CN110749681A - 一种中药甘草的质量评价方法及其应用 - Google Patents

一种中药甘草的质量评价方法及其应用 Download PDF

Info

Publication number
CN110749681A
CN110749681A CN201911132222.8A CN201911132222A CN110749681A CN 110749681 A CN110749681 A CN 110749681A CN 201911132222 A CN201911132222 A CN 201911132222A CN 110749681 A CN110749681 A CN 110749681A
Authority
CN
China
Prior art keywords
liquorice
quality evaluation
honey
licorice
raw
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201911132222.8A
Other languages
English (en)
Other versions
CN110749681B (zh
Inventor
周倩
周蒙
蒋海强
石典花
戴衍朋
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Second Hospital of Shandong University
Original Assignee
Shandong Academy of Chinese Medicine
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Shandong Academy of Chinese Medicine filed Critical Shandong Academy of Chinese Medicine
Priority to CN201911132222.8A priority Critical patent/CN110749681B/zh
Publication of CN110749681A publication Critical patent/CN110749681A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN110749681B publication Critical patent/CN110749681B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
    • G01N30/06—Preparation
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/50—Conditioning of the sorbent material or stationary liquid
    • G01N30/52—Physical parameters
    • G01N30/54—Temperature
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/62—Detectors specially adapted therefor
    • G01N30/72—Mass spectrometers
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N2030/022—Column chromatography characterised by the kind of separation mechanism
    • G01N2030/025—Gas chromatography
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
    • G01N30/06—Preparation
    • G01N2030/062—Preparation extracting sample from raw material

Landscapes

  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)

Abstract

本发明涉及一种甘草的质量评价方法及其应用，属于中药技术领域。本发明利用甘草的气味特征，采用气相色谱‑离子迁移质谱（GC‑IMS）建立了一种可快速对甘草做出鉴别的质量评价方法，同时还可通过图谱行为的不同达到区分生甘草和炙甘草的目的。

Description

一种中药甘草的质量评价方法及其应用
技术领域
本发明涉及一种中药甘草的质量评价方法及其应用，属于中药技术领域。
背景技术
甘草为豆科植物甘草Glycyrrhiza uralensis Fisch.、胀果甘草Glycyrrhizainflate Bat.或光果甘草Glycyrrhiza glabra L.的干燥根及根茎，为临床最常用的传统中药之一，素有“十方九草”之称。甘草在临床上应用规格主要有生甘草和炙甘草两种。生品以清热解毒、润肺祛痰为主，蜜炙后主要功效则为补脾和胃，益气复脉。炮制前后甘草功效和药理作用发生了较大的变化，因此对甘草有效的质量控制和对生炙甘草进行快速区分是很关键的。国内外对甘草成分和质量评价研究多针对黄酮和三萜类成分展开，具体方法包括UV、多成分含量测定、HPLC指纹图谱研究，HPLC-MS分析等等，可为评价其质量提供一定的参考。但是由于中药成分复杂，药效物质基础不明确、使得质控指标往往与质量、药效并不正相关或并不相关。同时上述方法由于存在提取和检测过程繁琐或耗时长或缺乏高灵敏度等各方面原因在应用起来会受到很大的限制。此外，甘草蜜炙过程采用文火加工，蜜炙后，可以表征其药效作用物质基础的化学成分并不明显，如何分别对二者做出针对性的质量评价和区分，存在较大的困难。
中药传统的质量评价方法包括性状、色泽、气味等等，因为其主观性强，不好量化，逐渐为现代研究所摒弃，但是其作为几千年经验的积累，对现代质量评价的指导意义不容置疑，因此在中药质量评价不能一味追求技术先进性，还应与传统质量评价指标有机结合起来，才能更加的具有指导意义和实际价值。甘草具有豆腥气，微甜而特殊，该特征是鉴别甘草质量优劣的主要特征之一，传统上更是将“豆腥气浓”作为优级饮片的必备特性。而甘草经蜜炙后该“豆腥气”消失。利用此特性对甘草进行质量评价，并对生、炙甘草饮片做出区分，可以实现与传统质量评价方法有效的结合和统一，更真实的对饮片质量做出评价。尤其是在目前研究尚无法阐明甘草药效物质基础的前提下，将传统质量评价特性结合现代科学技术对其进行质量评价是最有效的途径之一。
发明内容
本发明利用甘草的气味特征，采用气相色谱-离子迁移质谱（GC-IMS）技术建立了一种可快速对甘草做出鉴别的质量评价方法，同时还可通过图谱行为的不同达到区分生甘草和炙甘草的目的。
一种中药甘草的质量评价方法，包括以下步骤：
（1）饮片粉碎，过筛；
（2）甘草粗粉孵化后，经顶空进样用气相色谱-离子迁移质谱GC-IMS进行测试；
（3）进行生、炙甘草的区分。
所述的步骤（2）的气相色谱条件为：载气/漂移气：氮气；载气流量：0-2min，2mL/min；2-10min，2-20mL/min，10-20min，20 -100mL/min；20-30min，100-150mL/min；漂移气流量：150mL/min；柱温：60℃；IMS温度：45℃；进样针温度：85℃；进样体积：500μL。
所述的步骤（3）的生甘草中质量评价指标：己酸乙酯-二聚体ethyl hexanoate-D、2-庚醇2-heptanol、1-辛烯-3-醇-单体1-octen-3-ol-M、1-己醇1-hexanol、2-己烯-1-醇-单体2-hexen-1-ol-M。
所述的步骤（3）的炙甘草质量评价指标成分：苯乙醛-单体/二聚体phenylacetaldehyde-M/-D、糠醛-二聚体:Furfurol-D、5-甲基糠醛-单体/二聚体5-methylfurfural-M/-D、2-乙酰吡啶2-Acetylpyridine、2-乙酰吡嗪2-Acetylpyrazine、2-呋喃甲醇2-furanmethanol。
上述方法可以用于评价甘草的质量，并区分生炙甘草饮片。
本发明的有益效果：
本发明根据甘草具豆腥气的性状特征利用气相色谱-离子迁移质谱对甘草进行质量评价，并用于区分生炙甘草饮片。附图说明
图1 为甘草饮片GC-IMS图谱；1-23为生甘草；24-46为炙甘草；
图2 为甘草生品炙品组PCA散点图；1为生甘草 2为炙甘草；
图3 为GC-MS总离子流色谱图；A 生甘草；B炙甘草；
图4 为甘草HPLC特征图谱；A 生甘草；B 炙甘草。
具体实施方式
实施例1
采用气相色谱-离子迁移质谱（GC-IMS）分别对多批次生甘草和炙甘草饮片进行检测。
甘草（炙甘草）粗粉80℃孵化20分钟，经顶空进样用气相色谱-离子迁移质谱GC-IMS进行测试；
气相色谱条件为：载气/漂移气：氮气；载气流量：0-2min，2mL/min；2-10min，2mL/min-20mL/min，10-20min，20mL/min-100mL/min；20-30min，100mL/min-150mL/min；漂移气流量：150mL/min；柱温：60℃；IMS温度：45℃；进样针温度：85℃；进样体积：500μL。GC-IMS结果见图1。
采用软件内置的NIST数据库和IMS数据库可对物质进行定性分析。进一步采用Dynamic PCA（动态主成分分析）插件，选择生炙样品中的峰强差异较大（分布在平均值±σ以外）的成分进行统计。
通过统计，23批生甘草中均可检测到己酸乙酯-二聚体（1号，ethyl hexanoate-D）、2-庚醇（2号，2-heptanol）、1-辛烯-3-醇-单体（3号，1-octen-3-ol-M）、1-己醇（4号，1-hexanol）、2-己烯-1-醇-单体（5号，2-hexen-1-ol-M）成分，另有6、7号成分为未知，但也可通过图谱行为对比作为质量评价指标。图谱中上述指标成分综合颜色深浅程度（颜色越深表示浓度越大）与甘草的“豆腥气”的气味特征表现出明显的相关性。
23批炙甘草中苯乙醛-单体/二聚体（16号/17号，phenylacetaldehyde-M/-D）、糠醛-二聚体（18号，Furfurol-D）、5-甲基糠醛-单体/二聚体（19号/20号，5-methylfurfural-M/-D）、2-乙酰吡啶（21号，2-Acetylpyridine）、2-乙酰吡嗪（22号，2-Acetylpyrazine）、2-呋喃甲醇（23号，2-furanmethanol），另8、9、10、11、12、13、14、15成分暂时未知，但也可通过图谱行为对比作为质量评价指标。
选择上述差异峰进行PCA分析，可以将生甘草与炙甘草进行很好的区分，见图2。
甘草专属性成分中：己酸乙酯具有曲香、菠萝香型的香气；1-辛烯-3-醇具有蘑菇、薰衣草、玫瑰和干草香气。1-己醇具有水果芬芳香气。2-己烯-1-醇具有强烈末成熟果实气味。在上述成分共同作用下， 出现可表征甘草区别于炙甘草的豆腥气的性状特征。
对比例1
取甘草粉末100 g（炙甘草按照得率称取110 g），分别置圆底烧瓶中，各加7倍量的蒸馏水浸泡1 h后于挥发油提取器上蒸馏6 h。后将挥发油提取器中油和水移入分液漏斗中，用水10 mL分次洗涤容器，并入分液漏斗中。用乙酸乙酯强力振摇提取3次，每次5 mL，合并乙酸乙酯液，定容至50 mL。精密吸取1 mL置25 mL量瓶中，定容至刻度。加无水硫酸钠3 g吸水干燥，冷藏备用。
气相色谱条件为：色谱柱型RESTEK Rxi-5ms毛细管柱（30 m×0.25 mm, 0.25 μm），进样量1 μL，升温程序：40.0 ℃，保持5 min，以7 ℃·min-1升温至170.0 ℃，保持40min，以2.0 ℃·min-1升温至220 ℃，以5.0 ℃·min-1升温至280 ℃。流量1.00 mL·min-1，载气：氦气。
质谱条件：离子源：电轰击电离（EI）源；分流比29∶1，EI电离源70 eV，离子源温度200℃；接口温度：280 ℃；溶剂延时：3.50 min；检测器电压0.80 kv；灯丝发射电流750 μA，倍增器电压1200 V；m/z扫描范围为50~500 amu。
定性分析方法:按上述GC-MS分析条件对甘草生品和蜜炙品进行分析测定，扣除背景峰，得到生、炙甘草样品的总离子流色谱图，如图3所示。对总离子流色谱图中的各峰经质谱扫描后得到质谱图。结果可见甘草蜜炙后，挥发性成分在组成和含量上均发生了非常明显的变化。
该法通过提取挥发油，对甘草饮片进行质量分析。首先提取得到的挥发油成分复杂，无法明确豆腥气的物质基础。再者该法虽可明显区分甘草和炙甘草饮片，但提取过程耗时长，合计需要8-10h；处理过程较复杂，挥发油得率低，尤其是炙甘草提取6h后，仅有零星油花，经过后期乙酸乙酯反复处理，导致测定结果重复性差，很难对甘草饮片质量做出较为真实可信的评价。气相色谱-离子迁移质谱与该方法相比工艺简单，结果重复性好。且与挥发油进行分析相比，直接采集气味进行分析，能更加真实的反映甘草饮片的气味特征。
对比例2
取甘草（炙甘草）中粉2 g，精密加入50％甲醇25 mL，称定重量，超声提取30 min，取出，放冷，再称重，补足重量，摇匀，滤过，取续滤液，经0.45 μm滤膜过滤，即得。色谱条件：Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱（4.6×250mm,5μm），柱温30℃，流速0.8 mL·min-1，进样量10μL。流动相由 0.2%甲酸水溶液（A）-乙腈（B）组成，梯度洗脱程序:0～10min，15%～25%B；10～20.3 min，25%～0% B；20.3～70 min，30%～70% B；70～75 min，70%～15%B。检测波长254nm。
本法提取过程与水蒸气提取挥发油相比操作简单，特征图谱检测成分种类也相对较多，但是成分与药效是否相关仍是未知，中药的质量控制需以效应成分的辨识和确认为基础，只有科学合理的效应成分才是保证中药安全有效的前提。此外由于蜜炙采用文火加热，经蜜炙加工后，化学成分变化并不明显，无法对生甘草和炙甘草饮片做出针对性的质量评价。

Claims (5)

1.一种中药甘草的质量评价方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）饮片粉碎，过筛；
（2）甘草粗粉80℃孵化10-30分钟，经顶空进样用气相色谱-离子迁移质谱GC-IMS进行测试；
（3）进行生、炙甘草的区分。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的步骤（2）的气相色谱条件为：载气/漂移气：氮气；载气流量：0-2min，2mL/min；2-10min，2-20mL/min，10-20min，20 -100mL/min；20-30min，100-150mL/min；漂移气流量：150mL/min；柱温：60℃；IMS温度：45℃；进样针温度：85℃；进样体积：500μL。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的步骤（3）的生甘草中质量评价指标：己酸乙酯-二聚体ethyl hexanoate-D、2-庚醇2-heptanol、1-辛烯-3-醇-单体1-octen-3-ol-M、1-己醇1-hexanol、2-己烯-1-醇-单体2-hexen-1-ol-M。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的步骤（3）的炙甘草质量评价指标成分：中苯乙醛-单体/二聚体phenylacetaldehyde-M/-D、糠醛-二聚体:Furfurol-D、5-甲基糠醛-单体/二聚体5-methylfurfural-M/-D、2-乙酰吡啶2-Acetylpyridine、2-乙酰吡嗪2-Acetylpyrazine、2-呋喃甲醇2-furanmethanol。
5.权利要求1所述的方法用于评价甘草的质量，并区分生炙甘草饮片。
CN201911132222.8A 2019-11-19 2019-11-19 一种中药甘草的质量评价方法及其应用 Active CN110749681B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201911132222.8A CN110749681B (zh) 2019-11-19 2019-11-19 一种中药甘草的质量评价方法及其应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201911132222.8A CN110749681B (zh) 2019-11-19 2019-11-19 一种中药甘草的质量评价方法及其应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN110749681A true CN110749681A (zh) 2020-02-04
CN110749681B CN110749681B (zh) 2022-01-07

Family

ID=69283683

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201911132222.8A Active CN110749681B (zh) 2019-11-19 2019-11-19 一种中药甘草的质量评价方法及其应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN110749681B (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111579664A (zh) * 2020-05-20 2020-08-25 山东省中医药研究院 一种基于气味识别鉴定侧柏炭炮制质量的方法和应用

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20060062734A1 (en) * 2004-09-20 2006-03-23 Melker Richard J Methods and systems for preventing diversion of prescription drugs
CN101829261A (zh) * 2010-05-14 2010-09-15 山东省中医药研究院 一种治疗银屑病的中药及其制备方法和质量控制方法
CN109381654A (zh) * 2018-06-01 2019-02-26 陕西中医药大学 一种参苓白术散的制备
CN109580849A (zh) * 2019-01-25 2019-04-05 中国检验检疫科学研究院 一种测定中药口服液中指标性成分的方法

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20060062734A1 (en) * 2004-09-20 2006-03-23 Melker Richard J Methods and systems for preventing diversion of prescription drugs
CN101829261A (zh) * 2010-05-14 2010-09-15 山东省中医药研究院 一种治疗银屑病的中药及其制备方法和质量控制方法
CN109381654A (zh) * 2018-06-01 2019-02-26 陕西中医药大学 一种参苓白术散的制备
CN109580849A (zh) * 2019-01-25 2019-04-05 中国检验检疫科学研究院 一种测定中药口服液中指标性成分的方法

Non-Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
CAROLIN S等: "Ion Mobility Spectrometry as a Potential Tool for Flavor Control in Chocolate Manufacture", 《FOODS》 *
MOHAMMADREZA K等: "Determination of ochratoxin A in licorice root using inverse ion mobility spectrometry", 《TALANTA》 *
房康等: "液相色谱⁃电喷雾电离⁃离子迁移谱联用法测定中药口服液中7种指标性成分", 《色谱》 *
朱丽娜等: "基于气相离子迁移谱检测的轮南白杏气调包装果实采后风味物质变化", 《现代食品科技》 *
段启: "《中药饮片生产技术》", 31 August 2017, 广东高等教育出版社 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111579664A (zh) * 2020-05-20 2020-08-25 山东省中医药研究院 一种基于气味识别鉴定侧柏炭炮制质量的方法和应用
CN111579664B (zh) * 2020-05-20 2022-04-22 山东省中医药研究院 一种基于气味识别鉴定侧柏炭炮制质量的方法和应用

Also Published As

Publication number Publication date
CN110749681B (zh) 2022-01-07

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Kang et al. Identification and quantification of key odorants in the world’s four most famous black teas
CN103789094A (zh) 一种从沉香木屑中提取沉香精油的方法
CN103076411A (zh) 一种测定茶叶中香气组分的分析方法
Wang et al. Comparative analysis of essential oil components in Pericarpium Citri Reticulatae Viride and Pericarpium Citri Reticulatae by GC–MS combined with chemometric resolution method
CN108645940A (zh) 一种烟草香味成分萃取方法
CN111751465B (zh) 甘草抗氧化活性成分的快速定量筛选方法及其应用
Wang et al. Effects of different steeping temperatures on the leaching of aroma components in black tea by SPME–GC–MS coupled with chemometric method
CN110749681B (zh) 一种中药甘草的质量评价方法及其应用
CN112710765A (zh) 一种栀子药材的指纹图谱检测方法及其应用
CN110082446B (zh) 一种姜黄质量检测方法
Ye et al. Rapid analysis of the essential oil of Acorus tatarinowii Schott by microwave distillation, SPME, and GC-MS
CN107238666B (zh) 一种刺柏挥发性成分的gc-ei/ms分析方法
TWI526685B (zh) 鑑定牛樟之方法
CN105738505A (zh) 芫荽中挥发性香料成分的检测方法
CN112213429B (zh) 一种加热不燃烧卷烟特征香气组分的分析方法
CN106353413B (zh) 顶空固相微萃取-气相色谱质谱联用检测蚕蛹香气的方法
Wesołowska et al. GC-MS analysis of lemon catnip (Nepeta cataria L. var. citriodora Balbis) essential oil
CN112684059A (zh) 一种基于uplc-esi-ms检测杜鹃兰假鳞茎化学成分的方法
CN102706999B (zh) 延胡索水溶性非生物碱类化合物的分析检测方法
KR20170055613A (ko) 인삼 시료의 더덕, 도라지 또는 이들의 혼합물의 혼입 여부를 판별하는 방법
CN111650304A (zh) 一种快速筛查硫熏款冬花的方法
CN104359987A (zh) 一种中药材成分的快速高效溶出与溶出成分的分析鉴定方法
CN110554124A (zh) 一种栀子配方颗粒指纹图谱的测定方法
CN112147250B (zh) 一种当归酒中44种有效成分的UPC2-PDA-Q-Tof/MS检测方法
Chen et al. Profile of the Volatile Aroma in Bergamot by Comprehensive Two-Dimensional Gas Chromatography Quadrupole Time-of-Flight Mass Spectrometry/Olfactometry

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
CB03 Change of inventor or designer information
CB03 Change of inventor or designer information

Inventor after: Zhou Meng

Inventor after: Zhou Qian

Inventor after: Jiang Haiqiang

Inventor after: Shi Dianhua

Inventor after: Dai Yanpeng

Inventor before: Zhou Qian

Inventor before: Zhou Meng

Inventor before: Jiang Haiqiang

Inventor before: Shi Dianhua

Inventor before: Dai Yanpeng

TA01 Transfer of patent application right
TA01 Transfer of patent application right

Effective date of registration: 20211215

Address after: 247 Beiyuan street, Jinan City, Shandong Province

Applicant after: THE SECOND HOSPITAL OF SHANDONG University

Address before: 250014, swallow Road, Lixia District, Ji'nan, Shandong, 7, Shanxi

Applicant before: SHANDONG ACADEMY OF CHINESE MEDICINE

GR01 Patent grant
GR01 Patent grant