％立体纯)。
化合物202A：LC-MS(ESI)：RT＝2.253min，C25H25ClF2N4O4S的计算质量550.1，m/z发现值551.0[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IG 5μm 4.6*250mm；流动相：CO2:MeOH＝70:30，以2.999g/min；柱温：39.8℃；波长：230nm，背压：100巴，RT＝2.72min)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.92(s,0.8H),7.82-7.81(m,1H),7.51-7.50(m,0.2H),7.46-7.45(m,0.8H),7.42-7.40(m,0.2H),7.09-7.02(m,2H),6.16(s,0.8H),6.03(s,0.2H),5.06(br s,1H),3.66(s,0.5H),3.61(s,2.5H),2.55(s,5H),2.47(s,1H),1.49(s,9H)。
化合物211：甲基4-(2-氯-3-氟苯基)-6-(5-乙氧基羰基四氢呋喃-3-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯(8种立体异构体的混合物)，LC-MS(ESI)：RT＝3.768,3.851和3.946min，C22H21ClFN3O5S的计算质量493.1，m/z发现值494.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.93-7.90(m,0.2H),7.89-7.88(m,0.8H),7.77-7.76(m,0.8H),7.75-7.73(m,0.2H),7.31-7.14(m,3H),6.20-6.17(m,0.2H),6.16(s,0.3H),6.12(m,0.5H),4.88-4.79(m,0.5H),4.64-4.52(m,1.5H),4.29-3.94(m,4H),3.60-3.57(m,3H),2.96-2.83(m,0.4H),2.712.57(m,1H),2.47-2.40(m,0.2H),2.32-2.18(m,0.4H),1.32-1.30(m,2.4H),1.29-1.19(m,0.6H)。
211的外消旋混合物(810mg，1.64mmol)通过手性制备型HPLC分离(分离条件：柱：Chiralpak IC 5μm 20*250mm；流动相：Hex:IPA:DEA＝60:40:0.2，以15mL/min；温度：30℃；波长：230nm)，得到呈黄色固体的标题化合物211S(71mg，9％产率，100％立体纯),组1(325mg，40％产率)和组2(177mg，22％产率)。组1(325mg，0.66mmol)通过手性制备型HPLC分离(分离条件：柱：Chiralpak IC 5μm 20*250mm；流动相：Hex:IPA:DEA＝80:20:0.2，以15mL/min；温度：30℃；波长：230)，得到呈黄色固体的标题化合物211U(32mg，10％产率，97.7％立体纯),组A(117mg，36％产率)和211N(51mg，16％产率，包含两种异构体)。组2(177mg，0.36mmol)通过手性制备型HPLC分离(分离条件：柱：Chiralpak IC 5μm 20*250mm；流动相：Hex:IPA:DEA＝85:15:0.2，以15mL/min；温度：30℃；波长：230nm)，得到呈黄色固体的标题化合物211V(54mg，31％产率，100％立体纯)和211T(43mg，24％产率，100％立体纯)。组A(117mg，0.24mmol)通过手性制备型HPLC分离(分离条件：柱：Chiralpak IC 5μm 20*250mm；流动相：Hex:IPA:DEA＝85:15:0.2，以15mL/min；温度：30℃；波长：230nm)，得到呈黄色固体的标题化合物211M(31mg，26％产率，98.7％立体纯)和211X(38mg，32％产率，100％立体纯)。
中间体211M：LC-MS(ESI)：RT＝4.092min，C22H21ClFN3O5S的计算质量493.1，m/z发现值493.9[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IF 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝80:20:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm；RT＝13.062min)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.90(d,J＝2.4Hz,1H),7.77(d,J＝2.4Hz,0.7H),7.72(d,J＝2.8Hz,0.3H),7.32-7.25(m,1.3H),7.20-7.14(m,1.7H),6.18(s,0.2H),6.15(s,0.8H),4.87-4.82(m,0.2H),4.80-4.77(m,1H),4.59-4.52(m,0.8H),4.39-4.30(m,1H),4.23(q,J＝7.2Hz,2H),4.18-4.15(m,0.2H),4.11(t,J＝6.8Hz,0.8H),3.59(s,0.9H),3.58(s,2.1H),2.75-2.68(m,0.7H),2.65-2.58(m,0.3H),2.49-2.44(m,0.3H),2.17-2.10(m,0.7H),1.30(t,J＝7.2Hz,3H)。
化合物217：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(氧杂环丁烷-3-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝4.061min，C18H15ClFN3O3S的计算质量407.1，m/z发现值407.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)8.03(s,2H),7.45-7.41(m,2H),7.24-7.19(m,1H),5.94(s,1H),4.86-4.68(m,5H),3.50(s,3H)。
217的外消旋混合物(250mg，0.614mmol)通过手性制备型HPLC分离(分离条件：column:Chiralpak IC 5um 20*250mm；流动相：Hex:EtOH＝80:20，以13mL/min；温度：30℃；波长：230nm)，得到呈黄色固体的标题化合物217A(76.9mg，31％产率，100％立体纯)和217B(53.2mg，21％产率，100％立体纯)。化合物217A：LC-MS(ESI)：RT＝3.996min，C18H15ClFN3O3S的计算质量407.1，m/z发现值408.1[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝80:20，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝10.020min)；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)9.73(s,0.9H),9.28(s,0.1H),8.05-7.95(m,2H),7.47-7.41(m,2H),7.25-7.20(m,1H),6.01(s,0.1H),5.93(s,0.9H),4.94-4.62(m,5H),3.49(s,3H)。
化合物218：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(1,4-二氧杂螺[4.5]癸-7-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝4.437min，C23H23ClFN3O4S的计算质量491.1，m/z发现值492.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.48-9.44(m,0.6H),9.20(s,0.2H),9.12(s,0.2H),8.00-7.99(m,1.6H),7.94-7.93(m,0.4H),7.44-7.41(m,1H),7.36-7.29(m,1H),7.25-7.20(m,1H),6.01-6.00(m,0.3H),5.91(dd,J＝8.4,3.6Hz,0.7H),4.14(s,0.3H),3.91-3.85(m,4.7H),3.53-3.51(m,3H),2.12-1.87(m,1H),1.83-1.42(m,7H)。
化合物220：(cis)-甲基6-(4-(((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)甲基)-四氢呋喃-2-基)-4-(2-氯-3-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝2.899min，C36H37ClFN3O4SSi的计算质量689.2，m/z发现值690.2[M+H]+。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.76(d,J＝3.9Hz,0.4H),7.70-7.60(m,4.6H),7.47-7.28(m,8H),7.25-7.15(m,1H),7.05-7.00(m,2H),6.28(s,0.5H),6.23(s,0.5H),5.61-5.53(m,1H),4.14-4.08(m,2H),3.73-3.63(m,2H),3.59(s,3H),2.84-2.63(m,2H),1.69-1.57(m,0.5H),1.53-1.49(m,0.5H),1.07(s,5H),1.02(s,4H)。
化合物224：(trans)-甲基4-(2-溴-4-氟苯基)-6-(4-(甲氧基羰基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝2.856min，C23H23BrFN3O4S的计算质量535.1，m/z发现值538.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.47-9.39(m,0.5H),8.99-8.93(m,0.5H),7.99(s,1.5H),7.94-7.91(m,0.5H),7.57(d,J＝8.0Hz,1H),7.37-7.30(m,1H),7.27-7.22(m,1H),5.98(s,0.5H),5.88(s,0.5H),3.89-3.83(m,0.5H),3.78-3.69(m,0.5H),3.62(s,3H),3.52(s,3H),2.68-2.62(m,0.5H),2.37-2.29(m,0.5H),2.02-1.98(m,2H),1.88-1.78(m,3H),1.72-1.59(m,1H),1.50-1.37(m,2H)。
224的外消旋混合物(450mg，0.840mmol)通过手性制备型HPLC分离(柱：ChiralpakIC 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝80:20:0.3，以13mL/min；温度：30℃；波长：230nm)，得到标题化合物224X(193mg，43％产率，100％立体纯)和224Y(190mg，42％产率，99.0％立体纯)。
化合物224X：LC-MS(ESI)：RT＝3.841min，C23H23BrFN3O4S的计算质量535.1，m/z发现值535.9[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝85:15:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝7.151min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.47-9.41(m,0.5H),9.01-8.94(m,0.5H),8.00-7.99(m,1.5H),7.95-7.93(m,0.5H),7.57(dd,J＝8.4,2.4Hz,1H),7.39-7.30(m,1H),7.28-7.23(m,1H),5.98(s,0.5H),5.88(s,0.5H),3.87-3.79(m,0.5H),3.62(s,3H),3.60-3.57(m,0.5H),3.52(s,3H),2.40-2.29(m,0.8H),2.08-1.98(m,2.2H),1.91-1.79(m,2.2H),1.74-1.61(m,1.8H),1.50-1.36(m,2H)。
化合物224Y：LC-MS(ESI)：RT＝3.847min，C23H23BrFN3O4S的计算质量535.1，m/z发现值535.8[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝85:15:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝10.245min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.44(d,J＝3.6Hz,0.6H),8.96(s,0.4H),8.00-7.99(m,1.5H),7.94(d,J＝3.6Hz,0.5H),7.59-7.55(m,1H),7.36-7.33(m,1H),7.30-7.22(m,1H),5.98(s,0.4H),5.88(d,J＝3.6Hz,0.6H),3.88-3.78(m,0.5H),3.62(s,1.2H),3.61(s,1.8H),3.59-3.57(m,0.5H),3.53(s,1.6H),3.51(s,1.4H),2.38-2.30(m,0.7H),2.07-1.97(m,2.3H),1.91-1.82(m,2H),1.79-1.60(m,2H),1.51-1.36(m,2H)。
化合物226：(trans)-甲基4-(3,4-二氟-2-甲基苯基)-6-(4-(甲氧基羰基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝4.206min，C24H25F2N3O4S的计算质量489.2，m/z发现值490.3[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.53(d,J＝3.6Hz,0.7H),8.96(s,0.3H),7.99-7.97(m,1.7H),7.92(d,J＝3.2Hz,0.3H),7.25-7.17(m,1H),7.10-7.07(m,0.7H),6.98-6.94(m,0.3H),5.81(s,0.3H),5.67(d,J＝3.2Hz,0.7H),3.90-3.79(m,0.3H),3.62-3.53(m,3.7H),3.52(s,3H),2.56-2.53(m,0.3H),2.47-2.43(m,2.7H),2.37-2.29(m,1H),2.04-1.96(m,2H),1.90-1.60(m,4H),1.49-1.35(m,2H)。
外消旋226(200mg，0.410mmol)通过手性制备型HPLC分离(柱：Chiralpak IC 5μm20*250mm；流动相：Hex:EtOH＝85:15，以8mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到呈黄色固体的标题化合物226M(80.0mg，40％产率，100％立体纯)和226N(90.0mg，45％产率，99.8％立体纯)。
化合物226M：LC-MS(ESI)：RT＝4.302min，C24H25F2N3O4S的计算质量489.2，m/z发现值490.0[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝85:15，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝6.758min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.52(d,J＝3.6Hz,0.7H),8.95(s,0.3H),8.00-7.97(m,1.7H),7.92(d,J＝3.2Hz,0.3H),7.25-7.17(m,1H),7.11-7.08(m,0.7H),6.98-6.94(m,0.3H),5.82(s,0.3H),5.68(d,J＝3.6Hz,0.7H),3.90-3.80(m,0.3H),3.62-3.53(m,3.7H),3.52(s,3H),2.55-2.53(m,0.3H),2.47-2.43(m,2.7H),2.38-2.30(m,1H),2.08-1.97(m,2H),1.94-1.60(m,4H),1.49-1.36(m,2H)。
化合物228：(trans)-甲基4-(2-溴-3,4-二氟苯基)-6-(4-(甲氧基羰基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝4.469min，C23H22BrF2N3O4S的计算质量553.1，m/z发现值553.8[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.52(d,J＝4.0Hz,0.5H),8.98(s,0.5H),7.99-7.98(m,1.5H),7.94-7.93(m,0.5H),7.52-7.44(m,1H),7.21-7.12(m,1H),6.00(s,0.5H),5.91(d,J＝3.2Hz,0.5H),3.87-3.80(m,0.5H),3.62-3.61(m,3.5H),3.52-3.51(m,3H),2.37-2.31(m,0.6H),2.08-1.65(m,6.4H),1.51-1.36(m,2H)。
228的外消旋混合物(400mg，0.72mmol)通过手性制备型HPLC分离(柱：ChiralpakIA 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝70:30:0.3，以25.0mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到呈黄色固体的标题化合物228M(160mg，40％产率，100％立体纯)和228N(170mg，43％产率，98.2％立体纯)。
化合物228M：LC-MS(ESI)：RT＝3.342min，C23H22BrF2N3O4S的计算质量553.1，m/z发现值556.1[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝70:30:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝5.698min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.53(d,J＝3.2Hz,0.5H),8.99(s,0.5H),8.00-7.99(m,1.5H),7.94-7.93(m,0.5H),7.52-7.44(m,1H),7.21-7.12(m,1H),6.00(s,0.5H),5.91(d,J＝3.6Hz,0.5H),3.87-3.80(m,0.5H),3.62-3.61(m,3.5H),3.52-3.51(m,3H),2.37-2.31(m,0.7H),2.04-1.61(m,6.3H),1.50-1.39(m,2H)。
化合物228N：LC-MS(ESI)：RT＝3.346min，C23H22BrF2N3O4S的计算质量553.1，m/z发现值556.1[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝70:30:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝6.157min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.53(d,J＝3.6Hz,0.5H),8.99(s,0.5H),8.00-7.99(m,1.5H),7.94-7.93(m,0.5H),7.52-7.44(m,1H),7.22-7.12(m,1H),6.00(s,0.5H),5.91(d,J＝3.6Hz,0.5H),3.88-3.81(m,0.5H),3.62-3.57(m,3.5H),3.52-3.51(m,3H),2.37-2.31(m,0.6H),2.07-1.64(m,6.4H),1.50-1.41(m,2H)。
化合物233M和233N：(cis)-甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(4-(N,N-二甲基氨磺酰基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯和(trans)-甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(4-(N,N-二甲基氨磺酰基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物233M：LC-MS(ESI)：RT＝3.477min，C23H25ClF2N4O4S2的计算质量558.1，m/z发现值559.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.36(s,0.6H),7.84(d,J＝3.2Hz,0.6H),7.82(d,J＝3.2Hz,0.4H),7.51(d,J＝3.2Hz,0.4H),7.42(d,J＝3.2Hz,1H),7.09-6.98(m,2H),6.18(s,0.6H),6.06(d,J＝2.4Hz,0.4H),4.12-4.06(m,0.6H),3.95-3.91(m,0.4H),3.60(s,1.2H),3.58(s,1.8H),3.33-3.30(m,0.6H),3.23-3.20(m,0.4H),2.98-2.95(m,6H),2.44-2.41(m,2.2H),2.25-2.14(m,1.8H),1.97-1.77(m,3.7H),1.67-1.62(m,0.3H)。
化合物233N：LC-MS(ESI)：RT＝4.172min，C23H25ClF2N4O4S2的计算质量558.1，m/z发现值559.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.09(s,0.5H),7.84-7.81(m,1H),7.51(d,J＝3.2Hz,0.5H),7.46(d,J＝3.2Hz,0.5H),7.39(s,0.5H),7.06-7.00(m,2H),6.18(s,0.5H),6.05(d,J＝2.4Hz,0.5H),4.04-3.98(m,0.4H),3.80-3.75(m,0.6H),3.62(s,1.8H),3.60(s,1.2H),3.14-3.06(m,1H),2.96(d,J＝4.4Hz,6H),2.35-2.19(m,2.3H),2.13-2.03(m,1H),2.01-1.74(m,3.7H),1.64-1.60(m,0.3H),1.50-1.48(m,0.7H)。
外消旋233M(60mg，0.105mmol)通过手性制备型HPLC分离(分离条件：柱：Chiralpak IF 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝85:15:0.3，以15mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到呈黄色固体的标题化合物233A(5.0mg，8％产率，98.8％立体纯)和233B(5.5mg，9％产率，98.2％立体纯)。
化合物233A：LC-MS(ESI)：RT＝4.329min，C23H25ClF2N4O4S2的计算质量558.1，m/z发现值558.9[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IF 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝80:20，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝10.706min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.36(s,0.6H),7.84(d,J＝3.2Hz,0.6H),7.82(d,J＝3.2Hz,0.4H),7.51(d,J＝3.2Hz,0.4H),7.42(d,J＝3.2Hz,1H),7.09-7.00(m,2H),6.18(s,0.6H),6.06(d,J＝2.8Hz,0.4H),4.13-4.06(m,0.6H),3.96-3.92(m,0.4H),3.60(s,1.2H),3.58(s,1.8H),3.33-3.30(m,0.6H),3.23-3.20(m,0.4H),2.98-2.97(m,6H),2.44-2.41(m,2.2H),2.28-2.15(m,1.8H),2.01-1.76(m,4H)。
化合物233B：LC-MS(ESI)：RT＝4.329min，C23H25ClF2N4O4S2的计算质量558.1，m/z发现值558.9[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IF 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝80:20，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝13.239min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.36(s,0.6H),7.84(d,J＝3.2Hz,0.6H),7.82(d,J＝2.8Hz,0.4H),7.51(d,J＝3.2Hz,0.4H),7.42(d,J＝3.2Hz,1H),7.09-6.98(m,2H),6.18(s,0.6H),6.06(d,J＝2.8Hz,0.4H),4.12-4.06(m,0.6H),3.96-3.91(m,0.4H),3.60(s,1.2H),3.58(s,1.8H),3.33-3.30(m,0.6H),3.23-3.21(m,0.4H),2.98-2.97(m,6H),2.44-2.41(m,2.2H),2.30-2.21(m,1.8H),2.02-1.75(m,4H)。
外消旋233N(200mg，0.36mmol)通过手性制备型SFC分离(分离条件：柱：ChiralpakIF 5μm 20*250mm；流动相：CO2:EtOH:DEA＝75:25:0.3，以50g/min；柱温：30℃；波长：214nm；背压：100巴)，得到呈黄色固体的标题化合物233C(46.8mg，23％产率，99.4％立体纯)和233D(40.9mg，21％产率，100％立体纯)。
化合物233C：LC-MS(ESI)：RT＝4.244min，C23H25ClF2N4O4S2的计算质量558.1，m/z发现值558.9[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IF 5μm 4.6*250mm；流动相：CO2:EtOH:DEA＝75:25:0.2，以3.0g/min；柱温：41.2℃；波长：214nm，背压：100巴，RT＝5.87min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.10(s,0.5H),7.84(d,J＝3.2Hz,0.5H),7.81(d,J＝2.8Hz,0.5H),7.51(d,J＝2.8Hz,0.5H),7.46(d,J＝3.2Hz,0.5H),7.40(s,0.5H),7.07-7.01(m,2H),6.18(s,0.5H),6.05(d,J＝2.8Hz,0.5H),4.05-3.98(m,0.4H),3.80-3.78(m,0.6H),3.62-3.58(m,3H),3.14-3.04(m,1H),2.99-2.95(m,6H),2.35-2.19(m,2.5H),2.12-1.96(m,1.5H),1.93-1.73(m,3H),1.66-1.61(m,0.5H),1.53-1.47(m,0.5H)。
化合物233D：LC-MS(ESI)：RT＝4.242min，C23H25ClF2N4O4S2的计算质量558.1，m/z发现值558.9[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IF 5μm 4.6*250mm；流动相：CO2:EtOH:DEA＝75:25:0.2，以3.0g/min；柱温：40.5℃；波长：214nm，背压：100巴，RT＝7.38min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.10(s,0.5H),7.84(d,J＝3.2Hz,0.5H),7.81(d,J＝3.2Hz,0.5H),7.51(d,J＝2.8Hz,0.5H),7.46(d,J＝3.2Hz,0.5H),7.40(s,0.5H),7.07-6.98(m,2H),6.18(s,0.5H),6.05(d,J＝2.4Hz,0.5H),4.04-3.98(m,0.4H),3.80-3.75(m,0.6H),3.62(s,1.8H),3.60(s,1.2H),3.14-3.07(m,1H),2.96(d,J＝4.8Hz,6H),2.35-2.21(m,2.5H),2.18-1.93(m,1.5H),1.91-1.74(m,3H),1.65-1.63(m,0.5H),1.57-1.47(m,0.5H)。
化合物234M和234N：(cis)-甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(4-(N-异丙基氨磺酰基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯和(trans)-甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(4-(N-异丙基氨磺酰基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
中间体234M(对映异构体混合物)：LC-MS(ESI)：RT＝2.619min，C24H27ClF2N4O4S2的计算质量572.1，m/z发现值573.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.33(s,0.6H),7.83-7.81(m,1H),7.49(d,J＝2.8Hz,0.4H),7.42-7.41(m,1H),7.09-6.97(m,2H),6.17(s,0.7H),6.06(d,J＝2.0Hz,0.3H),4.14-4.07(m,0.7H),4.00-3.91(m,1H),3.86-3.84(m,0.3H),3.71-3.63(m,1H),3.60-3.58(m,3H),3.19(s,0.7H),3.10-3.03(m,0.3H),2.53-2.42(m,2H),2.28-2.13(m,1.6H),2.08-1.91(m,2H),1.87-1.73(m,1.4H),1.27-1.22(m,6H)。
中间体234N(对映异构体混合物)：LC-MS(ESI)：RT＝2.603min，C24H27ClF2N4O4S2的计算质量572.1，m/z发现值572.9[M+H]+。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.12(s,0.4H),7.86-7.83(m,1H),7.53-7.47(m,1H),7.42(s,0.6H),7.10-7.02(m,2H),6.19(s,0.5H),6.06(s,0.5H),4.09-4.03(m,0.4H),3.87-3.72(m,2.6H),3.67-3.61(m,3H),2.99(s,1H),2.44-2.30(m,2H),2.24-1.94(m,2H),1.84-1.75(m,3H),1.30-1.28(m,6H)。
(cis)-甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(4-(N-异丙基氨磺酰基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯234M的外消旋混合物(60mg，0.105mmol)通过手性制备型HPLC分离(分离条件：柱：Chiralpak IE 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝80:20:0.3，以15mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到呈黄色固体的标题化合物234A(20mg，33％产率，100％立体纯)和234B(20mg，33％产率，99.4％立体纯)。
化合物234A：LC-MS(ESI)：RT＝4.001min，C24H27ClF2N4O4S2的计算质量572.1，m/z发现值573.1[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IE 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝80:20:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝9.378min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.33(s,0.6H),7.83-7.81(m,1H),7.49(d,J＝3.2Hz,0.4H),7.42-7.41(m,1H),7.09-6.97(m,2H),6.17(s,0.7H),6.06(d,J＝2.8Hz,0.3H),4.14-4.07(m,0.7H),4.00-3.92(m,1H),3.86-3.83(m,0.3H),3.69-3.64(m,1H),3.60-3.59(m,3H),3.20(s,0.7H),3.07(s,0.3H),2.54-2.42(m,2H),2.28-2.12(m,1.7H),2.06-1.92(m,2H),1.88-1.75(m,1.3H),1.27-1.22(m,6H)。
化合物234B：LC-MS(ESI)：RT＝3.998min，C24H27ClF2N4O4S2的计算质量572.1，m/z发现值573.1[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IE 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝80:20:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝11.824min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)8.33(s,0.6H),7.83-7.81(m,1H),7.49(d,J＝2.8Hz,0.4H),7.42-7.41(m,1H),7.09-6.97(m,2H),6.17(s,0.7H),6.06(d,J＝2.0Hz,0.3H),4.14-4.07(m,0.7H),4.00-3.91(m,1H),3.86-3.84(m,0.3H),3.71-3.63(m,1H),3.60-3.58(m,3H),3.19(s,0.7H),3.10-3.03(m,0.3H),2.53-2.42(m,2H),2.28-2.13(m,1.6H),2.08-1.91(m,2H),1.87-1.73(m,1.4H),1.27-1.22(m,6H)。
(trans)-甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(4-(N-异丙基氨磺酰基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯234N的外消旋混合物(200mg，0.34mmol)通过手性制备型HPLC分离(分离条件：柱：Chiralpak IE 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH＝70:30，以12mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到呈黄色固体的标题化合物234C(90mg，45％产率，100％立体纯)和234D(40.0mg，45％产率，100％立体纯)。
化合物234C：LC-MS(ESI)：RT＝4.181min，C24H27ClF2N4O4S2的计算质量572.1，m/z发现值573.1[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IE 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝70:30，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝10.101min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.10(s,0.5H),7.84-7.81(m,1H),7.51(d,J＝2.8Hz,0.5H),7.46(d,J＝3.2Hz,0.5H),7.40(s,0.5H),7.06-6.98(m,2H),6.18(s,0.5H),6.05(d,J＝2.8Hz,0.5H),4.04-3.97(m,0.5H),3.86-3.74(m,1.5H),3.72-3.65(m,1H),3.64-3.60(m,3H),3.01-2.92(m,1H),2.48-2.29(m,2H),2.23-1.91(m,2H),1.83-1.70(m,2.7H),1.55-1.48(m,0.3H),1.28-1.26(m,6H)。
化合物234D：LC-MS(ESI)：RT＝4.191min，C24H27ClF2N4O4S2的计算质量572.1，m/z发现值573.1[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IE 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝70:30，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝13.624min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.10(s,0.5H),7.84-7.81(m,1H),7.51(d,J＝2.8Hz,0.5H),7.46(d,J＝3.2Hz,0.5H),7.40(s,0.5H),7.06-6.98(m,2H),6.18(s,0.5H),6.05(d,J＝2.4Hz,0.5H),4.05-3.98(m,0.5H),3.86-3.74(m,1.5H),3.73-3.67(m,1H),3.64-3.60(m,3H),3.00-2.92(m,1H),2.42-2.29(m,2H),2.23-1.92(m,2H),1.87-1.64(m,2.6H),1.55-1.48(m,0.4H),1.28-1.26(m,6H)。
化合物235：(trans)-甲基6-(4-((叔丁氧基羰基)氨基)环己基)-4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.60(d,J＝3.2Hz,0.7H),9.17(s,0.3H),8.00-7.98(m,1.7H),7.93(d,J＝2.8Hz,0.3H),7.47-7.42(m,1H),7.22-7.13(m,1H),6.02(s,0.3H),5.93(d,J＝3.6Hz,0.7H),4.07-4.02(m,2H),3.94-3.89(m,0.2H),3.82-3.76(m,0.8H),3.53(s,2H),3.52(s,1H),2.83-2.71(m,2H),2.01-1.94(m,1H),1.89-1.81(m,1.5H),1.74-1.65(m,1.5H),1.53-1.49(m,1H),1.44(s,9H)。
化合物239：(trans)-甲基4-(2-溴-4-氟苯基)-6-(4-(甲氧基羰基)环己基)-2-(4-甲基噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝4.219min，C24H25BrFN3O4S的计算质量549.1m/z发现值549.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.33(d,J＝2.8Hz,0.6H),8.84(s,0.4H),7.56-7.55(m,1.6H),7.47(s,0.4H),7.37-7.24(m,2H),5.96(s,0.4H),5.87(d,J＝3.6Hz,0.6H),3.81(br s,0.4H),3.62(s,1H),3.61(s,2H),3.58-3.56(m,0.6H),3.52(s,2H),3.51(s,1H),2.43(s,1H),2.39(s,2H),2.33-2.29(m,1H),2.03-1.97(m,2H),1.89-1.80(m,1H),1.76-1.75(m,2H),1.68-1.63(m,1H),1.46-1.38(m,2H)。
239的外消旋混合物(350mg，0.638mmol)通过手性制备型HPLC分离(柱：ChiralpakIC 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH＝85:15，以25.0mL/min；温度：30℃；波长：214nm)并且通过制备型HPLC纯化(柱：Gilson X-bridge C18(5μm 19*150mm)流动相A：水(0.1％碳酸氢铵)，流动相B：乙腈，UV：214nm，流速：15mL/min，梯度：60％-95％(％B))，得到呈黄色固体的标题化合物239X(110mg，31％产率，100％立体纯)和239Y(109mg，31％产率，100％立体纯)。
化合物239X：LC-MS(ESI)：RT＝4.207min，C24H25BrFN3O4S的计算质量549.1m/z发现值549.9[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝85:15，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝7.110min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.33(d,J＝3.6Hz,0.6H),8.83(s,0.4H),7.56(d,J＝2.4Hz,0.6H),7.55(s,1H),7.47(s,0.4H),7.36-7.30(m,1H),7.28-7.21(m,1H),5.96(s,0.4H),5.87(d,J＝3.6Hz,0.6H),3.85-3.78(m,0.4H),3.62(s,1H),3.61(s,2H),3.59-3.55(m,0.6H),3.52(s,2H),3.51(s,1H),2.43(s,1H),2.39(s,2H),2.36-2.29(m,1H),2.08-1.96(m,2H),1.92-1.86(m,1H),1.83-1.73(m,2H),1.70-1.59(m,1H),1.50-1.38(m,2H)。
化合物239Y：LC-MS(ESI)：RT＝4.214min，C24H25BrFN3O4S的计算质量549.1m/z发现值549.8[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝85:15，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝10.035min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.33(d,J＝3.6Hz,0.6H),8.84(s,0.4H),7.56(d,J＝2.4Hz,0.6H),7.54(s,1H),7.47(s,0.4H),7.36-7.21(m,2H),5.96(s,0.4H),5.87(d,J＝3.6Hz,0.6H),3.85-3.80(m,0.4H),3.62(s,1H),3.61(s,2H),3.59-3.57(m,0.6H),3.52(s,2H),3.51(s,1H),2.43(s,1H),2.39(s,2H),2.37-2.29(m,1H),2.07-1.96(m,2H),1.92-1.86(m,1H),1.83-1.73(m,2H),1.70-1.59(m,1H),1.49-1.38(m,2H)。
化合物257：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(3-(甲氧基羰基)-双环[1.1.1]戊-1-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝3.835min，C22H19ClFN3O4S的计算质量475.1，m/z发现值476.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ8.02(d,J＝2.4Hz,1H),7.92(s,1H),7.43-7.40(m,1H),7.30-7.28(m,1H),7.12-7.08(m,1H),6.13(s,1H),3.71(s,3H),3.62(s,3H),2.52(s,6H)。
甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(3-(甲氧基羰基)双环[1.1.1]戊-1-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯257的外消旋混合物(350mg，0.740mmol)通过手性制备型HPLC分离(分离条件：柱：Chiralpak IF 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝90:10:0.3，以13mL/min；温度：30℃；波长：254nm)并且进一步通过制备型HPLC纯化(柱：Gilson X-bridgeC18(5μm 19*150mm)，流动相A：水(0.1％碳酸氢铵)，流动相B：乙腈，UV：214nm，流速：15mL/min，梯度：60％-95％(％B))，得到呈黄色固体的标题化合物257X(86mg，25％产率，100％立体纯)和257Y(92mg，26％产率，98.1％立体纯)。
化合物257X：LC-MS(ESI)：RT＝4.141min，C22H19ClFN3O4S的计算质量,m/z 475.1发现值476.2[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IF 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝90:10:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm；RT＝8.113min)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.92(d,J＝3.2Hz,0.6H),7.89(d,J＝3.2Hz,0.4H),7.76-7.74(m,1H),7.38-7.34(m,1H),7.25-7.21(m,1H),7.06-7.02(m,1H),6.10(s,0.6H),6.03(s,0.4H),3.71(s,1.8H),3.70(s,1.2H),3.61(s,1.2H),3.60(s,1.8H),2.56(s,3.5H),2.44(s,2.5H)。
化合物257Y：LC-MS(ESI)：RT＝2.397min，C22H19ClFN3O4S的计算质量,m/z 475.1发现值475.9[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IF 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝90:10:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm；RT＝9.805min)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.92(d,J＝3.6Hz,0.6H),7.89(d,J＝3.2Hz,0.4H),7.76-7.74(m,1H),7.38-7.34(m,1H),7.25-7.21(m,1H),7.09-7.01(m,1H),6.10(s,0.6H),6.03(s,0.4H),3.71(s,1.6H),3.70(s,1.4H),3.61(s,1.4H),3.60(s,1.6H),2.56(s,3.5H),2.44(s,2.5H)。
化合物259A和259B：(cis)甲基4-(2-氯-3-氟苯基)-6-(4-(N-甲基氨磺酰基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯和(trans)-甲基4-(2-氯-3-氟苯基)-6-(4-(N-甲基氨磺酰基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
分离条件：制备型HPLC(柱：Gilson X-bridge C18(5μm 19*150mm)流动相A：水(+0.1％碳酸氢铵)，流动相B：乙腈，UV：214nm，流速：15mL/min，梯度：40％-80％(％B))
化合物259A：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.56(d,J＝3.2Hz,0.7H),8.29(s,0.3H),8.01-7.97(m,2H),7.41-7.29(m,2H),7.22-7.15(m,1.4H),6.95-6.91(m,0.6H),6.08(s,0.3H),5.97(d,J＝3.6Hz,0.7H),3.96-3.87(m,0.3H),3.73-3.66(m,0.7H),3.51(s,3H),3.19-3.17(m,0.9H),2.67(br s,0.1H),2.61-2.58(m,3H),2.33-1.77(m,6.3H),1.70-1.60(m,1H),1.55-1.45(m,0.7H)。
化合物259B：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.54(d,J＝3.6Hz,0.6H),8.95(s,0.4H),8.00-7.99(m,1.5H),7.95-7.94(m,0.5H),7.40-7.29(m,2H),7.21-7.16(m,1H),7.00-6.95(m,0.4H),6.92-6.88(m,0.6H),6.06(s,0.3H),5.97(d,J＝3.6Hz,0.7H),3.89-3.83(m,0.4H),3.61-3.51(m,3.6H),3.26-3.16(m,0.4H),3.09-3.01(m,0.6H),2.62(d,J＝4.4Hz,3H),2.22-2.09(m,2H),2.01-1.71(m,4H),1.56-1.42(m,2H)。
(cis)-甲基4-(2-氯-3-氟苯基)-6-(4-(N-甲基氨磺酰基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯259A的外消旋混合物(70mg，0.133mmol)通过手性制备型HPLC分离(柱：Chiralpak IC 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝70:30:0.3，以13mL/min；温度：30℃；波长：230nm)，得到呈黄色固体的标题化合物259C(7.6mg，11％产率，100％立体纯)和259D(17.1mg，24％产率，100％立体纯)。
化合物259C：LC-MS(ESI)：RT＝3.455min，C22H24ClFN4O4S2的计算质量526.1，m/z发现值526.9[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝70:30:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm；RT＝9.436min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.56(d,J＝3.6Hz,0.6H),8.29(s,0.4H),8.00-7.98(m,2H),7.40-7.30(m,2H),7.22-7.15(m,1.4H),6.96-6.90(m,0.6H),6.08(s,0.4H),5.97(d,J＝3.2Hz,0.6H),3.97-3.86(m,0.3H),3.74-3.66(m,0.7H),3.51(s,3H),3.22-3.14(m,0.9H),2.67(br s,0.1H),2.59-2.58(m,3H),2.30-1.77(m,6.3H),1.70-1.59(m,1H),1.55-1.46(m,0.7H)。
化合物259D：LC-MS(ESI)：RT＝4.356min，C22H24ClFN4O4S2的计算质量526.1，m/z发现值526.9[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝70:30:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm；RT＝13.128min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.56(d,J＝3.2Hz,0.7H),8.29(s,0.3H),8.01-7.97(m,2H),7.41-7.29(m,2H),7.22-7.15(m,1.4H),6.95-6.91(m,0.6H),6.08(s,0.3H),5.97(d,J＝3.6Hz,0.7H),3.96-3.87(m,0.3H),3.74-3.65(m,0.7H),3.51(s,3H),3.19-3.17(m,0.9H),2.67(br s,0.1H),2.61-2.58(m,3H),2.30-1.78(m,6.3H),1.69-1.60(m,1H),1.54-1.46(m,0.7H)。
(trans)-甲基4-(2-氯-3-氟苯基)-6-(4-(N-甲基氨磺酰基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯259B的外消旋混合物(250mg，0.474mmol)通过手性制备型HPLC分离(柱：Chiralpak IF 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH＝50:50，以10mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到呈黄色固体的标题化合物259E(74.8mg，30％产率，100％立体纯)和259F(72.9mg，29％产率，98.4％立体纯)。
化合物259E：LC-MS(ESI)：RT＝4.085min，C22H24ClFN4O4S2的计算质量526.1，m/z发现值527.2[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IF 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝50:50，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm；RT＝5.843min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.10(s,0.3H),7.83(d,J＝2.8Hz,0.6H),7.81(d,J＝3.2Hz,0.4H),7.50(d,J＝3.2Hz,0.6H),7.46(d,J＝3.2Hz,0.4H),7.43(s,0.7H),7.22-7.02(m,3H),6.25(s,0.4H),6.11(d,J＝3.2Hz,0.6H),4.09-3.95(m,1.3H),3.85-3.77(m,0.7H),3.61(s,1.8H),3.59(s,1.2H),3.11-3.01(m,1H),2.88-2.86(m,3H),2.41-1.76(m,7.3H),1.55-1.50(m,0.7H)。
化合物259F：LC-MS(ESI)：RT＝4.071min，C22H24ClFN4O4S2的计算质量526.1，m/z发现值527.2[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IF 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝50:50，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm；RT＝7.833min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.54(d,J＝3.6Hz,0.6H),8.95(s,0.4H),8.00-7.99(m,1.5H),7.95-7.94(m,0.5H),7.40-7.29(m,2H),7.21-7.16(m,1H),7.00-6.95(m,0.4H),6.92-6.88(m,0.6H),6.06(s,0.3H),5.97(d,J＝3.6Hz,0.7H),3.89-3.83(m,0.4H),3.61-3.51(m,3.6H),3.26-3.16(m,0.4H),3.09-3.01(m,0.6H),2.62(d,J＝4.4Hz,3H),2.22-2.09(m,2H),2.01-1.71(m,4H),1.56-1.42(m,2H)。
化合物260：(cis)-乙基6-(4-((叔丁氧基羰基)氨基)四氢呋喃-2-基)-4-(2-氯-3-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝2.571min，C25H28ClFN4O5S的计算质量550.2，m/z发现值551.2[M+H]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.96(s,1H),8.01-7.95(m,2H),7.39-7.24(m,3H),7.08-7.01(br s,1H),6.08(s,1H),5.48-5.42(m,1H),4.09-4.02(m,1H),4.00-3.92(m,4H),2.83-2.74(m,1H),1.89-1.80(m,1H),1.40-1.32(m,9H),1.05-1.01(m,3H)。
化合物263：甲基4-(2-氯-3-氟苯基)-6-(4-(甲基氨基甲酰基)-四氢呋喃-2-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝3.169,3.328,3.437min，C21H20ClFN4O4S的计算质量478.1，m/z发现值478.9[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IG 5μm4.6*250mm；流动相：CO2:EtOH＝60:40，以2.999g/min；柱温：40.4℃；波长：214nm，背压：100巴，RT＝1.96,2.24,2.56,2.78,3.04,3.19,3.44,3.68min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.14(d,J＝11.6Hz,0.3H),8.93(s,0.1H),8.73(s,0.02H),8.67(s,0.05H),8.51(s,0.03H),7.88-7.78(m,1H),7.55-7.39(m,1.5H),7.26-6.99(m,3.5H),6.92(s,0.2H),6.84-6.68(m,0.3H),6.28-6.22(m,0.5H),6.16-6.08(m,0.5H),5.71-5.52(m,1H),4.77-4.69(m,0.3H),4.67-4.58(m,0.3H),4.57-4.48(m,0.4H),4.43-4.23(m,1H),4.19-3.92(m,1H),3.64-3.57(m,3H),3.12-3.02(m,0.4H),3.02-2.92(m,0.6H),2.89-2.79(m,3H),2.62-2.33(m,0.4H),2.27-2.14(m,0.4H),2.09-2.00(m,0.2H)。
化合物264：乙基6-(6-(叔丁氧基羰基)四氢-2H-吡喃-3-基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
分离条件：硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝15:1)，得到两组立体异构体，即组1(1.30g)和组2(2.10g)。组1(1.30g，2.36mmol)进一步通过制备型纯化HPLC分离(柱：Xtimate C18(10μm 50*250mm)，流动相A：水(0.1％三氟乙酸)，流动相B：乙腈，UV：214nm，流速：80mL/min，梯度：60％-85％(％B))，得到两组立体异构体，即组A(250mg)和组B(440mg)。组2(2.10g，3.82mmol)进一步通过制备型纯化HPLC分离(柱：Xtimate C18(10μm 50*250mm)，流动相A：水(0.1％三氟乙酸)，流动相B：乙腈，UV：214nm，流速：80mL/min，梯度：60％-85％(％B))，得到两组立体异构体，即组C(700mg)和组D(800mg)。
组A(250mg，0.455mmol)通过手性制备型HPLC分离(分离条件：柱：Chiralpak ID 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝95:5:0.3，以18mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到标题化合物264M(70mg，100％ee)和264N(58mg，99.1％ee)，将其进一步通过制备型HPLC纯化(柱：Gilson-2x-bridge C18(5μm 15*150mm)，流动相A：水(0.1％碳酸氢铵)，流动相B：乙腈，UV：214nm，流速：15mL/min，梯度：70％-95％(％B))，得到呈黄色固体的标题化合物264M(60mg，24％产率，100％ee)和264N(48mg，19％产率，99.0％ee)。
组B(440mg，0.800mmol)通过手性制备型HPLC分离(分离条件：柱：Chiralpak IC 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝60:40:0.3，以13mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到标题化合物264U(150mg，100％ee)和264V(110mg，100％ee)，将其进一步通过制备型HPLC纯化(柱：Gilson-2x-bridge C18(5μm 15*150mm)，流动相A：水(0.1％碳酸氢铵)，流动相B：乙腈，UV：214nm，流速：15mL/min，梯度：55％-95％(％B))，得到呈黄色固体的标题化合物264U(120mg，27％产率，100％ee)和264V(110mg，100％ee)。
组C(350mg，0.636mmol)通过手性制备型HPLC分离(分离条件：柱：Chiralpak IE 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝80:20:0.2，以12mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到标题化合物264S(109mg，100％ee)和264T(103mg，100％ee)，将其进一步通过制备型纯化HPLC分离(柱：Gilson-2x-bridge C18(5μm 19*150mm)，流动相A：水(0.1％碳酸氢铵)，流动相B：乙腈，UV：214nm，流速：15mL/min，梯度：60％-95％(％B))，得到呈黄色固体的标题化合物264S(82mg，23％产率，100％ee)和264T(91mg，26％产率，100％ee)。
组D(400mg，0.727mmol)通过手性制备型HPLC分离(分离条件：柱：Chiralpak IG 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝80:20:0.3，以15mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到标题化合物264X(130mg，100％ee)和264Y(120mg，100％ee)，将其进一步通过制备型纯化HPLC分离(柱：Gilson-5x-bridge C18(5μm 19*150mm)，流动相A：水(0.1％碳酸氢铵)，流动相B：乙腈，UV：214nm，流速：15mL/min，梯度：60％-100％(％B))，得到呈黄色固体的标题化合物264X(108mg，27％产率，100％ee)和264Y(93mg，23％产率，100％ee)。
化合物264U：LC-MS(ESI)：RT＝3.888min，C26H29ClFN3O5S的计算质量549.2，m/z发现值550.2[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝60:40:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝8.913min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.50(s,0.8H),9.26(br s,0.2H),8.01-7.99(m,1.7H),7.94(br s,0.3H),7.42(dd,J＝8.8,2.8Hz,1H),7.37-7.33(m,1H),7.23-7.18(m,1H),6.04(s,0.2H),5.92(d,J＝3.2Hz,0.8H),4.16-4.13(m,0.3H),4.04-3.96(m,3.3H),3.87-3.70(m,2.4H),2.02-1.93(m,2H),1.81-1.78(m,1H),1.55-1.53(m,1H),1.43(s,9H),1.09-1.03(m,3H)。1H NMR(400MHz,CD3OD+1M HCl水溶液(1滴))δ8.08(d,J＝2.8Hz,1H),8.01(d,J＝3.2Hz,1H),7.47(dd,J＝8.4,5.6Hz,1H),7.31(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),7.16-7.11(m,1H),6.20(s,1H),4.20(dd,J＝10.0,2.0Hz,1H),4.12-3.95(m,5H),2.13-2.08(m,2H),2.03-2.02(m,1H),1.73-1.70(m,1H),1.51(s,9H),1.15(t,J＝7.2Hz,3H)。
化合物264Y：LC-MS(ESI)：RT＝3.788min，C26H29ClFN3O5S的计算质量549.2，m/z发现值550.2[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IG 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝80:20:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝12.361min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.54(d,J＝3.6Hz,0.8H),9.20(s,0.2H),8.02-7.98(m,1.8H),7.93(d,J＝3.2Hz,0.2H),7.44-7.41(m,1H),7.38-7.34(m,1H),7.24-7.19(m,1H),6.03(s,0.2H),5.93(d,J＝3.6Hz,0.8H),4.21-4.18(m,0.2H),4.03-3.92(m,2.5H),3.89-3.82(m,1.8H),3.80-3.77(m,0.7H),3.67-3.61(m,0.8H),2.13-2.10(m,1H),1.98-1.96(m,2H),1.56-1.50(m,1H),1.45(s,2H),1.43(s,7H),1.10-1.01(m,3H)。
化合物275：甲基4-(2-溴-3-氟苯基)-6-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯,1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.13(s,0.5H),7.85-7.80(m,1H),7.52-7.47(m,1H),7.47-7.43(m,0.5H),7.25-7.18(m,1H),7.14-6.98(m,2H),6.25(s,0.5H),6.12-6.07(m,0.5H),4.41-4.16(m,2.5H),4.01-3.90(m,0.5H),3.65-3.56(m,3H),2.97-2.78(m,2H),2.02-1.80(m,2H),1.75-1.64(m,2H),1.54-1.47(m,9H)。
外消旋化合物275(6.40g，107mmol)通过手性制备型SFC分离(柱：Chiralpak IG 5μm 20*250mm；流动相：CO2:MeOH＝70:30，以50g/min；柱温：30℃；波长：214nm，背压：100巴)，得到呈黄色固体的标题化合物275A(2.60g，38％产率，100％立体纯)和275B(2.90g，38％产率，99.5％立体纯)。
中间体275A：手性分析(柱：Chiralpak IG 5μm 4.6*250mm；CO2:MeOH＝70:30，以3.0g/min；柱温：40℃；波长：254nm，背压：100巴，RT＝3.25min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.13(s,0.5H),7.83-7.81(m,1H),7.50-7.49(m,1H),7.45-7.44(m,0.5H),7.26-7.14(m,1H),7.10-6.98(m,2H),6.25(s,0.5H),6.10(s,0.5H),4.41-4.13(m,2.5H),4.00-3.92(m,0.5H),3.60-3.58(m,3H),2.97-2.77(m,2H),2.00-1.74(m,2H),1.64-1.55(m,2H),1.54-1.45(m,9H)。
中间体275B：手性分析(柱：Chiralpak IG 5μm 4.6*250mm；CO2:MeOH＝70:30，以3.0g/min；温度：40℃；波长：254nm，RT＝4.31min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.13(s,0.5H),7.83-7.81(m,1H),7.52-7.48(m,1H),7.44-7.43(m,0.5H),7.26-7.17(m,1H),7.12-6.97(m,2H),6.25(s,0.5H),6.10(s,0.5H),4.37-4.09(m,2.5H),4.98-3.94(m,0.5H),3.63-3.59(m,3H),2.96-2.79(m,2H),2.01-1.81(m,2H),1.74-1.58(m,2H),1.51-1.45(m,9H)。
化合物279：乙基4-(2-溴-4-氟苯基)-6-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝2.252min，C26H30BrFN4O4S的计算质量592.1，m/z发现值593.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.09(s,0.4H),7.83-7.81(m,1H),7.50(d,J＝3.2Hz,0.6H),7.44(d,J＝3.2Hz,0.4H),7.39(s,0.6H),7.33-7.28(m,2H),7.01-6.93(m,1H),6.19(s,0.4H),6.05(d,J＝2.4Hz,0.6H),4.35-4.19(m,2.2H),4.08-3.91(m,2.8H),2.91-2.81(m,2H),2.00-1.67(m,3H),1.61-1.58(m,1H),1.51(s,9H),1.15-1.10(m,3H)。
乙基4-(2-溴-4-氟苯基)-6-(1-(叔丁氧基羰基)
哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯化合物279的外消旋混合物(10.0g，15.2mmol，根据1H NMR纯度为90％)通过手性制备型SFC分离(分离条件：柱：Chiralpak IG 5μm 20 mm*250mm；流动相：CO2:MeOH＝75:25，以50g/min；柱温：40℃；波长：214nm，背压：100巴)，得到呈黄色固体的标题化合物279A(4.7g，50％产率，根据1H NMR纯度为95％，100％立体纯)和呈黄色固体的279B(4.9g，49％产率，根据1H NMR纯度为90％，100％立体纯)。
化合物279A：LC-MS(ESI)：RT＝2.236min，C26H30BrFN4O4S的计算质量592.1，m/z发现值593.0[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IG 5μm 4.6 mm*250mm；流动相：CO2:MeOH＝70:30，以3.0g/min；柱温：40℃；波长：254nm，背压：100巴，RT＝2.86min)1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.09(s,0.4H),7.83-7.81(m,1H),7.50(d,J＝2.8Hz,0.6H),7.44(d,J＝3.2Hz,0.4H),7.38(d,J＝2.0Hz,0.6H),7.34-7.28(m,2H),7.02-6.93(m,1H),6.19(s,0.4H),6.05(d,J＝2.4Hz,0.6H),4.36-4.15(m,2.3H),4.08-4.02(m,2H),3.96-3.90(m,0.7H),2.91-2.83(m,2H),2.07-1.58(m,4H),1.50(s,9H),1.15-1.10(m,3H)
化合物279B：LC-MS(ESI)：RT＝2.325min，C26H30BrFN4O4S的计算质量592.1，m/z发现值596.0[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IG 5μm 4.6 mm*250mm；流动相：CO2:MeOH＝70:30，以3.0g/min；柱温：40℃；波长：254nm，背压：100巴，RT＝3.82min)1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.09(s,0.4H),7.83-7.81(m,1H),7.50(d,J＝3.2Hz,0.6H),7.44(d,J＝3.2Hz,0.4H),7.38(d,J＝1.2Hz,0.6H),7.33-7.28(m,2H),7.02-6.93(m,1H),6.18(s,0.4H),6.05(d,J＝2.4Hz,0.6H),4.33-4.15(m,2.4H),4.08-4.02(m,2H),3.96-3.90(m,0.6H),2.91-2.83(m,2H),2.08-1.58(m,4H),1.50(s,9H),1.15-1.10(m,3H)。
化合物283：甲基4-(2-氯-3-氟苯基)-6-(-5-氧代-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)吡咯烷-3-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
分离条件：硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝2:1)，然后进一步通过C18柱(乙腈:水＝5％至100％)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物283M(18mg，2％产率)和呈黄色固体的283N(16mg，2％产率)。
中间体283M：1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.87(d,J＝2.7Hz,1H),7.55(s,2H),7.28-7.22(m,1H),7.17-7.10(m,2H),6.19(s,1H),4.84-4.75(m,2H),3.96-3.90(m,1H),3.83-3.78(m,1H),3.66-3.56(m,6H),3.03-2.95(m,1H),2.68-2.59(m,1H),1.03-0.95(m,2H),0.04(s,3H),0.00(s,6H)。
中间体283N：1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.87(s 1H),7.58(s,1H),7.55(s,1H),7.30-7.25(m,1H),7.14(t,J＝6.9Hz,2H),6.16(s,1H),4.88-4.77(m,2H),3.81-3.75(m,1H),3.66(s,3H),3.63-3.57(m,4H),3.20-3.11(m,1H),2.84-2.74(m,1H),1.01-0.94(m,2H),0.04(s,9H)。
化合物288：(trans)-甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(4-(甲氧基羰基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝2.849min，C23H22ClF2N3O4S的计算质量509.1，m/z发现值509.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.14(s,0.6H),7.82(s,1H),7.50(s,0.4H),7.46(s,0.6H),7.37(s,0.4H),7.08-6.98(m,2H),6.18(s,0.6H),6.04(s,0.4H),4.02-3.96(m,0.6H),3.81-3.75(m,0.4H),3.70(s,3H),3.62(s,1H),3.60(s,2H),2.46-2.39(m,1H),2.24-1.90(m,5H),1.76-1.66(m,2H),1.55-1.45(m,1H)。
(trans)-甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(4-(甲氧基羰基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯288的外消旋混合物(420mg，96％纯度，0.790mmol)通过手性制备型HPLC分离(分离条件：柱：Chiralpak IC 5μm 30*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝85:15:0.3，以23mL/min；温度：30℃；波长：230nm)，得到呈黄色固体的标题化合物288M(190mg，98％纯度，46％产率，100％立体纯)和288(190mg，97％纯度，46％产率，100％立体纯)。
化合物288M：LC-MS(ESI)：RT＝3.319min，C23H22ClF2N3O4S的计算质量509.1，m/z发现值509.9[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝85:15:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：254nm，RT＝7.204min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.54(s,0.6H),8.99(s,0.4H),8.00-7.94(m,2H),7.46-7.39(m,1H),7.21-7.11(m,1H),6.03(s,0.4H),5.93(s,0.6H),3.89-3.80(m,0.6H),3.62(s,3.4H),3.54(s,3H),2.39-2.29(m,0.6H),2.05-1.66(m,6.4H),1.51-1.36(m,2H)。
化合物288N：LC-MS(ESI)：RT＝3.313min，C23H22ClF2N3O4S的计算质量509.1，m/z发现值509.9[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝85:15:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：254nm，RT＝9.765min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.52(br s,0.5H),8.99(s,0.5H),8.01-7.99(m,1.5H),7.94(d,J＝3.2Hz,0.5H),7.49-7.41(m,1H),7.21-7.14(m,1H),6.02(s,0.4H),5.93(s,0.6H),3.88-3.81(m,0.5H),3.62-3.61(m,3H),3.58-3.56(m,0.5H),3.53-3.35(m,3H),2.37-2.30(m,0.7H),2.08-1.97(m,2H),1.90-1.82(m,4.3H),1.50-1.39(m,2H)。
化合物290：甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(4-(N-(2-乙氧基-2-氧代乙基)氨磺酰基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝1.76min，C25H27ClF2N4O6S2的计算质量616.1，m/z发现值617.3[M+H]+。
将甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(4-(N-(2-乙氧基-2-氧代乙基)氨磺酰基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯290(1.20g，1.90mmol)的混合物通过C18柱(乙腈:水(+0.1％碳酸氢铵)＝49％至70％)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物290R(700mg，58％产率)和呈黄色固体的290S(40mg，产率3％)。
化合物290R：LC-MS(ESI)：RT＝3.603min，C25H27ClF2N4O6S2的计算质量616.1，m/z发现值617.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.56(d,J＝3.6Hz,0.7H),8.31(s,0.3H),8.00-7.99(m,1.7H),7.97-7.96(m,0.3H),7.86(t,J＝6.4Hz,0.3H),7.61-7.58(m,0.7H),7.49-7.39(m,1H),7.22-7.17(m,1H),6.03(s,0.3H),5.92(d,J＝3.6Hz,0.7H),4.16-4.09(m,2H),3.94-3.88(m,0.6H),3.85-3.79(m,2H),3.72-3.66(m,0.7H),3.52(s,3H),3.18-3.12(m,0.7H),2.39-2.33(m,2H),2.28-2.17(m,0.7H),2.14-2.08(m,0.6H),2.05-1.94(m,0.7H),1.90-1.76(m,2.3H),1.68-1.64(m,1H),1.59-1.53(m,0.7H),1.23-1.19(m,3H)。
化合物290S：LC-MS(ESI)：RT＝3.447min，C25H27ClF2N4O6S2的计算质量616.1，m/z发现值617.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.57(d,J＝3.6Hz,0.6H),9.02(s,0.4H),8.00(s,1H),7.99-7.98(m,0.6H),7.95-7.94(m,0.4H),7.67-7.58(m,1H),7.49-7.42(m,1H),7.21-7.14(m,1H),6.01(s,0.4),5.92(d,J＝4.0Hz,0.6),4.14(q,J＝7.2Hz,2H),3.84-3.83(m,2H),3.59-3.56(m,0.7H),3.53(s,2H),3.52(s,1H),3.18-3.12(m,0.6H),,3.04-2.97(m,0.7H),2.26-2.19(m,2H),1.97-1.81(m,3H),1.72-1.67(m,1H),1.54-1.42(m,2H),1.25-1.21(m,3H)。
化合物292：甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(4-(((R)-3-(甲氧基羰基)吡咯烷-1-基)磺酰基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝4.523min和4.650min，C27H29ClF2N4O6S2的计算质量642.1，m/z发现值643.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.94-7.91(m,0.5H),7.90-7.87(m,0.5H),7.77-7.73(m,1H),7.26-7.17(m,2H),6.14(s,0.2H),6.13(s,0.3H),6.07(s,0.2H),6.06(s,0.3H),4.12-4.04(m,0.2H),4.02-3.93(m,0.4H),3.90-3.81(m,0.2H),3.76-3.69(m,3.2H),3.67-3.62(m,2H),3.61-3.57(m,3H),3.53-3.46(m,2.4H),3.28-3.15(m,1.6H),2.50-2.39(m,0.5H),2.37-2.18(m,4H),2.16-2.08(m,0.5H),2.04-1.91(m,1.6H),1.87-1.66(m,3.4H)。
甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(4-(((R)-3-(甲氧基羰基)
吡咯烷-1-基)磺酰基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯292的混合物(1.20g，90％纯度，1.68mmol)通过制备型HPLC分离(柱：gilson X-bridge C18(5μm19*150mm)，流动相A：水(0.1％碳酸氢铵)，流动相B：乙腈，UV：214nm，流速：15mL/min，梯度：60％-65％(％B))，得到呈黄色固体的标题化合物292M(247mg，96.3％纯度，21％产率)和292N(762mg，99.4％纯度，64％产率)。
化合物292M：LC-MS(ESI)：RT＝9.612min，C27H29ClF2N4O6S2的计算质量642.1，m/z发现值643.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.34(s,0.6H),7.84-7.81(m,1H),7.51(d,J＝3.2Hz,0.4H),7.42-7.40(m,1H),7.09-6.98(m,2H),6.18(s,0.6H),6.06(d,J＝2.8Hz,0.4H),4.13-4.06(m,0.7H),3.96-3.90(m,0.3H),3.79-3.72(m,4H),3.60-3.58(m,5H),3.55-3.49(m,1.3H),3.35-3.29(m,0.7H),3.22-3.12(m,1H),2.53-2.41(m,2H),2.28-2.14(m,4H),2.04-1.76(m,4H)。
化合物292N：LC-MS(ESI)：RT＝3.593min，C27H29ClF2N4O6S2的计算质量642.1，m/z发现值643.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.11(s,0.4H),7.84-7.81(m,1H),7.52-7.46(m,1H),7.40(s,0.6H),7.08-7.00(m,2H),6.18(s,0.4H),6.05(d,J＝2.8Hz,0.6H),4.04-3.97(m,0.5H),3.78-3.73(m,4.5H),3.62-3.58(m,4H),3.54-3.48(m,2H),3.19-3.03(m,2H),2.41-2.35(m,2H),2.29-2.22(m,3H),2.13-1.94(m,1H),1.88-1.72(m,3H),1.52-1.44(m,1H)。
(trans)-甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(4-(((R)-3-(甲氧基羰基)吡咯烷-1-基)磺酰基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯292N外消旋混合物(500mg，99.4％纯度，0.774mmol)通过手性制备型SFC(分离条件：柱：Chiralpak IG 5μm 20*250mm；流动相：CO2:EtOH:DEA＝60:40:0.3，以50g/min；柱温：30℃；波长：230nm，背压：100巴)，得到呈黄色固体的292W(146mg，29％产率，99.3％纯度，100％立体纯)和292Z(160mg，32％产率，99.4％纯度，99.8％立体纯)。
化合物292W：LC-MS(ESI)：RT＝4.527min，C27H29ClF2N4O6S2的计算质量642.1，m/z发现值643.1[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IG 5μm 4.6*250mm；流动相：CO2:EtOH:DEA＝60:40:0.2，以2.999g/min；柱温：40.1℃；波长：230nm，背压：100巴，RT＝4.45min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.11(s,0.4H),7.84-7.81(m,1H),7.51(d,J＝3.2Hz,0.5H),7.46(d,J＝2.8Hz,0.5H),7.41(s,0.6H),7.06-7.01(m,2H),6.18(s,0.4H),6.05(d,J＝2.4Hz,0.6H),4.06-3.97(m,0.5H),3.80-3.78(m,0.5H),3.74-3.71(m,4H),3.62-3.57(m,4H),3.55-3.48(m,2H),3.19-3.07(m,2H),2.38-2.35(m,1H),2.29-2.20(m,3H),2.13-2.00(m,1H),1.95-1.74(m,4H),1.58-1.51(m,1H)。
化合物292Z：LC-MS(ESI)：RT＝4.042min，C27H29ClF2N4O6S2的计算质量642.1，m/z发现值643.1[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IG 5μm 4.6*250mm；流动相：CO2:EtOH:DEA＝60:40:0.2，以2.999g/min；；柱温：40.1℃；波长：230nm，背压：100巴，RT＝5.5min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.11(s,0.5H),7.84-7.81(m,1H),7.51(d,J＝2.8Hz,0.5H),7.46(d,J＝3.2Hz,0.5H),7.41(s,0.5H),7.07-7.01(m,2H),6.18(s,0.4H),6.05(d,J＝2.8Hz,0.6H),4.04-3.95(m,0.5H),3.79-3.76(m,0.5H),3.74-3.71(m,4H),3.62-3.60(m,4H),3.55-3.48(m,2H),3.19-3.09(m,2H),2.41-2.33(m,1H),2.26-2.18(m,3H),2.14-2.01(m,1H),1.97-1.76(m,4H),1.59-1.51(m,1H)。
化合物294：甲基6-(3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)环丁基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝2.08min，C35H35ClFN3O3SSi的计算质量659.2，m/z发现值660.6[M+H]+。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.41(br s,0.5H),7.89-7.87(m,1H),7.76-7.69(m,4H),7.56-7.55(m,0.5H),7.48-7.35(m,7H),7.31-7.29(m,0.3H),7.26-7.19(m,0.7H),7.16-7.10(m,1H),6.98-6.88(m,1H),6.19-6.16(m,0.5H),6.05-6.00(m,0.5H),4.36-4.25(m,1H),3.96-3.84(m,1H),3.61-3.56(m,3H),2.76-2.32(m,3H),2.25-2.14(m,1H),1.10(s,9H)。
化合物296：(trans)-甲基6-(4-((叔丁氧基羰基)氨基)环己基)-4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-2-(3,5-二氟吡啶-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝1.93min，C28H29ClF4N4O4的计算质量596.2，m/z发现值597.4[M+H]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.30(s,0.8H),9.14(s,0.2H),8.58(s,1H),8.10-8.03(m,1H),7.51-7.42(m,1H),7.20-7.13(m,1H),6.83-6.73(m,1H),6.03(s,0.8H),5.92(s,0.2H),4.04-4.01(m,0.5H),3.89-3.84(m,0.5H),3.51(s,3H),1.90-1.65(m,5H),1.39(s,9H),1.35-1.23(m,4H)。
化合物299：甲基6-(-3-((叔丁氧基羰基)氨基)环戊基)-4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，分离条件：制备型HPLC(Xtimate C18(10μm50*250mm)，流动相A：水(0.1％碳酸氢铵)，流动相B：乙腈，UV：214nm，流速：80mL/min，梯度：60％-90％(％B))，得到呈黄色油的组1(299A-D，1.3g，26％产率)和组2(299E-H，1.5g，30％产率)。组1(299A-D,1.3g，2.4mmol)通过手性制备型HPLC分离(柱：Chiralpak IG 5μm20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝80:20:0.3，以15mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到呈黄色固体的标题化合物299A(280mg，22％),299B(230mg，18％)，299C(320mg，25％)和299D(330mg，25％)。组2(299E-H,1.5g，2.7mmol)通过手性制备型HPLC分离(柱：Chiralpak IG 5μm20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝90:10:0.3，以25mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到呈黄色固体的标题化合物299E(300mg，20％),299F(350mg，23％)，299G(380mg，25％)和299H(350mg，23％)。
化合物299A：LC-MS(ESI)：RT＝2.310min，C25H27ClF2N4O4S的计算质量552.1，m/z发现值453.0[M+H-Boc]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.11(br s,0.4H),7.83-7.81(m,1H),7.49(d,J＝3.2Hz,0.6H),7.45(d,J＝3.2Hz,0.4H),7.37(br s,0.6H),7.08-7.01(m,2H),6.18(s,0.4H),6.04(d,J＝2.8Hz,0.6H),4.69-4.54(m,1.4H),4.47-4.39(m,0.6H),4.32-4.25(m,1H),3.61(s,1.8H),3.59(s,1.2H),2.45-2.06(m,3H),1.98-1.82(m,2H),1.67-1.61(m,1H),1.47(s,5H),1.46(s,4H)。
化合物299B：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.11(br s,0.4H),7.82(t,J＝3.2Hz,1H),7.50(d,J＝3.2Hz,0.6H),7.45(d,J＝2.8Hz,0.4H),7.38(br s,0.6H),7.10-6.99(m,2H),6.18(s,0.4H),6.04(d,,J＝2.8Hz,0.6H),4.70-4.53(m,1.4H),4.47-4.39(m,0.6H),4.33-4.24(m,1H),3.61(s,1.8H),3.60(s,1.2H),2.44-2.06(m,3H),1.98-1.82(m,2H),1.67-1.61(m,1H),1.47(s,9H)。
化合物299C：LC-MS(ESI)：RT＝2.324min，C25H27ClF2N4O4S的计算质量552.1，m/z发现值453.0[M+H-Boc]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.10(br s,0.4H),7.82(t,J＝3.2Hz,1H),7.50(d,J＝2.8Hz,0.6H),7.45(d,J＝2.8Hz,,0.4H),7.37(br s,0.6H),7.09-6.98(m,2H),6.17(s,0.4H),6.04(d,J＝2.8Hz,0.6H),4.66-4.52(m,1.3H),4.46-4.38(m,0.7H),4.26(br s,1H),3.61(s,1.8H),3.59(s,1.2H),2.33-1.96(m,4H),1.74-1.63(m,2H)1.46(s,9H)。
化合物299D：LC-MS(ESI)：RT＝2.313min，C25H27ClF2N4O4S的计算质量552.1，m/z发现值453.0[M+H-Boc]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.11(br s,0.4H),7.82(t,J＝3.2Hz,1H),7.50(d,J＝3.2Hz,0.6H),7.45(d,J＝2.8Hz,0.4H),7.37(br s,0.6H),7.09-6.98(m,2H),6.17(s,0.4H),6.04(d,J＝2.8Hz,0.6H),4.66-4.52(m,1.3H),4.46-4.38(m,0.7H),4.26(br s,1H),3.61(s,1.8H),3.59(s,1.2H),2.34-1.96(m,4H),1.77-1.61(m,2H),1.46(s,9H)。
化合物299E：LC-MS(ESI)：RT＝2.207min，C25H27ClF2N4O4S的计算质量552.1，m/z发现值453.0[M+H-Boc]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.32(br s,0.2H),7.87(d,J＝13.6Hz,0.8H),7.82(d,J＝10.0Hz,0.2H),7.57-7.55(m,1.6H),7.47(d,J＝13.2Hz,0.2H),7.11-7.01(m,2H),6.17(s,0.2H),6.07(br s,0.8H),6.05(d,J＝2.4Hz,0.8H),5.84(br s,0.2H),4.72(br s,0.1H),4.52-4.43(m,1H),4.29(m,0.6H),4.17-4.03(m,0.3H)3.62(s,2.4H),3.59(s,0.6H),2.61-2.44(m,0.1H),2.38-2.25(m,0.9H),2.18-2.12(m,0.4H),2.02-1.60(m,4.6H),1.46(s,9H)。
化合物299F：LC-MS(ESI)：RT＝2.368min，C25H27ClF2N4O4S的计算质量552.1，m/z发现值453.1[M+H-Boc]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.32(br s,0.2H),7.86(d,J＝2.8Hz,0.8H),7.82(d,J＝2.8Hz,0.2H),7.57-7.48(m,1.6H),7.45(d,J＝3.2Hz,0.2H),7.11-7.01(m,2H),6.16(s,0.2H),6.07(br s,0.8H),6.05(d,J＝2.8Hz,0.8H),5.82(br s,0.2H),4.80-4.70(m,0.1H),4.54-4.45(m,1H),4.23-4.22(m,0.7H),4.12-4.05(m,0.2H)3.62(s,2H),3.59(s,1H),2.59-2.47(m,0.2H),2.38-2.29(m,0.8H),2.24-2.08(m,0.6H),2.03-1.89(m,4.4H),1.60(s,9H)。
化合物299G：LC-MS(ESI)：RT＝2.354min，C25H27ClF2N4O4S的计算质量552.1，m/z发现值453.1[M+H-Boc]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.28(br s,0.1H),7.88(d,J＝14.8Hz,0.8H),7.81(d,J＝5.2Hz,0.2H),7.57-7.48(m,1.7H),7.45(d,J＝3.6Hz,0.2H),7.13-7.00(m,2H),6.19-6.17(m,1H),6.08-6.07(m,1H),4.76-4.65(m,0.1H),4.50-4.38(m,1H),4.25-4.20(m,0.7H),4.15-4.03(m,0.2H),3.61(s,2.4H),3.59(s,0.6H),2.53-2.42(m,0.1H),2.29-2.17(m,1.9H),2.04-1.91(m,2H),1.78-1.65(m,2H),1.59(s,9H)。
化合物299H：LC-MS(ESI)：RT＝2.177min，C25H27ClF2N4O4S的计算质量552.1，m/z发现值453.0[M+H-Boc]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.26(br s,0.1H),7.86(d,J＝2.4Hz,0.8H),7.81(d,J＝3.2Hz,0.2H),7.57-7.54(m,1.7H),7.45(d,J＝3.2Hz,0.2H),7.12-7.00(m,2H),6.17-6.16(m,1H),6.08(d,J＝2.4Hz,1H),4.78-4.69(m,0.1H),4.49-4.41(m,1H),4.21-4.17(m,0.7H),4.10-4.05(m,0.2H),3.62(s,2H),3.59(s,1H),2.54-2.40(m,0.2H),2.23-2.08(m,1.8H),1.99-1.89(m,2H),1.80-1.60(m,2H),1.50(s,9H)。
化合物301：乙基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(4-(甲氧基羰基)-环庚基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝1.73min，C25H26ClF2N3O4S的计算质量537.1，m/z发现值538.5[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.50(d,J＝2.8Hz,0.6H),9.09-8.96(m,0.4H),8.03-7.96(m,1.6H),7.93(d,J＝2.8Hz,0.4H),7.52-7.41(m,1H),7.24-7.13(m,1H),6.01(s,0.4H),5.91(d,J＝3.2Hz,0.6H),4.02-3.91(m,2.4H),3.86-3.76(m,0.6H),3.65-3.59(m,3H),2.65-2.54(m,1H),2.08-1.58(m,9.4H),1.49-1.37(m,0.6H),1.07(t,J＝7.2Hz,1.8H),1.05(t,J＝7.2Hz,1.2H)。
化合物301的混合物(2.00g，3.72mmol)通过手性制备型HPLC分离(第一分离条件：柱：Chiralpak IC 5μm 20*250mm；流动相：CO2:MeOH＝75:25，以50g/min；波长：214nm；第二分离条件：柱：Chiralpak AD-H 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝90:10:0.3，以15mL/min；波长：230nm；第三分离条件：柱：Superchiral S-OJ 5μm 21*250mm；流动相：Hex:EtOH＝95:5，以20mL/min；波长：254nm；第四分离条件：柱：Chiralpak IC 5μm 50*250mm；流动相：Hex:IPA:DEA＝95:5:0.1，以60mL/min；波长：254nm；第五分离条件：柱：Chiralpak IE5μm 50*250mm；流动相：Hex:IPA:DEA＝95:5:0.1，以60mL/min；波长：254nm)，得到呈黄色固体的301M(190mg，99.9％纯度，9.5％产率，100％立体纯)，301N(185mg，99.9％纯度，9.3％产率，100％立体纯)，301P(170mg，99.9％纯度，8.5％产率，100％立体纯)，301Q(190mg，99.9％纯度，9.5％产率，100％立体纯)，301U(150mg，99.9％纯度，7.5％产率，99.8％立体纯)，301V(130mg，99.9％纯度，6.5％产率，100％立体纯)，301X(245mg，98.5％纯度，12.3％产率，97.8％立体纯)和301Y(260mg，99.1％纯度，13.0％产率，100％立体纯)。
化合物301M：LC-MS(ESI)：RT＝4.614min，C25H26ClF2N3O4S的计算质量537.1，m/z发现值538.1[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:IPA:DEA＝95:5:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：254nm，RT＝10.942min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.51(d,J＝2.8Hz,0.6H),8.99(s,0.4H),8.02-7.96(m,1.6H),7.94(s,0.4H),7.50-7.43(m,1H),7.23-7.15(m,1H),6.01(s,0.4H),5.91(d,J＝2.8Hz,0.6H),4.02-3.92(m,2.4H),3.85-3.76(m,0.6H),3.62(s,3H),2.68-2.57(m,1H),2.15-1.94(m,3H),1.91-1.74(m,4H),1.72-1.58(m,2H),1.46-1.34(m,1H),1.11-1.01(m,3H)。
化合物301N：LC-MS(ESI)：RT＝4.615min，C25H26ClF2N3O4S的计算质量537.1，m/z发现值538.1[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:IPA:DEA＝95:5:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：254nm，RT＝13.356min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.51(d,J＝2.8Hz,0.6H),8.99(s,0.4H),8.02-7.96(m,1.6H),7.94(d,J＝3.2Hz,0.4H),7.51-7.43(m,1H),7.23-7.16(m,1H),6.01(s,0.4H),5.91(d,J＝3.6Hz,0.6H),4.00-3.94(m,2.4H),3.84-3.76(m,0.6H),3.62(s,3H),2.65-2.57(m,1H),2.15-1.94(m,3H),1.91-1.74(m,4H),1.72-1.58(m,2H),1.45-1.35(m,1H),1.11-1.03(m,3H)。
化合物301P：LC-MS(ESI)：RT＝4.576min，C25H26ClF2N3O4S的计算质量537.1，m/z发现值538.1[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：CO2:MeOH＝75:25，以3g/min；Col Temp:40℃；波长：214nm；背压：100巴；RT＝3.82min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.50(d,J＝2.8Hz,0.6H),9.04(s,0.4H),8.03-7.96(m,1.6H),7.93(d,J＝3.2Hz,0.4H),7.50-7.43(m,1H),7.22-7.16(m,1H),6.01(s,0.4H),5.91(d,J＝3.2Hz,0.6H),4.00-3.93(m,2.4H),3.85-3.77(m,0.6H),3.61(s,3H),2.78-2.72(m,0.4H),2.61-2.55(m,0.6H),2.08-1.99(m,1.5H),1.95-1.85(m,3H),1.81-1.56(m,5.5H),1.10-1.03(m,3H)。
化合物301Q：LC-MS(ESI)：RT＝4.611min，C25H26ClF2N3O4S的计算质量537.1，m/z发现值538.1[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak AD-H 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝90:10:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝5.704min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.50(s,0.6H),9.03(s,0.4H),8.03-7.95(m,1.6H),7.94-7.91(m,0.4H),7.50-7.40(m,1H),7.21-7.12(m,1H),6.01(s,0.4H),5.91(s,0.6H),4.00-3.91(m,2.4H),3.85-3.77(m,0.6H),3.65-3.55(m,3H),2.69-2.63(m,0.4H),2.60-2.54(m,0.6H),2.07-1.75(m,7.5H),1.71-1.58(m,1.5H),1.49-1.37(m,1H),1.09-1.03(m,3H)。
化合物301U：LC-MS(ESI)：RT＝3.046min，C25H26ClF2N3O4S的计算质量537.1，m/z发现值538.2[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak AD-H 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝90:10:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝8.566min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.51(d,J＝3.6Hz,0.6H),9.03(s,0.4H),8.02-7.96(m,1.6H),7.94(d,J＝3.2Hz,0.4H),7.50-7.43(m,1H),7.21-7.12(m,1H),6.01(s,0.4H),5.91(d,J＝3.2Hz,0.6H),4.00-3.93(m,2.4H),3.86-3.77(m,0.6H),3.63(s,1.2H),3.61(s,1.8H),2.69-2.63(m,0.4H),2.60-2.54(m,0.6H),2.04-1.76(m,7.5H),1.71-1.59(m,1.5H),1.48-1.39(m,1H),1.09-1.03(m,3H)。
化合物301V：LC-MS(ESI)：RT＝3.113min，C25H26ClF2N3O4S的计算质量537.1，m/z发现值538.1[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：CO2:MeOH＝75:25，以3g/min；Col Temp:40℃；波长：230nm；背压：100巴；RT＝4.06min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.51(d,J＝3.6Hz,0.6H),9.08(s,0.4H),8.03-7.96(m,1.6H),7.93(d,J＝3.2Hz,0.4H),7.50-7.43(m,1H),7.21-7.13(m,1H),6.01(s,0.4H),5.91(d,J＝3.2Hz,0.6H),4.00-3.93(m,2.4H),3.84-3.77(m,0.6H),3.61(s,1.2H),3.60(s,1.8H),2.73-2.67(m,0.4H),2.59-2.54(m,0.6H),2.08-1.96(m,1.5H),1.95-1.80(m,3.5H),1.77-1.66(m,4H),1.61-1.52(m,1H),1.09-1.03(m,3H)。
化合物301X：LC-MS(ESI)：RT＝3.380min，C25H26ClF2N3O4S的计算质量537.1，m/z发现值538.2[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：CO2:MeOH＝75:25，以3g/min；Col Temp:40℃；波长：230nm；背压：100巴；RT＝4.62min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.51(d,J＝3.6Hz,0.6H),9.08(s,0.4H),8.03-7.96(m,1.6H),7.93(d,J＝3.2Hz,0.4H),7.50-7.43(m,1H),7.21-7.13(m,1H),6.01(s,0.4H),5.91(d,J＝3.2Hz,0.6H),4.00-3.93(m,2.4H),3.84-3.77(m,0.6H),3.61(s,1.2H),3.60(s,1.8H),2.73-2.67(m,0.4H),2.59-2.54(m,0.6H),2.08-1.96(m,1.5H),1.95-1.80(m,3.5H),1.77-1.66(m,4H),1.61-1.52(m,1H),1.09-1.03(m,3H)。
化合物301Y：LC-MS(ESI)：RT＝3.396min，C25H26ClF2N3O4S的计算质量537.1，m/z发现值538.2[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：CO2:MeOH＝75:25，以3g/min；Col Temp:40℃；波长：214nm；背压：100巴；RT＝5.88min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.51(d,J＝2.8Hz,0.6H),9.05(s,0.4H),8.02-7.96(m,1.6H),7.94(d,J＝2.8Hz,0.4H),7.50-7.43(m,1H),7.22-7.15(m,1H),6.01(s,0.4H),5.91(d,J＝3.2Hz,0.6H),4.00-3.93(m,2.4H),3.86-3.76(m,0.6H),3.61(s,3H),2.80-2.72(m,0.4H),2.63-2.57(m,0.6H),2.10-1.99(m,1.5H),1.95-1.84(m,3H),1.82-1.55(m,5.5H),1.09-1.03(m,3H)。
化合物306：甲基6-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基)-4-(3,4-二氟-2-甲基苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝1.96min，C26H30F2N4O4S的计算质量532.2m/z发现值533.3[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.56(d,J＝3.2Hz,0.8H),9.13(s,0.2H),7.99-7.91(m,2H),7.25-7.18(m,1H),7.11-7.08(m,0.8H),6.97-6.94(m,0.2H),5.82(s,0.2H),5.69(d,J＝3.2Hz,0.8H),4.14-4.00(m,2.2H),3.81-3.75(m,0.8H),3.52(s,3H),2.85-2.68(m,2H),2.43(s,3H),1.91-1.64(m,3H),1.52-1.48(m,1H),1.44(s,9H)。
306的外消旋混合物(600mg，1.13mmol)通过手性制备型SFC分离(分离条件：柱：Chiralpak IG 5μm 20*250mm；流动相：CO2:MeOH:DEA＝80:20:0.2，以50g/min；柱温40℃；波长：214nm；背压：100巴)，得到呈黄色固体的标题化合物306A(260mg，43％产率，100％立体纯)和306B(270mg，45％产率，98.6％立体纯)。
化合物306A：LC-MS(ESI)：RT＝1.87min，C26H30F2N4O4S的计算质量532.2m/z发现值533.6[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IG；流动相：CO2:MeOH:DEA＝80:20:0.2，以3.0g/min；柱温：40.1℃；波长：230nm，背压：100巴，RT＝3.08min)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.10(s,0.7H),7.80(s,1H),7.51(d,J＝2.1Hz,0.3H),7.43(d,J＝2.4Hz,0.7H),7.09-7.06(m,0.3H),7.04(s,0.2H),6.97-6.85(m,1.8H),5.93(s,0.8H),5.85(s,0.2H),4.39-4.16(m,2.8H),3.85-3.78(m,0.2H),3.60(s,3H),2.94-2.79(m,2H),2.57(s,2.3H),2.42(s,0.7H),2.00-1.97(m,1H),1.87-1.63(m,3H),1.50(s,9H)。
化合物306B：LC-MS(ESI)：RT＝1.87min，C26H30F2N4O4S的计算质量532.2m/z发现值533.7[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IG；流动相：CO2:MeOH:DEA＝80:20:0.2，以3.0g/min；柱温：39.9℃；波长：230nm，RT＝3.96min)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.10(s,0.7H),7.80-7.79(m,1H),7.51(d,J＝2.1Hz,0.3H),7.43(d,J＝2.1Hz,0.7H),7.09-7.07(m,0.3H),7.05(s,0.2H),6.95-6.87(m,1.8H),5.93(s,0.8H),5.85(s,0.2H),4.37-4.15(m,2.7H),3.84-3.78(m,0.3H),3.60(s,3H),2.94-2.80(m,2H),2.57(s,2.3H),2.43(s,0.7H),2.01-1.97(m,1H),1.75-1.60(m,3H),1.50(s,9H)。
化合物314：(trans)-甲基6-(-4-(N-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)甲基磺酰胺基)环己基)-4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝3.077min，C30H41ClF2N4O5S2Si的计算质量702.2，m/z发现值702.8[M+H]+。
化合物316：乙基6-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-3-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝1.75min，C26H30ClFN4O4S的计算质量548.2，m/z发现值549.6[M+H]+。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.12(s,0.5H),7.83(s,1H),7.51-7.50(m,0.5H),7.46-7.45(m,0.5H),7.38(d,J＝0.6Hz,0.5H),7.19-7.05(m,3H),6.29(s,0.5H),6.16(s,0.5H),4.32-4.03(m,5H),2.90-2.84(m,2H),2.05-1.86(m,3H),1.62-1.52(m,1H),1.50(s,9H),1.15-1.10(m,3H)。
化合物326：乙基6-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝2.01min，C26H30ClFN4O4S的计算质量548.2，m/z发现值549.5[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.47(d,J＝2.4Hz,0.7H),9.04(s,0.3H),8.01-7.99(m,1.7H),7.93-7.92(m,0.3H),7.43-7.34(m,2H),7.24-7.18(m,1H),6.03(s,0.2H),5.92(d,J＝3.2Hz,0.8H),4.11-4.01(m,2H),3.99-3.94(m,2H),3.83-3.75(m,1H),2.84-2.69(m,2H),1.91-1.66(m,3H),1.57-1.49(m,1H),1.43(s,9H),1.10-1.02(m,3H)。
乙基6-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯326的外消旋混合物(2.50g，4.55mmol)通过手性制备型HPLC分离(分离条件：柱：Chiralpak IG 5μm 20*250mm；流动相：CO2:MeOH＝70:30，以50g/min；温度：30℃；波长：214nm；背压：100巴)，得到呈黄色固体的标题化合物326A(1.00g，40％产率，100％立体纯)和326B(1.20g，48％产率，99.8％立体纯)。
化合物326A：手性分析(柱：Chiralpak IG 5μm 4.6*250mm；流动相：CO2:MeOH＝70:30，以3g/min；温度：30℃；波长：230nm；背压：100巴；RT＝2.5min)。
化合物326B：手性分析(柱：Chiralpak IG 5μm 4.6*250mm；流动相：CO2:MeOH＝70:30，以3g/min；温度：30℃；波长：230nm；背压：100巴；RT＝3.4min)。
化合物336：乙基4-(2-溴-3-氟苯基)-6-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯,1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.48(d,J＝3.2Hz,0.7H),9.06(s,0.3H),8.04-7.92(m,2H),7.44-7.37(m,1H),7.31-7.24(m,1H),7.21-7.15(m,1H),6.07(s,0.3H),5.97(d,J＝3.6Hz,0.7H),4.16-3.93(m,4.3H),3.83-3.76(m,0.7H),2.85-2.67(m,2H),1.96-1.64(m,3.3H),1.54-1.50(m,0.7H),1.44(s,9H),1.08-1.01(m,3H)。
化合物340：乙基6-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基)-4-(3,4-二氟-2-甲基苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
LC-MS(ESI)：RT＝2.879min，C27H32F2N4O4S的计算质量546.2，m/z发现值546.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.08(s,1H),7.80(d,J＝3.2Hz,1H),7.50(d,J＝3.2Hz,0.2H),7.43(d,J＝3.2Hz,0.8H),7.10-7.05(0.4H),6.93-6.90(m,1.6H),5.95(s,0.8H),5.86-5.85(m,0.2H),4.36-4.28(m,2H),4.21-4.05(m,2.7H),3.84-3.79(m,0.3H),2.92-2.83(m,2H),2.57-2.56(m,2.3H),2.43-2.42(m,0.7H),2.01-1.98(m,1H),1.86-1.83(m,1H),1.77-1.68(m,2H),1.50(s,9H),1.13(t,J＝2.8Hz,3H)。
外消旋340(2.40g，4.39mmol)通过制备型手性SFC分离(分离条件：柱：ChiralpakIG 5μm 20*250mm；流动相：CO2:MeOH＝80:20，以50g/min；柱温40℃；波长：230nm；背压：100巴)，得到呈黄色固体的标题化合物340A(700mg，29％产率，100％立体纯)和340B(800mg，33％产率，99.4％立体纯)。
化合物340A：手性分析(柱：Chiralpak IG 5μm 4.6*250mm；流动相：CO2:MeOH:DEA＝80:20:0.2，以3.0mL/min；温度：40.1℃；波长：230nm，RT＝3.00min)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.60(s,0.7H),9.12(s,0.3H),8.00-7.93(m,2H),7.47-7.41(m,1H),7.23-7.17(m,1H),6.03(s,0.3H),5.93(s,0.7H),4.19-3.75(m,5H),2.89-2.64(m,2H),2.51(s,2H),2.49(s,1H),2.00-1.57(m,4H),1.53(s,9H),1.10-1.02(m,3H)。
化合物340B：手性分析(柱：Chiralpak IG 5μm 4.6*250mm；流动相：CO2:MeOH:DEA＝80:20:0.2，以3.0mL/min；温度：39.9℃；波长：230nm，RT＝3.85min)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.60(s,0.7H),9.12(s,0.3H),8.03-7.93(m,2H),7.50-7.41(m,1H),7.22-7.16(m,1H),6.03(s,0.3H),5.93(s,0.7H),4.14-3.75(m,5H),2.83-2.66(m,2H),2.51(s,2H),2.49(s,1H),1.92-1.57(m,4H),1.53(s,9H),1.10-1.02(m,3H)。
化合物344：(trans)-乙基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(4-(甲氧基羰基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝3.884min，C24H24ClF2N3O4S的计算质量523.1，m/z发现值524.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.51(d,J＝3.2Hz,0.6H),8.92(br s,0.4H),8.05-7.99(m,1.6H),7.93(d,J＝3.6Hz,0.4H),7.49-7.41(m,1H),7.21-7.15(m,1H),6.02(s,0.4H),5.92(d,J＝3.6Hz,0.6H),4.00-3.93(m,2H),3.86-3.80(m,0.4H),3.62(s,1.3H),3.61(s,1.7H),3.58-3.54(m,0.6H),2.55-2.51(m,0.4H),2.36-2.30(m,0.6H),2.07-1.98(m,2H),1.89-1.65(m,4H),1.48-1.35(m,2H),1.09-1.03(m,3H)。
外消旋344(500mg，0.955mmol)通过手性制备型HPLC分离(柱：Chiralpak IC 5μm20*250mm；流动相：Hex:EtOH＝85:15，以25mL/min；温度：30℃；波长：230nm)，得到呈黄色固体的标题化合物344M(220mg，44％产率，100％立体纯)和344N(220mg，44％产率，100％立体纯)。
化合物344M：LC-MS(ESI)：RT＝3.866min，C24H24ClF2N3O4S的计算质量523.1，m/z发现值524.0[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝85:15，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝6.857min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.51(br s,0.6H),8.92(br s,0.4H),8.03-7.98(m,1.6H),7.93(d,J＝3.6Hz,0.4H),7.48-7.42(m,1H),7.21-7.15(m,1H),6.02(s,0.4H),5.92(s,0.6H),4.00-3.93(m,2H),3.87-3.80(m,0.5H),3.62(s,1.3H),3.61(s,1.7H),3.58-3.53(m,0.5H),2.55-2.52(m,0.5H),2.36-2.30(m,0.5H),2.04-1.97(m,2H),1.90-1.65(m,4H),1.48-1.38(m,2H),1.09-1.03(m,3H)。
化合物344N：LC-MS(ESI)：RT＝3.859min，C24H24ClF2N3O4S的计算质量523.1，m/z发现值524.1[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝85:15，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝8.931min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.51(d,J＝3.2Hz,0.6H),8.92(br s,0.4H),8.05-7.99(m,1.6H),7.93(d,J＝2.8Hz,0.4H),7.49-7.42(m,1H),7.20-7.15(m,1H),6.02(s,0.4H),5.92(d,J＝2.8Hz,0.6H),4.00-3.93(m,2H),3.87-3.79(m,0.5H),3.62(s,1.3H),3.61(s,1.7H),3.58-3.54(m,0.5H),2.55-2.53(m,0.5H),2.35-2.31(m,0.5H),2.08-1.97(m,2H),1.90-1.65(m,4H),1.45-1.39(m,2H),1.09-1.03(m,3H)。
化合物346：(trans)-乙基4-(2-溴-3,4-二氟苯基)-6-(4-(甲氧基羰基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.45(s,0.5H),8.94(s,0.5H),7.99-7.90(m,2H),7.56-7.45(m,1H),7.23-7.14(m,1H),6.01(s,0.5H),5.92(s,0.5H),3.99-3.91(m,1H),3.87-3.78(m,0.5H),3.61(s,3H),3.54-3.49(m,0.5H),2.50-2.49(m,0.5H),2.39-2.26(m,0.5H),2.10-2.01(m,2H),1.93-1.72(m,4H),1.43-1.36(m,2H),1.06-1.00(m,3H)。
外消旋346(700mg，1.23mmol)通过手性制备型SFC分离(柱：Chiralpak IC 5μm20*250mm；流动相：CO2:MeOH＝70:30，以50g/min；柱温：39.9℃；波长：214nm，背压：100巴)，得到呈黄色固体的标题化合物346M(300mg，50％产率，100％立体纯)和346N(200mg，33％产率，100％立体纯)。
化合物346M：LC-MS(ESI)：RT＝4.110min，C24H24BrF2N3O4S的计算质量567.1，m/z发现值568.0[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm，流动相：CO2:MeOH＝70:30，以2.999g/min；柱温：39.9℃；波长：230nm，背压：100巴，RT＝3.30min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.47(s,0.5H),8.92(s,0.5H),7.99(s,1.5H),7.93(d,J＝2.8Hz,0.5H),7.55-7.46(m,1H),7.22-7.12(m,1H),6.01(s,0.5H),5.92(s,0.5H),3.99-3.95(m,2H),3.87-3.80(m,0.5H),3.58(s,3H),3.55-3.51(m,0.5H),2.36-2.29(m,0.6H),2.05-2.01(m,2.4H),1.90-1.82(m,2H),1.76-1.59(m,2H),1.46-1.42(m,2H),1.10-1.03(m,3H)。
化合物346N：LC-MS(ESI)：RT＝4.122min，C24H24BrF2N3O4S的计算质量567.1，m/z发现值568.0[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm，流动相：CO2:MeOH＝70:30，以2.999g/min；柱温：39.9℃；波长：230nm，背压：100巴，RT＝4.78min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.49(s,0.5H),8.92(s,0.5H),7.99(s,1.5H),7.93(d,J＝3.2Hz,0.5H),7.54-7.43(m,1H),7.22-7.12(m,1H),6.01(s,0.5H),5.91(d,J＝3.2Hz,0.5H),3.99-3.95(m,2H),3.90-3.75(m,0.5H),3.62(s,1.5H),3.61(s,1.5H),3.57-3.52(m,0.5H),2.38-2.31(m,1H),2.09-2.01(m,2H),1.87-1.59(m,4H),1.51-1.40(m,2H),1.10-1.03(m,3H)。
化合物349：乙基6-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-2-(3,5-二氟吡啶-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
LC-MS(ESI)：RT＝1.806min，C28H29ClF4N4O4的计算质量596.2，m/z发现值597.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.61(s,0.7H),8.31(d,J＝2.4Hz,0.7H),8.25(d,J＝2.0Hz,0.3H),7.75(s,0.3H),7.33-7.28(m,1H),7.09-6.97(m,2H),6.32(s,0.7H),6.07(d,J＝2.4Hz,0.3H),4.39-4.18(m,2.7H),4.10-3.89(m,2.3H),2.97-2.78(m,2H),1.88-1.82(m,1H),1.70-1.57(m,3H),1.51(s,6.3H),1.49(s,2.7H),1.16-1.11(m,3H)。
外消旋349(300mg，0.052mmol)通过手性制备型HPLC分离(柱：Chiralpak IC 5μm20*250mm；流动相：Hex:IPA＝90:10，以25mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到标题化合物349A(120mg，40％产率，100％立体纯)和349A(135mg，45％产率，100％立体纯)。
中间体349A：LC-MS(ESI)：RT＝3.116和3.294min，C28H29ClF4N4O4的计算质量596.2，m/z发现值597.1[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:IPA＝90:10，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm；RT＝14.784min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.27(s,0.6H),9.17(d,J＝3.6Hz,0.4H),8.56(d,J＝2.0Hz,1H),8.08-8.02(m,1H),7.49-7.43(m,1H),7.24-7.18(m,1H),6.04(s,0.6H),5.94(d,J＝2.8Hz,0.4H),4.17-3.94(m,4.6H),3.82-3.75(m,0.4H),2.84-2.67(m,2H),1.84-1.61(m,3.6H),1.53-1.46(m,0.4H),1.41(s,9H),1.09-1.02(m,3H)。
中间体349A：LC-MS(ESI)：RT＝2.896和3.173min，C28H29ClF4N4O4的计算质量596.2，m/z发现值597.1[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:IPA＝90:10，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm；RT＝19.839min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.28(s,0.6H),9.17(s,0.4H),8.56(d,J＝2.4Hz,1H),8.07-8.02(m,1H),7.51-7.43(m,1H),7.24-7.17(m,1H),6.04(s,0.6H),5.94(d,J＝2.8Hz,0.4H),4.15-3.94(m,4.6H),3.82-3.73(m,0.4H),2.84-2.67(m,2H),1.84-1.68(m,3.6H),1.52-1.46(m,0.4H),1.41(s,9H),1.09-1.00(m,3H)。
化合物359E和359F：(cis)-甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(4-(N-(2-甲氧基乙基)氨磺酰基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯和(trans)-甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(4-(N-(2-甲氧基乙基)氨磺酰基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
分离条件：制备型HPLC分离(分离条件：柱：Gilson X-bridge C18(5μm 19mm*150mm)，流动相A：水(+0.1％碳酸氢铵)，流动相B：乙腈，UV：254nm，流速：15mL/min，梯度：50％-70％(％B))，得到呈黄色固体的标题化合物359E(130mg，9％产率)和359F(430mg，29％产率)。
化合物359E：LC-MS(ESI)：RT＝3.771min，C24H27ClF2N4O5S2的计算质量588.1，m/z发现值589.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.56(s,0.7H),8.31(s,0.3H),8.00-7.96(m,2H),7.49-7.37(m,1.3H),7.22-7.19(m,1H),7.11(t,J＝6.0Hz,0.7H),6.04(s,0.3H),5.93(s,0.7H),3.93-3.87(m,0.3H),3.69(br s,0.7H),3.52(s,3H),3.41-3.37(m,2H),3.27-3.25(m,3.3H),3.17-3.08(m,2.7H),2.37-1.78(m,6.3H),1.65-1.62(m,1H),1.52-1.48(m,0.7H)。
化合物359F：LC-MS(ESI)：RT＝3.648min，C24H27ClF2N4O5S2的计算质量588.1，m/z发现值589.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.57(d,J＝3.6Hz,0.6H),8.99(s,0.4H),8.00-7.94(m,2H),7.49-7.41(m,1H),7.21-7.10(m,2H),6.01(s,0.4H),5.92(d,J＝3.6Hz,0.6H),3.89-3.81(m,0.4H),3.61-3.52(m,3.6H),3.41-3.37(m,2H),3.29(s,3H),3.16-3.10(m,2.4H),3.07-2.99(m,0.6H),2.20-2.13(m,2H),2.01-1.68(m,4H),1.56-1.41(m,2H)。
外消旋359E(120mg，0.200mmol)通过手性制备型HPLC分离(分离条件：柱：Chiralpak IA 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝70:30:0.3，以25mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到呈黄色固体的标题化合物359A(40mg，33％产率，100％立体纯)和359B(45mg，38％产率，100％立体纯)。
化合物359A：LC-MS(ESI)：RT＝2.375min，C24H27ClF2N4O5S2的计算质量588.1，m/z发现值589.0[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝70:30:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝7.183min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.57(s,0.7H),8.31(s,0.3H),8.01-7.96(m,2H),7.49-7.37(m,1.3H),7.22-7.18(m,1H),7.12(t,J＝6.0Hz,0.7H),6.03(s,0.3H),5.92(s,0.7H),3.94-3.86(m,0.3H),3.72-3.66(m,0.7H),3.52(s,3H),3.40-3.35(m,2H),3.27-3.25(m,3H),3.18-3.08(m,3H),2.38-1.76(m,6.3H),1.66-1.62(m,1H),1.51-1.45(m,0.7H)。
化合物359B：LC-MS(ESI)：RT＝2.361min，C24H27ClF2N4O5S2的计算质量588.1，m/z发现值589.0[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝70:30:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝9.264min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.57(s,0.7H),8.31(s,0.3H),8.01-7.96(m,2H),7.50-7.37(m,1.3H),7.22-7.18(m,1H),7.12(t,J＝6.0Hz,0.7H),6.03(s,0.3H),5.92(s,0.7H),3.94-3.86(m,0.3H),3.72-3.66(m,0.7H),3.52(s,3H),3.41-3.35(m,2H),3.27-3.25(m,3H),3.18-3.08(m,3H),2.37-1.74(m,6.3H),1.65-1.60(m,1H),1.52-1.45(m,0.7H)。
外消旋359F(380mg，0.65mmol)通过手性制备型HPLC分离(分离条件：柱：Chiralpak IE 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH＝50:50，以10mL/min；温度：30℃；波长：230nm)，得到呈黄色固体的标题化合物359C(150mg，39％产率，100％立体纯)和359D(130mg，34％产率，100％立体纯)。
化合物359C：LC-MS(ESI)：RT＝3.082min，C24H27ClF2N4O5S2的计算质量588.1，m/z发现值589.0[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IE 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝50:50，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝9.329min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.56(d,J＝3.6Hz,0.6H),8.97(s,0.4H),8.00-7.94(m,2H),7.48-7.41(m,1H),7.21-7.15(m,1.4H),7.10(t,J＝6.0Hz,0.6H),6.01(s,0.4H),5.92(d,J＝3.6Hz,0.6H),3.88-3.80(m,0.4H),3.61-3.52(m,3.6H),3.41-3.37(m,2H),3.28(s,3H),3.18-3.11(m,2.4H),3.06-2.99(m,0.6H),2.20-2.09(m,2H),1.98-1.67(m,4H),1.55-1.41(m,2H)。
化合物359D：LC-MS(ESI)：RT＝3.086min，C24H27ClF2N4O5S2的计算质量588.1，m/z发现值589.0[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IE 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝50:50，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝11.758min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.56(d,J＝3.2Hz,0.6H),8.97(s,0.4H),8.00-7.94(m,2H),7.48-7.41(m,1H),7.21-7.16(m,1.4H),7.10(t,J＝5.6Hz,0.6H),6.02(s,0.4H),5.92(d,J＝3.6Hz,0.6H),3.89-3.80(m,0.4H),3.62-3.52(m,3.6H),3.41-3.37(m,2H),3.29(s,3H),3.16-3.11(m,2.4H),3.06-3.00(m,0.6H),2.20-2.09(m,2H),1.99-1.68(m,4H),1.55-1.41(m,2H)。
化合物361：(trans)-甲基6-(4-(N-(3-(叔丁氧基)-2,2-二甲基-3-氧代丙基)氨磺酰基)环己基)-4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，通过制备型HPLC纯化(柱：Gilson Xbrige C18(5μm 19*150mm)，流动相A：水(0.1％碳酸氢铵)，流动相B：乙腈，UV：214nm，流速：15mL/min，梯度：70％-90％(％B))，得到呈黄色固体的标题化合物(200mg，24％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝4.561min，C30H37ClF2N4O6S2的计算质量686.2，m/z发现值686.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.58(d,J＝3.6Hz,0.6H),9.00(s,0.4H),8.02-8.01(m,1H),7.99(d,J＝6.4Hz,0.6H),7.96-7.93(m,0.4H),7.49-7.41(m,1H),7.22-7.14(m,1H),7.10-7.06(m,0.4H),7.00-6.96(m,0.6H),6.01(s,0.4H),5.92(d,J＝4.0Hz,0.6H),3.89-3.80(m,0.4H),3.61-3.56(m,0.6H),3.53(s,1.8H),3.52(s,1.2H),3.17-3.13(m,0.4H),3.11-3.05(m,2H),3.03-2.96(m,0.6H),2.23-2.10(m,2H),2.04-1.91(m,1H),1.89-1.75(m,2H),1.73-1.67(m,1H),1.56-1.45(m,2H),1.42(s,9H),1.09(s,2.4H),1.08(s,3.6H)。
外消旋361(190mg，0.227mmol)通过手性制备型HPLC分离(分离条件：柱：Chiralpak IE 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝70:30:0.3，以14mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到呈黄色固体的标题化合物361X(65mg，34％产率，100％立体纯)和361Y(65mg，34％产率，99.9％立体纯)。
化合物361X：LC-MS(ESI)：RT＝4.288min，C30H37ClF2N4O6S2的计算质量686.2，m/z发现值687.2[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IE 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝70:30:0.2，以1mL/min；温度：30℃；波长：230nm；RT＝10.214min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.10(S,0.5H),7.84-7.81(m,1H),7.51(d,J＝2.8Hz,0.5H),7.46(d,J＝2.8Hz,0.5H),7.39(s,0.5H),7.07-7.01(m,2H),6.18(s,0.5H),6.05(d,J＝2.0Hz,0.5H),4.93-4.84(m,1H),4.04-3.98(m,0.5H),3.80-3.75(m,0.5H),3.62-3.60(m,3H),3.16-3.13(m,2H),3.06-3.00(m,1H),2.44-1.95(m,4H),1.83-1.64(m,3H),1.46(s,9H),1.23(m,6H)。
化合物361Y：LC-MS(ESI)：RT＝3.650min，C30H37ClF2N4O6S2的计算质量686.2，m/z发现值687.2[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IE 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝70:30:0.2，以1mL/min；温度：30℃；波长：230nm；RT＝13.723min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.10(s,0.5H),7.84-7.81(m,1H),7.51(d,J＝3.2Hz,0.5H),7.46(d,J＝3.2Hz,0.5H),7.39(s,0.5H),7.07-7.01(m,2H),6.18(s,0.5H),6.05(d,J＝2.8Hz,0.5H),4.93-4.84(m,1H),4.10-3.98(m,0.5H),3.80-3.75(m,0.5H),3.62-3.60(m,3H),3.16-3.13(m,2H),3.06-3.00(m,1H),2.43-1.95(m,4H),1.84-1.70(m,3H),1.46(s,9H),1.23(m,6H)。
化合物362a：乙基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(5-乙氧基羰基四氢-2H-吡喃-2-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝2.471min，C24H25ClFN3O5S的计算质量521.1，m/z发现值522.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.86(s,0.2H),8.80(s,0.2H),8.74(d,J＝4.8Hz,0.6H),8.01-7.96(m,2H),7.45-7.42(m,2H),7.23-7.21(m,1H),6.07(d,J＝2.8Hz,0.5H),6.01(d,J＝5.6Hz,0.5H),5.25-5.08(m,1H),4.46-4.41(m,0.5H),4.34-4.09(m,2.5H),3.99-3.94(m,2H),3.89-3.76(m,0.6H),3.68-3.34(m,0.4H),2.83-2.62(m,1H),2.31-2.12(m,1.5H),2.02-1.65(m,2H),1.61-1.48(m,0.5H),1.33-1.26(m,2H),1.22-1.18(m,1H),1.09-1.04(m,3H)。
化合物362R：乙基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(5-乙氧基羰基四氢-2H-吡喃-2-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝3.606和3.694min，C24H25ClFN3O5S的计算质量521.1，m/z发现值522.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.93-7.89(m,1H),7.76-7.75(m,1H),7.49-7.44(m,0.5H),7.41-7.34(m,0.5H),7.24-7.22(m,1H),7.10-7.02(m,1H),6.18(d,J＝4.4Hz,0.5H),6.12(d,J＝3.2Hz,0.5H),5.34-5.20(m,1H),4.60-4.55(m,0.5H),4.21-4.16(m,1.8H),4.15-4.12(m,0.7H),4.03(q,J＝6.8Hz,2H),3.88-3.83(m,0.7H),3.70-3.63(m,0.3H),2.81-2.75(m,0.2H),2.65(br s,0.6H),2.41-2.33(m,0.6H),2.28-2.13(m,0.6H),1.96-1.82(m,2.2H),1.79-1.56(m,0.8H),1.38-1.35(m,2H),1.29-1.25(m,1H),1.15-1.11(m,3H)。
362a(676mg，1.30mmol)和362R(962mg，1.85mmol)进一步通过硅胶柱色谱法纯化(石油醚:乙酸乙酯＝6:1)，得到标题化合物362W(1.40g，2.69mmol)，将其通过手性制备型HPLC分离(分离条件：柱：Chiralpak IC 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH＝90:10，以15mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到组1(690mg)，组2(92mg)，组3(80mg)，组4(146mg)和标题化合物362Y(48mg，3％产率，92.7％立体纯)。组2进一步通过制备型HPLC纯化(柱：WatersKinete EVO C18(5μm 21.2*150mm)，流动相A：水(0.1％碳酸氢氨)，流动相B：乙腈，UV：214nm，流速：15mL/min，梯度：65％-70％(％B))，得到标题化合物362V(50mg，4％产率，100％立体纯)，组3进一步通过手性制备型HPLC分离(分离条件：柱：Chiralpak IC5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH＝90:10，以25mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到标题化合物362X(48mg，3％产率，99.2％立体纯)，和组4进一步通过手性制备型HPLC分离(分离条件：柱：Chiralpak IC 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH＝90:10，以25mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到标题化合物362T(90mg，6％产率，99.7％立体纯)。组1进一步通过手性制备型HPLC分离(分离条件：柱：Chiralpak IC 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH＝95:5，以25mL/min；温度：30℃；波长：214)，得到组5(140mg)，组6(130mg),组7(110mg)和标题化合物362U(60mg，4％产率，100％立体纯)。组5进一步通过制备型HPLC纯化(柱：Gilson X-bridgeC18(5μm 21.2*150mm)，流动相A：水(0.1％碳酸氢氨)，流动相B：乙腈，UV：214nm，流速：15mL/min，梯度：65％-85％(％B)，得到标题化合物362M(110mg，8％产率，96.9％立体纯)。组6进一步通过制备型HPLC纯化(柱：Waters kinete EVO C18(5μm 21.2*150mm)，流动相A：水(0.1％碳酸氢氨)，流动相B：乙腈，UV：214nm，流速：15mL/min，梯度：50％-95％(％B)，得到标题化合物362N(88mg，6％产率，96.9％立体纯)，组7进一步通过制备型HPLC纯化(柱：Waters Gemininx C18(5μm 19*150mm)，流动相A：水(0.1％碳酸氢氨)，流动相B：乙腈，UV：214nm，流速：15mL/min，梯度：65％-95％(％B)，得到标题化合物362S(86mg，6％产率，94.6％立体纯)。
化合物362M(cis)：LC-MS(ESI)：RT＝3.344min，C24H25ClFN3O5S的计算质量521.1，m/z发现值521.9[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝95:5，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm；RT＝9.833min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.92(br s,1H),7.77(d,J＝2.8Hz,1H),7.42-7.38(m,2H),7.11(dd,J＝8.4,2.4Hz,1H),6.93-6.88(m,1H),6.16(s,1H),5.33(dd,J＝10.8,2.0Hz,1H),4.63-4.60(m,1H),4.38-4.22(m,2H),4.06-3.98(m,2H),3.82-3.78(m,1H),2.57(br s,1H),2.40-2.37(m,1H),2.02-1.88(m,2H),1.78-1.65(m,1H),1.37(t,J＝7.2Hz,3H),1.12(t,J＝7.2Hz,3H)。
化合物362N(cis)：LC-MS(ESI)：RT＝3.348min，C24H25ClFN3O5S的计算质量521.1，m/z发现值521.9[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝95:5，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm；RT＝11.383min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.25(br s,1H),7.89(br s,1H),7.62(br s,1H),7.46-7.42(m,1H),7.14(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),6.96-6.93(m,1H),6.25(br s,1H),5.34(d,J＝10.0Hz,1H),4.62(d,J＝11.6Hz,1H),4.38-4.22(m,2H),4.10-4.01(m,2H),3.82-3.79(m,1H),2.59(br s,1H),2.42-2.38(m,1H),2.00-1.89(m,2H),1.77-1.68(m,1H),1.37(t,J＝7.2Hz,3H),1.14(t,J＝7.2Hz,3H)。
化合物362S(cis)：LC-MS(ESI)：RT＝3.334min，C24H25ClFN3O5S的计算质量521.1，m/z发现值521.9[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝95:5，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm；RT＝13.153min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.84(br s,1H),7.80(d,J＝3.2Hz,1H),7.41(d,J＝2.8Hz,1H),7.29-7.28(m,1H),7.12(dd,J＝8.8,2.4Hz 1H),6.94-6.89(m,1H),6.22(s,1H),5.32-5.29(m,1H),4.63(d,J＝11.6Hz,1H),4.39-4.32(m,1H),4.29-4.23(m,1H),4.08-3.98(m,2H),3.82-3.78(m,1H),2.58(brs,1H),2.44-2.41(m,1H),2.11-2.08(m,1H),1.97-1.88(m,2H),1.39(t,J＝6.8Hz,3H),1.14(t,J＝6.8Hz,3H)。
化合物362T(cis)：LC-MS(ESI)：RT＝4.093min，C24H25ClFN3O5S的计算质量521.1，m/z发现值522.2[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝90:10，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm；RT＝15.229min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.84(br s,1H),7.80(d,J＝3.2Hz,1H),7.41(d,J＝3.2Hz,1H),7.29-7.27(m,1H),7.11(dd,J＝8.8,2.8Hz,1H),6.94-6.88(m,1H),6.22(s,1H),5.32-5.29(m,1H),4.63(d,J＝11.2Hz,1H),4.39-4.34(m,1H),4.28-4.23(m,1H),4.08-3.98(m,2H),3.82-3.78(m,1H),2.58(br s,1H),2.43-2.41(m,1H),2.11-2.08(m,1H),1.97-1.87(m,2H),1.39(t,J＝7.2Hz,3H),1.14(t,J＝7.2Hz,3H)。
化合物362U(trans)：LC-MS(ESI)：RT＝4.304min，C24H25ClFN3O5S的计算质量521.1，m/z发现值522.2[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝95:5，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm；RT＝8.729min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.82(br s,1H),7.84(d,J＝3.2Hz,1H),7.44-7.39(m,2H),7.12(dd,J＝8.4,2.4Hz,1H),6.95-6.90(m,1H),6.17(s,1H),5.25(dd,J＝10.8,2.0Hz,1H),4.37(dd,J＝8.4,5.2Hz,1H),4.16(q,J＝7.2Hz,2H),4.05-4.00(m,2H),3.67(t,J＝11.6Hz,1H),2.78-2.70(m,1H),2.45-2.18(m,2H),1.96-1.85(m,1H),1.57-1.47(m,1H),1.27(t,J＝7.2Hz,3H),1.12(t,J＝7.2Hz,3H)。
化合物362V(trans)：LC-MS(ESI)：RT＝3.711min，C24H25ClFN3O5S的计算质量521.1，m/z发现值522.2[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝90:10，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm；RT＝9.631min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.82(br s,1H),7.83(d,J＝3.2Hz,1H),7.43-7.39(m,2H),7.12(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),6.95-6.89(m,1H),6.17(s,1H),5.25(dd,J＝11.2,2.0Hz,1H),4.38(dd,J＝10.0,2.8Hz,1H),4.16(q,J＝7.2Hz,2H),4.03(q,J＝7.2Hz,2H),3.68(m,J＝11.6Hz,1H),2.78-2.70(m,1H),2.25-2.18(m,2H),1.96-1.85(m,1H),1.58-1.47(m,1H),1.27(t,J＝7.2Hz,3H),1.12(t,J＝6.8Hz,3H)。
化合物362X(trans)：LC-MS(ESI)：RT＝4.313min，C24H25ClFN3O5S的计算质量521.1，m/z发现值522.2[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝90:10，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm；RT＝11.369min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.83(br s,1H),7.84(d,J＝3.2Hz,1H),7.43(d,J＝3.2Hz,1H),7.30-7.27(m,1H),7.13(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),6.93-6.89(m,1H),6.23(s,1H),5.24(dd,J＝10.8,1.6Hz,1H),4.39(dd,J＝7.6,4.0Hz,1H),4.16(q,J＝7.2Hz,2H),4.07-3.97(m,2H),3.69-3.63(m,1H),2.78-2.68(m,1H),2.30-2.25(m,2H),2.00-1.89(m,1H),1.73-1.66(m,1H),1.27(t,J＝7.2Hz,3H),1.15(t,J＝7.2Hz,3H)。
化合物362Y(trans)：LC-MS(ESI)：RT＝4.306min，C24H25ClFN3O5S的计算质量522.2，m/z发现值521.9[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝90:10，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm；RT＝13.057min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.83(br s,1H),7.84(d,J＝3.2Hz,1H),7.43(d,J＝3.2Hz,1H),7.30-7.27(m,1H),7.13(dd,J＝8.4,2.0Hz,1H),6.95-6.88(m,1H),6.23(s,1H),5.24-5.21(m,1H),4.41-4.37(m,1H),4.16(q,J＝7.2Hz,2H),4.06-4.01(m,2H),3.69-3.63(m,1H),2.78-2.69(m,1H),2.30-2.25(m,2H),1.99-1.88(m,1H),1.70-1.66(m,1H),1.28(t,J＝7.2Hz,3H),1.15(t,J＝7.2Hz,3H)。
化合物368：乙基6-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝2.05min，C26H29ClF2N4O4S的计算质量566.2，m/z发现值567.7[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.36(s,0.5H),7.82(d,J＝3.2Hz,1H),7.51(d,J＝2.8Hz,0.5H),7.46(d,J＝3.2Hz,0.5H),7.38(s,0.5H),7.10-6.99(m,2H),6.20(s,0.5H),6.08(s,0.5H),4.30(br s,1.5H),4.09-3.99(m,2H),3.97-3.89(m,0.5H),2.91-2.79(m,2H),1.80-1.74(m,3H),1.61-1.58(m,2H),1.50(s,9H),1.13(t,J＝6.8Hz,3H)。
外消旋368(13.0g，22.9mmol)通过手性制备型HPLC分离(柱：Chiralpak IA 5μm20*250mm；流动相：Hex:EtOH＝95:5，以25mL/min，温度：30℃；波长：214nm)，得到标题化合物368A(5g，38％产率，99.7％立体纯)和368B(5g，38％产率，98.4％立体纯)。
化合物368A：LC-MS(ESI)：RT＝2.05min，C26H29ClF2N4O4S的计算质量566.2，m/z发现值567.6[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝95:5，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm；RT＝7.937min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.12(s,0.5H),7.83-7.82(m,1H),7.51(d,J＝3.2Hz,0.4H),7.46(d,J＝3.2Hz,0.6H),7.34(s,0.5H),7.10-6.99(m,2H),6.20(s,0.6H),6.08(d,J＝2.4Hz,0.4H),4.36-4.14(m,2.6H),4.10-3.99(m,2H),3.97-3.89(m,0.4H),2.91-2.78(m,2H),2.10-1.63(m,3.5H),1.58-1.56(m,0.5H),1.50(s,9H),1.14(t,J＝7.2Hz,3H)。
化合物368B：LC-MS(ESI)：RT＝2.05min，C26H29ClF2N4O4S的计算质量566.2，m/z发现值567.6[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝95:5，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm；RT＝8.930min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.12(s,0.5H),7.83-7.82(m,1H),7.51(d,J＝3.2Hz,0.4H),7.46(d,J＝3.2Hz,0.6H),7.34(s,0.5H),7.10-6.99(m,2H),6.20(s,0.6H),6.08(d,J＝2.4Hz,0.4H),4.36-4.14(m,2.6H),4.10-3.99(m,2H),3.97-3.89(m,0.4H),2.91-2.78(m,2H),2.10-1.63(m,3.5H),1.58-1.56(m,0.5H),1.50(s,9H),1.14(t,J＝7.2Hz,3H)。
化合物371：甲基6-(3-((叔丁氧基羰基)氨基)双环[1.1.1]戊-1-基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝2.454min，C25H26ClFN4O4S的计算质量532.1，m/z发现值532.8[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.91-7.86(m,0.8H),7.82-7.79(m,1H),7.48(d,J＝2.8Hz,0.2H),7.43(d,J＝3.2Hz,0.8H),7.41(br s,0.2H),7.31-7.27(m,0.7H),7.25-7.24(m,0.3H),7.14-7.11(m,1H),6.96-6.89(m,1H),6.15(s,0.8H),6.01(d,J＝2.8Hz,0.2H),5.04(br s,1H),3.64(s,0.7H),3.60(s,2.3H),2.53(s,4.6H),2.45(s,1.4H),1.47(s,9H)。
外消旋371(1.20g，2.26mmol)通过手性制备型SFC分离(柱：Chiralpak IG 5μm20*250mm；流动相：CO2:MeOH＝70:30，以45g/min；柱温：39℃；波长：214nm，背压：100巴)，得到呈黄色固体的标题化合物371A(608mg，51％产率，100％立体纯)和371B(576mg，48％产率，100％立体纯)。
化合物371A：LC-MS(ESI)：RT＝2.455min，C25H26ClFN4O4S的计算质量532.1，m/z发现值532.8[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IG 5μm 4.6*250mm；流动相：CO2:MeOH＝70:30，以2.999g/min；柱温：40℃；波长：230nm，背压：100巴，RT＝2.92min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.88(br s,0.8H),7.81(d,J＝3.6Hz,0.2H),7.80(d,J＝2.8Hz,0.8H),7.48(d,J＝2.8Hz,0.3H),7.43(d,J＝3.2Hz,0.7H),7.40(br s,0.2H),7.31-7.27(m,0.7H),7.25-7.24(m,0.3H),7.12(dd,J＝8.8,2.8Hz,1H),6.96-6.89(m,1H),6.15(s,0.7H),6.01(s,0.3H),5.03(br s,1H),3.64(s,0.7H),3.60(s,2.3H),2.53(s,4.3H),2.45(s,1.7H),1.47(s,9H)。
化合物371B：LC-MS(ESI)：RT＝2.456min，C25H26ClFN4O4S的计算质量532.1，m/z发现值532.8[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IG 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝70:30，以2.999g/min；柱温：40℃；波长：230nm，背压：100巴，RT＝4.32min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.88(br s,0.8H),7.81(d,J＝3.2Hz,0.2H),7.80(d,J＝3.2Hz,0.8H),7.48(d,J＝3.2Hz,0.3H),7.43(d,J＝3.2Hz,0.7H),7.40(br s,0.2H),7.31-7.27(m,0.7H),7.25-7.24(m,0.3H),7.14-7.11(m,1H),6.97-6.89(m,1H),6.15(s,0.7H),6.01(d,J＝2.4Hz,0.3H),5.03(br s,1H),3.64(s,0.7H),3.60(s,2.3H),2.53(s,4.3H),2.45(s,1.7H),1.47(s,9H)。
化合物377：乙基6-(-1-(叔丁氧基羰基)-2-(((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)甲基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物377a(外消旋物)：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.09(s,0.2H),7.82(d,J＝2.8Hz,0.8H),7.70-7.66(m,4H),7.50(d,J＝2.4Hz,0.6H),7.45-7.38(m,6H),7.34-7.29(m,1.4H),7.13(d,J＝8.0Hz,1H),6.96-6.88(m,1H),6.23(d,J＝9.2Hz,0.4H),6.10(d,J＝12.8Hz,0.6H),4.77-4.68(m,0.3H),4.54-4.37(m,1H),4.26-4.13(m,1H),3.99-3.94(m,2H),3.89-3.79(m,1H),3.72-3.65(m,0.7H),2.93-2.79(m,1H),2.22-2.05(m,1H),1.97-1.88(m,1H),1.85-1.68(m,2H),1.58(s,3H),1.55-1.40(m,9H),1.28-1.21(m,1H),1.08-0.98(m,9H)。
化合物377b(外消旋物)：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.14-8.11(m,0.3H),7.84-7.80(m,0.7H),7.73-7.65(m,4H),7.50(d,J＝2.8Hz,0.6H),7.45-7.26(m,7.4H),7.16-7.11(m,1H),6.91-6.84(m,1H),6.21-6.18(m,0.4H),6.07-6.04(m,0.6H),4.83-4.74(m,0.3H),4.58-4.32(m,1.2H),4.23-4.10(m,1.4H),4.04-3.96(m,1.6H),3.89-3.65(m,1.5H),2.93-2.65(m,1H),2.38-2.18(m,1.6H),2.05-2.00(m,0.4H),1.98-1.84(m,2H),1.63(s,3H),1.49-1.42(m,9H),1.28-1.24(m,1H),1.08-1.00(m,9H)。
化合物380：(trans)-甲基6-(4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)环己基)-4-(2-氯-3-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝3.152min，C27H35ClFN3O3SSi的计算质量563.2，m/z发现值564.2[M+H]+。
化合物382：叔丁基4-(6-(2-氯-4-氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)氮杂环庚烷-1-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝1.92min，C26H30ClFN4O4S的计算质量548.2，m/z发现值549.4[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.08-8.06(m,0.5H),7.82-7.78(m,1H),7.49-7.39(m,1.5H),7.32-7.26(m,1H),7.15-7.12(m,1H),7.00-6.89(m,1H),6.19-6.16(m,0.5H),6.04-6.03(m,0.5H),4.15-4.06(m,0.5H),3.96-3.71(m,1.5H),3.61-3.59(m,3H),3.56-3.18(m,3H),2.15-1.67(m,6H),1.51(s,4H),1.50(s,5H)。
化合物385：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(1,4-二氧杂螺[4.5]癸-8-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯,1H NMR,41％产率)，呈黄色固体。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.20(br s,0.6H),7.83-7.77(m,1H),7.46(br s,0.4H),7.43-7.40(m,1H),7.33-7.28(m,1H),7.15-7.07(m,1H),6.95-6.86(m,1H),6.18(s,0.7H),6.04(s,0.3H),3.99(s,4H),3.94-3.90(m,1H),3.63-3.58(m,3H),2.06-2.00(m,1H),1.91-1.88(m,2H),1.83-1.75(m,4H),1.66-1.55(m,1H)。
化合物394：(trans)-甲基6-(4-((叔丁氧基羰基)氨基)环己基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(3,5-二氟吡啶-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.67-8.64(m,0.7H),8.31-8.28(m,0.7H),8.25-8.22(m,0.3H),7.84-7.80(m,0.3H),7.33-7.28(m,1H),7.15-7.11(m,1H),6.97-6.82(m,2H),6.29-6.26(m,0.7H),6.02-6.00(m,0.3H),4.51-4.42(m,1H),4.05-3.96(m,1H),3.60(s,1.2H),3.58(s,1.8H),2.21-2.07(m,4H),1.98-1.90(m,2H),1.61-1.54(m,1H),1.46(s,9H),1.32-1.28(m,1H)。
化合物397：(cis)-甲基6-(4-((叔丁氧基羰基)氨基)环己基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(3,5-二氟吡啶-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.67-8.61(m,0.7H),8.32-8.29(m,0.6H),8.26-8.23(m,0.4H),7.84-7.80(m,0.3H),7.30-7.28(m,1H),7.13-7.11(m,1H),6.98-6.96(m,1H),6.90-6.87(m,1H),6.30-6.26(m,0.7H),6.04-6.00(m,0.3H),4.46-4.39(m,1H),3.99-3.94(m,1H),3.58(s,3H),2.13-2.07(m,3H),1.98-1.91(m,3H),1.71-1.67(m,2H),1.48(s,4H),1.45(s,5H)。
化合物407：甲基4-(2-溴-4-氟苯基)-6-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝2.207min，C25H28BrFN4O4S的计算质量578.1，m/z发现值579.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.12(s,0.4H),7.83-7.81(m,1H),7.51-7.45(m,1.6H),7.34-7.30(m,1H),7.01-6.94(m,1H),6.17(s,0.4H),6.02(d,J＝2.8Hz,0.6H),4.32-4.17(m,2H),3.94-3.93(m,0.3H),3.61-3.60(m,3H),3.50-3.49(m,0.7H),2.86(br s,2H),2.10-1.66(m,3.3H),1.51(s,9H),1.46-1.35(m,0.7H)。
外消旋化合物407(5.00g，8.65mmol)通过手性SFC分离(柱：Chiralpak IG 5μm20*250mm；，流动相：CO2:MeOH＝70:30，以50g/min，温度：30℃；波长：214nm，背压：100巴)，得到呈黄色固体的407A(1.6g，32％产率，100％立体纯)和呈黄色固体的407B(1.8g，36％产率，100％立体纯)。
化合物407A：手性HPLC分析(柱：Chiralpak IG 5μm 4.6*250mm；流动相：CO2:MeOH＝70:30,，以3.0g/min；温度：40℃；波长：220nm；RT＝2.98min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.12(s,0.4H),7.84-7.81(m,1H),7.55-7.45(m,1.6H),7.33-7.31(m,1H),7.01-6.93(m,1H),6.17(s,0.4H),6.02(d,J＝2.8Hz,0.6H),4.36-4.14(m,2.4H),3.96-3.91(m,0.6H),3.61-3.60(m,3H),2.89(br s,2H),2.12-1.64(m,3.5H),1.58(s,0.5H),1.51(s,9H)。
化合物407B：手性HPLC分析(柱：Chiralpak IG 5μm 4.6*250mm；流动相：CO2:MeOH＝70:30，以3.0g/min；温度：40℃；波长：230nm；RT＝4.46min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.12(s,0.4H),7.83-7.81(m,1H),7.50-7.44(m,1.6H),7.35-7.33(m,1H),7.01-6.93(m,1H),6.17(s,0.4H),6.02(d,J＝2.8Hz,0.6H),4.37-4.14(m,2.4H),3.96-3.91(m,0.6H),3.61-3.60(m,3H),2.96-2.77(m,2H),2.11-1.63(m,3.5H),1.58(s,0.5H),1.51(s,9H)。
化合物411：乙基4-(2-溴-3-氟苯基)-6-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝2.11min，C26H30BrFN4O4S的计算质量592.1，m/z发现值594.9[M+H]+。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.10(s,0.4H),7.82-7.80(m,1H),7.50-7.47(m,0.6H),7.44-7.39(m,1H),7.24-7.17(m,1H),7.13-7.11(m,1H),7.10-6.95(m,1H),6.26(s,0.5H),6.11(d,J＝2.4Hz,0.5H),4.36-4.14(m,2.4H),4.08-3.90(m,2.6H),2.94-2.77(m,2H),2.08-1.71(m,3H),1.62-1.54(m,1H),1.50(s,9H),1.13-1.08(m,3H)。
化合物411A和411B：乙基4-(2-溴-3-氟苯基)-6-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯和乙基4-(2-溴-3-氟苯基)-6-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
外消旋化合物411(7.60g，95％纯度，12.2mmol)通过手性制备型SFC分离(分离条件：柱：Chiralpak IG 5μm 20*250mm；流动相：CO2:MeOH＝75:25，以50g/min；柱温：40℃；波长：254nm；背压：100巴)，得到呈黄色固体的标题化合物411A(3.20g，95％纯度，42％产率，100％立体纯)和呈黄色固体的411B(3.20g，95％纯度，42％产率，99.3％立体纯)。
化合物411A：LC-MS(ESI)：RT＝2.268min，C26H30BrFN4O4S的计算质量592.1，m/z发现值593.1[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IG 5μm 20*250mm；流动相：CO2:MeOH＝75:25，以3.0g/min；柱温：40℃；波长：254nm；背压：100Bar,RT＝3.98min)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.09(s,0.4H),7.82-7.80(m,1H),7.49-7.40(m,1.6H),7.24-7.17(m,1H),7.17-7.11(m,1H),7.07-6.98(m,1H),6.26(s,0.5H),6.12(s,0.5H),4.35-3.91(m,5H),2.93-2.78(m,2H),2.01-1.81(m,2H),1.71-1.56(m,2H),1.50(s,9H),1.10(t,J＝7.2Hz,3H)。
化合物411B：LC-MS(ESI)：RT＝2.249min，C26H30BrFN4O4S的计算质量592.1，m/z发现值593.0[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IG 5μm 20*250mm；流动相：CO2:MeOH＝75:25，以3.0g/min；柱温：40℃；波长：254nm；背压：100Bar,RT＝4.84min)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.14-8.08(m,0.3H),7.81(d,J＝3.0Hz,1H),7.51-7.34(m,1.7H),7.24-7.20(m,1H),7.07-7.00(m,1H),6.27-6.10(m,1H),4.39-3.90(m,5H),2.98-2.76(m,2H),2.06-1.77(m,2.5H),1.68-1.57(m,1.5H),1.50(s,9H),1.10(t,J＝7.2Hz,3H)。
化合物417：乙基6-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
LC-MS(ESI)：RT＝2.169min，C27H33FN4O4S的计算质量528.2，m/z发现值529.1[M+H]+。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.07(s,1H),7.80-7.78(m,1H),7.50(d,J＝3.2Hz,0.3H),7.42(d,J＝3.2Hz,0.7H),7.06-6.79(m,3H),5.96(s,0.7H),5.87(d,J＝2.0Hz,0.3H),4.34-4.15(m,2.7H),4.07-4.00(m,2H),3.85-3.79(m,0.3H),2.89-2.86(m,2H),2.63(s,2H),2.48(s,1H),2.03-2.00(m,1H),1.87-1.83(m,1H),1.70-1.55(m,2H),1.50(s,9H),1.14-1.10(m,3H)。
外消旋417(6.00g，90％纯度，10.2mmol)通过手性制备型SFC分离(柱：ChiralpakIG 5μm 20mm*250mm；流动相：CO2:MeOH:DEA＝75:25:0.3，以50g/min；柱温：40℃；波长：214nm，背压：100巴)，得到呈黄色固体的标题化合物417A(2.70g，90％纯度，45％产率，100％立体纯)和417B(2.60g，90％纯度，43％产率，99.2％立体纯)。
化合物417A：手性分析(柱：Chiralpak IG 5μm 4.6mm*250mm；流动相：CO2:MeOH:DEA＝75:25:0.2，以3.00g/min；柱温：40℃；波长：214nm，背压：100巴，RT＝2.73min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.05(s,0.7H),7.80-7.79(m,1H),7.50(d,J＝3.2Hz,0.3H),7.42(d,J＝3.2Hz,0.7H),7.32-7.28(m,0.3H),7.18-7.15(m,0.7H),7.00(s,0.3H),6.90-6.76(m,2H),5.96(s,0.7H),5.87(s,0.3H),4.35-4.16(m,2.7H),4.09-3.99(m,2H),3.84-3.79(m,0.3H),2.92-2.83(m,2H),2.63(s,2H),2.48(s,1H),2.03-2.00(m,1H),1.87-1.84(m,1H),1.72-1.59(m,2H),1.50(s,9H),1.14-1.09(m,3H)。
化合物417B：手性分析(柱：Chiralpak IG 5μm 4.6mm*250mm；流动相：CO2:MeOH:DEA＝75:25:0.2，以3.00g/min；柱温：40℃；波长：214nm，背压：100巴，RT＝3.59min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.05(s,0.7H),7.79(d,J＝2.8Hz,1H),7.50(d,J＝3.2Hz,0.3H),7.42(d,J＝2.8Hz,0.7H),7.32-7.28(m,0.3H),7.18-7.15(m,0.7H),6.99(s,0.3H),6.90-6.76(m,2H),5.96(s,0.7H),5.87(d,J＝2.0Hz,0.3H),4.36-4.16(m,2.7H),4.09-3.99(m,2H),3.84-3.78(m,0.3H),2.92-2.83(m,2H),2.63(s,2H),2.49(s,1H),2.03-2.00(m,1H),1.87-1.79(m,1H),1.73-1.69(m,1H),1.61-1.56(m,1H),1.50(s,9H),1.15-1.10(m,3H)。
化合物426：乙基6-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基)-4-(3-氟-2-甲基苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
LC-MS(ESI)：RT＝2.143min，C27H33FN4O4S的计算质量528.2，m/z发现值529.1[M+H]+。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.08(s,1H),7.80-7.78(m,1H),7.49(d,J＝2.8Hz,0.3H),7.42(d,J＝2.8Hz,0.7H),7.08-7.01(m,2H),6.95-6.88(m,1H),6.01(s,0.7H),5.92(d,J＝2.0Hz,0.3H),4.31-4.17(m,3H),4.08-3.99(m,2H),2.89-2.82(m,2H),2.54(d,J＝2.0Hz,2H),2.39(d,J＝1.6Hz,1H),2.03-2.00(m,1H),1.87-1.84(m,1H),1.69-1.56(m.2H),1.50(s,9H),1.13-1.09(m,3H)。
外消旋426(3.0g，85％纯度，4.82mmol)通过手性制备型HPLC分离(柱：ChiralpakIC 5μm 20mm*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝98:2:0.3，以22mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到呈黄色固体的标题化合物426A(950mg，32％产率，90％纯度，100％立体纯)和426B(650mg，23％产率，90％纯度，99.3％立体纯)。
化合物426A：手性HPLC(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6mm*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝98:2:0.2，以1mL/min；柱温：40℃；波长：254nm，RT＝17.28min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.06(s,0.7H),7.79(d,J＝3.2Hz,1H),7.49(d,J＝3.2Hz,0.3H),7.42(d,J＝3.2Hz,0.7H),7.16-7.01(m,2.3H),6.95-6.88(m,1H),6.01(s,0.7H),5.92(d,J＝2.4Hz,0.3H),4.38-4.17(m,2.7H),4.09-3.99(m,2H),3.86-3.80(m,0.3H),2.93-2.82(m,2H),2.53(s,2.2H),2.39(s,0.8H),2.06-2.00(m,1H),1.87-1.68(m,2H),1.62-1.55(m,1H),1.50(s,9H),1.13-1.09(m,3H)。
化合物426B：手性HPLC(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6mm*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝98:2:0.2，以1mL/min；柱温：40℃；波长：254nm，RT＝19.61min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.06(s,0.7H),7.79(d,J＝2.8Hz,1H),7.50(d,J＝3.2Hz,0.3H),7.42(d,J＝3.2Hz,0.7H),7.15-7.01(m,2.3H),6.95-6.88(m,1H),6.01(s,0.7H),5.92(d,J＝2.0Hz,0.3H),4.35-4.17(m,2.7H),4.10-3.99(m,2H),3.86-3.81(m,0.3H),2.89-2.83(m,2H),2.54(s,2.2H),2.40(s,0.8H),2.03-2.00(m,1H),1.87-1.84(m,1H),1.73-1.68(m,1H),1.62-1.56(m,1H),1.50(s,9H),1.14-1.09(m,3H)
化合物430：甲基6-(4-(氮杂环丁烷-1-基磺酰基)环己基)-4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
纯化条件：通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝3:1)，然后进一步通过C18柱(乙腈:水＝5％至80％)纯化，得到呈黄色固体的170mg外消旋产物。外消旋混合物(170mg，0.298mmol)通过手性制备型HPLC分离(分离条件：柱：Chiralpak ID 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH＝70:30，以12mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到呈黄色固体的标题化合物430A(4.7mg，3％产率，100％立体纯)，430B(5.1mg，3％产率，93.7％立体纯)，430C(10mg，6％产率，100％立体纯)和430D(11mg，6％产率，99.1％立体纯)。
化合物430A(cis)：LC-MS(ESI)：RT＝4.455min，C24H25ClF2N4O4S2的计算质量570.0，m/z发现值570.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak ID 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝70:30，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝7.861min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.59(s,0.7H),8.22(s,0.3H),8.03-8.00(m,1.7H),7.97(d,J＝2.8Hz,0.3H),7.50-7.40(m,1H),7.22-7.18(m,1H),6.03(s,0.3H),5.92(s,0.7H),3.91-3.84(m,4.2H),3.73-3.67(m,0.8H),3.51(s,3H),3.21-3.15(m,1H),2.35-2.17(m,5H),2.14-1.97(m,1H),1.93-1.77(m,2H),1.71-1.62(m,1H),1.56-1.41(m,1H)。
化合物430B(cis)：LC-MS(ESI)：RT＝4.264min，C24H25ClF2N4O4S2的计算质量570.0，m/z发现值570.9[M+H]+。手性HPLC(柱：手性HPLC(柱：Chiralpak ID 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝70:30，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝8.867min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.59(s,0.7H),8.30(s,0.3H),8.04-7.96(m,2H),7.48-7.46(m,1H),7.22-7.18(m,1H),6.03(s,0.3H),5.92(d,J＝3.2Hz,0.7H),3.91-3.84(m,4.2H),3.72-3.69(m,0.8H),3.52(s,1.2H),3.51(s,1.8H),3.19-3.16(m,1H),2.37-2.19(m,5H),2.10-1.92(m,1H),1.88-1.80(m,2H),1.70-1.68(m,1H),1.62-1.55(m,1H)。
化合物430C(trans)：LC-MS(ESI)：RT＝3.966min，C24H25ClF2N4O4S2的计算质量570.0，m/z发现值571.2[M+H]+。手性HPLC(柱：手性HPLC(柱：Chiralpak IE 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝50:50，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝9.127min)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.61(s,0.7H),8.95(s,0.3H),8.03-7.94(m,2H),7.49-7.46(m,1H),7.24-7.16(m,1H),6.01(s,0.4H),5.93(s,0.6H),3.95-3.86(m,4.5H),3.53-3.51(m,3.5H),3.05-2.96(m,0.4H),2.87(br s,0.6H),2.26-2.07(m,5H),1.97-1.90(m,2H),1.85-1.80(m,1H),1.59-1.46(m,2H)。
化合物430D(trans)：LC-MS(ESI)：RT＝3.961min，C24H25ClF2N4O4S2的计算质量570.0，m/z发现值571.2[M+H]+。手性HPLC(柱：手性HPLC(柱：Chiralpak IE 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝50:50，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝12.662min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.60(s,0.6H),8.93(s,0.4H),8.01-8.00(m,1.6H),7.98-7.94(m,0.4H),7.52-7.42(m,1H),7.23-7.13(m,1H),5.99(s,0.4H),5.93(s,0.6H),3.97-3.86(m,4.4H),3.62-3.52(m,3.6H),3.22-3.16(m,0.5H),3.08-3.04(m,0.5H),2.20-2.13(m,4H),1.95-1.81(m,2.7H),1.76-1.66(m,1.3H),1.55-1.43(m,2H)。
化合物432：甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(1,4-二氧杂螺[4.5]癸-8-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.53(d,J＝3.6Hz,0.6H),8.63(s,0.4H),8.02-7.95(m,2H),7.48-7.39(m,1H),7.21-7.17(m,1H),6.02(s,0.3H),5.92(d,J＝3.6Hz,0.7H),3.93-3.86(m,4H),3.63-3.57(m,1H),3.53(s,2.7H),3.49(s,0.3H),2.07-1.97(m,1H),1.94-1.88(m,1H),1.82-1.68(m,4H),1.57-1.52(m,2H)。
化合物435：乙基6-(3-((叔丁氧基羰基)氨基)-2,2-二甲基环丁基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
LC-MS(ESI)：RT＝1.930min，C27H32ClFN4O4S的计算质量563.1，m/z发现值563.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.86-7.85(m,1H),7.51(d,J＝2.8Hz,1H),7.41-7.37(m,1H),7.15-7.11(m,1H),6.99-6.90(m,1H),6.18-6.14(m,1H),4.23(br s,0.3H),4.08-4.02(m,2.6H),3.90(br s,1H),3.76(br s,0.3H),2.49-2.30(m,2H),1.46(s,12H),1.14-1.09(m,6H)。
外消旋435(910mg，1.60mmol)通过手性制备型SFC分离(分离条件：柱：ChiralpakIE 5μm 20*250mm，流动相：CO2:MeOH＝75:25，以50g/min；温度：40℃；波长：214nm)，得到呈黄色固体的标题化合物435b(450mg，49％产率)和435a(440mg，48％产率)。
435a(cis)：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.14(s,0.2H),7.85-7.84(m,0.8H),7.52-7.51(m,1H),7.45-7.38(m,1H),7.36-7.34(m,1H),7.15-7.11(m,1H),7.00-6.91(m,1H),6.24(s,0.2H),6.15(d,J＝2.4Hz,0.8H),4.07-4.03(m,2H),3.98-3.94(m,1H),3.91-3.85(m,0.7H),3.81-3.67(m,0.3H),2.48-2.31(m,2H),1.45(s,13H),1.36-1.24(m,2H),1.16-1.11(m,3H)。
435b(trans)：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.17(s,0.2H),7.86-7.85(m,0.8H),7.54-7.45(m,2H),7.32-7.29(m,1H),7.14-7.11(m,1H),6.95-6.87(m,1H),6.25(s,0.2H),6.09(d,J＝2.8Hz,0.8H),4.23-4.14(m,1.3H),4.10-4.00(m,2H),3.93-3.87(m,0.7H),2.63-2.46(m,2H),1.47-1.44(m,13H),1.29-1.26(m,2H),1.12(t,J＝7.2Hz,3H)。
化合物441：甲基6-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基)-4-(3-氟-2-甲基苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝2.133min，C26H31FN4O4S的计算质量514.6，m/z发现值515.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.10(br s,1H),7.79-7.78(m,1H),7.49(d,J＝3.2Hz,0.3H),7.42(d,J＝3.2Hz,0.7H),7.17-7.00(m,2H),6.95-6.88(m,1H),6.01(s,0.7H),5.91(s,0.3H),4.40-4.17(m,2.7H),3.88-3.80(m,0.3H),3.59-3.58(m,3H),2.99-2.79(m,2H),2.54(d,J＝2Hz,2.2H),2.38(d,J＝2Hz,0.8H),2.04-1.59(m,4H),1.50(s,9H)。
外消旋441(5.0g，90％纯度，8.77mmol)通过手性制备型HPLC分离(分离条件：柱：Chiralpak IG 5μm 20*250mm；流动相：CO2:MeOH:DEA＝75:25:0.3，以50g/min；温度：30℃；波长：230nm)，得到呈黄色固体的标题化合物441a(2.2g，90％纯度，44％产率，99.1％立体纯)和441b(2.0g，90％纯度，40％产率，100％立体纯)。
化合物441a：手性分析：(柱：Chiralpak IG 5μm 4.6*250mm；流动相：CO2:MeOH＝75:25，以3g/min；柱温：40℃；波长：214nm，背压：100巴，RT＝3.38min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.09(s,1H),7.79-7.78(m,1H),7.50(d,J＝3.2Hz,0.3H),7.42(d,J＝3.2Hz,0.7H),7.16-7.04(m,2H),6.99-6.88(m,1H),6.00(s,0.7H),5.91(s,0.3H),4.43-4.16(m,2.7H),3.87-3.81(m,0.3H),3.59-3.58(m,3H),2.98-2.78(m,2H),2.54(d,J＝2Hz,2.2H),2.37(d,J＝2.4Hz,0.8H),2.03-1.59(m,4H),1.50(s,9H)。
化合物441b：手性分析：(柱：Chiralpak IG 5μm 4.6*250mm；流动相：CO2:MeOH＝75:25，以3g/min；柱温：40℃；波长：214nm，背压：100巴，RT＝2.91min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.10(s,1H),7.79-7.78(m,1H),7.49(d,J＝3.2Hz,0.3H),7.42(d,J＝3.2Hz,0.7H),7.17-7.12(m,2H),7.00-6.88(m,1H),6.01(s,0.7H),5.91(d,J＝3.2Hz,0.3H),4.43-4.17(m,2.7H),3.88-3.80(m,0.3H),3.59-3.58(m,3H),2.98-2.79(m,2H),2.54(d,J＝2Hz,2.2H),2.39(d,J＝2Hz,0.8H),2.04-1.56(m,4H),1.50(s,9H)。
化合物445：甲基6-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝1.79min，C26H31FN4O4S的计算质量514.2，m/z发现值515.4[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.09(s,0.7H),7.79(d,J＝2.8Hz,1H),7.49(d,J＝3.2Hz,0.3H),7.42(d,J＝2.8Hz,0.7H),7.32-7.28(m,0.3H),7.17-7.13(m,0.7H),7.07(s,0.3H),6.90-6.76(m,2H),5.95(s,0.7H),5.85(s,0.3H),4.40-4.20(m,2H),3.59(s,2H),3.58(s,1H),2.97-2.79(m,2H),2.63(s,2H),2.47(s,1H),2.02-1.97(m,1H),1.90-1.81(m,1H),1.72-1.59(m,3H),1.50(s,9H)。
外消旋445(2.00g，3.88mmol)通过手性制备型SFC分离(柱：Chiralpak IG 5μm20*250mm；流动相：CO2:MeOH:DEA＝75:25:0.3，以50g/min；柱温40℃；波长：214nm；背压：100巴)，得到呈黄色固体的标题化合物445A(684mg，34％产率，99.3％立体纯)和呈黄色固体的445B(607mg，30％产率，100％立体纯)。
化合物445A：LC-MS(ESI)：RT＝1.89min，C26H31FN4O4S的计算质量514.2，m/z发现值515.1[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IG 5μm 4.6*250mm；流动相：CO2:MeOH:DEA＝75:25:0.2，以3.0g/min；柱温：40℃；波长：280nm，背压：100巴；RT＝3.81min)。
化合物445B：LC-MS(ESI)：RT＝1.88min，C26H31FN4O4S的计算质量514.2，m/z发现值515.1[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IG 5μm 4.6*250mm；流动相：CO2:MeOH:DEA＝75:25:0.2，以3.0g/min；柱温：40℃；波长：280nm，背压：100巴；RT＝2.93min)。
化合物472：trans-甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(4-(N-(3-甲氧基-3-氧代丙基)氨磺酰基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝3.937min，C25H27ClF2N4O6S2的计算质量616.1，m/z发现值617.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.57(d,J＝3.6Hz,0.6H),8.97(s,0.4H),7.99-7.94(m,2H),7.49-7.42(m,1H),7.22-7.11(m,2H),6.02(s,0.4H),5.92(d,J＝3.6Hz,0.6H),3.90-3.80(m,0.4H),3.63(s,3H),3.61-3.52(m,3.6H),3.26-3.14(m,2.4H),3.07-2.99(m,0.6H),2.57-2.54(m,2H),2.22-2.11(m,2H),2.00-1.70(m,4H),1.56-1.40(m,2H)。
节I：具有通式I的主要二氢嘧啶的一步转化(脱保护和偶联)
化合物96：乙基4-(2-氯-3-氟苯基)-6-(1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯(2种立体异构体的混合物)
方法O：在0℃向乙基6-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-3-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯化合物9(200mg，0.340mmol)在甲醇(5mL)中的溶液中添加在甲醇中的2M盐酸(5mL，10mmol)。在室温下搅拌2小时后，将混合物浓缩，得到残余物，在氮气气氛下将其溶解在二氯甲烷(5mL)中并且添加三乙胺(150mg，1.50mmol)和甲烷磺酰氯(114mg，1.00mmol)。搅拌过夜后，将反应混合物用水(30mL)两次洗涤，经Na2SO4(s)干燥，过滤并减压浓缩，得到残余物，将其用C18(乙腈:水＝40％至55％)纯化，得到呈淡黄色固体的标题化合物(240mg，86％产率)。
化合物96(200mg，0.380mmol)进一步通过手性制备型HPLC分离(柱：Chiralpak IA5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH＝70:30，以11mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到呈黄色固体的立体异构体化合物96A(62mg，31％产率)和化合物96B(61.5mg，31％产率)。
化合物96B：LC-MS(ESI)：RT＝4.103min，C22H24ClFN4O4S2的计算质量526.1，m/z发现值527.2[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝70:30，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝8.673min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.16(br s,0.3H),7.83(d,J＝3.2Hz,1H),7.53(d,J＝2.8Hz,0.7H),7.45(d,J＝2.8Hz,0.3H),7.38(brs,0.7H),7.24-7.03(m,3H),6.28(br s,0.3H),6.15(d,J＝2.8Hz,0.7H),4.23-3.88(m,5H),2.89-2.76(m,5H),2.34-1.72(m,4H),1.13-1.07(m,3H)。
化合物97：4-(4-氯-2-氟-苯基)-6-(1-甲烷磺酰基-哌啶-4-基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氢-嘧啶-5-甲酸甲基酯(2种立体异构体的混合物)
方法P：向6-(1-叔丁氧基羰基-哌啶-4-基)-4-(4-氯-2-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氢-嘧啶-5-甲酸甲基酯化合物11(300mg，0.562mmol)在二氯甲烷(3mL)中的溶液中添加三氟乙酸(3mL，40.2mmol)。在室温下搅拌1小时后，将混合物浓缩，得到残余物，其无需进一步纯化即可使用。向残余物(700mg，0.562mmol)和三乙胺(170mg，1.69mmol)在二氯甲烷(6mL)中的溶液中添加甲烷磺酰氯(71mg，0.62mmol)。在室温搅拌2小时后，将混合物浓缩并将残余物通过制备型HPLC纯化(柱：Gilson X-bridge C18(5μm 19*150mm)，流动相A：水(0.1％碳酸氢铵)，流动相B：乙腈，流速：15mL/min；梯度：15％-95％(％B))，得到呈黄色固体的标题化合物(81mg，28％产率)。化合物97(250mg，0.488mmol)进一步通过手性制备型HPLC分离(分离条件：柱：Chiralpak IA 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝70:30:0.3，以18mL/min，温度：30℃；波长：230nm)，得到呈黄色固体的立体异构体化合物97A(47.0mg，19％产率)和化合物97B(36.0mg，15％产率)。
化合物97B：LC-MS(ESI)：RT＝4.388min，C21H22ClFN4O4S2的计算质量512.1，m/z发现值512.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝70:30:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝11.437min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.60(br s,0.8H),9.26(br s,0.2H),8.05-8.00(m,1.8H),7.95-7.94(m,0.2H),7.42(d,J＝10.4Hz,1H),7.31-7.26(m,2H),5.89(s,0.2H),5.77(s,0.8H),3.72-3.63(m,3H),3.55(s,3H),2.91(s,0.6H),2.90(s,2.4H),2.80-2.72(m,2H),2.08-1.95(m,1H),1.90-1.72(m,2H),1.63-1.61(m,1H)。
类似地使用类似程序(方法O或方法P)，制备了以下产物：
Figure BDA0002341655160002681
Figure BDA0002341655160002691
Figure BDA0002341655160002701
化合物98：甲基4-(2-氯-3-氟苯基)-6-(1-(甲基磺酰基)哌啶-3-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯(4种立体异构体的混合物)
化合物98(300mg，0.59mmol)进一步通过手性制备型HPLC分离(第一分离条件：柱：Chiralpak IE 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝70:30:0.3，以12mL/min；温度：30℃；波长：230nm；第二分离条件：柱：Chiralpak IC 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝50:50:0.3，以10mL/min；温度：30℃；波长：230nm)，得到呈黄色固体的标题化合物化合物98A(17.2mg，6％产率)，化合物98B(18.0mg，6％产率)，化合物98C(18.7mg，6％产率)和化合物98D(25.9mg，9％产率)。
化合物98A：LC-MS(ESI)：RT＝3.335min，C21H22ClFN4O4S2的计算质量512.1，m/z发现值512.9。手性HPLC(柱：Chiralpak IE 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝70:30:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝12.265min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.62(s,0.8H),9.36(s,0.2H),8.01-7.94(m,2H),7.43-7.30(m,2H),7.21(d,J＝8.4Hz,0.8H),7.19(d,J＝7.2Hz,0.2H),6.10(s,0.2H),5.99(s,0.8H),4.14-4.06(m,0.2H),3.84-3.74(m,0.8H),3.71-3.63(m,1.5H),3.53(s,2H),3.51(s,1H),3.49-3.43(m,0.5H),3.04(t,J＝11.2Hz,1H),2.97(s,1H),2.93(s,2H),2.75-2.67(m,1H),1.85-1.69(m,3H),1.62-1.53(m,1H)。
化合物41：乙基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-((1R,5S,6r)-3-(甲基磺酰基)-3-氮杂双环-[3.1.0]己-6-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯(2种立体异构体的混合物)
化合物41(170mg，0.32mmol)进一步通过SFC分离(分离条件：柱：Chiralpak IA 5μm 20*250mm；流动相：CO2:EtOH＝70:30，以45g/min；共溶剂：EtOH；柱温：39.8℃；波长：214nm，背压：100巴)，得到呈淡黄色固体的立体异构体化合物41A(45.9mg，27％产率)和化合物41B(58.8mg，35％产率)。
化合物41A：LC-MS(ESI)：RT＝3.687min，C22H22ClFN4O4S2的计算质量524.1，m/z发现值525.1[M+H]+。SFC分析方法(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：CO2:EtOH＝70:30，以4mL/min；柱温：40℃；波长：214nm，背压：100巴，RT＝2.88min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.64(d,J＝2.8Hz,1H),8.01(s,2H),7.44-7.41(m,1H),7.39-7.35(m,1H),7.25-7.20(m,1H),5.93(d,J＝2.8Hz,1H),3.98(q,J＝7.2Hz,2H),3.53-3.46(m,3H),3.43(s,0.6H),3.40(s,0.4H),3.28(t,J＝2.8Hz,1H),2.94(s,3H),2.40-2.37(m,1H),2.20-2.17(m,1H),1.07(t,J＝6.8Hz,3H)。
化合物56：乙基4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(3,5-二氟吡啶-2-基)-6-(1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯(2种立体异构体的混合物)
化合物56(150mg，0.270mmol)进一步通过手性制备型HPLC分离(柱：Chiralpak IC5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH＝60:40，以18mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到呈黄色固体的立体异构体化合物56A(43.2mg，29％产率)和化合物56B(37.7mg，25％产率)。
化合物56A：LC-MS(ESI)：RT＝3.648min，C24H24ClF3N4O4S的计算质量556.1，m/z发现值557.1[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝60:40，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：210nm，RT＝9.583min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.44(s,0.4H),9.41(d,J＝3.2Hz,0.6H),8.63-8.62(m,1H),8.11-8.06(m,1H),7.60-7.56(m,1H),7.31-7.28(m,1H),7.22-7.16(m,1H),5.71(s,0.4H),5.52(d,J＝3.6Hz,0.6H),4.11-4.03(m,2H),3.95-3.93(m,0.4H),3.73-3.62(m,2.6H),2.89-2.88(m,3H),2.78-2.71(m,2H),2.02-1.61(m,4H),1.19-1.12(m,3H)。
化合物61B：甲基4-(2-氯-3-氟苯基)-6-(3-(甲基磺酰胺基)环戊基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
LC-MS(ESI)：RT＝3.666min，C21H22ClFN4O4S2的计算质量512.1，m/z发现值513.1[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：CO2:MeOH＝70:30，以4.0mL/min；柱温：40.2℃；波长：214nm，背压：100巴，Rt＝6.50min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.54(brs,0.7H),9.16(s,0.3H),8.00-7.99(m,1.7H),7.93(d,J＝2.8Hz,0.3H),7.41-7.31(m,2H),7.21-7.12(m,2H),6.05(s,0.2H),5.94(s,0.8H),4.48-4.43(m,0.2H),4.33-4.25(m,0.8H),4.05-3.97(m,1H),3.52(s,3H),2.93(s,3H),2.28-2.22(m,1H),2.14-2.07(m,1H),1.98-1.77(m,2H),1.70-1.54(m,2H)。
化合物61D：甲基4-(2-氯-3-氟苯基)-6-(3-(甲基磺酰胺基)环戊基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
LC-MS(ESI)：RT＝3.625min，C21H22ClFN4O4S2的计算质量512.1，m/z发现值513.1[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：CO2:MeOH＝70:30，以4.0mL/min；柱温：40.3℃；波长：214nm，背压：100巴，RT＝5.79min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.52(brs,0.8H),9.14(s,0.2H),8.02-7.99(m,1.8H),7.93(d,J＝3.2Hz,0.2H),7.40-7.31(m,2H),7.22-7.11(m,2H),6.05(s,0.2H),5.96(s,0.8H),4.50-4.40(m,0.2H),4.31-4.23(m,0.8H),4.08-3.93(m,1H),3.52(s,3H),2.92(s,3H),2.18-1.98(m,3H),1.92-1.77(m,1H),1.70-1.53(m,2H)。
化合物61E：甲基4-(2-氯-3-氟苯基)-6-(3-(甲基磺酰胺基)环戊基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
LC-MS(ESI)：RT＝3.976min，C21H22ClFN4O4S2的计算质量512.1，m/z发现值512.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak AD-H 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝80:20:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝11.038min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.56(d,J＝3.6Hz,0.7H),8.94(s,0.3H),8.03-8.01(m,1.5H),7.97(dd,J＝14.0,3.0Hz,0.5H),7.41-7.29(m,2H),7.19-7.14(m,2H),6.06(s,0.3H),5.96(d,J＝3.6Hz,0.7H),4.35-4.26(m,0.3H),4.17-4.08(m,0.7H),3.87-3.79(m,0.3H),3.76-3.66(m,0.7H),3.52-3.51(m,3H),2.98(s,1H),2.94(s,2H),2.44-2.37(m,0.3H),2.24-2.18(m,0.7H),2.02-1.64(m,5H)。
化合物61G：甲基4-(2-氯-3-氟苯基)-6-(3-(甲基磺酰胺基)环戊基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
LC-MS(ESI)：RT＝3.770min，C21H22ClFN4O4S2的计算质量512.1，m/z发现值512.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：CO2:MeOH＝60:40，以3.0mL/min；柱温：40℃；波长：214nm，背压100巴，RT＝7.31min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.58(s,0.7H),8.96(s,0.3H),8.04-7.95(m,2H),7.41-7.29(m,2H),7.20-7.14(m,2H),6.06(s,0.3H),5.96(s,0.7H),4.34-4.25(m,0.3H),4.15-4.07(m,0.7H),3.82-3.75(m,0.3H),3.74-3.66(m,0.7H),3.52-3.50(m,3H),2.96-2.93(m,3H),2.29-2.23(m,0.3H),2.07-1.97(m,2.7H),1.89-1.65(m,3H)。
化合物62B：甲基6-(3-乙酰胺基环戊基)-4-(2-氯-3-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
LC-MS(ESI)：RT＝3.704min，C22H22ClFN4O3S的计算质量476.1，m/z发现值477.0[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝85:15，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝16.977min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.57(d,J＝3.6Hz,0.8H),9.08(s,0.2H),8.03-8.00(m,2H),7.94-7.90(m,1H),7.41-7.29(m,2H),7.19(d,J＝7.6Hz,0.8H),7.13(d,J＝7.2Hz,0.2H),6.05(s,0.2H),5.94(d,J＝3.6Hz,0.8H),4.48-4.38(m,0.2H),4.35-4.24(m,1.8H),3.52-3.51(m,3H),2.22-2.12(m,1H),2.09-2.01(m,1H),1.94-1.82(m,1H),1.79(s,3H),1.76-1.67(m,2H),1.56-1.43(m,1H)。
化合物62D：甲基6-(3-乙酰胺基环戊基)-4-(2-氯-3-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
LC-MS(ESI)：RT＝3.675min，C22H22ClFN4O3S的计算质量476.1，m/z发现值477.0[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝85:15，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：254nm，RT＝9.898min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.55(d,J＝2.8Hz,0.8H),9.13(s,0.2H),8.00-7.88(m,3H),7.40-7.31(m,2H),7.20-7.12(m,1H),6.05(s,0.2H),5.96(d,J＝2.0Hz,0.8H),4.50-4.39(m,0.2H),4.33-4.22(m,1.8H),3.52(s,3H),2.10-1.98(m,3H),1.91-1.83(m,1H),1.79(s,3H),1.59-1.43(m,2H)。
化合物62G：甲基6-(3-乙酰胺基环戊基)-4-(2-氯-3-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
LC-MS(ESI)：RT＝3.489min，C22H22ClFN4O3S的计算质量476.1，m/z发现值477.0[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IB 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝90:10，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：254nm，RT＝11.172min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.56(d,J＝3.6Hz,0.7H),8.69(s,0.3H),8.04-8.01(m,1.7H),7.99(d,J＝3.2Hz,0.3H),7.96(d,J＝3.6Hz,0.3H),7.90(d,J＝7.6Hz,0.7H),7.41-7.30(m,2H),7.20-7.15(m,1H),6.07(s,0.3H),5.96(d,J＝3.6Hz,0.7H),4.37-4.27(m,0.3H),4.15-4.01(m,1.7H),3.52-3.51(m,3H),2.20-2.13(m,0.3H),2.06-1.87(m,4.7H),1.80(s,2H),1.74-1.57(m,2H)。
化合物65：4-(2-氯-4-氟-苯基)-6-(1-甲烷磺酰基-吡咯烷-3-基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氢-嘧啶-5-甲酸甲基酯(4种立体异构体的混合物)
化合物65(240mg，0.482mmol)进一步通过手性制备型HPLC(第一分离条件(柱：Chiralpak IB 5μm 20*250mm，流动相：Hex:EtOH:DEA＝80:20:0.3，以15mL/min，温度：30℃，波长：230nm)和第二分离条件(柱：Chiralpak IE 5μm 20*250mm，流动相：Hex:EtOH:DEA＝50:50:0.3，以10mL/min，温度：30℃，波长：230nm))，得到立体异构体化合物65A(22.4mg，9％产率)，化合物65B(36.8mg，15％产率)，化合物65C(42.7mg，18％产率)和化合物65D(23.4mg，10％产率)。
化合物65A：LC-MS(ESI)：RT＝3.750min，C20H20ClFN4O4S2的计算质量498.1，m/z发现值498.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IE 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝50:50:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝8.523min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.60(s,0.9H),9.33(s,0.1H),8.01(s,1.9H),7.94(s,0.1H),7.43-7.36(m,2H),7.23-7.19(m,1H),6.03(s,0.1H),5.95(s,0.9H),4.58-4.53(m,0.1H),4.40-4.33(m,0.9H),3.62-3.37(m,7H),3.03(s,0.3H),2.97(s,2.7H),2.22-2.13(m,1H),2.05-1.97(m,1H)。
化合物65C：LC-MS(ESI)：RT＝3.709min，C20H20ClFN4O4S2的计算质量498.1，m/z发现值498.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IE 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝50:50:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝10.361min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.62(s,0.9H),9.28(s,0.1H),8.02-7.93(m,2H),7.43-7.35(m,2H),7.24-7.19(m,1H),6.03(s,0.1H),5.94(d,J＝2.4Hz,0.9H),4.59-4.55(m,0.1H),4.41-4.33(m,0.9H),3.59-3.34(m,7H),3.03(s,0.3H),2.95(s,2.7H),2.33-2.24(m,1H),2.18-2.11(m,1H)。
化合物176：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-((cis)-2-(甲基磺酰基)-八氢环戊二烯并[c]吡咯l-5-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯和甲基
外消旋176使用以下来分离：C18柱(乙腈:水＝70％-80％)和制备型HPLC(柱：Waters Kinate EVO C18(5μm 21.2*150mm)，流动相A：水(+0.1％三氟乙酸)，流动相B：乙腈，UV：214nm，流速：15mL/min，梯度：30％-60％(％B))，得到176X(17mg，10％产率)和176Y(60mg，35％产率)呈黄色固体。
化合物176X然后使用手性制备型HPLC分离(柱：Chiralpak IC 5μm 20*250mm；流动相：CO2:IPA＝60:40，以50g/min；共溶剂：IPA；柱温：40℃；波长：214nm，背压：100巴)，得到标题化合物176A(26mg，17％产率，100％立体纯)和176B(23mg，15％产率，98.3％立体纯)呈黄色固体。
化合物176A：LC-MS(ESI)：RT＝3.923min，C23H24ClFN4O4S2的计算质量538.1，m/z发现值539.2[M+H]+。手性SFC(柱：Chiralpak IG 5μm 4.6*250mm；流动相：CO2:IPA＝60:40，以2.999g/min；柱温：40.2℃；波长：214nm，背压：100巴，RT＝3.85min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.44(d,J＝2.8Hz,0.8H),9.00(s,0.2H),7.99(d,J＝1.6Hz,1.8H),7.93(br s,0.2H),7.42(dd,J＝9.2,2.4Hz,1H),7.34-7.31(m,1H),7.30-7.18(m,1H),6.00(s,0.2H),5.91(d,J＝2.8Hz,0.8H),4.47-4.38(m,0.2H),4.32-4.24(m,0.8H),3.54(s,3H),3.48-3.37(m,2H),2.99-2.92(m,4H),2.91(s,3H),2.22-2.14(m,1H),2.08-2.01(m,1H),1.87-1.81(m,0.3H),1.77-1.72(m,1H),1.62-1.58(m,0.7H)。
化合物176Y然后使用手性制备型HPLC分离(柱：Chiralpak IA 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH＝70:30；温度：30℃；波长：230nm)，得到标题化合物176C(26mg，17％产率，100％立体纯)和176D(23mg，15％产率，99.5％立体纯)呈黄色固体。
176D：LC-MS(ESI)：RT＝3.686min，C23H24ClFN4O4S2的计算质量538.1，m/z发现值538.9[M+H]+。手性SFC(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：CO2:MeOH＝70:30，以2.999g/min；柱温：39.7℃；波长：230nm，背压100巴，RT＝4.41min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.25(br s,0.2H),7.84-7.82(m,1H),7.50(d,J＝3.2Hz,0.7H),7.44(d,J＝3.2Hz,0.3H),7.42(br s,0.8H),7.25-7.23(m,1H),7.15-7.11(m,1H),6.97-6.88(m,1H),6.19(s,0.2H),6.05(d,J＝2.8Hz,0.8H),4.44-4.27(m,1H),3.60(s,2H),3.59(s,1H),3.45-3.41(m,3.5H),3.27-3.19(m,0.5H),2.90(s,1H),2.88(s,2H),2.87-2.77(m,2H),2.53-2.43(m,0.3H),2.38-2.23(m,1H),2.11-2.02(m,2H),1.90-1.83(m,0.7H)。
化合物261：(cis)-乙基4-(2-氯-3-氟苯基)-6-(4-(甲基磺酰胺基)-四氢呋喃-2-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝3.735min，C21H22ClFN4O5S2的计算质量528.1，m/z发现值528.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.14(s,0.4H),8.99(s,0.4H),8.95(s,0.1H),8.87(s,0.1H),8.03-8.00(m,1H),7.97-7.95(m,0.8H),7.60-7.55(m,0.2H),7.51(d,J＝4.4Hz,0.4H),7.38-7.27(m,3H),6.13(s,0.4H),6.08(s,0.4H),6.02-6.00(m,0.1H),5.96-5.94(m,0.1H),5.70-5.59(m,0.2H),5.50-5.44(m,0.8H),4.32-4.24(m,0.2H),4.13-4.07(m,1.3H),3.99-3.95(m,3.3H),3.80-3.75(m,0.2H),2.99-2.95(m,3H),2.92-2.85(m,0.8H),2.64-2.61(m,0.2H),2.58-2.55(m,0.7H),2.45-2.42(m,0.3H),2.26-2.19(m,0.1H),2.09-2.03(m,0.5H),1.86-1.79(m,0.4H),1.07-1.00(m,3H)。
化合物262：(cis)-乙基6-(4-乙酰胺基四氢呋喃-2-基)-4-(2-氯-3-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝3.620min，C21H22ClFN4O4S2的计算质量492.1，m/z发现值492.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.94-7.91(m,1H),7.75-7.73(m,1H),7.31-7.26(m,1.5H),7.21-7.11(m,1.5H),6.23(s,0.5H),6.20(s,0.5H),5.73-5.67(m,0.2H),5.62-5.52(m,0.8H),4.46-4.41(m,0.5H),4.39-4.33(m,0.5H),4.17-4.14(m,0.5H),4.08-4.00(m,3.3H),3.88-3.84(m,0.2H),3.07-2.98(m,0.8H),2.70-2.65(m,0.2H),2.02-1.96(m,1H),1.95-1.91(m,1.3H),1.86-1.80(m,1.7H),1.12-1.09(m,3H)。
化合物300B、300D和300E：甲基6-(-3-乙酰胺基环戊基)-4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物300B：制备型HPLC分离(柱：gilson X-bridge C18(5μm 19*150mm)，流动相A：水(0.1％碳酸氢铵)，流动相B：乙腈，UV：214nm，流速：15mL/min，梯度：35％-65％(％B))，得到标题化合物300B(120mg，61％产率，100％ee)呈黄色固体。LC-MS(ESI)：RT＝4.358min，C22H21ClF2N4O3S的计算质量494.1，m/z发现值495.0[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IA 5μm4.6*250mm；流动相：CO2:MeOH＝70:30，以2.999g/min；柱温：39.9℃；波长：230nm，背压：100巴，RT＝2.85min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.13(br s,0.3H),7.83-7.81(m,1H),7.50(d,J＝3.2Hz,0.6H),7.45(d,J＝3.2Hz,0.4H),7.39(d,J＝0.8Hz,0.7H),7.08-7.01(m,2H),6.18(s,0.4H),6.04(d,J＝2.8Hz,0.6H),5.63(d,J＝6.4Hz,0.4H),5.55(d,J＝6.8Hz,0.6H),4.64-4.59(m,1H),4.55-4.41(m,1H),3.60(s,2H),3.59(s,1H),2.48-2.41(m,0.6H),2.39-2.24(m,1H),2.19-2.05(m,1.4H),2.00(s,3H),1.97-1.96(m,0.7H),1.91-1.81(m,1.3H),1.72-1.63(m,0.6H),1.54-1.51(s,0.4H)。
化合物300D：通过制备型HPLC纯化(柱：gilson X-bridge C18(5μm 19*150mm)，流动相A：水(0.1％碳酸氢铵)，流动相B：乙腈，UV：214nm，流速：15mL/min，梯度：35％-65％(％B))，得到标题化合物300D(210mg，71％产率，100％ee)呈黄色固体。LC-MS(ESI)：RT＝3.573min，C22H21ClF2N4O3S的计算质量494.1，m/z发现值494.7[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IE 5μm4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝70:30，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝7.839min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.13(s,0.4H),7.82(d,J＝3.2Hz,1H),7.51(d,J＝3.2Hz,0.6H),7.45(d,J＝3.2Hz,0.4H),7.38(d,J＝2.0Hz,0.6H),7.08-7.01(m,2H),6.18(s,0.4H),6.05(d,J＝2.8Hz,0.6H),5.58(d,J＝10.4Hz,0.4H),5.50(d,J＝6.8Hz,0.6H),4.62-4.56(m,1H),4.54-4.41(m,1H),3.60(s,2H),3.59(s,1H),2.40-2.31(m,1H),2.29-2.22(m,1H),2.19-2.09(m,1H),2.09-2.01(m,1H),1.99(s,1H),1.98(s,2H),1.79-1.68(m,2H)。
化合物300G：通过制备型HPLC纯化(柱：gilson X-bridge C18(5μm 19*150mm)，流动相A：水(0.1％碳酸氢铵)，流动相B：乙腈，UV：214nm，流速：15mL/min，梯度：35％-65％(％B))，得到标题化合物300G(200mg，59％产率，99.5％ee)呈黄色固体。LC-MS(ESI)：RT＝3.593min，C22H21ClF2N4O3S的计算质量494.1，m/z发现值494.7[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IC 5μm4.6*250mm；流动相：CO2:MeOH＝70:30，以2.999g/min；柱温：40℃；波长：230nm，背压：100巴，RT＝5.77min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.17(s,0.1H),7.89(d,J＝3.2Hz,0.8H),7.80(d,J＝3.2Hz,0.2H),7.55(d,J＝3.2Hz,0.9H),7.53(br s,0.9H),7.46(d,J＝2.8Hz,0.1H),7.13-7.02(m,2H),6.19(s,0.1H),6.09(d,J＝2.8Hz,0.9H),4.49-4.43(m,1.8H),4.39-4.31(m,0.2H),3.61(s,2.5H),3.59(s,0.5H),2.51-2.43(m,0.1H),2.34-2.27(m,0.9H),2.25-2.14(m,0.2H),2.13-2.11(m,1H),2.00(s,3H),1.97-1.93(m,0.8H),1.89-1.74(m,3H)。
化合物372：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(3-(甲基磺酰胺基)双环[1.1.1]戊-1-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝3.314min，C21H20ClFN4O4S2的计算质量510.1，m/z发现值510.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.46(d,J＝3.6Hz,0.5H),8.35(s,0.5H),8.17(s,0.5H),8.02-8.00(m,0.5H),8.00(s,1.5H),7.96(d,J＝2.8Hz,0.5H),7.46-7.41(m,1H),7.35-7.30(m,1H),7.25-7.19(m,1H),5.97(s,0.5H),5.87(d,J＝3.6Hz,0.5H),3.55(s,1.5H),3.53(s,1.5H),2.96(s,1.4H),2.93(s,1.6H),2.44(s,3H),2.28(s,3H)。
外消旋372(180mg，0.353mmol)通过手性制备型HPLC分离(柱：Chiralpak IG 5μm20*250mm；流动相：Hex:EtOH＝70:30，以13mL/min；温度：30℃；波长：230nm)，得到标题化合物372X(56.3mg，31％产率，100％立体纯)和372Y(50.1mg，28％产率，99.7％立体纯)。
化合物372X：LC-MS(ESI)：RT＝3.125min，C21H20ClFN4O4S2的计算质量510.1，m/z发现值511.2[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IG 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝70:30，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝8.003min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.47-9.40(m,0.5H),8.37-8.32(m,0.5H),8.18-8.13(m,0.5H),8.01-8.00(m,2H),7.96-7.94(m,0.5H),7.44-7.42(m,1H),7.34-7.31(m,1H),7.24-7.20(m,1H),5.97(s,0.5H),5.87(s,0.5H),3.54(s,3H),2.95(s,1.3H),2.94(s,1.7H),2.44(s,3H),2.28(s,3H)。
化合物372Y：LC-MS(ESI)：RT＝3.164min，C21H20ClFN4O4S2的计算质量510.1，m/z发现值511.2[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IG 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝70:30，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝10.326min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.47-9.41(m,0.5H),8.37-8.32(m,0.5H),8.18-8.13(m,0.5H),8.00-7.99(m,2H),7.96-7.93(m,0.5H),7.44-7.42(m,1H),7.34-7.30(m,1H),7.24-7.20(m,1H),5.97(s,0.5H),5.87(s,0.5H),3.54(s,3H),2.95(s,1.3H),2.94(s,1.7H),2.44(s,3H),2.28(s,3H)。
化合物378a：乙基6-((trans)-2-(((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)甲基)-1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝2.861，C39H44ClFN4O5S2Si的计算质量794.2，m/z发现值795.3[M+H]+。
化合物378b：乙基6-((trans)-2-(((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)甲基)-1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝2.831min，C39H44ClFN4O5S2Si的计算质量794.2，m/z发现值795.3[M+H]+。
化合物383：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(1-(甲基磺酰基)氮杂环庚烷-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝3.891min，C22H24ClFN4O4S2的计算质量526.1，m/z发现值527.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.12(s,0.4H),7.84-7.83(s,1H),7.50(d,J＝3.2Hz,0.6H),7.45(d,J＝3.2Hz,0.4H),7.42-7.40(m,0.6H),7.32-7.29(m,0.6H),7.25-7.24(m,0.4H),7.15-7.12(m,1H),6.98-6.90(m,1H),6.19(s,0.2H),6.16(s,0.2H),6.05(s,0.6H),4.23-4.17(m,0.4H),4.04-3.98(m,0.6H),3.79-3.68(m,1H),3.61-3.55(m,4H),3.45-3.22(m,2H),2.94-2.90(m,3H),2.26-1.81(m,6H)。
外消旋383(251mg，0.480mmol)通过手性制备型SFC分离(分离条件：柱：ChiralpakIA 5μm 20*250mm；流动相：CO2:MeOH＝70:30，以45g/min；柱温41.1℃；波长：214nm；背压：100巴；柱：Chiralpak IA 5μm 20*250mm；流动相：Hex:IPA:DEA＝80:20:0.3，以15mL/min；温度：30℃；波长：230nm；柱：Chiralpak IC 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝70:30:0.3，以15mL/min；温度：30℃；波长：230nm)，得到标题化合物383A(25mg，10％产率，100％立体纯)和383B(22mg，9％产率，99.4％立体纯)，383C(23mg，32％产率，99.2％立体纯)和383D(31mg，12％产率，100％立体纯)呈黄色固体。
化合物383A：LC-MS(ESI)：RT＝3.909min，C22H24ClFN4O4S2的计算质量526.1，m/z发现值527.2[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝70:30:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm；RT＝14.425min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.49(s,0.7H),9.13(s,0.3H),8.00(s,1.6H),7.94(s,0.4H),7.44-7.42(m,1H),7.38-7.31(m,1H),7.24-7.20(m,1H),6.01(s,0.3H),5.91(s,0.7H),4.04(s,0.3H),3.84-3.80(m,0.7H),3.53-3.36(m,5H),3.28-3.19(m,2H),2.94(s,3H),2.13-1.62(m,6H)。
化合物383B：LC-MS(ESI)：RT＝3.635min，C22H24ClFN4O4S2的计算质量526.1，m/z发现值526.9[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝70:30:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm；RT＝16.887min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.47(d,J＝3.6Hz,0.7H),9.12(s,0.3H),8.00-7.99(m,1.6H),7.94-7.93(m,0.4H),7.45-7.41(m,1H),7.38-7.31(m,1H),7.24-7.19(m,1H),6.01(s,0.3H),5.91(d,J＝3.6Hz,0.7H),4.07-4.01(m,0.3H),3.84-3.78(m,0.7H),3.55-3.39(m,5H),3.26-3.20(m,2H),2.93(s,3H),2.14-1.62(m,6H)。
化合物383C：LC-MS(ESI)：RT＝3.619min，C22H24ClFN4O4S2的计算质量526.1，m/z发现值526.9[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IA；流动相：CO2:MeOH＝70:30，以2.999mL/min；柱温：40℃；波长：214nm，背压：100巴，RT＝3.73min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.48(d,J＝3.6Hz,0.7H),9.08(s,0.3H),8.00-7.99(m,1.6H),7.94-7.93(m,0.4H),7.44-7.41(m,1H),7.38-7.30(m,1H),7.25-7.20(m,1H),6.00(s,0.3H),5.91(d,J＝3.2Hz,0.7H),4.06-4.00(m,0.3H),3.84-3.79(m,0.7H),3.52-3.41(m,5H),3.31-3.21(m,2H),2.93(s,3H),2.13-1.66(m,6H)。
化合物383D：LC-MS(ESI)：RT＝3.617min，C22H24ClFN4O4S2的计算质量526.1，m/z发现值526.9[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IA；流动相：CO2:MeOH＝70:30，以2.999mL/min；温度：40℃；波长：214nm，RT＝4.63min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.48(d,J＝3.6Hz,0.7H),9.08(s,0.3H),8.00-7.99(m,1.6H),7.94-7.93(m,0.4H),7.44-7.41(m,1H),7.38-7.33(m,1H),7.25-7.19(m,1H),6.00(s,0.3H),5.91(d,J＝3.6Hz,0.7H),4.06-4.00(m,0.3H),3.84-3.79(m,0.7H),3.52-3.42(m,5H),3.31-3.22(m,2H),2.93(s,3H),2.13-1.66(m,6H)。
化合物384：(trans)-甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(4-(氧杂环丁烷-3-磺酰胺基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝3.381min，C24H26ClFN4O5S2的计算质量568.1，m/z发现值569.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.47(d,J＝3.6Hz,0.6H),9.04(s,0.4H),8.00-7.98(m,1.5H),7.94(d,J＝3.2Hz,0.5H),7.51-7.41(m,2H),7.35-7.29(m,1H),7.23-7.19(m,1H),5.99(s,0.4H),5.90(d,J＝3.6Hz,0.6H),4.84-4.78(m,2H),4.72-4.59(m,3H),3.85-3.76(m,0.5H),3.55(br s,0.5H),3.51(s,2H),3.50(s,1H),3.32(br s,0.4H),3.13-3.11(m,0.6H),2.01-1.59(m,6H),1.35-1.23(m,2H)。
外消旋384(110mg，0.190mmol)通过手性制备型HPLC分离(柱：Chiralpak IE 5μm20*250mm；流动相：Hex:EtOH＝50:50，以10.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm)，得到标题化合物384A(43.1mg，39％产率，100％立体纯)和384B(42.3mg，38％产率，100％立体纯)。
化合物384A：LC-MS(ESI)：RT＝3.309min，C24H26ClFN4O5S2的计算质量568.1，m/z发现值569.2[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IE 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝50:50，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝9.233min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.46(d,J＝3.2Hz,0.6H),9.03(s,0.4H),7.99-7.98(m,1.5H),7.94(d,J＝3.2Hz,0.5H),7.49-7.41(m,2H),7.35-7.29(m,1H),7.22-7.21(m,1H),5.99(s,0.4H),5.90(d,J＝2.8Hz,0.6H),4.84-4.78(m,2H),4.68-4.58(m,3H),3.82-3.76(m,0.4H),3.68(br s,0.6H),3.51(s,2H),3.50(s,1H),3.31-3.27(m,0.4H),3.14-3.09(m,0.6H),1.94-1.59(m,6H),1.34-1.29(m,2H)。
化合物384B：LC-MS(ESI)：RT＝3.264min，C24H26ClFN4O5S2的计算质量568.1，m/z发现值569.2[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IE 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝50:50，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝13.064min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.46(d,J＝3.6Hz,0.6H),9.03(s,0.4H),7.99-7.98(m,1.6H),7.94(d,J＝2.8Hz,0.4H),7.50-7.40(m,2H),7.35-7.29(m,1H),7.23-7.19(m,1H),6.00(s,0.4H),5.90(d,J＝3.6Hz,0.6H),4.84-4.78(m,2H),4.70-4.58(m,3H),3.82-3.76(m,0.4H),3.57-3.55(m,0.6H),3.51(s,2H),3.50(s,1H),3.31-3.30(m,0.4H),3.15-3.09(m,0.6H),1.98-1.59(m,6H),1.34-1.28(m,2H)。
节II：去除具有通式I的主要二氢嘧啶的Boc保护
盐酸盐
化合物99：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯盐酸盐
在室温向6-(1-叔丁氧基羰基-哌啶-4-基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氢-嘧啶-5-甲酸甲基酯化合物5B(1.56g，2.92mmol)在甲醇(15mL)中的溶液中添加在甲醇中的4M盐酸(15mL，60.0mmol)。在室温下搅拌20分钟后，将混合物浓缩，得到呈黄色固体的标题化合物(1.69g，>100％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝1.444min，C20H21Cl2FN4O2S的计算质量470.1，m/z发现值434.9[M-HCl+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.00(br s,1H),8.60(br s,1H),8.02(dd,J＝4.4,3.2Hz,2H),7.43(dd,J＝8.8,2.8Hz,1H),7.36(dd,J＝8.8,6.0Hz,1H),7.21(td,J＝8.4,2.8Hz,1H),5.94(s,1H),3.86-3.79(m,1H),3.54(s,3H),3.40-3.35(m,2H),3.02-2.89(m,2H),2.19-2.02(m,2H),1.88(d,J＝14.4Hz,1H),1.72(d,J＝14.4Hz,1H)。
类似地使用类似程序，制备了以下胺盐酸盐：
化合物109：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯盐酸盐
化合物5被de-Boc，得到化合物109。LC-MS(ESI)：RT＝0.834min,m/z发现值434.7[M+H]+。
化合物111：甲基4-(2-氯-3-氟苯基)-6-(哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯盐酸盐
化合物10被de-Boc，得到化合物111。LC-MS(ESI)：RT＝1.33min，C20H21Cl2FN4O2S的计算质量470.1，m/z发现值435.4[M-HCl+H]+。
化合物117：4-(2-氯-3-氟-苯基)-6-哌啶-4-基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢-嘧啶-5-甲酸甲基酯盐酸盐
化合物10A被de-Boc，得到化合物117。LC-MS(ESI)：RT＝1.34min，C20H21Cl2FN4O2S的计算质量470.1，m/z发现值434.9[M-HCl+H]+。
化合物119：甲基4-(2-溴-4-氟苯基)-6-(哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯盐酸盐
化合物12被de-Boc，得到化合物119。LC-MS(ESI)：RT＝1.45min，C20H21BrClFN4O2S的计算质量514.0，m/z发现值479.1[M-HCl+H]+。
化合物32：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(哌啶-3-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物31被de-Boc，得到化合物32。LC-MS(ESI)：RT＝3.416min，C20H21Cl2FN4O2S的计算质量470.1，m/z发现值434.9[M-HCl+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.67(br s,1H),9.26(br s,0.4H),9.10(br s,0.6H),8.77(br s,1H),8.05-8.00(m,2H),7.45-7.33(m,2H),7.24-7.17(m,1H),5.97(s,0.6H),5.94(s,0.4H),4.09-3.99(m,1H),3.55(s,3H),3.37-3.20(m,3H),2.96-2.83(m,1H),1.93-1.71(m,4H)。
化合物35：甲基4-(2-氯-3-氟苯基)-6-(4-氟-哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物34被de-Boc，得到化合物35。LC-MS(ESI)：RT＝1.44min，C20H19ClF2N4O2S的计算质量452.1，m/z发现值453.4[M+H]+。
化合物45：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(cis-3-(甲氧基羰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯盐酸盐
化合物44A被de-Boc，得到化合物45。LC-MS(ESI)：RT＝1.46min，C22H22ClFN4O4S的计算质量492.1，m/z发现值493.5[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.75(s,1H),9.15(s,1H),8.88(s,1H),8.06(d,J＝3.2Hz,1H),8.03(d,J＝3.2Hz,1H),7.55-7.48(m,0.2H),7.44-7.36(m,1.8H),7.23-7.18(m,1H),5.95(s,1H),3.95-3.87(m,1H),3.55(s,3H),3.46(s,3H),3.42-3.37(m,1H),3.30-3.28(m,0.5H),3.24-3.17(m,3.5H),2.21-2.08(m,2H)。
化合物53：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(哌啶-4-基)-2-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯盐酸盐
化合物52被de-Boc，得到化合物53。LC-MS(ESI)：RT＝0.90min，C23H20ClF4N3O2的计算质量517.1m/z发现值482.1[M+H-HCl]+。
化合物67A：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(吡咯烷-3-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯盐酸盐
化合物66A被de-Boc，得到化合物67。(LC-MS(ESI)：RT＝3.198min，C19H19Cl2FN4O2S的计算质量456.1，m/z发现值420.9[M-HCl+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.46-9.07(m,2H),8.06-8.03(m,2H),7.45-7.41(m,2H),7.23-7.18(m,1H),5.95(s,0.8H),5.76(s,0.2H),4.44-4.32(m,2H),3.54(s,3H),3.33-3.34(m,2H),3.28-3.17(m,1H),2.13-2.08(m,2H)。
化合物67D：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(吡咯烷-3-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯盐酸盐
化合物66D被e-Boc以得到化合物67D，LC-MS(ESI)：RT＝1.95min，C19H18ClFN4O4S的计算质量420.9，m/z发现值421.1[M+H]+。
化合物79：甲基6-(氮杂环丁烷-3-基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯盐酸盐
化合物78A被de-Boc，得到化合物79。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.27(br s,2H),8.07(d,J＝2.8Hz,1H),8.04(d,J＝2.8Hz,1H),7.49-7.45(m,1H),7.42(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),7.19(td,J＝11.2,2.4Hz,1H),5.95(s,1H),4.58-4.50(m,1H),4.30-4.04(m,4H),3.52(s,3H)。
化合物297：(trans)-甲基6-(4-氨基环己基)-4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-2-(3,5-二氟吡啶-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯盐酸盐,1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.78-8.73(m,1H),8.38-8.20(m,2H),8.12-8.01(m,1H),7.67-7.52(m,1H),7.43-7.27(m,1H),6.23-6.15(m,1H),4.16(s,3H),3.79-3.71(m,1H),3.60(s,0.5H),3.57(s,2.5H),3.08-2.90(m,1H),2.09-2.01(m,3H),1.93-1.78(m,3H),1.54-1.46(m,2H)。
化合物350：乙基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-2-(3,5-二氟吡啶-2-基)-6-(哌啶-4-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯盐酸盐
化合物349被de-Boc以得到化合物350，LC-MS(ESI)：RT＝2.05min，C26H29ClF2N4O4S的计算质量566.2，m/z发现值567.7[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.36(s,0.5H),7.82(d,J＝3.2Hz,1H),7.51(d,J＝2.8Hz,0.5H),7.46(d,J＝3.2Hz,0.5H),7.38(s,0.5H),7.10-6.99(m,2H),6.20(s,0.5H),6.08(s,0.5H),4.30(br s,1.5H),4.09-3.99(m,2H),3.97-3.89(m,0.5H),2.91-2.79(m,2H),1.80-1.74(m,3H),1.61-1.58(m,2H),1.50(s,9H),1.13(t,J＝6.8Hz,3H)。
化合物350A：乙基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-2-(3,5-二氟吡啶-2-基)-6-(哌啶-4-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯盐酸盐
化合物349A被de-Boc以得到化合物350A，LC-MS(ESI)：RT＝1.512min，C23H22Cl2F4N4O2的计算质量532.1，m/z发现值497.1[M+H-HCl]+。
化合物350B：乙基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-2-(3,5-二氟吡啶-2-基)-6-(哌啶-4-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯盐酸盐
化合物349B被de-Boc以得到化合物350B，LC-MS(ESI)：RT＝1.504min，C23H22Cl2F4N4O2的计算质量532.1，m/z发现值497.0[M+H-HCl]+。
化合物369：乙基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物368被de-Boc以得到化合物369，LC-MS(ESI)：RT＝1.55min，C21H21ClF2N4O2S的计算质量466.1，m/z发现值467.1[M+H]+。
化合物369A：乙基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物368A被de-Boc，得到化合物369A,1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.02(s,2H),7.50-7.43(m,1H),7.24-7.20(m,1H),5.97(s,1H),3.98(q,J＝6.8Hz,2H),3.88-3.75(m,1H),3.32-3.23(m,2H),2.89-2.77(m,2H),2.10-1.79(m,3H),1.67-1.64(m,1H),1.08(t,J＝6.8Hz,3H)。
化合物369B：乙基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物368B被de-Boc，得到化合物369B,1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.02(s,2H),7.49-7.42(m,1H),7.23-7.19(m,1H),5.95(s,1H),3.98(q,J＝6.8Hz,2H),3.84-3.76(m,1H),3.36-3.31(m,2H),2.97-2.82(m,2H),2.15-1.97(m,2H),1.89-1.83(m,1H),1.72-1.66(m,1H),1.07(t,J＝6.8Hz,3H)。
化合物373：甲基6-(3-氨基双环[1.1.1]戊-1-基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物371被de-boc以得到化合物373，LC-MS(ESI)：RT＝1.41min，C20H18ClFN4O2S的计算质量432.1，m/z发现值433.5[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.85(s,0.8H),7.81(d,J＝3.6Hz,1H),7.48(d,J＝2.8Hz,0.2H),7.43(d,J＝2.8Hz,0.8H),7.39(s,0.2H),7.30-7.27(m,0.6H),7.25-7.23(m,0.4H),7.13-7.10(m,1H),6.93-6.89(m,1H),6.15(s,0.8H),6.00(d,J＝2.4Hz,0.2H),3.63(s,0.5H),3.60(m,2.5H),2.31(s,5H),2.25(s,1H)。
化合物373A：甲基6-(3-氨基双环[1.1.1]戊-1-基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物371A被de-boc以得到化合物373A，LC-MS(ESI)：RT＝0.982min，C20H18ClFN4O2S的计算质量432.1，m/z发现值432.8[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.85-7.81(m,1.7H),7.44-7.43(m,1.3H),7.29-7.27(m,0.6H),7.26-7.25(m,0.4H),7.12(dd,J＝8.8,2.8Hz,1H),6.92-6.91(m,1H),6.15(s,0.8H),6.00(s,0.2H),3.67(s,0.3H),3.64(s,0.7H),3.60(s,2H),2.32(s,4H),2.30(s,1H),2.27(s,1H)。
化合物373B：甲基6-(3-氨基双环[1.1.1]戊-1-基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物371B被de-boc以得到化合物373B，LC-MS(ESI)：RT＝1.883min，C20H18ClFN4O2S的计算质量432.1，m/z发现值432.8[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.95(d,J＝3.2Hz,0.3H),7.85(s,0.7H),7.81(d,J＝2.8Hz,1H),7.55-7.51(m,0.5H),7.49-7.38(m,1.2H),7.29-7.28(m,0.6H),7.26-7.25(m,0.2H),7.23-7.17(m,0.2H),7.13-7.11(m,1H),7.07-7.00(m,0.3H),6.94-6.89(m,1H),6.15(s,0.8H),6.00(s,0.2H),3.63-3.60(m,3H),2.32-2.27(m,6H)。
三氟乙酸盐
化合物121：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯三氟乙酸盐
向甲基6-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯化合物5(2.00g，3.75mmol)在二氯甲烷(10mL)中的悬浮液中添加2,2,2-三氟乙酸(10mL)。在室温下搅拌2小时后，将混合物减压浓缩，得到呈黄色固体的标题化合物(2.50g，>100％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝1.45min，C22H20ClF4N4O3S的计算质量531.1，m/z发现值435.4[M-CF3COOH+H]+。
类似地使用类似程序，制备以下胺三氟乙酸盐：
化合物123：4-(4-氯-3-氟-苯基)-6-哌啶-4-基-2-噻唑-2-基-1,4-二氢-嘧啶-5-甲酸甲基酯三氟乙酸盐
化合物13被de-Boc，得到化合物123。LC-MS(ESI)：RT＝2.035min，C20H20ClFN4O2S的计算质量434.1，m/z发现值435.1[M+H]+。
化合物125：甲基6-(trans-4-氨基环己基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯三氟乙酸盐
化合物14被de-Boc，得到化合物125。LC-MS(ESI)：RT＝2.288min，C23H22ClF4N4O3S的计算质量545.1，m/z发现值448.8[M+H-TFA]+。
化合物127：甲基6-(cis-4-氨基环己基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢-嘧啶-5-甲酸酯三氟乙酸盐
化合物15被de-Boc，得到化合物127。LC-MS(ESI)：RT＝0.299min，C23H22ClF4N4O3S的计算质量545.1，m/z发现值448.8[M+H-TFA]+。
化合物28：甲基4-(2-氯-3-氟苯基)-6-(trans-4-(2-乙氧基-2-氧代乙基)-环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物27Y被de-Boc，得到化合物28。LC-MS(ESI)：RT＝3.324min，C25H27ClFN3O4S的计算质量519.1，m/z发现值520.0[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralcel OJ-H 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝80:20，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm；RT＝7.308min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.46(s,0.5H),8.99(m,0.5H),7.99(d,J＝2.8Hz,1H),7.98-7.94(m,1H),7.39-7.29(m,2H),7.19-7.17(m,1H),6.05-5.96(m,1H),4.07(q,J＝7.2Hz,2H),3.81-3.58(m,1H),3.51(s,3H),2.22(d,J＝7.2Hz,2H),1.91-1.59(m,8H),1.20(t,J＝7.2Hz,3H),1.12-1.08(m,1H)。
游离胺：
化合物58：甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
在室温向甲基6-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯化合物57(280mg，0.507mmol)在二氯甲烷(3mL)中的溶液中添加三氟乙酸(3mL)。搅拌1小时后，将混合物浓缩至干，然后将其吸收至5M氨的甲醇溶液(3mL)中。继续搅拌0.5小时。将反应混合物浓缩，剩下残余物，将其通过硅胶柱色谱法(二氯甲烷:甲醇＝20:1)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物(160mg，70％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝1.48min，C20H19ClF2N4O2S的计算质量452.1m/z发现值453.3[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.00(s,2H),7.49-7.42(m,1H),7.20-7.17(m,1H),6.02-5.92(m,1H),4.01-3.91(m,0.5H),3.73-3.70(m,0.5H),3.52(s,3H),3.07-3.00(m,2H),2.59-2.54(m,2H),1.90-1.57(m,4H)。
化合物88(trans)：trans-甲基6-(3-氨基环丁基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
将trans-甲基6-(3-((叔丁氧基羰基)氨基)环丁基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯化合物87(400mg，0.769mmol)在5M盐酸(在甲醇中)中的溶液(10mL，50mmol)在室温下搅拌1小时。然后将混合物在室温下减压浓缩，得到残余物，将其溶于4M氨的甲醇溶液(20mL，80mmol)中，并在室温下搅拌30分钟。将所得混合物浓缩，得到呈黄色固体的粗标题化合物(283mg，88％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝2.178min，C19H18ClFN4O2S的计算质量420.1，m/z发现值420.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.38(brs,0.3H),7.84(d,J＝3.2Hz,0.7H),7.82(d,J＝3.2Hz,0.3H),7.50(d,J＝3.2Hz,0.7H),7.45(d,J＝3.2Hz,1H),7.30-7.25(m,1H),7.13(dt,J＝8.4,2.8Hz,1H),6.96-6.88(m,1H),6.18(s,0.3H),6.05(d,J＝2.8Hz,0.7H),4.59-4.52(m,0.4H),4.48-4.40(m,0.6H),3.93-3.86(m,0.6H),3.80-3.72(m,0.4H),3.60(s,2H),3.58(s,1H),2.82-2.75(m,0.6H),2.63-2.46(m,1.4H),2.37-2.23(m,0.6H),2.21-2.03(m,1.4H)。
类似地使用类似程序，制备了以下游离胺：
化合物88(cis)：(cis)-甲基6-(3-氨基环丁基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝3.168min，C19H18ClFN4O2S的计算质量420.1，m/z发现值420.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.82(br s,0.4H),7.83(d,J＝3.2Hz,1H),7.51-7.45(m,1H),7.29-7.26(m,1H),7.12(dd,J＝4.8,2.8Hz,1H),6.95-6.87(m,1H),6.18-6.05(m,1H),4.51-4.16(m,1H),3.69-3.47(m,4H),2.84-2.49(m,2H),2.23-1.82(m,2H)。
化合物83：甲基6-(氮杂环丁烷-3-基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物78被de-Boc，得到化合物83。LC-MS(ESI)：RT＝1.32min，C18H16ClFN4O2S的计算质量406.1，m/z发现值407.4[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6+D2O)δ8.01(d,J＝3.2Hz,1H),7.95(s,1H),7.44-7.40(m,2H),7.20(td,J＝8.0,2.0Hz,1H),5.98(s,1H),4.58(s,1H),3.96-3.88(m,4H),3.51(s,3H)。
化合物144：乙基4-(2-氯苯基)-6-(哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物143B被de-Boc，得到化合物144。LC-MS(ESI)：RT＝1.47min，C21H23ClN4O2S的计算质量430.10，m/z发现值431.4[M+H]+。
化合物160：甲基4-(2-溴-3,4-二氟苯基)-6-(哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物159A被de-Boc，得到化合物160。LC-MS(ESI)：RT＝1.64min，C20H19BrF2N4O2S的计算质量496.0，m/z发现值499.4[M+3]+。
化合物189：甲基6-(4-氨基环庚基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物188被de-Boc以得到化合物189，LC-MS(ESI)：RT＝2.154min和2.282min，C22H24ClFN4O2S的计算质量462.1，m/z发现值463.1[M+H]+。
化合物192：乙基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(哌啶-4-基)-2-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物191被de-Boc，得到化合物192。LC-MS(ESI)：RT＝1.986min，C24H21ClF5N3O2的计算质量513.1，m/z发现值514.0[M+H]+。
化合物197A：乙基4-(2-溴-3,4-二氟苯基)-6-(哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯盐酸盐
化合物196A被de-Boc以得到化合物197A，LC-MS：RT＝1.52min，C21H21BrF2N4O2S的计算质量510.05，m/z发现值：513.4[M-HCl+H]+。
化合物203：甲基6-(3-氨基双环[1.1.1]戊-1-基)-4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物202被de-Boc以得到化合物203，LC-MS(ESI)：RT＝1.844min，C12H19NO4的计算质量241.1，m/z发现值242.2[M+H]+。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ4.96(br s,1H),3.70(s,3H),2.30(s,6H),1.46(s,9H)。
化合物202A被de-Boc，得到化合物203A。LC-MS(ESI)：RT＝1.489min，C20H17ClF2N4O2S的计算质量450.1，m/z发现值450.9[M+H]+。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.90(brs,1H),7.82(d,J＝2.4Hz,1H),7.46(d,J＝2.4Hz,1H),7.06-7.03(m,2H),6.14(br s,1H),3.61(s,3H),2.43(s,6H)。
化合物202B被de-Boc，得到化合物203B。LC-MS(ESI)：RT＝2.249min，C25H25ClF2N4O4S的计算质量550.1，m/z发现值551.0[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IG 5μm4.6*250mm；流动相：CO2:MeOH＝70:30，以2.999g/min；柱温：40.1℃；波长：230nm，背压：100巴，RT＝3.95min)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.91-7.89(m,0.8H),7.81-7.78(m,1H),7.49-7.48(m,0.2H),7.44-7.42(m,0.8H),7.40-7.38(m,0.2H),7.08-7.01(m,2H),6.14(br s,0.8H),6.01(br s,0.2H),5.03(br s,1H),3.64(s,0.5H),3.60(s,2.5H),2.53(s,5H),2.45(s,1H),1.47(s,9H)。
化合物236：(trans)-甲基6-(4-氨基环己基)-4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物235被de-Boc，得到化合物236,1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.14(br s,0.7H),7.83-7.80(m,1H),7.48(d,J＝3.2Hz,0.3H),7.44(d,J＝3.2Hz,0.7H),7.41-7.38(m,0.3H),7.08-7.05(m,1H),7.04-6.97(m,1H),6.17(s,0.7H),6.03(s,0.3H),3.97-3.89(m,0.7H),3.72-3.68(m,0.3H),3.61(s,1H),3.59(s,2H),2.79-2.72(m,1H),2.05-2.02(m,2.5H),1.96-1.92(m,1.5H),1.65-1.50(m,2H),1.36-1.26(m,2H)。
化合物238：(trans)-甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(4-(氨磺酰基氨基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物237被de-Boc以得到化合物238，LC-MS(ESI)：RT＝3.924min，C21H22ClF2N5O4S2的计算质量545.1，m/z发现值546.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.54(br s,0.6H),9.05(br s,0.4H),7.99-7.94(m,2H),7.49-7.40(m,1H),7.22-7.11(m,1H),6.56-6.43(m,3H),6.00(s,0.4H),5.91(s,0.6H),3.84-3.75(m,0.4H),3.61-3.56(m,0.6H),3.51(s,3H),3.25-3.20(m,0.4H),3.12-3.07(m,0.6H),2.12-2.02(m,2H),1.90-1.69(m,3H),1.65-1.53(m,1H),1.30-1.23(m,2H)。
化合物247：甲基6-(1-(氮杂环丁烷-3-基磺酰基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物246被de-Boc以得到化合物247，LC-MS(ESI)：RT＝1.598min，C23H24ClF2N5O4S2的计算质量571.1，m/z发现值571.9[M+H]+。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.28(s,0.3H),7.85(s,1H),7.56(s,0.7H),7.48-7.45(m,1H),7.14-7.05(m,2H),6.19(s,0.3H),6.08(s,0.7H),4.21-4.08(m,4H),4.03-3.90(m,4H),3.61(s,3H),3.01-2.88(m,2H),2.26-2.16(m,1H),2.06-1.87(m,2H),1.74-1.67(m,1H)。
化合物250：(trans)-甲基6-(4-(氮杂环丁烷-3-磺酰胺基)环己基)-4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物249被de-Boc以得到化合物250，LC-MS(ESI)：RT＝1.589min，C24H26ClF2N5O4S2的计算质量585.1，m/z发现值585.9[M+H]+。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.16(s,0.5H),7.84(s,1H),7.57-7.53(m,0.5H),7.48-7.47(m,0.5H),7.42(s,0.5H),7.10-7.00(m,2H),6.18(s,0.5H),6.05(s,0.5H),4.25-4.04(m,4H),3.99-3.87(m,2H),3.82-3.67(m,1H),3.61(s,1.5H),3.60(s,1.5H),3.50-3.32(m,1H),2.21-1.99(m,4H),1.75-1.36(m,4H)。
化合物276A：甲基4-(2-溴-3-氟苯基)-6-(哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物275A被de-Boc，得到化合物276A,1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.82(d,J＝6.4Hz,1H),7.56-7.52(m,0.9H),7.50(d,J＝2.8Hz,1H),7.42-7.42(m,0.1H),7.25-7.18(m,1H),7.11-7.04(m,2H),7.01-6.98(m,0.2H),6.25(s,0.1H),6.12(d,J＝2.8Hz,0.9H),4.37-4.27(m,0.3H),4.08-4.00(m,0.7H),3.75-3.62(m,2H),3.61-3.56(m,3H),3.13-3.00(m,2H),2.64-2.53(m,1H),2.47-2.36(m,1H),2.34-2.12(m,1H),1.95-1.84(m,1H)。
化合物276B：甲基4-(2-溴-3-氟苯基)-6-(哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物275B被de-Boc，得到化合物276B,1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.59-9.01(m,1H),7.82(s,1H),7.58-7.37(m,2H),7.30-7.27(m,0.5H),7.25-7.23(m,0.5H),6.24(s,0.2H),6.14-6.09(m,0.5H),4.09-4.01(m,0.8H),3.74(s,0.2H),3.67-3.51(m,5H),3.17-3.02(m,2H),2.53-2.38(m,1H),2.34-2.23(m,1H),2.13-2.07(m,1H),1.93-1.83(m,1H)。
化合物280：乙基4-(2-溴-4-氟苯基)-6-(哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物279被de-Boc以得到化合物280，LC-MS(ESI)：RT＝1.01min，C21H22BrFN4O2S的计算质量492.1，m/z发现值495.4[M+H]+。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.27-8.20(m,0.6H),7.85-7.78(m,1H),7.50(d,J＝3.0Hz,0.4H),7.46-7.43(m,0.6H),7.34-7.31(m,2.4H),7.04-6.91(m,1H),6.19(s,0.6H),6.06(s,0.4H),4.25-3.88(m,3H),3.35-3.15(m,2H),2.93-2.74(m,2H),2.24-2.06(m,1H),1.90-1.60(m,3H),1.19-1.07(m,3H)。
化合物280A：乙基4-(2-溴-4-氟苯基)-6-(哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物279A被de-Boc以得到化合物280A，LC-MS(ESI)：RT＝1.57min，C21H22BrFN4O2S的计算质量492.1，m/z发现值494.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.26(brs,1H),7.83(d,J＝2.8Hz,0.6H),7.80(d,J＝3.2Hz,0.4H),7.52(d,J＝3.2Hz,0.6H),7.43(d,J＝2.8Hz,0.4H),7.33-7.28(m,2H),7.03-6.94(m,1H),6.18(s,0.4H),6.06(s,0.6H),4.22-4.17(m,0.4H),4.08-3.97(m,2.6H),3.47-3.38(m,1.2H),3.30-3.23(m,1H),3.02-2.84(m,2.8H),2.34-2.10(m,1.3H),2.00-1.97(m,1H),1.88-1.73(m,1.7H),1.13(q,J＝7.2Hz,3H)。
化合物280B：乙基4-(2-溴-4-氟苯基)-6-(哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物279B被de-Boc以得到化合物280B，LC-MS(ESI)：RT＝1.55min，C21H22BrFN4O2S的计算质量492.1，m/z发现值494.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.28(brs,1H),7.83(d,J＝3.2Hz,0.6H),7.80(d,J＝3.2Hz,0.4H),7.52(d,J＝3.2Hz,0.6H),7.43(d,J＝2.8Hz,0.4H),7.33-7.28(m,2H),7.03-6.93(m,1H),6.18(s,0.4H),6.07(s,0.6H),4.23-4.17(m,0.4H),4.07-3.99(m,2.6H),3.51-3.41(m,1.8H),3.32-3.25(m,1H),3.05-2.83(m,2.2H),2.38-2.13(m,1.3H),2.02-1.98(m,1H),1.89-1.76(m,1.7H),1.12(q,J＝7.2Hz,3H)。
化合物307A：甲基4-(3,4-二氟-2-甲基苯基)-6-(哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物306A被de-Boc以得到化合物307A，LC-MS(ESI)：RT＝1.908min，C21H22F2N4O2S的计算质量432.1，m/z发现值432.9[M+H]+。
化合物307B：甲基4-(3,4-二氟-2-甲基苯基)-6-(哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物306B被de-Boc以得到化合物307B，LC-MS(ESI)：RT＝1.896min，C21H22F2N4O2S的计算质量432.1，m/z发现值432.9[M+H]+。
化合物317：乙基4-(2-氯-3-氟苯基)-6-(哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物316被de-Boc以得到化合物317：LC-MS(ESI)：RT＝0.85min，C21H22ClFN4O2S的计算质量448.1，m/z发现值449.5[M+H]+。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.82(d,J＝3.6Hz,1H),7.52(d,J＝3.6Hz,0.6H),7.46-7.43(m,0.4H),7.24-7.00(m,3H),6.28(s,0.4H),6.17(s,0.6H),4.78-4.29(m,2.4H),4.09-4.01(m,2.6H),3.66-3.51(m,1.4H),3.44-3.33(m,0.6H),3.12-2.84(m,2H),2.55-2.22(m,1.4H),2.05-1.78(m,2.6H),1.14-1.09(m,3H)。
化合物327A：乙基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物326A被de-Boc以得到化合物327A，LC-MS(ESI)：RT＝1.899min，C21H22ClFN4O2S的计算质量448.1，m/z发现值449.1[M+H]+。
化合物327B：乙基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物326B被de-Boc以得到化合物327B，LC-MS(ESI)：RT＝1.897min，C21H22ClFN4O2S的计算质量448.1，m/z发现值449.1[M+H]+。
化合物337：乙基4-(2-溴-3-氟苯基)-6-(哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯,
化合物336被de-Boc以得到化合物337，LC-MS(ESI)：RT＝1.42min，C21H22BrFN4O4S的计算质量492.1，m/z发现值495.4[M+H]+。
化合物341A：乙基4-(3,4-二氟-2-甲基苯基)-6-(哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物340A被de-Boc，得到341A,1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.63(s,0.2H),7.98-7.94(m,1.8H),7.25-7.19(m,1H),7.10-7.00(m,1H),5.82(s,0.3H),5.68(s,0.7H),4.02-3.94(m,2.3H),3.72-3.65(m,0.7H),3.08-3.00(m,2H),2.62-2.55(m,2H),2.44(s,3H),1.92-1.78(m,2H),1.63-1.59(m,1.3H),1.45-1.42(m,0.7H),1.07(t,J＝5.4Hz,3H)。
化合物341B：乙基4-(3,4-二氟-2-甲基苯基)-6-(哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物340B被de-Boc，得到341B,1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.63(s,0.2H),7.98(s,1.8H),7.25-7.18(m,1H),7.09-6.99(m,1H),5.82(s,0.3H),5.68(s,0.7H),4.00-3.94(m,2.2H),3.73-3.65(m,0.8H),3.08-3.01(m,2H),2.61-2.55(m,2H),2.45(s,3H),1.89-1.75(m,2H),1.66-1.58(m,1.2H),1.45-1.42(m,0.8H),1.06(t,J＝5.4Hz,3H)。
化合物395：(trans)-甲基6-(4-氨基环己基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(3,5-二氟吡啶-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物394被de-Boc，得到化合物395,1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.66-8.57(m,0.6H),8.34-8.29(m,0.6H),8.26-8.21(m,0.4H),7.86-7.80(m,0.2H),7.62-7.55(m,0.2H),7.34-7.28(m,1H),7.16-7.10(m,1H),6.93-6.84(m,1H),6.32-6.27(m,0.6H),6.06-5.97(m,0.4H),4.13-3.94(m,1H),3.77-3.64(m,1H),3.56(s,3H),2.14-2.05(m,3H),2.00-1.93(m,1H),1.62-1.37(m,4H)。
化合物408A：甲基4-(2-溴-4-氟苯基)-6-(哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物407A被de-Boc以得到化合物408A，LC-MS(ESI)：RT＝1.799min，C20H20BrFN4O2S的计算质量478.1，m/z发现值479.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.28(s,0.4H),7.84-7.79(m,1H),7.52-7.51(m,0.6H),7.44-7.43(m,0.5H),7.33-7.29(m,1.5H),7.02-6.93(m,1H),6.16(s,0.4H),6.03(s,0.6H),4.20-4.11(m,0.5H),4.02-3.96(m,0.5H),3.61-3.60(m,3H),3.44-3.35(m,1H),3.28-3.23(m,1H),3.01-2.81(m,3H),2.32-2.23(m,0.6H),2.12-2.08(m,0.4H),1.98-1.94(m,1H),1.88-1.72(m,2H)。
化合物408B：甲基4-(2-溴-4-氟苯基)-6-(哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物407B被de-Boc以得到化合物408B，LC-MS(ESI)：RT＝1.903min，C20H20BrFN4O2S的计算质量478.1，m/z发现值479.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.34(s,0.3H),7.84-7.80(m,1H),7.53-7.52(m,1H),7.43-7.42(m,0.3H),7.34-7.31(m,1.2H),7.26-7.25(m,0.5H),7.03-6.93(m,1H),6.16(s,0.3H),6.04(s,0.7H),4.25-4.21(m,0.3H),4.06-4.00(m,0.7H),3.61-3.60(m,3H),3.56-3.49(m,1H),3.37-3.30(m,0.7H),3.09-2.85(m,3H),2.48-2.39(m,1.2H),2.35-2.21(m,0.8H),2.02-1.99(m,0.6H),1.92-1.81(m,1.4H)。
化合物398：(cis)-甲基6-(4-氨基环己基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(3,5-二氟吡啶-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物397被de-Boc，得到化合物398，1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.93-8.89(m,0.3H),8.76-8.73(m,0.1H),8.62-8.60(m,0.2H),8.33-8.28(m,0.7H),8.27-8.24(m,0.5H),7.84-7.79(m,0.2H),7.32-7.27(m,2H),7.14-7.11(m,1H),6.91-6.86(m,1H),6.28(s,0.7H),6.04-6.00(m,0.3H),4.10-3.92(m,1H),3.61(s,1H),3.58(s,2H),3.39-3.33(m,1H),2.04-1.93(m,5H),1.60-1.38(m,3H)。
化合物412A：乙基4-(2-溴-3-氟苯基)-6-(哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物411A被de-Boc以得到化合物412A，LC-MS(ESI)：RT＝1.57min，C21H22BrFN4O2S的计算质量492.1，m/z发现值494.8[M+H]+。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.23(s,0.5H),7.81(d,J＝3.0Hz,0.4H),7.78(d,J＝3.3Hz,0.6H),7.49(d,J＝3.0Hz,0.4H),7.42(d,J＝3.0Hz,0.6H),7.21-7.12(m,1.5H),7.07-6.98(m,1H),6.25(s,0.6H),6.11(s,0.4H),4.22-3.92(m,3H),3.33-3.18(m,2H),2.88-2.77(m,2H),2.10-2.04(m,0.3H),1.83-1.62(m,3.7H),1.11(t,J＝7.2Hz,3H)。
化合物412B：乙基4-(2-溴-3-氟苯基)-6-(哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物411B被de-Boc以得到化合物412B，LC-MS(ESI)：RT＝1.58min，C21H22BrFN4O2S的计算质量492.1，m/z发现值494.8[M+H]+。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.25(s,0.5H),7.83(d,J＝3.0Hz,0.4H),7.80(d,J＝2.7Hz,0.6H),7.51(d,J＝3.0Hz,0.4H),7.44(d,J＝3.0Hz,0.6H),7.23-7.14(m,1.5H),7.09-6.98(m,1H),6.27(s,0.6H),6.13(s,0.4H),4.24-3.97(m,3H),3.34-3.20(m,2H),2.94-2.80(m,2H),2.20-2.09(m,0.8H),1.93-1.63(m,3.2H),1.13(t,J＝7.2Hz,3H)。
化合物418B：乙基4-(4-氟-2-甲基苯基)-6-(哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物417B被de-Boc以得到化合物418B，LC-MS(ESI)：RT＝1.536min，C22H25FN4O2S的计算质量428.2，m/z发现值429.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.49(s,0.3H),7.81-7.79(m,1H),7.53(d,J＝3.2Hz,0.7H),7.39(d,J＝2.8Hz,0.3H),7.30-7.28(m,0.7H),7.17-7.13(m,0.3H),7.09(s,0.7H),6.90-6.84(m,1.7H),6.81-6.76(m,0.3H),5.95(s,0.3H),5.88(d,J＝1.6Hz,0.7H),4.41-4.35(m,0.3H),4.06-3.92(m,2.7H),3.60-3.53(m,2H),3.11-3.00(m,2H),2.62(s,1H),2.48(s,2H),2.45-2.08(m,3H),2.01-1.97(m,0.3H),1.86-1.83(m,0.7H),1.13-1.08(m,3H)。
化合物427A：乙基4-(3-氟-2-甲基苯基)-6-(哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物426A被de-Boc以得到化合物427A，LC-MS(ESI)：RT＝1.52min，C22H25FN4O2S的计算质量428.2，m/z发现值429.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.48(s,0.3H),7.81-7.79(m,1H),7.52(d,J＝3.2Hz,0.7H),7.38(d,J＝3.2Hz,0.3H),7.14-7.01(m,2.7H),6.97-6.88(m,1H),6.01(s,0.3H),5.93(d,J＝1.6Hz,0.7H),4.43-4.37(m,0.3H),4.06-3.94(m,2.7H),3.61-3.54(m,2H),3.12-3.01(m,2H),2.52(s,1H),2.45-2.29(m,4H),2.25-2.09(m,1H),2.05-2.01(m,0.3H),1.87-1.83(m,0.7H),1.13-1.08(m,3H)。
化合物427B：乙基4-(3-氟-2-甲基苯基)-6-(哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物426B被de-Boc以得到化合物427B，LC-MS(ESI)：RT＝1.53min，C22H25FN4O2S的计算质量428.2，m/z发现值429.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.37(s,0.4H),7.79(d,J＝3.2Hz,1H),7.52(d,J＝3.2Hz,0.6H),7.40(d,J＝3.2Hz,0.4H),7.14-7.01(m,2.6H)，6.97-6.88(m,1H),6.01(s,0.3H),5.93(s,0.7H),4.35-4.29(m,0.4H),4.06-3.93(m,2.6H),3.59-3.42(m,2H),3.10-2.93(m,2H),2.53(s,1H),2.39(s,2H),2.37-2.26(m,1H),2.15-2.08(m,1.3H),2.01-1.82(m,1.7H),1.13-1.08(m,3H)。
化合物436a：(cis)-乙基6-(3-氨基-2,2-二甲基环丁基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物435a被de-Boc以得到化合物436a，LC-MS(ESI)：RT＝1.83min，C22H24ClFN4O2S的计算质量462.1，m/z发现值463.5[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.8(s,0.7H),7.81(d,J＝2.0Hz,1H),7.63-7.37(m,2.3H),7.19-7.11(m,1H),6.92(br s,1H),6.25(s,0.7H),6.16(s,0.3H),4.50-4.37(m,0.7H),4.29-4.24(m,0.3H),4.23-4.19(m,0.3H),4.11-3.91(m,2.7H),3.34-3.22(m,0.7H),3.19-3.08(m,0.3H),2.67-2.47(m,0.6H),2.46-2.21(m,0.4H),1.36(s,3H),1.14-1.10(m,6H)。
化合物442a：甲基-4-(3-氟-2-甲基苯基)-6-(哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物441a被de-Boc以得到化合物442a，LC-MS(ESI)：RT＝1.481min，C21H23FN4O2S的计算质量414.5，m/z发现值415.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.26(s,1H),7.76(d,J＝2.8Hz,1H),7.50(d,J＝2.8Hz,0.4H),7.39(d,J＝3.2Hz,0.6H),7.26-7.06(m,2H),7.00-6.87(m,1H),5.99(s,0.6H),5.90(s,0.4H),4.25-4.17(m,0.6H),3.97-3.88(m,0.4H),3.58(s,3H),3.52-3.44(m,0.7H),3.32-3.25(m,1.3H),3.04-2.82(m,2H),2.53(s,2H),2.38(s,1H),2.35-2.19(m,1H),2.00-1.73(m,3H)。
化合物442b：甲基-4-(3-氟-2-甲基苯基)-6-(哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物441b被de-Boc以得到化合物442b，LC-MS(ESI)：RT＝1.47min，C21H23FN4O2S的计算质量414.5，m/z发现值414.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.27(s,1H),7.77(d,J＝2.8Hz,1H),7.51(d,J＝2.8Hz,0.4H),7.40(d,J＝3.2Hz,0.6H),7.15-7.01(m,2H),6.97-6.88(m,1H),6.00(s,0.6H),5.91(s,0.4H),4.27-4.18(m,0.6H),3.98-3.89(m,0.4H),3.59(s,3H),3.53-3.45(m,0.7H),3.33-3.26(m,1.3H),3.05-2.83(m,2H),2.54(s,2H),2.39(s,1H),2.36-2.21(m,1H),1.87-1.73(m,3H)。
化合物446A：甲基4-(4-氟-2-甲基苯基)-6-(哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物445A被de-Boc以得到化合物446A，LC-MS(ESI)：RT＝1.40min，C21H23FN4O2S的计算质量414.2，m/z发现值415.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.79(d,J＝3.2Hz,1H),7.64(d,J＝3.2Hz,1H),7.22-7.19(m,1H),6.83-6.73(m,2H),5.78(s,1H),4.03-3.79(m,1H),3.50(s,3H),3.19-3.13(m,2H),2.78-2.69(m,2H),2.46(s,3H),2.14-1.81(m,3H),1.65-1.62(m,1H)。
化合物446B：甲基4-(4-氟-2-甲基苯基)-6-(哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物445B被de-Boc以得到化合物446B，LC-MS(ESI)：RT＝1.38min，C21H23FN4O2S的计算质量414.2，m/z发现值415.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.80(d,J＝3.2Hz,1H),7.64(d,J＝3.2Hz,1H),7.22-7.19(m,1H),6.83-6.73(m,2H),5.78(m,1H),4.00-3.80(m,1H),3.50(s,3H),3.19-3.13(m,2H),2.78-2.69(m,2H),2.46(s,3H),2.12-1.81(m,3H),1.65-1.62(m,1H)。
节III：与具有通式I的主要二氢嘧啶的所得胺(节II)的偶联反应
化合物100：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(1-(环丙基磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
方法M：在20℃向甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯盐酸盐化合物99(80.0mg，0.170mmol)和三乙胺(51.5mg，0.510mmol)在二氯甲烷(3mL)中的溶液中添加环丙烷磺酰氯(31.1mg，0.221mmol)。在室温下搅拌过夜后，将混合物用水(10mL)淬灭，随后用二氯甲烷(50mL)萃取三次。将合并的有机层用水(20mL)洗涤两次，用盐水(20mL)洗涤两次，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到残余物，将其通过制备型HPLC分离(柱：X-bridge C18(5μm 19*150mm)，流动相A：水(0.1％碳酸氢铵)，流动相B：乙腈，UV：214nm，流速：20mL/min，梯度：25％-75％(％B))，得到呈黄色固体的标题化合物(34.0mg，37％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝4.061min，C22H24ClFN4O4S2的计算质量538.1，m/z发现值538.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝60:40，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝7.052min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.51(d,J＝3.2Hz,0.8H),9.11(s,0.2H),8.00-7.98(m,1.6H),7.92(d,J＝3.2Hz,0.4H),7.42(dd,J＝8.8,2.8Hz,1H),7.39-7.32(m,1H),7.24-7.19(dd,J＝8.8,2.8Hz,1H),6.02(s,0.2H),5.93(d,J＝3.6Hz,0.8H),4.01-3.96(m,0.1H),3.81-3.69(m,2.9H),3.53(s,2.4H),3.52(s,0.6H),2.90(q,J＝12.0Hz,2H),2.68-2.59(m,1H),2.12-1.98(m,1H),1.93-1.76(m,2H),1.63(d,J＝11.6Hz,1H),1.06-1.00(m,2H),0.99-0.92(m,2H)。
化合物108：甲基-4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(1-(1-(甲氧基羰基)环丙烷-1-羰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
方法N：向1-(甲氧基羰基)环丙烷甲酸(55mg，0.38mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(6mL)中的溶液中添加N,N-二异丙基乙胺(123mg，0.957mmol)和2-(3H-[1,2,3]三唑并[4,5-b]吡啶-3-基)-1,1,3,3-四甲基脲鎓六氟磷酸盐(V)(145mg，0.383mmol)。在室温下搅拌30分钟后，向混合物添加甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯盐酸盐化合物99(150mg，0.319mmol)并且在室温下继续搅拌2小时。然后将其倒入水(40mL)中，并用乙酸乙酯(40mL)萃取两次。将合并的有机层用水(40mL)洗涤两次，用盐水(40mL)洗涤两次，浓缩并通过制备型HPLC纯化(柱：Gilson X-bridge C18(5μm19*150mm)，流动相A：水(0.1％碳酸氢铵)，流动相B：乙腈，UV：214nm，流速：20mL/min，梯度：25％-80％(％B))，得到呈黄色固体的标题化合物(105mg，59％产率，100％ee)。LC-MS(ESI)：RT＝3.831min，C26H26ClFN4O5S的计算质量560.1，m/z发现值560.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝70:30，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝23.052min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.48(d,J＝3.2Hz,0.7H),9.03(s,0.2H),8.94(s,0.1H),8.00-7.98(m,1.8H),7.92(d,J＝2.8Hz,0.2H),7.43-7.31(m,2H),7.23-7.17(m,1H),6.02(s,0.3H),5.92(d,J＝3.6Hz,0.7H),4.58-4.46(m,1H),4.10-3.82(m,2H),3.72-3.70(m,3H),3.54(s,3H),3.14-3.05(m,1H),2.70-2.61(m,1H),2.01-1.56(m,4H),1.43-1.27(m,4H)。
类似地使用类似程序(方法M或方法N)，可以如下所示制备产物：
Figure BDA0002341655160002991
Figure BDA0002341655160003011
Figure BDA0002341655160003021
Figure BDA0002341655160003031
Figure BDA0002341655160003041
Figure BDA0002341655160003051
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Figure BDA0002341655160003071
Figure BDA0002341655160003081
Figure BDA0002341655160003091
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Figure BDA0002341655160003121
Figure BDA0002341655160003131
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Figure BDA0002341655160003171
Figure BDA0002341655160003181
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Figure BDA0002341655160003221
Figure BDA0002341655160003231
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Figure BDA0002341655160003261
Figure BDA0002341655160003271
化合物101：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(1-(乙基磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
LC-MS(ESI)：RT＝3.991min，C22H24ClFN4O4S2的计算质量526.1，m/z发现值526.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝60:40，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝7.516min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.51(d,J＝3.6Hz,0.8H),9.14(s,0.2H),8.00(s,1.8H),7.93(d,J＝2.8Hz,0.2H),7.42(dd,J＝9.2,2.8Hz,1H),7.38-7.34(m,1H),7.23-7.18(m,1H),6.02(s,0.2H),5.92(d,J＝3.6Hz,0.8H),4.01-3.90(m,0.2H),3.79-3.69(m,2.8H),3.53(s,3H),3.08(q,J＝7.2Hz,2H),2.94-2.80(m,2H),2.10-1.95(m,1H),1.91-1.75(m,2H),1.65-1.60(m,1H),1.25(t,J＝7.2Hz,3H)。
化合物102：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(1-(环丙烷羰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
LC-MS(ESI)：RT＝3.851min，C24H24ClFN4O3S的计算质量502.1，m/z发现值502.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝80:20，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝15.920min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.48(d,J＝3.6Hz,0.7H),9.23-9.16(m,0.3H),7.98(dd,J＝6.4,3.2Hz,1.7H),7.91(d,J＝3.2Hz,0.3H),7.43-7.40(m,1H),7.38-7.31(m,1H),7.20(dd,J＝8.8,2.8Hz,1H),6.02(s,0.3H),5.92(d,J＝3.6Hz,0.7H),4.61-4.33(m,2H),4.18-4.07(m,0.3H),3.92-3.84(m,0.7H),3.54(s,2.1H),3.53(s,0.9H),3.20-3.08(m,1H),2.59-2.54(m,1H),2.06-1.93(m,1.2H),1.49-1.23(m,3.8H),0.81-0.69(m,4H)。
化合物103：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
LC-MS(ESI)：RT＝4.495min，C21H22ClFN4O4S2的计算质量512.1，m/z发现值512.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IE 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝50:50:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝10.842min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.51(d,J＝4.0Hz,0.8H),9.14(s,0.2H),8.00-7.98(m,1.5H),7.93-7.92(m,0.5H),7.43-7.40(m,1H),7.39-7.32(m,1H),7.23-7.19(m,1H),6.02(s,0.2H),5.93(d,J＝4.0Hz,0.8H),4.00-3.91(m,0.2H),3.74-3.64(m,2.8H),3.53-3.52(m,3H),2.91-2.90(m,3H),2.82-2.73(m,2H),2.15-1.80(m,3.2H),1.67-1.64(m,0.8H)。
化合物104：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(1-((3-甲氧基-3-氧代丙基)-磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
LC-MS(ESI)：RT＝4.371min，C24H26ClFN4O6S2的计算质量584.1，m/z发现值585.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.52(d,J＝4.0Hz,0.8H),9.14(s,0.2H),8.00-7.89(m,2H),7.42(dd,J＝8.8,2.8Hz,1H),7.38-7.32(m,1H),7.24-7.19(m,1H),6.02(s,0.2H),5.92(d,J＝3.6Hz,0.8H),3.83-3.70(m,2.4H),3.66(s,3H),3.63-3.61(m,0.6H),3.54(s,2.4H),3.53(s,0.6H),3.34(t,J＝3.2Hz,2H),2.94-2.85(m,2H),2.76(t,J＝3.2Hz,2H),2.02-1.93(m,1H),1.89-1.75(m,2H),1.64-1.61(m,1H)。
化合物106：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(1-((2-甲氧基-2-氧代乙基)磺酰基)-哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
LC-MS(ESI)：RT＝3.985min，C23H24ClFN4O6S2的计算质量570.1，m/z发现值570.9[M+H]+。手性HPLC(Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm，流动相：Hex:EtOH＝70:30，以1.0mL/min，温度：30℃，波长：230nm，RT＝12.627min)；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.52(d,J＝2.4Hz,0.8H),9.17(s,0.2H),8.05-7.96(m,1.8H),7.92(d,J＝2.8Hz,0.2H),7.46-7.41(m,1H),7.38-7.31(m,1H),7.26-7.16(m,1H),6.02(s,0.2H),5.92(d,J＝2.8Hz,0.8H),4.30(s,2H),4.00-3.91(m,0.2H),3.83-3.68(m,5.8H),3.53(s,3H),2.99-2.83(m,2H),2.06-1.93(m,1H),1.91-1.75(m,2H),1.65(d,J＝11.2Hz,1H)。
化合物110：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(1-(氧杂环丁烷-3-基磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯(2种立体异构体的混合物)
化合物110(330mg，0.595mmol)进一步通过手性制备型HPLC分离(柱：ChiralpakIA 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝50:50:0.3，以8.0mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到立体异构体化合物110A(110mg，33％产率)和化合物110B(105mg，32％产率)。
化合物110B：LC-MS(ESI)：RT＝2.890min，C23H24ClFN4O5S2的计算质量554.1，m/z发现值554.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝50:50:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝9.357min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.56(s,0.8H),9.18(s,0.2H),8.03-7.99(m,1.8H),7.93(d,J＝2.8Hz,0.2H),7.43(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),7.38-7.34(m,1H),7.23-7.18(m,1H),6.01(s,0.2H),5.92(s,0.8H),4.89-4.86(m,2H),4.83-4.79(m,1H),4.76(t,J＝5.2Hz,2H),3.72(t,J＝11.6Hz,3H),3.52-3.51(m,3H),2.88-2.79(m,2H),1.95-1.89(m,1H),1.80-1.75(m,2H),1.62-1.59(m,1H)。
化合物122：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(1-(2-羟基乙酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯(2种立体异构体的混合物)
化合物122(340mg，0.690mmol)进一步通过手性制备型HPLC分离(柱：ChiralpakIA 5μm 20*250mm；流动相：Hex:IPA:DEA＝50:50:0.3，以8mL/min；温度：30℃；波长：230nm)，得到立体异构体化合物122A(93.9mg，28％产率)和化合物122B(88.4mg，26％产率)。
化合物122B：LC-MS(ESI)：RT＝3.385min，C22H22ClFN4O4S的计算质量492.1，m/z发现值492.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝50:50:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝9.523min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.52(d,J＝3.6Hz,0.7H),9.30(s,0.2H),9.19(s,0.1H),8.00-7.97(m,1.7H),7.92(d,J＝3.2Hz,0.3H),7.42(dd,J＝8.4,2.4Hz,1H),7.37-7.33(m,1H),7.23-7.19(m,1H),6.01(s,0.3H),5.92(d,J＝3.6Hz,0.7H),4.53-4.50(m,2H),4.19-4.06(m,2.3H),3.87-3.75(m,1.7H),3.53(s,2.1H),3.52(s,0.9H),3.03-2.97(m,1H),2.71-2.61(m,1H),1.87-1.59(m,4H)。
化合物129：6-[1-(2-叔丁氧基羰基氨基-乙酰基)-哌啶-4-基]-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氢-嘧啶-5-甲酸甲基酯
LC-MS(ESI)：RT＝4.362min，C27H31ClFN5O5S的计算质量591.2，m/z发现值592.0[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝70:30，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝9.371min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.47(d,J＝2.8Hz,0.7H),9.15-9.12(m,0.3H),7.98(d,J＝4.4Hz,1.7H),7.92(s,0.3H),7.41(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),7.37-7.31(m,1H),7.22-7.18(m,1H),6.76-6.64(m,1H),6.01(s,0.3H),5.93(d,J＝3.6Hz,0.7H),4.64-4.42(m,1H),4.14-4.05(m,0.2H),3.99-3.75(m,3.8H),3.53(s,3H),3.12-2.98(m,1H),2.67-2.56(m,1H),2.00-1.64(m,3.2H),1.61-1.50(m,0.8H),1.40(s,9H)。
化合物112：甲基4-(2-氯-3-氟苯基)-6-(1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯(2种立体异构体的混合物)
化合物112(90mg，0.18mmol)进一步通过手性制备型HPLC分离(柱：Chiralpak IF5μm 20*250mm；流动相：Hex:IPA＝60:40，以10mL/min；温度：30℃；波长：230nm)，得到呈黄色固体的立体异构体化合物112A(24.4mg，27％产率)和化合物112B(20.6mg，23％产率)。
化合物112B：LC-MS(ESI)：RT＝2.384min，C21H22ClFN4O4S2的计算质量512.1，m/z发现值512.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IF 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝60:40，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝10.487min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.60(d,J＝3.6Hz,0.8H),9.20(s,0.2H),8.02-7.99(m,1.8H),7.93(d,J＝2.8Hz,0.2H),7.41-7.31(m,2H),7.23-7.17(m,1H),6.08(s,0.2H),5.98(d,J＝3.6Hz,0.8H),4.01-3.92(m,0.2H),3.75-3.63(m,2.8H),3.53(s,3H),2.90(d,J＝6.0Hz,3H),2.82-2.73(m,2H),2.17-1.97(m,1H),1.94-1.86(m,1H),1.81(d,J＝12.8Hz,1H),1.66(d,J＝14.8Hz,1H)。
化合物113：4-(2-氯-3-氟-苯基)-6-[1-(2-甲氧基羰基-乙烷磺酰基)-哌啶-4-基]-2-噻唑-2-基-1,4-二氢-嘧啶-5-甲酸甲基酯(2种立体异构体的混合物)
化合物113(380mg，0.650mmol)进一步通过手性制备型HPLC分离(柱：ChiralpakIE 5μm 4.6*250mm；流动相：MeOH:EtOH:DEA＝50:50:0.2:，以10mL/min；温度：30℃；波长：254nm)，得到呈黄色固体的立体异构体化合物113P(170mg，44％产率)和化合物113Y(180mg，47％产率)。
化合物113Y：LC-MS(ESI)：RT＝4.081min，C24H26ClFN4O6S2的计算质量584.1，m/z发现值585.1[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IE 5μm 4.6*250mm；流动相：MeOH:EtOH:DEA＝50:50:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝8.353min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.18(br s,0.3H),7.83(t,J＝3.2Hz,1H),7.52(d,J＝3.2Hz,0.7H),7.45(d,J＝3.2Hz,1H),7.23-7.02(m,3H),6.25(s,0.3H),6.12(d,J＝2.8Hz,0.7H),4.22-3.90(m,3H),3.76(s,3H),3.60(s,2.1H),3.59(s,0.9H),3.29(t,J＝7.6Hz,2H),3.00-2.84(m,4H),2.27-1.71(m,4H)。
化合物118：3-((4-(6-(2-氯-3-氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)苯甲酸
LC-MS(ESI)：RT＝4.112min，C27H24ClFN4O6S2的计算质量618.1，m/z发现值618.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IE 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:IPA:TFA＝60:40:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝10.487min)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ8.41(s,1H),8.33(d,J＝7.6Hz,1H),8.05(d,J＝7.6Hz,1H),7.92(d,J＝2.8Hz,1H),7.79-7.75(m,2H),7.30-7.25(m,1H),7.19-7.13(m,2H),6.11(s,1H),4.00-3.92(m,2H),3.80-3.69(m,1H),3.52(s,3H),2.47(q,J＝12.0Hz,2H),2.17-1.95(m,2H),1.90(d,J＝12.8Hz,1H),1.74(d,J＝12.8Hz,1H)。
化合物115：4-(2-氯-3-氟-苯基)-6-(1-甲基氨磺酰基-哌啶-4-基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氢-嘧啶-5-甲酸甲基酯(2种立体异构体的混合物)
化合物115(150mg，0.280mmol)进一步通过手性制备型HPLC分离(柱：ChiralpakIE 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH＝70:30，以12mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到呈黄色固体的立体异构体化合物115A(34.3mg，23％产率)和化合物115B(20.6mg，23％产率)。
化合物115B：LC-MS(ESI)：RT＝3.935min，C21H23ClFN5O4S2的计算质量527.1，m/z发现值527.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IE 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝70:30，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝13.838min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.61(d,J＝3.2Hz,0.8H),9.09(s,0.2H),8.00-7.99(m,1.8H),7.93(d,J＝2.8Hz,0.2H),7.40-7.29(m,2H),7.22-7.05(m,2H),6.07(s,0.2H),5.97(d,J＝3.6Hz,0.8H),3.96-3.90(m,0.2H),3.72-3.60(m,2.8H),3.53(s,2.4H),3.52(s,0.6H),2.77-2.67(m,2H),2.57(d,J＝4.8Hz,3H),2.10-1.76(m,3H),1.62(d,J＝10.8Hz,1H)。
化合物120：甲基4-(2-溴-4-氟苯基)-6-(1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯(2种立体异构体的混合物)
化合物120(193mg，0.350mmol)进一步通过手性制备型HPLC分离(柱：ChiralpakIF 5μm 20*250mm；流动相：Hex:IPA＝60:40，以10mL/min；温度：30℃；波长：230nm)，得到立体异构体化合物120A(65mg，34％产率)和化合物120B(64mg，33％产率)。
化合物120A：LC-MS(ESI)：RT＝2.589min，C21H22BrFN4O4S2的计算质量556.0，m/z发现值556.8[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IF 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝60:40，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝8.568min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.51(s,0.8H),9.16(s,0.2H),8.00(s,2H),7.56(dd,J＝8.4,2.4Hz,1H),7.39-7.35(m,1H),7.28-7.23(m,1H),5.99(s,0.2H),5.91(s,0.8H),3.71-3.64(m,3H),3.53(s,3H),2.90(s,3H),2.78(q,J＝12.0Hz,2H),2.16-1.97(m,1H),1.94-1.79(m,2H),1.67-1.63(m,1H)。
化合物120B：LC-MS(ESI)：RT＝2.539min，C21H22BrFN4O4S2的计算质量556.0，m/z发现值556.8[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IF 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝60:40，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝10.530min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.51(d,J＝3.6Hz,0.8H),9.16(s,0.2H),8.01-7.98(m,1.8H),7.93(d,J＝3.2Hz,0.2H),7.59-7.55(m,1H),7.37(dd,J＝8.8,7.0Hz,0.7H),7.34-7.22(m,1.3H),5.99(s,0.2H),5.90(d,J＝3.6Hz,0.8H),4.00-3.91(m,0.2H),3.76-3.63(m,2.8H),3.53(s,2.4H),3.52(s,0.6H),2.91(s,1H),2.90(s,2H),2.82-2.72(m,2H),2.09-1.97(m,1H),1.95-1.78(m,2H),1.67-1.64(d,J＝13.6Hz,1H)。
化合物124：4-(4-氯-3-氟-苯基)-6-(1-甲烷磺酰基-哌啶-4-基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氢-嘧啶-5-甲酸甲基酯(2种立体异构体的混合物)
化合物124(150mg，0.514mmol)进一步通过手性制备型HPLC分离(分离条件：柱：Chiralpak IA 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝70:30:0.2，以12mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到呈黄色固体的立体异构体化合物124A(36.5mg，24％产率)和化合物124B(35.3mg，24％产率)。
化合物124B：LC-MS(ESI)：RT＝4.261min，C21H22ClFN4O4S2的计算质量512.1，m/z发现值512.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝70:30:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝10.524min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.78(d,J＝3.2Hz,1H),8.03(d,J＝3.2Hz,2H),7.58(t,J＝8.0Hz,1H),7.24(d,J＝8.4Hz,1H),7.14(dd,J＝8.0,1.6Hz,1H),5.50(s,1H),3.77-3.63(m,3H),3.59(s,3H),2.90(s,3H),2.76(q,J＝12.4Hz,2H),2.06-1.94(m,1H),1.87-1.77(m,2H),1.65(d,J＝12.0Hz,1H)。
化合物126：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(trans-4-(甲基磺酰胺基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯(2种立体异构体的混合物)
化合物126(280mg，0.530mmol)进一步通过手性制备型HPLC分离(分离条件：柱：Chiralpak IF 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝70:30:0.3，以10mL/min；温度：30℃；波长：230nm)，得到立体异构体化合物126A(26mg，19％产率)和化合物126B(20mg，14％,产率)。
化合物126B：LC-MS(ESI)：RT＝3.529min，C22H24ClFN4O4S2的计算质量526.1，m/z发现值527.1[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IF 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝70:30:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝10.664min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.42(d,J＝3.2Hz,0.6H),8.97(s,0.4H),8.00-7.98(m,1.6H),7.93(d,J＝3.2Hz,0.4H),7.43-7.40(m,1H),7.36-7.30(m,1H),7.23-7.17(m,1H),7.09-7.04(m,1H),6.00(s,0.4H),5.90(d,J＝3.6Hz,0.6H),3.83-3.75(m,0.4H),3.58-3.54(m,0.6H),3.52(s,1.8H),3.50(s,1.2H),3.19-3.09(m,1H),2.94(s,1.8H),2.93(s,1.2H),2.04-1.97(m,2H),1.88-1.67(m,3H),1.62-1.53(m,1H),1.42-1.28(m,2H)。
化合物128：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(cis-4-(甲基磺酰胺基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯(2种立体异构体的混合物)
化合物128(400mg，0.800mmol)进一步通过手性制备型HPLC分离(分离条件：柱：Chiralpak IF 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH＝70:30，以10mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到立体异构体化合物128C(19mg，10％产率)和化合物128D(37mg，19％产率)。
化合物128D：LC-MS(ESI)：RT＝3.605min，C22H24ClFN4O4S2的计算质量526.1，m/z发现值527.1[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak AS-H 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝70:30，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝8.617min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.41(d,J＝4.0Hz,0.2H),9.13(s,0.8H),8.12-8.00(m,1.2H),7.94(d,J＝2.8Hz,0.8H),7.47(d,J＝9.6Hz,0.8H),7.43(dd,J＝8.4,2.8Hz,1H),7.32(dd,J＝8.4,6.0Hz,1H),7.21(td,J＝8.4,2.8Hz,1H),6.86(d,J＝4.4Hz,0.2H),6.01(s,0.8H),5.91(d,J＝4.0Hz,0.2H),3.96-3.84(m,1H),3.72-3.63(m,1H),3.52(s,0.6H),3.50(s,2.4H),2.98(s,2.4H),2.93(s,0.6H),2.11-1.80(m,4H),1.68-1.49(m,4H)。
化合物33：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(1-(甲基磺酰基)哌啶-3-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯(4种立体异构体的混合物)
化合物33(210mg，0.410mmol)进一步通过手性制备型HPLC(第一分离柱：Chiralpak IE 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH＝60:40，以10mL/min；温度：30℃；波长：214nm和第二分离柱：Chiralpak IC 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH＝50:50，以10mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到呈黄色固体的立体异构体化合物33A(17.0mg，8％产率)，化合物33B(22.7mg，11％产率)，化合物33C(23.4mg，11％产率)，和化合物33D(20.1mg，10％产率)。
化合物33A：LC-MS(ESI)：RT＝4.383min，C21H22ClFN4O4S2的计算质量512.1，m/z发现值512.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IE 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝60:40，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝8.720min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.55(d,J＝2.8Hz,0.8H),9.33(s,0.2H),8.01-7.98(m,1.5H),7.94-7.93(m,0.5H),7.44-7.41(m,1H),7.39-7.34(m,1H),7.25-7.21(m,1H),6.04(s,0.2H),5.94(d,J＝2.8Hz,0.8H),4.16-4.03(m,0.2H),3.81-3.74(m,0.8H),3.72-3.63(m,1.6H),3.54-3.52(m,3H),3.49-3.42(m,0.4H),3.06-3.03(m,1H),3.01-2.93(m,3H),2.75-2.67(m,1H),1.85-1.68(m,3H),1.64-1.54(m,1H)。
化合物33C：LC-MS(ESI)：RT＝4.325min，C21H22ClFN4O4S2的计算质量512.1，m/z发现值512.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝50:50，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝9.380min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.57(d,J＝3.6Hz,0.8H),9.25(s,0.2H),8.00-7.96(m,1.5H),7.93-7.91(m,0.5H),7.43-7.41(m,1H),7.41-7.34(m,1H),7.24-7.19(m,1H),6.01(s,0.2H),5.93(d,J＝4.0Hz,0.8H),4.15-4.05(m,0.2H),3.84-3.77(m,0.8H),3.67-3.58(m,1H),3.54-3.51(m,4H),2.96-2.90(m,4H),2.74-2.66(m,1H),2.07-1.96(m,0.3H),1.89-1.85(m,2.7H),1.67-1.58(m,1H)。
化合物36：甲基4-(2-氯-3-氟苯基)-6-(4-氟-1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯(2种立体异构体的混合物)
LC-MS(ESI)：RT＝3.604min，C21H21ClF2N4O4S2的计算质量530.1，m/z发现值530.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.29(d,J＝2.8Hz,1H),8.02-8.00(m,2H),7.45-7.35(m,2H),7.27-7.26(m,1H),6.08(s,0.1H),5.84(d,J＝3.2Hz,0.9H),3.59-3.55(m,2H),3.50(s,3H),2.96-2.89(m,5H),2.39-2.21(m,2H),2.09-1.90(m,2H)。化合物36(150mg，0.283mmol)进一步通过手性制备型HPLC分离(柱：Chiralpak IE 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH＝50:50，以9.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm)，得到呈黄色固体的立体异构体化合物36A(13.2mg，9％产率)和化合物36B(19.6mg，13％产率)。
化合物46：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(cis-3-(甲氧基羰基)-1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯(2种立体异构体的混合物)
LC-MS(ESI)：RT＝1.65min，C23H24ClFN4O6S2的计算质量570.1，m/z发现值571.5[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.64(s,1H),8.00(s,2H),7.43-7.37(m,2H),7.23(t,J＝9.2Hz,1H),5.96(s,1H),4.26-4.17(m,1H),4.02-3.97(m,1H),3.74-3.66(m,1H),3.50(s,3H),3.47(s,3H),3.46-3.40(m,1H),3.32-3.21(m,1H),3.12-3.00(m,1H),2.92(s,3H),2.17-2.08(m,1H),2.04-1.95(m,1H)。
化合物54：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基)-2-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯(2种立体异构体的混合物)
化合物54(250mg，0.45mmol)进一步通过手性制备型HPLC分离(柱：Chiralpak IC5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH＝85:15，以15mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到立体异构体化合物54A(51.7mg，21％产率)和化合物54B(51.9mg，21％产率)。
化合物54A：LC-MS(ESI)：RT＝3.004min，C24H22ClF4N3O4S的计算质量559.1m/z发现值559.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝85:15，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝12.463min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.57(s,0.7H),9.44(d,J＝2.8Hz,0.3H),7.47-7.35(m,2H),7.28-7.20(m,3H),5.97(s,0.7H),5.87(d,J＝2.8Hz,0.3H),4.04-3.98(m,1H),3.74-3.63(m,2H),3.52(s,1H),3.51(s,2H),2.89(s,2H),2.86(s,1H),2.78-2.73(m,2H),2.01-1.95(m,1H),1.88-1.73(m,3H)。
化合物59：甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯(2种立体异构体的混合物)
化合物59(90mg，0.17mmol)进一步通过手性制备型HPLC分离(柱：Chiralpak IE 5μm 20*250mm，流动相：Hex:EtOH＝50:50，以8mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到呈黄色固体的立体异构体化合物59A(31.5mg，35％产率)和化合物59B(27.7mg，31％产率)。
化合物59B：LC-MS(ESI)：RT＝4.264min，C21H21ClF2N4O4S2的计算质量530.1，m/z发现值531.1[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IE 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝50:50，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝11.213min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.68(d,J＝2.8Hz,0.8H),9.28(s,0.2H),8.03-8.00(m,1.8H),7.95(d,J＝2.8Hz,0.2H),7.50-7.43(m,1H),7.23-7.14(m,1H),6.02(s,0.2H),5.94(d,J＝3.2Hz,0.8H),4.00-3.93(m,0.2H),3.75-3.64(m,2.8H),3.53(s,3H),2.91(s,0.6H),2.90(s,2.4H),2.84-2.73(m,2H),2.21-2.11(m,0.2H),2.04-2.01(m,1H),1.96-1.79(m,2H),1.68-1.64(m,0.8H)。
化合物68：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(1-新戊酰吡咯烷-3-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
LC-MS(ESI)：RT＝4.126min，C24H26ClFN4O3S的计算质量504.1，m/z发现值505.0[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝70:30，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝7.737min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.57(d,J＝3.2Hz,0.9H),9.10(s,0.1H),8.00(s,1.8H),7.94(d,J＝9.2Hz,0.2H),7.44-7.36(m,2H),7.21(t,J＝11.2Hz,1H),6.04(s,0.1H),5.94(d,J＝5.2Hz,0.9H),4.25(br s,1H),4.03-3.60(m,3H),3.54(s,3H),2.27-1.90(m,2H),1.23-1.19(m,9H)。
化合物84：4-(2-氯-4-氟-苯基)-6-(1-甲烷磺酰基-氮杂环丁烷-3-基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氢-嘧啶-5-甲酸甲基酯(2种立体异构体的混合物)
化合物84(120mg，0.248mmol)进一步通过手性制备型HPLC分离(柱：Chiralpak IC5μm 20*250mm，流动相：MeOH:EtOH＝50:50，以10mL/min，温度：30℃，波长：214nm)，得到呈黄色固体的立体异构体化合物84A(35.5mg，30％产率)和化合物84B(43.2mg，36％产率)。
化合物84A：LC-MS(ESI)：RT＝3.600min，C19H18ClFN4O4S2的计算质量484.0，m/z发现值484.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：MeOH:EtOH＝50:50，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝5.449min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.73(d,J＝3.6Hz,1H),8.05-8.03(m,2H),7.43-7.40(m,2H),7.20(td,J＝8.4,2.4Hz,1H),5.94(d,J＝3.6Hz,1H),4.55-4.46(m,1H),4.26-4.21(m,2H),4.07(t,J＝8.4Hz,1H),3.99(t,J＝8.4Hz,1H),3.54(s,3H),3.08(s,3H)。
化合物80：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(1-(环丁基磺酰基)氮杂环丁烷-3-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
LC-MS(ESI)：RT＝2.758min，C22H22ClFN4O4S2的计算质量524.1，m/z发现值524.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝60:40，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm,RT＝8.206min)；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.72(d,J＝2.8Hz,0.95H),9.21(s,0.05H),8.06(d J＝3.2Hz,0.95H),8.04(d J＝3.2Hz,0.95H),8.00(d,J＝3.2Hz,0.05H),7.95(d,J＝3.2Hz,0.05H),7.43-7.38(m,2H),7.23-7.18(m,1H),6.02(s,0.05H),5.94(d,J＝3.2Hz,0.95H),4.51-4.43(m,1H),4.26-4.14(m,3H),4.01(t,J＝8.0Hz,1H),3.94(t,J＝8.0Hz,1H),3.51(d,J＝6.8Hz,3H),2.40-2.27(m,4H),2.05-1.86(m,2H)。
化合物81：4-(2-氯-4-氟-苯基)-6-(1-乙基氨磺酰基-氮杂环丁烷-3-基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氢-嘧啶-5-甲酸甲基酯
LC-MS(ESI)：RT＝3.702min，C20H21ClFN5O4S2的计算质量513.1，m/z发现值513.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IB 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝80:20，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝8.934min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.71(d,J＝3.2Hz,0.9H),9.25(s,0.1H),8.04(dd,J＝8.0,3.2Hz,1.8H),7.98(dd,J＝11.2,3.2Hz,0.2H),7.44-7.38(m,2H),7.23-7.15(m,2H),6.03(s,0.1H),5.94(d,J＝3.6Hz,0.9H),4.32-4.24(m,1H),4.14-4.06(m,2H),3.92(t,J＝8.4Hz,1H),3.85(t,J＝8.4Hz,1H),3.52(d,J＝7.2Hz,3H),3.12-3.00(m,2H),1.13-1.06(m,3H)。
化合物82：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(1-(环己基磺酰基)氮杂环丁烷-3-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
LC-MS(ESI)：RT＝4.108min，C24H26ClFN4O4S2的计算质量552.1，m/z发现值552.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝50:50，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝7.760min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.71(d,J＝3.2Hz,0.95H),9.25(s,0.05H),8.04(d,J＝3.2Hz,0.95H),8.02(d,J＝3.2Hz,0.95H),7.96(s,0.1H),7.43-7.38(m,2H),7.20(td,J＝10.8,2.4Hz,1H),6.03(s,0.05H),5.94(d,J＝3.2Hz,0.95H),4.47-4.39(m,1H),4.29-4.23(m,2H),4.03(t,J＝8.0Hz,1H),3.97(t,J＝8.0Hz,1H),3.53(s,3H),3.03(tt,J＝11.6,3.6Hz,1H),2.07(d,J＝11.6Hz,2H),1.77(d,J＝12.4Hz,2H),1.62(d,J＝12.8Hz,1H),1.44-1.24(m,4H),1.19-1.08(m,1H)。
化合物130：6-(1-苯磺酰基-氮杂环丁烷-3-基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氢-嘧啶-5-甲酸甲基酯(2种立体异构体的混合物)
化合物130(80mg，0.147mmol)进一步通过手性制备型HPLC分离(分离条件：column:Chiralpak ID 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH＝70:30，以15mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到呈黄色固体的立体异构体化合物130A(17.1mg，21％产率)和化合物130B(17.3mg，22％产率)。
化合物130A：LC-MS(ESI)：RT＝4.231min，C24H20ClFN4O4S2的计算质量546.1，m/z发现值546.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak ID 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝70:30，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝13.425min)；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.62(d,J＝3.6Hz,1H),8.04(d,J＝3.2Hz,1H),8.00(d,J＝3.2Hz,1H),,7.87-7.85(m,2H),7.73-7.69(m,1H),7.67-7.63(m,2H),7.38(dd,J＝8.8,2.0Hz,1H),7.19-7.13(m,2H),5.84(d,J＝3.2Hz,1H),4.21-4.08(m,2H),4.02(t,J＝8.0Hz,1H),3.93(t,J＝7.6Hz,2H),3.48(s,3H)。
化合物89：trans-甲基6-(3-乙酰胺基环丁基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯(2种立体异构体的混合物)
化合物89(115mg，0.249mmol)进一步通过手性制备型HPLC分离(柱：Chiralpak IC5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝80:20:0.3，以15mL/min；温度：30℃；波长：230nm)，得到呈黄色固体的立体异构体化合物89R(39.6mg，34％产率)和化合物89S(36.8mg，32％产率)。
化合物89R：LC-MS(ESI)：RT＝2.865min，C21H20ClFN4O3S的计算质量462.1，m/z发现值462.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝85:15:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝9.512min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.55(d,J＝3.6Hz,0.9H),8.78(s,0.1H),8.37(d,J＝6.4Hz,0.1H),8.17(d,J＝3.2Hz,0.9H),8.03-8.01(m,1.8H),7.96(s,0.2H),7.44-7.33(m,2H),7.21(td,J＝8.8,2.8Hz,1H),6.00(s,0.2H),5.91(d,J＝3.6Hz,0.8H),4.42-4.48(m,1H),4.33-4.26(m,1H),3.50(s,3H),2.67-2.59(m,1H),2.49-2.44(m,1H),2.29-2.12(m,2H),1.83(s,0.3H),1.80(s,2.7H)。
化合物116：甲基4-(2-氯-3-氟苯基)-6-(1-(吡啶-2-基磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物116(140mg，0.243mmol)通过手性制备型HPLC分离(柱：Chiralpak IE 5μm20*250mm；流动相：MeOH:EtOH:DEA＝50:50:0.2，以8mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到呈黄色固体的立体异构体化合物116A(34mg，24％产率，100％ee)和化合物116B(23mg，16％产率，100％ee)。
化合物116B：LC-MS(ESI)：RT＝4.343min，C25H23ClFN5O4S2的计算质量575.1，m/z发现值575.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IE 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝50:50:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝13.410min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.59(d,J＝3.6Hz,0.8H),9.13(s,0.2H),8.84-8.81(m,1H),8.16-8.12(m,1H),8.04-8.00(m,2H),7.97-7.95(m,1H),7.76-7.73(m,1H),7.37-7.33(m,2H),7.19-7.13(m,1H),6.05(s,0.2H),5.95(d,J＝4.0Hz,0.8H),3.93-3.85(m,2H),3.66-3.59(m,1H),3.48(s,2.1H)3.47(s,0.9H),2.79-2.67(m,2H),2.00-1.90(m,1H),1.87-1.73(m,2H),1.61-1.57(m,1H)。
化合物140：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(1-((3-甲基-3-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)羰基)环丁基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯(非对映异构体的混合物)
在室温向甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯化合物99(300mg，0.648mmol)在二氯甲烷(6mL)中的溶液中添加2-(三甲基甲硅烷基)乙基3-(氯磺酰基)-1-甲基环丁烷甲酸酯(293mg，0.843mmol)和三乙胺(201mg，1.99mmol)。在氮气气氛下于40℃搅拌过夜后，将反应混合物用水(10mL)稀释，并用乙酸乙酯(10mL)萃取两次。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥，过滤并浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝4:1)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物140A(160mg，90％纯度，31％产率)和140B(175mg，90％纯度，34％产率)。
化合物140A(trans):1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.53(d,J＝3.2Hz,0.8H),9.13(s,0.2H),7.99-7.90(m,2H),7.35-7.33(m,1H),7.28-7.21(m,1H),7.18-7.16(m,1H),5.99(s,0.2H),5.89(d,J＝3.2Hz,0.8H),4.16-4.12(m,2H),3.97-3.88(m,1H),3.76-3.65(m,3H),3.50(s,3H),2.89-2.72(m,4H),2.29-2.23(m,2H),1.94-1.85(m,1H),1.83-1.69(m,2H),1.63-1.55(m,1H),1.33(s,3H),0.99-0.92(m,2H),0.01(s,9H)。
化合物140B(cis):1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.53(d,J＝3.6Hz,0.8H),9.12(s,0.2H),8.00-7.90(m,2H),7.41-7.38(m,1H),7.35-7.28(m,1H),7.20-7.14(m,1H),5.99(s,0.2H),5.89(d,J＝3.6Hz,0.8H),4.15-4.09(m,3H),3.74-3.63(m,3H),3.50(s,3H),2.88-2.79(m,2H),2.68-2.61(m,2H),2.19-2.13(m,2H),1.94-1.69(m,3H),1.65-1.55(m,1H),1.40(s,3H),0.95-0.91(m,2H),0.00(s,9H)。
化合物145：乙基6-(1-(((trans)-3-(叔丁氧基羰基)环丁基)磺酰基)哌啶-4-基)-4-(2-氯苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯：LC-MS(ESI)：RT＝3.573min，C30H37ClN4O6S2的计算质量648.2，m/z发现值649.2[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IA 5μm4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝80:20:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm；RT＝8.109min)。
化合物157A：甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(1-((3-甲氧基-3-氧代丙基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝2.05min，C24H25ClF2N4O6S2的计算质量602.1，m/z发现值603.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.65(d,J＝3.6Hz,0.8H),9.23(s,0.2H),8.02-7.99(m,1.8H),7.94(d,J＝3.2Hz,0.2H),7.47-7.42(m,1H),7.23-7.19(m,1H),6.02(s,0.2H),5.93(d,J＝3.6Hz,0.8H),3.76-3.69(m,3H),3.66(s,3H),3.53(s,3H),3.38-3.35(m,2H),2.93-2.88(m,2H),2.76(t,J＝7.2Hz,2H),2.02-1.96(m,1H),1.85-1.77(m,2H),1.65-1.62(m,1H)。
化合物158A：甲基6-(1-((1H-吡唑-4-基)磺酰基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-3-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
LC-MS(ESI)：RT＝3.074min，C23H22ClFN6O4S2的计算质量564.1，m/z发现值564.8[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.72(br s,1H),9.58(br s,0.8H),9.18(s,0.2H),8.12-7.93(m,4H),7.39-7.30(m,2H),7.20-7.19(m,1H),6.05(s,0.3H),5.96(s,0.7H),3.74-3.67(m,2.3H),3.55-3.48(m,3.7H),2.28-2.19(m,2H),2.09-2.00(m,1H),1.95-1.86(m,1H),1.80-1.78(m,1H),1.65-1.62(m,1H)。
化合物161：(trans)-甲基4-(2-溴-3,4-二氟苯基)-6-(1-((3-(叔丁氧基羰基)环丁基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
在0℃向甲基4-(2-溴-3,4-二氟苯基)-6-(哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯160(230mg，0.464mmol)在二氯甲烷(10mL)中的溶液中添加三乙胺(141.0mg，1.392mmol)和(trans)-叔丁基3-(氯磺酰基)环丁烷甲酸酯(153mg，0.603mmol)。在室温搅拌1小时后，将混合物减压浓缩，得到残余物，将所述残余物通过硅胶柱色谱法纯化(石油醚:乙酸乙酯＝5:1至3:1)，得到小极性级分，将其进一步通过制备型HPLC纯化(柱：gilson X-brige C18(5μm 19*150mm)流动相A：水(+0.1％碳酸氢铵)，流动相B：乙腈，UV：214nm，流速：15mL/min，梯度：83％-98％(％B))，得到呈黄色固体的标题化合物161(190mg，57％产率)和呈黄色固体的大极性级分161A(100mg，30％产率)。
化合物161，LC-MS(ESI)：RT＝3.689min，C29H33BrF2N4O6S2的计算质量714.1，m/z发现值714.8[M+H]+。
化合物163：(trans)-乙基6-(-4-氨甲酰基环己基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
LC-MS(ESI)：RT＝4.017min，C23H24ClFN4O3S的计算质量490.1，m/z发现值491.0[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak OZ-H,5μm 4.6*150mm；流动相：Hex:EtOH＝70:30，以1mL/min；温度：35℃；波长：254nm；RT＝5.648min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.37(d,J＝3.6Hz,0.6H),8.83(s,0.4H),7.99-7.97(m,1.6H),7.94(d,J＝3.2Hz,0.4H),7.44-7.40(m,1H),7.37-7.33(m,1H),7.24-7.18(m,2H),6.72(br s,0.4H),6.67(br s,0.6H),6.02(s,0.4H),5.91(d,J＝3.6Hz,0.6H),4.01-3.94(m,2H),3.83-3.78(m,0.4H),3.64-3.55(m,0.6H),2.26-2.15(m,1H),1.91-1.81(m,4H),1.73-1.62(m,2H),1.50-1.36(m,2H),1.10-1.04(m,3H)。
化合物164：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(1-(吗啉代磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝4.058min，C24H27ClFN5O5S2的计算质量583.1，m/z发现值584.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.16(s,0.3H),7.84-7.82(m,1H),7.51(d,J＝3.2Hz,0.7H),7.46-7.45(m,0.3H),7.43(s,0.7H),7.29-7.27(m,0.8H),7.25-7.24(m,0.2H),7.16-7.11(m,1H),6.99-6.89(m,1H),6.19(s,0.3H),6.07(d,J＝2.8Hz,0.7H),4.21-4.13(m,0.3H),3.98-3.85(m,2.7H),3.78-3.75(m,4H),3.61-3.59(m,3H),3.30-3.24(m,4H),3.07-2.95(m,2H),2.25-2.15(m,1H),2.09-1.98(m,1H),1.96-1.78(m,1.4H),1.71-1.67(m,0.6H)。
化合物165：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(1-((1-甲基-1H-吡唑-4-基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝3.874min，C24H24ClFN6O4S2的计算质量578.1，m/z发现值578.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.18(s,0.3H),7.83(d,J＝3.2Hz,1H),7.75-7.73(m,2H),7.53(d,J＝2.8Hz,0.7H),7.46(d,J＝3.2Hz,0.3H),7.43(s,0.7H),7.28-7.27(m,0.3H),7.26-7.24(m,0.7H),7.15-7.11(m,1H),6.97-6.89(m,1H),6.17(s,0.3H),6.04(d,J＝2.8Hz,0.7H),3.99(s,3H),3.95-3.85(m,2H),3.77-3.69(m,1H),3.55(s,3H),2.44-2.26(m,3H),2.20-2.05(m,1H),2.00-1.87(m,1.4H),1.73-1.69(m,0.6H)。
化合物166A：甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(1-((二氟甲基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
外消旋化合物166(70mg，0.124mmol)通过手性制备型HPLC分离(柱：Chiralpak IG5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝70:30:0.3，以16mL/min；温度：30℃；波长：230nm)，得到呈黄色固体的标题化合物166B(25mg，25％产率，100％立体纯)和166A(22mg，23％产率，100％立体纯)。
化合物166A：LC-MS(ESI)：RT＝2.341min，C21H19ClF4N4O4S2的计算质量566.1，m/z发现值567.1[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IG 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝70:30:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm；RT＝8.619min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.65(s,0.8H),9.35(s,0.2H),8.01(s,1.7H),7.94-7.93(m,0.3H),7.45(q,J＝9.2Hz,1H),7.28-7.12(m,1.7H),7.02-6.99(m,0.3H),6.02(s,0.2H),5.93(s,0.8H),4.02-4.01(m,0.2H),3.91-3.78(m,2.8H),3.58-3.54(m,3H),3.21-3.12(m,2H),2.18-1.64(m,4H)。
化合物190：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(4-(甲基磺酰胺基)-环庚基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝3.016min，C23H26ClFN4O4S2的计算质量540.1，m/z发现值541.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.06-8.02(br s,0.4H),7.85-7.81(m,1H),7.50-7.49(m,0.5H),7.46-7.44(m,0.5H),7.40(br s,0.6H),7.30-7.25(m,1H),7.15-7.11(m,1H),6.97-6.98(m,1H),6.17(s,0.4H),6.05-6.03(m,0.6H),4.44-4.25(m,1H),4.22-4.10(m,0.5H),4.03-3.97(m,0.5H),3.80-3.63(m,1H),3.62(s,1.5H),3.60(s,1.5H),3.01(s,1.5H),3.00(s,1.5H),2.28-1.65(m,10H)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.92(d,J＝3.2Hz,0.6H),7.88(d,J＝2.8Hz,0.4H),7.74(d,J＝2.8Hz,0.9H),7.68-7.58(m,0.1H),7.41-7.35(m,1H),7.24-7.20(m,1H),7.07-7.01(m,1H),6.12(d,J＝4.0Hz,0.6H),6.04(d,J＝2.4Hz,0.4H),4.21-4.05(m,0.5H),3.95-3.88(m,0.5H),3.69-3.62(m,0.4H),3.59(s,3H),3.55-3.44(m,0.6H),2.96-2.93(m,3H),2.37-1.44(m,10H)。
化合物194A：(trans)-乙基6-(1-((3-(叔丁氧基羰基)环丁基)磺酰基)-哌啶-4-基)-4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-2-(2,4,6-三氟苯基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
将反应混合物通过制备型薄层色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝1:10)纯化，得到呈白色固体的标题化合物194X(400mg，19％产率)和194Y(600mg，28％产率)。对于194X：LC-MS(ESI)：RT＝3.540min，C33H35ClF5N3O6S的计算质量731.2，m/z发现值732.3[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.55(s,0.8H),9.45(d,J＝3.2Hz,0.2H),7.57-7.45(m,1H),7.27-7.19(m,3H),5.98(s,0.8H),5.89(d,J＝3.2Hz,0.2H),4.08-3.89(m,4H),3.77-3.62(m,2H),3.08-2.97(m,1H),2.85-2.74(m,2H),2.47-2.42(m,4H),2.00-1.79(m,3H),1.74-1.67(m,1H),1.40(s,9H),1.06-1.03(m,3H)。
化合物194X进一步通过手性制备型HPLC分离(柱：Chiralpak OD-H 5μm20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝90:10:0.3，以15mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到呈无色固体的标题化合物194A(200mg，33％产率)和194B(100mg，17％产率)。
化合物198A和化合物198B：(trans)-乙基4-(2-溴-3,4-二氟苯基)-6-(1-((3-(叔丁氧基羰基)环丁基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯和(cis)-乙基4-(2-溴-3,4-二氟苯基)-6-(1-((3-(叔丁氧基羰基)环丁基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物198A：LC-MS：RT＝4.589min，C30H35BrF2N4O6S2的计算质量728.1，m/z发现值：729.0[M+1]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.60(s,0.7H),9.12(s,0.3H),8.00-7.92(m,2H),7.51-7.42(m,1H),7.24-7.14(m,1H),6.02(s,0.2H),5.95(s,0.8H),4.04-3.91(m,3H),3.80-3.67(m,3H),3.16-3.06(m,1H),2.93-2.83(m,2H),2.64-2.55(m,3H),2.04-1.72(m,4H),1.64-1.54(m,1H),1.43(s,9H),1.09-1.05(m,3H)。
化合物198B：LC-MS：RT＝4.413min，C30H35BrF2N4O6S2的计算质量728.1，m/z发现值：729.0[M+1]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.58(s,0.8H),9.12(s,0.2H),8.00-7.93(m,2H),7.54-7.46(m,1H),7.27-7.14(m,1H),6.02(s,0.2H),5.93-5.90(m,0.8H),3.97-3.93(m,3H),3.76-3.65(m,3H),3.11-3.04(m,1H),2.90-2.74(m,2H),2.48-2.35(m,4H),2.01-1.77(m,3H),1.67-1.59(m,1H),1.41(s,9H),1.09-1.05(m,3H)。
化合物200A：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-6-(1-(噻唑-2-基磺酰基)哌啶-4-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
LC-MS(ESI)：RT＝3.868min，C23H21ClFN5O4S3的计算质量581.0，m/z发现值581.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.52(d,J＝1.2Hz,0.8H),9.11(s,0.2H),8.25(d,J＝2.0Hz,1H),8.20(d,J＝2.8Hz,1H),8.01-7.95(m,2H),7.42-7.40(m,1H),7.33-7.32(m,1H),7.32-7.20(m,1H),6.00(s,0.2H),5.90(d,J＝3.2Hz,0.8H),3.94-3.87(m,2H),3.67-3.59(m,1H),3.49(s,3H),2.83-2.73(m,2H),1.99-1.87(m,1H),1.81-1.80(m,2H),1.65-1.61(m,1H)。
化合物201A：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(1-((1-甲基-1H-咪唑-4-基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝3.453min，C24H24ClFN6O4S2的计算质量578.1，m/z发现值578.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.51(d,J＝3.6Hz,0.8H),9.00(s,0.2H),8.03-8.00(m,1.8H),7.94(d,J＝3.2Hz,0.2H),7.86-7.82(m,2H),7.44-7.39(m,1H),7.36-7.29(m,1H),7.23-7.16(m,1H),6.00(s,0.2H),5.90(d,J＝3.6Hz,0.8H),3.82-3.70(m,5H),3.57-3.49(m,1H),3.48(s,3H),2.63-2.55(m,2H),2.07-1.72(m,3H),1.61-1.57(m,1H)。
化合物204A：甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(3-(甲基-磺酰胺基)双环[1.1.1]戊-1-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝3.326min，C21H19ClF2N4O4S2的计算质量528.1m/z发现值529.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.89(s,0.7H),7.83(d,J＝3.2Hz,0.3H),7.82(d,J＝3.2Hz,0.7H),7.51(d,J＝2.8Hz,0.3H),7.46(d,J＝3.2Hz,0.7H),7.44(br s,0.3H),7.08-7.02(m,2H),6.15(s,0.7H),6.03(d,J＝2.4Hz,0.3H),5.14(br s,0.7H),5.03(br s,0.3H),3.63(s,0.9H),3.60(s,2.1H),3.05(s,0.9H),3.04(s,2.1H),2.61(s,4.2H),2.53(s,1.8H)。
化合物206B：(trans)-甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(3-(甲基磺酰胺基)环丁基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯,(分离条件：柱：Chiralpak IE 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH＝60:40，以10mL/min；温度：30℃；波长：214nm),LC-MS(ESI)：RT＝3.925min，C20H20ClFN4O4S2的计算质量498.1，m/z发现值498.9[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IE 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝60:40，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝11.912min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.61(d,J＝3.2Hz,0.9H),8.90(s,0.1H),8.05-8.02(m,1.8H),7.96(d,J＝3.2Hz,0.2H),7.64-7.62(m,0.2H),7.47-7.35(m,2.8H),7.23-7.19(m,1H),6.00(s,0.1H),5.92(d,J＝3.6Hz,0.9H),4.45-4.40(m,0.1H),4.33-4.21(m,1.8H),4.03-3.98(m,0.1H),3.50(s,3H),2.91(s,0.2H),2.87(s,2.8H),2.67-2.61(m,1H),2.48-2.29(m,3H)。
化合物206D：(cis)-甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(3-(甲基磺酰胺基)环丁基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯,(分离条件：柱：Chiralpak IA 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝70:30:0.3，以11mL/min；温度：30℃；波长：214nm),LC-MS(ESI)：RT＝3.312min，C20H20ClFN4O4S2的计算质量498.1，m/z发现值498.9[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝70:30:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：254nm，RT＝8.762min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)9.54(br s,0.7H),8.83(br s,0.3H),8.04-8.02(m,1.6H),7.97-7.96(m,0.4H),7.53-7.51(m,0.4H),7.46-7.41(m,1.6H),7.33-7.28(m,1H),7.23-7.18(m,1H),5.99(s,0.3H),5.90(d,J＝2.0Hz,0.7H),4.20-4.10(m,0.3H),3.91-3.83(m,0.7H),3.80-3.68(m,1H),3.52(s,2H),3.51(s,1H),2.92(s,1H),2.88(s,2H),2.71-2.68(m,0.4H),2.59-2.58(m,0.6H),2.43-2.33(m,2H),2.28-2.18(m,1H)。
化合物208B：3-(N-(3-(6-(2-氯-4-氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)双环[1.1.1]戊-1-基)氨磺酰基)苯甲酸，LC-MS(ESI)：RT＝4.457min，C27H22ClFN4O6S2的计算质量616.1，m/z发现值616.8[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.38(d,J＝2.8Hz,0.5H),8.98(s,0.5H),8.82(s,0.5H),8.40(s,1H),8.26(s,0.5H),8.21-8.18(m,1H),8.07-8.06(m,1H),7.98-7.92(m,2H),7.78-7.74(m,1H),7.42-7.37(m,1H),7.28-7.23(m,1H),7.20-7.14(m,1H),5.91(s,0.5H),5.81(d,J＝3.2Hz,0.5H),3.48(s,1.5H),3.46(s,1.5H),2.21(s,3H),2.03(s,3H)。
化合物209A和209B：(trans)-甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(1-((4-甲基-4-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)羰基)环己基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯和(cis)-甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(1-((4-甲基-4-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)羰基)-环己基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
在0℃向甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯化合物58(300mg，85％纯度，0.563mmol)在二氯甲烷(10mL)中的溶液中添加三乙胺(800mg，7.906mmol)和2-(三甲基甲硅烷基)乙基4-(氯磺酰基)-1-甲基环己烷甲酸酯(400mg，90％纯度，1.06mmol，部分IV)。在25℃下搅拌过夜后，将混合物浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝4:1)以及制备型薄层色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝4:1)纯化，得到呈黄色固体的209A(160mg，纯度60％，23％产率)和209B(70mg，纯度80％，13％产率)。
化合物209A：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.17-8.15(m,0.3H),7.81-7.77(m,1H),7.50-7.48(m,0.7H),7.43-7.41(m,0.4H),7.39-7.35(m,0.6H),7.06-6.93(m,2H),6.16(s,0.4H),6.02(m,0.6H),4.19-4.10(m,2H),4.05-3.72(m,3H),3.58-3.56(m,3H),3.07-2.67(m,3H),2.39-2.13(m,2H),2.09-1.83(m,5H),1.75-1.48(m,5H),1.23-1.20(m,3H),1.00-0.88(m,2H),0.01(s,9H)。
化合物209B：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.14(s,0.4H),7.80-7.77(m,1H),7.50-7.47(m,0.6H),7.42-7.40(m,0.4H),7.37-7.34(m,0.6H),7.02-6.95(m,2H),6.13(s,0.4H),6.00(s,0.6H),4.20-4.11(m,2H),4.03-3.81(m,3H),3.55-3.53(m,3H),3.18-2.80(m,3H),2.36-2.15(m,2H),2.11-1.84(m,4H),1.82-1.55(m,4H),1.19-1.15(m,2H),1.12-1.01(m,3H),0.98-0.91(m,2H),0.01(s,9H)。
化合物213：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(1-((2-甲氧基-2-氧代乙基)磺酰基)吡咯烷-3-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.68(s,0.9H),9.41-9.37(m,0.1H),8.04-7.98(m,1.8H),7.95-7.93(m,0.2H),7.45-7.43(m,1H),7.40-7.35(m,1H),7.24-7.19(m,1H),6.02(s,0.1H),5.93(s,0.9H),4.48-4.34(m,3H),3.72(s,1.2H),3.71(s,1.8H),3.67-3.56(m,2H),3.54(s,3H),3.51-3.38(m,2H),2.33-2.12(m,1.6H),2.06-1.98(m,0.4H)。
213的外消旋混合物(400mg，0.720mmol)通过手性制备型HPLC分离(第一分离条件：柱：Chiralpak IB5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH＝85:15，以8mL/min；温度：30℃；波长：214nm；第二分离条件：柱：ChiralpakID 5μm20*250mm；流动相：Hex:IPA:DEA＝98:2:0.2，以15mL/min；温度：30℃；波长：214nm；柱：ChiralpakIF 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH＝50:50，以8mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到呈黄色固体的标题化合物213X(40mg，10％产率，100％立体纯)，213Y(45mg，11％产率，100％立体纯)，213M(47mg，11％产率，100％立体纯)和213N(50mg，13％产率，97.7％立体纯)。
化合物213X：LC-MS(ESI)：RT＝3.558min，C22H22ClFN4O6S2的计算质量556.1，m/z发现值557.1[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak ID 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:IPA:DEA＝50:50:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝13.460min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.65(d,J＝3.2Hz,0.9H),9.37(s,0.1H),8.04-8.01(m,1.8H),7.99(d,J＝3.2Hz,0.1H),7.94(d,J＝2.4Hz,0.1H),7.45-7.42(m,1H),7.40-7.36(m,1H),7.23-7.19(m,1H),6.02(s,0.1H),5.94(d,J＝3.6Hz,0.9H),4.47-4.34(m,3H),3.73(s,3H),3.72-3.65(m,1H),3.63-3.56(m,2H),3.54(s,3H),3.45-3.38(m,1H),2.25-2.16(m,1H),2.06-1.98(m,1H)。
化合物213M：LC-MS(ESI)：RT＝3.541min，C22H22ClFN4O6S2的计算质量556.1，m/z发现值557.1[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IF 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝50:50，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝10.289min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.68(d,J＝3.2Hz,0.9H),9.40(s,0.1H),8.04-8.02(m,1.8H),7.99(d,J＝2.8Hz,0.1H),7.93(d,J＝2.8Hz,0.1H),7.45-7.42(m,1H),7.39-7.36(m,1H),7.25-7.20(m,1H),6.02(s,0.1H),5.94(d,J＝2.8Hz,0.9H),4.46-4.36(m,3H),3.73(s,3H),3.71-3.58(m,1.4H),3.55(s,3H),3.53-3.49(m,0.6H),3.47-3.40(m,2H),2.33-2.26(m,1H),2.20-2.13(m,1H)。
化合物215：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(1-((2-甲氧基乙基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝2.794min，C23H26ClFN4O5S2的计算质量556.1，m/z发现值556.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.18(s,0.3H),7.83(d,J＝2.8Hz,1H),7.53(d,J＝3.2Hz,0.7H),7.46-7.44(m,1H),7.30-7.28(m,0.8H),7.26(brs,0.2H),7.16-7.12(m,1H),6.99-6.89(m,1H),6.19(s,0.3H),6.07(d,J＝2.4Hz,0.7H),4.20-4.14(m,0.3H),4.00-3.88(m,2.7H),3.83-3.76(m,2H),3.60(s,2H),3.59(s,1H),3.41(s,2H),3.40(s,1H),3.25-3.22(m,2H),3.00-2.88(m,2H),2.31-2.21(m,0.7H),2.13-2.03(m,1H),1.98-1.70(m,2.3H)。
化合物216：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-6-(1-((2,2,2-三氟乙基)磺酰基)哌啶-4-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝3.603min，C22H21ClF4N4O4S2的计算质量580.1，m/z发现值581.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.55(s,0.7H),9.24(s,0.3H),8.01-7.93(m,2H),7.44-7.35(m,2H),7.23-7.19(m,1H),6.02-5.93(m,1H),4.56-4.49(m,2H),3.96(br s,0.2H),3.79-3.73(m,2.8H),3.53(s,3H),2.97-2.88(m,2H),2.10-1.81(m,3.2H),1.68-1.65(m,0.8H)。
化合物222：甲基6-(1-((3-(叔丁氧基)-2,2-二甲基-3-氧代丙基)磺酰基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝3.790min，C29H36ClFN4O6S2的计算质量654.2，m/z发现值655.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.16(s,0.3H),7.83-7.81(m,1H),7.52(d,J＝3.2Hz,0.7H),7.44(d,J＝3.2Hz,0.3H),7.42(s,0.7H),7.29-7.28(m,1H),7.16-7.12(m,1H),7.00-6.89(m,1H),6.19(s,0.3H),6.07(d,J＝2.8Hz,0.7H),4.18-4.11(m,0.3H),4.03-3.85(m,2.7H),3.60(s,2H),3.59(s,1H),3.19(s,1.3H),3.18(s,0.7H),2.90-2.79(m,2H),2.32-2.20(m,0.7H),2.16-2.02(m,1H),2.00-1.80(m,1.6H),1.73-1.70(m,0.7H),1.49(s,9H),1.40(s,4H),1.38(s,2H)。
化合物231X和231Y：(trans)-甲基6-(1-((3-(叔丁氧基羰基)环丁基)磺酰基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯和(cis)-甲基6-(1-((3-(叔丁氧基羰基)环丁基)磺酰基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
中间体231X(trans，对映异构体的混合物)：LC-MS(ESI)：RT＝3.685min，C29H33ClF2N4O6S2的计算质量670.2，m/z发现值671.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.63(d,J＝3.2Hz,0.8H),9.19(s,0.2H),8.02-7.99(m,1.8H),7.93(d,J＝2.8Hz,0.2H),7.46-7.42(m,1H),7.22-7.18(m,1H),6.02(s,0.2H),5.93(d,J＝3.6Hz,0.8H),4.02-3.97(m,1H),3.76-3.70(m,3H),3.53(s,3H),3.15-3.08(m,1H),2.92-2.83(m,2H),2.57-2.53(m,4H),1.96-1.90(m,1H),1.85-1.73(m,2H),1.62-1.58(m,1H),1.42(s,9H)。
中间体231Y(cis，对映异构体的混合物)：LC-MS(ESI)：RT＝3.653min，C29H33ClF2N4O6S2的计算质量670.2，m/z发现值670.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.63(d,J＝3.6Hz,0.8H),9.20(s,0.2H),8.01-7.99(m,1.8H),7.93(d,J＝3.2Hz,0.2H),7.46-7.42(m,1H),7.23-7.19(m,1H),6.02(s,0.2H),5.93(d,J＝3.6Hz,0.8H),3.97-3.93(m,1H),3.75-3.67(m,3H),3.53(s,3H),3.18-3.06(m,1H),2.88-2.80(m,2H),2.46-2.40(m,4H),1.97-1.93(m,1H),1.83-1.74(m,2H),1.62-1.59(m,1H),1.41(s,9H)。
(trans)-甲基6-(1-((3-(叔丁氧基羰基)-环丁基)磺酰基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯231X的外消旋混合物(280mg，0.420mmol)通过手性制备型HPLC(分离条件：柱：Chiralpak IE 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH＝60:40，以10mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到呈黄色固体的标题化合物231A(80mg，29％产率，100％立体纯)和231B(100mg，36％产率，100％立体纯)。
化合物231A：LC-MS(ESI)：RT＝1.93min，C29H33ClF2N4O6S2的计算质量670.2，m/z发现值671.4[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IE 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝60:40，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝9.730min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.19(s,0.3H),7.83(d,J＝3.6Hz,1H),7.53(d,J＝2.8Hz,0.6H),7.46(d,J＝3.2Hz,0.4H),7.42(m,0.7H),7.08-7.03(m,2H),6.18(s,0.3H),6.06(d,J＝2.4Hz,0.7H),4.16-3.99(m,0.4H),3.97-3.87(m,3.6H),3.60(s,2H),3.59(s,1H),3.20-3.14(m,1H),2.95-2.90(m,2H),2.82-2.74(m,2H),2.62-2.55(m,2H),2.22-2.14(m,0.6H),2.05-1.92(m,1.1H),1.90-1.66(m,1.3H),1.63-1.58(m,1H),1.47(s,9H)。
化合物231B：LC-MS(ESI)：RT＝1.93min，C29H33ClF2N4O6S2的计算质量670.2，m/z发现值671.4[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IE 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝60:40，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝12.613min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.19(s,0.3H),7.83(d,J＝3.6Hz,1H),7.53(d,J＝2.8Hz,0.6H),7.46(d,J＝3.2Hz,0.4H),7.42(s,0.7H),7.08-7.03(m,2H),6.18(s,0.3H),6.06(d,J＝2.4Hz,0.7H),4.16-4.14(m,0.4H),4.00-3.87(m,3.6H),3.60(s,2H),3.59(s,1H),3.20-3.14(m,1H),2.95-2.90(m,2H),2.82-2.74(m,2H),2.62-2.55(m,2H),2.22-2.14(m,0.6H),2.05-1.77(m,2.4H),1.70-1.58(m,1H),1.47(s,9H)。
(cis)-甲基6-(1-((3-(叔丁氧基羰基)环丁基)-磺酰基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯231Y的外消旋混合物(220mg，0.330mmol)通过手性制备型HPLC(分离条件：柱：Chiralpak IG 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH＝50:50，以12mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到呈黄色固体的标题化合物231C(97mg，44％产率，100％立体纯)和231D(107mg，49％产率，99.7％立体纯)。
化合物231C：LC-MS(ESI)：RT＝1.90min，C29H33ClF2N4O6S2的计算质量670.2，m/z发现值671.4[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IE 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝60:40，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝10.809min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.20(s,0.4H),7.84-7.83(m,1H),7.53(d,J＝3.2Hz,0.6H),7.46(d,J＝2.8Hz,0.4H),7.42(d,J＝2.4Hz,0.6H),7.08-7.03(m,2H),6.18(s,0.4H),6.06(d,J＝1.6Hz,0.6H),4.19-4.13(m,0.3H),4.04-3.91(m,2.7H),3.70-3.65(m,1H),3.60(s,2H),3.59(s,1H),3.03-2.90(m,3H),2.79-2.72(m,2H),2.57-2.50(m,2H),2.23-2.18(m,0.4H),2.05-1.97(m,1H),1.89-1.81(m,2H),1.69-1.66(m,0.6H),1.47(s,9H)。
化合物231D：LC-MS(ESI)：RT＝1.90min，C29H33ClF2N4O6S2的计算质量670.2，m/z发现值671.4[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IE 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝60:40，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝14.521min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.21(s,0.4H),7.84-7.83(m,1H),7.53(d,J＝3.2Hz,0.7H),7.46(d,J＝3.2Hz,0.3H),7.42-7.41(m,0.6H),7.08-7.02(m,2H),6.18(s,0.3H),6.06(s,0.6H),4.19-4.13(m,0.3H),4.05-3.89(m,2.7H),3.70-3.63(m,1H),3.60(s,2H),3.59(s,1H),3.03-2.91(m,3H),2.87-2.74(m,2H),2.57-2.51(m,2H),2.23-2.18(m,0.5H),2.05-2.02(m,1H),1.93-1.80(m,2H),1.70-1.66(m,0.5H),1.47(s,9H)。
化合物237：(trans)-甲基6-(4-((N-(叔丁氧基羰基)氨磺酰基)氨基)-环己基)-4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯,1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.13(br s,0.6H),7.83-7.80(m,1H),7.50(d,J＝3.0Hz,0.4H),7.45(d,J＝3.0Hz,0.6H),7.40-7.37(m,0.4H),7.05-6.95(m,2H),6.15(s,0.6H),6.05-6.01(m,0.4H),3.96-3.89(m,0.6H),3.72-3.67(m,0.4H),3.60(s,1.1H),3.58(s,1.9H),3.31-3.23(m,1H),2.31-2.15(m,2H),2.06-1.91(m,2H),1.79-1.57(m,2H),1.50-1.47(m,9H),1.44-1.41(m,2H)。
化合物240M和240N：(trans)-甲基4-(2-溴-4-氟苯基)-6-(1-((3-(叔丁氧基羰基)环丁基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯和(cis)-甲基4-(2-溴-4-氟苯基)-6-(1-((3-(叔丁氧基羰基)环丁基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物240M(对映异构体的混合物)：LC-MS(ESI)：RT＝2.650min，C29H34BrFN4O6S2的计算质量696.1，m/z发现值698.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.15(s,0.2H),7.83(d,J＝3.2Hz,1H),7.52-7.44(m,1.8H),7.32(dd,J＝8.4,2.8Hz,1H),7.28-7.25(m,1H),7.02-6.93(m,1H),6.16(s,0.2H),6.03(d,J＝2.4Hz,0.8H),4.20-4.08(m,0.3H),4.04-3.87(m,3.7H),3.60(s,3H),3.22-3.13(m,1H),2.99-2.87(m,2H),2.82-2.72(m,2H),2.63-2.53(m,2H),2.25-2.15(m,0.8H),2.07-1.59(m,3.2H),1.47(s,9H)。
化合物240N(对映异构体的混合物)：LC-MS(ESI)：RT＝2.610min，C29H34BrFN4O6S2的计算质量696.1，m/z发现值698.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.17(s,0.2H),7.83-7.82(m,1H),7.52-7.44(m,1.8H),7.35-7.31(m,1H),7.29-7.21(m,1H),7.02-6.94(m,1H),6.16(s,0.2H),6.03(d,J＝2.4Hz,0.8H),4.21-4.08(m,0.2H),4.05-3.87(m,2.8H),3.73-3.64(m,1H),3.59(s,3H),3.06-2.87(m,3H),2.82-2.71(m,2H),2.59-2.47(m,2H),2.26-2.14(m,0.7H),2.04-1.78(m,2.6H),1.70-1.66(m,0.7H),1.47(s,9H)。
(trans)-甲基4-(2-溴-4-氟苯基)-6-(1-((3-(叔丁氧基羰基)环丁基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯240M的外消旋混合物(480mg，0.69mmol)通过手性制备型HPLC分离(分离条件：柱：Chiralpak ID 5μm 20*250mm；流动相：Hex:IPA:DEA＝50:50:0.3，以13mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到呈黄色固体的标题化合物240P(140mg，29％产率，100％立体纯)和呈黄色固体的240Q(150mg，31％产率，99.2％立体纯)。
化合物240P：LC-MS(ESI)：RT＝3.629min，C29H34BrFN4O6S2的计算质量696.1，m/z发现值699.2[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak ID 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:IPA:DEA＝50:50:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝8.996min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.50(d,J＝3.6Hz,0.8H),9.13(s,0.2H),8.01-7.98(m,1.8H),7.93(d,J＝3.2Hz,0.2H),7.58-7.55(m,1H),7.38-7.31(m,1H),7.30-7.21(m,1H),5.99(s,0.2H),5.90(d,J＝3.6Hz,0.8H),4.04-3.95(m,1H),3.80-3.70(m,3H),3.53(s,2.5H),3.52(s,0.5H),3.16-3.08(m,1H),2.92-2.83(m,2H),2.68-2.53(m,4H),2.07-1.88(m,1H),1.87-1.75(m,2H),1.61-1.58(m,1H),1.42(s,9H)。
化合物240Q：LC-MS(ESI)：RT＝3.794min，C29H34BrFN4O6S2的计算质量696.1，m/z发现值699.2[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak ID 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:IPA:DEA＝50:50:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝11.886min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.50(d,J＝3.6Hz,0.8H),9.12(s,0.2H),8.01-7.98(m,1.8H),7.93(d,J＝3.6Hz,0.2H),7.58-7.55(m,1H),7.38-7.31(m,1H),7.30-7.21(m,1H),5.99(s,0.2H),5.90(d,J＝3.6Hz,0.8H),4.04-3.96(m,1H),3.77-3.70(m,3H),3.53(s,2.5H),3.52(s,0.5H),3.16-3.08(m,1H),2.93-2.83(m,2H),2.66-2.51(m,4H),2.10-1.89(m,1H),1.87-1.75(m,2H),1.61-1.58(m,1H),1.42(d,J＝3.6Hz,9H)。
化合物242：甲基6-(1-((3-(叔丁氧基羰基)环丁基)磺酰基)-哌啶-4-基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯,1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.18(brs,0.3H),7.84-7.82(m,1H),7.52-7.50(m,0.7H),7.47-7.43(m,1H),7.31-7.28(m,1H),7.15-7.12(m,1H),6.98-6.91(m,1H),6.18(s,0.3H),6.08-6.04(m,0.7H),4.12-3.85(m,4H),3.74-3.66(m,1H),3.59(s,3H),3.37-3.09(m,1H),3.01-2.90(m,2H),2.82-2.73(m,2H),2.60-2.49(m,2H),2.25-2.13(m,1H),2.07-1.98(m,1H),1.91-1.85(m,1H),1.47(s,5H),1.46(s,4H)。
化合物242通过制备型HPLC使用C18柱纯化(乙腈:水＝80％至88％)，得到化合物242A和242B
化合物242A(trans)：LC-MS(ESI)：RT＝8.683min，C29H34ClFN4O6S2的计算质量652.2，m/z发现值653.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.52(d,J＝3.2Hz,0.9H),9.13(br s,0.1H),8.01-7.98(m,1.8H),7.93-7.92(m,0.2H),7.42(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),7.37-7.31(m,1H),7.23-7.18(m,1H),6.01(s,0.2H),5.92(d,J＝3.2Hz,0.8H),4.03-3.96(m,1H),3.77-3.70(m,3H),3.53-3.52(m,3H),3.15-3.08(m,1H),2.92-2.83(m,2H),2.61-2.53(m,4H),2.07-1.89(m,1.2H),1.86-1.72(m,2H),1.61-1.57(m,0.8H),1.43-1.42(m,9H)。
化合物242B(cis)：LC-MS(ESI)：RT＝1.27min，C29H34ClFN4O6S2的计算质量652.2，m/z发现值653.6[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.51(d,J＝3.2Hz,0.8H),9.12(br s,0.2H),8.00(s,1.8H),7.92(m,0.2H),7.42(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),7.38-7.31(m,1H),7.23-7.18(m,1H),6.02(s,0.2H),5.92(d,J＝3.6Hz,0.8H),3.99-3.90(m,1H),3.78-3.67(m,3H),3.53(s,3H),3.12-3.03(m,1H),2.89-2.80(m,2H),2.49-2.48(m,4H),2.08-1.90(m,1.2H),1.87-1.75(m,2H),1.62-1.59(m,0.8H),1.41(s,9H)。
化合物246：甲基6-(1-((1-(叔丁氧基羰基)氮杂环丁烷-3-基)磺酰基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝2.686min，C28H32ClF2N5O6S2的计算质量671.2，m/z发现值671.8[M+H]+。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.21(s,0.3H),7.86-7.84(m,1H),7.55(s,0.7H),7.49-7.45(m,1H),7.11-7.01(m,2H),6.19(s,0.3H),6.08(s,0.7H),4.35-4.13(m,4.2H),4.09-3.94(m,3.8H),3.61-3.60(m,3H),3.04-2.91(m,2H),2.20-2.16(m,1H),2.06-1.86(m,2H),1.74-1.70(m,1H),1.47(s,9H)。
化合物249：(trans)-甲基6-(4-(1-(叔丁氧基羰基)氮杂环丁烷-3-磺酰胺基)环己基)-4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝2.631min，C29H34ClF2N5O6S2的计算质量685.2，m/z发现值685.8[M+H]+。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.16(s,0.5H),7.84(d,J＝1.8Hz,1H),7.58-7.53(m,0.5H),7.50-7.46(m,0.5H),7.42(s,0.5H),7.09-7.01(m,2H),6.18(s,0.5H),6.06(s,0.5H),4.39-4.27(m,1H),4.22-4.17(m,4H),4.05-3.90(m,1.5H),3.84-3.67(m,0.5H),3.61(s,1.5H),3.60(s,1.5H),3.54-3.38(m,1H),2.31-1.91(m,4H),1.88-1.65(m,2H),1.58-1.51(m,2H),1.46(s,9H)。
化合物252：(trans)-甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(4-(3-甲氧基-3-氧代丙基磺酰胺基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝4.182min，C25H27ClF2N4O6S2的计算质量616.1，m/z发现值617.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.16(s,0.5H),7.83(d,J＝3.2Hz,1H),7.52(d,J＝3.2Hz,0.5H),7.46(d,J＝2.8Hz,0.5H),7.41(s,0.5H),7.07-6.98(m,2H),6.17(s,0.5H),6.04(d,J＝2.8Hz,0.5H),4.38-4.36(m,0.5H),4.31-4.29(m,0.5H),4.02-3.93(m,0.5H),3.75(s,3H),3.73-3.70(m,0.5H),3.60-3.59(m,3H),3.42-3.37(m,3H),2.89-2.84(m,2H),2.31-1.99(m,4H),1.93-1.72(m,1H),1.64-1.35(m,3H)。
(trans)-甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(4-(3-甲氧基-3-氧代丙基磺酰胺基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯252的外消旋混合物(200mg，0.320mmol)通过手性制备型SFC分离(柱：Chiralpak IA 5μm 20*250mm；流动相：CO2:MeOH:DEA＝65:35:0.3，以45g/min；柱温：39.9℃；波长：230nm，背压：100巴)，得到呈黄色固体的252X(80mg，90％纯度，40％产率，97.6％立体纯)和252Y(70mg，90％纯度，45％产率，94.2％立体纯)。
中间体252X：LC-MS(ESI)：RT＝2.933min，C25H27ClF2N4O6S2的计算质量616.1，m/z发现值617.1[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：CO2:MeOH:DEA＝65:35:0.2，以2.999mL/min；柱温：39.9℃；波长：230nm，背压：100巴，RT＝3.88min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.15(s,0.5H),7.84-7.82(m,1H),7.52(d,J＝3.2Hz,0.5H),7.46(d,J＝3.2Hz,0.5H),7.40(s,0.5H),7.07-6.98(m,2H),6.17(s,0.5H),6.04(d,J＝2.8Hz,0.5H),4.23-4.16(m,1H),4.01-3.93(m,0.5H),3.75(s,3H),3.73-3.69(m,0.5H),3.60-3.59(m,3H),3.44-3.35(m,3H),2.89-2.84(m,2H),2.29-2.14(m,2H),2.12-1.92(m,2H),1.90-1.64(m,2H),1.53-1.35(m,2H)。
中间体252Y：LC-MS(ESI)：RT＝3.842min，C25H27ClF2N4O6S2的计算质量616.1，m/z发现值617.1[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：CO2:MeOH:DEA＝65:35:0.2，以2.999mL/min；柱温：39.9℃；波长：230nm，背压：100巴，RT＝4.65min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.15(s,0.5H),7.83-7.82(m,1H),7.52(d,J＝3.2Hz,0.5H),7.46(d,J＝3.2Hz,0.5H),7.40(s,0.5H),7.07-6.98(m,2H),6.17(s,0.5H),6.04(d,J＝2.4Hz,0.5H),4.23-4.16(m,1H),4.01-3.93(m,0.5H),3.75(s,3H),3.73-3.70(m,0.5H),3.60-3.59(m,3H),3.45-3.36(m,3H),2.89-2.84(m,2H),2.29-2.14(m,2H),2.12-1.95(m,2H),1.93-1.64(m,2H),1.55-1.36(m,2H)。
化合物254：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(1-((1-环丙基-1H-吡唑-4-基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(4,5-二氢噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝4.252min，C26H26ClFN6O4S2的计算质量604.1，m/z发现值604.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.18(s,0.3H),7.83(s,2H),7.72-7.70(m,1H),7.54-7.53(m,0.7H),7.46-7.45(m,0.3H),7.43(s,0.7H),7.30-7.29(m,0.3H),7.25-7.23(m,0.7H),7.15-7.11(m,1H),6.97-6.88(m,1H),6.17(s,0.3H),6.05(s,0.7H),4.01-3.83(m,2H),3.77-3.65(m,2H),3.55(s,3H),2.45-2.27(m,3H),2.20-2.05(m,1H),2.02-1.88(m,1.5H),1.75-1.69(m,0.5H),1.24-1.18(m,2H),1.17-1.09(m,2H)。
化合物255：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(-1-(氧杂环丁烷-3-基磺酰基)吡咯烷-3-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝3.777min，C22H22ClFN4O5S2的计算质量540.1，m/z发现值541.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.63(s,1H),8.02(s,2H),7.44-7.41(m,1H),7.39-7.35(m,1H),7.23-7.18(m,1H),5.94(s,1H),4.97-4.90(m,1H),4.88-4.79(m,4H),4.37-4.28(m,1H),3.63-3.52(m,6H),3.38-3.32(m,1H),2.18-2.07(m,1H),2.05-1.96(m,1H)。
化合物256A：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(-1-(丙基磺酰基)吡咯烷-3-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯,LC-MS(ESI)：RT＝4.129min，C22H24ClFN4O4S2的计算质量526.1，m/z发现值527.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.62(s,1H),8.02(s,2H),7.44-7.41(m,1H),7.39-7.35(m,1H),7.24-7.19(m,1H),5.94(s,1H),4.41-4.33(m,1H),3.63-3.52(m,6H),3.39-3.33(m,1H),3.16-3.12(m,2H),2.23-2.14(m,1H),2.02(br s,1H),1.81-1.71(m,2H),1.01(t,J＝7.2Hz,3H)。
化合物256D：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(-1-(丙基磺酰基)吡咯烷-3-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝4.098min，C22H24ClFN4O4S2的计算质量526.1，m/z发现值527.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.67(d,J＝2.8Hz,0.9H),9.30(s,0.1H),8.05-8.02(m,1.8H),7.99-7.98(m,0.1H),7.94-7.93(m,0.1H),7.45-7.42(m,1H),7.39-7.36(m,1H),7.24-7.20(m,1H),6.02(s,0.1H),5.93(d,J＝2.8Hz,0.9H),4.61-4.54(m,0.1H),4.42-4.34(m,0.9H),3.62-3.36(m,7H),3.20-3.04(m,2H),2.35-2.26(m,1H),2.18-2.10(m,1H),1.78-1.68(m,2H),1.03-0.95(m,3H)。
化合物266：甲基6-(1-(N-(叔丁氧基羰基)氨磺酰基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯,LC-MS(ESI)：RT＝2.586min，C25H29ClFN5O6S2的计算质量613.1，m/z发现值614.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.95(s,1H),9.55(d,J＝3.6Hz,0.8H),9.11(s,0.2H),8.01(s,2H),7.44-7.35(m,2H),7.23-7.19(m,1H),6.02(s,0.2H),5.92(d,J＝3.6Hz,0.8H),3.80-3.62(m,3H),3.52(s,3H),2.90-2.82(m,2H),1.96-1.79(m,3H),1.65-1.62(m,1H),1.44(s,9H)。
化合物269A和269B：(trans)-乙基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(1-((3-甲基-3-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)羰基)环丁基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯和(cis)-乙基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(1-((3-甲基-3-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)羰基)环丁基)-磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物269A：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.10(s,0.4H),7.76(d,J＝3.2Hz,1H),7.47(d,J＝3.2Hz,0.6H),7.39(d,J＝3.2Hz,0.4H),7.29(d,J＝2.4Hz,0.6H),7.02-6.98(m,2H),6.13(s,0.4H),6.02(d,J＝2.8Hz,0.6H),4.19-4.14(m,2H),4.03-3.76(m,6H),2.87-2.80(m,2H),2.70-2.66(m,2H),2.45-2.35(m,2H),2.18-2.09(m,0.5H),1.98-1.58(m,3.5H),1.39(s,2H),1.38(s,1H),1.07-1.03(m,3H),0.98-0.94(m,2H),0.00(s,9H)
化合物269B：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.12(s,0.4H),7.78-7.77(m,1H),7.48(d,J＝2.8Hz,0.6H),7.41(d,J＝3.2Hz,0.4H),7.30(d,J＝2.0Hz,0.6H),7.04-7.01(m,2H),6.15(s,0.4H),6.04(d,J＝2.8Hz,0.6H),4.17-4.13(m,2H),4.01-3.84(m,5H),3.75-3.65(m,1H),2.96-2.78(m,4H),2.20-2.11(m,3H),2.01-1.62(m,3H),1.43(s,2H),1.42(s,1H),1.11-1.04(m,3H),0.99-0.94(m,2H),0.00(s,9H)。
化合物271A和化合物271B：(trans)-乙基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(1-((3-甲基-3-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)羰基)环丁基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯和(cis)-甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(1-((3-甲基-3-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)羰基)-环丁基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物271A：(trans)-乙基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(1-((3-甲基-3-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)羰基)环丁基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯,中间体EO8495_1034.1A：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.13(br s,0.2H),7.83(d,J＝2.8Hz,1H),7.52(d,J＝3.2Hz,0.7H),7.45(d,J＝3.2Hz,0.3H),7.36-7.33(m,0.8H),7.31-7.26(m,1H),7.15-7.11(m,1H),6.98-6.89(m,1H),6.20(s,0.3H),6.09(d,J＝2.4Hz,0.7H),4.25-4.21(m,2H),4.03(q,J＝7.2Hz,2H),3.98-3.80(m,4H),2.95-2.73(m,4H),2.51-2.44(m,2H),2.24-2.18(m,0.5H),2.07-2.00(m,1H),1.94-1.85(m,1.5H),1.78-1.66(m,1H),1.46(s,2.5H),1.45(s,0.5H),1.12-1.08(m,3H),0.87-0.86(m,2H),0.07(s,9H)。
化合物271B：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.09(s,0.2H),7.78-7.77(m,1H),7.46(d,J＝2.8Hz,0.7H),7.39(d,J＝3.2Hz,0.3H),7.29(br s,0.8H),7.26-7.22(m,1H),7.10-7.07(m,1H),6.93-6.88(m,1H),6.15(s,0.3H),6.04(d,J＝2.4Hz,0.7H),4.17-4.14(m,2H),4.01-3.85(m,4H),3.73-3.68(m,1H),2.97-2.83(m,4H),2.19-2.11(m,3H),2.00-1.82(m,3H),1.43(s,2.5H),1.42(s,0.5H),1.09-1.03(m,3H),0.99-0.94(m,2H),0.01(s,9H)。
化合物273A和273B：(trans)-甲基4-(2-氯-3-氟苯基)-6-(1-((3-甲基-3-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)羰基)环丁基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯和(cis)-甲基4-(2-氯-3-氟苯基)-6-(1-((3-甲基-3-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)羰基)环丁基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物273A：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.10(s,0.2H),7.77(d,J＝3.2Hz,1H),7.46(d,J＝3.2Hz,1H),7.38(s,0.8H),7.16-7.11(m,1H),7.10-6.98(m,2H),6.18(s,0.3H),6.05(d,J＝2.8Hz,0.7H),4.18-4.14(m,2H),3.95-3.73(m,4H),3.53(s,2H),3.52(s,1H),2.90-2.82(m,2H),2.76-2.70(m,2H),2.43-2.42(m,2H),2.17-2.10(m,1H)1.98-1.61(m,3H),1.39(s,2H),1.38(s,1H),0.98-0.94(m,2H),0.00(s,9H)
化合物273B：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.13(s,0.2H),7.78-7.77m,1H),7.46(d,J＝3.2Hz,1H),7.40(d,J＝2.8Hz,0.8H),7.21-7.14(m,1H),7.06-7.02(m,2H),6.20(s,0.3H),6.07(d,J＝3.2Hz,0.7H),4.17-4.13(m,2H),3.95-3.85(m,3H),3.73-3.69(m,1H),3.54(s,2H),3.53(s,1H),2.97-2.84(m,4H),2.19-2.12(m,2H),2.00-1.65(m,4H),1.43(s,3H),0.99-0.94(m,2H),0.01(s,9H)
化合物277C和277D：(trans)-甲基4-(2-溴-3-氟苯基)-6-(1-((3-甲基-3-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)羰基)环丁基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯和(cis)-甲基4-(2-溴-3-氟苯基)-6-(1-((3-甲基-3-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)羰基)环丁基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物277C：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.16(s,0.2H),7.84-7.81(m,1H),7.53-7.49(m,1.7H),7.46-7.45(m,0.2H),7.28-7.27(m,0.8H),7.19-7.00(m,2H),6.24(s,0.2H),6.10(s,0.8H),4.34-4.25(m,2H),4.03-3.80(m,4H),3.59(s,3H),2.96-2.76(m,4H),2.54-2.45(m,2H),2.18-2.09(m,1H),2.03-1.85(m,2H),1.73-1.67(m,1H),1.49-1.40(m,3H),1.05-1.01(m,2H),0.07(s,9H)。
化合物277D：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.12(s,0.2H),7.79-7.75(m,1H),7.49-7.41(m,2H),7.25-7.22(m,0.8H),7.05-6.95(m,2H),6.19(s,0.3H),6.06-6.02(m,0.7H),4.17-4.13(m,2H),3.99-3.66(m,4H),3.53(s,3H),2.98-2.80(m,4H),2.20-2.10(m,3H),1.94-1.60(m,3H),1.43(s,3H),0.99-0.95(m,2H),0.03(s,9H)。
化合物281C和281D：(trans)-乙基4-(2-溴-4-氟苯基)-6-(1-((3-甲基-3-(((三甲基甲硅烷基)乙氧基)羰基)环丁基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯和(cis)-乙基4-(2-溴-4-氟苯基)-6-(1-((3-甲基-3-(((三甲基甲硅烷基)乙氧基)羰基)环丁基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物281C：LC-MS(ESI)：RT＝2.24min，C32H42BrFN4O6S2Si的计算质量768.2，m/z发现值770.8[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.13(s,0.2H),7.83(d,J＝3.2Hz,1H),7.52(d,J＝2.8Hz,0.8H),7.45(d,J＝3.2Hz,0.3H),7.39(d,J＝2.0Hz,0.7H),7.33-7.29(m,2H),7.03-6.94(m,1H),6.18(s,0.2H),6.06(d,J＝2.4Hz,0.8H),4.25-4.20(m,2H),4.06-3.83(m,6H),2.94-2.77(m,4H),2.52-2.46(m,2H),2.24-2.18(m,0.8H),2.08-2.01(m,1H),1.99-1.95(m,0.2H),1.92-1.89(m,1H),1.84-1.77(m,0.3H),1.70-1.66(m,0.7H),1.45(s,3H),1.13-1.08(m,3H),1.05-1.01(m,2H),0.07(s,9H)。
化合物281D：LC-MS(ESI)：RT＝2.16min，C32H42BrFN4O6S2Si的计算质量768.2，m/z发现值768.8[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.13(s,0.2H),7.83-7.81(m,1H),7.51(d,J＝3.2Hz,0.8H),7.44(d,J＝3.2Hz,0.3H),7.39(d,J＝2.4Hz,0.7H),7.32-7.28(m,2H),7.02-6.94(m,1H),6.17(s,0.3H),6.05(d,J＝2.4Hz,0.7H),4.22-4.18(m,2.2H),4.05-3.90(m,4.8H),3.77-3.73(m,1H),3.01-2.88(m,4H),2.24-2.16(2.8H),2.07-2.06(m,0.2H),2.01-2.00(m,0.8H),1.98-1.96(m,0.2H),1.92-1.88(m,1H),1.83-1.77(m,0.2H),1.69-1.65(m,0.8H),1.47(s,3H),1.14-1.07(m,3H),1.03-0.99(m,2H),0.04(s,9H)。
化合物298：(trans)-甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-2-(3,5-二氟吡啶-2-基)-6-4-(甲基磺酰胺基)环己基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝3.182min，C24H23ClF4N4O4S的计算质量574.1，m/z发现值575.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.34-8.31(m,1H),7.34-7.29(m,1H),7.07-6.98(m,2H),6.20(s,1H),4.42(d,J＝7.6Hz,1H),3.96-3.90(m,1H),3.60(s,3H),3.48-3.39(m,1H),3.03(s,3H),2.27-2.17(m,3H),2.09-2.06(m,1H),1.94-1.91(m,1H),1.83-1.62(m,2H),1.57-1.45(m,2H)。
(trans)-甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-2-(3,5-二氟吡啶-2-基)-6-4-(甲基磺酰胺基)环己基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯298的外消旋混合物(120mg，93.5％纯度，0.195mmol)通过手性制备型HPLC分离(分离条件：柱：Chiralpak IC 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝50:50:0.3，以10mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到呈黄色固体的标题化合物298A(17.3mg，99.9％纯度，15％产率，100％立体纯)和298B(17.3mg，99.8％纯度，15％产率，99.7％立体纯)。
化合物298A：LC-MS(ESI)：RT＝2.652min，C24H23ClF4N4O4S的计算质量574.1，m/z发现值575.0[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝50:50:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝7.634min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.23(s,0.7H),9.15(s,0.3H),8.57(s,1H),8.08-8.03(m,1H),7.48-7.42(m,1H),7.21-7.01(m,2H),6.03(s,0.7H),5.92(s,0.3H),3.85-3.81(m,0.7H),3.51(s,3H),3.20-3.17(m,1H),3.08(br s,0.3H),2.92(s,3H),2.02-1.99(m,2H),1.85-1.71(m,4H),1.36-1.23(m,2H)。
化合物298B：LC-MS(ESI)：RT＝2.650min，C24H23ClF4N4O4S的计算质量574.1，m/z发现值575.0[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝50:50:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝9.413min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.23(s,0.7H),9.15(s,0.3H),8.57(s,1H),8.06(t,J＝8.8Hz,1H),7.48-7.42(m,1H),7.22-7.02(m,2H),6.03(s,0.7H),5.92(s,0.3H),3.86-3.81(m,0.7H),3.51(s,3H),3.20-3.18(m,1H),3.08(br s,0.3H),2.92(s,3H),2.03-2.00(m,2H),1.85-1.71(m,4H),1.36-1.26(m,2H)。
化合物304：甲基6-(1-((1,4-二氧杂螺[4.5]癸-2-基甲基)磺酰基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
向甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯化合物99(434mg，1.00mmol)在二氯甲烷(15mL)中的溶液中添加三乙胺(202mg，2.00mmol)和1,4-二氧杂螺[4.5]癸-2-基甲烷磺酰氯(382mg，1.5mmol)。在室温搅拌2小时后，将混合物用二氯甲烷(50mL)稀释，用水(100mL)和盐水(100mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝10:1至3:1)纯化，得到小的极性级分，将其进一步通过C18柱(乙腈:水＝80％至88％)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物(110mg，20％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝1.97min，C29H34ClFN4O6S2的计算质量652.2，m/z发现值652.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.18(s,0.2H),7.86-7.82(m,1H),7.52(d,J＝3.2Hz,0.8H),7.47-7.42(m,1H),7.31-7.24(m,1H),7.17-7.11(m,1H),6.99-6.89(m,1H),6.19(s,0.3H),6.07(d,J＝2.4Hz,0.7H),4.62-4.52(m,1H),4.21-4.11(m,0.3H),4.04-3.75(m,3.7H),3.62-3.57(m,3H),3.41-3.25(m,2H),3.13-2.88(m,3H),2.31-2.20(m,0.7H),2.13-2.04(m,1H),1.98-1.84(m,1.3H),1.76-1.69(m,1H),1.65-1.60(m,8H),1.45-1.39(m,2H)。
化合物304(110mg，0.169mmol)通过手性制备型HPLC分离(分离条件：柱：Chiralpak IC 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝60:40:0.3，以12mL/min；波长：214nm)，得到呈黄色固体的304A(45mg，41％产率，100％立体纯)和304B(45mg，45％产率，100％立体纯)。
化合物304A：LC-MS(ESI)：RT＝2.00min，C29H34ClFN4O6S2的计算质量652.2，m/z发现值652.8[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝60:40:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝9.430min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.18(s,0.3H),7.85-7.81(m,1H),7.52(d,J＝3.2Hz,0.7H),7.47-7.42(m,1H),7.31-7.24(m,1H),7.17-7.12(m,1H),7.00-6.89(m,1H),6.19(s,0.3H),6.07(d,J＝2.8Hz,0.7H),4.61-4.51(m,1H),4.26-4.14(m,1.3H),4.02-3.79(m,2.7H),3.63-3.57(m,3H),3.35-3.26(m,1H),3.13-2.92(m,4H),2.32-2.21(m,0.7H),2.13-2.02(m,1H),1.99-1.81(m,1.6H),1.76-1.69(m,0.7H),1.65-1.55(m,8H),1.46-1.38(m,2H)。
化合物304B：LC-MS(ESI)：RT＝2.00min，C29H34ClFN4O6S2的计算质量652.2，m/z发现值652.8[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝60:40:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝11.231min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.18(s,0.3H),7.83(d,J＝2.8Hz,1H),7.52(d,J＝2.8Hz,0.7H),7.47-7.41(m,1H),7.31-7.24(m,1H),7.17-7.11(m,1H),7.00-6.89(m,1H),6.19(s,0.3H),6.07(d,J＝2.8Hz,0.7H),4.62-4.52(m,1H),4.26-4.13(m,1.3H),4.05-3.79(m,2.7H),3.63-3.57(m,3H),3.35-3.25(m,1H),3.12-2.87(m,4H),2.31-2.20(m,0.7H),2.14-2.03(m,1H),1.99-1.82(m,1.6H),1.76-1.69(m,0.7H),1.65-1.56(m,8H),1.46-1.38(m,2H)。
化合物308M和308N：(trans)-甲基6-(1-((3-(叔丁氧基羰基)环丁基)磺酰基)哌啶-4-基)-4-(3,4-二氟-2-甲基苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯和(cis)-甲基6-(1-((3-(叔丁氧基羰基)环丁基)磺酰基)哌啶-4-基)-4-(3,4-二氟-2-甲基苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
分离条件：硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝5:1至2:1)，得到小的极性级分，将其进一步通过C18柱(乙腈:水＝70％至75％)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物308M(80mg，23％产率)和呈黄色固体的308N(70mg，22％产率)。
中间体308M：LC-MS(ESI)：RT＝4.436min，C30H36F2N4O6S2的计算质量650.2，m/z发现值651.3[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.15(s,0.6H),7.82-7.80(m,1H),7.52(d,J＝3.2Hz,0.4H),7.43(d,J＝3.2Hz,0.6H),7.29-7.27(m,0.4H),7.08-7.05(m,0.7H),6.99-6.94(m,0.3H),6.92-6.87(m,1H),5.93(s,0.6H),5.84(d,J＝2.0Hz,0.4H),4.22-4.14(m,0.5H),4.04-3.77(m,3.5H),3.59(s,1.8H),3.58(s,1.2H),3.22-3.13(m,1H),2.98-2.85(m,2H),2.82-2.71(m,2H),2.62-2.53(m,3.8H),2.42(d,J＝2.4Hz,1.2H),2.20-1.73(m,4H),1.48(s,5H),1.47(s,4H)。
中间体308N：LC-MS(ESI)：RT＝3.620min，C30H36F2N4O6S2的计算质量650.2，m/z发现值650.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.17(s,0.6H),7.81(d,J＝3.2Hz,1H),7.53(d,J＝2.4Hz,0.4H),7.43(d,J＝3.2Hz,0.6H),7.29-7.28(m,0.4H),7.10-7.05(m,0.7H),7.00-6.94(m,0.3H),6.91-6.87(m,1H),5.93(s,0.6H),5.84(d,J＝2.0Hz,0.4H),4.23-4.15(m,0.5H),4.06-3.90(m,2H),3.84-3.76(m,0.5H),3.72-3.64(m,1H),3.59(s,1.8H),3.58(s,1.2H),3.04-2.86(m,3H),2.81-2.70(m,2H),2.58-2.47(m,4H),2.42(d,J＝2.0Hz,1H),2.18-1.76(m,4H),1.46(s,4H),1.45(s,5H)。
化合物310：甲基6-(1-((3-(叔丁氧基羰基)环戊基)磺酰基)-哌啶-4-基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝5.260min和5.392min，C30H36ClFN4O6S2的计算质量666.2，m/z发现值667.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.52(d,J＝3.6Hz,0.8H),9.15(s,0.2H),8.01-7.98(m,1.8H),7.93(d,J＝3.2Hz,0.2H),7.44-7.31(m,2H),7.23-7.17(m,1H),6.02(s,0.2H),5.92(d,J＝3.6Hz,0.8H),4.00-3.91(m,0.2H),3.79-3.69(m,3.8H),3.53(s,2.4H),3.52(s,0.6H),2.95-2.72(m,3H),2.33-1.59(m,10H),1.41-1.40(m,9H)。
甲基6-(1-((3-(叔丁氧基羰基)环戊基)磺酰基)-哌啶-4-基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯310的外消旋混合物(500mg，0.750mmol)通过手性制备型HPLC分离(柱：Chiralpak IB 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝90:10:0.3，以15mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到呈黄色固体的标题化合物310X(233mg，47％产率)和310Y(183mg，37％产率)。
中间体310X：LC-MS(ESI)：RT＝4.482min，C30H36ClFN4O6S2的计算质量666.2，m/z发现值667.3[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IB 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝85:15:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝7.745和7.932min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.52(d,J＝3.6Hz,0.8H),9.15(s,0.2H),8.01-7.92(m,2H),7.43-7.34(m,2H),7.23-7.18(m,1H),6.02(s,0.2H),5.92(d,J＝3.6Hz,0.8H),4.00-3.93(m,0.2H),3.79-3.72(m,3.8H),3.53(s,2.4H),3.52(s,0.6H),2.96-2.81(m,3H),2.18-1.59(m,10H),1.41-1.40(m,9H)。
中间体310Y：LC-MS(ESI)：RT＝4.285min，C30H36ClFN4O6S2的计算质量666.2，m/z发现值667.2[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IB 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝85:15:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝9.191和9.699min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.52(d,J＝3.6Hz,0.8H),9.16(s,0.2H),8.00-7.92(m,2H),7.43-7.31(m,2H),7.23-7.18(m,1H),6.02(s,0.2H),5.92(d,J＝3.6Hz,0.8H),4.00-3.93(m,0.2H),3.79-3.67(m,3.8H),3.53(s,2.4H),3.52(s,0.6H),2.95-2.86(m,2H),2.80-2.72(m,1H),2.33-2.24(m,1H),2.05-1.76(m,8H),1.62-1.56(m,1H),1.41-1.40(m,9H)。
化合物312：甲基6-(1-((4-(叔丁氧基羰基)环己基)磺酰基)-哌啶-4-基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝2.251min，C31H38ClFN4O6S2的计算质量680.2，m/z发现值681.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.51(s,0.8H),9.15(s,0.2H),8.01-7.92(m,2H),7.44-7.31(m,2H),7.23-7.17(m,1H),6.02(s,0.2H),5.92(d,J＝3.6Hz,0.8H),4.01-3.93(m,0.2H),3.79-3.72(m,2.8H),3.53(s,2.4H),3.52(s,0.6H),3.22-3.11(m,1H),3.02-2.71(m,2H),2.58-2.54(m,1H),2.23-1.75(m,7.7H),1.64-1.37(m,13.3H)。
甲基6-(1-((4-(叔丁氧基羰基)环己基)磺酰基)-哌啶-4-基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯化合物312的外消旋混合物(160mg，0.240mmol)通过手性制备型HPLC分离(柱：Chiralpak IC 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝50:50:0.3，以10mL/min；温度：30℃；波长：230nm)，得到呈黄色固体的标题化合物化合物312X(40mg，58％产率，100％立体纯)和化合物312Y(45mg，28％产率，100％立体纯)。
中间体化合物312X(cis)：LC-MS(ESI)：RT＝3.906min，C31H38ClFN4O6S2的计算质量680.2，m/z发现值681.1[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IC 5μm4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝50:50:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝6.838min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.51(d,J＝3.2Hz,0.7H),9.15(s,0.3H),8.00(s,1.7H),7.93(s,0.3H),7.43-7.34(m,2H),7.23-7.18(m,1H),6.01(s,0.3H),5.92(d,J＝3.2Hz,0.7H),3.96(br s,0.3H),3.82-3.73(m,2.7H),3.53(s,3H),3.22-3.17(m,1H),2.93(q,J＝12.0Hz,2H),2.55-2.51(m,1H),2.07-1.74(m,7.3H),1.64-1.51(m,4.7H),1.42(s,9H)。
中间体化合物312Y(cis)：LC-MS(ESI)：RT＝5.024min，C31H38ClFN4O6S2的计算质量680.2，m/z发现值681.1[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IC 5μm4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝50:50:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝8.891min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.52(d,J＝3.6Hz,0.8H),9.15(s,0.2H),8.00-7.92(m,2H),7.44-7.31(m,2H),7.23-7.17(m,1H),6.02(s,0.2H),5.92(d,J＝3.6Hz,0.8H),4.03-3.93(m,0.2H),3.79-3.72(m,2.8H),3.53(s,2.4H),3.52(s,0.6H),3.17-3.11(m,1H),3.01-2.95(m,2H),2.23-2.16(m,1H),2.09-1.74(m,7H),1.61-1.51(m,1H),1.48-1.33(m,13H)。
化合物318M和318N：(trans)-乙基6-(1-(3-(叔丁氧基羰基)环丁基)磺酰基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-3-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯和(cis)-乙基6-(1-(3-(叔丁氧基羰基)环丁基)磺酰基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-3-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
硅胶柱色谱法纯化(石油醚:乙酸乙酯＝6:1至3:1)，得到部分1和部分2。部分1进一步通过制备型HPLC纯化(柱：Gilson Xbrige C18(5μm 19*150mm)，流动相A：水(0.1％碳酸氢铵)，流动相B：乙腈，UV：214nm，流速：15mL/min，梯度：55％-95％(％B))，得到呈黄色固体的标题化合物318M(380mg，32％产率)。部分2进一步通过制备型HPLC纯化(柱：GilsonXbrige C18(5μm 19*150mm)，流动相A：水(0.1％碳酸氢铵)，流动相B：乙腈，UV：214nm，流速：15mL/min，梯度：60％-95％(％B))，得到呈黄色固体的标题化合物318N(330mg，28％产率)。
化合物318M：LC-MS(ESI)：RT＝3.959min，C30H36ClFN4O6S2的计算质量666.2，m/z发现值667.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.56(d,J＝3.2Hz,0.8H),9.08(s,0.2H),8.00-7.98(m,1.8H),7.93(d,J＝3.2Hz,0.2H),7.40-7.29(m,2H),7.23-7.18(m,1H),6.09(s,0.2H),5.99(d,J＝3.2Hz,0.8H),4.04-3.92(m,3.2H),3.78-3.71(m,2.8H),3.16-3.08(m,1H),2.91-2.83(m,2H),2.61-2.53(m,4H),1.99-1.76(m,3H),1.62-1.59(m,1H),1.43(s,1.8H),1.42(s,7.2H),1.08-1.01(m,3H)。
化合物318N：LC-MS(ESI)：RT＝3.654min，C30H36ClFN4O6S2的计算质量666.2，m/z发现值667.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.93(d,J＝2.8Hz,0.3H),7.88(d,J＝2.8Hz,0.7H),7.75(d,J＝3.2Hz,0.7H),7.73(d,J＝3.6Hz,0.3H),7.32-7.11(m,3H),6.21(s,0.3H),6.14(s,0.7H),4.07-4.00(m,2H),3.97-3.82(m,4H),3.16-3.06(m,1H),3.00-2.89(m,2H),2.68-2.50(m,4H),2.16-1.85(m,3.3H),1.71-1.62(m,0.7H),1.46(s，6.3H),1.45(s,2.7H),1.13-1.09(m,3H)。
(trans)-乙基6-(1-(3-(叔丁氧基羰基)环丁基)磺酰基)-哌啶-4-基)-4-(2-氯-3-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯318M的外消旋混合物(200mg，0.30mmol)通过手性制备型HPLC分离(柱：Chiralpak IE 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH＝50:50，以10mL/min；温度：30℃；波长：230nm)，得到呈黄色固体的标题化合物318X(85mg，43％产率，100％立体纯)和318Y(80mg，46％产率，100％立体纯)。
中间体318X：LC-MS(ESI)：RT＝3.997min，C30H36ClFN4O6S2的计算质量666.2，m/z发现值667.1[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IE 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝50:50，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：254nm；RT＝8.184min)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.89(s,1H),7.74(d,J＝2.8Hz,1H),7.30-7.14(m,3H),6.20(s,0.3H),6.14(s,0.7H),4.06-3.86(m,6H),3.31-3.14(m,1H),3.00-2.90(m,2H),2.73-2.58(m,4H),2.14-1.86(m,3.3H),1.80-1.61(m,0.7H),1.47(s,9H),1.11(t,J＝6.8Hz,3H)。
中间体318Y：LC-MS(ESI)：RT＝3.992min，C30H36ClFN4O6S2的计算质量666.2，m/z发现值667.1[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IE 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝50:50，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm；RT＝9.519min)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.93(s,0.2H),7.88(d,J＝2.4Hz,0.8H),7.30-7.14(m,3H),6.21(s,0.2H),6.14(s,0.8H),4.06-3.86(m,6H),3.20-3.14(m,1H),3.00-2.90(m,4H),2.70-2.62(m,4H),2.15-1.79(m,3.2H),1.72-1.65(m,0.8H),1.47(s,9H),1.11(t,J＝7.2Hz,3H)。
化合物320A和320B：(trans)-乙基4-(2-氯-3-氟苯基)-6-(1-((3-甲基-3-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)羰基)环丁基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯和(cis)乙基4-(2-氯-3-氟苯基)-6-(1-((3-甲基-3-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)羰基)环丁基)-磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
分离条件：通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝5:1)纯化，得到呈黄色固体的标题320A(301mg，根据1H NMR纯度为95％，37％产率)和320B(300mg，根据1H NMR纯度为95％，37％产率)。
化合物320A：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.15(s,0.3H),7.83(d,J＝3.2Hz,1H),7.52(d,J＝2.8Hz,0.7H),7.45(d,J＝3.2Hz,0.3H),7.39(s,0.7H),7.25-7.17(m,1H),7.14-7.03(m,2H),6.27(s,0.3H),6.15(d,J＝2.8Hz,0.7H),4.25-4.21(m,2H),4.07-4.00(m,2H),3.97-3.80(m,4H),2.95-2.87(m,2H),2.83-2.74(m,2H),2.52-2.44(m,2H),2.25-2.15(m,1H),2.09-2.02(m,1H),1.97-1.68(m,2H),1.48-1.46(m,3H),1.13-1.08(m,3H),1.05-1.01(m,2H),0.07(s,9H)。
化合物320B：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.16(s,0.3H),7.83(d,J＝3.2Hz,1H),7.52(d,J＝3.2Hz,0.7H),7.45(d,J＝2.8Hz,0.3H),7.38(s,0.7H),7.25-7.14(m,1H),7.09-7.03(m,2H),6.27(s,0.3H),6.15(d,J＝2.8Hz,0.7H),4.23-4.19(m,2H),4.07-3.91(m,5H),3.81-3.72(m,1H),3.02-2.86(m,4H),2.25-2.19(m,2H),2.16-1.97(m,2H),1.93-1.67(m,2H),1.48(s,2H),1.47(s,1H),1.13-1.07(m,3H),1.03-1.00(m,2H),0.05(s,9H)。
化合物322C和322D：(trans)-甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(1-((3-甲基-3-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)羰基)环丁基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯和(cis)-甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(1-((3-甲基-3-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)羰基)环丁基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
分离条件：硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝5:1)，得到呈黄色固体的标题化合物322C(230mg，90％纯度，22％产率)和标题化合物322D(370mg，90％纯度，35％产率)。
化合物322C：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.12(s,0.3H),7.76(d,J＝3.2Hz,1H),7.46(d,J＝3.2Hz,0.7H),7.40(d,J＝3.2Hz,0.3H),7.36(s,0.7H),7.34(s,0.4H),7.02-6.97(m,2H),6.11(s,0.4H),5.99(s,0.6H),4.19-4.17(m,2H),4.06-3.82(m,4H),3.54(s,2.1H),3.52(s,0.9H),2.85-2.80(m,2H),2.76-2.70(m,2H),2.45-2.39(m,2H),2.12-2.03(m,1H),1.98-1.57(m,3H),1.39(s,3H),0.99-0.93(m,2H),0.03(s,9H)。
322D：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.17(s,0.3H),7.75(s,1H),7.48(s,0.7H),7.40(s,0.6H),7.37(s,0.4H),7.01-6.98(m,2H),6.12-6.01(m,1H),4.17-4.10(m,2H),3.95-3.88(m,3H),3.85-3.80(m,1H),3.68(s,3H),2.97-2.84(m,4H),2.19-2.11(m,3H),1.98-1.57(m,3H),1.42(s,3H),0.99-0.94(m,2H),0.03(s,9H)。
化合物324：甲基6-(1-((1H-吡唑-4-基)磺酰基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝3.749min，C23H21ClF2N6O4S2的计算质量582.1，m/z发现值582.8[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.77(s,1H),9.63(d,J＝3.6Hz,0.8H),9.23(s,0.2H),8.39(s,1H),8.04-7.99(m,1.8H),7.94(d,J＝3.6Hz,0.2H),7.85(s,1H),7.49-7.40(m,1H),7.23-7.12(m,1H),6.00(s,0.2H),5.91(d,J＝3.6Hz,0.8H),3.80-3.64(m,2.2H),3.56-3.50(m,0.8H),3.48(s,2.4H),3.47(s,0.6H),2.29-2.16(m,2.2H),2.10-1.98(m,1H),1.95-1.84(m,1H),1.82-1.73(m,1H),1.67-1.60(m,0.8H)。
化合物328F和328H：(trans)-乙基6-(1-((3-(叔丁氧基羰基)环丁基)磺酰基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯和(cis)-乙基6-(1-((-3-(叔丁氧基羰基)环丁基)磺酰基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物328F：LC-MS(ESI)：RT＝4.330min，C30H36ClFN4O6S2的计算质量666.2，m/z发现值667.1[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IE 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝70:30，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝15.325min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.49(s,0.8H),9.07(br s,0.2H),8.00-7.98(m,2H),7.43-7.41(m,1H),7.38-7.34(m,1H),7.23-7.18(m,1H),6.00(br s,0.2H),5.93(s,0.8H),4.02-3.95(m,3H),3.77-3.71(m,3H),3.17-3.08(m,1H),2.91-2.83(m,2H),2.60-2.51(m,4H),1.96-1.93(m,1H),1.84-1.76(m,2H),1.61-1.58(m,1H),1.42(s,9H),1.07(t,J＝7.2Hz,3H)。
化合物328H：LC-MS(ESI)：RT＝4.029min，C30H36ClFN4O6S2的计算质量666.2，m/z发现值667.1[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝70:30，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝7.610min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.50(d,J＝3.6Hz,0.8H),9.06(s,0.2H),8.00-7.98(m,1.8H),7.93-7.92(m,0.2H),7.43-7.40(m,1H),7.38-7.34(m,1H),7.24-7.19(m,1H),6.03(s,0.2H),5.93(d,J＝3.6Hz,0.8H),4.00-3.93(m,3H),3.73-3.67(m,3H),3.10-3.05(m,1H),2.88-2.78(m,2H),2.48-2.40(m,4H),2.04-1.93(m,1H),1.90-1.82(m,2H),1.62-1.57(m,1H),1.41(s,9H),1.09-1.03(m,3H)。
化合物330P和330Q：(trans)-甲基6-(1-((3-(叔丁氧基羰基)环丁基)磺酰基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-3-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯和(cis)-甲基6-(1-((3-(叔丁氧基羰基)环丁基)磺酰基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-3-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
分离条件：硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝5:1至3:1)，随后是C18柱(乙腈:水＝30％至90％)，得到标题化合物330P(85mg，98.5％纯度，28％产率)和另一种粗产物，将所述粗产物进一步通过制备型HPLC纯化(柱：Waters Kinete EVO C18(5μm,21.2*150mm)流动相A：水(0.1％碳酸氢铵)，流动相B：乙腈，UV：214nm，流速：15mL/min，40％-80％(％B))，得到呈黄色固体的330Q(75mg，99.5％纯度，25％产率)。
化合物330P：LC-MS(ESI)：RT＝4.162min，C29H34ClFN4O6S2的计算质量652.2，m/z发现值652.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.57(s,0.8H),9.15(s,0.2H),8.04-7.93(m,2H),7.41-7.27(m,2H),7.24-7.15(m,1H),6.07(s,0.2H),5.98(s,0.8H),4.05-3.93(m,1.2H),3.82-3.66(m,2.8H),3.52(s,3H),3.18-3.07(m,1H),2.95-2.81(m,2H),2.63-2.50(m,4H),2.12-2.03(m,0.2H),2.01-1.90(m,1H),1.88-1.70(m,2H),1.65-1.55(m,0.8H),1.42(s,9H)。
化合物330Q：LC-MS(ESI)：RT＝4.297min，C29H34ClFN4O6S2的计算质量652.2，m/z发现值653.3[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.58(d,J＝3.6Hz,0.8H),9.16(s,0.2H),8.01(s,1.6H),7.99(d,J＝2.8Hz,0.2H),7.93(d,J＝2.8Hz,0.2H),7.42-7.29(m,2H),7.24-7.15(m,1H),6.07(s,0.2H),5.98(d,J＝3.6Hz,0.8H),4.01-3.90(m,1.2H),3.79-3.64(m,2.8H),3.53(s,2.4H),3.52(s,0.6H),3.12-3.02(m,1H),2.91-2.78(m,2H),2.48-2.38(m,4H),2.11-2.02(m,0.2H),2.01-1.90(m,1H),1.89-1.71(m,2H),1.66-1.57(m,0.8H),1.41(s,9H)。
化合物332M和332N：(trans)-乙基4-(2-溴-4-氟苯基)-6-(1-(3-(叔丁氧基羰基)环丁基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯和(cis)-乙基4-(2-溴-4-氟苯基)-6-(1-(3-(叔丁氧基羰基)环丁基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
分离条件：硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝6:1至2:1)，然后进一步通过制备型HPLC纯化(柱：Gilson X-bridge C18(5μm 19*150mm)，流速：15mL/min，流动相A：水(0.1％碳酸氢铵)，流动相B：乙腈，梯度：75％-85％(％B))，得到呈黄色固体的标题化合物332M(370mg，52％产率)和332N(300mg，42％产率)。
化合物332M：LC-MS(ESI)：RT＝3.249min，C30H36BrFN4O6S2的计算质量710.1，m/z发现值711.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.14(s,0.3H),7.82(d,J＝2.8Hz,1H),7.51(d,J＝2.8Hz,0.7H),7.44(d,J＝2.8Hz,0.3H),7.41(s,0.7H),7.33-7.27(m,2H),7.03-6.94(m,1H),6.18(s,0.3H),6.05(d,J＝2.0Hz,0.7H),4.21-4.15(m,0.3H),4.09-3.84(m,5.7H),3.21-3.14(m,1H),2.98-2.87(m,2H),2.82-2.72(m,2H),2.63-2.53(m,2H),2.21-2.18(m,0.7H),2.17-1.77(m,2.6H),1.70(br s,0.7H),1.47(s,9H),1.14-1.08(m,3H)。
化合物332N：LC-MS(ESI)：RT＝2.896min，C30H36BrFN4O6S2的计算质量710.1，m/z发现值711.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.15(s,0.3H),7.83-7.81(m,1H),7.52(d,J＝3.2Hz,0.7H),7.44(d,J＝3.2Hz,0.3H),7.40(d,J＝2.0Hz,0.7H),7.33-7.28(m,2H),7.03-6.94(m,1H),6.18(s,0.3H),6.06(d,J＝2.4Hz,0.7H),4.21-4.15(m,0.3H),4.08-3.87(m,4.7H),3.74-3.63(m,1H),3.06-2.86(m,3H),2.82-2.70(m,2H),2.58-2.47(m,2H),2.24-2.14(m,0.7H),2.09-1.97(m,1H),1.92-1.78(m,1.3H),1.70-1.63(m,1H),1.46(s,6.3H),1.45(s,2.7H),1.14-1.08(m,3H)。
外消旋332M(300mg，0.420mmol)通过手性制备型HPLC分离(柱：Chiralpak IE 5μm20*250mm；流动相：Hex:EtOH＝70:30，以14mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到呈黄色固体的标题化合物332X(90mg，30％产率，100％立体纯)和332Y(75mg，25％产率，99.5％立体纯)。
化合物332X：LC-MS(ESI)：RT＝4.122min，C30H36BrFN4O6S2的计算质量710.1，m/z发现值711.0[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IE 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝70:30，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm；RT＝12.685min)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.93(d,J＝3.2Hz,0.3H),7.89(d,J＝3.2Hz,0.7H),7.74(d,J＝3.2Hz,0.7H),7.73(d,J＝3.2Hz,0.3H),7.43-7.37(m,2H),7.14-7.06(m,1H),6.13(s,0.3H),6.06(s,0.7H),4.14-3.83(m,6H),3.23-3.14(m,1H),3.04-2.89(m,2H),2.74-2.57(m,4H),2.16-1.85(m,3.3H),1.69-1.63(m,0.7H),1.48(s,2.7H),1.47(s,6.3H),1.12(t,J＝7.2Hz,3H)。
化合物332Y：LC-MS(ESI)：RT＝4.117min，C30H36BrFN4O6S2的计算质量710.1，m/z发现值711.1[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IE 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝70:30，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm；RT＝15.270min)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.93(d,J＝2.8Hz,0.3H),7.89(d,J＝3.2Hz,0.7H),7.74(d,J＝3.2Hz,0.7H),7.73(d,J＝3.2Hz,0.3H),7.43-7.37(m,2H),7.13-7.06(m,1H),6.13(s,0.3H),6.06(s,0.7H),4.13-3.85(m,6H),3.22-3.14(m,1H),3.04-2.90(m,2H),2.74-2.56(m,4H),2.16-1.85(m,3.3H),1.69-1.63(m,0.7H),1.48(s,2.7H),1.47(s,6.3H),1.12(t,J＝7.2Hz,3H)。
化合物334：甲基6-(1-((3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)环丁基)-磺酰基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯,1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.16-8.14(m,1H),7.82-7.80(m,1H),7.65-7.61(m,4H),7.45-7.36(m,8H),7.16-7.12(m,1H),7.00-6.97(m,1H),6.18(s,0.3H),6.06(s,0.7H),4.67-4.60(m,0.5H),4.16-4.14(m,0.5H),3.98-3.84(m,2.7H),3.79-3.74(m,0.3H),3.60(s,1H),3.59(s,2H),3.12-3.04(m,0.5H),2.92-2.42(m,6H),2.21-2.14(m,0.5H),2.00-1.76(m,2.3H),1.67-1.64(m,0.7H),1.06(s,4.5H),1.04(s,4.5H),0.95-0.80(m,1H)。
化合物338M和338N：(trans)-乙基4-(2-溴-3-氟苯基)-6-(1-((3-(叔丁氧基羰基)环丁基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯和(cis)-乙基4-(2-溴-3-氟苯基)-6-(1-((3-(叔丁氧基羰基)环丁基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物338M：LC-MS(ESI)：RT＝4.457min，C30H36BrFN4O6S2的计算质量710.1，m/z发现值711.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.51(d,J＝3.2Hz,0.7H),9.08(s,0.3H),8.00-7.92(m,2H),7.44-7.38(m,1H),7.31-7.15(m,2H),6.07(s,0.3H),5.98(d,J＝3.6Hz,0.7H),4.04-3.93(m,3.3H),3.78-3.70(m,2.7H),3.16-3.08(m,1H),2.92-2.82(m,2H),2.67-2.52(m,4H),2.05-1.74(m,3.2H),1.62-1.59(m,0.8H),1.43-1.42(m,9H),1.08-1.01(m,3H)。
化合物338N：LC-MS(ESI)：RT＝4.103min，C30H36BrFN4O6S2的计算质量710.1，m/z发现值711.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.51(d,J＝3.2Hz,0.7H),9.08(s,0.3H),8.00-7.92(m,2H),7.44-7.38(m,1H),7.31-7.15(m,2H),6.07(s,0.3H),5.98(d,J＝3.6Hz,0.7H),4.04-3.93(m,3.3H),3.78-3.70(m,2.7H),3.16-3.08(m,1H),2.92-2.82(m,2H),2.67-2.52(m,4H),2.05-1.74(m,3.2H),1.62-1.59(m,0.8H),1.42(s,9H),1.08-1.01(m,3H)。
外消旋338M(360mg，0.510mmol)通过手性制备型HPLC分离(分离条件：柱：Chiralpak ID 5μm 20*250mm；流动相：Hex:IPA:DEA＝50:50:0.3，以12mL/min；温度：30℃；波长：230nm)，得到标题化合物338A(130mg，36％产率，100％立体纯)和338B(150mg，42％产率，98.1％立体纯)。
化合物338A：LC-MS(ESI)：RT＝4.684min，C30H36BrFN4O6S2的计算质量710.1，m/z发现值711.1[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak ID 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:IPA:DEA＝50:50:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝8.521min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.52(d,J＝2.4Hz,0.7H),9.09(s,0.3H),8.00-7.93(m,2H),7.44-7.38(m,1H),7.29(t,J＝8.8Hz,1H),7.21-7.15(m,1H),6.07(s,0.3H),5.98(d,J＝3.2Hz,0.7H),4.04-3.95(m,3.3H),3.78-3.71(m,2.7H),3.16-3.08(m,1H),2.91-2.83(m,2H),2.61-2.53(m,4H),2.08-1.77(m,3.3H),1.63-1.58(m,0.7H),1.42(s,9H),1.06(t,J＝6.8Hz,3H)。
化合物338B：LC-MS(ESI)：RT＝4.684min，C30H36BrFN4O6S2的计算质量710.1，m/z发现值713.1[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak ID 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:IPA:DEA＝50:50:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝10.348min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.52(d,J＝3.6Hz,0.7H),9.09(s,0.3H),8.00-7.92(m,2H),7.44-7.37(m,1H),7.32-7.24(m,1H),7.21-7.15(m,1H),6.07(s,0.3H),5.98(d,J＝3.6Hz,0.7H),4.04-3.92(m,3.3H),3.81-3.70(m,2.7H),3.16-3.08(m,1H),2.92-2.82(m,2H),2.61-2.54(m,4H),2.10-1.77(m,3.3H),1.62-1.59(m,0.7H),1.43-1.42(m,9H),1.08-1.01(m,3H)。
外消旋338N(280mg，0.390mmol)通过手性制备型HPLC分离(分离条件：柱：Chiralpak ID 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝60:40:0.3，以12mL/min；温度：30℃；波长：230nm)，得到呈黄色固体的标题化合物338C(100mg，36％产率，100％立体纯)和338D(110mg，39％产率，97.3％立体纯)。
化合物338C：LC-MS(ESI)：RT＝4.576min，C30H36BrFN4O6S2的计算质量710.1，m/z发现值713.1[M+H]+。手性分析(分析条件：柱：Chiralpak ID 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝60:40:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝7.731min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.52(d,J＝3.2Hz,0.7H),9.09(s,0.3H),8.01-7.92(m,2H),7.44-7.37(m,1H),7.31-7.24(m,1H),7.21-7.15(m,1H),6.07(s,0.3H),5.97(d,J＝3.6Hz,0.7H),4.00-3.91(m,3.3H),3.76-3.67(m,2.7H),3.12-3.03(m,1H),2.88-2.80(m,2H),2.48-2.33(m,4H),2.10-1.77(m,3.3H),1.63-1.57(m,0.7H),1.41(s,9H),1.08-1.01(m,3H)。
化合物338D：LC-MS(ESI)：RT＝4.575min，C30H36BrFN4O6S2的计算质量710.1，m/z发现值711.1[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak ID 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝60:40:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝9.220min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.52(d,J＝3.2Hz,0.7H),9.09(s,0.3H),8.01-7.92(m,2H),7.44-7.37(m,1H),7.31-7.24(m,1H),7.21-7.15(m,1H),6.07(s,0.3H),5.97(d,J＝3.6Hz,0.7H),4.00-3.91(m,3.3H),3.76-3.67(m,2.7H),3.12-3.03(m,1H),2.88-2.80(m,2H),2.48-2.33(m,4H),2.10-1.77(m,3.3H),1.63-1.57(m,0.7H),1.41(s,9H),1.08-1.01(m,3H)。
化合物342X和342Y：(trans)-乙基6-(1-((3-(叔丁氧基羰基)环丁基)磺酰基)哌啶-4-基)-4-(3,4-二氟-2-甲基苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯和(cis)-乙基6-(1-((3-(叔丁氧基羰基)环丁基)磺酰基)哌啶-4-基)-4-(3,4-二氟-2-甲基苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物342X：LC-MS(ESI)：RT＝3.760min，C31H38F2N4O6S2的计算质量664.2，m/z发现值665.3[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.11(s,0.6H),7.81-7.80(m,1H),7.52(d,J＝2.8Hz,0.4H),7.43(d,J＝2.8Hz,0.6H),7.09-7.04(m,0.8H),6.99-6.95(m,0.4H),6.92-6.86(m,1.2H),5.94(s,0.6H),5.85(d,J＝2.0Hz,0.4H),4.21-4.15(m,0.5H),4.10-3.76(m,5.5H),3.22-3.13(m,1H),2.97-2.85(m,2H),2.82-2.72(m,2H),2.62-2.53(m,3.7H),2.42(d,J＝1.6Hz,1.3H),2.20-2.01(m,1.5H),1.96-1.73(m,2.2H),1.70-1.67(m,0.3H),1.48(s,9H),1.11(t,J＝7.2Hz,3H)。
化合物342Y：LC-MS(ESI)：RT＝3.747min，C31H38F2N4O6S2的计算质量664.2，m/z发现值665.3[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.11(s,0.6H),7.81-7.80(m,1H),7.52(d,J＝3.2Hz,0.4H),7.43(d,J＝3.2Hz,0.6H),7.09-7.03(m,0.8H),6.99-6.94(m,0.4H),6.92-6.86(m,1.2H),5.94(s,0.6H),5.86(d,J＝2.0Hz,0.4H),4.23-4.15(m,0.6H),4.09-3.91(m,4H),3.84-3.77(m,0.4H),3.72-3.63(m,1H),3.06-2.85(m,3H),2.81-2.70(m,2H),2.57-2.48(m,3.8H),2.42(d,J＝2.0Hz,1.2H),2.20-2.01(m,1.5H),1.95-1.76(m,2.2H),1.64-1.61(m,0.3H),1.46(s,9H),1.11(t,J＝7.2Hz,3H)。
化合物342M和342N：(trans)-乙基6-(1-((3-(叔丁氧基羰基)环丁基)磺酰基)哌啶-4-基)-4-(3,4-二氟-2-甲基苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯和(cis)-乙基6-(1-((3-(叔丁氧基羰基)环丁基)磺酰基)哌啶-4-基)-4-(3,4-二氟-2-甲基苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物342M：LC-MS(ESI)：RT＝3.632min，C31H38F2N4O6S2的计算质量664.2，m/z发现值665.3[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.11(s,0.6H),7.81-7.80(m,1H),7.52(d,J＝2.8Hz,0.4H),7.43(d,J＝2.8Hz,0.6H),7.08-7.04(m,0.8H),6.99-6.93(m,0.4H),6.92-6.86(m,1.2H),5.94(s,0.6H),5.85(d,J＝2.0Hz,0.4H),4.22-4.15(m,0.5H),4.10-3.76(m,5.5H),3.22-3.12(m,1H),2.98-2.85(m,2H),2.82-2.72(m,2H),2.62-2.53(m,3.7H),2.42(d,J＝1.6Hz,1.3H),2.20-2.01(m,1.5H),1.96-1.73(m,2.2H),1.70-1.67(m,0.3H),1.48(s,9H),1.11(t,J＝7.2Hz,3H)。
化合物342N：LC-MS(ESI)：RT＝2.888min，C31H38F2N4O6S2的计算质量664.2，m/z发现值665.3[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.13(s,0.6H),7.81-7.80(m,1H),7.52(d,J＝3.2Hz,0.4H),7.43(d,J＝3.2Hz,0.6H),7.09-7.04(m,0.8H),6.99-6.94(m,0.4H),6.92-6.86(m,1.2H),5.94(s,0.6H),5.86(d,J＝2.0Hz,0.4H),4.23-4.15(m,0.6H),4.09-3.91(m,4H),3.85-3.77(m,0.4H),3.72-3.63(m,1H),3.06-2.84(m,3H),2.81-2.70(m,2H),2.57-2.48(m,3.8H),2.42(d,J＝2.4Hz,1.2H),2.20-2.01(m,1.5H),1.95-1.76(m,2.2H),1.69-1.64(m,0.3H),1.46(s,9H),1.11(t,J＝7.2Hz,3H)。
化合物315X和351Y：(trans)-乙基6-(3-(叔丁氧基羰基)环丁基)磺酰基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-2-(3,5-二氟吡啶-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯和(cis)-乙基6-(3-(叔丁氧基羰基)环丁基)磺酰基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-2-(3,5-二氟吡啶-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物351X：LC-MS(ESI)：RT＝3.273min，C32H35ClF4N4O6S的计算质量714.2，m/z发现值715.2[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak ID 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:IPA＝70:30，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm；RT＝10.999min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.64(s,0.6H),8.35(d,J＝2.0Hz,0.6H),8.26(d,J＝2.0Hz,0.4H),7.77(s,0.4H),7.33-7.29(m,1H),7.08-6.98(m,2H),6.31(s,0.6H),6.07(d,J＝2.4Hz,0.4H),4.25-4.17(m,0.6H),4.09-3.94(m,3.4H),3.89-3.87(m,2H),3.20-3.15(m,1H),2.98-2.88(m,2H),2.80-2.72(m,2H),2.61-2.53(m,2H),2.22-2.17(m,0.4H),1.97-1.62(m,3.6H),1.48(s,5.4H),1.47(s,3.6H),1.13(t,J＝7.2Hz,3H)。
化合物351Y：LC-MS(ESI)：RT＝2.469min，C32H35ClF4N4O6S的计算质量714.2，m/z发现值715.1[M+H]+。
化合物353：乙基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(1-((4-乙氧基羰基环己基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝4.177min，C30H35ClF2N4O6S2的计算质量684.2，m/z发现值685.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.60(d,J＝3.2Hz,0.7H),9.14(s,0.3H),7.98-7.97(m,1.7H),7.91(d,J＝3.2Hz,0.3H),7.47-7.40(m,1H),7.21-7.14(m,1H),6.01(s,0.2H),5.92(d,J＝3.2Hz,0.8H),4.11-4.01(m,2H),3.98-3.92(m,2H),3.80-3.71(m,3H),3.23-3.11(m,1H),2.98-2.86(m,2H),2.11-1.72(m,8H),1.58-1.36(m,5H),1.19-1.14(m,3H),1.07-1.01(m,3H)。
353的外消旋混合物(700mg，1.02mmol)通过手性制备型HPLC分离(柱：ChiralpakIB 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝80:20:0.3，以15mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到呈黄色固体组1(360mg)和组2(230mg)。组1(360mg，0.526mmol)通过手性制备型HPLC分离(柱：Chiralpak IE 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝60:40:0.3，以12mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到呈黄色固体的EO8495_837M(80mg，11％产率，100％立体纯)和EO8495_837N(80mg，11％产率，100％立体纯)。组2(230mg，0.336mmol)通过手性制备型HPLC分离(柱：Chiralpak IC 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝60:40:0.3，以12mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到呈黄色固体的353X(90mg，13％产率，100％立体纯)和353Y(90mg，13％产率，100％立体纯)。
化合物353M：LC-MS(ESI)：RT＝4.195min，C30H35ClF2N4O6S2的计算质量684.2，m/z发现值685.1[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IE 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝60:40:0.2，以1mL/min；温度：30℃；波长：230nm；RT＝17.755min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.61(d,J＝3.2Hz,0.8H),9.15(s,0.2H),8.02-7.99(m,1.8H),7.93(d,J＝3.6Hz,0.2H),7.49-7.42(m,1H),7.24-7.16(m,1H),6.03(s,0.2H),5.94(d,J＝3.2Hz,0.8H),4.13-4.07(m,2H),4.02-3.94(m,2.3H),3.82-3.72(m,2.7H),3.25-3.17(m,1H),2.99-2.87(m,2H),2.67(br s,1H),2.13-1.74(m,7.4H),1.64-1.52(m,4.6H),1.19(t,J＝7.2Hz,3H),1.09-1.03(m,3H)。
化合物353N：LC-MS(ESI)：RT＝4.191min，C30H35ClF2N4O6S2的计算质量684.2，m/z发现值685.1[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IE 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝60:40:0.2，以1mL/min；温度：30℃；波长：230nm；RT＝19.587min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.61(d,J＝3.6Hz,0.8H),9.15(s,0.2H),8.01-7.99(m,1.8H),7.93(d,J＝3.2Hz,0.2H),7.49-7.42(m,1H),7.24-7.16(m,1H),6.03(s,0.2H),5.94(d,J＝3.6Hz,0.8H),4.13-4.08(m,2H),4.01-3.94(m,2.3H),3.83-3.72(m,2.7H),3.26-3.17(m,1H),3.00-2.88(m,2H),2.67(br s,1H),2.14-2.02(m,2H),1.98-1.74(m,5H),1.65-1.53(m,5H),1.19(t,J＝7.2Hz,3H),1.09-1.03(m,3H)。
化合物353X：LC-MS(ESI)：RT＝4.178min，C30H35ClF2N4O6S2的计算质量684.2，m/z发现值685.2[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝60:40:0.2，以1mL/min；温度：30℃；波长：230nm；RT＝13.384min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.60(d,J＝3.2Hz,0.8H),9.14(s,0.2H),7.99-7.97(m,1.8H),7.92(d,J＝3.6Hz,0.2H),7.47-7.40(m,1H),7.22-7.14(m,1H),6.02(s,0.2H),5.92(d,J＝3.6Hz,0.8H),4.06-4.01(m,2H),3.99-3.92(m,2.2H),3.81-3.71(m,2.8H),3.19-3.11(m,1H),3.00-2.89(m,2H),2.34-2.25(m,1H),2.09-1.73(m,7.2H),1.61-1.54(m,0.8H),1.52-1.36(m,4H),1.16(t,J＝7.2Hz,3H),1.07-1.01(m,3H)。
化合物353Y：LC-MS(ESI)：RT＝4.180min，C30H35ClF2N4O6S2的计算质量684.2，m/z发现值685.2[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝60:40:0.2，以1mL/min；温度：30℃；波长：230nm；RT＝16.644min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.62(d,J＝3.2Hz,0.8H),9.16(s,0.2H),8.01-7.99(m,1.7H),7.94(d,J＝3.2Hz,0.3H),7.49-7.43(m,1H),7.23-7.16(m,1H),6.04(s,0.2H),5.94(d,J＝3.2Hz,0.8H),4.06(q,J＝7.2Hz,2H),4.01-3.94(m,2.3H),3.82-3.73(m,2.7H),3.21-3.13(m,1H),3.00-2.92(m,2H),2.36-2.28(m,1H),2.10-1.74(m,7.2H),1.62-1.59(m,0.8H),1.53-1.38(m,4H),1.18(t,J＝7.2Hz,3H),1.09-1.03(m,3H)。
化合物355：乙基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(1-((2-甲氧基-2-氧代乙基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝4.127min，C24H25ClF2N4O6S2的计算质量602.1，m/z发现值602.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.62(br s,0.8H),9.17(br s,0.2H),8.04-7.99(m,1.8H),7.94-7.91(m,0.2H),7.49-7.42(m,1H),7.24-7.17(m,1H),6.04(s,0.2H),5.94-5.91(d,J＝1.6Hz,0.8H),4.33(s,0.5H),4.31(s,1.5H),3.98(q,J＝2.8Hz,2H),3.82-3.67(m,6H),2.97-2.84(m,2H),2.17-2.08(m,0.2H),2.04-1.94(m,1H),1.89-1.80(m,2H),1.70-1.62(m,0.8H),1.10-1.03(m,3H)。
化合物364：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-6-((R)-1-((2,2,2-三氟乙基)磺酰基)吡咯烷-3-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝2.458min，C21H19ClF4N4O4S2的计算质量566.0，m/z发现值566.8[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)9.60-9.38(m,1H),8.04-7.94(m,2H),7.44-7.32(m,2H),7.23-7.20(m,1H),6.03(s,0.1H),5.94(s,0.9H),4.62-4.54(m,2.1H),4.42-4.34(m,0.9H),3.78-3.61(m,3H),3.58(s,3H),3.48-3.42(m,1H),2.24-2.15(m,1H),2.09-1.99(m,1H)。
化合物365：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-((R*)-1-((2-甲氧基乙基)磺酰基)吡咯烷-3-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝4.246min，C22H24ClFN4O5S2的计算质量542.1，m/z发现值543.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.62(d,J＝3.6Hz,0.9H),9.28(s,0.1H),8.03-7.93(m,2H),7.44-7.41(m,1H),7.39-7.35(m,1H),7.24-7.19(m,1H),6.02(s,0.1H),5.94(d,J＝3.6Hz,0.9H),4.60-4.56(m,0.1H),4.40-4.31(m,0.9H),3.72(t,J＝6.0Hz,2H),3.64-3.50(m,6H),3.48-3.43(m,2H),3.39-3.30(m,4H),2.25-2.16(m,1H),2.03-1.94(m,1H)。
化合物366X和366Y：(trans)-甲基6-(1-((3-(叔丁氧基羰基)环丁基)磺酰基)吡咯烷-3-基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯和(cis)-甲基6-(1-((3-(叔丁氧基羰基)环丁基)磺酰基)吡咯烷-3-基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物366X：LC-MS(ESI)：RT＝1.92min，C28H32ClFN4O6S2的计算质量638.1，m/z发现值639.8[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.60(s,1H),8.01(d,J＝2.8Hz,1H),7.74-7.66(m,1H),7.43-7.35(m,2H),7.22-7.17(m,1H),5.95(s,1H),4.36-4.32(m,1H),4.14-4.10(m,1H),3.67-3.60(m,2.5H),3.53(s,3H),3.50-3.48(m,0.5H),3.41-3.35(m,1H),3.15-3.09(m,1H),2.66-2.59(m,2H),2.17-2.11(m,1H),2.04-1.95(m,1H),1.37(s,9H),1.27-1.22(m,2H)。
化合物366Y：LC-MS(ESI)：RT＝1.88min，C28H32ClFN4O6S2的计算质量638.1，m/z发现值638.6[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.61(s,0.9H),9.25(br s,0.1H),8.03(s,1.5H),7.75-7.69(m,0.5H),7.44-7.36(m,2H),7.23-7.19(m,1H),5.95(s,0.9H),5.79(s,0.1H),4.38-4.33(m,0.8H),4.13-4.01(m,1.2H),3.63-3.48(m,6H),3.27-3.18(m,1H),3.14-3.05(m,1H),2.53(br s,2H),2.22-2.13(m,1H),2.02-1.96(m,1H),1.40(s,9H),1.28-1.15(m,2H)。
化合物370B-1和370D-1：(trans)-乙基6-(1-((3-(叔丁氧基羰基)环丁基)磺酰基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯和(cis)-乙基6-(1-((3-(叔丁氧基羰基)环丁基)磺酰基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物370B-1：LC-MS(ESI)：RT＝4.718min，C30H35ClF2N4O6S2的计算质量684.2，m/z发现值685.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.62(s,0.7H),9.13(s,0.3H),8.01-7.94(m,2H),7.49-7.43(m,1H),7.23-7.19(m,1H),6.03(s,0.3H),5.94(s,0.7H),4.04-3.95(m,3.2H),3.78-3.70(m,2.8H),3.16-3.08(m,1H),2.91-2.82(m,2H),2.60-2.52(m,4H),2.02-1.74(m,3H),1.63-1.58(m,1H),1.42(s,9H),1.07(t,d＝6.8Hz,3H)。
化合物370D-1：LC-MS(ESI)：RT＝2.812min，C30H35ClF2N4O6S2的计算质量684.2，m/z发现值685.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.18(s,0.3H),7.83(d,J＝3.2Hz,1H),7.53(d,J＝3.2Hz,0.7H),7.45(d,J＝3.6Hz,0.3H),7.35(s,0.7H),7.10-6.99(m,2H),6.20(s,0.3H),6.09(d,J＝2.8Hz,0.7H),4.22-4.15(m,0.3H),4.10-3.87(m,4.7H),3.72-3.63(m,1H),3.06-2.86(m,3H),2.81-2.70(m,2H),2.57-2.47(m,2H),2.24-1.66(m,4H),1.46(s,9H),1.14-1.10(m,3H)。
化合物389B：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(3-(2-甲氧基-2-氧代乙基磺酰胺基)双环[1.1.1]戊-1-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯,1H NMR(400MHz,DMSO-d6)9.43(br s,0.3H),8.34-8.32(m,0.7H),8.01-7.98(m,1.5H),7.95-7.94(m,0.5H),7.44-7.40(m,1H),7.35-7.30(m,1H),7.25-7.18(m,1H),5.97(s,0.5H),5.87(s,0.5H),4.20(s,1H),4.15(s,1H),3.72(s,1.2H),3.71(s,1.8H),3.55(s,1.5H),3.53(s,1.5H),2.45(s,2H),2.42(s,1H),2.29(s,2H),2.25(s,1H)。
化合物391B：甲基6-(3-乙酰胺基双环[1.1.1]戊-1-基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝2.398min，C22H20ClFN4O3S的计算质量474.1，m/z发现值475.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.36(d,J＝2.8Hz,0.5H),8.52(s,0.5H),8.39(s,0.5H),8.28(s,0.5H),8.01-7.99(m,1.4H),7.95(d,J＝2.8Hz,0.6H),7.44-7.40(m,1H),7.35-7.30(m,1H),7.25-7.19(m,1H),5.96(s,0.5H),5.86(d,J＝3.6Hz,0.5H),3.55(s,1.5H),3.53(s,1.5H),2.44(s,3.2H),2.28(s,2.8H),1.79(s,1.7H),1.77(s,1.3H)。
化合物392B：甲基6-(3-(1,4-二氧杂螺[4.5]癸-2-基甲基磺酰胺基)双环[1.1.1]戊-1-基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝1.86min，C29H32ClFN4O6S2的计算质量650.1，m/z发现值651.5[M+H]+。
化合物396：(trans)-甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(3,5-二氟吡啶-2-基)-6-(4-(甲基磺酰胺基)环己基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝4.132min，C24H24ClF3N4O4S的计算质量556.1，m/z发现值557.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.18(br s,0.7H),9.07-9.03(m,0.3H),8.59-8.55(m,1H),8.09-8.03(m,1H),7.44-7.39(m,1H),7.36-7.31(m,1H),7.25-7.18(m,1H),7.15-7.09(m,0.7H),7.07-7.02(m,0.3H),6.01(s,0.7H),5.90(d,J＝3.2Hz,0.3H),3.86-3.78(m,0.7H),3.57-3.54(m,0.3H),3.52(s,1H),3.50(s,2H),3.22-3.15(m,0.7H),3.11-3.04(m,0.3H),2.92(s,1H),2.91(s,2H),2.03-1.97(m,2H),1.85-1.79(m,1.8H),1.76-1.71(m,1.8H),1.60-1.53(m,0.4H),1.38-1.27(m,2H)。
外消旋396(140mg，0.251mmol)通过手性制备型HPLC分离(分离条件：柱：Chiralpak OD-H 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝85:15:0.3，以15mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到呈黄色固体的标题化合物396A(25mg，18％产率，100％立体纯)和呈黄色固体的396B(25mg，18％产率，97.3％立体纯)。
化合物396A：LC-MS(ESI)：RT＝4.016min，C24H24ClF3N4O4S的计算质量556.1，m/z发现值556.9[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak OD-H 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝85:15:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝12.683min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.15(br s,0.7H),9.02(d,J＝3.6Hz,0.3H),8.57-8.55(m,1H),8.08-8.02(m,1H),7.44-7.39(m,1H),7.36-7.31(m,1H),7.24-7.18(m,1H),7.10(d,J＝7.6Hz,0.7H),7.01(d,J＝7.2Hz,0.3H),6.02(s,0.7H),5.91(d,J＝2.8Hz,0.3H),3.84-3.80(m,0.8H),3.56-3.54(m,0.2H),3.52(s,1H),3.50(s,2H),3.21-3.18(m,0.6H),3.10-3.05(m,0.4H),2.92(s,1H),2.91(s,2H),2.04-1.95(m,2H),1.86-1.80(m,1.6H),1.77-1.71(m,2H),1.59-1.54(m,0.4H),1.36-1.27(m,2H)。
化合物396B：LC-MS(ESI)：RT＝4.016min，C24H24ClF3N4O4S的计算质量556.1，m/z发现值556.9[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak OD-H 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝85:15:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝15.170min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.16(br s,0.7H),9.02(d,J＝3.2Hz,0.3H),8.57-8.55(m,1H),8.08-8.02(m,1H),7.44-7.39(m,1H),7.35-7.31(m,1H),7.24-7.18(m,1H),7.10(d,J＝7.6Hz,0.7H),7.02(d,J＝7.6Hz,0.3H),6.02(s,0.7H),5.91(d,J＝3.2Hz,0.3H),3.86-3.78(m,0.7H),3.58-3.54(m,0.3H),3.52(s,1H),3.50(s,2H),3.21-3.17(m,0.7H),3.10-3.04(m,0.3H),2.92(s,1H),2.91(s,2H),2.04-1.99(m,2H),1.85-1.80(m,1.7H),1.76-1.71(m,2H),1.58-1.53(m,0.3H),1.36-1.27(m,2H)。
化合物399：(cis)-甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(3,5-二氟吡啶-2-基)-6-(4-(甲基磺酰胺基)环己基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝3.700min，C24H24ClF3N4O4S的计算质量556.1，m/z发现值556.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.19-9.14(m,0.8H),9.08-9.02(m,0.2H),8.65-8.62(m,0.5H),8.58-8.55(m,0.5H),8.11-8.03(m,1H),7.44-7.39(m,1H),7.36-7.31(m,1H),7.25-7.19(m,1H),7.12-7.09(m,0.8H),7.05-7.02(m,0.1H),6.78-6.76(m,0.1H),6.05-6.00(m,0.8H),5.92-5.89(m,0.2H),3.94-3.88(m,0.6H),3.84-3.80(m,0.3H),3.69-3.62(m,0.5H),3.52(s,1H),3.50(s,2H),3.21-3.16(m,0.4H),3.11-3.04(m,0.2H),2.96(s,1.5H),2.92-2.91(s,1.3H),2.90-2.88(m,0.2H),2.07-2.00(m,1H),1.94-1.80(m,3H),1.73-1.51(m,3H),1.36-1.24(m,1H)。
外消旋399(70mg，0.126mmol)通过手性制备型HPLC分离(分离条件：柱：ChiralpakID 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH＝70:30，以13mL/min；温度：30℃；波长：254nm)，得到呈黄色固体的标题化合物399C(25mg，36％产率，100％立体纯)和呈黄色固体的399D(24mg，34％产率，99.4％立体纯)。
化合物399C：LC-MS(ESI)：RT＝4.040min，C24H24ClF3N4O4S的计算质量556.1，m/z发现值556.9[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak ID 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝70:30，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝6.748min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.17(br s,0.9H),9.10-9.05(m,0.1H),8.67-8.61(m,0.9H),8.57-8.55(m,0.1H),8.11-8.04(m,1H),7.45-7.40(m,1H),7.39-7.33(m,1H),7.25-7.19(m,1H),7.14-7.07(m,0.9H),6.79-6.76(m,0.1H),6.03(s,0.9H),5.93-5.90(m,0.1H),3.96-3.86(m,1H),3.68-3.62(m,1H),3.51(s,0.4H),3.50(s,2.6H),2.96(s,2.6H),2.89(s,0.4H),1.97-1.80(m,4H),1.68-1.57(m,3H),1.54-1.51(m,1H)。
化合物399D：LC-MS(ESI)：RT＝4.018min，C24H24ClF3N4O4S的计算质量556.1，m/z发现值556.9[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak ID 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝70:30，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝8.621min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.18(br s,0.7H),9.08-9.03(m,0.3H),8.59-8.54(m,1H),8.09-8.03(m,1H),7.44-7.40(m,1H),7.36-7.31(m,1H),7.25-7.18(m,1H),7.15-7.10(m,0.7H),7.06-7.02(m,0.3H),6.01(s,0.7H),5.92-5.89(m,0.3H),3.86-3.79(m,0.7H),3.57-3.54(m,0.3H),3.51(s,1H),3.50(s,2H),3.20-3.15(m,0.7H),3.09-3.06(m,0.3H),2.92(s,3H),2.02-1.98(m,2H),1.85-1.80(m,1.8H),1.76-1.71(m,2H),1.58-1.55(m,0.2H),1.33-1.24(m,2H)。
化合物405：甲基6-(3-(1-(叔丁氧基羰基)氮杂环丁烷-3-磺酰胺基)双环[1.1.1]戊-1-基)-4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
LC-MS(ESI)：RT＝1.81min，C28H30ClF2N5O6S2的计算质量669.1，m/z发现值670.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.87-7.81(m,1.7H),7.51-7.46(m,1.3H),7.04-7.02(m,2H),6.15(s,0.7H),6.02(s,0.3H),5.40(s,0.7H),5.23(s,0.3H),4.22-4.17(m,4H),3.99-3.95(m,1H),3.62(s,0.9H),3.59(s,2.1H),2.58(s,4.2H),2.45(s,1.8H),1.45(s,9H)。
化合物406：甲基6-(3-(氮杂环丁烷-3-磺酰胺基)双环[1.1.1]戊-1-基)-4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物405被使用TFA进行de-Boc以得到化合物406，LC-MS(ESI)：RT＝3.946min，C23H22ClF2N5O4S2的计算质量569.1，m/z发现值570.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.88-7.81(m,1.7H),7.52-7.46(m,1.3H),7.10-7.02(m,2H),6.15(s,0.7H),6.02(s,0.3H),4.28-4.16(m,1H),4.10-4.04(m,2H),3.87-3.83(m,2H),3.62(s,0.9H),3.60(s,2.1H),2.57(s,4H),2.48(s,2H)。
化合物409P和409Q：trans-甲基4-(2-溴-4-氟苯基)-6-(1-((3-甲基-3-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)羰基)环丁基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯和cis-甲基4-(2-溴-4-氟苯基)-6-(1-((3-甲基-3-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)羰基)环丁基)-磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物409P(trans)：LC-MS(ESI)：RT＝3.005min，C31H40BrFN4O6S2Si的计算质量754.1，m/z发现值754.7[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.84(d,J＝3.2Hz,1H),7.53-7.45(m,1.8H),7.34-7.31(m,1.2H),7.02-6.94(m,1H),6.16(s,0.2H),6.03(d,J＝2.0Hz,0.8H),4.25-4.21(m,2.2H),4.01-3.78(m,3.8H),3.60(s,3H),2.94-2.74(m,4H),2.52-2.46(m,2H),2.29-2.20(m,1H),2.05-2.01(m,1H),1.92-1.88(m,1H),1.71-1.67(m,1H),1.60(s,1H),1.45(m,3H),1.05-1.01(m,2H),0.06(s,9H)。
化合物409Q(cis)：LC-MS(ESI)：RT＝2.952min，C31H40BrFN4O6S2Si的计算质量754.1，m/z发现值754.7[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.12(s,0.2H),7.78(d,J＝2.8Hz,1H),7.47-7.39(m,1.8H),7.28-7.20(m,1H),6.97-6.89(m,1H),6.11(s,0.3H),5.98(d,J＝2.0Hz,0.7H),4.17-4.09(m,2.2H),3.98-3.82(m,2.8H),3.71-3.67(m,1H),3.54(s,3H),2.97-2.81(m,4H),2.19-2.08(m,3H),2.02-1.95(m,1H),1.86-1.83(m,1H),1.64-1.61(m,1H),1.52(s,1H),1.43(s,3H),0.99-0.94(m,2H),0.01(s,9H)。
化合物413C和413D：(trans)-乙基4-(2-溴-3-氟苯基)-6-(1-((3-甲基-3-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)羰基)环丁基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯和(cis)-乙基4-(2-溴-3-氟苯基)-6-(1-((3-甲基-3-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)羰基)环丁基)-磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物413C(trans)：LC-MS(ESI)：RT＝2.43min，C32H42BrFN4O6S2Si的计算质量768.2，m/z发现值770.7[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.53(br s,0.8H),9.08(br s,0.2H),8.01-7.97(m,1.9H),7.90-7.83(m,0.1H),7.38(dd,J＝13.6,8.0Hz,1H),7.28-7.24(m,1H),7.17(d,J＝7.6Hz,1H),6.04(br s,0.2H),5.95(br s,0.8H),4.14(t,J＝8.4Hz,2H),3.97-3.89(m,3H),3.73-3.66(m,3H),2.86-2.71(m,4H),2.28-2.22(m,2H),1.80-1.70(m,3H),1.61-1.54(m,1H),1.33(s,3H),1.02(t,J＝6.8Hz,3H),0.94(t,J＝8.4Hz,2H),0.00(s,9H)。
化合物413D(cis)：LC-MS(ESI)：RT＝2.32min，C32H42BrFN4O6S2Si的计算质量768.2，m/z发现值770.7[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.53(d,J＝3.2Hz,0.8H),9.07(br s,0.2H),7.99-7.95(m,1.8H),7.90(d,J＝3.6Hz,0.2H),7.41-7.36(m,1H),7.29-7.22(m,1H),7.18(d,J＝7.6Hz,0.8H),7.13(d,J＝7.6Hz,0.2H),6.04(br s,0.2H),5.94(d,J＝3.6Hz,0.8H),4.15-4.10(m,3H),3.97-3.91(m,2H),3.73-3.63(m,3H),2.87-2.78(m,2H),2.66-2.61(m,2H),2.18-2.13(m,2H),1.94-1.74(m,3H),1.57(d,J＝12.8Hz,1H),1.40(s,3H),1.03(t,J＝6.8Hz,3H),0.93(t,J＝8.4Hz,2H),0.00(s,9H)。
化合物415：甲基6-(1-(N-(叔丁氧基羰基)氨磺酰基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
LC-MS(ESI)：RT＝1.82min，C25H28ClF2N5O6S2的计算质量631.1，m/z发现值632.3[M+H]+。
化合物419A和419B：(trans)-乙基4-(4-氟-2-甲基苯基)-6-(1-((3-甲基-3-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)羰基)环丁基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯和(cis)-乙基4-(4-氟-2-甲基苯基)-6-(1-((3-甲基-3-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)-羰基)环丁基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物419A：LC-MS(ESI)：RT＝2.122min，C33H45FN4O6S2Si的计算质量704.3，m/z发现值705.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.09(br s,0.5H),7.81-7.80(m,1H),7.52(d,J＝2.8Hz,0.5H),7.42(d,J＝3.2Hz,0.5H),7.31-7.29(m,0.5H),7.16-7.13(m,0.5H),7.00(s,0.5H),6.90-6.77(m,2H),5.95(s,0.5H),5.86(d,J＝4.8Hz,0.5H),4.25-4.21(m,2.5H),4.03-3.77(m,5.5H),2.95-2.74(m,4H),2.62(s,1.5H),2.52-2.43(m,3.5H),2.15-2.05(m,1.4H),1.96-1.77(m,2H),1.67-1.63(m,0.6H),1.45(d,J＝2.8Hz,3H),1.10(q,J＝7.2Hz,3H),1.06-0.99(m,2H),0.07-0.06(m,9H)。
化合物419B：LC-MS(ESI)：RT＝2.012min，C33H45FN4O6S2Si的计算质量704.3，m/z发现值705.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.10(br s,0.5H),7.80(d,J＝3.2Hz,1H),7.52(d,J＝2.8Hz,0.5H),7.42(d,J＝3.2Hz,0.5H),7.31-7.29(m,0.5H),7.17-7.13(m,0.5H),7.02-6.99(m,0.5H),6.90-6.77(m,2H),5.95(s,0.5H),5.86(d,J＝4.8Hz,0.5H),4.22-4.18(m,2.5H),4.04-3.90(m,4H),3.84-3.71(m,1.5H),3.02-2.83(m,4H),2.62(s,1.5H),2.48(s,1.5H),2.24-2.05(m,3.5H),1.96-1.78(m,2H),1.66-1.64(m,0.5H),1.48(d,J＝2.0Hz,3H),1.10(q,J＝7.2Hz,3H),1.04-0.99(m,2H),0.05(s,9H)。
化合物421：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(1-(((trans-4-(甲氧基羰基)环己基)甲基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝3.13min，C29H34ClFN4O6S2的计算质量652.1，m/z发现值653.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.18(brs,0.2H),7.87-7.78(m,1H),7.53(d,J＝3.2Hz,0.8H),7.46-7.45(m,1H),7.30-7.26(m,1H),7.16-7.12(m,1H),7.04-6.98(m,1H),6.19(s,0.2H),6.07(d,J＝3.6Hz,0.8H),4.03-3.86(m,3H),3.67(s,3H),3.60-3.59(m,3H),2.94-2.84(m,2H),2.81-2.78(m,2H),2.31-2.20(m,2H),2.16-2.09(m,2H),2.04-1.98(m,3H),1.99-1.80(m,2H),1.74-1.70(m,1H),1.57-1.47(m,2H),1.19-1.09(m,2H)。
化合物423：乙基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(1-(((trans-4-(甲氧基羰基)环己基)甲基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝3.28min，C30H35ClF2N4O6S2的计算质量684.2，m/z发现值685.4[M+H]+。1H NMR(400MHz,CD3OD)7.95(d,J＝3.2Hz,0.3H),7.91(d,J＝3.2Hz,0.7H),7.78(d,J＝3.2Hz,0.7H),7.91(d,J＝3.2Hz,0.3H),7.30-7.22(m,2H),6.18(s,0.3H),6.11(s,0.7H),4.16-4.01(m,2H),3.98-3.83(m,3H),3.67(s,3H),2.99-2.85(m,4H),2.37-2.27(m,1H),2.20-2.04(m,4H),2.01-1.90(m,4H),1.75-1.70(m,1H),1.55-1.45(m,2H),1.28-1.21(m,2H),116-1.12(m,3H)。
化合物428C和428D：(trans)-乙基4-(3-氟-2-甲基苯基)-6-(1-((3-甲基-3-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)羰基)环丁基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯和(cis)-乙基4-(3-氟-2-甲基苯基)-6-(1-((3-甲基-3-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)羰基)环丁基)-磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物428C(trans)：LC-MS(ESI)：RT＝2.06min，C33H45FN4O6S2Si的计算质量704.3，m/z发现值704.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.92(d,J＝3.2Hz,0.3H),7.88(d,J＝3.2Hz,0.7H),7.75-7.72(m,1H),7.18-7.08(m,2H),6.97-6.92(m,1H),5.96(s,0.3H),5.90(s,0.7H),4.26-4.22(m,2H),4.06-3.80(m,6H),3.00-2.79(m,4H),2.50(d,J＝2.0Hz,1H),2.44-2.38(m,4H),2.13-2.01(m,2H),1.90-1.84(m,1.4H),1.68-1.63(m,0.6H),1.43(d,J＝2.4Hz,3H),1.12(t,J＝7.2Hz,3H),1.10-1.00(m,2H),0.07-0.05(m,9H)。
化合物428D(cis)：LC-MS(ESI)：RT＝1.99min，C33H45FN4O6S2Si的计算质量704.3，m/z发现值704.9[M+H]+。1HNMR(400MHz,CD3OD)δ7.91-7.88(m,1H),7.76-7.72(m,1H),7.20-7.08(m,2H),6.97-6.91(m,1H),5.96(s,0.3H),5.90(s,0.7H),4.25-4.21(m,2H),4.11-3.79(m,6H),2.99-2.84(m,4H),2.50(d,J＝2.0Hz,1H),2.43(d,J＝1.6Hz,2H),2.27-2.24(m,2H),2.11-1.97(m,2H),1.88-1.85(m,1.4H),1.68-1.64(m,0.6H),1.49(s,3H),1.12(t,J＝7.2Hz,3H),1.05-1.01(m,2H),0.07-0.05(m,9H)。
化合物437：(cis)-乙基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(2,2-二甲基-3-(甲基磺酰胺基)环丁基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝4.161min，C23H26ClFN4O4S2的计算质量540.1，m/z发现值541.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.40(d,J＝3.2Hz,0.7H),8.30(s,0.3H),8.04-7.98(m,2H),7.45-7.36(m,2H),7.32-7.25(m,2H),6.08(s,0.3H),5.95(d,J＝3.2Hz,0.7H),4.20-4.15(m,0.3H),3.98(q,J＝7.2Hz,2H),3.84-3.80(m,0.7H),3.62-3.56(m,0.3H),3.50-3.43(m,0.7H),2.94(s,0.9H),2.91(s,2.1H),2.80-2.72(m,0.7H),2.40-2.34(m,0.3H),2.27-2.19(m,0.3H),2.12-2.05(m,0.7H),1.21(s,0.9H),1.18(s,2.1H),1.10-1.04(m,6H)。
外消旋437(200mg，0.37mmol)通过手性制备型HPLC(分离条件：柱：Chiralpak IC5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH＝60:40，以12mL/min；温度：30℃；波长：230nm)，得到呈黄色固体的标题化合物437A(85mg，42％产率，100％立体纯)和437B(87mg，43％产率，100％立体纯)。
化合物437A：LC-MS(ESI)：RT＝3.661min，C23H26ClFN4O4S2的计算质量540.1，m/z发现值540.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝60:40，以1mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝6.429min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.39(d,J＝3.2Hz,0.7H),8.30(s,0.3H),8.03-7.98(m,2H),7.45-7.36(m,2H),7.32-7.25(m,2H),6.08(s,0.3H),5.95(d,J＝3.2Hz,0.7H),4.20-4.15(m,0.3H),3.98(q,J＝7.2Hz,2H),3.84-3.79(m,0.7H),3.62-3.56(m,0.3H),3.50-3.43(m,0.7H),2.94(s,0.9H),2.91(s,2.1H),2.79-2.72(m,0.7H),2.40-2.32(m,0.3H),2.27-2.18(m,0.3H),2.12-2.05(m,0.7H),1.21(s,0.9H),1.18(s,2.1H),1.10-1.04(m,6H)。
化合物437B：LC-MS(ESI)：RT＝3.691min，C23H26ClFN4O4S2的计算质量540.1，m/z发现值540.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝60:40，以1mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝9.756min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.38(d,J＝3.2Hz,0.7H),8.30(s,0.3H),8.03-7.98(m,2H),7.45-7.36(m,2H),7.32-7.25(m,2H),6.08(s,0.3H),5.95(d,J＝3.2Hz,0.7H),4.20-4.15(m,0.3H),3.98(q,J＝7.2Hz,2H),3.84-3.79(m,0.7H),3.62-3.56(m,0.3H),3.50-3.43(m,0.7H),2.94(s,0.9H),2.91(s,2.1H),2.79-2.72(m,0.7H),2.40-2.33(m,0.3H),2.27-2.18(m,0.3H),2.12-2.05(m,0.7H),1.21(s,0.9H),1.18(s,2.1H),1.10-1.04(m,6H)。
化合物438F和438H：(trans)-甲基4-(2-溴-3-氟苯基)-6-(1-((3-(叔丁氧基羰基)环丁基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯和(cis)-甲基4-(2-溴-3-氟苯基)-6-(1-((3-(叔丁氧基羰基)环丁基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
纯化条件：通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝4:1至2:1)纯化，进一步通过C18柱(乙腈:水＝80％至88％)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物438F(450mg，38％产率，100％立体纯)和438H(350mg，30％产率，99.5％立体纯)。
化合物438F(trans)：LC-MS(ESI)：RT＝4.235min，C29H34BrFN4O6S2的计算质量696.1，m/z发现值696.8[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IG 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝60:40:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝11.290min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.56(d,J＝3.2Hz,0.8H),9.16(s,0.2H),8.01-7.98(m,1.7H),7.93(d,J＝3.2Hz,0.3H),7.44-7.37(m,1H),7.29(t,J＝8.4Hz,1H),7.24-7.20(m,0.8H),7.15(d,J＝7.2Hz,0.2H),6.06(s,0.2H),5.97(d,J＝3.6Hz,0.8H),4.04-3.96(m,1H),3.77-3.71(m,3H),3.52(s,2.4H),3.51(s,0.6H),3.16-3.08(m,1H),2.92-2.83(m,2H),2.61-2.54(m,4H),2.06-1.76(m,3H),1.62-1.59(m,1H),1.42(s,9H)。
化合物438H(cis)：LC-MS(ESI)：RT＝4.145min，C29H34BrFN4O6S2的计算质量696.1，m/z发现值696.8[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝70:30，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝9.158min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.57(d,J＝2.8Hz,0.8H),9.16(s,0.2H),8.01-7.98(m,1.7H),7.93(d,J＝3.2Hz,0.3H),7.44-7.38(m,1H),7.29(t,J＝8.4Hz,1H),7.24-7.20(m,0.8H),7.14(d,J＝7.6Hz,0.2H),6.06(s,0.2H),5.97(d,J＝3.2Hz,0.8H),3.99-3.91(m,1H),3.76-3.67(m,3H),3.52(s,2.4H),3.51(s,0.6H),3.12-3.03(m,1H),2.89-2.80(m,2H),2.49-2.40(m,4H),2.07-1.76(m,3H),1.63-1.57(m,1H),1.41(s,9H)。
化合物440B：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(3-(2-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)乙基磺酰胺基)双环[1.1.1]戊-1-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝4.335min，C27H32ClFN4O7S2的计算质量642.1，m/z发现值643.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.86(s,0.7H),7.83-7.81(m,1H),7.49(d,J＝3.2Hz,0.3H),7.45-7.42(m,1H),7.30-7.28(m,0.5H),7.26-7.24(m,0.5H),7.15-7.11(m,1H),6.97-6.89(m,1H),6.33(s,0.7H),6.15(s,0.7H),6.09(s,0.3H),6.02(d,J＝2.8Hz,0.3H),3.95-3.91(m,2H),3.69-3.66(m,6H),3.63(s,1H),3.60-3.57(m,4H),3.41(s,1H),3.40(s,2H),3.32-3.26(m,2H),2.56(s,4H),2.50(s,2H)。
化合物443b：甲基4-(3-氟-2-甲基苯基)-6-(1-((((trans)-4-(甲氧基羰基)环己基)甲基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝1.86min，C30H37FN4O6S2的计算质量632.2，m/z发现值632.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.59(d,J＝3.2Hz,0.9H),9.17(s,0.1H),8.00-7.92(m,2H),7.22-7.13(m,2H),7.08-6.99(m,1H),5.87(s,0.1H),5.73(d,J＝3.2Hz,0.9H),3.79-3.66(m,3H),3.59(s,3H),3.53(s,0.5H),3.52(s,2.5H),2.94(d,J＝6.4Hz,2H),2.87-2.76(m,2H),2.45(s,0.4H),2.38(s,2.6H),2.30-2.22(m,1H),2.06-1.77(m,8H),1.66-1.62(m,1H),1.36-1.31(m,2H),1.18-1.06(m,2H)
化合物447-1C和447-1D：(trans)-甲基4-(4-氟-2-甲基苯基)-6-(1-((3-甲基-3-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)羰基)环丁基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯和(cis)-甲基4-(4-氟-2-甲基苯基)-6-(1-((3-甲基-3-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)羰基)环丁基)-磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物447-1C(trans)：LC-MS(ESI)：RT＝2.323min，C32H43FN4O6S2Si的计算质量690.2，m/z发现值691.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.92-7.87(m,1H),7.76-7.69(m,1H),7.34-7.30(m,0.7H),7.24-7.21(m,0.3H),6.90-6.78(m,2H),5.90(s,0.3H),5.84(s,0.7H),4.26-4.22(m,2H),4.17-4.06(m,0.4H),3.98-3.78(m,3.6H),3.58(s,3H),3.00-2.79(m,4H),2.60(s,1H),2.52(s,2H),2.46-2.38(m,2H),2.10-1.97(m,2H),1.90-1.83(m,1H),1.65-1.62(m,1H),1.43(s,3H),1.06-0.98(m,2H),0.07(s,9H)。
化合物447-1D(cis)：LC-MS(ESI)：RT＝2.301min，C32H43FN4O6S2Si的计算质量690.2，m/z发现值691.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.92-7.87(m,1H),7.75-7.71(m,1H),7.34-7.31(m,0.7H),7.25-7.21(m,0.3H),6.93-6.83(m,2H),5.90(s,0.3H),5.84(s,0.7H),4.25-4.20(m,2H),4.12-4.02(m,1H),3.95-3.78(m,3H),3.58(s,3H),2.99-2.84(m,4H),2.60(s,1H),2.52(s,2H),2.29-2.22(m,2H),2.11-2.01(m,2H),1.93-1.83(m,1.3H),1.66-1.63(m,0.7H),1.48(s,3H),1.05-1.00(m,2H),0.06(s,9H)。
化合物449：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(1-(((4-(甲氧基羰基)-1-甲基环己基)甲基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯,LC-MS(ESI)：RT＝1.75min，C30H36ClFN4O6S2的计算质量666.2，m/z发现值666.8[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.56(d,J＝3.6Hz,0.8H),9.18(s,0.2H),8.02-7.99(m,1.8H),7.93(d,J＝3.2Hz,0.2H),7.44-7.41(m,1H),7.38-7.33(m,1H),7.24-7.20(m,1H),6.02(s,0.2H),5.92(d,J＝2.8Hz,0.8H),3.98-3.93(m,0.2H),3.74-3.66(m,2.8H),3.60(s,3H),3.53(s,2.4H),3.52(s,0.6H),3.01(s,0.9H),2.95(s,1.1H),2.87-2.77(m,2H),2.33-2.24(m,1H),2.02-1.44(m,11H),1.27-1.20(m,1H),1.17(s,1.2H),1.15(m,1.8H)。
外消旋449(100mg，95％纯度，0.142mmol)通过手性制备型HPLC分离(分离条件：柱：Chiralpak IC 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝70:30:0.3，以15mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到呈黄色固体的标题化合物449A(cis)(40mg，90％纯度，38％产率)和呈黄色固体的449B(trans)(40mg，90％纯度，38％产率)。
化合物449A(cis)：LC-MS(ESI)：RT＝1.67min，C30H36ClFN4O6S2的计算质量666.2，m/z发现值666.8[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝70:30:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝11.261min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.54(d,J＝3.2Hz,0.8H),9.17(s,0.2H),8.01(s,1.6H),7.93(br s,0.4H),7.44-7.35(m,2H),7.24-7.19(m,1H),6.02(s,0.2H),5.92(d,J＝3.6Hz,0.8H),3.96(br s,0.2H),3.72-3.66(m,2.8H),3.59(s,3H),3.53(s,3H),3.01(s,2H),2.90-2.82(m,2H),2.35-2.27(m,1H),2.02-1.96(m,1H),1.91-1.81(m,4H),1.74-1.56(m,5H),1.27-1.21(m,2H),1.17(s,3H)。
化合物449B(trans)：LC-MS(ESI)：RT＝1.66min，C30H36ClFN4O6S2的计算质量666.2，m/z发现值666.8[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝70:30:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝13.764min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.54(d,J＝3.2Hz,0.8H),9.16(s,0.2H),8.02-7.98(m,1.6H),7.93(d,J＝3.2Hz,0.4H),7.44-7.41(m,1H),7.39-7.31(m,1H),7.24-7.19(m,1H),6.02(s,0.2H),5.92(d,J＝3.2Hz,0.8H),3.98-3.92(m,0.2H),3.74-3.66(m,2.8H),3.60(s,3H),3.53(s,2.4H),3.52(s,0.6H),2.95(s,2H),2.85-2.77(m,2H),2.33-2.24(m,1H),2.02-1.95(m,1H),1.90-1.72(m,4H),1.65-1.62(m,3H),1.57-1.44(m,4H),1.15(s,3H)。
化合物451：甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(1-(((4-(甲氧基羰基)-1-甲基环己基)甲基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝1.70min，C30H35ClF2N4O6S2的计算质量684.2，m/z发现值684.8[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.66(d,J＝3.6Hz,0.8H),9.24(s,0.2H),8.02-7.94(m,2H),7.49-7.43(m,1H),7.23-7.20(m,1H),6.02(s,0.2H),5.93(d,J＝2.8Hz,0.8H),3.96(br s,0.2H),3.76-3.69(m,2.8H),3.60(s,3H),3.53(s,3H),3.01(s,0.8H),2.94(s,1.2H),2.90-2.76(m,2H),2.34-2.24(m,1H),2.02-1.44(m,11H),1.27-1.19(m,1H),1.17-1.15(m,3H)。
外消旋451(90mg，90％纯度，0.118mmol)通过手性制备型HPLC分离(分离条件：柱：Chiralpak IC 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝70:30:0.3，以15mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到呈黄色固体的标题化合物451A(48mg，90％纯度，53％产率)和呈黄色固体的451B(40mg，90％纯度，44％产率)。
化合物451A(cis)：LC-MS(ESI)：RT＝1.71min，C30H35ClF2N4O6S2的计算质量684.2，m/z发现值684.8[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝70:30:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝10.547min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.65(s,0.8H),9.23(s,0.2H),8.02-7.99(m,1.6H),7.94(d,J＝3.2Hz,0.4H),7.50-7.43(m,1H),7.24-7.16(m,1H),6.03(s,0.2H),5.93(s,0.8H),4.00-3.95(m,0.2H),3.75-3.66(m,2.8H),3.59(s,3H),3.53(s,2.4H),3.52(s,0.6H),3.00(s,2H),2.87-2.82(m,2H),2.34-2.29(m,1H),2.03-1.04(m,10H),1.28-1.21(m,2H),1.07(s,1.8H),1.05(s,1.2H)。
化合物451B(trans)：LC-MS(ESI)：RT＝1.68min，C30H35ClF2N4O6S2的计算质量684.2，m/z发现值684.8[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝70:30:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝12.719min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.65(s,0.8H),9.23(s,0.2H),8.03-7.99(m,1.6H),7.94(d,J＝3.2Hz,0.4H),7.49-7.42(m,1H),7.23-7.15(m,1H),6.02(s,0.2H),5.93(s,0.8H),3.99-3.93(m,0.2H),3.74-3.66(m,2.8H),3.60(s,3H),3.53(s,2.4H),3.52(s,0.6H),2.94(s,2H),2.85-2.77(m,2H),2.30-2.24(m,1H),2.02-1.45(m,12H),1.16(s,1.8H),1.15(s,1.2H)。
化合物453：(trans)-甲基4-(2-氯-3-氟苯基)-6-(1-(((4-(甲氧基羰基)环己基)甲基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯,1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.62(d,J＝4.0Hz,0.8H),9.19(s,0.2H),8.01-7.99(m,1.8H),7.94(d,J＝3.2Hz,0.2H),7.41-7.32(m,2H),7.23-7.16(m,1H),6.07(s,0.2H),5.98(d,J＝3.2Hz,0.8H),3.77-3.65(m,3H),3.59(s,3H),3.53(s,2.2H),3.52(s,0.8H),2.94(d,J＝6.4Hz,2H),2.86-2.78(m,2H),2.30-2.22(m,1H),1.97-1.78(m,8H),1.66-1.62(m,1H),1.41-1.31(m,2H),1.12-1.08(m,2H)。
化合物455：甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(1-(((3-(甲氧基羰基)双环[1.1.1]戊-1-基)甲基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝2.579min，C28H29ClF2N4O6S2的计算质量654.1，m/z发现值654.7[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.20(s,0.2H),7.84-7.83(m,1H),7.54(d,J＝3.2Hz,0.8H),7.47(d,J＝3.2Hz,0.4H),7.42(d,J＝2.0Hz,0.6H),7.08-7.03(m,2H),6.18(s,0.3H),6.06(d,J＝2.4Hz,0.7H),4.20-4.10(m,0.3H),3.99-3.88(m,2.7H),3.69(s,3H),3.60(s,2H),3.59(s,1H),3.14-3.12(m,2H),2.92-2.85(m,2H),2.28-2.22(m,6H),2.08-2.04(m,2H),1.96-1.90(m,1H),1.73-1.70(m,0.6H),1.56(s,0.4H)。
化合物458：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(1-((1-(3-羟基-3-甲基丁基)-1H-吡唑-4-基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝3.150min，C28H32ClFN6O5S2的计算质量650.2，m/z发现值651.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.52(d,J＝3.6Hz,0.8H),9.16(s,0.2H),8.40(s,1H),8.02-7.99(m,1.6H),7.93(d,J＝3.2Hz,0.4H),7.80(s,1H),7.42-7.33(m,2H),7.22-7.18(m,1H),6.00(s,0.2H),5.90(d,J＝3.2Hz,0.8H),4.45(s,1H),4.29-4.25(m,2H),3.76-3.65(m,2H),3.55-3.51(m,1H),3.47(s,3H),2.27-2.18(m,2H),2.09-2.01(m,1H),1.95-1.89(m,3H),1.81-1.78(m,1H),1.65-1.62(m,1H),1.11(s,6H)。
化合物459：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(1-((2-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)乙基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝4.041min，C27H34ClFN4O7S2的计算质量644.2，m/z发现值645.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.19(s,0.3H),7.83(d,J＝2.8Hz,1H),7.52(d,J＝2.4Hz,0.7H),7.45(d,J＝2.8Hz,1H),7.29-7.28(m,0.7H),7.27(br s,0.3H),7.15-7.13(m,1H),6.97-6.89(m,1H),6.19(s,0.4H),6.07(s,0.7H),4.19-4.12(m,0.4H),3.97-3.87(m,4.6H),3.69-3.65(m,6H),3.60-3.55(m,5H),3.37(d,J＝5.2Hz,3H),3.29-3.26(m,2H),3.03-2.89(m,2H),2.30-2.20(m,0.8H),2.12-1.81(m,3.2H)。
化合物460：甲基6-(1-(2,5,8,11-四氧杂三癸-13-基磺酰基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝2.853min，C29H38ClFN4O8S2的计算质量688.2，m/z发现值688.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.19(s,0.3H),7.83(d,J＝3.2Hz,1H),7.53(d,J＝3.2Hz,0.7H),7.45-7.42(m,1H),7.30-7.28(m,0.7H),7.26-7.24(m,0.3H),7.16-7.12(m,1H),6.98-6.89(m,1H),6.19(s,0.3H),6.06(d,J＝2.4Hz,0.7H),4.18-4.11(m,0.3H),3.99-3.87(m,4.7H),3.66-3.62(m,10H),3.60-3.58(m,3H),3.56-3.54(m,2H),3.39(s,2.1H),3.37(s,0.9H),3.29-3.26(m,2H),3.04-2.88(m,2H),2.30-2.20(m,0.7H),2.12-1.80(m,3H),1.73-1.69(m,0.3H)。
化合物461：乙基6-(1-((1H-吡唑-4-基)磺酰基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝1.907min，C24H23ClF2N6O4S2的计算质量596.1，m/z发现值597.0[M+H]+。
化合物464：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(1-((2-(2甲氧基乙氧基)乙基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝3.921min，C25H30ClFN4O6S2的计算质量600.1，m/z发现值600.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.17(s,0.3H),7.83(d,J＝3.2Hz,1H),7.52(d,J＝3.2Hz,0.7H),7.45(d,J＝2.8Hz,0.3H),7.43-7.41(m,0.7H),7.30-7.27(m,0.7H),7.25-7.24(m,0.3H),7.16-7.12(m,1H),6.97-6.88(m,1H),6.19(s,0.3H),6.06(d,J＝2.4Hz,0.7H),4.20-4.12(m,0.3H),3.99-3.86(m,4.7H),3.68-3.65(m,2H),3.60-3.56(m,5H),3.41(s,2.1H),3.40(s,0.93H),3.30-3.26(m,2H),3.04-2.89(m,2H),2.30-2.19(m,1H),2.12-2.02(m,1H),1.96-1.80(m,1.5H),1.72-1.69(m,0.5H)。
化合物466：甲基6-(1-((1H-吡唑-4-基)磺酰基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
LC-MS(ESI)：RT＝1.55min，C23H22ClFN6O4S2的计算质量564.1，m/z发现值565.3[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.76(s,1H),9.51(d,J＝3.6Hz,0.8H),9.15(s,0.2H),8.49-8.19(m,1H),8.10-7.76(m,3H),7.42-7.39(m,1H),7.36-7.29(m,1H),7.22-7.17(m,1H),5.99(s,0.2H),5.90(d,J＝3.6Hz,0.8H),3.77-3.67(m,2H),3.55-3.47(m,4H),2.44-2.36(m,0.2H),2.28-2.17(m,2H),2.10-1.99(m,1H),1.95-1.85(m,1H),1.80-1.77(m,1H),1.64-1.61(m,0.8H)。
化合物467：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(1-((2,2-二甲基-3,3-二苯基-4,7,10-三氧杂-3-硅十二烷-12-基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝2.14min，C42H50ClFN4O7S2Si的计算质量868.3，m/z发现值869.7[M+H]+。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.83(d,J＝3.2Hz,1H),7.68-7.66(m,4H),7.50(d,J＝2.8Hz,1H),7.44-7.35(m,6H),7.29-7.25(m,1H),7.15-7.12(m,1H),6.95-6.90(m,1H),6.11(s,1H),3.96-3.88(m,5H),3.82(t,J＝5.6Hz,2H),3.69-3.61(m,6H),3.57(s,3H),3.24(t,J＝6.0Hz,2H),2.99-2.88(m,2H),2.13-1.74(m,5H),1.05(s,9H)。
化合物469：(trans)-甲基6-(1-((1-(3-(叔丁氧基羰基)环丁基)-1H-吡唑-4-基)磺酰基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝2.26min，C32H36ClFN6O6S2的计算质量718.2，m/z发现值718.8[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.19(s,0.3H),7.84(d,J＝2.8Hz,1H),7.81(s,1H),7.79(s,1H),7.55(d,J＝3.2Hz,0.7H),7.46(d,J＝2.8Hz,0.3H),7.45-7.43(m,0.7H),7.30-7.29(m,0.2H),7.26-7.24(m,0.8H),7.16-7.11(m,1H),6.98-6.90(m,1H),6.17(s,0.3H),6.05(d,J＝2.4Hz,0.7H),5.09-4.99(m,1H),4.02-3.70(m,3H),3.55(s,3H),3.18-3.10(m,1H),2.95-2.86(m,2H),2.81-2.71(m,2H),2.46-2.23(m,3H),2.14-1.89(m,2.4H),1.73-1.70(m,0.6H),1.51(s,9H)。
化合物473：甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(1-((2-甲氧基-2-氧代乙基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯,1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.64(s,1H),8.03-7.94(m,2H),7.47-7.41(m,1H),7.25-7.16(m,1H),5.94(s,1H),4.34-4.31(m,2H),3.83-3.68(m,6H),3.52(s,3H),2.96-2.87(m,2H),2.04-1.94(m,1H),1.90-1.77(m,2H),1.73-1.62(m,1H)。
化合物475：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(1-((4-(2-乙氧基-2-氧代乙基)
环己基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.84(d,J＝2.1Hz,1H),7.56-7.42(m,1.6H),7.30-7.28(m,0.4H),7.16-7.13(m,1H),6.96-6.92(m,1H),6.10(s,1H),4.17-4.10(m,2.4H),4.04-3.94(m,2.6H),3.60(s,3H),3.09-2.93(m,3H),2.29-2.17(m,5H),1.98-1.89(m,4H),1.82-1.73(m,2H),1.29-1.25(m,5H),1.09-1.05(m,1H),0.93-0.83(m,2H)。
外消旋475(150mg，94％纯度，0.214mmol)通过手性制备型HPLC分离(ChiralpakIC 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝40:60:0.3，以11mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到呈黄色固体的标题化合物475A(50mg，根据1H NMR纯度为95％，33％产率)和475B(50mg，92％纯度，32％产率)。
化合物475A(trans)：LC-MS(ESI)：RT＝1.91min，C30H36ClFN4O6S2的计算质量666.2，m/z发现值666.9[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝40:60:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝10.297min)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.17(s,0.3H),7.83(d,J＝2.1Hz,1H),7.54(d,J＝2.4Hz,0.7H),7.45-7.42(m,1H),7.30-7.29(m,1H),7.15-7.11(m,1H),6.97-6.88(m,1H),6.18(s,0.3H),6.06(d,J＝1.8Hz,0.7H),4.20-4.11(m,2.3H),4.07-3.90(m,2.7H),3.60(s,2H),3.59(s,1H),3.09-2.88(m,3H),2.26-2.18(m,4.3H),2.09-1.78(m,5.7H),1.69-1.60(m,3H),1.26(t,J＝5.4Hz,3H),1.12-1.02(m,2H)。
化合物475B(cis)：LC-MS(ESI)：RT＝1.92min，C30H36ClFN4O6S2的计算质量666.2，m/z发现值666.9[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝40:60:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝8.298min)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.17(s,0.3H),7.83-7.81(m,1H),7.52-7.50(m,0.7H),7.45-7.41(m,1H),7.30-7.27(m,0.6H),7.25-7.22(m,0.4H),7.16-7.10(m,1H),6.97-6.87(m,1H),6.18(s,0.3H),6.06(d,J＝2.4Hz,0.7H),4.18-3.87(m,5H),3.59(s,3H),3.09-2.95(m,3H),2.39-2.36(m,2H),2.29-2.11(m,2H),2.02-1.98(m,1H),1.95-1.69(m,8.6H),1.66-1.63(m,1.4H),1.25(t,J＝7.2Hz,3H)。
化合物477：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(1-((4-(2-乙氧基-2-氧代乙基)环己基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝1.93min，C30H35ClF2N4O6S2的计算质量684.2，m/z发现值684.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.83(d,J＝3.2Hz,1H),7.55-7.46(m,1H),7.06-7.02(m,2H),6.18(s,0.4H),6.06(s,0.6H),4.16-3.93(m,5H),3.60(s,3H),3.09-2.89(m,3H),2.38-2.17(m,6H),2.01-1.74(m,8H),1.28-1.24(m,5H)。
外消旋477(140mg，95％纯度，0.194mmol)通过手性制备型HPLC分离(ChiralpakIC 5μm 30*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝50:50:0.3，以25mL/min；温度：30℃；波长：230nm)，得到呈黄色固体的标题化合物477A(50mg，根据1H NMR纯度为95％，36％产率)和477B(30mg，根据1H NMR纯度为95％，21％产率)。
化合物477A(trans)：LC-MS(ESI)：RT＝1.94min，C30H35ClF2N4O6S2的计算质量684.2，m/z发现值684.8[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝50:50:0.2，以1.0mL/min；Temp.:30℃；波长：230nm，RT＝10.735min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.22(s,0.4H),7.84-7.82(m,1H),7.55(d,J＝2.8Hz,0.6H),7.46-7.43(m,1H),7.08-7.00(m,2H),6.17(s,0.4H),6.06(d,J＝2.8Hz,0.6H),4.19-4.13(m,2.3H),4.06-3.90(m,2.7H),3.60(s,1.8H),3.59(s,1.2H),3.08-2.88(m,3H),2.25-2.14(m,4.7H),2.04-1.77(m,6H),1.69-1.66(m,2.3H),1.26(t,J＝7.2Hz,3H),1.11-1.01(m,2H)。
化合物477B(cis)：LC-MS(ESI)：RT＝1.95min，C30H35ClF2N4O6S2的计算质量684.2，m/z发现值684.8[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝50:50:0.2，以1.0mL/min；Temp.:30℃；波长：230nm，RT＝8.605min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.19(s,0.3H),7.83(d,J＝3.2Hz,1H),7.53-7.52(m,0.7H),7.46(d,J＝3.2Hz,0.4H),7.41(s,0.6H),7.08-7.00(m,2H),6.18(s,0.4H),6.06(d,J＝2.8Hz,0.6H),4.22-3.89(m,5H),3.60(s,1.8H),3.59(s,1.2H),3.08-2.97(m,3H),2.39-2.36(m,2H),2.25-2.15(m,2H),2.08-1.99(m,1H),1.96-1.78(m,8H),1.73-1.61(m,2H),1.26(t,J＝7.2Hz,3H)。
化合物479：乙基6-(1-(((3-(叔丁氧基羰基)环丁基)甲基)磺酰基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
LC-MS(ESI)：RT＝2.02min，C31H37ClF2N4O6S2的计算质量698.2，m/z发现值699.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.18(s,0.4H),7.83(d,J＝3.2Hz,1H),7.53(d,J＝3.2Hz,0.6H),7.45(d,J＝3.2Hz,0.4H),7.36(s,0.6H),7.11-6.98(m,2H),6.20(s,0.4H),6.09(d,J＝2.4Hz,0.6H),4.22-3.86(m,5H),3.11-2.74(m,6H),2.58-2.44(m,2H),2.30-2.06(m,3.6H),1.97-1.77(m,1.8H),1.75-1.67(0.6H),1.50-1.41(m,9H),1.26(t,J＝7.2Hz,0.4H),1.12(t,J＝7.2Hz,3H)。
外消旋479(750mg，1.07mmol)通过手性制备型HPLC分离(第一分离条件:柱：Chiralpak ID 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝80:20:0.3，以15mL/min；波长：214nm；第二分离条件：柱：Superchiral S-IC 5μm 21*250mm；流动相：Hex:EtOH＝95:5，以20mL/min；波长：254nm；第三分离条件：柱：Superchiral S-IC 5μm 21*250mm；流动相：Hex:EtOH＝95:5，以20mL/min；波长：254nm)，得到呈黄色固体的标题化合物479M(170mg，99.8％纯度，23％产率，100％立体纯)，479N(60mg，98.5％纯度，8％产率，100％立体纯)，479P(120mg，99.9％纯度，16％产率，100％立体纯)和479Q(60mg，99.8％纯度，8％产率，100％立体纯)。
化合物479M：LC-MS(ESI)：RT＝3.331min，C31H37ClF2N4O6S2的计算质量698.2，m/z发现值699.2[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak ID 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝80:20:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝12.253min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.63(d,J＝3.6Hz,0.8H),9.14(s,0.2H),8.04-7.99(m,1.8H),7.94(d,J＝3.2Hz,0.2H),7.49-7.43(m,1H),7.24-7.17(m,1H),6.03(s,0.2H),5.94(d,J＝3.2Hz,0.8H),4.01-3.94(m,2.2H),3.75-3.66(m,2.8H),3.16(d,J＝7.2Hz,2H),3.02-2.93(m,1H),2.85-2.77(m,2H),2.67-2.59(m,1H),2.35-2.28(m,2H),2.10-1.93(m,3H),1.90-1.77(m,2.2H),1.65-1.62(m,0.8H),1.39(s,9H),1.10-1.03(m,3H)。
化合物479N：LC-MS(ESI)：RT＝3.318min，C31H37ClF2N4O6S2的计算质量698.2，m/z发现值699.2[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak ID 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝80:20:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝12.963min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.63(d,J＝3.2Hz,0.8H),9.14(s,0.2H),8.01-7.99(m,1.8H),7.94(d,J＝2.8Hz,0.2H),7.49-7.43(m,1H),7.24-7.17(m,1H),6.04(s,0.2H),5.94(d,J＝3.6Hz,0.8H),4.01-3.94(m,2.2H),3.75-3.66(m,2.8H),3.25(d,J＝7.6Hz,2H),3.09-3.01(m,1H),2.86-2.73(m,3H),2.33-2.27(m,2H),2.15-2.08(m,2H),2.04-1.97(m,1H),1.95-1.78(m,2.2H),1.65-1.62(m,0.8H),1.41(s,9H),1.10-1.03(m,3H)。
化合物479P：LC-MS(ESI)：RT＝3.318min，C31H37ClF2N4O6S2的计算质量698.2，m/z发现值699.2[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak ID 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝80:20:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝15.188min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.63(d,J＝3.2Hz,0.8H),9.14(s,0.2H),8.01-7.99(m,1.8H),7.94(d,J＝2.8Hz,0.2H),7.49-7.43(m,1H),7.24-7.17(m,1H),6.04(s,0.2H),5.94(d,J＝3.6Hz,0.8H),4.01-3.94(m,2.2H),3.75-3.66(m,2.8H),3.16(d,J＝7.6Hz,2H),3.02-2.93(m,1H),2.85-2.77(m,2H),2.67-2.59(m,1H),2.35-2.28(m,2H),2.11-1.93(m,3H),1.90-1.77(m,2.2H),1.65-1.62(m,0.8H),1.39(s,9H),1.10-1.03(m,3H)。
化合物479Q：LC-MS(ESI)：RT＝3.313min，C31H37ClF2N4O6S2的计算质量698.2，m/z发现值699.2[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak ID 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝80:20:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝15.206min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.63(d,J＝2.8Hz,0.8H),9.14(s,0.2H),8.01-7.99(m,1.8H),7.94(d,J＝3.2Hz,0.2H),7.49-7.43(m,1H),7.24-7.17(m,1H),6.04(s,0.2H),5.94(d,J＝2.0Hz,0.8H),4.01-3.94(m,2.2H),3.75-3.66(m,2.8H),3.25(d,J＝7.2Hz,2H),3.08-3.01(m,1H),2.86-2.73(m,3H),2.33-2.27(m,2H),2.15-2.05(m,2H),2.02-1.94(m,1H),1.90-1.77(m,2.2H),1.65-1.62(m,0.8H),1.41(s,9H),1.10-1.03(m,3H)。
化合物481A和481B：乙基6-(1-((3-(2-(叔丁氧基)-2-氧代乙基)环丁基)磺酰基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
纯化条件：硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝4:1至2:1)，得到呈黄色固体的产物(210mg，88％产率)，将其通过手性制备型SFC分离(柱：Chiralpak IC 5μm 20*250mm；流动相：CO2:IPA:DEA＝60:40:0.3，以50g/min；柱温：40℃；波长：230nm；背压：100巴)，得到呈黄色固体的标题化合物481A(65.8mg，31％产率，100％立体纯)和481B(64.8mg，31％产率，100％立体纯)。
化合物481A：LC-MS(ESI)：RT＝3.997min，C31H37ClF2N4O6S2的计算质量698.2，m/z发现值699.2[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：CO2:IPA:DEA＝60:40:0.2，以3.0g/min；柱温：40℃；波长：280nm，RT＝5.40min)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.93(d,J＝3.2Hz,0.3H),7.89(d,J＝3.6Hz,0.7H),7.76(d,J＝3.2Hz,0.7H),7.73(d,J＝3.6Hz,0.3H),7.27-7.19(m,2H),6.15(s,0.3H),6.08(s,0.7H),4.11-3.98(m,3.4H),3.95-3.82(m,2.6H),2.98-2.88(m,2H),2.82-2.74(m,1H),2.70-2.61(m,2H),2.48(d,J＝7.6Hz,2H),2.22-1.85(m,5.3H),1.70-1.65(m,0.7H),1.44-1.43(m,9H),1.14-1.10(m,3H)。
化合物481B：LC-MS(ESI)：RT＝3.986min，C31H37ClF2N4O6S2的计算质量698.2，m/z发现值699.1[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：CO2:IPA:DEA＝60:40:0.2，以3.0g/min；柱温：40℃；波长：280nm，RT＝4.28min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.62(d,J＝3.2Hz,0.7H),9.12(s,0.3H),8.01-8.00(m,2H),7.51-7.43(m,1H),7.24-7.17(m,1H),6.03(s,0.3H),5.93(d,J＝3.2Hz,0.7H),4.01-3.89(m,3H),3.76-3.64(m,3H),2.88-2.77(m,2H),2.44-2.41(m,1H),2.34(d,J＝7.2Hz,2H),2.07-1.57(m,8H),1.40-1.39(m,9H),1.09-1.03(m,3H)。
化合物483：甲基6-(1-((2-(2-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)乙氧基)乙基)磺酰基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.16(s,0.3H),7.82-7.81(m,1H),7.69-7.67(m,4H),7.48(d,J＝3.2Hz,0.7H),7.44-7.34(m,7H),7.30-7.27(m,0.6H),7.25-7.23(m,0.4H),7.16-7.12(m,1H),6.97-6.88(m,1H),6.19(s,0.3H),6.06(d,J＝2.4Hz,0.7H),4.10-4.05(m,0.3H),3.99-3.82(m,6.7H),3.63-3.60(m,2H),3.57-3.56(m,3H),3.22-3.18(m,2H),2.95-2.84(m,2H),2.29-2.19(m,0.7H),2.11-1.99(m,1H),1.92-1.89(m,1.2H),1.83-1.77(m,0.4H),1.71-1.67(m,0.7H),1.58(s,9H)。
节IV：具有通式I的主要二氢嘧啶的不稳定酯的水解
化合物105：3-((4-(6-(2-氯-4-氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)丙酸
方法S：在0℃向甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(1-((3-甲氧基-3-氧代丙基)磺酰基)
哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯化合物104(63mg，0.11mmol)在四氢呋喃(2mL)中的溶液中添加氢氧化锂一水合物(13.4mg，0.33mmol)在水(3mL)中的溶液。在室温搅拌2小时后，用1N盐酸水溶液(5mL)将混合物酸化至pH＝3。将所得混合物用乙酸乙酯(10mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到呈黄色固体的标题化合物(30mg，49％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝3.040min，C23H24ClFN4O6S2的计算质量570.1，m/z发现值571.1[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:TFA＝70:30:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝11.155min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.00-7.95(m,2H),7.41(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),7.38-7.34(m,1H),7.23-7.18(m,1H),5.94(s,1H),3.75-3.66(m,3H),3.54(s,3H),3.23(t,J＝3.6Hz,2H),2.88(q,J＝12.4Hz,2H),2.50-2.46(m,2H),2.06-2.94(m,1H),1.86-1.75(m,2H),1.70-1.56(m,1H)。
化合物92：2-(trans-2-(6-(2-氯-4-氟苯基)-5-(乙氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)环丙基)乙酸
方法T：将化合物91H(46mg，0.09mmol)在4M盐酸在1,4-二噁烷(4mL)中的混合物在室温下搅拌2小时。然后将其浓缩，得到残余物，将所述残余物通过制备型薄层色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝1:1)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物(14.0mg，34％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝3.904min，C21H19ClFN3O4S的计算质量463.1，m/z发现值463.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IE 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:IPA:TFA＝85:15:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝7.771min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.44(d,J＝3.6Hz,1H),7.99-7.96(m,2H),7.44-7.36(m,2H),7.20-7.15(m,1H),5.90(d,J＝2.0Hz,1H),4.02-3.94(m,2H),3.13-3.07(m,1H),2.37-2.32(m,3H),1.92-1.82(m,1H),1.08(t,J＝7.2Hz,3H),0.78-0.71(m,1H)。
化合物141：(trans)-3-((4-(6-(2-氯-4-氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)-1-甲基环丁烷-1-甲酸
方法U：在室温向(trans)-甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(1-((3-甲基-3-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)羰基)环丁基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯化合物140A(160mg，0.202mmol)在二氯甲烷(8mL)中的溶液中添加三氟乙酸(4mL)。在室温下在氮气气氛下搅拌2小时后，将反应混合物用水(20mL)稀释，并用乙酸乙酯(20mL)萃取两次。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥，过滤并浓缩。将残余物通过C18柱(乙腈:水＝60％至80％)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物(125mg，98％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝3.476min，C26H28ClFN4O6S2的计算质量610.1，m/z发现值610.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.58(s,1H),9.55(d,J＝3.2Hz,0.8H),9.15(s,0.2H),8.01-7.98(m,1.8H),7.93(d,J＝3.2Hz,0.2H),7.45-7.41(m,1H),7.37-7.30(m,1H),7.24-7.17(m,1H),6.01(s,0.2H),5.91(d,J＝3.2Hz,0.8H),4.00-3.92(m,1H),3.79-3.65(m,3H),3.53(s,2.4H),3.52(s,0.6H),2.91-2.82(m,2H),2.79-2.68(m,2H),2.29-2.20(m,2H),2.08-1.71(m,3H),1.62-1.55(m,1H),1.35(s,3H)。
化合物270A：(trans)-3-((4-(6-(2-氯-3,4-二氟苯基)-5-(乙氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)-1-甲基环丁烷甲酸
方法W：向(trans)-乙基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(1-((3-甲基-3-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)羰基)环丁基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯化合物269A(180mg，90％纯度，0.218mmol)在四氢呋喃(5mL)中的溶液中添加在四氢呋喃中的1M四丁基氟化铵(5mL，5.0mmol)。在室温搅拌2小时后，将反应用水(5mL)淬灭并浓缩，得到残余物，将其用水(5mL)稀释，并用乙酸乙酯(10mL)萃取三次。将合并的有机层用水(10mL)洗涤三次，经Na2SO4(s)干燥并浓缩，得到粗产物，将其通过制备型HPLC纯化(柱：Gilson Xbrige C18(5μm 19*150mm)，流动相A：水(0.1％碳酸氢铵)，流动相B：乙腈，UV：214nm，流速：15mL/min，梯度：10％-80％(％B))，得到呈黄色固体所需产物(125mg，99.7％纯度，89％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝3.401min，C27H29ClF2N4O6S2的计算质量642.1m/z发现值643.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.01-7.94(m,2H),7.45(q,J＝8.4Hz,1H),7.23-7.15(m,1H),6.04(s,0.2H),5.93(s,0.8H),4.02-3.89(m,3H),3.75-3.64(m,3H),2.92-2.80(m,2H),2.74-2.64(m,2H),2.25-2.18(m,2H),2.02-1.70(m,3H),1.64-1.56(m,1H),1.33(s,3H),1.07(t,J＝7.2Hz,3H)。
类似地使用类似程序(方法S或方法T，方法U或方法W)，可以制备以下酸：
Figure BDA0002341655160003981
Figure BDA0002341655160003991
Figure BDA0002341655160004001
Figure BDA0002341655160004011
Figure BDA0002341655160004021
Figure BDA0002341655160004041
Figure BDA0002341655160004051
Figure BDA0002341655160004061
Figure BDA0002341655160004071
Figure BDA0002341655160004081
化合物107：2-((4-(6-(2-氯-4-氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)乙酸
LC-MS(ESI)：RT＝3.307min，C22H22ClFN4O6S2的计算质量556.1，m/z发现值556.9[M+H]+。手性HPLC(Chiralpak IB 5μm 4.6*250mm，流动相：Hex:EtOH:TFA＝70:30:0.2，以1.0mL/min，温度：30℃，波长：230nm，RT＝8.254min)；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.00(s,1.7H),7.92(s,0.3H),7.41(dd,J＝8.8,2.8Hz,1H),7.38-7.34(m,1H),7.23-7.18(m,1H),6.01(s,0.2H),5.92(s,0.8H),3.95-3.88(m,2H),3.80-3.64(m,3H),3.53(s,3H),2.97-2.88(m,2H),2.04-1.91(m,1H),1.90-1.77(m,2H),1.62(d,J＝11.2Hz,1H)。
化合物7：2-((4-(6-(2-氯-4-氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢-嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)-2-甲基丙酸
LC-MS(ESI)：RT＝3.967min，C24H26ClFN4O6S2的计算质量584.1，m/z发现值584.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IE 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:IPA:TFA＝70:30:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝10.158min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6(+D2O))δ7.98(dd,J＝12.4,3.2Hz,2H),7.41(dd,J＝8.4,2.8Hz,1H),7.34(dd,J＝9.2,6.0Hz,1H),7.22-7.17(m,1H),5.93(s,1H),3.85-3.82(m,3H),3.52(s,3H),3.06-2.98(m,2H),2.01-1.92(m,1H),1.88-1.80(m,1H),1.75(d,J＝12Hz,1H),1.60(d,J＝12.4Hz,1H),1.51(s,6H)。
化合物114：3-((4-(6-(2-氯-3-氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢-嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)丙酸
LC-MS(ESI)：RT＝2.524min，C23H24ClFN4O6S2的计算质量570.1，m/z发现值571.1[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IF 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:TFA＝60:40:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝11.664min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.62(brs,1H),8.00(s,2H),7.41-7.31(m,2H),7.21(d,J＝7.2Hz,1H),5.99(s,1H),3.80-3.68(m,3H),3.53(s,3H),3.31(t,J＝7.2Hz,2H),2.95-2.86(m,2H),2.67(t,J＝7.2Hz,2H),2.05-1.61(m,4H)。
化合物17：trans-4-(6-(2-氯-3-氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)环己烷甲酸
LC-MS(ESI)：RT＝3.326min，C22H21ClFN3O4S的计算质量477.1，m/z发现质量477.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IE 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:TFA＝85:15:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝11.064min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.45(brs,0.6H),8.94(br s,0.4H),7.99-7.93(m,2H),7.39-7.29(m,2H),7.19-7.17(m,1H),6.06(br s,0.4H),5.97(br s,0.6H),3.87-3.77(m,0.4H),3.64-3.56(m,0.6H),3.52(s,3H),2.42-2.37(m,0.4H),2.35-2.21(m,0.6H),2.05-1.97(m,2H),1.86-1.76(m,2H),1.73-1.62(m,2H),1.44-1.36(m,2H)。
化合物19：trans-4-(6-(2-氯-4-氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)环己烷甲酸
LC-MS(ESI)：RT＝3.958min，C22H21ClFN3O4S的计算质量477.1，m/z发现值478.1[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IE 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:IPA:TFA:DEA＝85:15:0.1:0.1，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝9.501min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.03(br s,1H),9.40(d,J＝2.8Hz,0.6H),8.92(s,0.4H),7.99-7.98(m,1.6H),7.94-7.93(m,0.4H),7.45-7.39(m,1H),7.36-7.30(m,1H),7.23-7.18(m,1H),6.01(s,0.4H),5.91(d,J＝3.2Hz,0.6H),3.89-3.75(m,0.4H),3.64-3.56(m,0.6H),3.53(s,3H),2.44-2.32(m,0.4H),2.25-2.17(m,0.6H),2.09-1.97(m,2H),1.88-1.58(m,4H),1.49-1.34(m,2H)。
化合物21：trans-4-(6-(2-氯-4-氟苯基)-5-(乙氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)环己烷甲酸
LC-MS(ESI)：RT＝4.156min，C23H23ClFN3O4S的计算质量491.1，m/z发现值491.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IE 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:IPA:DEA:TFA＝85:15:0.1:0.1，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm,100％ee,RT＝8.533min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.88(br s,0.2H),7.99(d,J＝3.6Hz,1.8H),7.94(d,J＝3.2Hz,0.2H),7.44-7.41(m,1H),7.36-7.33(m,1H),7.24-7.19(m,1H),6.02(s,0.4H),5.91(s,0.6H),4.00-3.93(m,2H),3.86-3.77(m,0.4H),3.61-3.54(m,0.6H),2.40-2.33(m,0.4H),2.25-2.18(m,0.6H),2.04-1.74(m,6H),1.47-1.32(m,2H),1.10-1.03(m,3H)。
化合物23：trans-4-(6-(2-氯-3-氟苯基)-5-(乙氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)环己烷甲酸
LC-MS(ESI)：RT＝3.542min，C23H23ClFN3O4S的计算质量，m/z发现值492.2[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IE 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:IPA:TFA:DEA＝90:10:0.1:0.1，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝12.746min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.49(brs,0.5H),8.88(s,0.5H),8.00-7.93(m,2H),7.39-7.31(m,2H),7.21-7.17(m,1H),6.07(s,0.4H),5.96(s,0.6H),4.00-3.93(m,2H),3.84-3.78(m,0.5H),3.59-3.55(m,0.5H),2.34-2.28(m,0.5H),2.18-2.15(m,0.5H),2.03-1.96(m,2H),1.86-1.63(m,4H),1.40-1.35(m,2H),1.09-1.02(m,3H)。
化合物25：cis-3-(6-(2-氯-3-氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)环己烷甲酸
LC-MS(ESI)：RT＝4.541min，C22H21ClFN3O4S的计算质量477.1，m/z发现值477.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak ID 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:TFA＝85:15:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝7.090min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.12(br s,0.3H),8.00-7.98(m,1.6H),7.94(d,J＝2.8Hz,0.4H),7.40-7.29(m,2H),7.21-7.15(m,1H),6.06(s,0.4H),5.97(s,0.6H),3.97-3.89(m,0.4H),3.71-3.63(m,0.6H),3.52-3.51(m,3H),2.35-2.24(m,1H),1.93-1.81(m,3H),1.78-1.67(m,3H),1.45-1.25(m,2H)。
化合物29：2-(trans-4-(6-(2-氯-3-氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)环己基)乙酸
LC-MS(ESI)：RT＝3.930min，C23H23ClFN3O4S的计算质量491.1，m/z发现值491.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:TFA＝90:10:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm；RT＝9.625min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.81(brs,1H),9.46(br s,0.4H),8.97(s,0.6H),7.99-7.97(m,1.6H),7.93(d,J＝3.2Hz,0.4H),7.39-7.28(m,2H),7.21-7.15(m,1H),6.06(s,0.4H),5.96(s,0.6H),3.87-3.53(m,1H),3.51-3.50(m,3H),2.14(d,J＝6.8Hz,2H),1.88-1.55(m,7H),1.15-1.03(m,2H)。
化合物72C：3-(6-(2-氯-4-氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)环戊烷甲酸
LC-MS(ESI)：RT＝3.434min，C20H17ClFN3O4S的计算质量463.1，m/z发现值463.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralcel OJ-H 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:TFA＝70:30:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝6.639min)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.93(d,J＝2.8Hz,1H),7.78(d,J＝3.2Hz,1H),7.38(dd,J＝8.4,6.0Hz,1H),7.25(dd,J＝8.4,2.8Hz,1H),7.07(td,J＝8.4,2.4Hz,1H),6.08(s,1H),4.44-4.35(m,1H),3.59(s,3H),3.18-3.10(m,1H),2.29-2.16(m,3H),2.05-1.81(m,3H)。
化合物72F：3-(6-(2-氯-4-氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)环戊烷甲酸
LC-MS(ESI)：RT＝3.875min，C21H19ClFN3O4S的计算质量463.1，m/z发现值463.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:TFA＝80:20:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝5.240min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.02(s,1H),9.45(d,J＝3.6Hz,0.8H),8.99(s,0.2H),7.99(q,J＝3.2Hz,1.8H),7.93(d,J＝3.2Hz,0.2H),7.44-7.40(m,1H),7.35-7.30(m,1H),7.24-7.17(m,1H),6.01(s,0.2H),5.92(d,J＝3.6Hz,0.8H),4.35-4.28(m,0.2H),4.24-4.16(m,0.8H),3.52(s,2.4H),3.51(s,0.6),3.06-2.97(m,1H),2.16-1.77(m,6H)。
化合物77：3-(6-(2-氯-3-氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)环戊烷甲酸
LC-MS(ESI)：RT＝3.607min，C21H19ClFN3O4S的计算质量463.1，m/z发现值463.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.09(br s,1H),9.75-9.45(m,1H),8.01-7.91(m,2H),7.41-7.30(m,2H),7.23-7.13(m,1H),6.06(s,0.3H),5.97-5.95(m,0.7H),4.52-4.34(m.0.3H),4.30-4.07(m.0.7H),3.52(s,3H),3.43-3.23(m,1H),3.08-2.96(m,0.4H),2.91-2.68(m,0.6H),2.22-1.99(m,3H),1.94-1.74(m,2H)。
化合物86：6-(3-羧基-环丁基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氢-嘧啶-5-甲酸甲基酯
LC-MS(ESI)：RT＝4.042min，C20H17ClFN3O4S的计算质量449.1，m/z发现值449.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:TFA＝80:20:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝5.654min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.31(s,0.2H),7.85(d,J＝2.8Hz,0.8H),7.83(d,J＝3.2Hz,0.2H),7.53-7.50(m,1.6H),7.46(d,J＝3.6Hz,0.2H),7.30-7.27(m,1H),7.14(dd,J＝8.4,2.4Hz,1H),6.97-6.89(m,1H),6.18(s,0.2H),6.06(d,J＝2.8Hz,0.8H),4.75-4.69(m,0.2H),4.64-4.56(m,0.8H),3.61(s,2.5H),3.59(s,0.5H),3.47-3.39(m,0.8H),3.28-3.20(m,0.2H),2.85-2.69(m,2H),2.67-2.60(m,1.7H),2.54-2.51(m,0.3H)。
化合物93：2-(trans-2-(6-(2-氯-4-氟苯基)-5-(乙氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)环丙基)乙酸
LC-MS(ESI)：RT＝3.309min，C21H19ClFN3O4S的计算质量463.1，m/z发现值463.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:TFA＝90:10:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝10.898min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.48(s,J＝3.2Hz,1H),8.00-7.96(m,2H),7.40(dd,J＝7.2,2.4Hz,1H),7.34-7.30(m,1H),7.24-7.19(m,1H),5.92(d,J＝3.6Hz,1H),3.98(q,J＝7.2Hz,2H),3.11-3.05(m,1H),2.37-2.28(m,2H),1.70-1.61(m,1H),1.46-1.39(m,1H),1.07(t,J＝7.2Hz,3H),0.84-0.74(m,1H)。
化合物95：4-(6-(2-氯-4-氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)环庚烷甲酸
LC-MS(ESI)：RT＝3.860min，C23H23ClFN3O4S的计算质量491.1，m/z发现值491.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.91(br s,1H),7.74-7.73(m,1H),7.41-7.36(m,1H),7.23-7.21(m,1H),7.06-7.02(m,1H),6.11-6.05(m,1H),4.11(br s,0.6H),3.93(br s,0.4H),3.59(s,3H),2.55(br s,1H),2.22-1.47(m,10H)。
化合物95A：LC-MS(ESI)：RT＝3.623min，C23H23ClFN3O4S的计算质量491.1，m/z发现值491.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.91(s,1H),7.73(d,J＝3.2Hz,1H),7.40-7.37(m,1H),7.22-7.20(m,1H),7.07-7.03(m,1H),6.11(s,0.6H),6.05(s,0.4H),4.11(br s,0.6H),3.93(br s,0.4H),3.59(s,3H),2.64(s,1H),2.19-1.74(m,9H),1.61-1.46(m,1H)。
化合物95C：LC-MS(ESI)：RT＝2.621min，C23H23ClFN3O4S的计算质量491.1，m/z发现值492.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.92(s,1H),7.74(d,J＝3.2Hz,1H),7.41-7.37(m,1H),7.23-7.21(m,1H),7.07-7.02(m,1H),6.11(s,0.6H),6.05(s,0.4H),,4.11(br s,0.6H),3.93(br s,0.4H),3.59(s,3H),2.61(br s,1H),2.22-1.75(m,10H)。
化合物95E：LC-MS(ESI)：RT＝3.530min，C23H23ClFN3O4S的计算质量491.1，m/z发现值492.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.92-7.89(m,1H),7.74(d,J＝3.2Hz,1H),7.39-7.36(m,1H),7.23-7.21(m,1H),7.06-7.01(m,1H),6.12(s,0.6H),6.04(s,0.4H),,4.12(brs,0.6H),3.94(br s,0.4H),3.59(s,3H),2.55(br s,1H),2.17-1.71(m,10H)。
化合物142：(cis)-3-((4-(6-(2-氯-4-氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)-1-甲基环丁烷-1-甲酸
LC-MS(ESI)：RT＝3.345min，C26H28ClFN4O6S2的计算质量610.1，m/z发现值610.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.55(s,0.8H),9.15(s,0.2H),8.03-8.00(m,1.8H),7.93(s,0.2H),7.45-7.41(m,1H),7.38-7.34(m,1H),7.24-7.19(m,1H),6.02(s,0.2H),5.92(s,0.8H),4.14-4.05(m,1H),3.78-3.63(m,3H),3.53(s,3H),2.90-2.80(m,2H),2.70-2.63(m,2H),2.17-2.07(m,2H),2.00-1.71(m,3H),1.63-1.55(m,1H),1.40(s,3H)。
化合物146：(trans)-3-((4-(6-(2-氯苯基)-5-乙氧基羰基-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)环丁烷-1-甲酸：LC-MS(ESI)：RT＝4.575min，C26H29ClN4O6S2的计算质量592.1，m/z发现值592.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.99-7.97(m,1.8H),7.92(d,J＝2.8Hz,0.2H),7.44-7.42(m,1H),7.36-7.26(m,3H),6.07(s,0.2H),5.96(s,0.8H),4.02-3.95(m,3.2H),3.78-3.71(m,2.8H),3.13-3.10(m,1H),2.91-2.82(m,2H),2.57-2.51(m,4H),2.06-1.94(m,1H),1.89-1.76(m,2.2H),1.61-1.58(m,0.8H),1.08-1.02(m,3H)。
化合物148A：(trans)-4-(6-(2-溴苯基)-5-乙氧基羰基-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)环己烷-1-甲酸，LC-MS(ESI)：RT＝3.561min，C23H24BrN3O4S的计算质量517.1，m/z发现值520.1[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak OJ-H 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:TFA＝85:15:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝8.374min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.01(br s,1H),9.23(s,0.6H),8.83(s,0.4H),7.99-7.97(m,1.5H),7.92(d,J＝3.2Hz,0.5H),7.61(d,J＝8.4Hz,1H),7.38-7.32(m,2H),7.22-7.16(m,1H),6.03(s,0.4H),5.91(d,J＝2.8Hz,0.6H),4.01-3.92(m,2H),3.87-3.79(m,0.5H),3.61-3.56(m,0.5H),2.42-2.35(m,0.5H),2.25-2.19(m,0.5H),2.04-1.97(m,2H),1.91-1.64(m,4H),1.47-1.37(m,2H),1.10-1.02(m,3H)。
化合物150A：(trans)-4-(6-(2-溴-3-氟苯基)-5-乙氧基羰基-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)环己烷-1-甲酸，LC-MS(ESI)：RT＝3.634min，C23H23BrFN3O4S的计算质量535.1，m/z发现值538.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.87(s,1H),7.99(d,J＝4.0Hz,1.5H),7.93(d,J＝3.2Hz,0.5H),7.44-7.38(m,1H),7.31-7.24(m,1H),7.20-7.15(m,1H),6.60(s,0.5H),5.96(s,0.5H),3.99-3.94(m,2H),3.89-3.79(m,0.5H),3.62-3.55(m,0.5H),2.41-2.34(m,0.5H),2.25-2.19(m,0.5H),2.05-1.98(m,2H),1.91-1.63(m,4H),1.47-1.33(m,2H),1.09-1.01(m,3H)。
化合物152A：LC-MS(ESI)：RT＝3.382min，C22H21BrFN3O4S的计算质量521.0，m/z发现值524.0[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IE 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:TFA＝85:15:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝10.792min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.11(s,0.7H),7.83(d,J＝2.8Hz,1H),7.51(s,0.3H),7.49(d,J＝3.2Hz,0.5H),7.45(d,J＝3.2Hz,0.5H),7.24-7.18(m,1H),7.12(d,J＝7.6Hz,1H),7.07-6.99(m,1H),6.25(s,0.5H),6.09(d,J＝2.8Hz,0.5H),4.07-4.01(m,0.5H),3.83-3.75(m,0.5H),3.61(s,1H),3.59(s,2H),2.50-2.43(m,1H),2.27-2.12(m,2.5H),2.06-1.93(m,1.5H),1.81-1.50(m,4H)。
化合物154A：LC-MS(ESI)：RT＝3.726min，C24H25F2N3O4S的计算质量489.2，m/z发现值490.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.04(s,1H),9.49(d,J＝2.8Hz,0.7H),8.88(s,0.3H),7.98(d,J＝3.2Hz,1.7H),7.92(d,J＝3.2Hz,0.3H),7.26-7.17(m,1H),7.10-7.07(m,0.7H),7.00-6.95(m,0.3H),5.81(s,0.3H),5.68(d,J＝3.2Hz,0.7H),3.97(q,J＝7.2Hz,2H),3.86-3.79(m,0.3H),3.61-3.52(m,0.7H),2.50(s,1H),2.45(s,2H),2.39-2.32(m,0.3H),2.25-2.18(m,0.7H),2.08-1.59(m,6H),1.49-1.30(m,2H),1.07(t,J＝6.8Hz,3H)。
化合物156A：LC-MS(ESI)：RT＝3.467min，C23H23BrFN3O4S的计算质量535.1，m/z发现值536.0[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IE 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:TFA＝90:10:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm；RT＝12.600min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.99(br s,1H),9.31(d,J＝3.2Hz,0.6H),8.85(s,0.4H),7.99-7.97(m,1.6H),7.93(d,J＝3.2Hz,0.4H),7.56(dd,J＝8.4,2.0Hz,1H),7.36-7.31(m,1H),7.28-7.22(m,1H),5.99(s,0.4H),5.89(d,J＝3.6Hz,0.6H),4.01-3.93(m,2H),3.85-3.78(m,0.4H),3.61-3.54(m,0.6H),2.42-2.32(m,0.4H),2.26-2.19(m,0.6),2.04-1.97(m,2H),1.90-1.61(m,4H),1.47-1.36(m,2H),1.11-1.04(m,3H)。
化合物162:trans-3-((4-(-6-(2-溴-3,4-二氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)环丁烷甲酸：LC-MS(ESI)：RT＝4.127min，C25H25BrF2N4O6S2的计算质量658.0，m/z发现值658.8[M+H]+。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.91(s,1H),7.75(s,1H),7.29-7.19(m,2H),6.12-6.07(m,1H),4.10-3.87(m,4H),3.58(s,3H),3.26-3.20(m,1H),3.02-2.92(m,2H),2.77-2.64(m,4H),2.14-1.69(m,4H)。
化合物195A：(trans)-3-((4-(6-(2-氯-3,4-二氟苯基)-5-乙氧基羰基-2-(2,4,6-三氟苯基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)环丁烷甲酸，LC-MS(ESI)：RT＝4.267min，C29H27ClF5N3O6S的计算质量675.1，m/z发现值676.1[M+H]+。手性分析(柱：Chiralcel OZ-H 5μm 4.6*150mm,Phase:Hex:EtOH＝90:10，以1.0mL/min，温度：35℃；波长：254nm，RT＝7.778min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.56(s,1H),7.59-7.47(m,1H),7.27-7.17(m,3H),5.97(s,0.8H),5.88(s,0.2H),4.01-3.92(m,4H),3.81-3.66(m,2H),3.12-3.08(m,1H),2.86-2.79(m,2H),2.58-2.53(m,4H),1.97-1.53(m,4H),1.06-1.03(m,3H)。
化合物199A：(trans)-3-((4-(6-(2-溴-3,4-二氟苯基)-5-乙氧基羰基-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)环丁烷甲酸，LC-MS(ESI)：RT＝3.993min，C26H27BrF2N4O6S2的计算质量672.1，m/z发现值673.0[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:TFA＝80:20:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝13.117min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.00-7.98(m,1.8H),7.93-7.92(m,0.2H),7.52-7.45(m,1H),7.23-7.14(m,1H),6.02(s,0.2H),5.93(s,0.8H),4.02-3.95(m,3H),3.78-3.71(m,3H),3.17-3.11(m,1H),2.91-2.81(m,2H),2.58-2.54(m,4H),2.04-1.83(m,3H),1.62-1.60(m,0.8H),1.47-1.42(m,0.2H),1.09-1.05(m,3H)。
化合物199B：(trans)-3-((4-(6-(2-溴-3,4-二氟苯基)-5-乙氧基羰基-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)环丁烷甲酸，LC-MS(ESI)：RT＝4.002min，C26H27BrF2N4O6S2的计算质量672.1，m/z发现值673.0[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:TFA＝80:20:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝11.811min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.00-7.98(m,1.8H),7.95-7.92(m,0.2H),7.52-7.45(m,1H),7.25-7.17(m,1H),6.02(s,0.2H),5.93(s,0.8H),4.02-3.96(m,3H),3.77-3.71(m,3H),3.16-3.10(m,1H),2.91-2.82(m,2H),2.57-2.53(m,4H),2.03-1.74(m,3H),1.63-1.58(m,0.8H),1.48-1.42(m,0.2H),1.07-1.05(m,3H)。
化合物210A：(trans)-4-((4-(6-(2-氯-3,4-二氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)-1-甲基环己烷甲酸，LC-MS(ESI)：RT＝3.66min，C28H31ClF2N4O6S2的计算质量657.1m/z发现值656.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.97-7.89(m,1H),7.76-7.75(m,1H),7.28-7.17(m,2H),6.14(s,0.3H),6.07(s,0.7H),4.21-4.10(m,0.3H),4.02-3.85(m,2.7H),3.59(s,3H),3.14-2.99(m,3H),2.18-1.95(m,4H),1.90-1.63(m,8H),1.25(s,3H)。
化合物210B：(cis)-4-((4-(6-(2-氯-3,4-二氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)-1-甲基环己烷甲酸，LC-MS(ESI)：RT＝3.65min，C28H31ClF2N4O6S2的计算质量657.1m/z发现值656.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.97-7.88(m,1H),7.79-7.72(m,1H),7.27-7.18(m,2H),6.13(s,0.3H),6.07(s,0.7H),4.22-4.11(m,0.3H),3.99-3.83(m,2.7H),3.59(s,3H),3.14-2.95(m,3H),2.32-2.29(m,2H),2.18-1.96(m,4H),1.90-1.61(m,4H),1.28-1.21(m,2H),1.17(s,3H)。
化合物212M：(trans)-4-(-6-(2-氯-3-氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)四氢呋喃-2-甲酸
LC-MS(ESI)：RT＝2.910min，C20H17ClFN3O5S的计算质量465.1，m/z发现值466.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.85(d,J＝2.0Hz,1H),7.52(d,J＝2.8Hz,1H),7.24-7.22(m,1H),7.12-7.07(m,2H),6.24(brs,0.1H),6.17(s,0.9H),4.90-4.87(m,1H),4.63-4.61(m,1H),4.51-4.49(m,1H),4.24-4.22(m,1H),3.61(s,3H),2.80-2.79(m,1H),2.28-2.26(m,1H)。
化合物214A：2-((-3-(-6-(2-氯-4-氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)吡咯烷-1-基)磺酰基)乙酸,LC-MS(ESI)：RT＝3.127min，C21H20ClFN4O6S2的计算质量542.1，m/z发现值543.0[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IE 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:TFA＝70:30:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝13.322min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.01(s,2H),7.44-7.41(m,1H),7.39-7.35(m,1H),7.25-7.20(m,1H),5.94(s,1H),4.41-4.29(m,1H),3.87(s,2H),3.70-3.58(m,2H),3.54(s,3H),3.51-3.39(m,2H),2.26-2.13(m,1H),2.05-1.92(m,1H)。
化合物214C：2-((-3-(-6-(2-氯-4-氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)吡咯烷-1-基)磺酰基)乙酸，LC-MS(ESI)：RT＝2.914min，C21H20ClFN4O6S2的计算质量542.1，m/z发现值543.1[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak OD-H5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:TFA＝70:30:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝7.997min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.01(s,2H),7.44-7.41(m,1H),7.38-7.35(m,1H),7.24-7.19(m,1H),5.94(s,1H),4.42-4.30(m,1H),3.87(s,2H),3.63-3.54(m,5H),3.47-3.40(m,2H),2.33-2.24(m,1H),2.19-2.08(m,1H)。
化合物223：3-((4-(6-(2-氯-4-氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)-2,2-二甲基丙酸，LC-MS(ESI)：RT＝3.326min，C25H28ClFN4O6S2的计算质量598.1，m/z发现值599.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.89(brs,1H),7.75(d,J＝2.8Hz,1H),7.41-7.37(m,1H),7.24-7.22(m,1H),7.07-7.03(m,1H),6.14-6.07(m,1H),4.09(br s,0.3H),3.89-3.82(m,2.7H),3.59(s,3H),3.36(s,2H),2.94-2.84(m,2H),2.21-1.89(m,3.3H),1.72-1.68(m,0.7H),1.39(s,6H)。
化合物225：(trans)-4-(6-(2-溴-4-氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)环己烷甲酸
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.93(br s,1H),7.99(s,1.5H),7.93(d,J＝2.8Hz,0.5H),7.57-7.55(m,1H),7.37-7.33(m,1H),7.29-7.22(m,1H),5.98(s,0.5H),5.88(s,0.5H),3.87-3.76(m,0.5H),3.65-3.58(m,0.5H),3.53(s,1.6H),3.51(s,1.4H),2.41-2.34(m,0.5H),2.25-2.16(m,0.5H),2.09-1.97(m,2H),1.89-1.74(m,3H),1.67-1.58(m,1H),1.50-1.34(m,2H)。
化合物227A：(trans)-4-(-6-(3,4-二氟-2-甲基苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)环己烷甲酸，LC-MS(ESI)：RT＝3.615min，C23H23F2N3O4S的计算质量475.1，m/z发现值475.9[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:TFA＝90:10:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝7.364min)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.99-7.97(m,1.7H),7.92(d,J＝2.8Hz,0.3H),7.26-7.17(m,1H),7.11-7.06(m,0.7H),6.98-6.95(m,0.3H),5.81(s,0.3H),5.68(s,0.7H),3.85(br s,0.3H),3.62-3.57(m,0.7H),3.52(s,3H),2.44-2.38(m,3H),2.30-2.16(m,1H),2.06-1.96(m,2H),1.90-1.62(m,4H),1.46-1.33(m,2H)。
化合物229B：(trans)-4-(6-(2-溴-3,4-二氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)环己烷-甲酸，LC-MS(ESI)：RT＝3.510min，C22H20BrF2N3O4S的计算质量539.0，m/z发现值542.1[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝80:20:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝5.689min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.97(s,1H),9.51(s,0.4H),8.98(s,0.6H),8.00-7.99(m,1.5H),7.94-7.93(m,0.5H),7.52-7.44(m,1H),7.22-7.12(m,1H),6.00(s,0.5H),5.91(s,0.5H),3.88-3.80(m,0.5H),3.65-3.51(m,3.5H),2.41-2.33(m,0.5H),2.25-2.19(m,0.5H),2.06-2.01(m,2H),1.97-1.61(m,4H),1.49-1.36(m,2H)。
化合物230：3-((4-(6-(2-氯-3,4-二氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)丙酸
LC-MS(ESI)：RT＝3.864min，C23H23ClF2N4O6S2的计算质量588.1，m/z发现质量588.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6+一滴D2O)δ8.01-7.99(m,1.8H),7.93-7.92(m,0.2H),7.48-7.42(m,1H),7.23-7.19(m,1H),6.02(s,0.2H),5.94(s,0.8H),3.77-3.68(m,3H),3.54(s,3H),3.30-3.27(m,2H),2.94-2.84(m,2H),2.63-2.59(m,2H),2.04-1.94(m,1H),1.89-1.77(m,2.2H),1.66-1.61(m,0.8H)。
化合物232B：(trans)-3-((4-(6-(2-氯-3,4-二氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)环丁烷甲酸,LC-MS(ESI)：RT＝3.944min，C25H25ClF2N4O6S2的计算质量614.1，m/z发现质量615.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.01-7.92(m,2H),7.49-7.41(m,1H),7.22-7.18(m,1H),6.01(s,0.2H),5.92(s,0.8H),4.00-3.97(m,1H),3.76-3.70(m,3H),3.53(s,3H),3.11-3.04(m,1H),2.91-2.83(m,2H),2.56-2.51(m,4H),1.98-1.91(m,1H),1.86-1.72(m,2H),1.61-1.57(m,1H)。
化合物232D：(cis)-3-((4-(-6-(2-氯-3,4-二氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)环丁烷甲酸,LC-MS(ESI)：RT＝3.164min，C25H25ClF2N4O6S2的计算质量614.1，m/z发现质量615.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.32(s,1H),8.01-7.95(m,2H),7.48-7.42(m,1H),7.22-7.18(m,1H),5.93(s,1H),3.95-3.91(m,1H),3.73-3.67(m,3H),3.53(s,3H),3.06-3.01(m,1H),2.88-2.80(m,2H),2.48-2.41(m,4H),1.99-1.92(m,1H),1.83-1.74(m,2.1H),1.62-1.59(m,0.9H)。
化合物232X：(trans)-3-((4-(6-(2-氯-3,4-二氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)环丁烷甲酸,LC-MS(ESI)：RT＝3.939min，C25H25ClF2N4O6S2的计算质量614.1，m/z发现质量615.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.63(s,1H),8.01-7.97(m,2H),7.48-7.41(m,1H),7.22-7.18(m,1H),5.94(s,1H),4.03-3.99(m,1H),3.77-3.71(m,3H),3.53(s,3H),3.17-3.14(m,1H),2.92-2.84(m,2H),2.59-2.55(m,4H),2.07-1.96(m,1.2H),1.91-1.72(m,2H),1.64-1.59(m,0.8H)。
化合物241B：(trans)-3-((4-(-6-(2-溴-4-氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)环丁烷甲酸，LC-MS(ESI)：RT＝3.329min，C25H26BrFN4O6S2的计算质量640.1，m/z发现值643.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.01-7.98(m,1.8H),7.93(d,J＝2.8Hz,0.2H),7.58-7.55(m,1H),7.38-7.30(m,1H),7.28-7.21(m,1H),5.99(s,0.2H),5.89(s,0.8H),4.04-3.95(m,1H),3.77-3.70(m,3H),3.53(s,2.5H),3.52(s,0.5H),3.18-3.10(m,1H),2.88(q,J＝14.0Hz,2H),2.59-2.53(m,4H),2.10-1.84(m,1H),1.82-1.75(m,2H),1.61-1.57(m,1H)。
化合物258：3-(6-(2-氯-4-氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)双环[1.1.1]戊烷-1-甲酸，LC-MS(ESI)：RT＝2.821min，C21H17ClFN3O4S的计算质量461.1，m/z发现值462.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.01-7.99(m,1.4H),7.95(d,J＝2.8Hz,0.6H),7.44-7.42(m,1H),7.32-7.30(m,1H),7.24-7.20(m,1H),5.97(s,0.5H),5.87(s,0.5H),3.56(s,1.5H),3.55(s,1.5H),2.34(s,3H),2.26(s,3H)。
化合物258B：3-(6-(2-氯-4-氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)双环[1.1.1]戊烷-1-甲酸，LC-MS(ESI)：RT＝3.399min，C21H17ClFN3O4S的计算质量461.1，m/z发现值461.9[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:TFA＝80:20:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝6.227min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.01-7.99(m,1.4H),7.95-7.92(m,0.6H),7.44-7.42(m,1H),7.35-7.28(m,1H),7.24-7.20(m,1H),5.97(s,0.5H),5.87(s,0.5H),3.56(s,1.5H),3.55(s,1.5H),2.36(s,3H),2.26(s,3H)。
化合物265E和265H：(cis)-5-(-6-(2-氯-4-氟苯基)-5-(乙氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)四氢-2H-吡喃-2-甲酸
化合物265E：LC-MS(ESI)：RT＝3.412min，C22H21ClFN3O5S的计算质量493.1，m/z发现值494.0[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IG 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝70:30:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝12.672min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.57(br s,1H),8.00(s,2H),7.43(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),7.38-7.34(m,1H),7.24-7.20(m,1H),5.96(s,1H),4.03-4.01(m,1H),3.98(q,J＝7.2Hz,2H),3.88-3.78(m,3H),2.06-1.97(m,2H),1.83-1.76(m,1H),1.59-1.50(m,1H),1.07(t,J＝7.2Hz,3H)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6+D2O)δ8.02-8.01(m,1H),7.97-7.95(m,1H),7.44-7.36(m,2H),7.24-7.19(m,1H),5.98(s,1H),4.05-3.98(m,4H),3.92-3.85(m,2H),2.07-2.00(m,2H),1.86-1.80(m,1H),1.60-1.51(m,1H),1.07(t,J＝7.2Hz,3H)。
化合物265H：LC-MS(ESI)：RT＝3.153min，C22H21ClFN3O5S的计算质量493.1，m/z发现值493.9[M+H]+。手性SFC(柱：Chiralpak IE 5μm 4.6*250mm；流动相：CO2:ACN:TFA＝60:40:0.2，以2.999g/min；柱温：40.1℃；波长：214nm，背压：100巴；RT＝6.19min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.58(br s,1H),8.00(s,2H),7.43(dd,J＝8.8,2.8Hz,1H),7.37(dd,J＝8.8,6.0Hz,1H),7.25-7.20(m,1H),5.95(s,1H),3.98(q,J＝7.2Hz,2H),3.90-3.82(m,3H),3.75-3.70(m,1H),2.15-2.09(m,1H),2.04-1.97(m,2H),1.62-1.53(m,1H),1.07(t,J＝6.8Hz,3H)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6+D2O)δ8.01(d,J＝3.2Hz,1H),7.96(d,J＝3.2Hz,1H),7.43(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),7.37(dd,J＝8.8,6.0Hz,1H),7.25-7.20(m,1H),5.98(s,1H),3.99(q,J＝6.8Hz,2H),3.92-3.86(m,3H),3.77-3.72(m,1H),2.17-2.12(m,1H),2.07-1.99(m,2H),1.64-1.54(m,1H),1.07(t,J＝6.8Hz,3H)。
270B：(cis)-3-((4-(6-(2-氯-3,4-二氟苯基)-5-乙氧基羰基-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)-1-甲基环丁烷甲酸，LC-MS(ESI)：RT＝3.425min，C27H29ClF2N4O6S2的计算质量642.1m/z发现值643.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.71(br s,1H),8.00(s,2H),7.46(q,J＝8.4Hz,1H),7.23-7.19(m,1H),5.94(s,1H),4.10-4.06(m,1H),3.97(q,J＝7.2Hz,2H),3.74-3.67(m,3H),2.84(q,J＝10.4Hz,2H),2.67-2.62(m,2H),2.13-2.08(m,2H),2.01-1.82(m,1H),1.85-1.78(m,2H),1.74-1.61(m,1H),1.39(s,3H),1.07(t,J＝7.2Hz,3H)。
化合物272A：(trans)-3-((4-(6-(2-氯-4-氟苯基)-5-乙氧基羰基-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)-1-甲基环丁烷甲酸，LC-MS(ESI)：RT＝3.339min，C27H30ClFN4O6S2的计算质量624.1m/z发现值625.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.01-7.93(m,2H),7.42(dd,J＝8.8,2.8Hz,1H),7.36(dd,J＝8.8,6.0Hz,1H),7.26-7.18(m,1H),6.02(s,0.2H),5.92(s,0.8H),3.98-3.94(m,3H),3.76-3.72(m,3H),2.86-2.78(m,2H),2.75-2.72(m,2H),2.26-2.20(m,2H),2.04-1.77(m,3H),1.60-1.55(m,1H),1.33(s,3H),1.07(t,J＝7.2Hz,3H)。
化合物272B：(cis)-3-((4-(6-(2-氯-4-氟苯基)-5-乙氧基羰基-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)-1-甲基环丁烷甲酸，LC-MS(ESI)：RT＝3.321min，C27H30ClFN4O6S2的计算质量624.1m/z发现值625.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.43(br s,1H),8.01-8.00(m,2H),7.42-7.38(m,1H),7.38-7.35(m,1H),7.24-7.19(m,1H),5.93(s,1H),4.10-4.06(m,1H),3.97(q,J＝7.2Hz,2H),3.74-3.71(m,3H),2.89-2.80(m,2H),2.67-2.62(m,2H),2.13-2.08(m,2H),1.99-1.92(m,1H),1.88-1.76(m,2H),1.61-1.53(m,1H),1.39(s,3H),1.07(t,J＝6.8Hz,3H)。
化合物274A：(trans)-3-((4-(-6-(2-氯-3-氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)-1-甲基环丁烷甲酸，LC-MS(ESI)：RT＝3.165min，C26H28ClFN4O6S2的计算质量610.1m/z发现值611.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.42(br s,1H),8.01-7.99(m,1.8H),7.93(d,J＝3.2Hz,0.2H),7.38-7.31(m,2H),7.22-7.20(m,1H),6.07(s,0.2H),5.97(s,0.8H),3.97-3.93(m,1H),3.76-3.68(m,3H),3.52(s,2H),3.51(s,1H),2.90-2.81(m,2H),2.79-2.73(m,2H),2.27-2.22(m,2H),2.06-1.72(m,3H),1.62-1.53(m,1H),1.34(s,3H)。
化合物274B：(cis)-3-((4-(-6-(2-氯-3-氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)-1-甲基环丁烷甲酸，LC-MS(ESI)：RT＝3.142min，C26H28ClFN4O6S2的计算质量610.1m/z发现值611.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.78(br s,1H),8.03-7.92(m,2H),7.39-7.34(m,2H),7.22-7.20(m,1H),6.07(s,0,2H),5.97(s,0.8H),4.21-4.06(m,1H),3.81-3.62(m,3H),3.52(s,3H),2.94-2.80(m,2H),2.68-2.62(m,2H),2.16-2.10(m,2H),1.99-1.90(m,1H),1.82-1.70(m,2H),1.65-1.52(m,1H),1.40(s,3H)
化合物278C：(trans)-3-((4-(6-(2-溴-3-氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)-1-甲基环丁烷甲酸，LC-MS(ESI)：RT＝3.742min，C26H28BrFN4O6S2的计算质量654.1，m/z发现值654.8[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.60(s,1H),9.60(s,0.8H),9.18(s,0.2H),8.03-7.95(m,1.7H),7.95-7.91(m,0.2H),7.44-7.37(m,1H),7.33-7.26(m,1H),7.22-7.13(m,1H),6.05(s,0.2H),5.96(s,0.8H),3.99-3.92(m,1H),3.80-3.65(m,3H),3.55-3.50(m,3H),2.94-2.70(m,4H),2.31-2.18(m,2H),2.18-2.09(m,1H),2.07-1.71(m,3.2H),1.63-1.55(m,0.8H),1.35(s,3H)。
化合物278D：(cis)-3-((4-(6-(2-溴-3-氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)-1-甲基环丁烷甲酸，LC-MS(ESI)：RT＝3.662min，C26H28BrFN4O6S2的计算质量654.1，m/z发现值654.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.61(s,0.8H),9.20-9.18(m,0.2H),8.05-7.98(m,2H),7.45-7.39(m,1H),7.31-7.24(m,1H),7.19-7.15(m,1H),6.07-5.54(m,1H),4.19-4.09(m,1H),3.79-3.65(m,3H),3.55-3.50(m,3H),2.93-2.80(m,2H),2.71-2.62(m,2H),2.18-2.13(m,2H),2.04-1.74(m,3.2H),1.65-1.57(m,0.8H),1.41(s,3H)。
化合物282C：(trans)-3-((4-(-6-(2-溴-4-氟苯基)-5-乙氧基羰基-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)-1-甲基环丁烷甲酸，LC-MS(ESI)：RT＝2.852min，C27H30BrFN4O6S2的计算质量668.1，m/z发现值670.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.99(s,1.8H),7.93(s,0.2H),7.57(dd,J＝8.4,2.4Hz,1H),7.37-7.34(m,1H),7.28-7.24(m,1H),5.99(s,0.2H),5.90(s,0.8H),4.00-3.85(m,3.2H),3.75-3.68(m,2.8H),2.87-2.79(m,2H),2.73-2.67(m,2H),2.19-2.13(m,2H),2.00-1.76(m,3.2H),1.60-1.57(m,0.8H),1.28(s,3H),1.08(t,J＝7.2Hz,3H)。
化合物282D：(cis)-3-((4-(6-(2-溴-4-氟苯基)-5-乙氧基羰基-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)-1-甲基环丁烷甲酸，LC-MS(ESI)：RT＝2.746min，C27H30BrFN4O6S2的计算质量668.1，m/z发现值670.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.82(br s,1H),8.01-7.99(m,2H),7.57(dd,J＝8.8,2.8Hz,1H),7.38-7.34(m,1H),7.29-7.24(m,1H),5.99(s,0.2H),5.91(s,0.8H),4.08-3.95(m,3.2H),3.74-3.67(m,2.8H),2.89-2.80(m,2H),2.66-2.61(m,2H),2.10-1.78(m,5.2H),1.61-1.59(m,0.8H),1.37(s,3H),1.08(t,J＝6.8Hz,3H)。
化合物285A：trans-3-((4-(6-(2-氯-4-氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)环丁烷-甲酸，LC-MS(ESI)：RT＝8.027min，C25H26ClFN4O6S2的计算质量596.1，m/z发现值596.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IA 5μm4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:TFA＝70:30:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝8.190min)；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.39(br s,1H),9.51(d,J＝3.6Hz,0.8H),9.12(s,0.2H),7.99(dd,J＝8.8,3.2Hz,1.8H),7.93(d,J＝3.2Hz,0.2H),7.44-7.40(m,1H),7.37-7.31(m,1H),7.23-7.18(m,1H),6.01(s,0.2H),5.92(d,J＝3.2Hz,0.8H),4.05-3.97(m,1H),3.77-3.70(m,3H),3.53(s,3H),3.19-3.11(m,1H),2.93-2.83(m,2H),2.59-2.54(m,4H),2.06-1.91(m,1H),1.90-1.73(m,2.2H),1.60-1.57(m,0.8H)。
化合物289A：(trans)-4-(6-(2-氯-3,4-二氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)环己烷甲酸，LC-MS(ESI)：RT＝3.915min，C22H20ClF2N3O4S的计算质量495.1，m/z发现值495.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.00-7.90(m,2H),7.48-7.41(m,1H),7.18(br s,1H),6.02(s,0.5H),5.93(s,0.5H),3.82-3.59(m,1H),3.53(s,3H),2.34-2.21(m,1H),2.05-1.99(m,2H),1.86-1.64(m,4H),1.48-1.34(m,2H)。
化合物293C：(trans)-1-((4-((R)-6-(2-氯-3,4-二氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)环己基)-磺酰基)吡咯烷-3-甲酸,手性分析(柱：Chiralpak IG 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:TFA＝60:40:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝9.720min)。LC-MS(ESI)：RT＝2.674min，C26H27ClF2N4O6S2的计算质量628.1，m/z发现值629.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.90(s,1H),7.75(d,J＝2.8Hz,1H),7.23-7.20(m,2H),6.10(s,1H),4.05-3.74(m,1H),3.66-3.64(m,2H),3.60(s,3H),3.52-3.49(m,2H),3.27-3.25(m,1H),3.20-3.16(m,1H),2.36-2.31(m,2H),2.28-2.20(m,2H),2.12-1.96(m,2H),1.87-1.64(m,4H)。
化合物302A：(trans)-4-(-6-(2-氯-3,4-二氟苯基)-5-(乙氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)环庚烷甲酸，通过C18柱(乙腈:水(+0.1％碳酸氢铵)＝5％至80％)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物(95mg，97.4％纯度，86％产率，95.2％立体纯)。LC-MS(ESI)：RT＝3.673min，C24H24ClF2N3O4S的计算质量523.1，m/z发现值523.9[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:TFA＝90:10:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝7.999min)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.92(br s,1H),7.74(d,J＝2.8Hz,1H),7.26-7.19(m,2H),6.13(s,0.7H),6.06(s,0.3H),4.19-4.10(m,0.7H),4.04(q,J＝7.2Hz,2H),3.98-3.90(m,0.3H),2.67-2.54(m,1H),2.20-1.88(m,7H),1.81-1.70(m,2H),1.59-1.48(m,1H),1.14(t,J＝7.2Hz,3H)。
化合物302C：(cis)-4-(-6-(2-氯-3,4-二氟苯基)-5-(乙氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)环庚烷甲酸，通过C18柱(乙腈:水(+0.1％碳酸氢铵)＝5％至80％)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物(90mg，97.5％纯度，82％产率，100％立体纯)。LC-MS(ESI)：RT＝3.679min，C24H24ClF2N3O4S的计算质量523.1，m/z发现值523.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:TFA＝80:20:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：254nm，RT＝5.465min)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.92(s,0.7H),7.89(s,0.3H),7.74(d,J＝3.2Hz,1H),7.26-7.19(m,2H),6.12(s,0.7H),6.06(s,0.3H),4.19-4.10(m,0.7H),4.04(q,J＝7.2Hz,2H),3.97-3.91(m,0.3H),2.65-2.53(m,1H),2.25-2.14(m,1H),2.11-1.93(m,3H),1.90-1.69(m,6H),1.14(t,J＝7.2Hz,3H)。
化合物302E：(cis)-4-(-6-(2-氯-3,4-二氟苯基)-5-(乙氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)环庚烷甲酸，通过C18柱(乙腈:水(+0.1％碳酸氢铵)＝5％至80％)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物(72mg，98.1％纯度，81％产率，98.9％立体纯)。LC-MS(ESI)：RT＝3.844min，C24H24ClF2N3O4S的计算质量523.1，m/z发现值523.9[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IE 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:TFA＝90:10:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝10.165min)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.92(br s,0.7H),7.89(br s,0.3H),7.74(d,J＝3.2Hz,1H),7.26-7.18(m,2H),6.13(s,0.7H),6.06(s,0.3H),4.19-4.10(m,0.7H),4.04(q,J＝7.2Hz,2H),3.98-3.92(m,0.3H),2.68-2.61(m,0.7H),2.59-2.53(m,0.3H),2.17-1.87(m,7H),1.85-1.69(m,2H),1.63-1.53(m,1H),1.14(t,J＝7.2Hz,3H)。
化合物302F：(trans)-4-(-6-(2-氯-3,4-二氟苯基)-5-(乙氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)环庚烷甲酸，通过C18柱(乙腈:水(+0.1％碳酸氢铵)＝5％至80％)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物(78mg，98.4％纯度，87％产率，100％立体纯)。LC-MS(ESI)：RT＝3.810min，C24H24ClF2N3O4S的计算质量523.1，m/z发现值523.9[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:TFA＝90:10:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝8.067min)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.95-7.87(m,1H),7.74(d,J＝2.8Hz,1H),7.26-7.18(m,2H),6.13(s,0.7H),6.06(s,0.3H),4.18-4.10(m,0.7H),4.04(q,J＝7.2Hz,2H),3.98-3.90(m,0.3H),2.62-2.49(br s,1H),2.21-2.11(m,1H),2.10-1.95(m,2.5H),1.93-1.76(m,5.5H),1.75-1.65(m,1H),1.14(t,J＝7.2Hz,3H)。
化合物309C：(trans)-3-((4-(6-(3,4-二氟-2-甲基苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)环丁烷甲酸，LC-MS(ESI)：RT＝3.189min，C26H28F2N4O6S2的计算质量594.1，m/z发现值595.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.00-7.97(m,1.9H),7.92(s,0.1H),7.25-7.18(m,1H),7.12-7.08(m,1H),5.81(s,0.1H),5.69(s,0.9H),4.00-3.96(m,1H),3.78-3.69(m,3H),3.52(s,3H),3.09-3.04(m,1H),2.91-2.82(m,2H),2.56-2.51(m,4H),2.43(s,3H),2.00-1.91(m,1H),1.84-1.72(m,2H),1.60-1.57(m,1H)。
化合物311A：(trans)-3-((4-(6-(2-氯-4-氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)-环戊烷甲酸并且，LC-MS(ESI)：RT＝3.395min，C26H28ClFN4O6S2的计算质量610.1，m/z发现值611.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.00-7.93(m,2H),7.43-7.35(m,2H),7.23-7.19(m,1H),6.02(s,0.3H),5.92(s,0.7H),4.00-3.93(m,0.3H),3.80-3.72(m,3.7H),3.53(s,3H),2.96-2.82(m,3H),2.24-2.19(m,1H),2.17-2.10(m,2H),2.06-1.99(m,2H),1.96-1.83(m,2H),1.79-1.59(m,3H)。
化合物311B：(cis)-3-((4-(6-(2-氯-4-氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)-环戊烷甲酸，LC-MS(ESI)：RT＝3.340min，C26H28ClFN4O6S2的计算质量610.1，m/z发现值611.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.99(s,2H),7.43-7.34(m,2H),7.23-7.18(m,1H),6.02(s,0.3H),5.93(s,0.7H),4.02-3.91(m,0.3H),3.79-3.66(m,3.7H),3.53(s,3H),2.95-2.86(m,2H),2.79-2.70(m,1H),2.32-2.25(m,1H),2.03-1.59(m,9H)。
化合物313A：(cis)-4-((4-(6-(2-氯-4-氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)-环己烷甲酸，LC-MS(ESI)：RT＝3.669min，C27H30ClFN4O6S2的计算质量624.1，m/z发现值625.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.99(d,J＝3.2Hz,1H),7.94(d,J＝2.4Hz,0.7H),7.88(br s,0.3H),7.42-7.34(m,2H),7.22-7.17(m,1H),6.02(s,0.3H),5.94(s,0.7H),3.82-3.74(m,3H),3.54(s,3H),3.20(br s,1H),2.95(q,J＝12.0Hz,2H),2.59(s,1H),2.11(br s,2H),1.97-1.78(m,5H),1.59-1.54(m,5H)。
化合物313B：(trans)-4-((4-(6-(2-氯-4-氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)-环己烷甲酸，LC-MS(ESI)：RT＝2.353min，C27H30ClFN4O6S2的计算质量624.1，m/z发现值625.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.00-7.93(m,2H),7.43-7.31(m,2H),7.23-7.18(m,1H),6.02(s,0.3H),5.92(s,0.7H),4.01-3.94(m,0.3H),3.79-3.72(m,2.7H),3.53(s,3H),3.18-3.12(m,1H),2.97(q,J＝12.0Hz,2H),2.24-2.18(m,1H),2.09-1.71(m,7.3H),1.61-1.35(m,4.7H)。
化合物319B：(trans)-3-((4-(6-(2-氯-3-氟苯基)-5-乙氧基羰基-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)-环丁烷甲酸，LC-MS(ESI)：RT＝3.410min，C26H28ClFN4O6S2的计算质量610.1，m/z发现值611.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.91(s,1H),7.75(d,J＝2.8Hz,1H),7.34-7.14(m,3H),6.16(s,1H),4.07-4.02(m,3H),3.96-3.87(m 3H),3.28-3.22(m,1H),3.03-2.93(m,2H),2.80-2.65(m,4H),2.16-1.66(m,4H),1.12(t,J＝7.2Hz,3H)。
化合物321A：(trans)-3-((4-(6-(2-氯-3-氟苯基)-5-乙氧基羰基-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)-1-甲基环丁烷甲酸，LC-MS(ESI)：RT＝3.435min，C27H30ClFN4O6S2的计算质量624.1，m/z发现值625.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.60(s,0.8H),9.11(s,0.2H),8.01-7.99(m,1.8H),7.94(d,J＝3.2Hz,0.2H),7.40-7.32(m,2H),7.23-7.18(m,1H),6.08(s,0.2H),5.98(d,J＝2.4Hz,0.8H),4.00-3.93(m,3H),3.77-3.69(m,3H),2.89-2.81(m,2H),2.79-2.73(m,2H),2.27-2.22(m,2H),2.00-1.87(m,1H),1.81-1.74(m,2H),1.61-1.58(m,1H),1.34(s,3H),1.08-1.03(m,
化合物321B：(cis)-3-((4-(6-(2-氯-3-氟苯基)-5-乙氧基羰基-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)-1-甲基环丁烷甲酸，LC-MS(ESI)：RT＝3.422min，C27H30ClFN4O6S2的计算质量624.1，m/z发现值625.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.60(s,0.8H),9.11(s,0.2H),8.03-8.00(m,1.8H),7.94(s,0.2H),7.41-7.32(m,2H),7.23-7.21(m,1H),6.09(s,0.2H),5.98(s,0.8H),4.14-4.05(m,1H),3.97(q,J＝6.8Hz,2H),3.77-3.66(m,3H),2.89-2.81(m,2H),2.69-2.64(m,2H),2.14-2.09(m,2H),1.99-1.90(m,1H),1.86-1.75(m,2H),1.62-1.59(m,1H),1.40(s,3H),1.06(t,J＝7.2Hz,3H)。
化合物323C：trans-甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(1-((3-(甲氧基羰基)-3-甲基环丁基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，通过制备型HPLC纯化(柱：gilson Xbrige C18(5μm 19*150mm)，流动相A：水(+0.1％碳酸氢铵)，流动相B：乙腈，UV：214nm，流速：15mL/min，梯度：10％-80％(％B))，得到呈黄色固体的标题化合物(125mg，98％纯度，69％产率，100％ee)。LC-MS(ESI)：RT＝3.270min，C26H27ClF2N4O6S2的计算质量628.1，m/z发现值629.0[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:TFA＝80:20:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm；RT＝9.816min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.01-7.94(m,2H),7.49-7.42(m,1H),7.22-7.16(m,1H),6.01(s,0.2H),5.92(s,0.8H),3.95-3.87(m,1H),3.76-3.64(m,3H),3.53(s,3H),2.89-2.81(m,2H),2.78-2.72(m,2H),2.25-2.18(m,2H),2.00-1.81(m,1H),1.81-1.69(m,2H),1.61-1.56(m,1H),1.33(s,3H)。
化合物323D：cis-甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(1-((3-(甲氧基羰基)-3-甲基环丁基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，通过制备型HPLC纯化(柱：gilson Xbrige C18(5μm 19*150mm)，流动相A：水(+0.1％碳酸氢铵)，流动相B：乙腈，UV：214nm，流速：15mL/min，梯度：10％-80％(％B))，得到呈黄色固体的标题化合物(125mg，99％纯度，43％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝3.243min，C26H27ClF2N4O6S2的计算质量628.1，m/z发现值629.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.01-8.00(m,2H),7.50-7.42(m,1H),7.24-7.14(m,1H),5.93(s,1H),4.13-4.01(m,1H),3.82-3.61(m,3H),3.53(s,3H),2.89-2.81(m,2H),2.70-2.62(m,2H),2.16-2.08(m,2H),2.01-1.94(m,1H),1.85-1.74(m,2H),1.74-1.61(m,1H),1.39(s,3H)。
化合物329B：(trans)-3-((4-(6-(2-氯-4-氟苯基)-5-(乙氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)环丁烷-甲酸，通过制备型HPLC纯化(柱：Xbrige C18(5μm 10*190mm)流动相A：水(0.1％碳酸氢铵)，流动相B：乙腈，UV：214nm，流速：15mL/min，梯度：30％-70％(％B))，得到呈黄色固体的标题化合物(58mg，63％产率，100％立体纯)。LC-MS(ESI)：RT＝3.553min，C26H28ClFN4O6S2的计算质量610.1，m/z发现质量611.1[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:TFA＝80:20:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝11.296min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.99-7.92(m,2H),7.43-7.40(m,1H),7.38-7.34(m,1H),7.23-7.19(m,1H),6.03(br s,0.2H),5.93(s,0.8H),4.00-3.92(m,3H),3.74-3.67(m,3H),3.07-3.00(m,1H),2.88-2.79(m,2H),2.46-2.44(m,4H),1.97-1.91(m,1H),1.83-1.76(m,2H),1.63-1.57(m,1H),1.07(t,J＝7.2Hz,3H)。
化合物331C：(trans)-3-((4-(6-(2-氯-3-氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)环丁烷-甲酸，LC-MS(ESI)：RT＝3.780min，C25H26ClFN4O6S2的计算质量596.1，m/z发现值596.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.16(s,1H),9.58(d,J＝3.2Hz,0.8H),9.15(s,0.2H),8.01-7.98(m,1.8H),7.93(d,J＝3.2Hz,0.2H),7.40-7.31(m,2H),7.22-7.16(m,1H),6.07(s,0.2H),5.97(d,J＝3.2Hz,0.8H),4.05-3.97(m,1H),3.77-3.71(m,3H),3.52(s,2.4H),3.51(s,0.6H),3.17-3.13(m,1H),2.93-2.84(m,2H),2.59-2.55(m,4H),1.97-1.90(m,1H),1.82-1.74(m,2.2H),1.61-1.58(m,0.8H)。
化合物333B：(trans)-3-((4-(6-(2-溴-4-氟苯基)-5-乙氧基羰基-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)环丁烷-1-甲酸，LC-MS(ESI)：RT＝3.702min，C26H28BrFN4O6S2的计算质量654.1m/z发现值655.0[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IG 5μm4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:TFA＝70:30:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm；RT＝13.060min)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.91(br s,1H),7.76(d,J＝2.8Hz,1H),7.43-7.39(m,2H),7.14-7.10(m,1H),6.09(s,1H),4.05(q,J＝7.2Hz,2H),3.96-3.89(m,4H),3.26-3.22(m,1H),3.03-2.93(m,2H),2.80-2.68(m,4H),2.15-1.61(m,4H),1.14(t,J＝7.2Hz,3H)。
化合物339B：(trans)-3-((4-(6-(2-溴-3-氟苯基)-5-乙氧基羰基-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)环丁烷甲酸，LC-MS(ESI)：RT＝3.933min，C26H28BrFN4O6S2的计算质量654.1，m/z发现值655.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.51(s,0.7H),9.07(s,0.3H),8.00-7.92(m,2H),7.44-7.37(m,1H),7.31-7.15(m,2H),6.07(s,0.3H),5.97(s,0.7H),4.03-3.93(m,3H),3.78-3.71(m,3H),3.15-3.12(m,1H),2.92-2.83(m,2H),2.58-2.53(m,4H),2.06-1.58(m,4H),1.08-1.01(m,3H)。
化合物339D：(cis)-3-((4-(6-(2-溴-3-氟苯基)-5-乙氧基羰基-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)环丁烷甲酸，LC-MS(ESI)：RT＝4.011min，C26H28BrFN4O6S2的计算质量654.1，m/z发现值655.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.51(s,0.7H),9.09(s,0.3H),8.00(s,1.7H),7.93(s,0.3H),7.44-7.39(m,1H),7.29(d,J＝7.6Hz,1H),7.24-7.15(m,1H),6.07(s,0.3H),5.97(s,0.7H),4.00-3.91(m,3.3H),3.77-3.67(m,2.7H),3.11-3.02(m,1H),2.88-2.80(m,2H),2.48-2.33(m,4H),2.04-1.78(m,3.3H),1.62-1.59(m,0.7H),1.08-1.01(m,3H)。
化合物343A：(trans)-3-((4-(6-(3,4-二氟-2-甲基苯基)-5-乙氧基羰基-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)环丁烷甲酸，LC-MS(ESI)：RT＝4.142min，C27H30F2N4O6S2的计算质量608.2，m/z发现值609.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.89(s,1H),7.73(d,J＝2.8Hz,1H),7.17-6.99(m,2H),5.86(s,1H),4.07-3.79(m,6H),3.26-3.17(m,1H),3.04-2.90(m,2H),2.77-2.63(m,4H),2.56-2.41(m,3H),2.16-1.80(m,3.3H),1.70-1.61(m,0.7H),1.12(t,J＝7.2Hz,3H)。
化合物343C：(trans)-3-((4-(6-(3,4-二氟-2-甲基苯基)-5-乙氧基羰基-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)环丁烷甲酸，LC-MS(ESI)：RT＝3.310min，C27H30F2N4O6S2的计算质量608.2，m/z发现值609.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.89(d,J＝2.4Hz,1H),7.73(d,J＝3.2Hz,1H),7.17-6.99(m,2H),5.86(s,1H),4.07-3.77(m,6H),3.27-3.20(m,1H),3.03-2.91(m,2H),2.77-2.64(m,4H),2.48(s,3H),2.15-1.79(m,3.3H),1.74-1.59(m,0.7H),1.12(t,J＝7.2Hz,3H)。
343D：(cis)-3-((4-(6-(3,4-二氟-2-甲基苯基)-5-乙氧基羰基-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)环丁烷-甲酸，LC-MS(ESI)：RT＝4.133min，C27H30F2N4O6S2的计算质量608.2，m/z发现值609.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.89(d,J＝2.0Hz,1H),7.73(d,J＝2.8Hz,1H),7.15-6.98(m,2H),5.86(s,1H),4.07-3.78(m,6H),3.21-3.13(m,1H),2.99-2.89(m,2H),2.72-2.54(m,4H),2.49(s,3H),2.18-1.57(m,4H),1.12(t,J＝7.2Hz,3H)。
化合物345A：(trans)-(R*)-4-(6-(2-氯-3,4-二氟苯基)-5-(乙氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)环己烷甲酸，通过制备型HPLC纯化(柱：Gilson X-bridgeC18(5μm 19*150mm)，流动相A：水(0.1％碳酸氢铵)，流动相B：乙腈，UV：214nm，流速：15mL/min，梯度：25％-70％(％B))，得到呈黄色固体的标题化合物(110mg，66％产率，100％立体纯)。LC-MS(ESI)：RT＝3.766min，C23H22ClF2N3O4S的计算质量509.1，m/z发现值510.0[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IE 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:TFA＝85:15:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝8.775min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.91(br s,1H),8.03-7.98(m,1.5H),7.94(d,J＝3.2Hz,,0.5H),7.49-7.42(m,1H),7.20-7.16(m,1H),6.02(s,0.4H),5.92(s,0.6H),4.00-3.94(m,2H),3.86-3.80(m,0.5H),3.60-3.57(m,0.5H),2.39-2.33(m,0.5H),2.24-2.17(m,0.5H),2.05-1.97(m,2H),1.87-1.63(m,4H),1.43-1.35(m,2H),1.10-1.03(m,3H)。
化合物347B：(trans)-4-(6-(2-溴-3,4-二氟苯基)-5-(乙氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)环己烷甲酸，通过制备型HPLC纯化(柱：Gilson X-brige C18(5μm19*150mm)，流动相A：水(0.1％碳酸氢铵)，流动相B：乙腈，UV：214nm，流速：15mL/min，梯度：30％-70％(％B))，得到呈黄色固体的标题化合物(6.5mg，3％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝3.672min，C23H22BrF2N3O4S的计算质量553.1，m/z发现值556.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.45(s,0.5H),8.90(s,0.5H),7.99(d,J＝2.4Hz,1.5H),7.93(s,0.5H),7.53-7.45(m,1H),7.21-7.12(m,1H),6.00(s,0.5H),5.91(s,0.5H),4.02-3.95(m,2H),3.86-3.80(m,0.5H),3.64-3.45(m,0.5H),2.40-2.34(m,0.5H),2.26-2.20(m,0.5H),2.04-1.94(m,2H),1.89-1.64(m,4H),1.50-1.35(m,2H),1.08-1.05(m,3H)。
化合物352B：(trans)-3-(4-6-(2-氯-3,4-二氟苯基)-2-(3,5-二氟吡啶-2-基)-5-乙氧基羰基-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)环丁烷甲酸，LC-MS(ESI)：RT＝3.229min，C28H27ClF4N4O6S的计算质量658.1，m/z发现值658.9[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:TFA＝85:15:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm；RT＝18.175min)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ8.43(s,1H),7.71-7.67(m,1H),7.24-7.22(m,2H),6.15(s,1H),4.12-3.97(m,4H),3.94-3.88(m,2H),3.24-3.17(m,1H),3.00-2.92(m,2H),2.74-2.58(m,4H),2.03-1.79(m,4H),1.13(t,J＝7.2Hz,3H)。
化合物354B：(cis)-4-((4-(6-(2-氯-3,4-二氟苯基)-5-乙氧基羰基-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)环己烷-甲酸，LC-MS(ESI)：RT＝3.622min，C28H31ClF2N4O6S2的计算质量656.1，m/z发现值656.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.89(brs,1H),7.75(s,1H),7.28-7.21(m,2H),6.17(s,0.3H),6.09(s,0.7H),4.19-4.11(m,0.3H),4.07-4.02(m,2H),3.99-3.85(m,2.7H),3.15-2.98(m,3H),2.46(br s,1H),2.32-2.29(m,2H),2.13-1.52(m,10H),1.14-1.11(m,3H)。
化合物354C：(trans)-4-((4-(6-(2-氯-3,4-二氟苯基)-5-乙氧基羰基-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)环己烷-甲酸，LC-MS(ESI)：RT＝3.909min，C28H31ClF2N4O6S2的计算质量656.1，m/z发现值656.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.94-7.89(m,1H),7.75(br s,1H),7.23-7.22(m,2H),6.15(s,0.3H),6.09(s,0.7H),,4.21-4.11(m,0.4H),4.09-4.01(m,2H),3.99-3.84(m,2.6H),3.15-2.99(m,3H),2.33-1.84(m,8.3H),1.69-1.46(m,4.7H),1.14-1.11(m,3H)。
化合物363E：(trans)-6-(-6-(2-氯-4-氟苯基)-5-乙氧基羰基-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)四氢-2H-吡喃-3-甲酸，LC-MS(ESI)：RT＝2.392min，C22H21ClFN3O5S的计算质量493.1，m/z发现值494.2[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:TFA＝90:10:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝5.908min)。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ9.30(br s,1H),8.00(s,1H),7.69(br s,1H),7.47-7.44(m,1H),7.15(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),6.99-6.95(m,1H),6.29(s,1H),5.28(d,J＝10.4Hz,1H),4.46-4.42(m,1H),4.11-4.02(m,2H),3.74-3.68(m,1H),2.87-2.78(m,1H),2.32-2.29(m,1H),2.21-2.18(m,1H),1.99-1.88(m,1H),1.60-1.50(m,1H),1.15(t,J＝7.2Hz,3H)。
化合物363H：(trans)-6-(6-(2-氯-4-氟苯基)-5-乙氧基羰基-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)四氢-2H-吡喃-3-甲酸，LC-MS(ESI)：RT＝2.623min，C22H21ClFN3O5S的计算质量493.1，m/z发现值493.9[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:TFA＝85:15:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝6.854min)。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ9.18(br s,1H),7.98-7.96(m,1H),7.64-7.42(m,2H),7.14(d,J＝6.4Hz,1H),6.99-6.95(m,1H),6.30-6.29(m,1H),5.25(br s,1H),4.43(br s,1H),4.06(brs,2H),3.71-3.68(m,1H),2.84-2.81(m,1H),2.30(br s,2H),2.04-1.96(m,1H),1.73(brs,1H),1.17(s,3H)。
化合物367A：(trans)-3-((3-(6-(2-氯-4-氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)吡咯烷-1-基)磺酰基)环丁烷甲酸，LC-MS(ESI)：RT＝2.980min，C24H24ClFN4O6S2的计算质量582.1，m/z发现值582.8[M+H]+。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.89(d,J＝2.8Hz,1H),7.77(d,J＝2.8Hz,1H),7.40-7.37(m,1H),7.24-7.21(m,1H),7.10-7.05(m,1H),6.09(s,1H),4.56-4.46(m,1H),4.20-4.12(m,1H),3.76-3.66(m,3H),3.60(s,3H),3.50-3.44(m,1H),3.24-3.16(m,1H),2.81-2.73(m,2H),2.69-2.62(m,2H),2.31-2.20(m,1H),2.14-2.03(m,1H)。
化合物367B：(cis)-3-((3-(6-(2-氯-4-氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)吡咯烷-1-基)磺酰基)环丁烷甲酸，LC-MS(ESI)：RT＝3.627min，C24H24ClFN4O6S2的计算质量582.1，m/z发现值582.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.90(d,J＝2.8Hz,1H),7.77(d,J＝3.2Hz,1H),7.40-7.36(m,1H),7.24-7.21(m,1H),7.10-7.05(m,1H),6.10(s,1H),4.52(s,1H),4.08-4.00(m,1H),3.75-3.64(m,3H),3.60(s,3H),3.48-3.42(m,1H),3.15-3.05(m,1H),2.77-2.69(m,2H),2.60-2.53(m,2H),2.33-2.23(m,1H),2.16-2.03(m,1H)。
化合物410C：trans-3-((4-(6-(2-溴-4-氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)-1-甲基环丁烷甲酸
LC-MS(ESI)：RT＝3.397min，C26H28BrFN4O6S2的计算质量654.1，m/z发现值655.1[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IA 250mm*4.6mm 5um；流动相：Hex:EtOH:TFA＝80:20:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：254nm，RT＝10.874min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.00(s,1.8H),7.93(m,0.2H),7.56(dd,J＝8.4,2.4Hz,1H),7.36-7.27(m,1H),7.26-7.23(m,1H),5.98(s,0.2H),5.89(s,0.8H),3.96-3.87(m,1.3H),3.75-3.67(m,2.7H),3.53(s,3H),2.90-2.81(m,2H),2.76-2.71(m,2H),2.23-2.18(m,2H),2.05-1.91(m,1H),1.84-1.74(m,2.2H),1.60-1.57(m,0.8H),1.31(s,3H)。
化合物410D：cis-3-((4-(6-(2-溴-4-氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)-1-甲基环丁烷甲酸
LC-MS(ESI)：RT＝3.727min，C26H28BrFN4O6S2的计算质量654.1，m/z发现值654.9[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IA 250mm*4.6mm 5um；流动相：Hex:EtOH:TFA＝70:30:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：254nm，RT＝10.417min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.25(brs,1H),8.02-8.00(m,2H),7.57(dd,J＝8.8,2.8Hz,1H),7.38-7.35(m,1H),7.28-7.26(m,1H),5.98(br s,0.2H),5.90(s,0.8H),4.13-4.04(m,1H),3.96-3.87(m,0.3H),3.73-3.71(m,2.7H),3.53(s,3H),2.90-2.81(m,2H),2.67-2.62(m,2H),2.14-2.09(m,2H),1.97-1.94(m,1H),1.81-1.78(m,2.2H),1.60-1.58(m,0.8H),1.39(s,3H)。
化合物414C：(trans)-3-((4-(6-(2-溴-3-氟苯基)-5-乙氧基羰基-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)-1-甲基环丁烷甲酸，LC-MS(ESI)：RT＝3.458min，C27H30BrFN4O6S2的计算质量668.1，m/z发现值671.0[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:TFA＝80:20:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：254nm，RT＝9.867min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.04(br s,1H),8.01-7.99(m,1.8H),7.93(br s,0.2H),7.42(dd,J＝13.6,8.0Hz,1H),7.29(t,J＝8.4Hz,1H),7.21(d,J＝7.6Hz,1H),6.07(br s,0.2H),5.98(s,0.8H),4.14-4.05(m,1H),3.97(dd,J＝13.2,6.4Hz,2H),3.74-3.67(m,3H),2.89-2.81(m,2H),2.68-2.63(m,2H),2.12(t,J＝10.4Hz,2H),2.01-1.77(m,3H),1.62-1.59(m,1H),1.40(s,3H),1.06(t,J＝6.8Hz,3H)。
化合物414D：(cis)-3-((4-(6-(2-溴-3-氟苯基)-5-乙氧基羰基-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)-1-甲基环丁烷甲酸，LC-MS(ESI)：RT＝3.458min，C27H30BrFN4O6S2的计算质量668.1，m/z发现值671.0[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IA 5μm4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:TFA＝80:20:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：254nm，RT＝15.337min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)9.10(br s,1H),8.02-8.00(m,1.8H),7.93(br s,0.2H),7.41(dd,J＝14.0,8.0Hz,1H),7.30(t,J＝8.4Hz,1H),7.21(d,J＝7.6Hz,1H),6.07(s,0.2H),5.98(s,0.8H),4.15-4.07(m,1H),4.00-3.95(m,2H),3.77-3.67(m,3H),2.89-2.81(m,2H),2.68-2.63(m,2H),2.13(t,J＝10.4Hz,2H),2.01-1.77(m,3H),1.61(d,J＝14.0Hz,1H),1.40(s,3H),1.06(t,J＝7.2Hz,3H)。
化合物420A：(trans)-3-((4-(5-乙氧基羰基-6-(4-氟-2-甲基苯基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)-1-甲基环丁烷甲酸，LC-MS(ESI)：RT＝2.813min，C28H33FN4O6S2的计算质量604.2，m/z发现值605.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.88(br s,1H),7.73(s,1H),7.33-7.30(m,1H),6.91-6.83(m,2H),5.85(br s,1H),4.06-3.82(m,6H),2.97-2.81(m,4H),2.59-2.53(m,3H),2.39-2.34(m,2H),2.07-1.84(m,3.4H),1.66-1.64(m,0.6H),1.41(s,3H),1.11(t,J＝7.2Hz,3H)。
化合物422：trans-4-(((4-(6-(2-氯-4-氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1基)磺酰基)甲基)环己烷-1-甲酸.
LC-MS(ESI)：RT＝2.83min，C28H32ClFN4O6S2的计算质量638.1，m/z发现值639.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ8.06-8.05(m,1H),7.97-7.96(m,1H),7.48-7.45(m,1H),7.31(dd,J＝2.6,J＝8.6Hz,1H),7.15-7.10(m,1H),6.19(s,1H),4.04-3.79(m,3H),3.64(s,3H),2,98-2.85(m,4H),2.31-2.22(m,1H),2.19-1.91(m,8H),1.84-1.83(m,1H),1.56-1.41(m,2H),1.28-1.14(m,2H)。
化合物424：trans-4-(((4-(6-(2-氯-3,4-二氟苯基)-5-(乙氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1基)磺酰基)甲基)环己烷-1-甲酸
LC-MS(ESI)：RT＝2.99min，C29H33ClF2N4O6S2的计算质量670.1，m/z发现值670.5[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.44-11.8(brs,0.3H),9.64(s,0.8H),9.14(s,0.2H),8.09-7.91(m,2H),7.51-7.42(m,1H),7.26-7.16(m,1H),6.04(m,0.2H),5.94(s,0.8H),4.04-3.91(m,2H),3.78-3.61(m,3H),2.95-2.94(d,J＝6.4Hz,2H),2.86-2.77(m,2H),2.18-2.08(m,1H),2.03-1.77(m,8H),1.66-1.63(m,1H),1.40-1.22(m,2H),1.18-0.97(m,5H)。
化合物425：trans-4-(((4-(6-(2-氯-3,4-二氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1基)磺酰基)甲基)环己烷-1-甲酸
LC-MS(ESI)：RT＝2.89min，C28H31ClF2N4O6S2的计算质量656.1，m/z发现值656.5[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.68-9.20(brs,1H),8.04-7.94(m,2H),7.50-7.40(m,1H),7.27-7.14(m,1H),6.03(s,0.2H),5.94(s,0.8H),3.78-3.62(m,3H),3.53(s,3H),2.94(d,J＝6.4Hz,2H),2.86-2.79(m,2H),2.15-2.08(m,1H),2.03-1.76(m,8H),1.71-1.60(m,1H),1.39-1.21(m,2H),1.20-0.94(m,2H)。
化合物429C：(trans)-3-((4-(-5-乙氧基羰基-6-(3-氟-2-甲基苯基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)-1-甲基环丁烷甲酸，LC-MS(ESI)：RT＝3.097min，C28H33FN4O6S2的计算质量604.2，m/z发现值605.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.88(s,1H),7.73(d,J＝2.8Hz,1H),7.16-7.11(m,2H),6.96-6.91(m,1H),5.90(s,1H),4.06-3.84(m,6H),2.99-2.81(m,4H),2.43-2.36(m,5H),2.10-1.84(m,3.4H),1.66-1.61(m,0.6H),1.42(s,3H),1.11(t,J＝7.2Hz,3H)。
化合物429D：(cis)-3-((4-(-5-乙氧基羰基-6-(3-氟-2-甲基苯基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)-1-甲基环丁烷甲酸，LC-MS(ESI)：RT＝3.025min，C28H33FN4O6S2的计算质量604.2，m/z发现值605.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.88(d,J＝2.4Hz,1H),7.73(d,J＝3.2Hz,1H),7.14-7.10(m,2H),6.96-6.91(m,1H),5.91(s,1H),4.06-3.86(m,6H),2.99-2.83(m,4H),2.44(s,3H),2.24-2.19(m,2H),2.08-1.86(m,3.4H),1.70-1.64(m,0.6H),1.48(s,3H),1.11(t,J＝7.2Hz,3H)。
化合物439B：(trans)-3-((4-(6-(2-溴-3-氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)环丁烷甲酸，LC-MS(ESI)：RT＝3.082min，C25H26BrFN4O6S2的计算质量640.1，m/z发现值640.8[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IE 5μm4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:TFA＝70:30:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝17.633min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.00(s,1.8H),7.93(s,0.2H),7.43-7.38(m,1H),7.29(t,J＝8.4Hz,1H),7.21(d,J＝7.2Hz,0.8H),7.15(d,J＝7.2Hz,0.2H),6.06(s,0.2H),5.97(s,0.8H),4.03-3.95(m,1H),3.77-3.71(m,3H),3.52(s,3H),3.14-3.06(m,1H),2.92-2.83(m,2H),2.57-2.53(m,4H),2.08-1.75(m,3.2H),1.61-1.59(m,0.8H)。
化合物439D：(cis)-3-((4-(6-(2-溴-3-氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)环丁烷甲酸，LC-MS(ESI)：RT＝3.213min，C25H26BrFN4O6S2的计算质量640.1，m/z发现值643.0[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IE 5μm4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:TFA＝60:40:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝13.828min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.00(s,1.8H),7.93(br s,0.2H),7.43-7.38(m,1H),7.28(t,J＝8.8Hz,1H),7.20(d,J＝7.2Hz,1H),6.05(br s,0.2H),5.97(s,0.8H),3.98-3.89(m,1H),3.74-3.67(m,3H),3.52(s,3H),3.09-3.00(m,1H),2.89-2.80(m,2H),2.51-2.44(m,4H),2.01-1.76(m,3.2H),1.62-1.59(m,0.8H)。
化合物444b：(trans)-4-(((4-(6-(3-氟-2-甲基苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)甲基)环己烷甲酸，LC-MS(ESI)：RT＝4.233min，C29H35FN4O6S2的计算质量618.2，m/z发现值619.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.00-7.97(m,1.8H),7.92-7.91(m,0.2H),7.23-7.13(m,1.9H),7.07-6.99(m,1.1H),5.87(s,0.1H),5.74(s,0.9H),4.03-3.95(m,0.2H),3.77-3.66(m,2.8H),3.53(s,0.5H),3.52(s,2.5H),2.93(d,J＝6.4Hz,2H),2.87-2.78(m,2H),2.45(br s,0.4H),2.39(s,2.6H),2.18-1.77(m,9.2H),1.65-1.61(m,0.8H),1.38-1.28(m,2H),1.17-1.06(m,2H)。
化合物447C：(trans)-3-((4-(6-(4-氟-2-甲基苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)-1-甲基环丁烷甲酸，LC-MS(ESI)：RT＝2.727min，C27H31FN4O6S2的计算质量590.2，m/z发现值591.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.56(br s,1H),8.01-7.99(m,1.9H),7.91(d,J＝3.2Hz,0.1H),7.28-7.24(m,1H),7.02-6.95(m,2H),5.80(s,0.1H),5.67(s,0.9H),3.95-3.87(m,1H),3.75-3.68(m,3H),3.51(s,3H),2.87-2.78(m,2H),2.75-2.70(m,2H),2.51(s,3H),2.21-2.16(m,2H),2.01-1.92(m,1H),1.85-1.72(m,2H),1.59-1.56(m,1H),1.31(s,3H)。
化合物447D：(cis)-3-((4-(6-(4-氟-2-甲基苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)-1-甲基环丁烷甲酸，LC-MS(ESI)：RT＝3.919min，C27H31FN4O6S2的计算质量590.2，m/z发现值591.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.00-7.99(m,2H),7.28-7.25(m,1H),7.01-6.95(m,2H),5.68(s,1H),4.08-3.99(m,1H),3.74-3.66(m,3H),3.52(s,3H),2.89-2.80(m,2H),2.68-2.63(m,2H),2.50(s,3H),2.08-2.03(m,2H),1.98-1.92(m,1H),1.87-1.73(m,2H),1.60-1.57(m,1H),1.37(s,3H)。
化合物450A：(cis)-4-(((4-(6-(2-氯-4-氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)甲基)-4-甲基环己烷甲酸，LC-MS(ESI)：RT＝4.473min，C29H34ClFN4O6S2的计算质量652.2，m/z发现值653.0[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IE 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:TFA＝60:40:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：254nm，RT＝12.154min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.01-7.99(m,1.8H),7.93(d,J＝3.2Hz,0.2H),7.42(dd,J＝8.8,2,8Hz,1H),7.39-7.31(m,1H),7.22(td,J＝8.8,2.8Hz,1H),6.02(s,0.2H),5.92(s,0.8H),3.99-3.93(m,0.2H),3.73-3.66(m,2.8H),3.53(s,2.1H),3.52(s,0.9H),3.00(s,2H),2.90-2.82(m,2H),2.22-2.14(m,1H),2.05-1.96(m,1H),1.90-1.81(m,4H),1.72-1.53(m,5H),1.25-1.19(m,2H),1.17(s,3H)。
化合物450B：(trans)-4-(((4-(6-(2-氯-4-氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)甲基)-4-甲基环己烷甲酸，LC-MS(ESI)：RT＝4.402min，C29H34ClFN4O6S2的计算质量652.2，m/z发现值652.9[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IE 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:TFA＝60:40:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：254nm，RT＝14.009min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.01(s,1.6H),7.93(br s,0.4H),7.43(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),7.38-7.35(m,1H),7.22(td,J＝8.8,2.8Hz,1H),6.01(br s,0.2H),5.92(s,0.8H),3.95(br s,0.2H),3.74-3.67(m,2.8H),3.53(s,3H),2.94(s,2H),2.85-2.77(m,2H),2.15-2.08(m,1H),2.03-1.97(m,1H),1.90-1.79(m,2H),1.73-1.62(m,5H),1.57-1.40(m,4H),1.15(s,3H)。
化合物452A：(cis)-4-(((4-(6-(2-氯-3,4-二氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)甲基)-4-甲基环己烷甲酸，LC-MS(ESI)：RT＝3.659min，C29H33ClF2N4O6S2的计算质量670.2，m/z发现值671.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.02(s,1.6H),7.94(s,0.4H),7.50-7.43(m,1H),7.23-7.16(m,1H),6.02(s,0.2H),5.93(s,0.8H),4.01-3.94(m,0.2H),3.76-3.66(m,2.8H),3.53(s,3H),3.00(s,2H),2.91-2.83(m,2H),2.21-2.14(m,1H),2.02-1.97(m,1H),1.90-1.77(m,4H),1.71-1.53(m,5H),1.25-1.19(m,2H),1.16(s,3H)。
化合物452B：(trans)-4-(((4-(6-(2-氯-3,4-二氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)甲基)-4-甲基环己烷甲酸，LC-MS(ESI)：RT＝3.603min，C29H33ClF2N4O6S2的计算质量670.2，m/z发现值670.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.00(br s,1H),9.66(br s,0.8H),9.26(s,0.2H),8.03-7.99(m,1.7H),7.94(d,J＝3.2Hz,0.3H),7.50-7.43(m,1H),7.23-7.15(m,1H),6.02(s,0.2H),5.93(s,0.8H),4.00-3.94(m,0.2H),3.73-3.66(m,2.8H),3.53(s,3H),2.94(s,2H),2.85-2.76(m,2H),2.18-2.13(m,1H),2.02-1.96(m,1H),1.90-1.71(m,4H),1.65-1.62(m,3H),1.55-1.43(m,4H),1.15(s,3H)。
化合物454：(trans)-4-(((4-(6-(2-氯-3-氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)甲基)-环己烷甲酸,LC-MS(ESI)：RT＝3.612min，C28H32ClFN4O6S2的计算质量638.1，m/z发现质量639.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.67(br s,0.8H),9.21(br s,0.2H),8.01-7.99(m,1.7H),7.94(d,J＝3.2Hz,0.3H),7.41-7.32(m,2H),7.23-7.16(m，1H),6.07(s,0.2H),5.98(s,0.8H),4.00-3.94(m,0.3H),3.77-3.67(m,2.7H),3.53(s,3H),2.94(d,J＝6.4Hz,2H),2.86-2.78(m,2H),2.16-2.09(m,1H),2.00-1.78(m,8H),1.66-1.62(m,1H),1.39-1.28(m,2H),1.16-1.07(m,2H)
化合物456：3-(((4-(6-(2-氯-3,4-二氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)甲基)双环[1.1.1]戊烷-1-甲酸，LC-MS(ESI)：RT＝3.237min，C27H27ClF2N4O6S2的计算质量640.1，m/z发现值641.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.35(br s,1H),9.67(s,0.8H),9.25(s,0.2H),8.02-7.99(m,1.8H),7.94(d,J＝2.8Hz,0.2H),7.49-7.42(m,1H),7.23-7.14(m,1H),6.02(s,0.2H),5.93(d,J＝1.6Hz,0.8H),3.98-3.92(m,0.2H),3.75-3.66(m,2.8H),3.53(s,2.5H),3.52(s,0.5H),3.35-3.32(m,2H),2.87-2.75(m,2H),2.07(s,6H),2.06-2.00(m,1H),1.94-1.76(m,2.2H),1.64-1.61(m,0.8H)。
化合物470：(trans)-3-(4-((4-(6-(2-氯-4-氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)-1H-吡唑-1-基)环丁烷甲酸，LC-MS(ESI)：RT＝2.100min，C28H28ClFN6O6S2的计算质量662.1，m/z发现值662.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,CD3OD)8.26(s,1H),7.94(br s,1H),7.87(s,1H),7.76(d,J＝2.4Hz,1H),7.39-7.35(m,1H),7.24-7.21(m,1H),7.06-7.01(m,1H),6.05(br s,1H),5.19-5.11(m,1H),3.94-3.78(m,2H),3.76-3.61(m,1H),3.54(s,3H),3.25-3.15(m,1H),2.95-2.85(m,2H),2.81-2.72(m,2H),2.45-2.34(m,2H),2.24-1.84(m,3.4H),1.77-1.63(m,0.6H)。
化合物476A：(trans)-2-(4-((4-(6-(2-氯-4-氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)环己基)乙酸，LC-MS(ESI)：RT＝3.658min，C28H32ClFN4O6S2的计算质量638.1，m/z发现值639.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.90(d,J＝3.2Hz,1H),7.77(d,J＝3.2Hz,1H),7.39(dd,J＝8.8,6.0Hz,1H),7.23(dd,J＝8.8,2.8Hz,1H),7.08-7.03(m,1H),6.09(s,1H),4.01-3.88(m,3H),3.59(s,3H),3.09-3.00(m,3H),2.18-2.15(m,2H),2.10-2.06(m,3H),1.98-1.87(m,4H),1.82-1.68(m,2H),1.64-1.54(m,2H),1.11-1.07(m,2H)。
化合物476B：(cis)-2-(4-((4-(6-(2-氯-4-氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)环己基)乙酸，LC-MS(ESI)：RT＝3.647min，C28H32ClFN4O6S2的计算质量638.1，m/z发现值639.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.90(d,J＝3.2Hz,1H),7.75(d,J＝2.8Hz,1H),7.39(dd,J＝8.8,6.0Hz,1H),7.23(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),7.08-7.03(m,1H),6.09(s,1H),4.00-3.89(m,3H),3.59(s,3H),3.16-3.13(m,1H),3.10-3.00(m,2H),2.25-2.23(m,2H),2.18-1.89(m,8H),1.81-1.71(m,3H),1.67-1.59(m,2H)。
化合物476：2-(4-((4-(6-(2-氯-3,4-二氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)环己基)乙酸，LC-MS(ESI)：RT＝4.253min，C28H31ClF2N4O6S2的计算质量656.1，m/z发现值656.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.07(br s,0.4H),9.65(br s,0.4H),9.26(br s,0.2H),8.01-7.99(m,1.8H),7.94-7.93(m,0.2H),7.49-7.42(m,1H),7.23-7.14(m,1H),6.02(s,0.2H),5.92(s,0.8H),4.02-3.96(m,0.2H),3.79-3.72(m,2.8H),3.53(s,3H),3.22-3.16(m,0.4H),3.10-3.04(m,0.6H),3.00-2.91(m,2H),2.25(d,J＝7.6Hz,0.8H),2.11(d,J＝6.8Hz,1.2H),2.07-2.01(m,2H),1.98-1.91(m,1H),1.84-1.59(m,7H),1.47-1.40(m,1H),1.31-1.26(m,0.6H),1.11-1.02(m,1H),0.88-0.84(m,0.4H)。
化合物478：2-(4-((4-(6-(2-氯-3,4-二氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)环己基)乙酸，LC-MS(ESI)：RT＝4.253min，C28H31ClF2N4O6S2的计算质量656.1，m/z发现值656.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.07(br s,0.4H),9.65(br s,0.4H),9.26(br s,0.2H),8.01-7.99(m,1.8H),7.94-7.93(m,0.2H),7.49-7.42(m,1H),7.23-7.14(m,1H),6.02(s,0.2H),5.92(s,0.8H),4.02-3.96(m,0.2H),3.79-3.72(m,2.8H),3.53(s,3H),3.22-3.16(m,0.4H),3.10-3.04(m,0.6H),3.00-2.91(m,2H),2.25(d,J＝7.6Hz,0.8H),2.11(d,J＝6.8Hz,1.2H),2.07-2.01(m,2H),1.98-1.91(m,1H),1.84-1.59(m,7H),1.47-1.40(m,1H),1.31-1.26(m,0.6H),1.11-1.02(m,1H),0.88-0.84(m,0.4H)。
化合物478A：(trans)-2-(4-((4-(6-(2-氯-3,4-二氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)环己基)乙酸，LC-MS(ESI)：RT＝3.397min，C28H31ClF2N4O6S2的计算质量656.1，m/z发现值656.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.08(s,1H),9.66(d,J＝2.8Hz,0.8H),9.27(s,0.2H),8.01-7.99(m,1.8H),7.93(d,J＝3.2Hz,0.2H),7.49-7.42(m,1H),7.23-7.14(m,1H),6.02(s,0.2H),5.92(d,J＝3.2Hz,0.8H),4.02-3.96(m,0.2H),3.79-3.72(m,2.8H),3.53(s,3H),3.10-3.04(m,1H),3.00-2.92(m,2H),2.12-2.04(m,4H),1.98-1.91(m,1H),1.84-1.57(m,6H),1.48-1.39(m,2H),1.11-1.01(m,2H)。
化合物480B：3-(((4-(6-(2-氯-3,4-二氟苯基)-5-乙氧基羰基-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)甲基)环丁烷甲酸，LC-MS(ESI)：RT＝3.418min，C27H29ClF2N4O6S2的计算质量642.1，m/z发现值642.9[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:TFA＝70:30:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：254nm，RT＝11.747min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6+一滴D2O)δ8.00(d,J＝3.2Hz,1H),7.97(d,J＝3.2Hz,0.8H),7.91(d,J＝3.2Hz,0.2H),7.49-7.42(m,1H),7.24-7.19(m,1H),6.04(s,0.2H),5.95(s,0.8H),4.01-3.95(m,2.2H),3.76-3.67(m,2.8H),3.17(d,J＝7.2Hz,2H),3.05-2.96(m,1H),2.85-2.77(m,2H),2.68-2.60(m,1H),2.38-2.32(m,2H),2.05-1.97(m,3H),1.90-1.78(m,2.2H),1.65-1.62(m,0.8H),1.10-1.04(m,3H)。
化合物480Y：3-(((4-(6-(2-氯-3,4-二氟苯基)-5-乙氧基羰基-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)甲基)环丁烷甲酸，LC-MS(ESI)：RT＝3.388min，C27H29ClF2N4O6S2的计算质量642.1，m/z发现值642.9[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak ID 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:TFA＝70:30:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：254nm，RT＝13.820min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6+一滴D2O)δ8.00(d,J＝3.2Hz,1H),7.96(d,J＝3.2Hz,0.8H),7.90(d,J＝3.2Hz,0.2H),7.49-7.42(m,1H),7.24-7.19(m,1H),6.04(s,0.2H),5.95(s,0.8H),4.01-3.95(m,2.2H),3.76-3.66(m,2.8H),3.26(d,J＝7.2Hz,2H),3.12-3.04(m,1H),2.86-2.76(m,3H),2.37-2.31(m,2H),2.18-2.11(m,2H),2.05-1.96(m,1H),1.91-1.79(m,2.2H),1.66-1.63(m,0.8H),1.10-1.04(m,3H)。
化合物482A：2-(3-((4-(6-(2-氯-3,4-二氟苯基)-5-乙氧基羰基-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)环丁基)乙酸，LC-MS(ESI)：RT＝3.832min，C27H29ClF2N4O6S2的计算质量642.1，m/z发现值642.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.96-7.89(m,1H),7.76(s,1H),7.27-7.19(m,2H),6.16(br s,0.3H),6.08(s,0.7H),4.14-3.98(m,3.4H),3.95-3.85(m,2.6H),2.99-2.89(m,2H),2.86-2.77(m,1H),2.72-2.65(m,2H),2.54(d,J＝7.6Hz,2H),2.23-1.81(m,5.3H),1.71-1.63(m,0.7H),1.12(t,J＝7.2Hz,3H)。
化合物482B：2-(3-((4-(6-(2-氯-3,4-二氟苯基)-5-乙氧基羰基-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)环丁基)乙酸，LC-MS(ESI)：RT＝3.831min，C27H29ClF2N4O6S2的计算质量642.1，m/z发现值642.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.94-7.90(m,1H),7.76(br s,1H),7.28-7.22(m,2H),6.16-6.09(m,1H),4.12-4.02(m,3.4H),3.95-3.83(m,2.6H),2.98-2.89(m,2H),2.76-2.86(m,1H),2.60-2.53(m,2H),2.46(d,J＝7.6Hz,2H),2.22-1.82(m,5.3H),1.70-1.65(m,0.7H),1.13(t,J＝7.2Hz,3H)。
化合物370B：(trans)-3-((4-(6-(2-氯-3,4-二氟苯基)-5-乙氧基羰基-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)环丁烷甲酸，LC-MS(ESI)：RT＝2.546min，C26H27ClFN4O6S2的计算质量628.1，m/z发现值629.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.25(br s,1H),9.61(s,0.8H),9.11(s,0.2H),8.01-7.93(m,2H),7.49-7.42(m,1H),7.23-7.17(m,1H),6.03(s,0.2H),5.93(s,0.8H),4.05-3.94(m,3.2H),3.78-3.70(m,2.8H),3.19-3.11(m,1H),2.92-2.82(m,2H),2.59-2.53(m,4H),2.07-1.59(m,4H),1.09-1.03(m,3H)。
化合物370D：(cis)-3-((4-(6-(2-氯-3,4-二氟苯基)-5-乙氧基羰基-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)环丁烷甲酸，LC-MS(ESI)：RT＝3.478min，C26H27ClF2N4O6S2的计算质量628.1，m/z发现值629.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.00-7.93(m,2H),7.49-7.42(m,1H),7.22-7.19(m,1H),6.03(s,0.2H),5.94(s,0.8H),4.00-3.91(m,3H),3.74-3.68(m,3H),3.11-3.02(m,1H),2.88-2.79(m,2H),2.47-2.42(m,4H),1.97-1.60(m,4H),1.07(t,J＝7.2Hz,3H)。
节V：具有通式I的主要二氢嘧啶的杂类转化
化合物131：甲基6-(1-(2-(叔丁氧基)-2-氧代乙基)哌啶-3-基)-4-(2-氯-3-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯(4种立体异构体的混合物)
在室温向甲基6-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-3-基)-4-(2-氯-3-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯化合物30(315mg，0.59mmol)在甲醇(10mL)中的溶液中添加在甲醇中的4M盐酸(10mL，40mmol)。在室温下搅拌20分钟后，将混合物浓缩以留下残余物(355mg粗品)，将其溶于N,N-二甲基甲酰胺(15mL)中。向上述溶液中添加叔丁基2-溴乙酸酯(115mg，0.59mmol)和三乙胺(149mg，1.48mmol)。在室温下搅拌过夜后，将反应混合物倒入水(30mL)中并用乙酸乙酯(30mL)萃取三次。将合并的有机层用水(40mL)和盐水(40mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥，然后浓缩，得到残余物，将其通过以下纯化：C18柱(乙腈:水＝65％至85％和制备型HPLC(柱：Xbrige C18 5μm 19*150mm，流动相A：水(0.1％碳酸氢铵)，流动相B：乙腈，流速：20mL/min，梯度：60％-90％(％B))，得到呈黄色固体的两种级分级分A(83mg，26％产率，2种立体异构体的混合物)和级分B(43mg，13％产率，2种立体异构体的混合物)。
级分B(43mg，0.08mmol)进一步通过手性制备型HPLC分离(分离条件：柱：Chiralpak ID 5μm 20*250mm；流动相：Hex:IPA＝70:30，以13mL/min；温度：30℃；波长：230nm)，得到立体异构体化合物131M(24.0mg，56％产率)和化合物131N(18.0mg，42％产率)。
化合物131N：LC-MS(ESI)：RT＝4.354min，C26H30ClFN4O4S的计算质量548.2，m/z发现值549.0[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak ID 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:IPA＝70:30，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝6.639min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.9(s,0.9H),9.51(s,0.1H),7.99(s,0.3H),7.88(d,J＝3.2Hz,0.85H),7.87(d,J＝3.2Hz,0.85H),7.41-7.27(m,2H),7.20-7.15(m,1H),6.10(s,0.9H),5.97(d,J＝2.8Hz,0.1H),4.00(s,0.9H),3.81(s,0.1H),3.53-3.48(m,3H),3.38-3.30(m,2H),3.31-3.29(m,1H),3.12(d,J＝12.8Hz,1H),3.02(d,J＝10.4Hz,0.9H),2.87-2.81(m,0.1H),2.73(dd,J＝11.6,3.2Hz,1H),1.93-1.83(m,1H),1.82-1.70(m,3H),1.42-1.37(m,9H)。
化合物132：trans-乙基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(4-(甲基氨甲酰基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
将trans-乙基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(4-(甲氧基羰基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯化合物20(100mg，0.20mmol)在甲胺(在醇溶液中)(10mL)中的溶液在45℃的密封管中搅拌过夜。冷却至室温后，将混合物浓缩，得到残余物，将其通过C18柱(乙腈:水＝45％至55％)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物(70mg，70％产率)。
化合物132(250mg，0.500mmol)进一步通过SFC分离(柱：Chiralpak IC5μm 20*250mm；流动相：CO2:EtOH＝60:40，以45g/min；柱温：40℃；波长：214nm，背压：100巴)，得到呈黄色固体的立体异构体化合物132A(92mg，37％产率)和化合物132B(96mg，38％产率)。
化合物132A：LC-MS(ESI)：RT＝3.670min，C24H26ClFN4O3S的计算质量504.1，m/z发现值505.0[M+H]+。SFC分析条件：(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：CO2:MeOH＝60:40，以3.0mL/min；柱温：40℃；波长：214nm，背压100巴，RT＝2.66min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.08(br s,0.5H),7.83-7.80(m,1H),7.48(d,J＝3.2Hz,0.5H),7.44(d,J＝2.8Hz,0.5H),7.34-7.28(m,1.5H),7.14-7.11(m,1H),6.96-6.88(m,1H),6.20(s,0.5H),6.06(d,J＝2.0Hz,0.5H),5.49(br s,1H),4.06(q,J＝7.2Hz,2H),4.02-3.97(m,0.5H),3.80-3.73(m,0.5H),2.84(d,J＝4.4Hz,3H),2.26-1.91(m,5H),1.80-1.64(m,2.8H),1.58-1.46(m,1.2H),1.14(t,J＝7.2Hz,3H)。
Figure BDA0002341655160004431
化合物135：
Figure BDA0002341655160004432
化合物133：1-叔丁基5-甲基6-(2-氯-4-氟苯基)-4-(cis-4-(甲基磺酰胺基)环己基)-2-(噻唑-2-基)嘧啶-1,5(6H)-二甲酸酯
在室温向甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(cis-4-(甲基磺酰胺基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯化合物128(70mg，0.133mmol)在四氢呋喃(5mL)中的溶液中添加4-二甲基氨基吡啶(20mg，0.160mmol)和二碳酸二叔丁酯(35mg，0.160mmol)。将混合物在氮气气氛下在60℃搅拌过夜。冷却至室温后，将混合物减压浓缩，得到残余物，将其通过制备型TLC(石油醚:乙酸乙酯＝1:1)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物(60mg，72％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝2.590min，C27H32ClFN4O6S2的计算质量626.1，m/z发现值626.7[M+H]+。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.89(d,J＝3.2Hz,1H),7.50(d,J＝3.2Hz,1H),7.12(dd,J＝8.4,2.4Hz,1H),7.07-7.03(m,1H),6.79(td,J＝8.4,2.4Hz,1H),6.70(s,1H),4.96(d,J＝7.6Hz,1H),3.84-3.82(m,1H),3.71(s,3H),3.69-3.65(m,1H),3.03(s,3H),2.02-1.74(m,7H),1.56-1.52(m,1H),1.24(s,9H)。
化合物134：1-叔丁基5-甲基4-(trans-4-(N-(2-(叔丁氧基)-2-氧代乙基)甲基磺酰胺基)环己基)-6-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)嘧啶-1,5(6H)-二甲酸酯
在0℃在氮气气氛下向1-叔丁基5-甲基6-(2-氯-4-氟苯基)-4-((cis)-4-(甲基磺酰胺基)环己基)-2-(噻唑-2-基)嘧啶-1,5(6H)-二甲酸酯化合物133(60mg，0.0958mmol)在四氢呋喃(5mL)中的溶液中添加在矿物油中的60％wt氢化钠(11mg，0.287mmol)。在室温下搅拌30分钟后，在0℃下滴加叔丁基2-溴乙酸酯(37mg，0.192mmol)。在氮气气氛下于室温搅拌过夜，然后向混合物中滴加1M盐酸水溶液以将pH值调节至4～5。将分离的水溶液用乙酸乙酯(20mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤两次，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到残余物，将其通过制备型TLC纯化(石油醚:乙酸乙酯＝3:1)，得到呈黄色固体的标题化合物(35mg，49％产率)。
化合物134的混合物(790mg，1.07mmol)通过手性制备型HPLC分离(分离条件：柱：Chiralpak IC 5μm 30*250mm；流动相：Hex:EtOH＝80:20，以20mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到标题化合物化合物134A(210mg，27％产率)和化合物134B(280mg，35％产率)。
化合物134B：LC-MS(ESI)：RT＝2.26min，C33H42ClFN4O8S2的计算质量740.2，m/z发现值741.2[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝80:20，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝11.705min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.91(d,J＝3.2Hz,0.8H),7.89(d,J＝3.2Hz,0.2H),7.50-7.48(m,1H),7.14-7.10(m,1H),7.07-7.02(m,1H),6.78(td,J＝8.0,2.4Hz,1H),6.69(s,0.2H),6.68(s,0.8H),4.17(d,J＝18.4Hz,0.8H),4.09(d,J＝18.4Hz,0.8H),3.97-3.96(m,0.4H),3.92-3.88(m,1H),3.79-3.74(m,1H),3.71(s,0.7H),3.70(s,2.3H),3.15(s,0.7H),3.11(s,2.3H),2.24-2.19(m,1.5H),2.14-2.05(m,1.5H),1.98-1.81(m,4.7H),1.71-1.67(m,0.3H),1.48(s,2H),1.39(s,7H),1.25(s,7H),1.23(s,2H)。
化合物135：2-(N-(cis-4-(6-(2-氯-4-氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)环己基)甲基磺酰胺基)乙酸
将1-叔丁基5-甲基4-((cis)-4-(N-(2-(叔丁氧基)-2-氧代乙基)甲基磺酰胺基)环己基)-6-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)嘧啶-1,5(6H)-二甲酸酯化合物134B(280mg，0.378mmol)在1M盐酸(在二氯甲烷中)(10mL，10mmol)中的溶液在室温下搅拌过夜。然后将反应混合物浓缩，得到残留物，将其通过制备型HPLC纯化(柱：waters2-Atlantis T35μm19*150mm，流速：15mL/min，流动相A：水(0.1％盐酸)，流动相B：乙腈，梯度：20％-85％(％B))，得到呈黄色固体的标题化合物(30mg，14％产率，90.3％ee)。LC-MS(ESI)：RT＝3.334min，C24H26ClFN4O6S2的计算质量584.1，m/z发现值584.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IG 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:TFA＝70:30:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝8.969min)。1H NMR(400MHz,一滴在DMSO-d6中的D2O)δ8.02-7.99(m,2H),7.44-7.41(m,1H),7.36-7.32(m,1H),7.23-7.18(m,1H),5.95(s,1H),3.97(s,2H),3.72-3.63(m,2H),3.52(s,3H),3.07(s,3H),2.02-1.92(m,1H),1.89-1.76(m,4H),1.68-1.65(m,1H),1.59-1.47(m,2H)。
化合物139：
Figure BDA0002341655160004451
化合物136：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(trans-4-((2-乙氧基-2-氧代乙基)氨基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
在室温向甲基6-(trans-4-氨基环己基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯化合物125(800mg，1.78mmol)在二氯甲烷(20mL)中的溶液中添加乙基2-氧代乙酸酯(363mg，50wt％在甲苯中，1.78mmol)。在氮气气氛下于室温搅拌过夜后，添加氰基硼氢化钠(336mg，5.34mmol)。将混合物在室温下再搅拌2小时，然后用饱和碳酸氢钠水溶液(30mL)淬灭。将分离的水溶液用二氯甲烷(30mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤两次，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到残余物，将所述残余物通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯:氢氧化铵＝10:1:0.02)纯化，得到残余物，将所述残余物进一步通过C18(乙腈:水(+0.1％三氟乙酸)＝5％至95％)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物(200mg，21％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝2.03min，C25H28ClFN4O4S的计算质量534.2，m/z发现值535.2[M+H]+。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.11(br s,0.6H),7.82-7.80(m,1H),7.46(dd,J＝13.2,3.0Hz,1H),7.40(br s,0.4H),7.30-7.28(m,1H),7.14-7.11(m,1H),6.95-6.86(m,1H),6.17(s,0.6H),6.03(d,J＝2.4Hz,0.4H),4.21(q,J＝7.2Hz,2H),3.95(t,J＝12.0Hz,0.6H),3.71(br s,0.4H),3.60-3.59(m,3H),3.48-3.47(m,2H),2.60-2.52(m,1H),2.11-1.90(m,4H),1.79-1.71(m,1H),1.60-1.40(m,4H),1.30(t,J＝7.2Hz,3H)。
化合物137：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(trans-4-(N-(2-乙氧基-2-氧代乙基)甲基-磺酰胺基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
向甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(trans-4-((2-乙氧基-2-氧代乙基)氨基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物136(200mg，0.374mmol)在二氯甲烷(10mL)中的溶液中添加三乙胺(113mg，1.12mmol)和甲烷磺酰氯(43mg，0.374mmol)。在氮气气氛下于室温搅拌过夜后，将混合物用饱和碳酸氢钠水溶液(20mL)淬灭。然后将分离的水溶液用二氯甲烷(20mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤两次，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到残余物，将其通过制备型TLC(二氯甲烷:甲醇＝20:1)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物(85mg，37％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝4.211min，C26H30ClFN4O6S2的计算质量612.1，m/z发现值612.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.44(d,J＝4.0Hz,0.6H),9.04(s,0.4H),7.99(s,1H),7.98-7.93(m,1H),7.44-7.40(m,1H),7.35-7.29(m,1H),7.23-7.17(m,1H),5.99(s,0.4H),5.90(d,J＝3.6Hz,0.6H),4.13(q,J＝7.2Hz,2H),4.06(s,2H),3.87-3.78(m,1H),3.67-3.60(m,0.6H),3.55(s,0.4H),3.52-3.510(m,3H),3.09-3.07(m,3H),2.08-2.02(m,0.4H),1.93-1.70(m,5H),1.63-1.50(m,2.6H),1.22(t,J＝7.2Hz,3H)。
化合物138：1-叔丁基5-甲基6-(2-氯-4-氟苯基)-4-(trans-4-(N-(2-乙氧基-2-氧代乙基)-甲基-磺酰胺基)-环己基)-2-(噻唑-2-基)嘧啶-1,5(6H)-二甲酸酯(2种立体异构体的混合物)
在室温向甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(trans-4-(N-(2-乙氧基-2-氧代乙基)甲基磺酰胺基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯化合物137(240mg，0.392mmol)在四氢呋喃(5mL)中的溶液中添加4-二甲基氨基吡啶(57mg，0.47mmol)和二碳酸二叔丁酯(103mg，0.470mmol)。将混合物在氮气气氛下在60℃搅拌过夜。冷却至室温后，将混合物减压浓缩，得到残余物，将其通过C18(乙腈:水＝30％至85％)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物(200mg，72％产率)。
化合物138(200mg，0.281mmol)进一步通过手性制备型HPLC分离(分离条件：柱：Chiralpak IC 5um 20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝80:20:0.3，以15mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到立体异构体化合物138A(88mg，44％产率)和化合物138B(85mg，43％产率)。
化合物138B：LC-MS(ESI)：RT＝2.20min，C31H38ClFN4O8S2的计算质量712.2，m/z发现值713.1[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IC 5um4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝80:20:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：210nm,100％ee,Rt＝21.183min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.89(d,J＝3.2Hz,1H),7.50(d,J＝3.2Hz,1H),7.11(dd,J＝8.6,2.6Hz,1H),7.05-7.02(m,1H),6.78(td,J＝8.4,2.4Hz,1H),6.69(s,1H),4.20(q,J＝7.2Hz,2H),4.11(d,J＝18.8Hz,1H),4.04(d,J＝18.4Hz,1H),3.83-3.77(m,1H),3.71(s,3H),3.59-3.53(m,1H),3.15(s,3H),2.06-1.87(m,5H),1.71-1.68(m,1H),1.54-1.46(m,2H),1.31(t,J＝7.2Hz,3H),1.23(s,9H)。
化合物139：
2-(N-(trans-4-(6-(2-氯-4-氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)环己基)甲基磺酰胺基)乙酸
1-叔丁基5-甲基6-(2-氯-4-氟苯基)-4-(trans-4-(N-(2-乙氧基-2-氧代乙基)甲基磺酰胺基)环己基)-2-(噻唑-2-基)嘧啶-1,5(6H)-二甲酸酯化合物138B(85mg，0.119mmol)在1M盐酸(在二氯甲烷中)(5mL，5mmol)中的在室温下的溶液。在氮气气氛下于室温搅拌5小时后，将反应混合物浓缩，得到残余物，将其溶于四氢呋喃(2mL)和水(2mL)中，并在室温下添加氢氧化锂(50mg，1.19mmol)。在氮气气氛下于室温搅拌过夜后，向混合物滴加1N盐酸盐水溶液以将pH值调节至3～4。将分离的水溶液用乙酸乙酯(20mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤两次，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到残余物，将其通过C18(乙腈:水＝5％至95％)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物(30mg，43％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝3.822min，C24H26ClFN4O6S2的计算质量584.1，m/z发现值584.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IG 5um 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:TFA＝70:30:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝9.786min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.73(brs,1H),9.46(d,J＝3.2Hz,0.6H),9.06(s,0.4H),7.99-7.94(m,2H),7.46-7.41(m,1H),7.35-7.29(m,1H),7.25-7.17(m,1H),5.99(s,0.4H),5.89(d,J＝3.2Hz,0.6H),3.97(s,2H),3.84-3.79(m,1H),3.64-3.58(m,1H),3.52-3.51(m,3H),3.10-3.08(m,3H),1.92-1.70(m,5H),1.63-1.46(m,3H)。
化合物474：甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(1-((2-羟基乙基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
Figure BDA0002341655160004481
在0℃向甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(1-((2-甲氧基-2-氧代乙基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯化合物473(45mg，0.076mmol)在四氢呋喃(2mL)中的溶液中添加硼氢化锂(5.0mg，0.23mmol)，并且将混合物在0℃下搅拌1小时。将混合物在室温下减压浓缩，得到残余物，将其通过制备型HPLC纯化(柱：gilson X-bridgeC18(5μm 19*150mm)流动相A：水(+0.1％碳酸氢铵)，流动相B：乙腈，UV：214nm，流速：15mL/min，梯度：40％-70％(％B))，得到呈黄色固体的标题化合物474(21mg，49％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝4.021min，C22H23ClFN4O5S2的计算质量560.1，m/z发现值561.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.62(s,0.8H),9.21(s,0.2H),7.99-7.93(m,2H),7.48-7.41(m,1H),7.23-7.14(m,1H),6.02(s,0.2H),5.93(s,0.8H),5.05-5.00(m,1H),4.02-3.92(m,0.3H),3.80-3.65(m,4.7H),3.58(s,3H),3.24-3.19(m,2H),2.94-2.84(m,2H),2.12-1.76(m,3.2H),1.65-1.62(m,0.8H)。
化合物158：甲基4-(2-氯-3-氟苯基)-6-(1-((1-(噁唑-2-基甲基)-1H-吡唑-4-基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
Figure BDA0002341655160004491
向甲基6-(1-((1H-吡唑-4-基)磺酰基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-3-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯158A(80.0mg，0.142mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(2mL)中的溶液中添加碳酸钾(39.0mg，0.284mmol)和碘化钠(21.0mg，0.142mmol)。在室温搅拌5分钟后，在N,N-二甲基甲酰胺(1mL)中的2-(氯甲基)噁唑(15.0mg，0.123mmol)。在室温下搅拌过夜后，将反应混合物倒入水(10mL)中，并用乙酸乙酯(10mL)萃取两次。将合并的有机层用水(10mL)洗涤两次，用盐水(10mL)洗涤两次，经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到残余物，将其通过制备型HPLC纯化(柱：waters Kinete EVO C18(5μm 21.2*150mm)流动相A：水(+0.1％碳酸氢铵)，流动相B：乙腈，UV：214nm，流速：15mL/min，梯度：30％-80％(％B))，得到呈黄色固体的标题化合物(25mg，27％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝4.318min，C27H25ClFN7O5S2的计算质量645.1，m/z发现值646.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.19(s,0.3H),7.95(d,J＝2.8Hz,1H),7.84-7.79(m,2H),7.71(s,1H),7.53(d,J＝3.2Hz,0.7H),7.46-7.45(m,1H),7.24-7.02(m,4H),6.23(s,0.3H),6.10(d,J＝2.8Hz,0.7H),5.50(s,2H),4.03-3.85(m,2.3H),3.77-3.72(m,0.7H),3.56-3.55(m,3H),2.48-1.91(m,5.3H),1.73-1.70(m,0.7H)。
化合物173：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-((cis)-3-(羟基甲基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
Figure BDA0002341655160004501
在室温向甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-((cis)-3-(甲氧基羰基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯化合物172(100mg，0.200mmol)在四氢呋喃(3mL)中的溶液中添加硼氢化锂(22mg，1.0mmol)。在室温搅拌过夜后，将悬浮液用水(20mL)淬灭，并用乙酸乙酯(20mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到残余物，将其通过制备型HPLC分离(柱：gilson X-bridge C18(5μm 19*150mm)，流动相A：水(+0.1％碳酸氢铵)，流动相B：乙腈，UV：214nm，流速：15mL/min，梯度：35％-90％(％B))，得到呈黄色固体的标题化合物(90mg，96％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝3.055min，C22H23ClFN3O3S的计算质量463.1，m/z发现值464.2[M+H]+.1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.15(s,0.6H),7.82(d,J＝2.8Hz,1H),7.49(d,J＝3.6Hz,0.3H),7.44(d,J＝3.6Hz,0.7H),7.40(br s,0.4H),7.33-7.29(m,1H),7.15-7.11(m,1H),6.96-6.87(m,1H),6.18(d,J＝1.6Hz,0.7H),6.04(d,J＝2.4Hz,0.3H),4.08-4.01(m,0.7H),3.86-3.79(m,0.3H),3.61-3.53(m,5H),2.12-1.62(m,5H),1.58-1.02(m,5H)。
化合物173A和173C：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-((cis)-3-(羟基甲基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
外消旋化合物173(300mg，0.650mmol)通过手性制备型HPLC分离(第一分离：(柱：Chiralpak IC 5μm 50*250mm；流动相：Hex:IPA:DEA＝85:15:0.1，以60mL/min；温度：30℃；波长：254nm)和第二分离(柱：Chiralpak IC 5μm 50*250mm；流动相：Hex:EtOH＝90:10:0.1，以60mL/min；温度：30℃；波长：254nm))随后通过C18柱纯化(乙腈:水＝40％至95％)，得到呈黄色固体的标题化合物173A(42.0mg，14％产率，96.2％立体纯)，173B(38.4mg，13％产率，94.0％立体纯)，173C(38.7mg，13％产率，100％立体纯)和173D(43.9mg，15％产率，100％立体纯)。
化合物173A：LC-MS(ESI)：RT＝4.063min，C22H23ClFN3O3S的计算质量463.1，m/z发现值463.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IG 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝90:10:0.2，以1mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝11.411min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.15(s,0.7H),7.83-7.81(m,1H),7.48(d,J＝3.2Hz,0.3H),7.44(d,J＝3.6Hz,0.7H),7.39(br s,0.3H),7.33-7.29(m,1H),7.15-7.11(m,1H),6.97-6.89(m,1H),6.19(s,0.7H),6.05(d,J＝2.4Hz,0.3H),4.07-4.00(m,0.7H),3.85-3.79(m,0.3H),3.61-3.53(m,5H),2.12-2.09(m,1H),1.99-1.76(m,4H),1.67-1.60(m,1H),1.55-1.46(m,1H),1.41-1.34(m,1H),1.30-1.21(m,1H),1.13-1.05(m,1H)。
化合物173C：LC-MS(ESI)：RT＝4.044min，C22H23ClFN3O3S的计算质量463.1，m/z发现值463.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:IPA:DEA＝90:10:0.2，以1mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝15.756min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.14(s,0.6H),7.82-7.81(m,1H),7.48(d,J＝2.8Hz,0.3H),7.44(d,J＝2.8Hz,0.7H),7.39(br s,0.4H),7.32-7.29(m,1H),7.15-7.11(m,1H),6.95-6.87(m,1H),6.18(s,0.7H),6.04(d,J＝2.8Hz,0.3H),4.08-4.01(m,0.7H),3.86-3.79(m,0.3H),3.61(s,0.9H),3.59(s,2.1H),3.58-3.50(m,2H),2.05-1.98(m,2H),1.90-1.70(m,3H),1.55-1.41(m,2H),1.36-1.27(m,1H),1.21-1.03(m,2H)。
化合物180B：(cis)-甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(4-(N-(2-羟基乙基)甲基磺酰胺基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢-嘧啶-5-甲酸酯
Figure BDA0002341655160004511
化合物177：(cis)-1-叔丁基5-甲基6-(2-氯-4-氟苯基)-4-(4-(甲基磺酰胺基)环己基)-2-(噻唑-2-基)嘧啶-1,5(6H)-二甲酸酯
在室温向(cis)-甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(4-(甲基磺酰胺基)-环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯128(1.40g，2.66mmol)在四氢呋喃(14mL)中的溶液中添加N,N-二甲基吡啶-4-胺(389mg，3.19mmol)和二碳酸二叔丁酯(696mg，3.19mmol)。在60℃下搅拌过夜后，将混合物减压浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯:四氢呋喃＝10:1:1至5:1:1)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物(1.30g，78％产率)。1HNMR(300MHz,CDCl3)δ7.89(d,J＝2.4Hz,1H),7.49(d,J＝2.1Hz,1H),7.14-7.10(m,1H),7.07-7.02(m,1H),6.83-6.75(m,1H),6.71-6.69(m,1H),5.01-4.93(m,1H),3.86-3.78(m,1H),3.71(s,3H),3.68-3.57(m,1H),3.02(s,3H),2.02-1.74(m,7H),1.57-1.51(m,1H),1.23(s,9H)。
化合物178：(cis)-1-叔丁基5-甲基4-(4-(N-(2-(叔丁氧基)-2-氧代乙基)甲基磺酰胺基)环己基)-6-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)嘧啶-1,5(6H)-二甲酸酯
在0℃向(cis)-1-叔丁基5-甲基6-(2-氯-4-氟苯基)-4-(4-(甲基磺酰胺基)环己基)-2-(噻唑-2-基)嘧啶-1,5(6H)-二甲酸酯177(1.0g，1.60mmol)在四氢呋喃(10mL)中的溶液中添加在矿物油中的60％wt氢化钠(192mg，4.80mmol)。在室温下搅拌30分钟后，在0℃下添加叔丁基2-溴乙酸酯(623mg，3.19mmol)。在室温搅拌过夜后，将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液(20mL)淬灭，并用乙酸乙酯(20mL)萃取两次。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯:四氢呋喃＝10:1:1至5:1:1)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物(430mg，36％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.92-7.88(m,1H),7.51-7.47(m,1H),7.15-7.09(m,1H),7.07-7.01(m,1H),6.82-6.74(m,1H),6.70-6.67(m,1H),4.20-4.05(m,1.6H),3.98-3.95(m,0.6H),3.94-3.89(m,0.8H),3.80-3.76(m,0.5H),3.71(s,1H),3.69(s,2H),3.62-3.52(m,0.5H),3.15(s,1H),3.11(s,2H),2.24-2.17(m,1H),2.14-2.00(m,2H),1.95-1.75(m,4H),1.71-1.59(m,1H),1.48(s,3H),1.38(s,6H),1.24(s,6H),1.22(s,3H)。
中间体179：(cis)-甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(4-(N-(2-甲氧基-2-氧代乙基)甲基磺酰胺基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
向1M盐酸盐在甲醇(10mL，10mmol)中的溶液中添加(cis)-1-叔丁基5-甲基4-(4-(N-(2-(叔丁氧基)-2-氧代乙基)甲基磺酰胺基)-环己基)-6-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)嘧啶-1,5(6H)-二甲酸酯178(430mg，0.580mmol)。在室温下搅拌过夜后，将混合物减压浓缩，得到残余物，将其溶于二氯甲烷(20mL)中，用饱和碳酸氢钠水溶液(20mL)洗涤。将分离的水相用二氯甲烷(20mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤两次，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯:四氢呋喃＝20:1:1)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物(340mg，98％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.85-7.80(m,1H),7.47-7.45(m,1H),7.32-7.29(m,1H),7.19-7.15(m,1H),7.06-7.01(m,1H),6.96-6.89(m,1H),6.19-6.15(m,0.3H),6.08-6.01(m,0.7H),4.10(s,2H),3.99-3.95(m,1H),3.89-3.85(m,1H),3.72(s,3H),3.58(s,3H),3.14(s,3H),2.09-2.00(m,5H),1.78-1.58(m,3H)。
化合物180：(cis)-甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(4-(N-(2-羟基-乙基)甲基磺酰胺基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
在0℃向(cis)-甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(4-(N-(2-甲氧基-2-氧代乙基)甲基磺酰胺基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯179(320mg，0.534mmol)在四氢呋喃(5mL)中的溶液中添加四氢硼酸锂(71mg，3.21mmol)。在氮气气氛下于30℃搅拌2小时后，将反应混合物用1M盐酸盐水溶液(20mL)缓慢淬灭，并用二氯甲烷(20mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到残余物，将其通过制备型HPLC纯化(柱：Gilson X-bridge C18(5μm 19*150mm)，流动相A：水(0.2％ammonium acetate)，流动相B：乙腈，UV：214nm，流速：15mL/min，梯度：30％-70％(％B))，得到呈黄色固体的标题化合物(110mg，36％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝4.007min，C24H28ClFN4O5S2的计算质量570.1，m/z发现值571.1[M+H]+。
化合物180B：(cis)-甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(4-(N-(2-羟基-乙基)甲基磺酰胺基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
外消旋(cis)-甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(4-(N-(2-羟基乙基)-甲基磺酰胺基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯180(110mg，0.193mmol)通过手性制备型HPLC分离(第一分离条件：柱：Chiralpak IA 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝70:30:0.3，以22mL/min；温度：30℃；波长：230nm；第二分离条件：柱：Chiralpak AD-H 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝85:15:0.3，以15mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到呈黄色固体的标题化合物180A(15mg，14％产率，100％立体纯)和呈黄色固体的180B(30mg，27％产率，100％立体纯)。
化合物180B：LC-MS(ESI)：RT＝3.946min，C24H28ClFN4O5S2的计算质量570.1，m/z发现值570.9[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝70:30:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝7.725min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.43(br s,0.6H),9.10(br s,0.4H),8.01-7.97(m,1.5H),7.95-7.92(m,0.5H),7.44-7.40(m,1H),7.36-7.30(m,1H),7.24-7.17(m,1H),6.00(s,0.4H),5.91(s,0.6H),4.79-4.73(m,1H),3.86-3.74(m,1H),3.59-3.55(m,1H),3.53(s,1.7H),3.51(s,1.3H),3.50-3.47(m,2H),3.17(t,J＝7.2Hz,2H),2.97(s,1.7H),2.96(s,1H),2.95(s,0.3H),2.11-2.03(m,0.4H),1.92-1.73(m,5H),1.66-1.56(m,2.6H)。
化合物182A：(trans)甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(4-(2-甲氧基乙基磺酰胺基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
Figure BDA0002341655160004541
化合物181A：(trans)-1-叔丁基5-甲基4-(4-((叔丁氧基羰基)氨基)-环己基)-6-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)嘧啶-1,5(6H)-二甲酸酯
在室温向(trans)-甲基6-(4-((叔丁氧基羰基)氨基)环己基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯14(500mg，0.910mmol)在二氯甲烷(5mL)中的溶液中添加二碳酸二叔丁酯(398mg，1.82mmol)和三乙胺(184mg，1.82mmol)。搅拌30分钟后，添加N,N-二甲基吡啶-4-胺(222mg，1.82mmol)。然后将混合物在室温下搅拌过夜。减压除去溶剂，并将获得的残余物通过硅胶柱色谱法纯化(乙酸乙酯:石油醚＝1:5)，得到黄色固体(400mg)，将其通过手性制备型SFC分离(柱：Chiralpak IE 5μm 20*250mm；流动相：CO2:IPA＝75:25，以50g/min；柱温：40℃；波长：214nm，背压：100巴)，得到呈黄色固体的181A(80mg，14％产率，99.4％立体纯)和181B(90mg，15％产率，96.9％立体纯)。
化合物181A：手性分析(柱：Chiralpak IE 5μm 4.6*250mm，流动相：CO2:IPA＝75:25，以3.0g/min；柱温：39.6℃；波长：230nm，背压：100巴，RT＝2.89min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.00-7.99(m,1H),7.47(dd,J＝9.2,2.4Hz,1H),7.14(td,J＝8.0,2.0Hz,1H),7.05-7.01(m,1H),6.83(d,J＝8.4Hz,1H),6.55(s,1H),3.66(s,3H),3.45-3.40(m,1H),3.31-3.24(m,1H),1.94-1.82(m,3H),1.88-1.60(m,2H),1.54-1.50(m,1H),1.40(s,9H),1.32-1.24(m,2H),1.15(s,9H)。
化合物182A：(trans)甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(4-(2-甲氧基乙基磺酰胺基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
在室温向4N盐酸盐在甲醇(5mL)中的溶液中添加(trans)-1-叔丁基5-甲基4-(4-((叔丁氧基羰基)氨基)环己基)-6-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)嘧啶-1,5(6H)-二甲酸酯181A(100mg，0.154mmol)。搅拌过夜后，将反应混合物浓缩，得到残余物，将其溶于四氢呋喃(10mL)中。在0℃下向该溶液中添加三乙胺(92mg，0.912mmol)。在室温下搅拌30分钟后。添加2-甲氧基乙烷磺酰氯(96mg，0.610mmol)并且将混合物在0℃下搅拌2小时。然后将其浓缩，得到残余物，将所述残余物通过制备型薄层色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝1:1)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物(22mg，25％产率，98.2％立体纯)。LC-MS(ESI)：RT＝4.004min，C24H28ClFN4O5S2的计算质量570.1，m/z发现值570.9[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝70:30，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝17.095min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.46(d,J＝3.2Hz,0.6H),9.00(s,0.4H),8.00-7.98(m,1.6H),7.94-7.93(m,0.4H),7.44-7.41(m,1H),7.35-7.29(m,1H),7.24-7.14(m,2H),6.00(s,0.4H),5.90(d,J＝3.6Hz,0.6H),3.83-3.76(m,0.4H),3.69-3.65(m,2H),3.58-3.55(m,0.6H),3.52(s,1.8H),3.50(s,1.2H),3.31-3.28(m,5.4H),3.16-3.08(m,0.6H),2.05-1.96(m,2.4H),1.88-1.66(m,3H),1.60-1.57(m,0.6H),1.38-1.22(m,2H)。
化合物185B：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(1-((2-羟基乙基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
Figure BDA0002341655160004561
在0℃向甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(1-((2-甲氧基-2-氧代乙基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯化合物106(140mg，0.250mmol)在四氢呋喃(40mL)中的溶液中添加硼氢化锂(27.0mg，1.25mmol)。在室温下搅拌6小时后，向混合物中添加入水(30mL)，用乙酸乙酯(30mL)萃取三次。将分离的有机层用盐水(30mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液浓缩，得到残余物，将其通过制备型HPLC纯化(柱：gilson,x-bridge C18(5μm 19*150mm，流动相A：水(+0.1％碳酸氢铵)，流动相B：乙腈，UV：214nm，流速：15mL/min，梯度：30％-80％(％B))，得到呈黄色固体的标题化合物化合物185(60mg，45％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝3.962min，C22H24ClFN4O5S2的计算质量542.1，m/z发现值543.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.20(s,0.2H),7.84-7.81(m,1H),7.52(d,J＝3.2Hz,0.8H),7.46-7.44(m,1H),7.30-7.27(m,0.8H),7.26-7.25(m,0.2H),7.16-7.12(m,1H),6.98-6.89(m,1H),6.19(s,0.2H),6.07(d,J＝2.8Hz,0.8H),4.23-4.15(m,0.2H),4.12-4.01(m,2H),3.93-3.89(m,2.8H),3.60(s,2H),3.59(s,1H),3.22-3.19(m,2H),3.02-2.90(m,2H),2.79-2.73(m,1H),2.31-2.28(m,0.8H),2.21-2.03(m,1H),1.97-1.85(m,1.2H),1.83-1.72(m,1H)。
外消旋化合物185(127mg，0.200mmol)通过手性制备型HPLC分离(柱：ChiralpakIA 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝70:30:0.3，以25mL/min；温度：30℃；波长：230nm)，得到呈黄色固体的标题化合物化合物185A(51.6mg，41％产率，100％立体纯)和化合物185B(59.2mg，47％产率，98.4％立体纯)。
化合物185A：LC-MS(ESI)：RT＝3.954min，C22H24ClFN4O5S2的计算质量542.1，m/z发现值543.1[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝70:30:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm；RT＝7.832min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.16(s,0.2H),7.89-7.77(m,1H),7.54(d,J＝12.0Hz,0.8H),7.49(d,J＝7.6Hz,0.2H),7.44(br s,0.8H),7.32-7.25(m,0.6H),7.25-7.23(m,0.4H),7.19-7.14(m,1H),7.01-6.87(m,1H),6.19(s,0.2H),6.07(d,J＝2.4Hz,0.8H),4.28-4.16(m,0.2H),4.16-4.06(m,2H),4.05-3.87(m,2.8H),3.60(s,2H),3.59(s,1H),3.25-3.19(m,2H),3.07-2.87(m,2H),2.80-2.67(m,1H),2.36-2.18(m,0.7H),2.16-2.10(m,1H),1.99-1.81(m,1.3H),1.76-1.68(m,1H)。
化合物185B LC-MS(ESI)：RT＝3.951min，C22H24ClFN4O5S2的计算质量542.1，m/z发现值543.1[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝70:30:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm；RT＝11.235min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.19(br s,0.2H),7.88-7.78(m,1H),7.54(d,J＝14.0Hz,0.8H),7.48(d,J＝15.2Hz,0.2H),7.39(br s,0.8H),7.32-7.30(m,0.7H),7.25-7.23(m,0.3H),7.19-7.13(m,1H),7.03-6.85(m,1H),6.19(s,0.2H),6.07(d,J＝2.8Hz,0.8H),4.27-4.17(m,0.2H),4.17-4.07(m,2H),4.02-3.87(m,2.8H),3.60(s,2H),3.59(s,1H),3.27-3.13(m,2H),3.02-2.83(m,2H),2.78-2.67(m,1H),2.35-2.16(m,0.7H),2.11-2.04(m,1H),2.00-1.88(m,1.3H),1.80-1.67(m,1H)。
化合物186A：(trans)-甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(4-(丙基-磺酰胺基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
Figure BDA0002341655160004571
将(trans)-1-叔丁基5-甲基4-(4-((叔丁氧基羰基)氨基)环己基)-6-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)嘧啶-1,5(6H)-二甲酸酯181A(100mg，0.154mmol)在4M盐酸盐(在乙酸乙酯中)(5mL，20mmol)中的溶液在室温下搅拌2小时。然后将混合物减压浓缩，得到残余物，将其溶于二氯甲烷(5mL)中。向该溶液中添加三乙胺(78mg，0.770mmol)和丙烷-1-磺酰氯(26mg，0.185mmol)。在室温下搅拌2小时后，将混合物用饱和碳酸氢钠水溶液(20mL)淬灭，用二氯甲烷(20mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤两次，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到残余物，将其通过制备型薄层色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝3:2)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物(40mg，47％产率，98.1％立体纯)。LC-MS(ESI)：RT＝3.988min，C24H28ClFN4O4S2的计算质量554.1，m/z发现值554.9[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝70:30:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝8.095min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.45(br s,0.6H),9.01(br s,0.4H),7.99-7.97(m,1.5H),7.94-7.93(m,0.5H),7.44-7.40(m,1H),7.35-7.29(m,1H),7.23-7.18(m,1H),7.12-7.08(m,1H),6.00(s,0.4H),5.90(d,J＝3.6Hz,0.6H),3.82-3.77(m,0.4H),3.57-3.56(m,0.6H),3.51(s,1.6H),3.50(s,1.4H),3.30-3.24(m,0.4H),3.10-3.07(m,0.6H),3.02-2.96(m,2H),1.99-1.94(m,2H),1.86-1.78(m,2H),1.72-1.66(m,3H),1.64-1.56(m,1H),1.39-1.30(m,2H),1.01-0.97(m,3H)。
化合物187B：(trans)-甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(4-(2-羟基乙基磺酰胺基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
Figure BDA0002341655160004581
化合物181B-1：(trans)-甲基6-(4-氨基环己基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
在氮气气氛下向(trans)-1-叔丁基5-甲基4-(4-((叔丁氧基羰基)氨基)环己基)-6-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)嘧啶-1,5(6H)-二甲酸酯化合物181B(200mg，0.31mmol)在二氯甲烷(8mL)中的溶液中添加三氟乙酸(5mL)。在室温搅拌2小时后，将混合物减压浓缩，得到残余物，将其用饱和碳酸钠水溶液碱化至pH＝8。然后将水相用乙酸乙酯(10mL)萃取三次。将合并的有机层经无水Na2SO4(s)干燥，过滤并浓缩，得到呈黄色固体的所需化合物181B-1(140mg，99％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝2.159min，C21H22ClFN4O2S的计算质量448.1，m/z发现值449.1[M+H]+。
化合物187B-1：(trans)-甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(4-(2-甲氧基-2-氧代乙基磺酰胺基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
在氮气气氛下向(trans)-甲基6-(4-氨基环己基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯181B-1(100mg，0.23mmol)和三乙胺(47mg，0.46mmol)在二氯甲烷(6mL)中的溶液中添加甲基2-(氯磺酰基)乙酸酯(48mg，0.27mmol)。在室温下搅拌2小时后，将混合物浓缩，得到残余物，将其通过C18柱(乙腈:水＝40％至80％)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物187B-1(100mg，75％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝4.022min，C24H26ClFN4O6S2的计算质量584.1，m/z发现值584.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.12(s,0.4H),7.83-7.82(m,1H),7.51(d,J＝2.8Hz,0.6H),7.45(d,J＝2.8Hz,0.4H),7.41(s,0.6H),7.31-7.24(m,1H),7.15-7.11(m,1H),6.96-6.88(m,1H),6.18(s,0.4H),6.04(d,J＝2.4Hz,0.6H),4.75-4.70(m,1H),4.07-4.06(m,2H),4.01-3.94(m,0.4H),3.83(s,3H),3.78-3.70(m,0.6H),3.60(s,1.8H),3.59(s,1.2H),3.44-3.39(m,1H),2.32-2.17(m,2H),2.13-1.93(m,2H),1.90-1.67(m,1.5H),1.57-1.40(m,2.5H)。
化合物187B：(trans)-甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(4-(2-羟基乙基磺酰胺基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
在氮气气氛下向(trans)-甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(4-(2-甲氧基-2-氧代乙基磺酰胺基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯187B-1(100mg，0.17mmol)在四氢呋喃(10mL)中的溶液中添加硼氢化锂(20mg，0.85mmol)。在室温下搅拌过夜后，将反应混合物用水(10mL)稀释，并用乙酸乙酯(10mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到残余物，将其通过C18柱(乙腈:水＝35％至80％)纯化，得到呈淡黄色固体的标题化合物187B(51mg，55％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝3.626min，C23H26ClFN4O5S2的计算质量556.1，m/z发现值556.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.12(s,0.4H),7.83-7.82(m,1H),7.51(d,J＝2.8Hz,0.6H),7.45(d,J＝3.2Hz,0.4H),7.41(s,0.6H),7.29-7.23(m,1H),7.15-7.11(m,1H),6.96-6.87(m,1H),6.18(s,0.4H),6.04(d,J＝2.4Hz,0.6H),4.34-4.27(m,1H),4.12-4.08(m,2H),4.01-3.94(m,0.4H),3.78-3.70(m,0.6H),3.60(s,1.8H),3.59(s,1.2H),3.48-3.40(m,1H),3.33-3.29(m,2H),2.67(t,J＝6.0Hz,0.6H),2.58(t,J＝6.0Hz,0.4H),2.32-2.15(m,2H),2.13-1.96(m,2H),1.93-1.60(m,2H),1.55-1.37(m,2H)。
化合物205：甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(1-(S-甲基磺酰亚胺基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
Figure BDA0002341655160004601
化合物205P：甲基6-(1-(N-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-S-甲基磺酰亚胺基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
在0℃向在氮气气氛下的三苯基膦二氯化物(2.40g，7.20mmol)在干氯仿(10mL)中的搅拌溶液中添加三乙胺(1.00g，9.90mmol)。在室温下搅拌10分钟后，将反应混合物冷却至0℃并且添加N-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-甲烷磺酰胺(1.40g，6.60mmol)在干氯仿(3mL)中的溶液。在0℃下搅拌20分钟后，添加甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯化合物99(300mg，0.660mmol)在氯仿(2mL)中的溶液。在0℃下搅拌30分钟后，将反应混合物减压浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯:二氯甲烷＝10:1:1)纯化。得到呈黄色固体的205P1(60mg，9％产率)和205P2(40mg，14％产率)。
化合物205P1：LC-MS(ESI)：RT＝2.864min，C27H36ClF2N5O3S2Si的计算质量643.2，m/z发现值644.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.21(s,0.4H),7.83(d,J＝3.2Hz,1H),7.53(d,J＝2.8Hz,0.6H),7.46(d,J＝3.2Hz,0.4H),7.40(br s,0.6H),7.09-7.02(m,2H),6.19(s,0.4H),6.06(d,J＝2.4Hz,0.6H),4.12-3.86(m,3H),3.61(s,1.6H),3.59(s,1.4H),2.76(s,1.6H),2.75(s,1.4H),2.68-2.63(m,2H),2.31-2.22(m,0.6H),2.07-1.98(m,1.4H),1.93-1.86(m,1H),1.77-1.71(m,1H),0.93(s,5H),0.92(s,4H),0.16-0.11(m,6H)。
化合物205P2：LC-MS(ESI)：RT＝2.848min，C27H36ClF2N5O3S2Si的计算质量643.2，m/z发现值644.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.21(s,0.4H),7.83(d,J＝3.2Hz,1H),7.53(d,J＝3.2Hz,0.6H),7.46(d,J＝2.8Hz,0.4H),7.41(d,J＝1.6Hz,0.6H),7.08-6.99(m,2H),6.19(s,0.4H),6.07(d,J＝2.8Hz,0.6H),4.13-3.83(m,3H),3.61(s,1.6H),3.59(s,1.4H),2.76(s,1.6H),2.75(s,1.4H),2.73-2.63(m,2H),2.29-2.19(m,0.5H),2.14-2.04(m,1H),2.04-1.95(m,1H),1.91-1.81(m,1H),1.73-1.70(m,0.5H),0.94(s,5H),0.93(s,4H),0.17-0.14(m,6H)。
化合物205：甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(1-(S-甲基磺酰亚胺基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
在室温下向205P2(40mg，0.060mmol)在甲醇(2mL)中的溶液中添加2M盐酸盐水溶液(0.5mL)。在室温下搅拌1小时后，将反应混合物减压浓缩，得到残余物，将其溶于水(10mL)中。将混合物用28％氨溶液(0.5mL)调节至pH＝9-10，并减压浓缩，得到残留物，将其通过制备型HPLC纯化(柱：Xbrige C18 HILIC(5μm 10*190mm)流动相A：水,流动相B：乙腈，UV：214nm，流速：50mL/min，梯度：20％-95％(％B))，得到呈黄色固体的化合物205A(20.8mg，65％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝3.418min，C21H22ClF2N5O3S2的计算质量529.1，m/z发现值529.9[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IC 5μm4.6*250mm；流动相：CO2:MeOH＝60:40，以2.999g/min；柱温：39.3℃；波长：214nm，背压：100巴，RT＝6.14min和6.84min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.19(s,0.4H),7.84-7.83(m,1H),7.53(d,J＝3.2Hz,0.6H),7.47(d,J＝3.2Hz,0.4H),7.43(br s,0.6H),7.09-7.02(m,2H),6.19(s,0.4H),6.07(d,J＝2.4Hz,0.6H),4.14-4.03(m,2.4H),3.92-3.86(m,0.6H),3.61(s,1.8H),3.59(s,1.2H),2.86(s,1.8H),2.84(s,1.2H),2.81-2.74(m,2H),2.31-2.20(m,0.7H),2.17-2.00(m,2.3H),1.95-1.74(m,2H)。
化合物205B类似于205A从205P1制备，1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.19(s,0.4H),7.84-7.82(m,1H),7.53(d,J＝3.2Hz,0.6H),7.47(d,J＝3.6Hz,0.4H),7.43(d,J＝1.6Hz,0.6H),7.08-7.01(m,2H),6.19(s,0.4H),6.07(d,J＝2.8Hz,0.6H),4.17-4.00(m,2.3H),3.93-3.86(m,0.7H),3.61(s,1.9H),3.59(s,1.1H),2.86(s,1.9H),2.84(s,1.1H),2.83-2.73(m,2H),2.28-2.22(m,0.7H),2.17-2.06(m,2H),2.02-1.94(m,1H),1.89-1.80(m,0.7H),1.75-1.72(m,0.6H)。
化合物207C：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(-1-甲基吡咯烷-3-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
Figure BDA0002341655160004611
向甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(吡咯烷-3-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯64(220mg，0.524mmol)和多聚甲醛(157mg，5.23mmol)在甲醇(8mL)中的溶液中添加氰基硼氢化钠(494mL，7.87mmol)。将混合物在室温搅拌2小时。将混合物浓缩，得到残余物，将其通过制备型HPLC纯化(柱：gilson C185μm 19*150mm，流速：20ml/min，流动相A：水(0.1％碳酸氢铵)，流动相B：乙腈，梯度：15％-60％(％B))，得到呈黄色固体的标题化合物(90mg，40％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝3.328min，C20H20ClFN4O2S的计算质量434.1，m/z发现值435.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.59(s,0.5H),10.55(s,0.5H),7.97(d,J＝2.8Hz,1H),7.91(s,1H),7.44-7.34(m,2H),7.22-7.15(m,1H),6.00(s,0.5H),5.96(s,0.5H),4.52(s,1H),3.51(s,1.5H),3.50(s,1.5H),3.17-2.93(m,2H),2.44(s,1.5H),2.42(s,1.5H),2.33-1.71(m,4H)。
207的混合物(90mg，0.21mmol)通过手性制备型HPLC分离(柱：Chiralpak IE 5μm20*250mm,Mobile Phase:Hex:EtOH:DEA＝90:10:0.3，以15mL/min，温度：30℃，波长：230nm)，得到标题化合物207C(6.3mg，7％产率，97.0％de)，207D(9.3mg，10％产率，98.2％de)和207A与207B的混合物。
化合物207C：LC-MS(ESI)：RT＝3.329min，C20H20ClFN4O2S的计算质量434.1，m/z发现值434.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IE 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝90:10:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝9.672min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.61(s,1H),7.81(d,J＝2.8Hz,1H),7.39(d,J＝3.2Hz,1H),7.33(dd,J＝8.8,6.4Hz,1H),7.12(dd,J＝8.8,2.8Hz,1H),6.92-6.88(m,1H),6.13(s,1H),4.67-4.63(m,1H),3.59(s,3H),3.21(t,J＝8.8Hz,1H),3.09(d,J＝10.0Hz,1H),2.50(s,3H),2.46-2.35(m,2H),2.15(q,J＝8.8Hz,1H),1.87-1.79(m,1H)。
化合物219：甲基4-(2-氯-3-氟苯基)-6-(5-(羟基甲基)-四氢呋喃-3-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
Figure BDA0002341655160004631
在0℃在氮气气氛下向甲基4-(2-氯-3-氟苯基)-6-(5-(乙氧基羰基)-四氢呋喃-3-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯211M(1.33g，2.70mmol)在四氢呋喃(45mL)中的溶液中添加硼氢化锂(297mg，13.5mmol)。在0℃下搅拌3小时后，将反应混合物用水(25mL)和0.6M盐酸盐水溶液(6mL)淬灭，并用乙酸乙酯(40mL)萃取三次。将合并的有机层用水(20mL)洗涤两次，经Na2SO4(s)干燥，过滤并浓缩，得到残余物，将其通过制备型HPLC纯化(柱：Waters X-bridge C18(5μm 19*150mm)流动相A：水(0.1％碳酸氢铵)，流动相B：乙腈，UV：214nm，流速：15mL/min，梯度：30％-80％(％B))，得到呈黄色固体的标题化合物219(960mg，79％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝3.126min，C20H19ClFN3O4S的计算质量451.1，m/z发现值451.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.65-9.62(m,0.3H),9.61-9.56(m,0.3H),9.24(s,0.1H),9.16(s,0.1H),9.11(s,0.1H),9.04(s,0.1H),8.01(s,1H),7.97-7.91(m,1H),7.41-7.33(m,2H),7.27-7.16(m,1H),6.09-6.05(m,0.4H),6.00-5.96(m,0.6H),5.03-4.86(m,0.2H),4.74-4.59(m,0.8H),4.43-4.33(m,0.5H),4.21-4.11(m,0.5H),4.04-3.97(m,1H),3.90-3.76(m,1H),3.68-3.64(m,0.4H),3.60-3.57(m,0.6H),3.53-3.52(m,2H),3.51-3.46(m,1H),3.43-3.41(m,1H),2.40-2.33(m,0.4H),2.23-2.13(m,0.6H),2.03-1.87(m,0.7H),1.78-1.68(m,0.3H)。
外消旋219(1.00g，2.20mmol)通过手性制备型HPLC分离(柱：Chiralpak AD-H 5μm20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝70:30:0.3，以15mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到标题化合物219D(19.7mg，2％产率，100％立体纯)，219F(19.9mg，2％产率，100％立体纯)，219H(19.5mg，2％产率，100％立体纯)和五种异构体的混合物(600mg，60％产率)。混合物(600mg，1.33mmol)通过手性制备型HPLC分离(柱：Chiralpak OD-H 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝90:10:0.3，以15mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到标题化合物219B(19.6mg，2％产率，100％立体纯)，级分1(230mg，23％产率)和级分2(170mg，17％产率)。级分1(230mg，0.51mmol)进一步通过手性SFC分离(柱：Chiralpak IG 5μm 20*250mm；流动相：CO2:MeOH:DEA＝75:25:0.3，以50g/min；柱温：40℃；波长：214nm，背压：100巴)，得到标题化合物219A(19.5mg，2％产率，100％立体纯)和219C(19.2mg，2％产率，100％立体纯)。级分2(170mg，0.38mmol)进一步通过手性SFC分离(柱：Chiralpak IG 5μm 20*250mm；流动相：CO2:IPA:DEA＝70:30:0.3，以50g/min；柱温：40℃；波长：214nm，背压：100巴)，得到标题化合物219E(19.7mg，2％产率，100％立体纯)和219G(20.0mg，2％产率，100％立体纯)。
化合物219A：LC-MS(ESI)：RT＝3.308min，C20H19ClFN3O4S的计算质量451.1，m/z发现值452.1[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak OD-H 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝90:10:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝10.908min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.63(d,J＝3.6Hz,0.7H),9.04(s,0.3H),8.03-8.00(m,1.6H),7.94(d,J＝3.2Hz,0.4H),7.41-7.29(m,2H),7.24-7.22(m,1H),6.09(s,0.3H),5.96(d,J＝4.0Hz,0.7H),4.87-4.84(m,0.3H),4.70-4.67(m,0.7H),4.65-4.60(m,0.3H),4.44-4.36(m,0.7H),4.32-4.26(m,0.3H),4.18-4.13(m,0.7H),4.04-3.96(m,1H),3.89-3.85(m,0.3H),3.68-3.65(m,0.7H),3.53(s,2H),3.51(s,1H),3.45-3.42(m,2H),2.41-2.34(m,0.7H),2.23-2.20(m,0.6H),1.92-1.85(m,0.7H)。
化合物219C：LC-MS(ESI)：RT＝3.319min，C20H19ClFN3O4S的计算质量451.1，m/z发现值452.1[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak AD-H 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝50:50:0.2，以0.5mL/min；温度：30℃；波长：254nm，RT＝4.358min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.61-9.56(m,0.7H),9.13-9.08(m,0.3H),8.01(s,1.6H),7.95(s,0.4H),7.41-7.26(m,2.3H),7.18(d,J＝7.2Hz,0.7H),6.06(s,0.4H),5.90(d,J＝2.8Hz,0.6H),4.89-4.76(m,0.3H),4.70-4.54(m,0.7H),4.41-4.31(m,0.7H),4.26-4.22(m,0.3H),4.21-4.10(m,1.6H),3.97-3.89(m,0.4H),3.82-3.78(m,0.7H),3.52(s,3H),3.43(s,1.3H),3.42(s,1H),2.28-2.15(m,1H),2.09-2.00(m,0.4H),1.80-1.71(m,0.6H)。1H NMR(400MHz,CD3OD+0.6MHCl水溶液(1滴))δ8.00(d,J＝3.2Hz,1H),7.90(d,J＝2.8Hz,1H),7.34-7.31(m,1H),7.28-7.26(m,1H),7.22-7.17(m,1H),6.22(s,1H),4.70-4.60(m,1H),4.41-4.38(m,1H),4.18-4.11(m,2H),3.65-3.58(m,5H),2.30-2.25(m,1H),2.15-2.10(m,1H)。
化合物219E：LC-MS(ESI)：RT＝2.601min，C20H19ClFN3O4S的计算质量451.1，m/z发现值451.9[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak AD-H 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝70:30:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝5.603min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.62(d,J＝3.6Hz,0.5H),9.24(s,0.5H),8.01(s,1H),7.96(d,J＝3.2Hz,0.5H),7.91(d,J＝2.8Hz,0.5H),7.41-7.29(m,2H),7.21(d,J＝7.6Hz,1H),6.06(s,0.5H),5.97(d,J＝3.2Hz,0.5H),5.04(t,J＝5.2Hz,0.5H),4.73-4.67(m,1H),4.45-4.36(m,0.5H),4.04-3.97(m,1.5H),3.89-3.80(m,1.5H),3.76-3.68(m,0.5H),3.63-3.56(m,1H),3.54(s,1.5H),3.51(s,1.5H),3.50-3.46(m,0.5H),2.47-2.44(m,0.5H),2.18-2.09(m,1H),1.97-1.91(m,0.5H)。
化合物219H：LC-MS(ESI)：RT＝3.051min，C20H19ClFN3O4S的计算质量451.1，m/z发现值451.9[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak AD-H 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝70:30:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝14.702min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.62-9.57(m,0.5H),9.16(s,0.5H),8.01(s,1H),7.96(d,J＝2.8Hz,0.5H),7.92(d,J＝3.2Hz,0.5H),7.40-7.30(m,2H),7.28-7.16(m,1H),6.09-6.05(m,0.5H),5.99-5.95(m,0.5H),4.91(t,J＝5.2Hz,0.5H),4.68-4.66(m,1H),4.42-4.33(m,0.5H),4.21-4.18(m,0.5H),4.03-3.94(m,1.5H),3.93-3.79(m,1H),3.62-3.55(m,1.4H),3.53(s,1.4H),3.52(s,1.6H),3.48-3.44(m,0.6H),2.46-2.40(m,0.6H),2.01(t,J＝8.4Hz,1H),1.74-1.67(m,0.4H)。1H NMR(400MHz,CD3OD+0.6M HCl水溶液(1滴))δ8.23-8.19(m,2H),7.45-7.40(m,2.2H),7.35-7.31(m,0.8H),6.35-6.33(m,1H),4.73-4.69(m,1H),4.26-4.19(m,2H),4.07-4.03(m,1H),3.97-3.93(m,1H),3.81(d,J＝4.0Hz,0.6H),3.78(d,J＝3.6Hz,0.4H),3.67(s,0.3H),3.64(s,2.7H),2.55-2.47(m,1H),2.14-2.11(m,1H)。
化合物221：(cis)-甲基4-(2-氯-3-氟苯基)-6-(4-(羟基甲基)四氢呋喃-2-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
Figure BDA0002341655160004651
在室温下在氮气气氛下向(cis)-甲基6-(4-(((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)甲基)-四氢呋喃-2-基)-4-(2-氯-3-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯220(2.20g，3.19mmol)在四氢呋喃(25mL)中的溶液中添加四丁基氟化铵三水合物(3.03g，9.60mmol)。在氮气气氛下于60℃搅拌过夜。然后将其冷却至室温，并减压浓缩，得到残余物，将其通过C18柱(乙腈:水＝5％至95％)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物(1.13g，78％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝3.277和3.326min，C20H19ClFN3O4S的计算质量451.1，m/z发现值452.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.13(s,0.5H),9.06(s,0.5H),7.83(dd,J＝10.0,3.2Hz,1H),7.43(d,J＝3.2Hz,1H),7.23-7.02(m,3H),6.27(s,0.5H),6.22(s,0.5H),5.62-5.53(m,1H),4.14-4.02(m,2H),4.01-3.71(m,0.3H),3.70-3.66(m,1.7H),3.63-3.62(m,1H),3.58(s,3H),2.91-2.86(m,1H),2.71-2.66(m,1H),1.68-1.65(m,0.5H),1.56-1.53(m,0.5H)。
221的外消旋混合物(1.13g，2.50mmol)通过手性制备型HPLC分离(柱：ChiralpakIE 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝80:20:0.2，以15mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到221D(251mg，22％产率，100％立体纯)和级分1(800mg)。级分1(800mg，1.77mmol)进一步通过手性制备型HPLC分离(柱：Chiralpak IG 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH＝80:20，以15mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到221A(161mg，14％产率，100％立体纯)和级分2(444mg)。级分2(444mg，0.984mmol)进一步通过手性制备型HPLC分离(柱：Chiralpak IC 5μm 20*250mm；流动相：Hex:IPA＝80:20，以15mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到221B(182mg，16％产率，100％立体纯)和221C(181mg，16％产率，96.9％立体纯)。
化合物221D：LC-MS(ESI)：RT＝3.123min，C20H19ClFN3O4S的计算质量451.1，m/z发现值451.9[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IE 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝80:20:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝11.164min)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.91(d,J＝3.2Hz,1H),7.73(d,J＝2.8Hz,1H),7.29-7.26(m,1H),7.20-7.11(m,2H),6.22(s,1H),5.55-5.51(m,1H),4.05-4.03(m,2H),3.61-3.58(m,5H),2.84-2.81(m,1H),2.65-2.61(m,1H),1.72-1.69(m,1H)。
化合物243A和243B：(trans)-甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(1-((3-(甲氧基羰基)环丁基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯和(cis)-甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(1-((3-(甲氧基羰基)环丁基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
Figure BDA0002341655160004671
向甲基6-(1-((3-(叔丁氧基羰基)环丁基)磺酰基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯化合物242(670mg，1.03mmol)在3M盐酸盐(在甲醇中)(10mL，30mmol)中的溶液中。在室温搅拌过夜后，将混合物减压浓缩，得到残余物，将其溶于二氯甲烷(20mL)中。向上述溶液中添加饱和碳酸氢钠水溶液(20mL)，并用二氯甲烷(20mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤两次，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到残余物，将其通过制备型TLC纯化(石油醚:乙酸乙酯＝2:1)，得到呈黄色固体的标题化合物243A(200mg，32％产率)和呈黄色固体的243B(180mg，29％产率)。
化合物243A：1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.52-9.51(m,0.8H),9.12(br s,0.2H),8.04-7.98(m,1.8H),7.94-7.92(m,0.2H),7.43-7.33(m,2H),7.24-7.15(m,1H),6.01(s,0.2H),5.92(d,J＝3.3Hz,0.8H),4.08-4.00(m,1H),3.78-3.69(m,3H),3.65(s,3H),3.53(s,3H),3.29-3.21(m,1H),2.93-2.82(m,2H),2.62-2.57(m,4H),1.97-1.73(m,3H),1.64-1.54(m,1H)。
化合物243B：1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.55-9.49(m,0.8H),9.12(br s,0.2H),8.00-7.89(m,2H),7.43-7.33(m,2H),7.24-7.17(m,1H),6.01(s,0.2H),5.94-5.90(m,0.8H),4.05-3.94(m,1H),3.74-3.67(m,3H),3.63(s,3H),3.53(s,3H),3.24-3.16(m,1H),2.90-2.79(m,2H),2.59-2.53(m,4H),2.02-1.75(m,3H),1.65-1.55(m,1H)。
化合物244X：(trans)-甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(1-((3-(2-羟基丙-2-基)环丁基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
Figure BDA0002341655160004681
在-78℃向(trans)-甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(1-((3-(甲氧基羰基)环丁基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯243A(281mg，0.46mmol)在四氢呋喃(6mL)中的溶液中添加滴加在四氢呋喃中的3.0M甲基氯化镁(1.2mL，3.6mmol)。在室温下搅拌过夜后，将反应混合物用饱和氯化铵水溶液(20mL)淬灭，并用乙酸乙酯(20mL)萃取两次。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到残余物，将其通过制备型TLC纯化(石油醚:乙酸乙酯＝3:2)，得到不纯的标题化合物，将其进一步通过制备型HPLC纯化(柱：Xbridge C18(5μm 10*190mm)，流动相A：水(0.1％碳酸氢铵)，流动相B：乙腈，流速：15mL/min，梯度：40％-75％(％B))，得到呈黄色固体的标题化合物(220mg，78％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝4.313min，C27H32ClFN4O5S2的计算质量610.2，m/z发现值611.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.52(d,J＝3.6Hz,0.8H),9.10(br s,0.2H),8.01-7.98(m,1.8H),7.93(d,J＝3.2Hz,0.2H),7.44-7.40(m,1H),7.37-7.31(m,1H),7.23-7.17(m,1H),6.01(s,0.2H),5.92(d,J＝4.0Hz,0.8H),4.36(s,1H),3.97-3.90(m,0.2H),3.78-3.71(m,3.8H),3.53(s,2.3H),3.52(s,0.7H),2.88-2.79(m,2H),2.40-2.26(m,5H),2.02-1.91(m,1H),1.83-1.74(m,2H),1.63-1.55(m,1H),1.02(s,6H)。
244X的外消旋混合物(200mg，0.327mmol)通过手性制备型SFC分离(分离条件：柱：Chiralpak IF 5μm 20*250mm；流动相：CO2:MeOH＝60:40，以50g/min；柱温：39.8℃；波长：214nm；背压：100巴)，得到呈黄色固体的244A(70mg，35％产率，100％立体纯)和呈黄色固体的244B(75mg，38％产率，100％立体纯)。
化合物244A：LC-MS(ESI)：RT＝4.342min，C27H32ClFN4O5S2的计算质量610.2，m/z发现值611.1[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IF 5μm 4.6*250mm；流动相：CO2:EtOH＝60:40，以2.999g/min；柱温：40.1℃；波长：230nm，背压：100巴，RT＝4.95min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.48(br s,0.8H),9.16-9.03(m,0.2H),8.06-7.90(m,2H),7.43-7.40(m,1H),7.37-7.31(m,1H),7.23-7.18(m,1H),6.02-5.97(m,0.2H),5.92(s,0.8H),4.35(s,1H),3.96-3.89(m,0.2H),3.78-3.69(m,3.8H),3.52(s,3H),2.89-2.80(m,2H),2.40-2.26(m,5H),2.00-1.92(m,1H),1.85-1.74(m,2H),1.64-1.55(m,1H),1.02(s,6H)。
化合物244B：LC-MS(ESI)：RT＝4.308min，C27H32ClFN4O5S2的计算质量610.2，m/z发现值611.1[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IF 5μm 4.6*250mm；流动相：CO2:EtOH＝60:40，以2.999g/min；柱温：40℃；波长：230nm，背压：100巴，RT＝6.15min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.51(d,J＝3.6Hz,0.8H),9.09(br s,0.2H),8.01-7.98(m,1.8H),7.94-7.91(m,0.2H),7.44-7.40(m,1H),7.38-7.31(m,1H),7.23-7.18(m,1H),6.01(s,0.2H),5.92(d,J＝3.6Hz,0.8H),4.35(s,1H),3.99-3.91(m,0.2H),3.78-3.71(m,3.8H),3.53(s,2.3H),3.52(s,0.7H),2.88-2.80(m,2H),2.40-2.25(m,5H),2.02-1.91(m,1H),1.86-1.74(m,2H),1.63-1.55(m,1H),1.02(s,6H)。
化合物244Y：(cis)-甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(1-((3-(2-羟基丙-2-基)环丁基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
Figure BDA0002341655160004691
在-78℃向(cis)-甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(1-((3-(甲氧基羰基)环丁基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯243B(200mg，0.327mmol)在四氢呋喃(4mL)中的溶液中添加滴加在四氢呋喃中的3.0M甲基氯化镁(0.9mL，2.7mmol)。在室温下搅拌过夜后，将反应混合物用饱和氯化铵水溶液(20mL)淬灭，并用乙酸乙酯(20mL)萃取两次。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液减压浓缩至干，得残余物，将其通过制备型TLC纯化(石油醚:乙酸乙酯＝1:1)，得到不纯的标题化合物，将其进一步通过制备型HPLC纯化(柱：Xbrige C18 5μm 10*190mm，流速：15mL/min，流动相A：水(0.1％碳酸氢铵)，流动相B：乙腈，梯度：40％-75％(％B))，得到呈黄色固体的标题化合物(130mg，65％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝4.314min，C27H32ClFN4O5S2的计算质量610.2，m/z发现值611.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.51(d,J＝3.6Hz,0.8H),9.08(br s,0.2H),8.01-7.98(m,1.8H),7.93(d,J＝2.8Hz,0.2H),7.44-7.40(m,1H),7.38-7.31(m,1H),7.23-7.17(m,1H),6.02(s,0.2H),5.92(d,J＝3.2Hz,0.8H),4.28(s,0.2H),4.26(s,0.8H),3.98-3.91(m,0.2H),3.77-3.68(m,3.8H),3.53(s,2.3H),3.52(s,0.7H),2.89-2.81(m,2H),2.33-2.27(m,2H),2.24-2.20(m,1H),2.12-2.06(m,2H),2.00-1.91(m,1H),1.87-1.74(m,2H),1.63-1.54(m,1H),0.98(s,6H)。
244Y的外消旋混合物(110mg，0.180mmol)通过手性制备型HPLC分离(分离条件：柱：Chiralpak IE 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝50:50:0.3，以9mL/min；温度：30℃；波长：230nm)，得到呈黄色固体的标题化合物244C(43mg，39％产率，100％立体纯)和呈黄色固体的244D(42mg，38％产率，100％立体纯)。
化合物244C：LC-MS(ESI)：RT＝4.328min，C27H32ClFN4O5S2的计算质量610.2，m/z发现值611.1[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IE 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝50:50:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝10.291min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.52(d,J＝3.2Hz,0.8H),9.09(br s,0.2H),8.01-7.98(m,1.8H),7.93(d,J＝3.2Hz,0.2H),7.44-7.40(m,1H),7.37-7.31(m,1H),7.23-7.17(m,1H),6.01(s,0.2H),5.92(d,J＝2.8Hz,0.8H),4.29(s,0.2H),4.26(s,0.8H),3.97-3.91(m,0.2H),3.77-3.67(m,3.8H),3.53(s,2.3H),3.52(s,0.7H),2.89-2.80(m,2H),2.33-2.26(m,2H),2.24-2.20(m,1H),2.12-2.06(m,2H),2.01-1.91(m,1H),1.86-1.74(m,2H),1.62-1.55(m,1H),0.98(s,6H)。
化合物244D：LC-MS(ESI)：RT＝4.328min，C27H32ClFN4O5S2的计算质量610.2，m/z发现值611.1[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IE 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝50:50:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝10.635min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.52(d,J＝3.2Hz,0.8H),9.09(br s,0.2H),8.03-7.98(m,1.8H),7.93(d,J＝3.6Hz,0.2H),7.44-7.40(m,1H),7.38-7.31(m,1H),7.23-7.17(m,1H),6.02(s,0.2H),5.92(d,J＝3.2Hz,0.8H),4.29(s,0.3H),4.26(s,0.7H),3.98-3.92(m,0.2H),3.77-3.67(m,3.8H),3.53(s,3H),2.89-2.80(m,2H),2.33-2.27(m,2H),2.24-2.20(m,1H),2.12-2.06(m,2H),2.01-1.91(m,1H),1.86-1.74(m,2H),1.63-1.55(m,1H),0.98(s,6H)。
化合物245：(trans)-甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(4-(N-((R)-2-羟基-3-甲氧基丙基)甲基磺酰胺基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物236-A：(trans)-甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(4-(((R)-2-羟基-3-甲氧基丙基)氨基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
向(trans)-甲基6-(4-氨基环己基)-4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯236(200mg，0.430mmol)在甲醇(4mL)中的溶液中添加(R)-2-(甲氧基甲基)环氧乙烷(40mg，0.470mmol)。在微波反应器中于90℃下搅拌2小时后，将反应混合物冷却至室温，用水(10mL)稀释并用乙酸乙酯(10mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到粗产物，将其通过C18柱(乙腈:水＝40％至80％)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物(200mg，84％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝2.161min，C25H29ClF2N4O4S的计算质量554.2，m/z发现值554.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.15(s,0.5H),7.83-7.81(m,1H),7.50(d,J＝3.2Hz,0.5H),7.45(d,J＝3.2Hz,0.5H),7.39(s,0.5H),7.09-6.98(m,2H),6.17(s,0.6H),6.04(s,0.4H),4.20-4.13(m,0.5H),4.00-3.93(m,1H),3.81-3.71(m,0.5H),3.61-3.59(m,3H),3.50-3.41(m,2H),3.40(s,3H),3.12-3.09(m,1H),2.96-2.88(m,2H),2.28-1.99(m,4H),1.84-1.39(m,4H)。
化合物236-B：(trans)-甲基6-(4-((叔丁氧基羰基)((R)-2-羟基-3-甲氧基丙基)氨基)环己基)-4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
在氮气气氛下向(trans)-甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(4-(((R)-2-羟基-3-甲氧基丙基)氨基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯236-A(150mg，0.270mmol)在二氯甲烷(8mL)中的溶液中添加焦碳酸二叔丁酯(177mg，0.810mmol)和三乙胺(90mg，0.810mmol)。在室温下搅拌2小时后，将反应混合物用水(10mL)稀释，并用乙酸乙酯(10mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(40mL)洗涤，经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到呈黄色油的标题化合物(180mg，99％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝2.517min，C30H37ClF2N4O6S的计算质量654.2，m/z发现值655.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.17(s,0.6H),7.83(d,J＝3.2Hz,1H),7.51(d,J＝2.8Hz,0.4H),7.45(d,J＝2.8Hz,0.6H),7.39(s,0.4H),7.07-6.98(m,2H),6.17(s,0.7H),6.04(s,0.3H),3.99-3.83(m,2H),3.61-3.59(m,3H),3.41-3.24(m,8H),2.14-1.70(m,8H),1.52(s,9H)。
化合物236-C：(trans)-甲基6-(4-(((R)-2-乙酰氧基-3-甲氧基丙基)-氨基)环己基)-4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
在氮气气氛下向(trans)-甲基6-(4-((叔丁氧基羰基)((R)-2-羟基-3-甲氧基丙基)氨基)环己基)-4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4二氢嘧啶-5-甲酸酯236-B(130mg，0.200mmol)在二氯甲烷(10mL)中的溶液中添加乙酸酐(61mg，0.600mmol)、4-二甲基氨基吡啶(24mg，0.200mmol)和三乙胺(60mg，0.600mmol)。在室温下搅拌2小时后，将反应混合物用水(10mL)稀释，并用乙酸乙酯(10mL)萃取三次。将合并的有机层用1M盐酸盐水溶液(10mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到呈无色油的粗化合物(150mg)，将其溶于二氯甲烷(10mL)中。在氮气气氛下向上述溶液中添加三氟乙酸(5ml)。在室温下搅拌2小时后，将反应混合物用水(10mL)稀释，并用乙酸乙酯(10mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到呈无色油的粗化合物(140mg，99％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝2.402min，C27H31ClF2N4O5S的计算质量596.2，m/z发现值596.8[M+H]+。
化合物236-D：(trans)-甲基6-(4-(N-((R)-2-乙酰氧基-3-甲氧基丙基)甲基磺酰胺基)环己基)-4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
在氮气气氛下向(trans)-甲基6-(4-(((R)-2-乙酰氧基-3-甲氧基丙基)氨基)-环己基)-4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯236-C(140mg，0.230mmol)在二氯甲烷(10mL)中的溶液中添加甲烷磺酰氯(40mg，0.350mmol)和三乙胺(70mg，0.700mmol)。在室温下搅拌2小时后，将反应混合物用水(10mL)稀释，并用乙酸乙酯(10mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到残余物，将其通过C18柱(乙腈:水＝40％至80％)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物(75mg，50％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝1.837min，C28H33ClF2N4O7S2的计算质量674.1，m/z发现值674.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.16(s,0.5H),7.84-7.83(m,1H),7.56-7.41(m,1.5H),7.05(br s,2H),6.17(s,0.5H),6.05(s,0.5H),4.00-3.90(m,1H),3.61-3.50(m,6H),3.38(s,3H),3.14(s,3H),2.93(s,3H),2.12(s,3H),2.05-1.72(m,8H)。
化合物245M：(trans)-甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(4-(N-((R)-2-羟基-3-甲氧基丙基)甲基磺酰胺基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
在氮气气氛下向(trans)-甲基6-(4-(N-((R)-2-乙酰氧基-3-甲氧基丙基)甲基磺酰胺基)环己基)-4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯236-D(110mg，0.160mmol)在甲醇(8mL)中的溶液中添加碳酸钾(44mg，0.320mmol)。在室温下搅拌2小时后，将反应混合物用水(10mL)稀释，并用乙酸乙酯(10mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液浓缩，得到残余物，将其通过C18柱(乙腈:水＝40％至80％)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物(40mg，41％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝1.739min，C26H31ClF2N4O6S2的计算质量632.1，m/z发现值632.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.17(s,0.5H),7.83(d,J＝4.0Hz,1H),7.53(d,J＝2.8Hz,0.5H),7.46(d,J＝2.8Hz,0.5H),7.39(s,0.5H),7.08-6.99(m,2H),6.17(s,0.5H),6.04(d,J＝2.8Hz,0.5H),4.00-3.94(m,1.5H),3.85-3.70(m,1.5H),3.61-3.59(m,3H),3.46-3.38(m,5H),3.34-3.31(m,2H),2.98-2.96(m,3.5H),2.89-2.85(m,0.5H),2.15-1.94(m,4H),1.90-1.64(m,4H)。
外消旋245M(80mg，0.13mmol)通过手性制备型HPLC分离(柱：Chiralpak IA 5μm20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝80:20:0.3，以25mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到呈黄色固体的标题化合物245A(40mg，50％产率，100％立体纯)和245B(40mg，50％产率，100％立体纯)。
化合物245A：LC-MS(ESI)：RT＝2.135min，C26H31ClF2N4O6S2的计算质量632.1，m/z发现值632.9[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IG 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝50:50:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝8.105min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.17(s,0.5H),7.83(d,J＝3.2Hz,1H),7.52(d,J＝3.2Hz,0.5H),7.46(d,J＝3.2Hz,0.5H),7.41(s,0.5H),7.07-6.98(m,2H),6.17(s,0.5H),6.04(d,J＝2.8Hz,0.5H),4.01-3.93(m,1.5H),3.85-3.68(m,1.5H),3.61-3.59(m,3H),3.46-3.41(m,5H),3.42-3.31(m,2H),2.98-2.96(m,3.5H),2.88-2.87(m,0.5H),2.16-1.96(m,4H),1.92-1.67(m,4H)。
化合物245B：LC-MS(ESI)：RT＝2.123min，C26H31ClF2N4O6S2的计算质量632.1，m/z发现值632.9[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IG 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝50:50:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝10.000min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.17(s,0.5H),7.83(d,J＝3.2Hz,1H),7.52(d,J＝3.2Hz,0.5H),7.46(d,J＝3.2Hz,0.5H),7.40(s,0.5H),7.07-6.98(m,2H),6.17(s,0.5H),6.04(d,J＝2.8Hz,0.5H),4.01-3.93(m,1.5H),3.85-3.69(m,1.5H),3.61-3.59(m,3H),3.46-3.39(m,5H),3.34-3.24(m,2H),3.01-2.98(m,3.5H),2.90-2.89(m,0.5H),2.16-1.93(m,4H),1.90-1.63(m,4H)。
Figure BDA0002341655160004741
化合物236-E：(trans)-甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(4-(((S)-2-羟基-3-甲氧基丙基)氨基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
向(trans)-甲基6-(4-氨基环己基)-4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯236(200mg，0.430mmol)在甲醇(4mL)中的溶液中添加(S)-2-(甲氧基甲基)环氧乙烷(42mg，0.470mmol)。在微波反应器中于85℃下搅拌2小时后，将反应混合物冷却至室温，用水(10mL)稀释并用乙酸乙酯(10mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到粗产物，将其通过C18柱(乙腈:水＝40％至80％)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物(170mg，71％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝2.169min，C25H29ClF2N4O4S的计算质量554.2，m/z发现值554.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.15(s,0.5H),7.83-7.81(m,1H),7.50(d,J＝3.2Hz,0.5H),7.45(d,J＝3.2Hz,0.5H),7.39(s,0.5H),7.08-6.98(m,2H),6.17(s,0.6H),6.04(s,0.4H),4.21-4.14(m,0.5H),3.98-3.93(m,1H),3.80-3.72(m,0.5H),3.61-3.59(m,3H),3.50-3.41(m,2H),3.40(s,3H),3.13-3.08(m,1H),2.97-2.88(m,2H),2.33-1.98(m,4H),1.82-1.42(m,4H)。
化合物236-F：(trans)-甲基6-(4-((叔丁氧基羰基)((S)-2-羟基-3-甲氧基丙基)氨基)环己基)-4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
在氮气气氛下向(trans)-甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(4-(((S)-2-羟基-3-甲氧基丙基)氨基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯236-E(170mg，0.300mmol)在二氯甲烷(10mL)中的溶液中添加焦碳酸二叔丁酯(200mg，0.920mmol)和三乙胺(93mg，0.920mmol)。在室温下搅拌2小时后，将反应混合物用水(10mL)稀释，并用乙酸乙酯(10mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(40mL)洗涤，经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到呈黄色油的标题化合物(200mg，99％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝1.945min，C30H37ClF2N4O6S的计算质量654.2，m/z发现值654.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.17(s,0.6H),7.83-7.82(m,1H),7.51(d,J＝2.8Hz,0.4H),7.45(d,J＝2.8Hz,0.6H),7.39(s,0.4H),7.07-6.98(m,2H),6.17(s,0.7H),6.04(s,0.3H),3.99-3.83(m,2H),3.61-3.59(m,3H),3.41-3.24(m,8H),2.14-1.70(m,8H),1.51(s,9H)。
化合物236-G：(trans)-甲基6-(4-(((S)-2-乙酰氧基-3-甲氧基丙基)(叔丁氧基羰基)氨基)环己基)-4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
在氮气气氛下向(trans)-甲基6-(4-((叔丁氧基羰基)((S)-2-羟基-3-甲氧基丙基)氨基)环己基)-4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4二氢嘧啶-5-甲酸酯236-F(200mg，0.310mmol)在二氯甲烷(10mL)中的溶液中添加乙酸酐(94mg，0.930mmol)、4-二甲基氨基吡啶(40mg，0.310mmol)和三乙胺(83mg，0.930mmol)。在室温下搅拌2小时后，将反应混合物用水(10mL)稀释，并用乙酸乙酯(10mL)萃取三次。将合并的有机层用1M盐酸盐水溶液(10mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到呈无色油的粗化合物(220mg，99％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝2.121min，C32H39ClF2N4O7S的计算质量696.2，m/z发现值696.9[M+H]+。
化合物236-H：(trans)-甲基6-(4-(N-((S)-2-乙酰氧基-3-甲氧基丙基)甲基磺酰胺基)环己基)-4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
在氮气气氛下向(trans)-甲基6-(4-(((S)-2-乙酰氧基-3-甲氧基丙基)(叔丁氧基羰基)氨基)环己基)-4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯236-G(220mg，0.310mmol)在二氯甲烷(10mL)中的溶液中添加三氟乙酸(5ml)。在室温下搅拌2小时后，将反应混合物用水(10mL)稀释，并用乙酸乙酯(10mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到粗化合物(230mg)，将其溶于二氯甲烷(10mL)中。向上述溶液中添加甲烷磺酰氯(53mg，0.470mmol)和三乙胺(90mg，0.900mmol)。在室温下搅拌2小时后，将反应混合物用水(10mL)稀释，并用乙酸乙酯(10mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到残余物，将其通过C18柱(乙腈:水＝40％至80％)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物(150mg，75％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝1.855min，C28H33ClF2N4O7S2的计算质量674.1，m/z发现值674.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.16(s,0.5H),7.84-7.83(m,1H),7.56-7.41(m,1.5H),7.05(br s,2H),6.17(s,0.5H),6.05(s,0.5H),4.00-3.90(m,1H),3.61-3.50(m,6H),3.38(s,3H),3.14(s,3H),2.93(s,3H),2.12(s,3H),2.05-1.72(m,8H)。
化合物245N：(trans)-甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(4-(N-((S)-2-羟基-3-甲氧基丙基)甲基磺酰胺基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
在氮气气氛下向(trans)-甲基6-(4-(N-((S)-2-乙酰氧基-3-甲氧基丙基)甲基磺酰胺基)环己基)-4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯236-H(150mg，0.220mmol)在甲醇(5mL)中的溶液中添加碳酸钾(60mg，0.440mmol)。在室温下搅拌2小时后，将反应混合物用水(10mL)稀释，并用乙酸乙酯(10mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液浓缩，得到残余物，将其通过C18柱(乙腈:水＝40％至80％)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物(85mg，60％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝2.456min，C26H31ClF2N4O6S2的计算质量632.1，m/z发现值632.8[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.17(s,0.5H),7.84-7.83(m,1H),7.53(d,J＝3.2Hz,0.5H),7.46(d,J＝3.2Hz,0.5H),7.41(s,0.5H),7.06-6.98(m,2H),6.17(s,0.5H),6.04(d,J＝2.8Hz,0.5H),4.03-3.91(m,1.5H),3.80-3.68(m,1.5H),3.65-3.59(m,3H),3.51-3.41(m,5H),3.34-3.31(m,2H),3.04-2.98(m,3.5H),2.92-2.86(m,0.5H),2.18-1.91(m,4H),1.80-1.65(m,4H)。
外消旋245N(150mg，0.240mmol)通过手性制备型HPLC分离(柱：Chiralpak IA 5μm20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝60:40:0.2，以25mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到呈黄色固体的标题化合物245C(75mg，50％产率，100％立体纯)和245D(75mg，50％产率，99.7％立体纯)。
化合物245C：LC-MS(ESI)：RT＝2.124min，C26H31ClF2N4O6S2的计算质量632.1，m/z发现值632.9[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝60:40:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝5.708min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.17(s,0.5H),7.83(d,J＝2.8Hz,1H),7.52(d,J＝3.2Hz,0.5H),7.46(d,J＝3.2Hz,0.5H),7.40(s,0.5H),7.07-6.98(m,2H),6.17(s,0.5H),6.04(d,J＝2.4Hz,0.5H),4.02-3.92(m,1.5H),3.86-3.69(m,1.5H),3.61-3.59(m,3H),3.46-3.39(m,5H),3.34-3.30(m,2H),2.99-2.98(m,3.5H),2.90-2.89(m,0.5H),2.17-1.96(m,4H),1.90-1.63(m,4H)。
化合物245D：LC-MS(ESI)：RT＝2.103min，C26H31ClF2N4O6S2的计算质量632.1，m/z发现值632.9[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝60:40:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝6.282min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.17(s,0.5H),7.83(d,J＝2.8Hz,1H),7.52(d,J＝2.8Hz,0.5H),7.46(d,J＝3.2Hz,0.5H),7.40(s,0.5H),7.07-6.98(m,2H),6.17(s,0.5H),6.04(d,J＝2.4Hz,0.5H),4.02-3.94(m,1.5H),3.85-3.70(m,1.5H),3.61-3.59(m,3H),3.48-3.38(m,5H),3.34-3.31(m,2H),2.98-2.96(m,3.5H),2.87-2.86(m,0.5H),2.16-1.92(m,4H),1.89-1.63(m,4H)。
化合物248：甲基6-(1-((1-(2-(叔丁氧基)乙基)氮杂环丁烷-3-基)磺酰基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
Figure BDA0002341655160004781
向甲基6-(1-(氮杂环丁烷-3-基磺酰基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯化合物247(150mg，粗品，0.250mmol(根据246定量的))、碳酸钾(100mg，0.780mmol)和碘化钠(30mg，0.200mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(9mL)中的溶液中添加2-(叔丁氧基)乙基4-甲基苯磺酸酯(100mg，0.390mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(1mL)中的溶液。在室温搅拌3天后，将混合物在水(30mL)中稀释，用乙酸乙酯(10mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤三次，经Na2SO4(s)干燥，过滤并减压浓缩，得到残余物，将其通过制备型TLC(石油醚:乙酸乙酯＝1:1)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物化合物248(10mg，6％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝9.582min，C29H36ClF2N5O5S2的计算质量671.2，m/z发现值672.3[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.19(s,0.5H),7.83(dd,J＝3.2,1.2Hz,1H),7.53(d,J＝2.8Hz,0.5H),7.46(d,J＝3.2Hz,0.5H),7.42(br s,0.5H),7.10-6.99(m,2H),6.18(s,0.4H),6.06(d,J＝2.4Hz,0.6H),4.20-4.13(m,0.3H),4.04-3.87(m,3.7H),3.78-3.69(m,2H),3.60-3.58(m,3H),3.56-3.52(m,2H),3.38(t,J＝5.2Hz,2H),2.96-2.83(m,2H),2.68(q,J＝5.6Hz,2H),2.24-1.67(m,4H),1.17(s,9H)。
化合物251：(trans)-甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(4-(1-甲基氮杂环丁烷-3-磺酰胺基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
Figure BDA0002341655160004791
在室温下在氮气气氛下向(trans)-甲基6-(4-(氮杂环丁烷-3-磺酰胺基)环己基)-4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯250(210mg，0.340mmol)和甲醛(1.5mL)在甲醇(10mL)中的溶液中添加乙酸(5滴)。在室温下搅拌1小时后，向混合物添加氰基硼氢化钠(90mg，1.36mmol)，并在室温下搅拌3小时。然后，将混合物用水(10mL)淬灭，减压浓缩以除去甲醇，并用二氯甲烷(10mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥，过滤并减压浓缩，得到残余物，其通过C18柱(乙腈:水＝5％至100％)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物(130mg，60％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝1.677min，C25H28ClF2N5O4S2的计算质量599.1，m/z发现值599.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.14(s,0.5H),7.84-7.82(m,1H),7.52(d,J＝3.2Hz,0.5H),7.46(d,J＝3.2Hz,0.5H),7.39(s,0.5H),7.07-6.98(m,2H),6.17(s,0.5H),6.04(d,J＝2.4Hz,0.5H),4.09(s,1H),4.01-3.92(m,1.5H),3.77-3.69(m,0.5H),3.68-3.63(m,2H),3.60(s,1.5H),3.58(s,1.5H),3.49-3.43(m,2H),3.39-3.36(m,1H),2.38(d,J＝1.6Hz,3H),2.25-1.90(m,4.3H),1.85-1.66(m,1.7H),1.53-1.36(m,2H)。
外消旋251(130mg，0.220mmol)通过手性制备型HPLC分离(分离条件：柱：Chiralpak IE 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝50:50:0.3，以10mL/min；温度：30℃；波长：230nm)，得到呈黄色固体的标题化合物251A(30mg，23％产率，100％立体纯)和呈黄色固体的251B(30mg，31％产率，99.6％立体纯)。
化合物251A：LC-MS(ESI)：RT＝8.952min，C25H28ClF2N5O4S2的计算质量599.1，m/z发现值600.2[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IE 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝50:50:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝10.756min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.14(s,0.5H),7.83-7.82(m,1H),7.52(d,J＝3.2Hz,0.5H),7.46(d,J＝3.2Hz,0.5H),7.39(s,0.5H),7.07-6.98(m,2H),6.17(s,0.5H),6.04(d,J＝2.4Hz,0.5H),4.15-4.08(m,1H),4.02-3.92(m,1.5H),3.77-3.71(m,0.5H),3.66(q,J＝7.6Hz,2H),3.60(s,1.5H),3.58(s,1.5H),3.48-3.43(m,2H),3.42-3.34(m,1H),2.38(d,J＝2.4Hz,3H),2.25-1.90(m,4.4H),1.84-1.66(m,1.6H),1.59-1.34(m,2H)。
化合物251B：LC-MS(ESI)：RT＝3.687min，C25H28ClF2N5O4S2的计算质量599.1，m/z发现值600.2[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IE 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝50:50:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝14.460min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.14(s,0.5H),7.83(t,J＝2.4Hz,1H),7.52(d,J＝3.2Hz,0.5H),7.46(d,J＝3.2Hz,0.5H),7.39(s,0.5H),7.09-6.98(m,2H),6.17(s,0.5H),6.04(d,J＝2.4Hz,0.5H),4.11-4.05(m,1H),4.01-3.91(m,1.6H),3.78-3.71(m,0.4H),3.65(q,J＝8.0Hz,2H),3.60(s,1.5H),3.58(s,1.5H),3.49-3.43(m,2H),3.40-3.34(m,1H),2.38(d,J＝1.2Hz,3H),2.25-1.94(m,4H),1.91-1.78(m,0.8H),1.73-1.62(m,1.2H),1.56-1.33(m,2H)。
化合物253B：(trans)-甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(4-(3-羟基丙基磺酰胺基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
Figure BDA0002341655160004801
在氮气气氛下向(trans)-甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(4-(3-甲氧基-3-氧代丙基磺酰胺基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯252Y(100mg，0.160mmol)在四氢呋喃(8mL)中的溶液中添加硼氢化锂(15mg，0.640mmol)。在室温下搅拌过夜后，将反应混合物用水(10mL)稀释，并用乙酸乙酯(10mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到粗产物，将其通过C18柱(乙腈:水＝35％至80％)纯化，得到呈淡黄色固体的标题化合物(50mg，53％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝3.941min，C24H27ClF2N4O5S2的计算质量588.1，m/z发现值588.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.15(s,0.5H),7.83-7.82(m,1H),7.52(d,J＝3.2Hz,0.5H),7.45(d,J＝3.2Hz,0.5H),7.40(s,0.5H),7.07-6.98(m,2H),6.17(s,0.5H),6.04(d,J＝2.4Hz,0.5H),4.31-4.29(m,0.5H),4.24-4.22(m,0.5H),4.01-3.94(m,0.5H),3.84-3.82(m,2H),3.76-3.69(m,0.5H),3.60-3.59(m,3H),3.45-3.37(m,1H),3.24-3.20(m,2H),2.31-2.17(m,2H),2.14-1.83(m,4H),1.82-1.65(m,2H),1.55-1.39(m,2H)。
化合物268：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(1-(N-(2-甲氧基乙基)-氨磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
Figure BDA0002341655160004811
化合物267：甲基6-(1-(N-(叔丁氧基羰基)-N-(2-甲氧基乙基)-氨磺酰基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
在0℃向甲基6-(1-(N-(叔丁氧基羰基)氨磺酰基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯化合物266(307mg，0.500mmol)、2-甲氧基乙醇(49mg，0.65mmol)和三苯基膦(460mg，1.75mmol)在四氢呋喃(10mL)中的溶液中添加在四氢呋喃中的1.9M二异丙基偶氮二甲酸酯(0.9mL，1.75mmol)。在室温下搅拌过夜后，将反应混合物减压浓缩，得到残余物，将其通过C18柱(乙腈:水＝60％至80％)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物(170mg，50％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝2.776min，C28H35ClFN5O7S2的计算质量671.2，m/z发现值672.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.55(d,J＝3.6Hz,0.8H),9.15(s,0.2H),8.01-7.93(m,2H),7.44-7.31(m,2H),7.23-7.19(m,1H),6.02(s,0.2H),5.92(d,J＝3.6Hz,0.8H),3.96-3.78(m,4H),3.74-3.67(m,1H),3.53(s,3H),3.49(t,J＝6.0Hz,2H),3.27(s,3H),2.98-2.87(m,2H),2.03-1.76(m,3H),1.64-1.61(m,1H),1.49(s,9H)。
化合物268：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(1-(N-(2-甲氧基乙基)-氨磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
在0℃向甲基6-(1-(N-(叔丁氧基羰基)-N-(2-甲氧基乙基)氨磺酰基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯化合物267(160mg，0.238mmol)在二氯甲烷(10mL)中的溶液中添加三氟乙酸(10mL)。在室温下搅拌过夜后，将反应混合物减压浓缩，用饱和碳酸钠水溶液碱化至pH 7-8，并用乙酸乙酯(30mL)萃取两次。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤两次，经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到粗产物，将其通过C18柱(乙腈:水＝65％至85％)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物(120mg，88％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝3.148min，C23H27ClFN5O5S2的计算质量571.1，m/z发现值571.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.53(d,J＝2.4Hz,0.8H),9.03(s,0.2H),8.01-7.99(m,1.8H),7.94-7.93(m,0.2H),7.43(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),7.38-7.29(m,2H),7.21-7.19(m,1H),6.02(s,0.2H),5.92(d,J＝3.6Hz,0.8H),3.70-3.60(m,3H),3.53(s,3H),3.41(t,J＝5.6Hz,2H),3.28(s,3H),3.09(q,J＝6.0Hz,2H),2.73-2.65(m,2H),2.04-1.96(m,1H),1.88-1.76(m,2H),1.63-1.60(m,1H)。
外消旋268(100mg，0.175mmol)通过手性制备型HPLC分离(柱：Chiralpak IA 5μm20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝80:20:0.3，以10mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到呈黄色固体的标题化合物268A(17.5mg，17.5％产率，100％立体纯)和268B(15.3mg，15.3％产率，96.8％立体纯)。
化合物268A：LC-MS(ESI)：RT＝3.652min，C23H27ClFN5O5S2的计算质量571.1，m/z发现值571.9[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝80:20:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝11.598min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.55(s,0.8H),9.04(s,0.2H),8.00-7.95(m,2H),7.44-7.42(m,1H),7.37-7.31(m,2H),7.23-7.18(m,1H),6.01-5.92(m,1H),3.68-3.65(m,3H),3.53(s,3H),3.42-3.40(m,2H),3.28(s,3H),3.12-3.09(m,2H),2.71-2.68(m,2H),2.03-2.00(m,1H),1.89-1.76(m,2H),1.63-1.60(m,1H)。
化合物268B：LC-MS(ESI)：RT＝3.652min，C23H27ClFN5O5S2的计算质量571.1，m/z发现值571.9[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝80:20:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝13.014min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.54(s,0.8H),9.03(s,0.2H),8.00-7.94(m,2H),7.44-7.42(m,1H),7.34-7.31(m,2H),7.23-7.19(m,1H),6.01-5.92(m,1H),3.68-3.65(m,3H),3.53(s,3H),3.42-3.40(m,2H),3.28(s,3H),3.09(q,J＝6.0Hz,2H),2.71-2.68(m,2H),2.02-1.99(m,1H),1.89-1.76(m,2H),1.63-1.61(m,1H)。
化合物284：甲基4-(2-氯-3-氟苯基)-6-(-5-氧代吡咯烷-3-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
Figure BDA0002341655160004831
将化合物283N(530mg，0.94mmol)在三氟乙酸(22mL)中的溶液在50℃在氮气气氛下搅拌过夜。将混合物浓缩，得到残余物，将其用二氯甲烷(10mL)稀释，并用饱和碳酸氢钠水溶液(5mL)洗涤。将有机层经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液浓缩，得到残余物，将其用在甲醇中的4.4M氨(20mL)稀释，并在30℃在氮气气氛下搅拌过夜。然后将其浓缩，得到残余物，将其通过C18柱(乙腈:水＝5％至100％)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物(210mg，41％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝2.135min，C19H16ClFN4O3S的计算质量434.1，m/z发现值435.1[M+H]+。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.83(d,J＝2.8Hz,1H),7.55-7.52(m,2H),7.27-7.20(m,1H),7.12-7.07(m,2H),6.26-6.12(m,1H),5.8-5.76(m,1H),4.97-4.84(m,1H),3.81(t,J＝8.4Hz,0.3H),3.73-3.62(m,0.7H),3.61(s,3H),3.53-3.49(m,1H),3.07-3.01(m,0.7H),2.90-2.84(m,0.3H),2.65-2.59(m,0.8H),2.50-2.44(m,0.2H)。
化合物284N的外消旋混合物(210mg，0.48mmol)通过手性制备型HPLC分离(第一分离条件：柱：Chiralpak IA 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝80:20:0.3，以13mL/min；温度：30℃；波长：230nm；第二分离条件：柱：Chiralpak IB 5μm 20*250mm；流动相：Hex:IPA:DEA＝80:20:0.3，以16mL/min；温度：30℃；波长：214nm；第三分离条件：柱：Chiralpak AD-H5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH＝60:40，以13mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到呈黄色固体的标题化合物284C(22.6mg，31％产率，100％立体纯)和284D(17.9mg，22％产率，94.4％立体纯)。
化合物284C：LC-MS(ESI)：RT＝3.562min，C19H16ClFN4O3S的计算质量434.1，m/z发现值435.1[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝80:20:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：254nm，RT＝12.940min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.35(s,0.1H),7.84-7.80(m,0.9H),7.54-7.52(m,1.9H),7.46(s,0.1H),7.27-7.22(m,1H),7.13-7.09(m,2H),6.26(s,0.1H),6.13(d,J＝2.0Hz,0.9H),5.95(s,0.1H),5.65(s,0.9H),5.18(s,0.1H),4.96-4.89(m,0.9H),3.83-3.75(m,0.2H),3.68-3.63(m,3.8H),3.53-3.49(m,1H),3.07-3.01(m,0.9H),2.90-2.83(m,0.1H),2.65-2.59(m,1H)。
化合物284D：LC-MS(ESI)：RT＝3.567min，C19H16ClFN4O3S的计算质量434.1，m/z发现值435.1[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝80:20:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：254nm，RT＝15.428min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.35(s,0.1H),7.84-7.80(m,0.9H),7.52(d,J＝3.6Hz,1.9H),7.46(d,J＝2.8Hz,0.1H),7.27-7.20(m,1H),7.11(t,J＝7.2Hz,2H),6.26(s,0.1H),6.13(d,J＝2.4Hz,0.9H),5.85(s,0.1H),5.58(s,0.9H),5.18(s,0.1H),4.96-4.89(m,0.9H),3.83-3.78(m,0.2H),3.68-3.61(m,3.8H),3.51(t,J＝7.2Hz,1H),3.07-3.01(m,1H),2.65-2.59(m,1H)。
化合物287：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-((trans)-4-(甲基亚磺酰胺基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
Figure BDA0002341655160004841
化合物286：甲基6-((trans)-4-(N'-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-甲基亚磺酰胺基)环己基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
在0℃向在氮气气氛下的三苯基膦二氯化物(2.0g，6.0mmol)在干氯仿(10mL)中的搅拌溶液中添加三乙胺(827mg，8.20mmol)。在室温下搅拌10分钟后，将反应混合物冷却至0℃并且添加N-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-甲烷磺酰胺(1.15g，5.50mmol)在干氯仿(3mL)中的溶液。将反应混合物在0℃下搅拌20分钟，这之后添加甲基6-((trans)-4-氨基环己基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯化合物125(300mg，0.53mmol)在氯仿(2mL)中的溶液。在0℃下搅拌30分钟后，将反应混合物减压浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝5:1)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物(55mg，16％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.13(s,0.4H),7.83-7.82(m,1H),7.51(d,J＝2.8Hz,0.5H),7.45(d,J＝2.8Hz,0.5H),7.40(br s,0.6H),7.29-7.28(m,1H),7.15-7.11(m,1H),6.96-6.88(m,1H),6.18(s,0.4H),6.04(d,J＝2.8Hz,0.6H),3.98-3.92(m,0.5H),3.84-3.81(m,1H),3.75-3.70(m,0.5H),3.60(s,1.6H),3.59(s,1.4H),3.41-3.31(m,1H),3.01(s,1.6H),3.00(s,1.4H),2.32-2.19(m,1.5H),2.15-2.11(m,1H),2.09-1.97(m,1.5H),1.91-1.84(m,0.7H),1.78-1.62(m,1.3H),1.55-1.35(m,2H),0.93(s,5H),0.92(s,4H),0.14-0.12(m,6H)。
化合物287：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-((trans)-4-(甲基亚磺酰胺基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
在室温向甲基6-((trans)-4-(N'-(叔丁基二甲基甲硅烷基)甲基亚磺酰胺基)环己基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯化合物286(50mg，0.080mmol)在甲醇(2mL)中的溶液中添加2M盐酸盐水溶液(1mL)。在室温下搅拌1小时后，将反应混合物减压浓缩，得到残余物，将其溶于水(10mL)中。将混合物用28％氨溶液(1mL)调节至pH＝9-10，并减压浓缩，得到残留物，将其通过制备型HPLC纯化(柱：Xbrige C18 HILIC(5μm 10*190mm)流动相A：水，流动相B：乙腈，UV：214nm，流速：50mL/min，梯度：20％-95％(％B))，得到呈黄色固体的标题化合物287(25.0mg，74％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝3.364min，C22H25ClFN5O3S2的计算质量525.1，m/z发现值526.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.14(s,0.4H),7.83-7.82(m,1H),7.52(d,J＝3.2Hz,0.6H),7.46(d,J＝3.2Hz,0.4H),7.43(br s,0.6H),7.30-7.25(m,1H),7.15-7.12(m,1H),6.95-6.88(m,1H),6.18(s,0.4H),6.04(d,J＝2.8Hz,0.6H),4.00-3.94(m,0.4H),3.76-3.71(m,0.6H),3.60(s,1.6H),3.59(s,1.4H),3.43-3.38(m,1H),3.10(s,1.6H),3.09(s,1.4H),2.23-2.09(m,2H),2.05-1.80(m,2H),1.74-1.55(m,2H),1.48-1.41(m,2H)。
化合物287的外消旋混合物(220mg，0.344mmol)通过手性制备型HPLC分离(柱：Chiralpak IC 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH：DEA＝60:40:0.3，以12mL/min，温度：30℃；波长：230nm)，得到组1(70mg)和组2(30mg)。
组1(70mg，0.13mmol)通过手性制备型HPLC分离(柱：Chiralpak AD-H 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝70:30:0.3，以15mL/min，温度：30℃；波长：214nm)，得到呈黄色固体的标题化合物287A(20.4mg，29％产率，100％ee)和287B(19.2mg，27％产率，100％ee)。组2(30mg，0.060mmol)通过手性制备型HPLC分离(柱：Chiralpak IC 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝60:40:0.3，以10mL/min，温度：30℃；波长：230nm)，得到呈黄色固体的标题化合物287C(11.0mg，37％产率，100％ee)和287D(9.8mg，33％产率，97.2％ee)。
化合物287A：LC-MS(ESI)：RT＝2.522min，C22H25ClFN5O3S2的计算质量525.1，m/z发现值525.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝60:40:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝10.044min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.13(s,0.4H),7.83-7.82(m,1H),7.51(d,J＝2.8Hz,0.6H),7.45(d,J＝3.2Hz,0.4H),7.41(d,J＝1.6Hz,0.6H),7.29-7.27(m,0.7H),7.26-7.25(m,0.3H),7.15-7.11(m,1H),6.96-6.88(m,1H),6.18(s,0.4H),6.04(d,J＝2.8Hz,0.6H),4.01-3.94(m,0.4H),3.76-3.71(m,0.6H),3.60(s,1.6H),3.59(s,1.4H),3.43-3.38(m,1H),3.10(s,1.6H),3.09(s,1.4H),2.23-2.16(m,2H),2.09-1.97(m,2H),1.96-1.69(m,2H),1.62-1.35(m,2H)。
化合物287B：LC-MS(ESI)：RT＝2.876min，C22H25ClFN5O3S2的计算质量525.1，m/z发现值525.9[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝60:40:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝10.327min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.13(s,0.4H),7.83-7.82(m,1H),7.51(d,J＝2.8Hz,0.6H),7.45(d,J＝3.6Hz,0.4H),7.41(br s,0.6H),7.29-7.28(m,0.6H),7.26-7.25(m,0.4H),7.15-7.11(m,1H),6.95-6.88(m,1H),6.18(s,0.4H),6.04(d,J＝2.4Hz,0.6H),4.01-3.95(m,0.4H),3.76-3.72(m,0.6H),3.60(s,1.6H),3.59(s,1.4H),3.43-3.38(m,1H),3.10(s,1.6H),3.09(s,1.4H),2.26-2.09(m,2.3H),2.05-1.96(m,1.7H),1.93-1.86(m,0.9H),1.78-1.66(m,1.1H),1.55-1.37(m,2H)。
化合物287C：LC-MS(ESI)：RT＝2.556min，C22H25ClFN5O3S2的计算质量525.1，m/z发现值526.1[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝60:40:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝13.442min)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.92(d,J＝3.6Hz,0.5H),7.88(d,J＝3.2Hz,0.5H),7.75-7.73(m,1H),7.39-7.35(m,1H),7.24-7.20(m,1H),7.07-7.00(m,1H),6.13(s,0.5H),6.05(s,0.5H),3.96-3.89(m,0.5H),3.72-3.66(m,0.5H),3.58(s,3H),3.40-3.31(m,1H),3.04(s,3H),2.19-2.13(m,2H),2.03-1.99(m,1H),1.92-1.87(m,1.5H),1.80-1.77(m,0.8H),1.73-1.67(m,0.7H),1.51-1.42(m,2H)。
化合物287D：LC-MS(ESI)：RT＝2.558min，C22H25ClFN5O3S2的计算质量525.1，m/z发现值526.2[M+H]+。手性HPLC(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝60:40:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝15.164min)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.92(d,J＝2.8Hz,0.5H),7.88(d,J＝3.2Hz,0.5H),7.75-7.73(m,1H),7.39-7.35(m,1H),7.24-7.20(m,1H),7.07-7.00(m,1H),6.13(s,0.5H),6.05(s,0.5H),3.96-3.90(m,0.5H),3.71-3.65(m,0.5H),3.59(s,3H),3.40-3.35(m,0.7H),3.30-3.27(m,0.3H),3.04(s,3H),2.21-2.11(m,2H),2.08-1.96(m,1H),1.93-1.86(m,1.5H),1.83-1.77(m,0.8H),1.72-1.67(m,0.7H),1.53-1.41(m,2H)。
化合物291：(trans)-甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(4-(N-(2-羟基乙基)氨磺酰基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
Figure BDA0002341655160004871
在0℃向(trans)-甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(4-(N-(2-乙氧基-2-氧代乙基)氨磺酰基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯化合物290S(308mg，0.500mmol)在四氢呋喃(20mL)中的溶液中添加硼氢化锂(33mg，1.50mmol)。在氮气气氛下于25℃搅拌6小时后，将混合物用乙酸乙酯(200mL)和盐水(100mL)稀释。将有机层分离，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液浓缩并通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝4:1至2:1)纯化，得到呈浅黄色固体的标题化合物(140mg，78％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝3.357min，C23H25ClF2N4O5S2的计算质量574.1，m/z发现值575.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.57(d,J＝3.2Hz,0.6H),8.98(s,0.4H),8.00-7.99(m,1.6H),7.95-7.94(m,0.4H),7.49-7.41(m,1H),7.21-7.14(m,1H),7.06(t,J＝6.0Hz,0.4H),6.98(t,J＝6.0Hz,0.6H),6.01(s,0.4H),5.92(d,J＝3.6Hz,0.6H),4.77-4.71(m,1H),3.89-3.81(m,0.4H),3.61-3.56(m,0.6H),3.53(s,1.8H),3.52(s,1.2H),3.48-3.42(m,2H),3.19-3.13(m,0.4H),3.06-3.00(m,2.6H),2.21-2.14(m,2H),1.99-1.94(m,1H),1.87-1.77(m,2H),1.73-1.69(m,1H),1.55-1.45(m,2H)。
(trans)-甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(4-(N-(2-羟基乙基)氨磺酰基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯291的外消旋混合物(140mg，0.243mmol)通过手性制备型SFC分离(分离条件：柱：Chiralpak IA 5μm 20*250mm；流动相：CO2:MeOH＝70:30，以45g/min；柱温：40.2℃；波长：214nm，背压：100巴)，得到呈黄色固体的标题化合物291C(43.2mg，20％产率，98.3％立体纯)和291D(38.5mg，18％产率，94.4％立体纯)。
化合物291C：LC-MS(ESI)：RT＝4.541min，C23H25ClF2N4O5S2的计算质量574.1，m/z发现值575.0[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：CO2:MeOH＝70:30，以2.999g/min；柱温：40.2℃；波长：214nm，背压：100巴，RT＝3.96min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.57(br s,0.6H),8.98(br s,0.4H),8.00-7.99(m,1.6H),7.95(d,J＝3.2Hz,0.4H),7.49-7.41(m,1H),7.21-7.15(m,1H),7.06(t,J＝6.0Hz,0.4H),6.98(t,J＝6.0Hz,0.6H),6.01(s,0.4H),5.92(s,0.6H),4.77-4.71(m,1H),3.89-3.82(m,0.4H),3.60-3.56(m,0.6H),3.53(s,1.8H),3.52(s,1.2H),3.48-3.42(m,2H),3.19-3.13(m,0.4H),3.06-2.99(m,2.6H),2.22-2.14(m,2H),1.99-1.94(m,1H),1.87-1.81(m,2H),1.73-1.70(m,1H),1.53-1.45(m,2H)。
化合物291D：LC-MS(ESI)：RT＝4.535min，C23H25ClF2N4O5S2的计算质量574.1，m/z发现值575.0[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：CO2:MeOH＝70:30，以2.999g/min；柱温：40.1℃；波长：214nm，背压：100巴，RT＝4.82min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.57(d,J＝4.0Hz,0.6H),8.98(br s,0.4H),8.00-7.99(m,1.6H),7.94(d,J＝3.2Hz,0.4H),7.49-7.41(m,1H),7.21-7.14(m,1H),7.06(d,J＝6.0Hz,0.4H),6.98(d,J＝6.0Hz,0.6H),6.01(s,0.4H),5.92(d,J＝3.2Hz,0.6H),4.77-4.71(m,1H),3.89-3.82(m,0.4H),3.61-3.58(m,0.6H),3.53(s,1.8H),3.52(s,1.2H),3.48-3.43(m,2H),3.19-3.13(m,0.4H),3.06-2.99(m,2.6H),2.21-2.14(m,2H),1.99-1.94(m,1H),1.88-1.78(m,2H),1.73-1.70(m,1H),1.55-1.43(m,2H)。
化合物295：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(3-羟基环丁基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
Figure BDA0002341655160004891
在0℃向甲基6-(3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)环丁基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯化合物294(100mg，0.15mmol)在四氢呋喃(5mL)中的溶液中添加在四氢呋喃中的1M四丁基氟化铵(0.17mL，0.17mmol)。在室温下搅拌16小时后，将混合物用乙酸乙酯(50mL)稀释，用水(50mL)和盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到残余物，将其通过C18柱(乙腈:水(+0.1％碳酸氢铵)＝35％至65％)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物(33.2mg，52％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝3.828min，C19H17ClFN3O3S的计算质量421.1，m/z发现值422.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.50-9.46(m,0.6H),8.99(m,0.4H),8.02-8.00(m,1.6H),7.96-7.95(m,0.4H),7.43-7.39(m,1H),7.33-7.29(m,1H),7.24-7.17(m,1H),6.00(s,0.4H),5.90-5.89(m,0.5H),5.42-5.40(m,0.4H),5.07-5.05(m,0.5H),4.98-4.97(m,0.1H),4.56-4.51(m,0.1H),4.26-4.22(m,0.1H),4.12-3.98(m,1.2H),3.78-3.69(m,0.6H),3.51(s,3H),2.67-2.61(m,0.5H),2.42-2.36(m,0.7H),2.29-2.22(m,2H),2.08-1.93(m,0.8H)。
化合物303：甲基6-(1-氨甲酰基哌啶-4-基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
在室温下在氮气气氛下向甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯化合物99(100mg，0.230mmol)在二氯甲烷(2mL)中的溶液中添加异氰酸基三甲基硅烷(200mg，1.80mmol)。在室温搅拌过夜后，将混合物减压浓缩，得到残留物，将其通过制备型HPLC纯化(柱：Gilson X-bridge C18(5μm 19*150mm)，流动相A：水(+0.1％三氟乙酸)，流动相B：乙腈，UV：214nm，流速：20mL/min，梯度：40％-60％(％B))，得到呈黄色固体的标题化合物(30mg，27％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝4.233min，C21H21ClFN5O3S的计算质量477.1，m/z发现值478.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.47(d,J＝3.2Hz,0.7H),9.10(s,0.3H),8.00-7.98(m,1.7H),7.92(d,J＝3.2Hz,0.3H),7.44-7.31(m,2H),7.24-7.17(m,1H),6.01-5.91(m,3H),4.16-3.98(m,2.3H),3.79-3.72(m,0.7H),3.53(s,2H),3.52(s,1H),2.76-2.64(m,2H),1.96-1.59(m,3.3H),1.49-1.46(m,0.7H)。
化合物305：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(1-((2,3-di羟基丙基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
Figure BDA0002341655160004901
在0℃向甲基6-(1-((1,4-二氧杂螺[4.5]癸-2-基甲基)磺酰基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯化合物304A(45mg，0.070mmol)在二氯甲烷(2mL)中的溶液中滴加三氟乙酸(1mL)。在室温下搅拌1小时后，将混合物用饱和碳酸氢钠水溶液(10mL)洗涤三次，然后用水(10mL)洗涤。将分离的有机层减压浓缩，得到残余物，将其通过C18柱(乙腈:水(0.1％碳酸氢铵)＝5％至80％)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物305A(10mg，25％产率，100％立体纯)。LC-MS(ESI)：RT＝3.984min，C23H26ClFN4O6S2的计算质量572.1，m/z发现值573.1[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:TFA＝70:30:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝12.191min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.56(s,0.8H),9.19(s,0.2H),8.04-7.98(m,1.8H),7.93(d,J＝3.2Hz,0.2H),7.46-7.40(m,1H),7.38-7.31(m,1H),7.25-7.18(m,1H),6.02(s,0.2H),5.92(s,0.8H),5.16-5.12(m,1H),4.88-4.82(m,1H),3.98-3.86(m,1.2H),3.77-3.64(m,2.8H),3.55(s,2.1H),3.53(s,0.9H),3.43-3.38(m,1H),3.32-3.20(m,2H),3.06-2.82(m,3H),2.16-2.07(m,0.2H),2.05-1.92(m,1H),1.90-1.73(m,2H),1.66-1.59(m,0.8H)。
使用类似条件将化合物304B转化为化合物305B。
化合物305B：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(1-((2,3-二氢丙基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯，LC-MS(ESI)：RT＝3.640min，C23H26ClFN4O6S2的计算质量572.1，m/z发现值573.1[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:TFA＝70:30:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝15.002min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.53(s,0.8H),9.16(s,0.2H),8.04-7.96(m,1.8H),7.95-7.91(m,0.2H),7.46-7.40(m,1H),7.38-7.30(m,1H),7.25-7.16(m,1H),6.02(s,0.2H),5.92(d,J＝3.2Hz,0.8H),5.12(br s,1H),4.83(br s,1H),3.99-3.86(m,1.2H),3.79-3.61(m,2.8H),3.53(s,3H),3.44-3.39(m,1H),3.29-3.21(m,2H),3.07-2.93(m,2H),2.88-2.77(m,1H),2.17-2.06(m,0.2H),2.04-1.93(m,1H),1.90-1.73(m,2H),1.67-1.58(m,0.8H)。
化合物315：(trans)-甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(4-(N-(2-羟基乙基)甲基磺酰胺基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
Figure BDA0002341655160004911
在0℃在氮气气氛下向(trans)-甲基6-(4-(N-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)甲基磺酰胺基)环己基)-4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯化合物314(200mg，0.280mmol)在干四氢呋喃(10mL)中的溶液中添加在四氢呋喃中的1M四丁基氟化铵(1mL，1.0mmol)。在室温下搅拌1小时后，将混合物用水(20mL)淬灭，并用乙酸乙酯(20mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到残余物，将其通过C18柱(乙腈:水＝45％至60％)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物(150mg，90％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝3.550min，C24H27ClF2N4O5S2的计算质量588.1，m/z发现值588.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.16(s,0.5H),7.83(d,J＝3.2Hz,1H),7.53(d,J＝3.2Hz,0.5H),7.46(d,J＝2.8Hz,0.5H),7.40(s,0.5H),7.07-6.99(m,2H),6.17(s,0.5H),6.04(d,J＝2.8Hz,0.5H),3.99-3.94(m,0.5H),3.89-3.85(m,1H),3.83-3.78(m,2H),3.75-3.69(m,0.5H),3.60(s,1.5H),3.59(s,1.5H),3.41-3.37(m,2H),2.97(s,3H),2.35(t,J＝5.6Hz,0.5H),2.26-2.24(m,0.5H),2.16-1.84(m,5H),1.78-1.61(m,3H)。
外消旋化合物315(150mg，0.230mmol)通过手性制备型HPLC分离(分离条件：柱：Chiralpak IA 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH＝70:30，以25mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到呈黄色固体的标题化合物315C(13.8mg，9％产率，100％立体纯)和315D(11.1mg，7％产率，99.0％立体纯)。
化合物315C：LC-MS(ESI)：RT＝3.302min，C24H27ClF2N4O5S2的计算质量588.1，m/z发现值589.2[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝70:30，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝6.533min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.17(s,0.5H),7.83(d,J＝2.8Hz,1H),7.53(d,J＝2.8Hz,0.5H),7.46(d,J＝2.8Hz,0.5H),7.40(s,0.5H),7.07-6.98(m,2H),6.17(s,0.5H),6.04(d,J＝2.4Hz,0.5H),4.00-3.94(m,0.5H),3.87-3.69(m,3.5H),3.60(s,1.5H),3.59(s,1.5H),3.40-3.37(m,2H),2.97(s,3H),2.37(d,J＝6.0Hz,0.5H),2.30-2.27(m,0.5H),2.15-1.87(m,5H),1.80-1.64(m,3H)。
化合物315D：LC-MS(ESI)：RT＝4.127min，C24H27ClF2N4O5S2的计算质量588.1，m/z发现值589.2[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝70:30，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝8.328min)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.16(s,0.5H),7.83(d,J＝2.8Hz,1H),7.53(d,J＝3.2Hz,0.5H),7.46(d,J＝2.8Hz,0.5H),7.40(s,0.5H),7.06-6.98(m,2H),6.17(s,0.5H),6.04(d,J＝3.2Hz,0.5H),3.99-3.94(m,0.5H),3.88-3.70(m,3.5H),3.60(s,1.5H),3.59(s,1.5H),3.40-3.37(m,2H),2.97(s,3H),2.36(d,J＝6.0Hz,0.5H),2.29-2.25(m,0.5H),2.16-1.93(m,4.5H),1.80-1.64(m,3.5H)。
化合物325：甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-6-(1-((1-(3,3,3-三氟-2-羟基丙基)-1H-吡唑-4-基)磺酰基)哌啶-4-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
Figure BDA0002341655160004931
向甲基6-(1-((1H-吡唑-4-基)磺酰基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯化合物324(80mg，0.14mmol)和2-(三氟甲基)环氧乙烷(18mg，0.17mmol)在乙腈(2mL)中的溶液中添加碳酸铯(22mg，0.069mmol)。在室温下在氮气气氛下搅拌5小时后，将混合物通过添加水(20mL)淬灭，然后用乙酸乙酯(20mL)萃取两次。将合并的有机层用水(15mL)、盐水(15mL)洗涤，经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到残余物，将其通过制备型HPLC纯化(柱：gilson X-bridge C18(5μm 19*150mm)流动相A：水(+0.1％碳酸氢铵)，流动相B：乙腈，UV：214nm，流速：15mL/min，梯度：70％-80％(％B))，得到呈黄色固体的标题化合物(36mg，99.3％纯度，38％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝3.915min，C26H24ClF5N6O5S2的计算质量694.1，m/z发现值695.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.65(d,J＝3.2Hz,0.8H),9.25(s,0.2H),8.43(s,0.2H),8.41(s,0.8H),8.05-7.99(m,1.8H),7.94(d,J＝3.2Hz,0.2H),7.91(s,0.2H),7.90(s,0.8H),7.49-7.39(m,1H),7.23-7.12(m,1H),6.80(d,J＝6.4Hz,1H),6.01(s,0.2H),5.91(d,J＝3.2Hz,0.8H),4.57-4.45(m,2H),4.41-4.32(m,1H),3.80-3.64(m,2.2H),3.58-3.50(m,0.8H),3.48(s,2.4H),3.47(s,0.6H),2.21-2.16(m,2.2H),2.12-2.01(m,1H),1.98-1.85(m,1H),1.84-1.75(m,1H),1.69-1.61(m,0.8H)。
化合物335：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(1-((3-羟基环丁基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
Figure BDA0002341655160004941
在0℃向甲基6-(1-((3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)环丁基)-磺酰基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯334(260mg，0.320mmol)在四氢呋喃(5mL)中的溶液中添加在四氢呋喃中的1M四丁基氟化铵(1mL，1.0mmol)。在室温下搅拌2小时后，将混合物在乙酸乙酯(150mL)中稀释，用水(50mL)和盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到残余物，将其通过C18柱(乙腈:水(0.1％碳酸氢铵)＝5％至80％)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物(200mg，纯度90％，99％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝1.61min，C24H26ClFN4O5S2的计算质量568.1，m/z发现值569.3[M+H]+。
外消旋335(200mg，90％纯度，0.316mmol)通过手性制备型HPLC分离(柱：Chiralpak IC 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝60:40:0.2，以15mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到呈黄色固体的标题化合物335A(cis异构体)(55.0mg，31％产率，100％立体纯)和335B(50.0mg，28％产率，100％立体纯)。
化合物335A(cis异构体)：LC-MS(ESI)：RT＝4.005min，C24H26ClFN4O5S2的计算质量568.1，m/z发现值569.1[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝60:40:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝7.531min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.49(br s,0.8H),9.12(br s,0.2H),8.00-7.99(m,1.8H),7.93-7.92(m,0.2H),7.43-7.40(m,1H),7.38-7.31(m,1H),7.23-7.18(m,1H),6.05(s,0.2H),5.92(s,0.8H),5.37-5.34(m,1H),4.38-4.30(m,1H),3.96-3.94(m,0.2H),3.92-3.85(m,1H),3.78-3.68(m,2.8H),3.53(s,2.4H),3.52(s,0.6H),2.89-2.80(m,2H),2.60-2.54(m,2H),2.31-2.24(m,2H),2.07-2.04(m,0.2H),2.00-1.74(m,3H),1.61-1.57(m,0.8H)。
化合物335B(trans异构体)：LC-MS(ESI)：RT＝3.920min，C24H26ClFN4O5S2的计算质量568.1，m/z发现值569.1[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝60:40:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝10.464min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.53(d,J＝3.2Hz,0.8H),9.14(s,0.2H),8.02-7.99(m,1.8H),7.93-7.92(m,0.2H),7.44-7.41(m,1H),7.38-7.31(m,1H),7.23-7.17(m,1H),6.01(s,0.2H),5.92(d,J＝3.6Hz,0.8H),5.46-5.44(m,1H),4.07-3.98(m,1H),3.94-3.90(m,0.2H),3.75-3.65(m,2.8H),3.53(s,2.4H),3.52(s,0.6H),3.50-3.43(m,1H),2.86-2.76(m,2H),2.59-2.51(m,2H),2.18-2.14(m,2H),2.11-1.75(m,3.2H),1.62-1.59(m,0.8H)。
化合物348：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(3-(1-羟基乙基)双环[1.1.1]戊-1-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
Figure BDA0002341655160004951
化合物348_1：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(3-(甲氧基(甲基)氨甲酰基)双环[1.1.1]戊-1-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
在室温下向3-(6-(2-氯-4-氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)双环[1.1.1]戊烷-1-甲酸258(380mg，90％纯度，0.740mmol)、1-羟基苯并三唑(150mg，1.11mmol)和N-((乙基亚氨基)亚甲基)-N,N-二甲基丙烷-1,3-二胺盐酸盐(213mg，1.11mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中的溶液中添加乙基二异丙基胺(287mg，2.22mmol)和N,O-二甲基羟基胺盐酸盐(108mg，1.11mmol)。在室温下搅拌过夜后，将混合物用水(40mL)淬灭，并用乙酸乙酯(40mL)萃取三次。将合并的有机层用1M盐酸水溶液(30mL)、水(30mL)、盐水(30mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到呈黄色固体的标题化合物(340mg，根据1H NMR的纯度为90％，82％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝1.54min，C23H22ClFN4O4S的计算质量504.1，m/z发现值505.5[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.90(s,0.7H),7.82(d,J＝3.2Hz,1H),7.49-7.40(m,1.3H),7.30-7.28(m,1H),7.14-7.11(m,1H),6.97-6.89(m,1H),6.16(s,0.7H),6.04(s,0.3H),3.73(s,3H),3.61(s,3H),3.23(s,3H),2.61(s,6H)。
化合物348_2：甲基6-(3-乙酰基双环[1.1.1]戊-1-基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
在0℃向甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(3-(甲氧基(甲基)氨甲酰基)双环[1.1.1]戊-1-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯348_1(340mg，90％纯度，0.606mmol)在四氢呋喃(8mL)中的溶液中滴加在四氢呋喃中的2M甲基溴化镁(1.5mL，3.00mmol)。在0℃下搅拌3小时后，将混合物用水(10mL)淬灭，并用乙酸乙酯(10mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到残余物，将其通过C18柱(乙腈:水＝60％至90％)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物(185mg，根据1H NMR的纯度为90％，60％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝1.61min，C22H19ClFN3O3S的计算质量459.1，m/z发现值460.4[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.89(s,0.7H),7.83-7.81(m,1H),7.50(d,J＝3.2Hz,0.4H),7.45(d,J＝3.2Hz,0.6H),7.42(s,0.3H),7.31-7.28(m,1H),7.15-7.12(m,1H),6.98-6.90(m,1H),6.17(s,0.6H),6.03(d,J＝2.8Hz,0.4H),3.64(s,1.1H),3.61(s,1.9H),2.54(s,3.8H),2.48(s,2.2H),2.20(s,3H)。
外消旋348_2(180mg，90％纯度，0.352mmol)通过手性制备型HPLC分离(分离条件：柱：Chiralpak IG 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝85:15:0.3，以15mL/min；温度：30℃；波长：230nm)，得到呈黄色固体的标题化合物348_2A(78mg，根据1H NMR纯度为90％，43％产率，100％立体纯)和348_2B(76mg，根据1H NMR纯度为90％，42％产率，100％立体纯)。
化合物348_2A：LC-MS(ESI)：RT＝1.58min，C22H19ClFN3O3S的计算质量459.1，m/z发现值460.4[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IG 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝85:15:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝10.906min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.44(d,J＝3.2Hz,0.6H),8.34(s,0.4H),8.01-7.99(m,1.6H),7.96-7.95(m,0.4H),7.46-7.41(m,1H),7.35-7.31(m,1H),7.25-7.20(m,1H),5.98(s,0.4H),5.88(d,J＝2.8Hz,0.6H),3.56(s,1.8H),3.55(s,1.2H),2.45(s,2.5H),2.30(s,3.5H),2.15(s,1.2H),2.13(s,1.8H)。
化合物348_2B：LC-MS(ESI)：RT＝1.58min，C22H19ClFN3O3S的计算质量459.1，m/z发现值460.3[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IG 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝85:15:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝12.902min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.44(d,J＝3.2Hz,0.6H),8.34(s,0.4H),8.01-7.99(m,1.6H),7.96-7.95(m,0.4H),7.45-7.40(m,1H),7.35-7.31(m,1H),7.25-7.19(m,1H),5.98(s,0.4H),5.88(d,J＝3.6Hz,0.6H),3.56(s,1.8H),3.55(s,1.2H),2.45(s,2.5H),2.30(s,3.5H),2.15(s,1.3H),2.13(s,1.7H)。
化合物348B：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(3-(1-羟基乙基)双环[1.1.1]戊-1-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
在0℃向甲基6-(3-乙酰基双环[1.1.1]戊-1-基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯348_2B(70mg，90％纯度，0.14mmol)在甲醇(0.8mL)和四氢呋喃(1.6mL)中的溶液中添加硼氢化钠(11mg，0.27mmol)。将反应混合物在0℃下搅拌2小时。向混合物缓慢添加水(10mL)，浓缩，得到残余物，将其用乙酸乙酯(10mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到残余物，将其通过制备型HPLC纯化(柱：水X-bridge C18(5μm 19*150mm)，流动相A：水(+0.1％碳酸氢铵)，流动相B：乙腈，UV：214nm，流速：15mL/min，梯度：30％-95％(％B))，得到呈黄色固体的标题化合物(20mg，99.2％纯度，31％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝3.347min，C22H21ClFN3O3S的计算质量461.1，m/z发现值462.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.92(s,0.8H),7.82-7.80(m,1H),7.48(d,J＝3.2Hz,0.2H),7.44(d,J＝3.2Hz,0.8H),7.40(s,0.2H),7.33-7.28(m,1H),7.14-7.11(m,1H),6.97-6.89(m,1H),6.16(s,0.8H),6.01(d,J＝2.8Hz,0.2H),3.95-3.87(m,1H),3.63(s,0.5H),3.60(s,2.5H),2.24-2.09(m,6H),1.34(d,J＝3.2Hz,1H),1.19(d,J＝6.4Hz,3H)。
化合物356：乙基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(1-((2-羟基乙基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
Figure BDA0002341655160004981
在0℃在氮气气氛下向乙基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(1-((2-甲氧基-2-氧代乙基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯355(320mg，99％纯度，0.525mmol)在四氢呋喃(5mL)中的溶液中添加四氢硼酸锂(70mg，96％纯度，3.1mmol)。在室温下搅拌30分钟后，将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液(20mL)缓慢淬灭，并用乙酸乙酯(20mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥，过滤并减压浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(二氯甲烷:甲醇＝200:1至100:1)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物(250mg，纯度99.7％，80％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝3.809min，C23H25ClF2N4O5S2的计算质量574.1，m/z发现值574.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.62(br s,0.8H),9.16(br s,0.2H),8.06-7.97(m,1.8H),7.95-7.92(m,0.2H),7.49-7.43(m,1H),7.23-7.17(m,1H),6.03(s,0.2H),5.94(s,0.8H),5.34-5.31(m,0.1H),5.06-5.02(m,0.9H),3.98(q,J＝6.8Hz,2H),3.79-3.65(m,5H),3.24-3.19(m,2H),2.92-2.83(m,2H),2.16-2.08(m,0.2H),2.03-1.94(m,1H),1.87-1.78(m,2H),1.68-1.59(m,0.8H),1.09-1.03(m,3H)。
外消旋356(240mg，0.405mmol)通过手性制备型HPLC分离(柱：Chiralpak ID 5μm20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝70:30:0.3，以15mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到呈黄色固体的标题化合物356A(80mg，99.9％纯度，34％产率，100％立体纯)和356B(65mg，99.0％纯度，28％产率，98.1％立体纯)。
化合物356A：LC-MS(ESI)：RT＝3.846min，C23H25ClF2N4O5S2的计算质量574.1，m/z发现值574.9[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak ID 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝70:30:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝9.363min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.40(br s,1H),8.00-7.96(m,2H),7.48-7.42(m,1H),7.26-7.19(m,1H),5.96(s,1H),5.02(br s,1H),3.97(q,J＝7.2Hz,2H),3.79-3.67(m,5H),3.21(t,J＝6.4Hz,2H),2.92-2.84(m,2H),2.05-1.97(m,1H),1.88-1.79(m,2H),1.71-1.62(m,1H),1.07(t,J＝7.2Hz,3H)。
化合物356B：LC-MS(ESI)：RT＝3.847min，C23H25ClF2N4O5S2的计算质量574.1，m/z发现值574.9[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak ID 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝70:30:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝11.939min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.74(br s,1H),8.04-7.94(m,2H),7.49-7.42(m,1H),7.22-7.17(m,1H),5.96(s,1H),5.03(br s,1H),3.97(q,J＝6.8Hz,2H),3.77-3.67(m,5H),3.21(t,J＝6.0Hz,2H),2.92-2.84(m,2H),2.04-1.96(m,1H),1.87-1.79(m,2H),1.69-1.62(m,1H),1.07(t,J＝6.8Hz,3H)。
化合物357A：(trans)-甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(1-((3-(羟基甲基)环丁基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
Figure BDA0002341655160004991
在0℃向(trans)-甲基6-(1-((3-(叔丁氧基羰基)环丁基)磺酰基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯242A(210mg，0.322mmol)在四氢呋喃(15mL)中的溶液中添加硼氢化锂(21mg，0.966mmol)。在室温搅拌6小时后，将混合物在0℃下用水(40mL)淬灭，减压浓缩，并用乙酸乙酯(40mL)萃取两次。将合并的有机层经Na2SO4(s)干燥并浓缩，得到残余物，将其通过C18柱(乙腈:水＝50％至58％)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物(50mg，22％产率，99.9％立体纯)。LC-MS(ESI)：RT＝3.848min，C25H28ClFN4O5S2的计算质量582.1，m/z发现值582.9[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IG 5μm4.6*250mm；流动相：CO2:MeOH＝70:30，以2.999g/min；柱温：39.9℃；波长：230nm，背压：100巴，RT＝3.79min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.53(d,J＝3.6Hz,0.8H),9.12(s,0.2H),8.01-7.93(m,2H),7.45-7.41(m,1H),7.38-7.31(m,1H),7.23-7.18(m,1H),6.01(s,0.2H),5.92(d,J＝3.2Hz,0.8H),4.66(t,J＝4.8Hz,1H),4.03-3.95(m,1H),3.76-3.69(m,3H),3.53(s,2.4H),3.52(s,0.6H),3.47(s,2H),2.87-2.79(m,2H),2.40-2.33(m,3H),2.14-1.74(m,5.2H),1.61-1.58(m,0.8H)。
化合物357B：(cis)-甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(1-((3-(羟基甲基)环丁基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物357B类似于化合物357A从化合物242B制备，LC-MS(ESI)：RT＝3.635min，C25H28ClFN4O5S2的计算质量582.1，m/z发现值583.1[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IG 5μm4.6*250mm；流动相：CO2:MeOH＝70:30，以2.999g/min；柱温：39.9℃；波长：230nm，背压：100巴，RT＝3.79min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.01-7.93(m,2H),7.45-7.31(m,2H),7.24-7.18(m,1H),6.01(s,0.2H),5.92(s,0.8H),4.61(t,J＝5.6Hz,1H),3.95-3.86(m,1.2H),3.77-3.66(m,2.8H),3.53(s,2.4H),3.52(s,0.6H),3.40-3.35(m,2H),2.87-2.79(m,2H),2.42-2.25(m,3H),2.12-1.74(m,5H),1.62-1.57(m,1H)。
化合物358B：(trans)-甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(4-(N-(3-羟基-3-甲基丁基)氨磺酰基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
Figure BDA0002341655160005001
在-78℃向(trans)-甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(4-(N-(3-甲氧基-3-氧代丙基)氨磺酰基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯252Y(60mg，97.2μmol)在四氢呋喃(4mL)中的溶液中滴加在四氢呋喃中的3.0M甲基氯化镁(1.6mL，4.8mmol)。在室温下搅拌过夜后，将反应混合物用饱和氯化铵水溶液(20mL)淬灭，并用乙酸乙酯(20mL)萃取两次。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到残余物，将其通过制备型TLC纯化(二氯甲烷:甲醇＝20:1)，得到不纯的化合物，将其进一步通过制备型HPLC纯化(柱：X-bridge C18(5μm 19*150mm)，流动相A：水(+0.1％碳酸氢铵)，流动相B：乙腈，UV：214nm，流速：15mL/min，梯度：45％-70％(％B))，得到呈黄色固体的标题化合物(25mg，36％产率，99.0％立体纯)。LC-MS(ESI)：RT＝3.690min，C26H31ClF2N4O5S2的计算质量616.1，m/z发现值617.1[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IE 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝50:50:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝9.331min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.55(d,J＝2.8Hz,0.6H),8.98(br s,0.4H),8.07-7.98(m,1.6H),7.94(d,J＝2.8Hz,0.4H),7.48-7.41(m,1H),7.21-7.15(m,1H),6.92(t,J＝6.4Hz,0.4H),6.85(t,J＝5.6Hz,0.6H),6.01(s,0.4H),5.92(d,J＝3.2Hz,0.6H),4.34(s,0.4H),4.32(s,0.6H),3.90-3.82(m,0.4H),3.62-3.58(m,0.6H),3.53(s,1.8H),3.52(s,1.2H),3.18-3.12(m,0.5H),3.08-3.04(m,2H),2.99-2.95(m,0.5H),2.22-2.12(m,2H),2.01-1.82(m,3H),1.75-1.70(m,1H),1.61-1.56(m,2H),1.53-1.43(m,2H),1.10(s,6H)。
化合物360C：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(1-((1-((R)-2-羟基丙基)-1H-吡唑-4-基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
Figure BDA0002341655160005011
向甲基6-(1-((1H-吡唑-4-基)磺酰基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯466(100mg，0.177mmol)和(R)-2-甲基环氧乙烷(103mg，1.77mmol)在乙腈(2mL)中的溶液中添加碳酸铯(29mg，0.089mmol)。在室温下在氮气气氛下搅拌16小时后，将混合物用水(20mL)稀释，并用乙酸乙酯(20mL)萃取两次。将合并的有机层用水(15mL)、盐水(15mL)洗涤，经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到残余物，将其通过制备型HPLC纯化(柱：Gilson X-bridge C18(5μm 19*150mm)流动相A：水(0.1％碳酸氢铵)，流动相B：乙腈，UV：214nm，流速：15mL/min，梯度：50％-55％(％B))，得到呈黄色固体的标题化合物(45.0mg，95.1％纯度，41％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝2.611min，C26H28ClFN6O5S2的计算质量622.1，m/z发现值622.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.51(d,J＝3.6Hz,0.8H),9.15(s,0.2H),8.28(s,0.2H),8.27(s,0.8H),8.04-7.98(m,1.8H),7.93(d,J＝3.2Hz,0.2H),7.83(s,0.2H),7.82(s,0.8H),7.44-7.38(m,1H),7.37-7.29(m,1H),7.24-7.16(m,1H),6.00(s,0.2H),5.90(d,J＝3.2Hz,0.8H),4.99(d,J＝4.4Hz,1H),4.17-3.98(m,3H),3.79-3.63(m,2.2H),3.58-3.50(m,0.8H),3.48(s,2.4H),3.47(s,0.6H),2.30-2.17(m,2.2H),2.11-2.00(m,1H),1.97-1.87(m,1H),1.84-1.75(m,1H),1.68-1.60(m,0.8H),1.05(d,J＝6.0Hz,3H)。
化合物360D：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(1-((1-((S)-2-羟基丙基)-1H-吡唑-4-基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物360D类似于化合物360C从化合物466制备，通过制备型HPLC纯化(柱：GilsonX-bridge C18(5μm 19*150mm)流动相A：水(0.1％碳酸氢铵)，流动相B：乙腈，UV：214nm，流速：15mL/min，梯度：50％-55％(％B))，得到呈黄色固体的标题化合物(65.0mg，98.2％纯度，59％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝2.557min，C26H28ClFN6O5S2的计算质量622.1，m/z发现值622.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.51(d,J＝3.6Hz,0.8H),9.15(s,0.2H),8.28(s,0.2H),8.27(s,0.8H),8.04-7.98(m,1.8H),7.92(d,J＝2.8Hz,0.2H),7.83(s,0.2H),7.82(s,0.8H),7.44-7.38(m,1H),7.37-7.30(m,1H),7.23-7.16(m,1H),6.00(s,0.2H),5.90(d,J＝3.6Hz,0.8H),4.99(d,J＝4.8Hz,1H),4.17-3.98(m,3H),3.79-3.63(m,2.2H),3.57-3.50(m,0.8H),3.48(s,2.4H),3.47(s,0.6H),2.30-2.17(m,2.2H),2.12-1.99(m,1H),1.97-1.85(m,1H),1.84-1.75(m,1H),1.68-1.60(m,0.8H),1.05(d,J＝6.0Hz,3H)。
化合物376：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(3-(N-((R)-2,3-二羟基丙基)甲基磺酰胺基)双环[1.1.1]戊-1-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
Figure BDA0002341655160005021
化合物374：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(3-((((R)-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基)甲基)氨基)双环[1.1.1]戊-1-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
在室温向甲基6-(3-氨基双环[1.1.1]戊-1-基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯373(250mg，0.579mmol)在甲醇(8mL)中的溶液中添加(R)-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-甲醛(113mg，0.859mmol)。在室温下搅拌1.5小时后，在室温下条件氰基硼氢化钠(73mg，1.16mmol)。在室温下搅拌过夜后，将反应混合物倒入水(10mL)中，并用乙酸乙酯(20mL)萃取两次。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤两次，经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到残余物，将其通过制备型HPLC纯化(柱：X-brige C18(5μm 19*150mm)流动相A：水(0.1％碳酸氢铵)，流动相B：乙腈，UV：214nm，流速：15mL/min，梯度：60％-90％(％B))，得到呈黄色固体的标题化合物(150mg，48％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.88-7.80(m,2H),7.49-7.40(m,1.3H),7.33-7.28(m,0.7H),7.14-7.11(m,1H),6.95-6.89(m,1H),6.16(s,0.9H),6.04(s,0.1H),4.29-4.21(m,1H),4.09-4.04(m,1H),3.72-3.67(m,1H),3.63-3.60(m,3H),2.81-2.77(m,2H),2.30-2.24(m,7H),1.44(s,3H),1.37(s,3H)。
化合物375：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(3-(N-(((R)-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基)甲基)甲基磺酰胺基)双环[1.1.1]戊-1-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
在0℃向甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(3-((((R)-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基)甲基)氨基)双环[1.1.1]戊-1-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯374(150mg，0.275mmol)在二氯甲烷(5mL)中的溶液中添加甲烷磺酰氯(38mg，0.330mmol)和三乙胺(83mg，0.825mmol)。在室温搅拌2小时后，将混合物用水(10mL)稀释，用二氯甲烷(10mL)萃取两次。将合并的有机层用盐水(15mL)洗涤两次，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到残余物，将其通过C18柱(乙腈:水＝05％至80％)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物(160mg，93％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.45-9.44(m,0.6H),8.38(s,0.4H),8.00-7.95(m,2H),7.44-7.41(m,1H),7.35-7.31(m,1H),7.24-7.18(m,1H),5.97(s,0.5H),5.88(d,J＝3.2Hz,0.5H),4.22-4.18(m,1H),4.03-4.00(m,1H),3.74-3.70(m,1H),3.55-3.54(m,3H),3.29-3.23(m,2H),3.03-2.99(m,3H),2.56(s,3H),2.39(s,3H),1.37(s,3H),1.28(s,3H)。
外消旋375(160mg，0.256mmol)通过手性制备型SFC分离(柱：Chiralpak IG 5μm20*250mm；流动相：CO2:MeOH:DEA＝75:25:0.3，以50g/min；柱温41.1℃；波长：254nm；背压：100巴)，得到呈黄色固体的标题化合物375C(50mg，31％产率，100％立体纯)和375D(60mg，38％产率，100％立体纯)。
化合物375C：手性分析(柱：Chiralpak IG 5μm 4.6*250mm；流动相：CO2:MeOH:DEA＝75:25:0.2，以3.0g/min；柱温：40℃；波长：230nm，RT＝6.14min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.44(s,0.5H),8.38(s,0.5H),8.01-7.95(m,2H),7.45-7.40(m,1H),7.35-7.30(m,1H),7.24-7.19(m,1H),5.97(s,0.5H),5.88(s,0.5H),4.22-4.18(m,1H),4.04-4.00(m,1H),3.73-3.70(m,1H),3.55-3.54(m,3H),3.29-3.26(m,2H),3.03-2.99(m,3H),2.56(s,3H),2.39(s,3H),1.37(s,3H),1.28(s,3H)。
化合物375D：手性分析(柱：Chiralpak IG 5μm 4.6*250mm；流动相：CO2:MeOH:DEA＝75:25:0.2，以3.0g/min；柱温：40℃；波长：230nm，RT＝7.18min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.45-9.44(m,0.6H),8.37(s,0.4H),8.01-7.95(m,2H),7.45-7.41(m,1H),7.35-7.30(m,1H),7.24-7.18(m,1H),5.97(s,0.5H),5.89-5.88(m,0.5H),4.23-4.17(m,1H),4.03-4.00(m,1H),3.73-3.70(m,1H),3.55-3.54(m,3H),3.29-3.26(m,2H),3.03-2.99(m,3H),2.56(s,3H),2.39(s,3H),1.37(s,3H),1.28(s,3H)。
化合物376C：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(3-(N-((R)-2,3-二羟基丙基)甲基磺酰胺基)双环[1.1.1]戊-1-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
在0℃向甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(3-(N-(((R)-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基)甲基)甲基磺酰胺基)双环[1.1.1]戊-1-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯375C(30mg，0.048mmol)在乙腈(3mL)中的溶液中添加1M盐酸盐水溶液(2mL)。在室温搅拌3小时后，将混合物减压浓缩，得到残余物，将其用水(10mL)稀释，并用乙酸乙酯(10mL)萃取两次。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤两次，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到残余物，将其通过制备型HPLC纯化(柱：Gilson X-brige C18(5μm 19*150mm)流动相A：水(0.1％碳酸氢铵)，流动相B：乙腈，UV：214nm，流速：15mL/min，梯度：10％-70％(％B))，得到呈黄色固体的标题化合物(8mg，29％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝3.876min，C24H26ClFN4O6S2的计算质量584.1，m/z发现值585.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.44-9.40(m,0.5H),8.35(s,0.5H),8.01-7.99(m,1.5H),7.96-7.95(m,0.5H),7.45-7.41(m,1H),7.35-7.30(m,1H),7.25-7.18(m,1H),5.97(s,0.5H),5.88-5.87(m,0.5H),4.85-4.79(m,1H),4.60-4.54(m,1H),3.67-3.63(m,1H),3.55-3.54(m,3H),3.39-3.34(m,1H),3.30-3.21(m,2H),3.13-3.08(m,1H),3.02-2.98(m,3H),2.55-2.54(m,3H),2.38(s,3H)。
化合物376D：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(3-(N-((R)-2,3-二羟基丙基)甲基磺酰胺基)双环[1.1.1]戊-1-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物376D类似于化合物376C从化合物375D制备，LC-MS(ESI)：RT＝3.701min，C24H26ClFN4O6S2的计算质量584.1，m/z发现值585.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.43(s,0.5H),8.35(s,0.5H),8.01-7.99(m,1.5H),7.96-7.95(m,0.5H),7.45-7.41(m,1H),7.35-7.30(m,1H),7.25-7.18(m,1H),5.97(s,0.5H),5.88(s,0.5H),4.85-4.79(m,1H),4.60-4.54(m,1H),3.65-3.64(m,1H),3.55-3.54(m,3H),3.38-3.35(m,1H),3.30-3.21(m,2H),3.13-3.08(m,1H),3.02-2.98(m,3H),2.54(s,3H),2.39-2.38(m,3H)。
化合物379N：乙基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-((trans)-2-(羟基甲基)-1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
Figure BDA0002341655160005051
将化合物378b(520mg，0.655mmol)和四丁基氟化铵(601mg，2.30mmol)的混合物在50℃在氮气气氛下搅拌过夜。然后将混合物冷却至室温，并通过C18柱纯化(乙腈:水＝40％至95％)，得到粗产物，将其进一步通过制备型HPLC纯化(柱：X-bridge C18(5μm 21.2*150mm)流动相A：水(0.1％碳酸氢铵)，流动相B：乙腈，UV：214nm，流速：15mL/min，梯度：35％-80％(％B))，得到呈浅黄色固体的化合物379N(170mg，47％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝2.853min，C23H26ClFN4O5S2的计算质量556.1，m/z发现值557.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.51(d,J＝2.0Hz,0.8H),9.12(s,0.2H),7.99(s,1.7H),7.93(d,J＝3.2Hz,0.3H),7.42(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),7.37-7.32(m,1H),7.24-7.20(m,1H),6.03(s,0.2H),5.93(d,J＝2.8Hz,0.8H),4.95-4.91(m,1H),4.05-3.95(m,4H),3.77-3.68(m,2H),3.59-3.54(m,1H),3.10-3.07(m,1H),3.03(s,3H),2.10-2.02(m,1H),1.88-1.79(m,2H),1.70-1.63(m,0.3H),1.53-1.47(m,0.7H),1.12-1.05(m,3H)。
外消旋379N(170mg，0.306mmol)通过手性制备型HPLC分离(柱：Chiralpak IF 5μm20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝60:40:0.3，以11mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到呈黄色固体的标题化合物379C(41mg，24％产率，100％立体纯)和379D(38mg，22％产率，97.2％立体纯)。
化合物379C：LC-MS(ESI)：RT＝2.559min，C23H26ClFN4O5S2的计算质量556.1，m/z发现值556.9[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IF 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝70:30:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝10.071min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.52(d,J＝3.2Hz,0.8H),9.14(s,0.2H),7.99(s,1.8H),7.93(d,J＝3.2Hz,0.2H),7.43(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),7.37-7.32(m,1H),7.25-7.20(m,1H),6.03(s,0.2H),5.92(d,J＝3.6Hz,0.8H),4.96-4.91(m,1H),4.07-3.95(m,4H),3.78-3.67(m,2H),3.59-3.53(m,1H),3.12-3.06(m,1H),3.04(s,0.5H),3.03(s,2.5H),2.20-2.15(m,0.2H),2.12-2.01(m,0.8H),1.87-1.75(m,2H),1.69-1.63(m,0.2H),1.53-1.47(m,0.8H),1.12-1.05(m,3H)。
化合物379D：LC-MS(ESI)：RT＝2.290min，C23H26ClFN4O5S2的计算质量556.1，m/z发现值556.9[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IF 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝70:30:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝13.403min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.52(d,J＝3.2Hz,0.8H),9.14(s,0.2H),7.99(s,1.8H),7.93(d,J＝2.4Hz,0.2H),7.43(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),7.37-7.32(m,1H),7.25-7.20(m,1H),6.03(s,0.2H),5.93(d,J＝3.2Hz,0.8H),4.97-4.91(m,1H),4.05-3.95(m,4H),3.75-3.68(m,2H),3.60-3.53(m,1H),3.12-3.06(m,1H),3.03(s,3H),2.21-2.17(m,0.1H),2.14-2.01(m,0.9H),1.85-1.75(m,2H),1.68-1.65(m,0.2H),1.52-1.48(m,0.8H),1.12-1.05(m,3H)。
化合物381：(trans)-甲基4-(2-氯-3-氟苯基)-6-(4-羟基环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
Figure BDA0002341655160005061
在0℃向(trans)-甲基6-(4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)环己基)-4-(2-氯-3-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯380(200mg，0.350mmol)在四氢呋喃(10mL)中的混合物中添加四丁基氟化铵(262mg，1.05mmol)。在23℃下搅拌16小时后，将混合物用水(10mL)淬灭，并用甲苯(30mL)萃取三次。将合并的有机层用水(20mL)洗涤两次，经Na2SO4(s)干燥并浓缩，得到残余物，将其通过制备型TLC纯化(石油醚:乙酸乙酯＝2:3)，得到呈黄色固体的化合物381(64mg，44％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝3.418min，C21H21ClFN3O3S的计算质量449.1，m/z发现值450.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.92(d,J＝3.2Hz,0.6H),7.88(d,J＝3.2Hz,0.4H),7.74-7.73(m,1H),7.29-7.24(m,1H),7.21-7.11(m,2H),6.18(s,0.6H),6.10(s,0.4H),3.94-3.92(m,0.6H),3.69-3.63(m,1.4H),3.59(s,1.2H),3.58(s,1.8H),2.09-2.03(m,2.1H),1.99-1.82(m,2.1H),1.79-1.64(m,1.8H),1.47-1.29(m,2H)。
外消旋381(180mg，0.400mmol)通过手性制备型HPLC分离(分离条件：柱：Chiralpak OJ-H 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝90:10:0.3，以18mL/min，温度：30℃，波长：214nm)，得到呈黄色固体的标题化合物381A(23.7mg，13％产率，100％立体纯)和381B(19.9mg，122％产率，100％立体纯)。
化合物381A：LC-MS(ESI)：RT＝3.407min，C21H21ClFN3O3S的计算质量449.1，m/z发现值450.2[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak OJ-H 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝85:15:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝11.545min)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.92(d,J＝3.2Hz,0.6H),7.88(d,J＝3.2Hz,0.4H),7.74-7.73(m,1H),7.29-7.20(m,1H),7.19-7.11(m,2H),6.18(s,0.6H),6.10(s,0.4H),3.94-3.93(m,0.6H),3.69-3.65(m,1.4H),3.58(s,1.2H),3.56(s,1.8H),2.15-2.02(m,2H),1.98-1.87(m,2.2H),1.79-1.65(m,1.8H),1.46-1.29(m,2H)。
化合物381B：LC-MS(ESI)：RT＝3.387min，C21H21ClFN3O3S的计算质量449.1，m/z发现值450.2[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak OJ-H 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝85:15:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝15.656min)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.92(d,J＝3.2Hz,0.6H),7.87(d,J＝2.8Hz,0.4H),7.74-7.73(m,1H),7.27-7.24(m,1H),7.20-7.13(m,2H),6.18(s,0.6H),6.10(s,0.4H),3.93-3.92(m,0.6H),3.69-3.64(m,1.4H),3.59(s,1.2H),3.58(s,1.8H),2.11-1.96(m,2.6H),1.88-1.64(m,3.4H),1.46-1.29(m,2H)。
化合物388：(trans)-甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(4-(N-甲基甲基磺酰胺基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
Figure BDA0002341655160005081
化合物386：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(4-氧代环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
向甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(1,4-二氧杂螺[4.5]癸-8-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯385(4.90g，根据1H NMR纯度为80％，7.97mmol)在四氢呋喃(49mL)中的混合物中添加在四氢呋喃中的2M盐酸盐(49mL，98mmol)。在室温下搅拌过夜后，将混合物浓缩，得到残留物，将其溶于乙酸乙酯(50mL)中，用饱和碳酸氢钠水溶液(50mL)稀释，并用二氯甲烷(50mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤两次，经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯:四氢呋喃＝10:1:0至10:1:1)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物(2.90g，81％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.12(br s,0.2H),7.82-7.79(m,1H),7.50-7.49(m,0.8H),7.45(s,1H),7.31-7.28(m,1H),7.16-7.12(m,1H),6.98-6.88(m,1H),6.20(s,0.3H),6.07(d,J＝2.1Hz,0.7H),4.54-4.46(m,0.3H),4.31-4.23(m,0.7H),3.62(s,3H),2.57-2.49(m,4H),2.39-2.32(m,1H),2.25-2.14(m,2H),1.99-1.89(m,1H)。
化合物387：(cis)-甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(4-(甲基氨基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯和(trans)-甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(4-(甲基氨基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
在0℃在氮气气氛下向甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(4-氧代环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯386(600mg，1.34mmol)在二氯甲烷(12mL)中的溶液中添加在四氢呋喃中的2M甲胺(3.4mL，6.80mmol)、三乙酰氧基氢硼酸钠(2.84g，13.4mmol)和乙酸(402mg，6.70mmol)。在室温下搅拌过夜后，将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液(30mL)缓慢淬灭，并用二氯甲烷(30mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(二氯甲烷:甲醇:氢氧化铵＝100:1:0.02至50:1:0.02)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物387A(260mg，42％产率)和呈黄色固体的387B(250mg，40％产率)。
中间体387A：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.00-7.93(m,2H),7.42-7.40(m,1H),7.34-7.31(m,1H),7.22-7.18(m,1H),6.01(s,0.7H),5.90(s,0.3H),3.89-3.83(m,0.7H),3.61-3.58(m,0.3H),3.50(s,3H),2.74-2.70(m,1H),2.33(s,3H),2.01-1.84(m,4H),1.59-1.42(m,4H)。
中间体387B：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.85(br s,1H),7.99-7.93(m,2H),7.44-7.40(m,1H),7.38-7.30(m,1H),7.23-7.16(m,1H),6.00(s,0.4H),5.90(s,0.6H),3.82-3.75(m,0.6H),3.62-3.59(m,0.4H),3.51(s,3H),2.35-2.26(m,4H),2.02-1.96(m,2H),1.85-1.67(m,3H),1.58-1.55(m,1H),1.10-1.02(m,2H)。
化合物388：(trans)-甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(4-(N-甲基甲基磺酰胺基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
在0℃在氮气气氛下向(trans)-甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(4-(甲基氨基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯387B(250mg，0.540mmol)在二氯甲烷(5mL)中的溶液中添加三乙胺(164mg，1.62mmol)和甲烷磺酰氯(68mg，0.594mmol)。在室温下搅拌过夜后，将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液(20mL)缓慢淬灭，并用二氯甲烷(20mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到残余物，将其通过C18柱(乙腈:水＝40％至95％)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物(120mg，41％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝3.751min，C23H26ClFN4O4S2的计算质量540.1，m/z发现值540.7[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.45(d,J＝3.2Hz,0.6H),9.16(br s,0.4H),7.99-7.98(m,1.6H),7.93-7.92(m,0.4H),7.43-7.41(m,1H),7.36-7.29(m,1H),7.23-7.19(m,1H),6.00(s,0.4H),5.90(d,J＝3.2Hz,0.6H),3.85-3.82(m,1H),3.66-3.57(m,1H),3.53(s,1.7H),3.51(s,1.3H),2.92(s,3H),2.73(s,3H),2.07-1.97(m,0.5H),1.93-1.73(m,5H),1.66-1.59(m,2.5H)。
外消旋388(100mg，0.185mmol)通过手性制备型HPLC分离(分离条件：柱：Chiralpak IA 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝70:30:0.3，以20mL/min；温度：30℃；波长：230nm)，得到呈黄色固体的标题化合物388A(32mg，32％产率，100％立体纯)和呈黄色固体的388B(28mg，28％产率，100％立体纯)。
化合物388A：LC-MS(ESI)：RT＝2.462min，C23H26ClFN4O4S2的计算质量540.1，m/z发现值541.1[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝70:30:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝7.008min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.43(d,J＝3.6Hz,0.6H),9.15(br s,0.4H),8.00-7.97(m,1.6H),7.93-7.92(m,0.4H),7.43-7.40(m,1H),7.36-7.29(m,1H),7.23-7.17(m,1H),6.00(s,0.4H),5.91(d,J＝3.6Hz,0.6H),3.89-3.78(m,1H),3.67-3.57(m,1H),3.53(s,1.7H),3.51(s,1.3H),2.92(d,J＝2.8Hz,3H),2.73(s,3H),2.14-2.05(m,0.5H),1.97-1.73(m,5H),1.66-1.59(m,2.5H)。
化合物388B：LC-MS(ESI)：RT＝2.459min，C23H26ClFN4O4S2的计算质量540.1，m/z发现值541.0[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝70:30:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝8.755min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.44(d,J＝3.6Hz,0.6H),9.16(br s,0.4H),8.00-7.98(m,1.6H),7.93-7.92(m,0.4H),7.44-7.40(m,1H),7.36-7.29(m,1H),7.23-7.17(m,1H),6.00(s,0.4H),5.90(d,J＝3.6Hz,0.6H),3.88-3.79(m,1H),3.66-3.56(m,1H),3.52(s,1.8H),3.51(s,1.2H),2.92(d,J＝2.4Hz,3H),2.73(s,3H),2.11-2.04(m,0.5H),1.97-1.73(m,5H),1.66-1.57(m,2.5H)。
化合物390B：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(3-(2-羟基乙基磺酰胺基)双环[1.1.1]戊-1-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
Figure BDA0002341655160005101
在0℃向甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(3-(2-甲氧基-2-氧代乙基磺酰胺基)双环[1.1.1]戊-1-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯化合物389B(40mg，0.070mmol)在四氢呋喃(1mL)中的溶液中添加硼氢化锂(12mg，0.56mmol)。在0℃至10℃的温度下搅拌4小时后，将混合物减压浓缩，得到残余物，将其通过C18柱(乙腈:水＝50％-60％)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物(18mg，47％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝3.976min，C22H22ClFN4O5S2的计算质量540.1，m/z发现值541.1[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)9.44(s,0.5H),8.35(s,0.5H),8.01-7.97(m,1.5H),7.95(d,J＝2.8Hz,0.5H),7.45-7.40(m,1H),7.34-7.30(m,1H),7.24-7.18(m,1H),5.96(s,0.5H),5.86(s,0.5H),4.90(s,1H),3.77-3.74(m,2H),3.54(s,1.5H),3.53(s,1.5H),3.22-3.16(m,2H),2.43(s,3H),2.27(s,3H)。
化合物393B：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(3-(2,3-二羟基丙基磺酰胺基)双环[1.1.1]戊-1-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
Figure BDA0002341655160005111
在0℃向甲基6-(3-(1,4-二氧杂螺[4.5]癸-2-基甲基磺酰胺基)双环[1.1.1]戊-1-基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯392B(30mg，0.050mmol)在二氯甲烷(2mL)中的溶液中滴加三氟乙酸(1mL)。在室温下搅拌1小时后，将混合物用饱和碳酸氢钠水溶液(10mL)洗涤三次，然后用水(10mL)洗涤。将分离的有机相减压浓缩，得到残余物，将其通过C18柱(乙腈:水(0.1％碳酸氢铵)＝5％至80％)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物(10mg，40％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝3.624min，C23H24ClFN4O6S2的计算质量570.1，m/z发现值571.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.00-7.99(m,1H),7.92-7.87(m,1H),7.42(d,J＝2.4Hz,0.5H),7.40(d,J＝2.8Hz,0.5H),7.36-7.32(m,1H),7.22-7.17(m,1H),5.97-5.91(m,1H),3.98-3.94(m,1H),3.56(s,3H),3.48-3.44(m,1H),3.41-3.36(m,1H),3.31-3.30(m,0.5H),3.27-3.26(m,0.5H),3.09-3.03(m,1H),2.46-2.31(m,6H)。
化合物401：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(1-(S-甲基磺酰亚胺基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物400N：甲基6-(1-(N-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-S-甲基磺酰亚胺基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
在0℃向甲烷磺酰胺(2.00g，21.0mmol)和叔丁基氯二甲基硅烷(4.80g，31.6mmol)在氯仿(30mL)中的搅拌溶液中添加三乙胺(3.20g，31.6mmol)。在室温搅拌16小时过夜后，将混合物减压浓缩，得到残余物，将其用水(100mL)稀释，并用乙酸乙酯(30mL)萃取两次。将合并的有机层经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到呈白色固体的N-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-甲磺酰胺(3.20g，73％产率)。
在0℃向在氮气气氛下的三苯基膦二氯化物(1.7g，5.1mmol)在干氯仿(10mL)中的搅拌溶液中添加三乙胺(697mg，6.90mmol)。在室温下搅拌十分钟后，将反应混合物冷却至0℃并且添加N-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-甲烷磺酰胺(970mg，5.50mmol)在干氯仿(3mL)中的溶液。在0℃下搅拌20分钟后，条件(S*)-甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯化合物99(150mg，0.350mmol，100％立体纯)在氯仿(1mL)中的溶液。在室温下搅拌30分钟后，将反应混合物减压浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯:二氯甲烷＝10:1:1)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物(150mg，经两步69％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝2.867min，C27H37ClFN5O3S2Si的计算质量625.2，m/z发现值626.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.20(s,0.3H),7.83(d,J＝2.8Hz,1H),7.52(d,J＝2.8Hz,0.7H),7.45(d,J＝3.6Hz,0.3H),7.44(br s,0.7H),7.31-7.28(m,1H),7.16-7.12(m,1H),6.98-6.89(m,1H),6.20(d,J＝2.8Hz,0.3H),6.07(s,0.7H),4.13-3.93(m,2.3H),3.90-3.83(m,0.7H),3.61(s,1.8H),3.60(s,1.2H),2.77(s,1.8H),2.76(s,1.2H),2.71-2.61(m,2H),2.33-2.20(m,0.8H),2.15-1.70(m,3.2H),0.94(s,4H),3.93(s,5H),0.17-0.13(m,6H)。
化合物401B：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(1-(S-甲基磺酰亚胺基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
在室温下向甲基6-(1-(N-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-S-甲基磺酰亚胺基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯400N(150mg，0.240mmol)在甲醇(2mL)中的溶液中添加2M盐酸盐水溶液(2mL)。在室温下搅拌1小时后，将反应混合物减压浓缩，得到残余物，将所述残余物溶于水(10mL)中，用28％氨溶液(1mL)调节至pH＝9-10，并减压浓缩，得到残余物，将所述残余物通过制备型HPLC纯化(柱：XbrigeC18 HILIC(5μm10*190mm)流动相A：水,流动相B：乙腈，UV：214nm，流速：50mL/min，梯度：20％-95％(％B))，得到呈黄色固体的标题化合物401B(101.0mg，83％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝3.149min，C21H23ClFN5O3S2的计算质量511.1，m/z发现值511.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.92(d,J＝3.2Hz,0.3H),7.89(d,J＝3.2Hz,0.7H),7.76-7.73(m,1H),7.41-7.37(m,1H),7.25-7.22(m,1H),7.08-7.04(m,1H),6.15(s,0.3H),6.07(s,0.7H),4.11-3.95(m,2.1H),3.89-3.83(m,0.9H),3.59(s,3H),2.88(s,3H),2.85-2.78(m,2H),2.24-2.14(m,0.7H),2.11-2.01(m,1H),1.98-1.91(m,1.5H),1.75-1.71(m,0.8H)。
外消旋401B(60mg，0.12mmol)通过手性制备型SFC分离(柱：Chiralpak IF 5μm20*250mm；流动相：CO2:MeOH＝60:40，以50g/min；温度：30℃；波长：230nm，背压：100巴)，得到呈黄色固体的标题化合物401X(7.7mg，13％产率，100％立体纯)和401Y(33.1mg，55％产率，100％立体纯)。
化合物401X：LC-MS(ESI)：RT＝3.621min，C21H23ClFN5O3S2的计算质量511.1，m/z发现值511.9[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IF 5μm 4.6*250mm；流动相：CO2:EtOH＝60:40，以2.999g/min；柱温：40℃；波长：214nm，背压：100巴，RT＝4.52min)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.92(d,J＝2.8Hz,0.3H),7.89(d,J＝3.2Hz,0.7H),7.76-7.74(m,1H),7.41-7.37(m,1H),7.25-7.21(m,1H),7.08-7.03(m,1H),6.15(s,0.3H),6.08(s,0.7H),4.12-3.92(m,1.6H),3.90-3.83(m,1.4H),3.59(s,3H),2.88(s,3H),2.85-2.79(m,2H),2.27-2.20(m,0.8H),2.17-2.01(m,1.2H),1.94-1.92(m,1.3H),1.74-1.70(m,0.7H)。
化合物401Y：LC-MS(ESI)：RT＝3.053min，C21H23ClFN5O3S2的计算质量511.1，m/z发现值511.9[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IF 5μm 4.6*250mm；流动相：CO2:EtOH＝60:40，以2.999g/min；柱温：40℃；波长：214nm，背压：100巴，RT＝5.7min)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.92(d,J＝3.2Hz,0.3H),7.89(d,J＝3.2Hz,0.7H),7.76-7.74(m,1H),7.41-7.37(m,1H),7.25-7.21(m,1H),7.08-7.03(m,1H),6.15(s,0.3H),6.07(s,0.7H),4.09-3.95(m,2.3H),3.88-3.83(m,0.7H),3.59(s,3H),2.88(s,3H),2.86-2.78(m,2H),2.24-2.17(m,0.8H),2.13-2.04(m,1H),1.94-1.90(m,1.5H),1.75-1.72(m,0.7H)。
化合物404N：乙基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-((trans)-2-(氟甲基)-1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
Figure BDA0002341655160005141
化合物402N：1-叔丁基5-乙基6-(2-氯-4-氟苯基)-4-((trans)-2-(羟基甲基)-1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)嘧啶-1,5(6H)-二甲酸酯
在室温向化合物379N(1.44g，2.59mmol)在四氢呋喃(50mL)中的溶液中添加4-二甲基氨基吡啶(379mg，3.11mmol)和二碳酸二叔丁酯(671mg，3.11mmol)。在氮气下在60℃搅拌过夜后，将其冷却至室温并浓缩，得到残余物，将所述残余物通过C18柱(乙腈:水＝30％至95％)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物(900mg，53％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝0.765min，C28H34ClFN4O7S2的计算质量656.2，m/z发现值656.8[M+H]+。
化合物403N：1-叔丁基5-乙基6-(2-氯-4-氟苯基)-4-((trans)-2-(氟甲基)-1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)嘧啶-1,5(6H)-二甲酸酯
在-78℃向化合物402N(200mg，0.305mmol)在二氯甲烷(2mL)中的溶液中添加二乙基氨基硫三氟化物(147mg，0.915mmol)。在室温下在氮气气氛下搅拌过夜后，将反应混合物用水(2mL)稀释并用二氯甲烷(10mL)萃取三次。将合并的有机层用冷盐水(20mL)洗涤三次，经Na2SO4(s)干燥，过滤并浓缩，得到残余物，将其通过制备进一步HPLC纯化(柱：Waters X-bridge C18(5μm 19*150mm)，流动相A：水(0.1％碳酸氢铵)，流动相B：乙腈，UV：214nm，流速：15mL/min，梯度：40％-85％(％B))，得到呈黄色固体的标题化合物(64.0mg，53％产率)。1HNMR(300MHz,CDCl3)δ7.90(d,J＝1.5Hz,1H),7.50(d,J＝3.0Hz,1H),7.16-7.04(m,2H),6.85-6.78(m,1H),6.74(d,J＝3.6Hz,1H),5.16(br s,0.5H),5.02(br s,0.5H),4.28-4.14(m,3H),3.91-3.58(m,4H),3.03(s,3H),2.44-2.12(m,4H),1.26(s,12H)。
化合物404N：乙基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-((trans)-2-(氟甲基)-1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
在室温下在氮气气氛下向化合物403N(64.0mg，0.097mmol)在二氯甲烷(1.5mL)中的溶液中添加三氟乙酸(1.5mL)。在室温搅拌1小时后，将混合物减压浓缩，得到残余物，将其进一步通过制备型HPLC纯化(柱：Gilson X-bridge C18(5μm 19*150mm)，流动相A：水(0.1％碳酸氢铵)，流动相B：乙腈，UV：214nm，流速：15mL/min，梯度：35％-85％(％B))，得到呈黄色固体的标题化合物(32.0mg，59％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝3.980min，C23H25ClF2N4O4S2的计算质量558.1，m/z发现值559.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.45(s,0.7H),9.30(s,0.3H),7.99-7.92(m,2H),7.44-7.41(m,1H),7.38-7.32(m,1H),7.25-7.21(m,1H),6.04(s,0.3H),5.95(d,J＝3.6Hz,0.7H),5.10(s,0.5H),4.98(s,0.5H),4.51(s,0.2H),4.21-4.18(m,0.8H),4.02-3.95(m,2H),3.77-3.66(m,0.4H),3.63-3.60(m,0.6H),3.55-3.53(m,0.8H),3.51-3.41(m,1.2H),3.39-3.36(m,1H),2.99(s,3H),2.28-1.98(m,4H),1.09-1.04(m,3H)。
化合物416：甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(1-氨磺酰基哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
Figure BDA0002341655160005151
在室温下在氮气气氛下向甲基6-(1-(N-(叔丁氧基羰基)氨磺酰基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯化合物415(440mg，0.69mmol)在甲醇(10mL)中的溶液中添加在1,4-二噁烷中的4N盐酸盐(3.0mL，12mmol)。在室温搅拌4小时后，将混合物减压浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝4:1至1:1)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物(225mg，61％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝3.366min，C20H20ClF2N5O4S2的计算质量531.1，m/z发现值532.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.61(s,0.8H),9.08(s,0.2H),8.01-7.99(m,1.8H),7.94(d,J＝3.2Hz,0.2H),7.48-7.42(m,1H),7.23-7.16(m,1H),6.77-6.74(m,2H),6.03(s,0.2H),5.93(s,0.8H),3.92-3.53(m,6H),2.67-2.54(m,2H),2.12-2.00(m,1H),1.93-1.88(m,1H),1.87-1.78(m,1H),1.66-1.63(m,1H)。
外消旋416(225mg，0.422mmol)通过手性制备型HPLC分离(分离条件：柱：Chiralpak IE 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝70:30:0.3，以12mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到呈黄色固体的标题化合物416A(6.4mg，3％产率，100％立体纯)和416B(5.3mg，2％产率，100％立体纯)。
化合物416A：LC-MS(ESI)：RT＝7.703min，C20H20ClF2N5O4S2的计算质量531.1，m/z发现值532.0[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IE 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝70:30:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝11.086min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.62(d,J＝3.2Hz,0.8H),9.09(s,0.2H),8.01-7.99(m,1.8H),7.94(d,J＝3.2Hz,0.2H),7.49-7.41(m,1H),7.23-7.15(m,1H),6.77-6.74(m,2H),6.03(s,0.2H),5.93(d,J＝3.2Hz,0.8H),3.92-3.58(m,3H),3.53(s,3H),2.67-2.54(m,2H),2.13-2.00(m,1H),1.95-1.87(m,1H),1.81-1.78(m,1H),1.67-1.63(m,1H)。
化合物416B：LC-MS(ESI)：RT＝4.704min，C20H20ClF2N5O4S2的计算质量531.1，m/z发现值532.0[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IE 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝70:30:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝14.628min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.62(s,0.8H),9.09(br s,0.2H),8.01(s,1.8H),7.94(br s,0.2H),7.48-7.41(m,1H),7.21(br s,1H),6.74(s,2H),6.02(br s,0.2H),5.93(s,0.8H),3.89-3.58(m,3H),3.53(s,3H),2.66-2.54(m,2H),2.09-2.00(m,1H),1.93-1.87(m,1H),1.81-1.78(m,1H),1.66-1.63(m,1H)。
化合物431：(trans)-甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(4-(N-(3-羟基丙基)甲基磺酰胺基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
Figure BDA0002341655160005161
化合物431-1：(trans)-甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(4-((3-乙氧基-3-氧代丙基)氨基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
在0℃在氮气气氛下向(trans)-甲基6-(4-氨基环己基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯化合物125(1.67g，97％纯度，2.87mmol)在乙醇(3mL)和四氢呋喃(3mL)中的溶液中添加丙烯酸乙酯(323mg，97％纯度，3.13mmol)。在室温搅拌过夜后，将混合物减压浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝8:1)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物431-1(1.11g，68％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝1.67min，C26H30ClFN4O4S的计算质量548.2，m/z发现值549.5[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.40(br s,0.3H),8.87(s,0.7H),8.03-7.96(m,1.7H),7.94(s,0.3H),7.46-7.43(m,1H),7.40-7.30(m,1H),7.25-7.17(m,1H),6.01(s,0.4H),5.94-5.90(m,0.6H),4.12-4.04(m,2H),3.85-3.75(m,0.5H),3.62-3.52(m,0.5H),3.51(s,3H),2.94-2.84(m,2H),2.65-2.57(m,1H),2.05-1.96(m,2H),1.89-1.56(m,5H),1.23-1.07(m,6H)。
化合物431-2：(trans)-甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(4-(N-(3-乙氧基-3-氧代丙基)甲基磺酰胺基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
在室温下在氮气气氛下向(trans)-甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(4-((3-乙氧基-3-氧代丙基)氨基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯化合物431-1(1.11g，1.96mmol)在二氯甲烷(30mL)中的溶液中添加三乙胺(614mg，99％纯度，6.00mmol)和甲烷磺酰氯(421mg，98％纯度，3.60mmol)。在室温下搅拌2小时后，将混合物减压浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝2:1)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物431-2(1.08g，纯度95％，86％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝4.286min，C27H32ClFN4O6S2的计算质量626.1，m/z发现值627.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.43(d,J＝4.0Hz,0.6H),9.09(s,0.4H),8.00-7.98(m,1.5H),7.93(d,J＝3.6Hz,0.5H),7.44-7.40(m,1H),7.37-7.30(m,1H),7.24-7.18(m,1H),6.01(s,0.4H),5.91(d,J＝3.6Hz,0.6H),4.08(q,J＝7.2Hz,2H),3.87-3.75(m,1H),3.60-3.51(m,4H),3.41(t,J＝7.6Hz,2H),2.98(d,J＝3.6Hz,3H),2.61(t,J＝8.0Hz,2H),2.08-1.56(m,8H),1.21(t,J＝7.2Hz,3H)。
化合物431：(trans)-甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(4-(N-(3-羟基丙基)甲基磺酰胺基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
在0℃在氮气气氛下向(trans)-甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(4-(N-(3-乙氧基-3-氧代丙基)甲基磺酰胺基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯化合物431-2(520mg，95％纯度，0.788mmol)在四氢呋喃(6mL)中的溶液中添加硼氢化锂(56mg，97％纯度，2.59mmol)。在室温下搅拌过夜后，将混合物冷却至0℃，用水(100mL)淬灭并用乙酸乙酯(50mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥，过滤并浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝1:2)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物431(300mg，纯度96％，63％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝3.992min，C25H30ClFN4O5S2的计算质量584.1，m/z发现值585.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.43(d,J＝3.2Hz,0.6H),9.10(s,0.4H),8.00-7.98(m,1.5H),7.93(d,J＝3.6Hz,0.5H),7.44-7.40(m,1H),7.36-7.30(m,1H),7.23-7.17(m,1H),6.00(s,0.4H),5.91(d,J＝3.6Hz,0.6H),4.49-4.47(m,1H),3.86-3.75(m,1H),3.60-3.55(m,2H),3.52(s,1.8H),3.51(s,1.2H),3.45-3.41(m,2H),3.20-3.16(m,2H),2.93(d,J＝2.8Hz,3H),1.95-1.60(m,10H)。
外消旋431(300mg，96％纯度，0.492mmol)通过手性制备型HPLC分离(柱：Chiralpak IA 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝80:20:0.3，以25mL/min；温度：30℃；波长：230nm)，得到呈黄色固体的标题化合物431A(64.4mg，98.6％纯度，22％产率，100％立体纯)和431B(63.4mg，99.8％纯度，22％产率，98.8％立体纯)。
化合物431A：LC-MS(ESI)：RT＝3.689min，C25H30ClFN4O5S2的计算质量584.1，m/z发现值584.7[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝80:20:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝9.607min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.44(d,J＝3.6Hz,0.6H),9.11(s,0.4H),8.00-7.98(m,1.5H),7.93(d,J＝3.6Hz,0.5H),7.44-7.40(m,1H),7.36-7.30(m,1H),7.24-7.18(m,1H),6.01(s,0.4H),5.91(d,J＝3.2Hz,0.6H),4.49(t,J＝4.8Hz,1H),3.86-3.75(m,1H),3.61-3.56(m,1H),3.53(s,1.8H),3.51(s,1.2H),3.44(q,J＝5.6Hz,2H),3.20-3.16(m,2H),2.94(d,J＝2.8Hz,3H),2.11-1.76(m,5H),1.73-1.61(m,5H)。
化合物431B：LC-MS(ESI)：RT＝3.690min，C25H30ClFN4O5S2的计算质量584.1，m/z发现值584.7[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IA 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝80:20:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝11.156min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.44(d,J＝3.6Hz,0.6H),9.11(s,0.4H),8.00-7.98(m,1.5H),7.93(d,J＝3.2Hz,0.5H),7.44-7.40(m,1H),7.36-7.30(m,1H),7.23-7.17(m,1H),6.00(s,0.4H),5.91(d,J＝3.6Hz,0.6H),4.48(t,J＝5.2Hz,1H),3.86-3.75(m,1H)3.60-3.55(m,1H),3.52(s,1.8H),3.51(s,1.2H),3.44(q,J＝5.6Hz,2H),3.18(t,J＝7.6Hz,2H),2.94(s,1.5H),2.93(s,1.5H),2.1
2-1.76(m,5H),1.73-1.61(m,5H)。
化合物433：(trans)-甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(4-(N-(2-羟基乙基)乙酰胺基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
Figure BDA0002341655160005191
化合物433-1：甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(4-氧代环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
在0℃向4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(1,4-二氧杂螺[4.5]癸-8-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯化合物432(2.85g，5.58mmol)在二氯甲烷(25mL)中的溶液中添加三氟乙酸(25mL)。在室温搅拌1小时后，将混合物减压浓缩，得到残余物，将其溶于二氯甲烷(250mL)中，并用饱和碳酸氢钠水溶液(200mL)洗涤两次，用盐水(200mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到呈黄色固体的标题化合物(1.72g，66％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.63(s,0.7H),9.25(br s,0.3H),8.00-7.93(m,2H),7.45(q,J＝8.8Hz,1H),7.24-7.21(m,1H),6.04-5.95(m,1H),4.13-4.00(m,1H),3.56(s,3H),2.59-2.51(m,1H),2.36-2.29(m,3H),2.17-2.10(m,2H),2.02-1.94(m,2H)。
化合物433-2：甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(4-((2-甲氧基-2-氧代乙基)氨基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
向甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(4-氧代环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯化合物433-1(1.98g，4.24mmol)和甲基2-氨基乙酸酯盐酸盐(1.64g，12.7mmol)在甲醇(50mL)中的溶液中添加乙酸钠(1.60g，19.1mmol)和氰基硼氢化钠(1.31g，20.4mmol)。在室温下搅拌过夜后，将混合物用水(100mL)淬灭，并用二氯甲烷(100mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝3:1至1:1)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物433-2A(1.30g，54％产率)和433-2B(500mg，21％产率)。
化合物433-2A(trans)：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.14-8.11(m,0.7H),7.81(s,1H),7.50-7.45(m,1.3H),7.08-6.96(m,2H),6.17(s,0.7H),6.03(s,0.3H),4.00-3.91(m,1H),3.76-3.73(m,4H),3.61-3.59(m,3H),3.52-3.46(m,2H),2.62-2.54(m,1H),2.35(br s,2H),1.99-1.90(m,2H),1.80-1.71(m,1H),1.44-1.34(m,2H)。
化合物433-2B(cis)：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.46-8.42(m,0.8H),7.83-7.82(m,1H),7.51-7.44(m,1.2H),7.10-6.96(m,2H),6.20-6.18(m,0.8H),6.05(br s,0.2H),4.04-3.96(m,1H),3.77(s,3H),3.59(s,3H),3.52-3.45(m,2H),2.95-2.89(m,1H),2.22-1.87(m,6H),1.77-1.70(m,2H)。
化合物433-3：(trans)-甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(4-(N-(2-甲氧基-2-氧代乙基)乙酰胺基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
在0℃向(trans)-甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(4-((2-甲氧基-2-氧代乙基)氨基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯433-2A(475mg，0.870mmol)在二氯甲烷(10mL)中的溶液中添加乙酸酐(903mg，8.70mmol)。在室温下搅拌过夜后，将混合物减压浓缩，得到残余物，将其溶于二氯甲烷(200mL)中，用饱和碳酸氢钠水溶液(10mL)洗涤两次并且用盐水(10mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝3:1至1:1)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物(340mg，55％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.54(d,J＝3.6Hz,0.5H),9.28(s,0.2H),8.95(s,0.3H),8.00-7.99(m,1.5H),7.95(d,J＝3.2Hz,0.3H),7.93(d,J＝3.2Hz,0.2H),7.49-7.41(m,1H),7.20-7.12(m,1H),6.01(d,J＝6.0Hz,0.5H),5.91(t,J＝4.0Hz,0.5H),4.57-4.51(m,0.2H),4.37-4.31(m,0.2H),4.20(s,0.6H),3.96(s,1H),3.91-3.79(m,1H),3.71(s,1.5H),3.61(s,2H),3.53-3.51(m,3.5H),3.32(s,3H),2.13(s,2H),1.93-1.82(m,4H),1.63-1.55(m,2H)。
化合物433：(trans)-甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(4-(N-(2-羟基乙基)乙酰胺基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
向(trans)-甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(4-(N-(2-甲氧基-2-氧代乙基)乙酰胺基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯433-2A(270mg，0.460mmol)在四氢呋喃(2mL)中的溶液中添加硼氢化锂(52mg，2.32mmol)。在室温搅拌过夜后，将混合物用水(10mL)淬灭，并用乙酸乙酯(10mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(5mL)洗涤，经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝1:1至1:2)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物433(200mg，99.8％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝4.557min，C25H27ClF2N4O4S的计算质量552.1，m/z发现值553.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.55(t,J＝3.6Hz,0.5H),9.25(s,0.3H),8.99(s,0.2H),8.00-7.99(m,1.5H),7.95-7.93(m,0.5H),7.48-7.42(m,1H),7.21-7.12(m,1H),6.01(d,J＝4.8Hz,0.5H),5.92(t,J＝3.6Hz,0.5H),4.86-4.83(m,0.5H),4.66-4.63(m,0.5H),4.34-4.27(m,0.2H),4.17-4.11(m,0.3H),3.86-3.79(m,0.5H),3.62-3.47(m,5H),3.43-3.38(m,1H),3.30-3.28(m,1H),3.25-3.23(m,1H),2.09-2.05(m,3H),1.96-1.75(m,4H),1.70-1.57(m,4H)。
外消旋433(200mg，0.362mmol)通过手性制备型HPLC分离(柱：Chiralpak AD-H 5μm 20*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝70:30:0.3，以13mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到呈黄色固体的标题化合物433A(54.5mg，27％产率，100％立体纯)和433B(37.5mg，12％产率，100％立体纯)。
化合物433A：LC-MS(ESI)：RT＝4.554min，C25H27ClF2N4O4S的计算质量552.1，m/z发现值553.1[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak AD-H 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝70:30:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝4.737min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.55(s,0.5H),9.24(s,0.3H),8.99(s,0.2H),8.00-7.99(m,1.5H),7.95-7.92(m,0.5H),7.49-7.42(m,1H),7.21-7.13(m,1H),6.01(d,J＝4.8Hz,0.4H),5.93-5.92(m,0.6H),4.88-4.85(m,0.5H),4.66(t,J＝5.6Hz,0.5H),4.33-4.27(m,0.2H),4.17-4.11(m,0.3H),3.87-3.76(m,0.5H),3.59-3.49(m,5H),3.41-3.38(m,1H),3.32-3.30(m,1H),3.25-3.24(m,1H),2.09-2.05(m,3H),1.95-1.75(m,4H),1.66-1.57(m,4H)。
化合物433B：LC-MS(ESI)：RT＝4.554min，C25H27ClF2N4O4S的计算质量552.1，m/z发现值553.1[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak AD-H 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝70:30:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝11.148min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.55(s,0.5H),9.25(s,0.3H),8.99(s,0.2H),8.00(s,1.5H),7.95-7.93(m,0.5H),7.49-7.42(m,1H),7.21-7.13(m,1H),6.02(d,J＝4.8Hz,0.5H),5.92(t,J＝3.2Hz,0.5H),4.88-4.85(m,0.5H),4.67-4.64(m,0.5H),4.31(br s,0.2H),4.14(br s,0.3H),3.89-3.76(m,0.5H),3.61-3.49(m,5H),3.43-3.38(m,1H),3.32-3.28(m,1H),3.25-3.22(m,1H),2.09-2.05(m,3H),1.96-1.75(m,4H),1.70-1.57(m,4H)。
化合物434：(trans)-甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(4-((2-羟基乙基)(2,2,2-三氟乙基)氨基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
Figure BDA0002341655160005221
化合物434-1：(trans)-甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(4-((2-甲氧基-2-氧代乙基)(2,2,2-三氟乙基)氨基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
向(trans)-甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(4-((2-甲氧基-2-氧代乙基)氨基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯433-2A(340mg，0.610mmol)在乙腈(2mL)中的溶液中添加碳酸氢钠(310mg，3.66mmol)和2,2,2-三氟乙基三氟甲磺酸酯(438mg，1.83mmol)。在85℃下搅拌过夜后，将混合物用水(10mL)淬灭，并用乙酸乙酯(10mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(5mL)洗涤，经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝3:1至1:1)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物434-1(320mg，52％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.53(d,J＝3.6Hz,0.6H),9.01(s,0.4H),8.00-7.98(m,1.5H),7.94(d,J＝3.2Hz,0.5H),7.48-7.41(m,1H),7.20-7.12(m,1H),6.00(s,0.4H),5.90(d,J＝3.2Hz,0.6H),3.82-3.74(m,0.6H),3.69-3.61(m,3.4H),3.58(s,2H),3.52(s,1.8H),3.51(s,1.2H),3.48-3.43(m,2H),2.84-2.78(m,0.4H),2.71-2.65(m,0.6H),1.92-1.85(m,3H),1.81-1.72(m,2H),1.68-1.59(m,1H),1.33-1.23(m,2H)。
化合物434：(trans)-甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(4-((2-羟基乙基)(2,2,2-三氟乙基)氨基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
向(trans)-甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(4-((2-甲氧基-2-氧代乙基)(2,2,2-三氟乙基)氨基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯434-1(247mg，0.398mmol)在四氢呋喃(2mL)中的溶液中添加硼氢化锂(90mg，4.13mmol)。在室温搅拌过夜后，将混合物用水(10mL)淬灭，并用乙酸乙酯(10mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(5mL)洗涤，经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝1:1至1:2)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物434(70mg，24％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝4.187min，C25H26ClF5N4O3S的计算质量592.1，m/z发现值593.2[M+H]+。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.52(d,J＝3.2Hz,0.5H),8.99(s,0.5H),8.00-7.97(m,1.5H),7.94(d,J＝2.8Hz,0.5H),7.49-7.41(m,1H),7.20-7.13(m,1H),6.01(s,0.4H),5.91(d,J＝3.6Hz,0.6H),4.43-4.39(m,1H),3.83-3.75(m,0.5H),3.52-3.51(m,3.5H),3.46-3.40(m,2H),3.30-3.26(m,2H),2.70(t,J＝6.8Hz,2H),2.59-2.56(m,1H),1.91-1.79(m,5H),1.75-1.64(m,1H),1.39-1.29(m,2H)。
外消旋434(70mg，0.12mmol)通过手性制备型SFC分离(柱：Chiralpak IG 5μm 20*250mm；流动相：CO2:MeOH＝70:30，以50g/min；柱温：30℃；波长：230nm，背压：100巴)，得到呈黄色固体的标题化合物434A(19.1mg，27％产率，100％立体纯)和434B(19.8mg，28％产率，100％立体纯)。
化合物434A：LC-MS(ESI)：RT＝4.165min，C25H26ClF5N4O3S的计算质量592.1，m/z发现值593.0[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IE 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝90:10:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝10.689min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.52(d,J＝3.2Hz,0.5H),8.98(s,0.5H),8.00-7.97(m,1.5H),7.94(d,J＝3.6Hz,0.5H),7.49-7.41(m,1H),7.20-7.13(m,1H),6.01(s,0.5H),5.91(d,J＝3.2Hz,0.5H),4.43-4.39(m,1H),3.81-3.70(m,0.6H),3.53-3.52(m,3.4H),3.46-3.41(m,2H),3.28-3.26(m,2H),2.72-2.68(m,2H),2.60-2.56(m,1H),1.90-1.74(m,5H),1.70-1.64(m,1H),1.40-1.29(m,2H)。
化合物434B：LC-MS(ESI)：RT＝4.169min，C25H26ClF5N4O3S的计算质量592.1，m/z发现值593.0[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IE 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH:DEA＝90:10:0.2，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝12.458min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.52(d,J＝3.6Hz,0.5H),8.98(s,0.5H),8.00-7.97(m,1.5H),7.94(d,J＝3.2Hz,0.5H),7.49-7.41(m,1H),7.20-7.13(m,1H),6.01(s,0.4H),5.91(d,J＝3.2Hz,0.6H),4.44-4.40(m,1H),3.81-3.76(m,0.6H),3.53-3.52(m,3.4H),3.46-3.42(m,2H),3.28-3.26(m,2H),2.71-2.68(m,2H),2.59-2.56(m,1H),1.88-1.73(m,5H),1.69-1.63(m,1H),1.40-1.29(m,2H)。
化合物448：(trans)-甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(4-(N-(氰基甲基)甲基磺酰胺基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
化合物448-1：(trans)-1-叔丁基5-甲基6-(2-氯-4-氟苯基)-4-(4-(甲基磺酰胺基)环己基)-2-(噻唑-2-基)嘧啶-1,5(6H)-二甲酸酯
将(trans)-甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(4-(甲基磺酰胺基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯126(1.44g，2.73mmol)、二碳酸二叔丁酯(631mg，2.89mmol)和N,N-二甲基吡啶-4-胺(136mg，1.11mmol)在四氢呋喃(10mL)中的混合物在60℃下搅拌过夜。冷却至室温并用水(100mL)淬灭后，混合物用二氯甲烷(100mL)萃取三次。将合并的有机层用饱和亚硫酸钠水溶液(50mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝3:1至1:1)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物448-1(990mg，58％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝1.82min，C27H32ClFN4O6S2的计算质量626.1，m/z发现值627.4[M+H]+。
化合物448-2：(trans)-1-叔丁基5-甲基6-(2-氯-4-氟苯基)-4-(4-(N-(氰基甲基)甲基磺酰胺基)环己基)-2-(噻唑-2-基)嘧啶-1,5(6H)-二甲酸酯
在0℃向(trans)-1-叔丁基5-甲基6-(2-氯-4-氟苯基)-4-(4-(甲基磺酰胺基)环己基)-2-(噻唑-2-基)嘧啶-1,5(6H)-二甲酸酯448-1(830mg，1.32mmol)在四氢呋喃(6mL)中的溶液中添加在矿物油中的60％wt氢化钠(160mg，3.97mmol)。在室温下搅拌1小时后，将混合物冷却至0℃，并添加2-溴乙腈(634mg，5.28mmol)。在室温下搅拌过夜后，将混合物用水(100mL)稀释，用乙酸乙酯(50mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液浓缩，得到残留物，将其通过硅胶柱色谱法纯化(石油醚:乙酸乙酯＝3:1至1:1)，得到呈黄色固体的标题化合物448-2(550mg，63％产率)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.00(s,2H),7.48(dd,J＝8.4,2.4Hz,1H),7.17-7.11(m,1H),7.07-7.00(m,1H),6.55(s,1H),4.46(s,2H),3.79-3.71(m,1H),3.68(s,3H),3.49(br s,1H),3.12(s,3H),2.06-2.01(m,1H),1.91-1.62(m,6H),1.59(br s,1H),1.15(s,9H)。
化合物448：(trans)-甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(4-(N-(氰基甲基)甲基磺酰胺基)环己基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
在0℃向(trans)-1-叔丁基5-甲基6-(2-氯-4-氟苯基)-4-(4-(N-(氰基甲基)甲基磺酰胺基)环己基)-2-(噻唑-2-基)嘧啶-1,5(6H)-二甲酸酯448-2(500mg，0.750mmol)在二氯甲烷(2mL)中的溶液中添加三氟乙酸(1mL)。在室温下搅拌过夜后，将混合物减压浓缩，得到残余物，将其溶于二氯甲烷(5mL)中，用饱和碳酸氢钠水溶液(3mL)洗涤两次，用盐水(3mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝3:1至1:1)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物448(280mg，66％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝4.278min，C24H25ClFN5O4S2的计算质量565.1，m/z发现值566.0[M+H]+。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.43(d,J＝3.2Hz,0.6H),9.09(s,0.4H),8.00-7.93(m,2H),7.44-7.40(m,1H),7.37-7.30(m,1H),7.24-7.18(m,1H),6.01(s,0.4H),5.91(d,J＝3.2Hz,0.6H),4.45(s,2H),3.97-3.84(m,1H),3.74-3.68(m,0.5H),3.62-3.59(m,0.5H),3.54(s,1.5H),3.52(s,1.5H),3.11(s,1.5H),3.09(s,1.5H),1.99-1.66(m,8H)。
外消旋448(280mg，0.495mmol)通过手性制备型HPLC分离(柱：Chiralpak IC 5μm20*250mm；流动相：Hex:EtOH＝70:30，以25mL/min；温度：30℃；波长：214nm)，得到呈黄色固体的标题化合物448A(52.6mg，99.5％纯度，19％产率，100％立体纯)和448B(46.1mg，99.4％纯度，16％产率，100％立体纯)。
化合物448A：LC-MS(ESI)：RT＝4.058min，C24H25ClFN5O4S2的计算质量565.1，m/z发现值566.1[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝70:30，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝12.949min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.43(d,J＝3.2Hz,0.6H),9.08(s,0.4H),8.00-7.93(m,2H),7.43-7.41(m,1H),7.37-7.31(m,1H),7.24-7.17(m,1H),6.01(s,0.4H),5.91(d,J＝3.2Hz,0.6H),4.45(s,2H),3.97-3.84(m,1H),3.74-3.68(m,0.5H),3.61-3.59(m,0.5H),3.54(s,1.5H),3.52(s,1.5H),3.11(s,1.5H),3.09(s,1.5H),2.11-1.95(m,1H),1.92-1.69(m,7H)。
化合物448B：LC-MS(ESI)：RT＝4.063min，C24H25ClFN5O4S2的计算质量565.1，m/z发现值566.1[M+H]+。手性分析(柱：Chiralpak IC 5μm 4.6*250mm；流动相：Hex:EtOH＝70:30，以1.0mL/min；温度：30℃；波长：230nm，RT＝15.940min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.43(s,0.6H),9.09(s,0.4H),7.99-7.93(m,2H),7.43-7.31(m,2H),7.23-7.20(m,1H),6.01(s,0.4H),5.92(s,0.6H),4.46(s,2H),3.96-3.85(m,1H),3.74-3.69(m,0.5H),3.62-3.59(m,0.5H),3.54(s,1.5H),3.53(s,1.5H),3.11(s,1.5H),3.10(s,1.5H),2.12-1.96(m,1H),1.92-1.69(m,7H)。
化合物457：甲基6-(1-((3-氨基-3-氧代丙基)磺酰基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
Figure BDA0002341655160005261
将甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(1-((3-甲氧基-3-氧代丙基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯104(130mg，0.222mmol)在密封管中在3M氨(在甲醇中)(3mL，9.00mmol)中的悬浮液在45℃下搅拌过夜。冷却至室温后，将混合物减压浓缩，得到残留物，将其通过制备型HPLC纯化(柱：Waters kinete EVO C18(5μm 21.2*150mm)流动相A：水(0.1％碳酸氢铵)，流动相B：乙腈，UV：214nm，流速：15mL/min，梯度：20％-80％(％B))，得到呈黄色固体的标题化合物457(42.8mg，99.2％纯度，34％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝3.767min，C23H25ClFN5O5S2的计算质量569.1，m/z发现值569.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.55(d,J＝3.6Hz,0.8H),9.18(s,0.2H),8.00-7.99(m,1.8H),7.94-7.93(m,0.2H),7.53(br s,1H),7.45-7.41(m,1H),7.38-7.31(m,1H),7.24-7.19(m,1H),7.04(br s,1H),6.02(s,0.2H),5.92(d,J＝3.2Hz,0.8H),4.00-3.92(m,0.2H),3.78-3.67(m,2.8H),3.53(s,3H),3.30-3.24(m,2H),2.93-2.84(m,2H),2.54-2.52(m,2H),2.12-1.75(m,3.2H),1.64-1.62(m,0.8H)。
化合物462：6-(4-((4-(6-(2-氯-3,4-二氟苯基)-5-(乙氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)-1H-吡唑-1-基)己酸
Figure BDA0002341655160005271
化合物462-1：乙基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(1-((1-(6-乙氧基-6-氧代己基)-1H-吡唑-4-基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
向乙基6-(1-((1H-吡唑-4-基)磺酰基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯461(360mg，80％纯度，0.482mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中的溶液中添加乙基6-溴己酸酯(98mg，99％纯度，0.435mmol)、碳酸钾(340mg，99％纯度，2.44mmol)和碘化钠(66mg，99％纯度，0.436mmol)。在60℃下搅拌过夜后，将混合物用水(30mL)稀释，并用乙酸乙酯(30mL)萃取三次。将合并的有机相用水(20mL)洗涤三次，用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液在真空中浓缩，得到残余物，将其通过制备型HPLC纯化(柱：Waters Xbridge C18(5um 19*150mm)，流动相A：水(0.1％碳酸氢铵)，流动相B：乙腈，UV：214nm，流速：15mL/min，梯度：65％-85％(％B))，得到呈黄色固体的标题化合物462-1(165mg，98.7％纯度，46％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝3.076min，C32H37ClF2N6O6S2的计算质量738.2，m/z发现值739.3[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.18(s,0.3H),7.86-7.81(m,1H),7.78-7.73(m,2H),7.56-7.51(m,0.7H),7.48-7.45(m,0.4H),7.36-7.32(m,0.6H),7.09-7.01(m,2H),6.18(s,0.4H),6.08-6.06(m,0.6H),4.21-4.09(m,4H),4.04-3.85(m,4.4H),3.79-3.69(m,0.6H),2.46-2.35(m,2H),2.34-2.29(m,2H),2.00-1.88(m,4H),1.73-1.66(m,2H),1.55-1.52(m,2H),1.42-1.33(m,2H),1.28-1.23(m,3H),1.12-1.04(m,3H)。
化合物462：6-(4-((4-(6-(2-氯-3,4-二氟苯基)-5-(乙氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)-1H-吡唑-1-基)己酸
在0℃向乙基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(1-((1-(6-乙氧基-6-氧代己基)-1H-吡唑-4-基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯462-1(159mg，98.7％纯度，0.212mmol)在甲醇(2mL)、水(2mL)和四氢呋喃(6mL)中的溶液中添加氢氧化锂一水合物(22mg，0.524mmol)。在室温下搅拌5小时后，将混合物用水(10mL)稀释，用1M盐酸盐水溶液酸化至pH约2，并用乙酸乙酯(15mL)萃取三次。将合并的有机相用水(15mL)、盐水(15mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥，过滤并在真空中浓缩，得到残余物，将其通过C18柱(乙腈:水＝10％至95％)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物462(90mg，纯度97％，58％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝3.907min，C30H33ClF2N6O6S2的计算质量710.2，m/z发现值710.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.41(s,1H),8.07-7.98(m,1.8H),7.94(s,0.2H),7.82(s,1H),7.45(dd,J＝9.2，16.8Hz,1H),7.24-7.15(m,1H),6.01(br s,0.2H),5.91(s,0.8H),4.18(t,J＝6.8Hz,2H),3.92(q,J＝6.8Hz,2H),3.75-3.64(m,2.2H),3.56-3.51(m,0.8H),2.33-2.12(m,4H),2.10-1.97(m,1H),1.92-1.89(m,4H),1.70-1.59(m,0.8H),1.55-1.43(m,2H),1.25-1.14(m,2.2H),1.05-0.95(m,3H)。
化合物463：5-(4-((4-(6-(2-氯-3,4-二氟苯基)-5-(乙氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)-1H-吡唑-1-基)戊酸
Figure BDA0002341655160005281
化合物463-1：乙基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(1-((1-(5-甲氧基-5-氧代戊基)-1H-吡唑-4-基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
在室温下向乙基6-(1-((1H-吡唑-4-基)磺酰基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯461(300mg，75％纯度，0.377mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中的溶液中添加甲基5-溴戊酸酯(67mg，0.344mmol)、碳酸钾(194mg，1.41mmol)和碘化钠(58mg，0.387mmol)。在60℃下搅拌过夜后，将混合物溶于乙酸乙酯(40mL)中，并用水(100mL)洗涤两次。将合并的水层用乙酸乙酯(60mL)萃取两次。将合并的有机层用水(30mL)洗涤两次并且用盐水(30mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到残余物，将其通过制备型HPLC纯化(柱：Gilson Gemini C18(5μm 19*150mm)流动相A：水(0.1％碳酸氢铵)，B：乙腈，UV：214nm，流速15mL/min，梯度：55％-70％(％B))，得到呈黄色固体的标题化合物463-1(150mg，99％纯度，56％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝4.243min，C30H33ClF2N6O6S2的计算质量710.2，m/z发现值710.8[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.64(d,J＝3.6Hz,0.8H),9.18(s,0.2H),8.43-8.42(m,1H),8.04-7.93(m,2H),7.84(d,J＝4.8Hz,1H),7.44(q,J＝8.8Hz,1H),7.22-7.18(m,1H),6.01(s,0.2H),5.91(d,J＝3.2Hz,0.8H),4.20(t,J＝6.8Hz,2H),3.95-3.89(m,2H),3.75-3.65(m,2.3H),3.56(s,3H),3.53-3.49(m,0.7H),2.35-2.30(m,2H),2.26-2.17(m,2H),2.09-2.03(m,1H),1.95-1.77(m,4H),1.66-1.63(m,1H),1.48-1.40(m,2H),1.03-0.96(m,3H)。
化合物463：5-(4-((4-(6-(2-氯-3,4-二氟苯基)-5-(乙氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)-1H-吡唑-1-基)戊酸
向乙基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(1-((1-(5-甲氧基-5-氧代戊基)-1H-吡唑-4-基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯化合物463-1(50mg，99％纯度，0.070mmol)在四氢呋喃(1mL)和乙醇(1mL)中的溶液中添加氢氧化锂水合物(7mg，0.163mmol)在水(0.5mL)中的溶液。在室温下搅拌5小时后，将混合物浓缩，得到残余物，将其用水(10mL)稀释，用1M盐酸盐水溶液(1mL)酸化至pH 4～5，并用乙酸乙酯(20mL)萃取两次。将合并的有机层用水(10mL)洗涤两次并且用盐水(10mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到残余物，将其通过制备型HPLC纯化(柱：Gilson Gemini C18(5μm 19*150mm)流动相A：水(0.1％碳酸氢铵)，B：乙腈，UV：214nm，流速15mL/min，梯度：05％-80％(％B))，得到呈黄色固体的标题化合物463(40mg，99.5％纯度，82％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝3.667min，C29H31ClF2N6O6S2的计算质量696.1，m/z发现值697.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.41(s,1H),8.03-7.94(m,2H),7.83(s,1H),7.43(q,J＝9.2Hz,1H),7.21-7.18(m,1H),6.01(s,0.2H),5.91(s,0.8H),4.20(t,J＝7.2Hz,2H),3.92(q,J＝7.2Hz,2H),3.75-3.65(m,2.2H),3.56-3.50(m,0.8H),2.26-2.17(m,4H),2.09-2.00(m,1H),1.92-1.77(m,4H),1.66-1.63(m,1H),1.45-1.38(m,2H),1.03-0.97(m,3H)。
化合物465：甲基4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-6-(1-((1-(噁唑-2-基甲基)-1H-吡唑-4-基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
在0℃向甲基6-(1-((1H-吡唑-4-基)磺酰基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-3,4-二氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯324(90mg，0.154mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(3mL)中的溶液中添加2-(氯甲基)噁唑(16mg，0.136mmol)、碳酸钾(43mg，0.312mmol)和碘化钠(23mg，0.153mmol)。在室温下在氮气气氛下搅拌过夜后，将混合物用乙酸乙酯(20mL)稀释并用水(15mL)洗涤。将水层用乙酸乙酯(10mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法纯化(石油醚:乙酸乙酯＝3:2)，并且然后进一步通过制备型HPLC纯化(柱：WatersXbridge C18(5μm 19*150mm)流动相A：水(0.1％碳酸氢铵)，流动相B：乙腈，UV：214nm，流速：15mL/min，梯度：20％-95％(％B))，得到呈黄色固体的标题化合物465(45mg，98.6％纯度，43％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝3.869min，C27H24ClF2N7O5S2的计算质量663.1，m/z发现值664.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.20(s,0.3H),7.95(d,J＝3.2Hz,1H),7.84-7.83(m,1H),7.80-7.79(s,1H),7.71(s,1H),7.54(d,J＝2.8Hz,0.6H),7.46(d,J＝2.8Hz,0.4H),7.43(s,0.7H),7.18(s,1H),7.08-7.01(m,2H),6.16(s,0.3H),6.05(d,J＝2.8Hz,0.7H),5.50(s,2H),4.02-3.91(m,2H),3.88-3.85(m,0.3H),3.76-3.70(m,0.7H),3.56(s,2H),3.55(s,1H),2.47-2.40(m,2H),2.32-2.14(m,1H),2.06-1.87(m,2.2H),1.73-1.70(m,0.8H)。
化合物468：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(1-((2-(2-(2-羟基乙氧基)乙氧基)乙基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
Figure BDA0002341655160005302
在室温下向甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(1-((2,2-二甲基-3,3-二苯基-4,7,10-三氧杂-3-硅十二烷-12-基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯467(150mg，0.173mmol)在四氢呋喃(3mL)中的溶液中添加在四氢呋喃中的四丁基氟化铵(0.19mL，0.190mmol)。在室温下搅拌过夜后，将混合物用水(30mL)淬灭，然后用乙酸乙酯(30mL)萃取两次，将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥，过滤并浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝1:2至1:3)纯化，然后进一步通过C18柱(乙腈:水＝54％至70％)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物468(40mg，37％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝3.170min，C26H32ClFN4O7S2的计算质量630.1，m/z发现值631.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.51(d,J＝3.6Hz,0.8H),9.15(s,0.2H),8.00-7.98(m,1.8H),7.93(d,J＝3.2Hz,0.2H),7.43-7.35(m,2H),7.23-7.18(m,1H),6.02(s,0.2H),5.92(d,J＝3.6Hz,0.8H),4.56(t,J＝5.2Hz,1H),3.98-3.91(m,0.2H),3.78-3.65(m,4.8H),3.59-3.53(m,9H),3.47-3.45(m,2H),3.43-3.42(m,2H),2.92-2.84(m,2H),2.12-1.61(m,4H)。
化合物471：5-(4-((4-(6-(2-氯-4-氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)-1H-吡唑-1-基)戊酸
Figure BDA0002341655160005311
化合物471-1：甲基6-(1-((1H-吡唑-4-基)磺酰基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
在室温下向甲基6-(1-((1H-吡唑-4-基)磺酰基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯466(100mg，0.177mmol)和甲基5-氯戊酸酯(27mg，0.177mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中的溶液中添加碳酸钾(122mg，0.884mmol)和碘化钠(27mg，0.177mmol)。在60℃下搅拌过夜后，将混合物用水(20mL)稀释，用乙酸乙酯(20mL)萃取两次。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到残余物，将其通过硅胶柱色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝5:1)纯化，得到标题化合物471-1(115mg，96％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝2.262min，C29H32ClFN6O6S2的计算质量678.2，m/z发现值679.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.87-7.72(m,4H),7.57-7.50(m,1H),7.50-7.40(m,1H),7.17-7.10(m,1H),6.99-6.88(m,1H),6.16(s,0.2H),6.05(s,0.8H),4.19(t,J＝7.2Hz,2H),4.00-3.82(m,3H),3.68(s,3H),3.55(s,3H),2.47-2.33(m,6H),1.99-1.94(m,3H),1.73-1.63(m,3H)。
化合物471：5-(4-((4-(6-(2-氯-4-氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氢嘧啶-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)-1H-吡唑-1-基)戊酸
在0℃向甲基6-(1-((1H-吡唑-4-基)磺酰基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯化合物471-1(112mg，0.165mmol)在甲醇(0.45mL)、水(0.45mL)和四氢呋喃(1.35mL)中的溶液中添加氢氧化锂一水合物(8.0mg，0.190mmol)。在室温下搅拌3小时后，将混合物用水(10mL)稀释，用1M盐酸盐水溶液酸化至pH约2，并用乙酸乙酯(15mL)萃取三次。将合并的有机相用水(15mL)、盐水(15mL)洗涤，经Na2SO4(s)干燥并过滤。将滤液在真空中浓缩，得到残余物，将其通过C18柱(乙腈:水＝10％至95％)纯化，得到呈黄色固体的标题化合物471(53mg，纯度97％，48％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝3.530min，C28H30ClFN6O6S2的计算质量664.1，m/z发现值665.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ8.21(s,1H),7.97-7.87(m,1H),7.80(s,1H),7.78-7.71(m,1H),7.41-7.33(m,1H),7.26-7.19(m,1H),7.08-7.00(m,1H),6.11(s,0.2H),6.05(s,0.8H),4.25(t,J＝7.2Hz,2H),3.95-3.75(m,2.5H),3.70-3.66(m,0.5H),3.54(s,3H),2.46-2.34(m,2H),2.33-2.27(m,2H),2.24-2.12(m,1H),2.09-2.01(m,1H),1.97-1.88(m,3H),1.76-1.66(m,1H),1.63-1.53(m,2H)。
化合物484：甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-6-(1-((2-(2-羟基乙氧基)乙基)磺酰基)哌啶-4-基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯
Figure BDA0002341655160005331
在0℃向甲基6-(1-((2-(2-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)乙氧基)乙基)磺酰基)哌啶-4-基)-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氢嘧啶-5-甲酸酯483(160mg，95％纯度，0.184mmol)在四氢呋喃(2mL)中的溶液中添加滴加在四氢呋喃中的1M四丁基氟化铵(0.4mL，0.400mmol)。在室温搅拌2小时后，将反应混合物用饱和氯化铵水溶液(5mL)和水(5mL)淬灭，然后用乙酸乙酯(10mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经Na2SO4(固体)干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到残余物，将所述残余物通过硅胶柱色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝1:0至30:1)，得到粗产物，将所述粗产物进一步通过制备型HPLC纯化(柱：Water Xbridge C18(5μm 19*150mm)，流动相A：水(0.1％碳酸氢铵)，流动相B：乙腈，UV：214nm，流速：15mL/min，梯度：30％-95％(％B))，得到呈黄色固体的标题化合物484(60.0mg，98.5％纯度，55％产率)。LC-MS(ESI)：RT＝3.803min，C24H28ClFN4O6S2的计算质量586.1，m/z发现值586.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.20(s,0.3H),7.83-7.81(m,1H),7.53-7.52(m,0.7H),7.45-7.44(m,1H),7.29-7.27(m,1H),7.15-7.11(m,1H),6.97-6.88(m,1H),6.18(s,0.3H),6.06(d,J＝2.8Hz,0.7H),4.21-4.13(m,0.3H),3.98-3.89(m,4.7H),3.83-3.77(m,2H),3.65-3.62(m,2H),3.59-3.58(m,3H),3.29-3.24(m,2H),3.09-2.92(m,2H),2.84-2.81(m,0.3H),2.47-2.44(m,0.7H),2.30-2.19(m,0.7H),2.12-2.00(m,1H),1.94-1.84(m,1.6H),1.73-1.69(m,0.7H)。
实例1：HBV组装测定
可以使用基于荧光猝灭的体外组装测定法来测量本发明化合物对HBV衣壳组装的干扰，所述测定法是根据Zlotnick和同事描述的方法开发的(Nature Biotechnology[自然生物技术]2006,24:358)。在典型的测定中，将突变的HBV C150蛋白(氨基酸1-150，C49A，C61A，C107A，150C)克隆到基于T7 RNA聚合酶的表达载体中，在大肠杆菌中表达，并纯化为同质二聚体。将纯化的HBV核心蛋白脱盐并用BODIPY-FL染料进行标记。
在非限制性实施例中，以96孔板形式进行组装测定。组装反应在pH 7.5的50mMHepes缓冲液和150mM NaCl中进行。将化合物与HBV CA蛋白预孵育15分钟，然后通过添加NaCl引发组装反应。使反应在室温下持续1小时。记录并分析DMSO处理的样品和化合物处理的样品之间的荧光变化，并针对组装调节进行分析。
实例2：HBV抑制活性和细胞毒性测定
在感染或转染了HBV的细胞或具有稳定整合的HBV的细胞(例如HepG2.2.15细胞)中确定了本发明化合物对HBV复制的抑制作用以及细胞毒性测定(Sells等人1987)。在此使用的方法如下。
分别针对HBV抑制活性和细胞毒性测定，将HepG2.2.15细胞以40,000个细胞/孔和5,000个细胞/孔的密度接种到2％FBS(胎牛血清)培养基中的96孔板中。接种后，将细胞板在37℃，5％CO2孵育过夜。第二天，添加含化合物的培养基以将细胞处理6天，并在处理中间更新一次培养基。采用八个剂量点，每种化合物稀释3倍，对于HBV抑制活性和细胞毒性测定，化合物的最高浓度分别为10μM和100μM。
化合物处理6天后，向细胞毒性测定板的各孔中分别添加20μl CCK-8(细胞计数试剂盒-8(天津Biolite公司))试剂，将板在37℃，5％CO2孵育2.5小时并且测量450nm波长的吸光度，同时读取630nm波长的吸光度作为参考。
通过q-PCR(定量聚合酶链反应)方法测量由化合物诱导的细胞培养基中的HBVDAN变化。使用QIAamp 96DNA血液试剂盒根据手册提取培养基中的HBV DNA，然后使用下表中的引物和探针通过q-PCR进行定量：
Figure BDA0002341655160005341
EC50和CC50值是由GraphPad Prism软件计算得出的并且是进行多次测量的平均值。表4显示了EC50值低于1μM的那些示例性化合物的EC50和CC50值。其他示例性化合物的EC50值未测量或高于1μM。
表4.活性数据
Figure BDA0002341655160005361
Figure BDA0002341655160005371
本文引用的每一个专利、专利申请和出版物的披露内容据此通过引用以其全文并入本文。
虽然已经参照具体实施例公开了本发明，但是本领域其他技术人员可以在不偏离本发明的真实精神以及范围的情况下设想本发明的其他实施例以及变化。所附权利要求旨在理解为包括所有这类实施例以及等同变化。
Figure IDA0002341655190000011

Claims (15)

1.一种具有式I的化合物
Figure FDA0002341655150000011
包括其任何可能的氘代异构体、立体异构体或互变异构形式，其中：
R1选自芳基或杂芳基，各自任选地被一个或多个卤素取代；
R2选自由以下组成的组：4-7元未被取代的饱和环，3-7元的被取代的饱和环和5-12元稠合的、螺环的或桥联的双环的未被取代或被取代的饱和环，这些饱和环各自任选地包含一个或多个杂原子，并且其中所述被取代的饱和环被一个或多个取代基取代，所述取代基各自独立地选自由以下组成的组：卤素、氧代、羟基、氰基、C1-C3烷基、C1-C3烷氧基、羟基C1-C3烷基或-X-R7；
R3是C1-C4烷基；
R4、R5和R6独立地选自由以下组成的组：氢、C1-C3烷基和卤素；
-X-R7选自由以下组成的组：-SO2-R7、-SO2-R8-(CH2)n-R7、-SO2NR8R7、-NR8S(＝O)(＝NH)-R7、-NR8S(＝O)NR8-R7、-NR8C(＝O)NR8-R7、-S(＝O)(＝NH)NR8-R7、-S(＝O)(＝NH)-R7、-NR8-(CH2)n-SO2-R7、-NR8SO2-NR8R7、-OC(＝O)-R7、-C(＝O)-R7、-(CH2)n-C(＝O)O-R7、-C(＝O)NR8-R7、-NR8C(＝O)-R7、-NR8C(＝O)O-R7、-OC(＝O)NR8-R7和-NR8-R7；
R7和R8各自独立地选自氢或选自取代基，所述取代基选自由以下组成的组：C1-C4烷基、芳基、杂芳基和任选地包含一个或多个杂原子的3-7元饱和环，来自该组的每个这样的取代基可以任选地被一个或多个R9和R10取代；
或R7和R8当与氮相连时可以合在一起形成3-7元饱和环；
R9和R10各自独立地选自-OR11、氧代、任选地被一个或两个R11取代的C1-C4烷基、-NHC(＝O)OR11、-C(＝O)R11、-(CH2)n-C(＝O)OR11、-C(＝O)NH2、-CN、卤素、或苯基；
每个R11独立地是C1-C4烷基、-(CH2)n-OR11或氢；
每个n独立地是0至4的整数；
或其药学上可接受的盐或溶剂化物。
2.根据权利要求1所述的化合物，其中-X-R7表示-SO2-R7、-SO2NH-R7或-C(＝O)O-R7。
3.根据权利要求1或2所述的化合物，其中R4、R5和R6独立地选自氟、氯或溴。
4.根据权利要求3所述的化合物，其中R4和R5中的至少一个是氟并且R6是氢。
5.根据前述权利要求中任一项所述的化合物，其中R1是噻唑基。
6.根据前述权利要求中任一项所述的化合物，其中R2选自包括3-7元饱和环的组，所述饱和环任选地包含一个或多个杂原子并且任选地被一个或多个卤素、氧代、羟基或-X-R7取代。
7.根据前述权利要求中任一项所述的化合物，其中R2选自包括4-6元饱和环的组，所述饱和环任选地包含一个或多个杂原子并且任选地被一个或多个卤素、氧代、羟基或-X-R7取代。
8.根据前述权利要求中任一项所述的化合物，其中R2是任选地包含一个或多个杂原子的5元或6元饱和环，所述环进一步被-X-R7取代。
9.根据权利要求8所述的化合物，其中所述饱和环包含氮或氧。
10.根据前述权利要求中任一项所述的化合物，其中R3是甲基。
11.根据权利要求1所述的化合物，其选自由具有以下式的化合物组成的组：
Figure FDA0002341655150000021
Figure FDA0002341655150000031
Figure FDA0002341655150000051
Figure FDA0002341655150000061
Figure FDA0002341655150000071
Figure FDA0002341655150000081
Figure FDA0002341655150000101
Figure FDA0002341655150000111
12.一种药物组合物，其包含根据权利要求1至11中任一项所述的化合物和药学上可接受的载体。
13.根据权利要求1至11中任一项所述的化合物或根据权利要求12所述的药物组合物，用作药物。
14.根据权利要求1至11中任一项所述的化合物或根据权利要求12所述的药物组合物，用于预防或治疗哺乳动物中的HBV感染。
15.一种产品，其包含(a)如权利要求1至11中任一项所定义的化合物和(b)另一种HBV抑制剂，作为用于在治疗HBV感染中同时、分开或相继使用的组合制剂。
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Families Citing this family (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US11639350B2 (en) 2017-06-27 2023-05-02 Janssen Pharmaceutica Nv Heteroaryldihydropyrimidine derivatives and methods of treating hepatitis B infections
CN112638883A (zh) * 2018-05-08 2021-04-09 爱尔兰詹森科学公司 二氢嘧啶衍生物及其在治疗hbv感染或hbv诱发疾病中的用途
CA3099605A1 (en) * 2018-06-26 2020-01-02 Janssen Sciences Ireland Unlimited Company Dihydropyrimidine derivatives and uses thereof in the treatment of hbv infection or of hbv-induced diseases
US11053235B2 (en) * 2018-08-09 2021-07-06 Janssen Sciences Ireland Unlimited Company Substituted 1,4-dihydropyrimidines for the treatment of HBV infection or HBV-induced diseases
CN114206862A (zh) * 2019-07-31 2022-03-18 杨森科学爱尔兰无限公司 二氢嘧啶衍生物及其在治疗hbv感染或hbv诱发疾病中的用途
CN110483338A (zh) * 2019-08-14 2019-11-22 苏州汉德创宏生化科技有限公司 一种大环类抑制剂中间体环庚烷基磺酰氯的合成方法
WO2023161204A1 (de) * 2022-02-24 2023-08-31 Bayer Aktiengesellschaft Verfahren zur herstellung von cis-4-aminotetrahydrofuran-2-carbonsäureestern

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1305471A (zh) * 1998-04-18 2001-07-25 拜尔公司 二氢嘧啶类化合物
WO2013102655A1 (en) * 2012-01-06 2013-07-11 Janssen R&D Ireland 4,4-disubstituted-1,4-dihydropyrimidines and the use thereof as medicaments for the treatment of hepatitis b
CN103626752A (zh) * 2012-08-24 2014-03-12 广东东阳光药业有限公司 二氢嘧啶类化合物及其在药物中的应用
WO2017011552A1 (en) * 2015-07-13 2017-01-19 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Hepatitis b antiviral agents

Family Cites Families (41)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2001045712A1 (de) 1999-12-22 2001-06-28 Bayer Aktiengesellschaft Arzneimittelkombinationen gegen virale erkrankungen
DE10012823A1 (de) 2000-03-16 2001-09-20 Bayer Ag Arzneimittel gegen virale Erkrankungen
DE10013126A1 (de) 2000-03-17 2001-09-20 Bayer Ag Arzneimittel gegen virale Erkrankungen
JP2010511728A (ja) 2006-12-05 2010-04-15 グラクソスミスクライン・リミテッド・ライアビリティ・カンパニー Ｉｌ−８受容体アンタゴニスト
RU2443703C2 (ru) 2007-06-18 2012-02-27 Саншайн Лейк Фарма Ко., Лтд Бром-фенил замещенные тиазолилдигидропиримидины
GB0715048D0 (en) 2007-08-02 2007-09-12 Glaxo Group Ltd Novel compounds
WO2010069147A1 (zh) 2008-12-17 2010-06-24 张中能 二氢嘧啶类化合物、其组合物及其应用
CN101575318B (zh) 2009-06-25 2012-02-08 中国人民解放军军事医学科学院毒物药物研究所 二氢嘧啶类化合物及其用于制备治疗和/或预防病毒性疾病的药物的用途
WO2013006394A1 (en) 2011-07-01 2013-01-10 Institute For Hepatitis And Virus Research Sulfamoylbenzamide derivatives as antiviral agents against hbv infection
US9487534B2 (en) 2011-08-02 2016-11-08 Scripps Research Institute, A Not-For-Profit Public Benefit Corporation Of California Modulators of virus assembly as antiviral agents
EA037918B1 (ru) 2011-12-21 2021-06-07 Новира Терапьютикс, Инк. Противовирусные агенты против гепатита в
WO2013144129A1 (en) 2012-03-31 2013-10-03 F. Hoffmann-La Roche Ag Novel 4-methyl-dihydropyrimidines for the treatment and prophylaxis of hepatitis b virus infection
CN103664897B (zh) 2012-09-01 2018-04-03 广东东阳光药业有限公司 二氢嘧啶类化合物及其在药物中的应用
CN103664925B (zh) 2012-09-07 2018-01-23 广东东阳光药业有限公司 杂芳基取代的二氢嘧啶类化合物及其在药物中的应用
MA37942B1 (fr) 2012-09-10 2020-01-31 Hoffmann La Roche Hétéroaryldihydropyrimidines d'acide 6-aminé pour le traitement et la prophylaxie d'une infection par le virus de l'hépatite b
CN103664899B (zh) 2012-09-11 2017-06-16 广东东阳光药业有限公司 杂芳基取代的二氢嘧啶类化合物及其在药物中的应用
BR112015015584A2 (pt) 2012-12-27 2017-12-12 Baruch S Blumberg Inst novos agentes antivirais contra infecção por hbv
US9266904B2 (en) 2013-05-17 2016-02-23 Hoffmann-La Roche Inc. 6-bridged heteroaryldihydropyrimidines for the treatment and prophylaxis of hepatitis B virus infection
KR20160077050A (ko) 2013-11-19 2016-07-01 선샤인 레이크 파르마 컴퍼니 리미티드 다이하이드로피리미딘 화합물 및 이의 약제학적 용도
WO2015078391A1 (en) 2013-11-27 2015-06-04 Sunshine Lake Pharma Co., Ltd. Processes for preparing dihydropyrimidine derivatives and intermediates thereof
DK3114128T3 (en) 2014-03-07 2019-03-25 Hoffmann La Roche New 6-fused heteroaryld dihydropyrimidines for the treatment and prophylaxis of hepatitis B virus infection
MX2016012573A (es) 2014-03-28 2018-02-19 Sunshine Lake Pharma Co Ltd Compuestos de dihidropirimidina y su aplicacion en productos farmaceuticos.
EP3150600B1 (en) 2014-05-30 2018-06-27 Qilu Pharmaceutical Co., Ltd. Dihydropyrimido loop derivative as hbv inhibitor
ES2896400T3 (es) 2014-08-01 2022-02-24 Nuevolution As Compuestos activos frente a bromdominios
EP3067915A1 (en) 2015-03-13 2016-09-14 L'universite D'aix-Marseille Method of accumulating ions
KR20170113658A (ko) 2015-03-16 2017-10-12 에프. 호프만-라 로슈 아게 Tlr7 작용제 및 hbv 캡시드 조립 억제제를 사용하는 병용 치료
WO2017064156A1 (en) 2015-10-16 2017-04-20 F. Hoffmann-La Roche Ag Novel 6-fused and 2-heteroaryldihydropyrimidines for the treatment and prophylaxis of hepatitis b virus infection
EP3370759A1 (en) 2015-11-03 2018-09-12 H. Hoffnabb-La Roche Ag Combination therapy of an hbv capsid assembly inhibitor and an interferon
WO2017108630A1 (en) 2015-12-21 2017-06-29 F. Hoffmann-La Roche Ag Combination therapy of an hbsag inhibitor and an hbv capsid assembly inhibitor
AR107633A1 (es) 2016-02-19 2018-05-16 Hoffmann La Roche Procedimiento para la preparación del ácido 4-fenil-5-alcoxicarbonil-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirimidin-6-il-[metil]-3-oxo-5,6,8,8a-tetrahidro-1h-imidazo[1,5a]pirazin-2-il-carboxílico
CN109689059A (zh) 2016-08-24 2019-04-26 豪夫迈·罗氏有限公司 Hbv衣壳组装抑制剂和核苷或核苷酸类似物的组合疗法
TWI670266B (zh) 2016-09-09 2019-09-01 大陸商浙江海正藥業股份有限公司 二氫嘧啶類化合物及其製備方法和用途
EP3970750A1 (en) 2016-09-13 2022-03-23 F. Hoffmann-La Roche AG Combined treatment with a tlr7 agonist and an hbv capsid assembly inhibitor
CA3068128A1 (en) 2017-06-26 2019-01-03 North & South Brother Pharmacy Investment Company Limited Dihydropyrimidine compounds and uses thereof in medicine
US11639350B2 (en) 2017-06-27 2023-05-02 Janssen Pharmaceutica Nv Heteroaryldihydropyrimidine derivatives and methods of treating hepatitis B infections
CN107501257B (zh) 2017-08-17 2020-05-29 山东大学 二氢嘧啶-三氮唑类衍生物及其制备方法与应用
CN112638883A (zh) 2018-05-08 2021-04-09 爱尔兰詹森科学公司 二氢嘧啶衍生物及其在治疗hbv感染或hbv诱发疾病中的用途
CA3099605A1 (en) 2018-06-26 2020-01-02 Janssen Sciences Ireland Unlimited Company Dihydropyrimidine derivatives and uses thereof in the treatment of hbv infection or of hbv-induced diseases
CN108947996B (zh) 2018-07-12 2022-01-18 山东大学 二氢嘧啶-磺酰胺类衍生物及其制备方法与应用
CN113227090A (zh) 2018-12-20 2021-08-06 詹森药业有限公司 杂芳基二氢嘧啶衍生物和治疗乙型肝炎感染的方法
TW202035412A (zh) 2018-12-20 2020-10-01 比利時商健生藥品公司 雜芳基二氫嘧啶衍生物和治療ｂ型肝炎感染之方法

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1305471A (zh) * 1998-04-18 2001-07-25 拜尔公司 二氢嘧啶类化合物
WO2013102655A1 (en) * 2012-01-06 2013-07-11 Janssen R&D Ireland 4,4-disubstituted-1,4-dihydropyrimidines and the use thereof as medicaments for the treatment of hepatitis b
CN104302626A (zh) * 2012-01-06 2015-01-21 爱尔兰詹森研发公司 4,4-二取代的-1,4-二氢嘧啶及其作为治疗乙型肝炎的药物的用途
CN103626752A (zh) * 2012-08-24 2014-03-12 广东东阳光药业有限公司 二氢嘧啶类化合物及其在药物中的应用
WO2017011552A1 (en) * 2015-07-13 2017-01-19 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Hepatitis b antiviral agents

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
PUBCHEM: "Pubchem", 《PUBCHEM》 *

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AU2018291688B2 (en) 2022-02-03
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