CN105738505A - 芫荽中挥发性香料成分的检测方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种芫荽中挥发性香料成分的检测方法，该检测方法包括样品提取、定性分析、定量测定、结果分析和结果换算，其中样品提取是将芫荽采用植物油进行提取，定性分析是采用顶空固相微萃取与气相色谱?质谱联用技术进行分析。本发明的检测方法实现了对芫荽提取物中低含量挥发性成分的浓缩富集，操作时间短，样品量小，选择性高，分离能力强，可高效无污染的提取芫荽中的挥发性成分。
Description
技术领域
本发明属于分析化学与食品检测领域，具体涉及一种芫荽中挥发性香料成分的检测方法。
背景技术
芫荽含有丰富的营养成分和保健成分，传统中医认为，芫荽性温味甘，能健胃消食，发汗透疹，利尿通便，驱风解毒等，主要用于治疗麻疹，消化不良、感冒风寒、流行性感冒、发热头痛、痢疾下血，还可以治疗高血压，外用有镇痛效果，还对某些食物中毒有解毒作用。其芫荽茎叶香气柔和，是人们饮食中最常用的调料，也是一种理想的具有保健功能的食用辛香原料，深受人们的喜爱，所以开发一种芫荽香料调味油并建立一套完整的芫荽挥发性成分的检测方法有着很好的开发应用前景。
发明内容
本发明要解决的技术问题是克服现有技术的不足，提供一种操作时间短、样品量小、选择性高、分离能力强、可高效无污染的提取芫荽中低含量挥发性成分的芫荽中挥发性香料成分的检测方法。
为解决上述技术问题，本发明采用以下技术方案：
一种芫荽中挥发性香料成分的检测方法，包括以下步骤：
(1)样品提取：将芫荽采用植物油进行提取，得到待测芫荽提取物样品；
(2)定性分析：采用顶空固相微萃取与气相色谱-质谱联用技术对待测芫荽提取物样品进行定性分析；
(3)定量测定：保持与步骤(2)中定性分析相同的气相色谱条件，通过标准曲线法对待测芫荽提取物样品中主成分癸醛进行定量分析；
(4)结果分析：通过精密度实验、样品回收率实验验证步骤(3)定量测定分析方法的准确性；
(5)结果换算：根据标准曲线法，计算出癸醛含量，并计算出芫荽提取率；
标准曲线A＝bC+a；W＝[(A-a)×V1×10-6]/(b×M总×W1)；
式中，A为峰面积，a、b为相关系数，C为癸醛在样品中浓度μg/mL，V1为植物油体积数mL，W1为癸醛所占芫荽提取物总含量面积百分数，M总为芫荽质量g，W为芫荽提取率。
上述的芫荽中挥发性香料成分的检测方法中，优选的，所述步骤(2)中，所述待测芫荽提取物样品的顶空固相微萃取的萃取温度为50℃～65℃，萃取时间为25min～35min，富集有待测芫荽提取物样品的萃取针在气相色谱-质谱联用仪的进样口解析时间为3min～5min。
上述的芫荽中挥发性香料成分的检测方法中，优选的，所述步骤(2)的气相色谱-质谱联用技术中，气相色谱的进样口温度为230℃～250℃，采用程序升温，程序升温的初始温度为40℃～60℃，程序升温的速度为3℃/min～7℃/min，程序升温至240℃～260℃。
上述的芫荽中挥发性香料成分的检测方法中，优选的，所述步骤(2)的气相色谱-质谱联用技术中，气相色谱采用的载气为氦气，以1.0mL/min～2mL/min的恒流模式进行色谱分离，分流比为1∶1～5，进样量为1μL～10μL。
上述的芫荽中挥发性香料成分的检测方法中，优选的，所述步骤(2)的气相色谱-质谱联用技术中，质谱单元的离子源采用EI离子源模式，离子源电压为70eV～100eV，离子源温度为230℃～260℃。
上述的芫荽中挥发性香料成分的检测方法中，优选的，所述步骤(1)中，所述样品提取包括以下过程：将芫荽与植物油混合并捣碎，经超声波萃取和压滤后，得到待测芫荽提取物样品。
上述的芫荽中挥发性香料成分的检测方法中，优选的，所述芫荽与植物油的质量体积比为40g～60g∶60mL～90mL。
上述的芫荽中挥发性香料成分的检测方法中，优选的，所述超声波萃取的工艺条件为：超声温度20℃～50℃，超声功率100W～400W，超声时间30min～100min。
本发明的创新主要在于：
1、采用植物油直接提取芫荽香料成分；2、利用顶空固相微萃取技术提取芫荽中的挥发性成分；3、采用标准曲线法，建立了一套完整地检测芫荽挥发性成分的定量分析方法。
与现有技术相比，本发明的优点在于：
1、本发明采用顶空固相微萃取技术、气相色谱-质谱联用技术和标准曲线法的协同作用定性和定量地检测了芫荽中的挥发性香料成分。本发明利用顶空固相微萃取技术提取芫荽中的挥发性成分，操作时间短，样品量小，无萃取溶剂，重现性好，选择性高，集采样、萃取、浓缩富集、进样于一体，可高效无污染的提取芫荽中的挥发性成分。采用气相色谱-质谱联用技术结合了气相色谱高效的分离能力和质谱法确定分子结构的能力，灵敏度高，并通过检索NIST02谱图库，结合有关文献，可确认芫荽挥发性成分中的各化学成分。采用标准曲线法，建立了一套完整地检测芫荽挥发性成分的定量分析方法。
2、本发明直接采用植物油(优选食用植物油)提取芫荽香料成分，可生产芫荽香料调味油。采用植物油为萃取溶剂直接提取芫荽香料成分，无残留的化学溶剂，更加健康营养安全，且该方法简单易行，成本低廉。
附图说明
图1为本发明实施例1中待测芫荽提取物样品挥发性香料成分的气相色谱-质谱总离子色谱图。
图2为植物油空白总离子色谱图。
图3为本发明实施例2中待测芫荽提取物样品挥发性香料成分的气相色谱-质谱总离子色谱图。
具体实施方式
以下结合说明书附图和具体优选的实施例对本发明作进一步描述，但并不因此而限制本发明的保护范围。
以下实施例中所采用的材料和仪器均为市售。
实施例1：
一种本发明的芫荽中挥发性香料成分的检测方法，包括以下步骤：
(1)样品提取：将50g新鲜的芫荽茎叶洗净、沥干、切碎，加入75mL植物油捣碎，然后进行超声萃取，超声温度35℃，超声功率200W，超声时间50min，再压滤，得到待测芫荽提取物样品。
(2)定性分析：采用顶空固相微萃取与气相色谱-质谱联用仪进行定性分析。取5mL待测芫荽提取物样品置于顶空瓶中，在50℃～65℃下预热15min～30min，50/30μmDVB-CAR-PDMS萃取针在60℃下萃取30min，气相色谱-质谱联用仪的进样口解析时间为3min。气相色谱的进样口温度为250℃，采用程序升温，初始温度为60℃，程序升温速度为5℃/min，程序升温至260℃，氦气为载气，以1.0mL/min的恒流模式进行色谱分离，分流比为1∶1，进样量为1μL。质谱单元的离子源采用EI离子源模式，离子源电压为70eV，离子源温度为230℃。如图1所示，为本实施例中芫荽提取物挥发性香料成分的气相色谱-质谱总离子色谱图，图2为植物油空白总离子色谱图。本实施例芫荽提取物中各挥发性化合物成分表(未知为空白样)如表1所示。
表1实施例1芫荽提取物中各挥发性化合物成分表(未知为空白样)
(3)定量测定：保持与定性分析相同的气相色谱条件，通过标准曲线法用FID(氢火焰离子化检测仪)对芫荽提取物主成分癸醛标样进行定量分析。以癸醛质量浓度为横坐标，对应的峰面积为纵坐标进行线性回归，其线性回归方程为A＝121875.3022C+5000000。
(4)结果分析：通过精密度、样品回收率实验验证定量测定分析方法的准确性，具体操作如下：
(4.1)精密度实验：由二位分析人员各自平行配制含癸醛0.664mg/mL的癸醛植物油混合溶液各6份。在两台不同色谱仪上对各自配制的精密度试验溶液进行测定。两人各测得6份溶液回收率的相对标准偏差分别为2.8％与4.2％，表明采用本方法的重复性良好；二位分析人员所测得的12份癸醛植物油混合溶液回收率数据的相对标准偏差为3.8％，表明采用本方法的中间精密度良好。
(4.2)样品回收率实验：向样品中分别加入不同量的癸醛植物油混合溶液，配制含癸醛为低、中、高3种浓度的溶液，每个浓度下平均配制三份，按面积归一化法测定癸醛含量，计算癸醛的回收率，结果见表2。
表2样品回收率实验结果表
(5)结果换算：根据标准曲线法，计算出未知提取物癸醛与壬醛含量，并计算出超声萃取芫荽的提取率。
标准曲线A＝bC+a；W＝[(A-a)×V1×10-6]/(b×M总×W1)。
式中，A为峰面积，a、b为相关系数，C为癸醛在样品中的浓度(μg/mL)，V1为植物油体积数(mL)，W1为癸醛所占芫荽提取物总含量面积百分数，M总为芫荽质量(g)，W为芫荽提取率。
经过计算，本实施例中芫荽的提取率为0.0862％。
实施例2：
一种本发明的芫荽中挥发性香料成分的检测方法，与实施例1的步骤基本相同，区别仅在于：芫荽质量为40g。
图3为本发明实施例2中芫荽提取物挥发性成分气相色谱-质谱总离子色谱图。
经过计算，本实施例中芫荽的提取率为0.0736％。
本发明提出了一种新的芫荽香料的提取制备方法，并通过对挥发性成分的检测，利用顶空固相微萃取技术与气相色谱-质谱联用技术对顶空平衡温度和时间与色谱条件的摸索，确定了最优的气相色谱-质谱分离条件，确定了一套完整地检测芫荽挥发性成分的定性定量分析方法。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，本发明的保护范围并不仅局限于上述实施例。凡属于本发明思路下的技术方案均属于本发明的保护范围。应该指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下的改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (8)
1.一种芫荽中挥发性香料成分的检测方法，包括以下步骤：
(1)样品提取：将芫荽采用植物油进行提取，得到待测芫荽提取物样品；
(2)定性分析：采用顶空固相微萃取与气相色谱-质谱联用技术对待测芫荽提取物样品进行定性分析；
(3)定量测定：保持与步骤(2)中定性分析相同的气相色谱条件，通过标准曲线法对待测芫荽提取物样品中主成分癸醛进行定量分析；
(4)结果分析：通过精密度实验、样品回收率实验验证步骤(3)定量测定分析方法的准确性；
(5)结果换算：根据标准曲线法，计算出癸醛含量，并计算出芫荽提取率；
标准曲线A＝bC+a；W＝[(A-a)×V1×10-6]/(b×M总×W1)；
式中，A为峰面积，a、b为相关系数，C为癸醛在样品中浓度μg/mL，V1为植物油体积数mL，W1为癸醛所占芫荽提取物总含量面积百分数，M总为芫荽质量g，W为芫荽提取率。
2.根据权利要求1所述的芫荽中挥发性香料成分的检测方法，其特征在于，所述步骤(2)中，所述待测芫荽提取物样品的顶空固相微萃取的萃取温度为50℃～65℃，萃取时间为25min～35min，富集有待测芫荽提取物样品的萃取针在气相色谱-质谱联用仪的进样口解析时间为3min～5min。
3.根据权利要求1所述的芫荽中挥发性香料成分的检测方法，其特征在于，所述步骤(2)的气相色谱-质谱联用技术中，气相色谱的进样口温度为230℃～250℃，采用程序升温，程序升温的初始温度为40℃～60℃，程序升温的速度为3℃/min～7℃/min，程序升温至240℃～260℃。
4.根据权利要求1所述的芫荽中挥发性香料成分的检测方法，其特征在于，所述步骤(2)的气相色谱-质谱联用技术中，气相色谱采用的载气为氦气，以1.0mL/min～2mL/min的恒流模式进行色谱分离，分流比为1∶1～5，进样量为1μL～10μL。
5.根据权利要求1所述的芫荽中挥发性香料成分的检测方法，其特征在于，所述步骤(2)的气相色谱-质谱联用技术中，质谱单元的离子源采用EI离子源模式，离子源电压为70eV～100eV，离子源温度为230℃～260℃。
6.根据权利要求1～5中任一项所述的芫荽中挥发性香料成分的检测方法，其特征在于，所述步骤(1)中，所述样品提取包括以下过程：将芫荽与植物油混合并捣碎，经超声波萃取和压滤后，得到待测芫荽提取物样品。
7.根据权利要求6所述的芫荽中挥发性香料成分的检测方法，其特征在于，所述芫荽与植物油的质量体积比为40g～60g∶60mL～90mL。
8.根据权利要求6所述的芫荽中挥发性香料成分的检测方法，其特征在于，所述超声波萃取的工艺条件为：超声温度20℃～50℃，超声功率100W～400W，超声时间30min～100min。
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