CN110787210A - 一种基于膜分离技术制备广金钱草总苷的方法 - Google Patents

一种基于膜分离技术制备广金钱草总苷的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN110787210A
CN110787210A CN201911271050.2A CN201911271050A CN110787210A CN 110787210 A CN110787210 A CN 110787210A CN 201911271050 A CN201911271050 A CN 201911271050A CN 110787210 A CN110787210 A CN 110787210A
Authority
CN
China
Prior art keywords
membrane
desmodium styracifolium
total glycosides
preparing
separation technology
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201911271050.2A
Other languages
English (en)
Inventor
李坤平
杨坤
郭姣
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Guangdong Pharmaceutical University
Original Assignee
Guangdong Pharmaceutical University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Guangdong Pharmaceutical University filed Critical Guangdong Pharmaceutical University
Priority to CN201911271050.2A priority Critical patent/CN110787210A/zh
Publication of CN110787210A publication Critical patent/CN110787210A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/48—Fabaceae or Leguminosae (Pea or Legume family); Caesalpiniaceae; Mimosaceae; Papilionaceae
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/30—Extraction of the material
    • A61K2236/33—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones
    • A61K2236/333—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones using mixed solvents, e.g. 70% EtOH
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/30—Extraction of the material
    • A61K2236/39—Complex extraction schemes, e.g. fractionation or repeated extraction steps
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/50—Methods involving additional extraction steps
    • A61K2236/51—Concentration or drying of the extract, e.g. Lyophilisation, freeze-drying or spray-drying
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/50—Methods involving additional extraction steps
    • A61K2236/53—Liquid-solid separation, e.g. centrifugation, sedimentation or crystallization

Abstract

本发明公开了一种基于膜分离技术制备广金钱草总苷的方法，包括醇提、粗滤、微滤、超滤膜纯化、纳滤膜浓缩、浓缩液干燥处理等步骤。本方法采用膜分离技术，不仅能避免传统植物提取物分离纯化过程繁琐、有机溶剂用量大、能耗高的缺点，且能提高广金钱草总苷的纯化效率及其总苷提取物中芹菜素碳苷类成份的含量。

Description

一种基于膜分离技术制备广金钱草总苷的方法
技术领域
本发明属于膜分离技术领域，具体涉及一种基于膜分离技术制备广金钱草总苷的方法。
背景技术
广金钱草Desmodiumstyracifolium (Osbeck)Merr，豆科马蹄金属植物，又名落地金钱、铜钱草、马蹄香等，主要分布在广东、广西、福建、湖南等省区。常用其地上部分，具有清热利湿、利尿通淋的效用，用于肾炎水肿、尿路结石、尿路感染、胆囊结石、黄疸肝炎等症的医治。食品医药行业常对广金钱草干燥地上部分进行提取分离纯化，生产出含有广金钱草固有特性或活性成份的总苷类提取物，以进行后续的产品开发和生产。
黄酮碳苷是指其糖配基直接连接在C6-C3-C6骨架的黄酮苷类化合物，其大多连接在A环的C-6和C-8位，因母核各异，其种类也不尽相同。近年来，黄酮碳苷的生物活性引起了越来越多的关注。从文献报道来看，芹菜素碳苷和木犀草素碳苷较为常见，其糖配基以葡萄糖、鼠李糖、木糖或阿拉伯糖等居多，通常具有较好的抗炎、保肝、降糖和抗肿瘤等生理活性。芹菜素碳苷类成份在广金钱草总苷中含量较多；其中典型的化合物包括：维采宁-2（Vicenin-2），夏佛塔苷（Schaftoside），异牡荆苷（Isovitexin）等。此类化合物具有抗氧化、抗炎、抗血小板凝聚、抗痉挛、改善功能性胃肠道不适、抗急慢性肝损伤等活性。
目前，广金钱草总苷的提取通常采用下述工艺：原料粗碎、用水或低碳醇溶剂浸泡、加热回流提取或超声提取、过滤和离心、沉淀、浓缩、大孔树脂吸附分离、溶剂萃取等，最后减压蒸发浓缩与溶剂回收、真空干燥或喷雾干燥或冷冻干燥。这种传统提取分离工艺存在提取过程繁琐、有机溶剂用量大、产品得率低、耗能大、污染重、成本高等缺陷。
发明内容
为了克服上述现有技术的不足，本发明的首要目的在于提供一种基于膜分离技术制备广金钱草总苷的方法，该方法不仅能避免传统植物提取物分离纯化过程繁琐、有机溶剂用量大、能耗高的缺点，且能提高广金钱草总苷的纯化效率及其总苷提取物中芹菜素碳苷类成份的含量。
本发明是通过以下技术方案实现：
一种基于膜分离技术制备广金钱草总苷的方法，包括如下步骤：
（1）将广金钱草药材粗碎，按固液比1:10~20加入质量浓度为50~80% 乙醇提取1~2次，
得到提取液，静置；
（2）采用60~90µm烧结金属滤头接真空泵对提取液进行粗滤处理，滤液再以0.2~0.45µm微滤膜过滤，获得微滤液；
（3）选取截留分子量3-10万的超滤膜对微滤液进行超滤处理，获得超滤液；
（4）选用截留分子量在100~1000Da的纳滤膜对超滤液进行浓缩，获得膜浓缩液；
（5）将膜浓缩液干燥处理，得到广金钱草总苷。
本发明先采用60~90µm烧结金属滤头接真空泵对提取液进行粗滤处理，以除去提取液中的细小颗粒；滤液再通过0.2~0.45µm微滤膜过滤以除去悬浮粒子、多糖、蛋白、果胶、纤维等大分子成分，目的是防止悬浮颗粒以及大分子对后续超滤膜造成不可逆的破坏。
本发明在粗滤和微滤后，进一步采用超滤膜进行分离纯化，超滤膜的截留分子量对分离纯化的效果有较大影响。本发明通过研究表明，当分子量>10万，几乎与微滤效果相当，
起不到分离纯化的作用；分子量<3万，不利于一些较大分子量的活性成分的富集。因此，本发明超滤膜的截留分子量优选为3-10万。
本发明在超滤后再选择截留分子量为100~1000Da的纳滤膜对超滤液进行浓缩，以用来去除溶剂或无机盐类，研究表明，本发明的广金钱草总苷在纳滤膜过滤时损失很少，而溶剂膜通量高，膜浓缩效果好。
优选地，步骤（1）中，所述提取方式为加热回流提取或浸提，所述提取的温度为80~95℃，提取时间为1~2h。
优选地，步骤（3）中，所述超滤处理的温度为20-25℃，压力为1.0~3.0MPa，膜通量为50-180L/m2·h。
优选地，步骤（4）中，所述浓缩操作的温度为25-35℃，压力为1.0~5.0 MPa，膜通量在50-120L/m2·h。
优选地，步骤（5）中，所述干燥处理为喷雾干燥或冷冻干燥。
更优选地，所述喷雾干燥的的进风温度设为210~215℃，喷雾空气流量500~540L·h-1；进料温度为25~30℃，抽气机输出80~85%；泵输出10~15%。
更优选地，所述冷冻干燥的冷阱温度-45~-55℃，真空度为0.1~0.2MPa。
本发明与现有技术相比，具有如下有益效果：
本发明工艺基于膜分离技术，包括醇提、粗滤、微滤、超滤膜纯化、纳滤膜浓缩、浓缩液
干燥处理等步骤，避免了传统蒸发浓缩工艺的能耗高的缺点，提高了广金钱草总苷提取物的加工效率；
本发明的膜分离技术在不改变目标产品的特征成份的前提下，可以提高广金钱草总苷部
位中芹菜素碳苷类有效成份的纯度；
本发明的膜分离技术所用的膜精度高，广金钱草中有效成份损失少，主要特征成份维采宁
-2，夏佛塔苷，异牡荆苷的纯度较高；
本发明避免了传统分离纯化工艺中所需的大量有机溶剂，采用膜处理方法，生态环保、能
耗小、提取得率高、工艺简单、分离效率高。
具体实施方式
下面通过具体实施方式来进一步说明本发明，以下实施例为本发明具体的实施方式，但本发明的实施方式并不受下述实施例的限制。
实施例1：
（1）称取0.5kg广金钱草粗碎约为1-2cm，置于10L圆底烧瓶，加入7.5 L 70% 乙醇水溶液后，电热套加热并维持在80-90℃，间歇振摇，浸提时间2h，稍冷，倾倒出一次浸提液；继续将上述广金钱草残渣进行二次浸提，采用固液比1:15，加入70%乙醇水溶液，加热，控制温度在80-90℃，浸取过程中间歇振摇，浸提时间为1.5h，稍冷，倾倒出二次浸提液；合并两次浸提液，静置，过夜；
（2）采用60~90 µm烧结金属滤头接真空泵对上述浸提液进行浸入式粗滤处理，滤液再以0.2 µm微滤膜过滤，获得微滤液，其中固形物含量≥2.5％；
（3）选取截留分子量3万分子量的超滤膜对微滤液进行超滤处理，获得超滤液，其中固形物含量≥1.2％，超滤处理的温度为25℃，压力为2.0MPa，膜通量为100L/m2·h；
（4）选用截留分子量在1000Da纳滤膜对超滤液进行浓缩，获得膜浓缩液，其中固形物含量≥3.2％，浓缩操作的温度为25℃，压力为3.0 MPa，膜通量在80L/m2·h；
（5）将膜浓缩液采用离心浓缩后冷冻干燥，冷冻干燥的冷阱温度-55℃，真空度为0.1MPa，得到广金钱草总苷11.66g。
本实施例对不同膜过滤前后的滤液进行了HPLC 指纹图谱分析，由结果分析表明，膜浓缩保留了绝大部分的活性成分，而纳滤膜处理损失的活性成分很少。
实施例2：
选取截留分子量5万分子量的超滤膜对微滤液进行超滤处理，其余同实施例1，得到广金钱草总苷13.9g。
实施例3：
选取截留分子量10万分子量的超滤膜对微滤液进行超滤处理，其余同实施例1，得到广金钱草总苷15.2g。
实施例4：
选用截留分子量在500Da纳滤膜对超滤液进行浓缩，其余同实施例1，得到广金钱草总苷11.98g。
实施例5：
选用截留分子量在100~300Da纳滤膜对超滤液进行浓缩，其余同实施例1，得到广金钱草总苷12.4g。
对比例1：
（1）称取0.5kg广金钱草粗碎约为1-2cm，置于10L圆底烧瓶，加入7.5 L 70% 乙醇水溶液后，电热套加热并维持在80-90℃，间歇振摇，浸提时间2h，稍冷，倾倒出一次浸提液；继续将上述广金钱草残渣进行二次浸提，采用固液比1:15，加入70%乙醇水溶液，加热，控制温度在80-90℃，浸取过程中间歇振摇，浸提时间为1.5h，稍冷，倾倒出二次浸提液；合并两次浸提液，静置，过夜；
（2）选取截留分子量3万分子量的超滤膜对微滤液进行超滤处理，获得超滤液，其中超滤处理的温度为25℃，压力为2.0MPa，膜通量为100L/m2·h；
（3）将超滤液加入AB-8型大孔树脂，用80%乙醇洗脱，合并洗脱液，减压蒸发浓缩；
（4）将浓缩液冷冻干燥，冷冻干燥的冷阱温度-55℃，真空度为0.1MPa，得到广金钱草总苷10.8g。
对上述实施例获得的广金钱草总苷，用相应的液相色谱-质谱联用技术和高效液相色谱法色谱法进行定性和定量分析，其中主要的化学成份，检测结果如表1。
表1各实施例获得的广金钱草总苷收率及其主要化学成份含量
项目 实施例1 实施例2 实施例3 实施例4 实施例5 对比例1
广金钱草总苷收率 2.33 2.78 3.04 2.40 2.48 2.16
维采宁-2的含量 9.51 9.89 10.23 9.67 9.80 10.47
夏佛塔苷的含量 18.25 19.11 19.69 18.77 18.53 20.13
异牡荆苷的含量 6.84 6.44 7.33 6.91 7.02 7.69
由实施例1~5的结果可以看出，本发明所采用的膜分离方法获得的广金钱草总苷，不仅保留了主要特征成份，且其含量相对粗提物均有大幅度增加，说明其富集纯化效果良好。
另外，由实施例和对比例1的结果可以看出，与传统方法相比，本发明不仅提高了广金钱草总苷的收率，且在保留三种主要特征成分的前提下，减少了大孔树脂分离纯化工序，避免了传统蒸发浓缩工艺的能耗高的缺点，使得整个膜分离纯化工艺更紧凑，能耗低，纯化效率更高。
由实施例1~3也可以看出，随着超滤膜分子量的增加，主要特征成份的相对含量也逐渐增加，考虑到分离纯化效果，本发明超滤膜的截留分子量优选为3-10万。同时由实施例1和4-5也可以看出，随着纳滤膜分子量的增加，广金钱草总苷的收率略有所增加，其主要的活性成分的含量无显著变化，考虑到纳滤膜的溶剂膜通量，截留分子量100~1000Da的纳滤膜均能满足本发明所述工艺要求。

Claims (8)

1.一种基于膜分离技术制备广金钱草总苷的方法，其特征在于，包括如下步骤：
（1）将广金钱草药材粗碎，按固液比1:10~20加入质量浓度为50~80% 乙醇提取1~2次，
得到提取液，静置；
（2）采用60~90µm烧结金属滤头接真空泵对提取液进行粗滤处理，滤液再以0.2~0.45µm微滤膜过滤，获得微滤液；
（3）选取截留分子量3-10万的超滤膜对微滤液进行超滤处理，获得超滤液；
（4）选用截留分子量在100~1000Da的纳滤膜对超滤液进行浓缩，获得膜浓缩液；
（5）将膜浓缩液干燥处理，得到广金钱草总苷。
2.根据权利要求1所述的一种基于膜分离技术制备广金钱草总苷的方法，其特征在于，步骤（1）中，所述提取方式为加热回流提取或浸提。
3.根据权利要求2所述的一种基于膜分离技术制备广金钱草总苷的方法，其特征在于，步骤（1）中，所述提取的温度为80~95℃，提取时间为1~2h。
4.根据权利要求1所述的一种基于膜分离技术制备广金钱草总苷的方法，其特征在于，步骤（3）中，所述超滤处理的温度为20-25℃，压力为1.0~3.0MPa，膜通量为50-180L/m2·h。
5.根据权利要求1所述的一种基于膜分离技术制备广金钱草总苷的方法，其特征在于，步骤（4）中，所述浓缩操作的温度为25-35℃，压力为1.0~5.0 MPa，膜通量在50-120L/m2·h。
6.根据权利要求1所述的一种基于膜分离技术制备广金钱草总苷的方法，其特征在于，步骤（5）中，所述干燥处理为喷雾干燥或冷冻干燥。
7.根据权利要求6所述的一种基于膜分离技术制备广金钱草总苷的方法，其特征在于，所述喷雾干燥的的进风温度设为210~215℃，喷雾空气流量500~540 L·h-1；进料温度为25~30℃，抽气机输出80~85%；泵输出10~15%。
8.根据权利要求6所述的一种基于膜分离技术制备广金钱草总苷的方法，其特征在于，所述冷冻干燥的冷阱温度-45~-55℃，真空度为0.1-0.2MPa。
CN201911271050.2A 2019-12-12 2019-12-12 一种基于膜分离技术制备广金钱草总苷的方法 Pending CN110787210A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201911271050.2A CN110787210A (zh) 2019-12-12 2019-12-12 一种基于膜分离技术制备广金钱草总苷的方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201911271050.2A CN110787210A (zh) 2019-12-12 2019-12-12 一种基于膜分离技术制备广金钱草总苷的方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN110787210A true CN110787210A (zh) 2020-02-14

Family

ID=69448059

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201911271050.2A Pending CN110787210A (zh) 2019-12-12 2019-12-12 一种基于膜分离技术制备广金钱草总苷的方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN110787210A (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114414670A (zh) * 2021-10-29 2022-04-29 柳州市妇幼保健院 一种马蹄金指纹图谱的建立方法及其指纹图谱

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102627679A (zh) * 2012-04-19 2012-08-08 南京泽朗医药科技有限公司 一种从广金钱草中制备夏佛塔苷的方法
CN104926897A (zh) * 2015-06-19 2015-09-23 武汉光谷人福生物医药有限公司 从广金钱草中提取分离新夏佛塔苷的方法和系统
CN104945391A (zh) * 2015-06-19 2015-09-30 武汉光谷人福生物医药有限公司 从广金钱草中提取分离夏佛塔苷的方法和系统
CN105085498A (zh) * 2015-06-19 2015-11-25 武汉光谷人福生物医药有限公司 从广金钱草中提取分离异牡荆素的方法和系统
CN109568352A (zh) * 2018-12-18 2019-04-05 合肥信达膜科技有限公司 一种中药药液中有效成分的膜提取工艺

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102627679A (zh) * 2012-04-19 2012-08-08 南京泽朗医药科技有限公司 一种从广金钱草中制备夏佛塔苷的方法
CN104926897A (zh) * 2015-06-19 2015-09-23 武汉光谷人福生物医药有限公司 从广金钱草中提取分离新夏佛塔苷的方法和系统
CN104945391A (zh) * 2015-06-19 2015-09-30 武汉光谷人福生物医药有限公司 从广金钱草中提取分离夏佛塔苷的方法和系统
CN105085498A (zh) * 2015-06-19 2015-11-25 武汉光谷人福生物医药有限公司 从广金钱草中提取分离异牡荆素的方法和系统
CN109568352A (zh) * 2018-12-18 2019-04-05 合肥信达膜科技有限公司 一种中药药液中有效成分的膜提取工艺

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
陈雪婷等: "星点设计-效应面法优选广金钱草提取工艺", 《中成药》 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114414670A (zh) * 2021-10-29 2022-04-29 柳州市妇幼保健院 一种马蹄金指纹图谱的建立方法及其指纹图谱
CN114414670B (zh) * 2021-10-29 2024-05-07 柳州市妇幼保健院 一种马蹄金指纹图谱的建立方法及其指纹图谱

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN100503626C (zh) 应用膜分离技术从肉苁蓉中生产含有苯乙醇苷的原料及其制备方法
CN102068484B (zh) 从柿叶提取含量为85-98%的柿叶黄酮的方法
CN106866759B (zh) 从罗汉果甜甙脱色树脂柱排出的废液中生产罗汉果黄酮的工艺
CN104086614A (zh) 一种适用于工业生产的罗汉果提取物的制备方法
CN101701013A (zh) 一种用水作溶剂从松树皮中提取原花青素的方法
CN101669980B (zh) 从淫羊藿中提取分离淫羊藿苷及总黄酮的方法
CN102198049A (zh) 中药制取方法及其装置
CN107337934A (zh) 一种乌饭树叶色素的提取方法
CN103224491A (zh) 以水为溶媒提取高纯葛根素的方法
CN110787210A (zh) 一种基于膜分离技术制备广金钱草总苷的方法
CN112266399B (zh) 一种淫羊藿提取物的高纯度分离提取方法
CN102784193A (zh) 采用耦合技术制备红芪提取物的方法
CN106214838B (zh) 一种利用微通道萃取装置从植物多糖水提液中回收总黄酮浸膏的方法
CN107674066A (zh) 一种从广金钱草中提取异夏佛塔苷的方法
CN107556194A (zh) 从金钱草中提取绿原酸的方法
CN113440547B (zh) 采用大孔树脂串联动态轴向压缩柱分离纯化大蓟总苷的方法
CN102579564A (zh) 藏茵陈有效部位提取物的制备方法
CN111187244B (zh) 一种从芹菜中提取芹菜素的新方法
CN107840844A (zh) 一种从广金钱草中提取夏佛塔苷的方法
CN106946833A (zh) 一种从猫须草中提取高纯度橙黄酮的方法
CN108299542B (zh) 一种从油茶枯中综合提取皂素及多酚的方法
CN104193795B (zh) 一种甘草酸联产甘草浸膏和低酸甘草霜的水氨循环生产方法
CN110831953B (zh) 从淫羊藿提取物中分离纯化淫羊藿苷的方法
CN102391344A (zh) 一种从苦玄参叶中制备苦玄参苷ia的方法
CN105420293A (zh) 中药虎杖提取液中分离纯化白藜芦醇的方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20200214

RJ01 Rejection of invention patent application after publication