CN110731924B - 增强的抗衰老化妆品组合物 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种增强的抗衰老化妆品组合物，其包含(A)浓缩的桦树汁，其浓缩倍数为1.05‑8倍，优选1.1‑4倍，更优选1.2‑2倍，(B)选自多肽、透明质酸钠、视黄醇、视黄醛、视黄醇棕榈酸酯、生育酚、泛醌和腺苷中的一种或多种物质。

Description

增强的抗衰老化妆品组合物

技术领域

本发明涉及一种增强的抗衰老化妆品组合物，其包含(A)浓缩的桦树汁，其浓缩倍数为1.05-8倍，优选1.1-4倍，更优选1.2-2倍，(B)选自多肽、透明质酸钠、视黄醇、视黄醛、视黄醇棕榈酸酯、生育酚、泛醌和腺苷中的一种或多种物质。

背景技术

桦树为桦木科落叶乔木，目前全球大约有100个品种，主要分布于北温带和寒温带。其中，我国境内约有29个品种，主要分布在东北、西北、华北和西南等地。桦树大多生长于人为干涉较少、且没有工业污染的边远山区。桦树汁(也称桦树液)是桦树树皮被划开或树干钻孔流出的新鲜汁液，无色或浅黄色，无沉淀及杂质，具有淡淡的桦树清香。桦树汁内含大量的糖类、氨基酸、维生素、生物素、细胞分裂素、微量的矿质元素、芳香油、桦树醇、皂角甙等化合物，具有良好的护肤和抗衰老等功效。

皮肤衰老是指皮肤对机体的防护能力和调节能力减退，不能适应内外环境的变化，出现颜色、形态等外观整体状况的改变，常表现为皮肤弹性减少或消失，皮肤松弛，皱纹增多，皮肤干燥，变薄，易脱屑，瘙痒，面色晦暗，没有光泽，并伴随色斑及疣状物，影响容貌和自信。随着人口老龄化问题的日益严重和生活水平的不断提高，消费者的抗皱意识不断加强，越来越多的消费者渴望使用化妆品来维持年轻的外表。据统计，抗皱产品已成为中国化妆品市场中增长速度最快、潜力最大的品类。

发明内容

一方面，本发明涉及(A)浓缩的桦树汁与(B)选自多肽、透明质酸钠、视黄醇、视黄醛、视黄醇棕榈酸酯、生育酚、泛醌和腺苷中的一种或多种的组合在增强的抗衰老化妆品组合物中的用途，其中浓缩的桦树汁的浓缩倍数为1.05-8倍，优选1.1-4倍，更优选1.2-2倍。

再一方面，本发明提供一种增强的抗衰老化妆品组合物，其包含(A)浓缩的桦树汁，其浓缩倍数为1.05-8倍，优选1.1-4倍，更优选1.2-2倍，和(B)选自多肽、透明质酸钠、视黄醇、视黄醛、视黄醇棕榈酸酯、生育酚、泛醌和腺苷中的一种或多种物质。

本发明的抗衰老化妆品组合物可促进成细胞外基质中胶原蛋白I、III、IV、VII、XVII、弹性蛋白、层粘连蛋白等的合成，减少金属基质蛋白酶MMP-1的表达，促进透明质酸生成，强化表皮、真皮以及真皮-表皮连接处的结构完整和功能性，改善皮肤弹性，减少皱纹，同时具有提升皮肤屏障，减少经皮水分流失，抗炎舒缓等作用，从而提供显著的抗衰老、尤其是抗皱纹形成功效。

所述抗衰老化妆品组合物不包含任何外加的水，但不排除各组分中固有地包含的水分。

在优选的实施方案中，所述抗衰老化妆品组合物中不添加EDTA盐、多磷酸钠、偏磷酸钠、葡萄糖酸等螯合剂。

本发明中所涉及的桦树汁得自桦木科桦树属，其可来自白桦(Betula alba)、柔毛桦(Betula pubescens)、垂枝桦(Betula pendula)和亚洲白桦(Betula platyphylla)这四个品种。所述桦树汁为在解冻至早春发叶之间，人工在桦树的树干基部钻孔收集而得的无色透明、无沉淀、无杂物，具有桦树清香营养丰富的汁液。所述桦树汁可商购获得并原样采用，例如可购自大兴安岭超越野生浆果开发有限责任公司。

本发明中所采用的浓缩桦树汁是将上述商购产品浓缩得到的。浓缩方法是本领域已知的，例如加热浓缩、低温真空浓缩、膜浓缩等。在本发明中，优选通过低温冷冻浓缩或膜浓缩工艺进行浓缩，例如，将商购的桦树汁原液输入低温干燥设备，降温至-40℃至-70℃，抽真空至0.1-30Pa而进行低温真空浓缩，从而得到浓缩倍数为1.05-8倍的浓缩桦树汁。

出乎意料地，本发明人发现，与非浓缩的桦树汁原液相比，浓缩倍数为1.05-8倍，优选1.1-4倍，更优选1.2-2倍的浓缩桦树汁与多肽、透明质酸钠、视黄醇、视黄醛、视黄醇棕榈酸酯、生育酚、泛醌和/或腺苷的组合可显著提供化妆品组合物的抗衰老、尤其是抗皱纹形成的功效。这表明所述浓缩桦树汁与所述多肽、透明质酸钠、视黄醇、视黄醛、视黄醇棕榈酸酯、生育酚、泛醌和/或腺苷的组合产生了协同或增效作用。

所述(A)浓缩桦树汁的含量为约18-98％重量，优选约20-95％重量，更优选约22-92％重量，最优选约30-90％重量，基于所述抗衰老化妆品组合物的总重量。

所述组分(B)中的多肽是本领域已知的能促进基质蛋白、尤其是胶原蛋白的合成，同时还可能增加弹性蛋白、透明质酸、糖胺聚糖和纤维连接蛋白的生成从而提供抗皱作用的那些。可在本发明中使用的多肽的实例包括但不限于二肽-2、二肽-4、三肽-1、四肽-21、五肽-3、六肽-3、六肽-8、六肽-9、六肽-10、棕榈酰二肽-5、棕榈酰二肽-7、棕榈酰三肽-1、棕榈酰三肽-5、棕榈酰四肽-3、棕榈酰四肽-7、棕榈酰五肽-3、棕榈酰五肽-4、棕榈酰六肽-6、棕榈酰寡肽、乙酰基四肽-3、乙酰基四肽-5、乙酰基四肽-9、乙酰基五肽-3、乙酰基六肽-3、乙酰基六肽-8、乙酰基八肽-1、肌肽、铜胜肽、寡肽-1、肉豆蔻酰五肽-11、二肽二氨基丁酰苄基酰胺二乙酸盐、脱羧肌肽HCL、及其任意组合，优选棕榈酰三肽-5、棕榈酰四肽-7、乙酰基六肽-3、二肽二氨基丁酰苄基酰胺二乙酸盐、棕榈酰寡肽、六肽-9及其任意组合。所述多肽优选地选自棕榈酰三肽-5、棕榈酰四肽-7、乙酰基六肽-3、二肽二氨基丁酰苄基酰胺二乙酸盐、棕榈酰寡肽、六肽-9及其任意组合。以上物质均可商购获得。

所述组分(B)中的透明质酸钠的实例包括但不限于大分子量透明质酸钠(1800-2200KDa)、中分子量透明质酸钠(1000-1800KDa)、小分子量透明质酸钠(10-1000KDa)、水解透明质酸钠(1-10KDa)、乙酰化透明质酸钠等中的一种或多种。透明质酸钠可以通过本领域已知的方法制备，例如首先通过发酵法由植物性来源培养基(蛋白胨、葡萄糖等)制得透明质酸钠。透明质酸钠也可以商购获得，例如可商购于华熙福瑞达生物医药有限公司。

所述组分(B)中的视黄醇、视黄醛、视黄醇棕榈酸酯、生育酚、泛醌和腺苷也是本领域中已知的成分，均可商购获得。

所述组分(B)的含量为约0.005-10％重量，优选约0.01-8％重量，更优选约0.1-6％重量，最优选约0.5-5％重量，基于所述抗衰老化妆品组合物的总重量。

除了上述组分(A)和(B)外，所述抗衰老化妆品组合物还可任选地包含组分(C)护肤化妆品中常用的成分，其实例包括但不限于媒介物、活性成分和辅料等。这些成分都是本领域已知的，本领域技术人员可根据需要选择组分(C)的类型和用量，例如，组分(C)的含量通常为约0-70％重量，基于所述抗衰老化妆品组合物的总重量。

所述媒介物是本领域已知的那些，例如稀释剂、分散剂和载体等，其实例包括但不限于乙醇、双丙甘醇、丁二醇等。所述媒介物在所述化妆品组合物中的含量是本领域已知的，例如，其通常占组分(C)总重量的0.5-20％。

所述活性成分是本领域已知的那些，其实例包括但不限于例如润肤剂、保湿剂、其它抗皱活性成分等。

所述润肤剂的实例包括但不限于橄榄油、澳洲坚果油、甜杏仁油、葡萄籽油、鳄梨油、玉米油、芝麻油、大豆油、花生油、白池花籽油、红花籽油、狗牙蔷薇果油、刺阿干树仁油、霍霍巴籽油、向日葵籽油、毛瑞榈果油、角鲨烷、棕榈酸乙基己酯、肉豆蔻酸异丙酯、氢化聚异丁烯、异十六烷、异十二烷、碳酸二乙基己酯、碳酸二辛酯、月桂酰肌氨酸异丙酯、异壬酸异壬酯、氢化聚癸烯、甘油三(乙基己酸)酯、鲸蜡醇乙基己酸酯、双-二乙氧基二甘醇环己烷1,4-二羧酸酯、辛酸/癸酸甘油三酯、油醇芥酸酯、辛基十二醇肉豆蔻酸酯、辛基十二醇、聚二甲基硅氧烷、辛基聚甲基硅氧烷、鲸蜡基聚二甲基硅氧烷、环五聚二甲基硅氧烷等的一种或多种。固体润肤剂的实例包括但不限于鲸蜡醇、硬脂醇、鲸蜡硬脂醇、山嵛醇、鲨肝醇、月桂酸、肉豆蔻酸、棕榈酸、硬脂酸、蜂蜡、小烛树蜡、巴西棕榈蜡、羊毛脂、地蜡、霍霍巴籽蜡、石蜡、微晶蜡、氢化米糠蜡、氢化椰油甘油酯类、甘油山嵛酸酯/二十酸酯、肉豆蔻醇肉豆蔻酸酯、双-二甘油多酰基己二酸酯-2、牛油果树果脂、木鲁星果棕籽脂等中的一种或多种。所述润肤剂在所述化妆品组合物中的含量是本领域已知的，例如，其通常占组分(C)总重量的1-50％。

所述保湿剂的实例包括但不限于甘油、双甘油、丁二醇、丙二醇、1,3-丙二醇、双丙甘醇、1,2-戊二醇、聚乙二醇-8、聚乙二醇-32、甲基葡糖醇聚醚-10、甲基葡糖醇聚醚-20、PEG/PPG-17/6共聚物、甘油聚醚-7、甘油聚醚-26、甘油葡糖苷、PPG-10甲基葡糖醚、PPG-20甲基葡糖醚、PEG/PPG/聚丁二醇-8/5/3甘油、蔗糖、海藻糖、鼠李糖、甘露糖、棉子糖、甜菜碱、赤藓醇、木糖醇、尿素、甘油聚醚-5乳酸酯、透明质酸钠、水解透明质酸钠、乙酰化透明质酸钠、聚谷氨酸钠、水解小核菌胶、出芽短梗酶多糖、银耳多糖、酸豆籽多糖等中的一种或多种。所述保湿剂在所述化妆品组合物中的含量是本领域已知的，例如，其通常占组分(C)总重量的1-30％。

所述其它抗皱活性成分的实例包括但不限于水解胶原、水解弹性蛋白、酵母提取物、谷维素、四氢姜黄素、鞣花酸、乳清蛋白、水杨酰植物鞘氨醇、水飞蓟素、蚕丝胶蛋白、生育酚磷酸酯钠、尿囊素、核糖核酸(RNA)、葡萄(VITIS VINIFERA)籽提取物、花榈木(PTEROCARPUS MARSUPIUM)树皮提取物、茶(CAMELLIA SINENSIS)多酚、葡萄酒提取物、苹果籽提取物、欧洲水青冈(FAGUS SYLVATICA)芽提取物、水解猴面包树(ADANSONIA DIGITATA)提取物、卤虫(ARTEMIA)提取物、香根鸢尾(IRIS FLORENTINA)根提取物、橙皮苷、人参皂甙、丹参(SALVIA MILTIORRHIZA)提取物、烟酰胺、熊果酸、番茄红素、咖啡(COFFEA ARABICA)提取物、乳酸、超氧化物歧化酶(SOD)、月见草(OENOTHERA BIENNIS)油、神经酰胺、二棕榈酰羟脯氨酸、羟基硬脂酸、水杨酸、麦角硫因、溶血卵磷脂、硫辛酸、糖原、白藜芦醇、阿魏酸、二裂酵母发酵产物溶胞物、乳酸菌发酵溶胞产物等中的一种或多种。所述其它抗皱活性成分在所述化妆品组合物中的含量是本领域已知的，例如，其通常占组分(C)总重量的0.01-10％。

所述辅料的实例包括但不限于乳化剂、增稠剂、防腐剂、香料等。

所述乳化剂的实例包括但不限于鲸蜡硬脂醇橄榄油酸酯、山梨坦橄榄油酸酯、聚山梨醇酯-60、聚山梨醇酯-80、甲基葡糖倍半硬脂酸酯、PEG-20甲基葡糖倍半硬脂酸酯、PEG-40氢化蓖麻油、PPG-26-丁醇聚醚-26、PEG-4聚甘油-2硬脂酸酯、PEG-60氢化蓖麻油、硬脂醇聚醚-2、硬脂醇聚醚-21、PPG-13-癸基十四醇聚醚-24、鲸蜡硬脂基葡糖苷、PEG-100硬脂酸酯、甘油硬脂酸酯、甘油硬脂酸酯SE、椰油基葡糖苷、鲸蜡硬脂醇聚醚-25、PEG-40硬脂酸酯、聚甘油-3甲基葡糖二硬脂酸酯、甘油硬脂酸酯柠檬酸酯、聚甘油-10硬脂酸酯、聚甘油-10肉豆蔻酸酯、聚甘油-10二油酸酯、聚甘油-10月桂酸酯、聚甘油-10异硬脂酸酯、聚甘油-10油酸酯、聚甘油-10二异硬脂酸酯、聚甘油-6月桂酸酯、聚甘油-6肉豆蔻酸酯、蔗糖硬脂酸酯、蔗糖多硬脂酸酯等中的一种或多种。所述乳化剂在所述化妆品组合物中的含量是本领域已知的，例如，其通常占组分(C)总重量的0.5-10％。

所述增稠剂的实例包括但不限于卡波姆类、丙烯酸(酯)类及其衍生物、黄原胶、阿拉伯胶、聚乙二醇-14M、聚乙二醇-90M、琥珀酰聚糖、羟乙基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素等高分子聚合物等中的一种或多种。所述增稠剂在所述化妆品组合物中的含量是本领域已知的，例如，其通常占组分(C)总重量的0.1-10％。

所述防腐剂的实例包括但不限于羟苯甲酯、羟苯丙酯、苯氧乙醇、苯甲醇、苯乙醇、双(羟甲基)咪唑烷基脲、山梨酸钾、苯甲酸钠、氯苯甘醚、脱氢乙酸钠、辛酰羟肟酸、1,2-己二醇、1,2-戊二醇、对羟基苯乙酮、辛甘醇、甘油辛酸酯、十一碳烯酸甘油酯、山梨坦辛酸酯、乙基己基甘油、牡丹根提取物等中的一种或多种。所述防腐剂在所述化妆品组合物中的含量是本领域已知的，例如，其通常占组分(C)总重量的0.01-2％。

本发明的抗衰老化妆品组合物可以通过本领域已知的任何合适的方法制备。例如，使用化妆品领域中常用的溶解槽、乳化锅、分散器、输送泵等设备制备。制备时先将水溶性物质投入水相溶解釜，将油溶性物质投入油相溶解釜，将两个釜的温度加热至约80℃，其中对于易结块的原料，可先用分散器将其预分散。待溶解完成后将油相和水相输送至乳化锅中，均质乳化约5-15分钟。乳化完成后将料体温度降至常温，加入任选的香精、防腐剂等，并视需要调节产物的pH。相关检测指标都合格后方可灌装出货。

以上制备方法可根据剂型要求进行删减或调整。根据需要，可将所述抗衰老化妆品组合物制成膏、霜、乳液、精华液等各种剂型。

实施例

以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。但是，应当理解为，这些实施例、对比例仅仅是用于具体地说明本发明，而不应理解为用于以任何形式限制本发明所附权利要求书的范围。

实施例1：制备组合物A、A1、B、B1、B2、B3、B4、C、C1、C2、D、D1、D2、E、E1、E2、F、F1、F2、J

上述各组合物的具体配方如下：

注：上表中的数据代表各成分的重量％，基于组合物的总重量，下同。

上述各组合物如下制备：

1.将购自大兴安岭超越野生浆果开发有限责任公司的新鲜白桦树汁原液输入低温干燥设备，降温至-65℃，抽真空至0.1Pa，浓缩至1.2倍、4倍和9倍；

2.将1、2、3、4、5、6、7、8、9、11号原料混合得到相应组合物。

实施例2：组合物A、A1、B、B1、B2、B3、B4、C、C1、C2、D、D1、D2、E、E1、E2、F、F1、F2、J对与衰老相关的基因表达的影响

在本实施例中，测试和对比上述组合物A、A1、B、B1、B2、B3、B4、C、C1、C2、D、D1、D2、E、E1、E2、F、F1、F2、J1对与衰老相关基因表达的影响。

实验仪器：荧光定量PCR仪(Roche)、超净工作台(苏净)、二氧化碳培养箱(Binder)、酶标仪(BIO-TEK)、微量振荡器。

实验试剂与耗材：人原代成纤维细胞、6孔板、成纤维细胞培养液、RNA提取试剂盒、反转录试剂盒、Trizol裂解液等。

基于成纤维细胞的基因表达分析步骤如下：

(1)接种：以5E5/孔的接种密度，接种细胞至6孔板中，在37℃和5％CO₂培养箱中孵育过夜；

(2)给药：待6孔板中细胞铺板率达到60％左右时，加入各组合物的受试物，每种组合物设6个复孔；

(3)收样：在37℃和5％CO₂培养箱种24h后，弃掉培养液，每孔加入1mL Trizol，吹打裂解细胞后，收样；

(4)PCR检测：提取RNA，反转录至cDNA后，进行荧光定量PCR检测；

(5)分析：采用2^-△△CT方法进行结果计算，采用T-Test方法进行统计分析。

测试结果如下表所示。

上述结果表明，与空白对照J相比，其余组合物均能提高胶原蛋白I、III、IV、VII、弹性蛋白、层粘连蛋白等基因表达水平，表明包含桦树汁、浓缩桦树汁、棕榈酰三肽-5、透明质酸钠、视黄醇、生育酚、和/或泛醌的组合物均具有一定的抗皱功效。然而，分别对比组合物B2、C2、D2、E2、F2与组合物A1、B、C、D、E、F的结果可以显然看出，1.2倍浓缩的桦树汁与棕榈酰三肽-5、透明质酸钠、视黄醇、生育酚或泛醌的组合的组合物非常显著地提高了各蛋白的基因表达水平，这充分表明了它们之间产生了协同增效作用；尤其地，对比组合物B2、B3、B4、C2、D2、E2、F2与组合物B1、C1、D1、E1、F1的结果可以显然看出，与非浓缩的桦树汁原液相比，浓缩桦树汁与多肽、透明质酸钠、视黄醇、生育酚或泛醌的组合显著提高了化妆品组合物的抗皱功效，且浓缩桦树汁的浓缩倍数为约1.05-8倍，优选约1.1-4倍。

实施例3：组合物G、G1、G2对与衰老相关的蛋白表达的影响

在本实施例中，进一步测试和对比上述组合物G、G1、G2对与衰老相关的蛋白表达的影响。

实验仪器：超净工作台(苏净)、洗板机(BIO-RAD)、酶标仪(BIO-TEK)、二氧化碳培养箱(Binder)

实验试剂及耗材：人原代成纤维细胞、12孔板、成纤维细胞培养液、不同指标的ELISA检测试剂盒等。

实验方法：

(1)接种：以2E5/孔的接种密度，接种于12孔培养板中，在37℃和5％CO₂培养箱培养，每两天换一次培养基；

(2)给药：待细胞融合再次达60％以上时，加入不同组别的受试物，每组设6个复孔；

(3)收样：在37℃和5％CO₂培养箱中48h后，弃掉培养液，每孔加入1mL Trizol，吹打裂解细胞后，收样；

(4)检测：按照ELISA试剂盒的测定方法进行指标测定；

(5)分析：采用T-Test方法进行统计分析。

测试结果如下表所示。

上述结果表明，与单独使用腺苷相比，包含桦树汁或1.2倍浓缩的桦树汁和腺苷的组合物G1和G2显著提高了角质形成细胞中与衰老相关的各蛋白的蛋白表达水平，表明桦树汁或浓缩桦树汁与腺苷产生了协同增效作用。进一步地，对比G1和G2，可看出，浓缩桦树汁比桦树汁原液对多肽的增效作用显著提高。

实施例4：制备组合物H、H1、H2和J1

H：棕榈酰三肽-5

H1：桦树汁原液+棕榈酰三肽-5

H2：1.2倍浓缩桦树汁+棕榈酰三肽-5

J1：空白对照(水基，无桦树汁，无多肽)

上述各组合物的配方如下所示：

上述各组合物如下制备：

1.油相：将6、8、9、10、11、13、14、15、16号原料加入油相锅，并加热各原料至80℃，溶解，混合均匀；

2.将4、17、19号原料在常温下混合均匀；

3.将12、18、21号原料等原料在常温下混合均匀；

4.水相：将1、2、3、5、7号原料加热到80℃，加入步骤2的混合物，溶解，混合均匀；

5.乳化：将水相和油相加入乳化罐中，保温在80℃，在3000rpm速度下均质乳化5分钟，乳化完成后加入20号原料；

6.搅拌降温至40℃时加入22号和步骤3的混合物，搅拌均匀后出料，得到各组合物。

实施例5：组合物H、H1、H2、J1对光老化3D全层皮肤模型的影响

在本实施例中，测试和对比上述面霜组合物H、H1、H2、J1对光老化3D全层皮肤模型的影响。

实验仪器：超净工作台(苏净)、二氧化碳培养箱(Binder)、UVA及UVB辐照仪、酶标仪(BIO-TEK)，冰冻切片机(Leica)。

实验试剂及耗材：3D全层皮肤模型(实验室自制)，不同指标的ELISA检测试剂盒，MTT试剂盒等。

实验步骤如下：

(1)3D全层模型构建：用角质细胞与成纤维细胞构建3D皮肤模型；

(2)造模及给药：在模型出厂即0天时，每天进行SSUV辐照处理(UVA：30J/cm2；UVB：50mJ/cm2)，然后将一定量的样品分别涂布于相应的模型表面，模型对照只涂布模型培养液，每中组合物6个复孔，每天涂抹一次，总作用时长为4天；

(3)收样与检测：样品作用结束后，收集培养液用ELISA试剂盒进行MMP1的测定，另每组取3个模型用MTT试剂盒进行模型活力的测定，余下3个进行组织固定，IHC染色测定真表皮连接处胶原蛋白IV的含量；

(4)分析：采用Test方法进行统计分析。

测试结果如下表所示。

样品	组织活力	真表皮连接处胶原蛋白IV表达	MMP1(ng)
				模型对照	1.355±0.099	0.218±0.045	9.083±0.881
H	2.091±0.212	1.778±0.165	4.323±0.411
				H1	3.996±0.333	4.745±0.213	2.467±0.411
H2	4.252±0.441	5.565±0.488	2.007±0.215
				J1	1.383±0.116	0.288±0.076	8.916±0.774

上述结果表明，与组合物H相比，组合物H1和H2著提高3D全层皮肤模型的组织活力，促进真表皮连接处胶原蛋白IV的表达，同时显著降低细胞外基质中MMP-1的表达，这充分表明，组合物中同时包含桦树汁或浓缩桦树汁和多肽能够显著提高抗皱功效，表明二者产生了明显的协调增效作用。进一步地，对比H1和H2，可看出，浓缩桦树汁比桦树汁原液对多肽的增效作用显著提高。

实施例6：组合物H和H2对人体皮肤形态的影响

在本实施例中，以皱纹等级1-5级的受试者为研究对象，测试志愿者使用H和H2于2周和4周后左右两侧眼角皱纹变化、脸颊水分和TEWL变化，评价组合物H和H2的抗皱、提升皮肤含水量和改善皮肤屏障功能的功效。

采用半脸对照的测试方法，在使用产品前、使用产品2周和4周后分别对志愿者进行如下测试：

1)用primos对志愿者左右两侧外眼角拍照，用软件计算参数，其中包括皱纹数量、皱纹面积、皱纹深度等；

2)用Corneometer测试左右两侧脸颊皮肤水分含量；

3)用Tewameter测试左右两侧脸颊的经皮失水率(TEWL值)。

早晚洁面后，在使用化妆水后取适量测试样品分别均匀涂抹于左右面部(包括眼周)，整个测试过程中保持原有护肤习惯不变，仅用测试样品替换各受试者之前各自使用的面霜。

所采用测试仪器为：

Primos(Canfield，美国)

皮肤水分测试仪Corneometer(Courage&Khazaka，德国)

皮肤水分流失率测试仪Tewameter(Courage&Khazaka,德国)

受试者：符合下列条件的受试者将被入选：

1)根据皱纹等级标准照片，筛选出皱纹等级为1-5级的受试者，并且非疾病产生的皱纹；

2)受试部位没有接受过皮肤治疗、美容以及其他可能影响结果的测试；

3)近一个月内未曾使用激素类药物及免疫抑制剂者；

4)现在或最近三个月受试部位未参加其他临床试验者。

其中，符合下列任一项者将被排除：

1)妊娠或哺乳期妇女；

2)有严重系统性疾病，免疫缺陷或自身免疫性疾病者；

3)近一周使用抗组胺药或近一个月使用过免疫抑制剂者；

4)近两个月受试部位使用任何抗炎药物者；

5)胰岛素依赖糖尿病患者；

6)正在接受治疗的呼吸道疾病患者；

7)过敏体质、过敏性皮肤炎等人群，有皮肤病或疾病史者；

8)正在接受皮肤科治疗的人群；

9)受试区域有大面积胎记、抓痕、白斑、色素痣、疤痕疙瘩等影响试验的皮肤表征者。

其他要求：

1)试验期间，禁止使用其它影响测试的产品；

2)测试过程中，采用同一面部固定设施及固定方式；

3)测试环境、测试时间和测试地点:

测试过程如下:

1)受试区域为两侧外眼角、额头和脸颊。试验前，受试者统一用洗面奶清洁面部，清洁后用无屑吸水纸巾擦拭干净；

2)在符合标准的房间内静坐20分钟，不能喝水和饮料，受试区域暴露，保持放松,避免触碰受试区域；

3)左右眼角随机分为产品涂抹区域和空白对照区域，以确保在统计学上达到平衡；

4)测试时，采用同一面部固定设施及固定方式，根据primos使用说明，采集产品使用前、使用2周和4周后受试者左右外眼角皱纹图片，并用Corneometer和Tewameter分别测试志愿者两侧脸颊水分值和TEWL值。

受试者数量：入组39人，5人中途退出，有效志愿者共34人，平均年龄45.5±8.5岁。测试结果如下。

(1)皱纹数量

表1:皱纹数量测试结果(平均值±SD值，n＝34)

皱纹数量	H2	H
			使用测试产品前(W0)	137.69±53.09	131.31±51.77
使用测试产品2周后(W2)	83.14±48.41**ΔΔ	126.69±49.32
			使用测试产品4周后(W4)	75.72±39.6**ΔΔ	123.59±45.86

注：“**”表示与使用产品前相比p<0.01，“ΔΔ”表示与H相比p<0.01。

皱纹数量用于表征眼角皱纹数量，数值越高皱纹越多，反之皱纹越少。H2使用后皮肤皱纹数量逐渐减少，至4周时皱纹数量减少非常显著(p<0.01)。H使用4周后皱纹面积与使用前相比无显著性差异(P>0.05)。使用4周后，H2与H相比差异非常显著(p<0.01)，表明H2有减少皮肤皱纹的功效。

(2)皱纹深度

表2:皱纹深度测试结果(平均值±SD值，n＝34)

皱纹深度(um)	H2	H
			使用测试产品前	79.59±35.2	76.52±36.3
使用测试产品2周后	75.72±45.3	75.33±43.9
			使用测试产品4周后	69.31±32.4**Δ	73.03±39.4

注：“**”表示与使用产品前相比p<0.01，“Δ”表示与H相比p<0.01。

皱纹深度用于表征眼角皱纹的深浅，数值越高皱纹越深，反之皱纹越浅。H2使用后皮肤皱纹深度逐渐降低，至4周时皱纹深度降低非常显著(p<0.01)。H使用4周后皱纹深度与使用前相比无显著性差异(P>0.05)。使用4周后，H2与H相比差异比较显著(p<0.05)，表明H2有减少皮肤皱纹的功效。

(3)皱纹面积

表3:皱纹面积测试结果(平均值±SD值，n＝34)

皱纹面积	H2	H
			使用测试产品前	80.74±18.02	79.56±19.34
使用测试产品2周后	67.3±18.81**Δ	75.1±19.57
			使用测试产品4周后	62.5±22.09**Δ	73.75±20.93

注：“**”表示与使用产品前相比p<0.01；，“Δ”表示与H相比p<0.05。

皱纹面积用于表征眼角皱纹总面积，数值越高皱纹越多，反之皱纹越少。H2使用后皮肤皱纹面积逐渐降低，至4周时皱纹面积降低非常显著(p<0.01)。H使用4周后皱纹面积与使用前相比无显著性差异(P>0.05)。使用4周后，H2与H相比差异比较显著(p<0.01)，表明H2具有显著的减少皮肤皱纹的功效。

(4)水分含量

表4:水分含量测试结果(平均值±SD值，n＝34)

水分	H2	H
			使用测试产品前	33.14±11.36	32.18±10.97
使用测试产品2周后	38.94±12.25*Δ	33.29±11.54
			使用测试产品4周后	42.18±10.98**ΔΔ	34.62±11.66

注：“*”表示与使用产品前相比p<0.05，“**”表示与使用产品前相比p<0.01；“Δ”表示与H相比p<0.05，“ΔΔ”表示与H相比p<0.01。

水分含量用于表征皮肤角质层含水量，数值越高皮肤含水量越高，反之皮肤含水量越低。H2使用后皮肤水分含量逐渐升高，至4周时升高非常显著(p<0.01)。H使用4周后皮肤水分含量与使用前相比无显著性差异(P>0.05)。使用4周后，H2与H相比差异非常显著(p<0.01)，表明H2有提升皮肤水分含量的功效。

(5)TEWL

表5:TEWL测试结果(平均值±SD值，n＝34)

TEWL	H2	H
			使用测试产品前	19.7±8.01	18.9±8.23
使用测试产品2周后	16.0±7.99	18.3±8.01
			使用测试产品4周后	15.3±7.25*Δ	17.9±7.87

注：“*”表示与使用产品前相比p<0.05，“Δ”表示与H相比p<0.05。

TEWL用于表征皮肤角质屏障功能，数值越高皮肤屏障功能越差，反之屏障功能越好。H2使用后TEWL值逐渐降低，至4周时降低比较显著(p<0.05)。H使用4周后TEWL值与使用前相比无显著性差异(P>0.05)。使用4周后，H2与H相比差异比较显著(p<0.05)，表明H2有修复皮肤屏障功能的功效。

实施例7：抗皱眼霜组合物的制备

上述抗皱眼霜组合物如下制备：

1.油相：将1、3、4、5号原料加入油相锅，并将上述各原料加热至80℃，溶解，混合均匀；

2.将6、7、9、10、11号原料等原料在常温下混合均匀；

3.水相：将2加热到80℃，加入步骤3的混合物，溶解，混合均匀；

4.乳化：将水相和油相加入乳化罐中，保温在80℃，在3000rpm速度下均质乳化5分钟，乳化完成后加入12号原料；

5.加入8号原料，搅拌降温至40℃时加入步骤2的混合物，搅拌均匀后出料，得到所述抗皱眼霜组合物。

采用半脸对照的测试方法，在使用产品前和使用产品4周后分别对20名志愿者进行如下测试：

1)用primos对志愿者左右两侧外眼角拍照，用软件计算皱纹参数，其中包括皱纹数量、皱纹面积、皱纹深度等；

2)用Corneometer测试左右两侧眼角的皮肤水分含量。

结果显示，20名受试者中有18人眼角皮肤含水量显著增加，其中有16人眼角皱纹明显变浅变淡，皱纹面积减小，皱纹数量减少。

实施例8：抗皱乳液组合物的制备

所述抗皱乳液组合物的配方如下：

上述抗皱乳液组合物如下制备：

1.油相：将4、5、6、7、10、12、13、14号原料加入油相锅，并加热至80℃，溶解，混合均匀；

2.将1、2、8、9、17、19号原料等原料在常温下混合均匀；

3.将3、18、20号原料等原料在常温下混合均匀；

4.水相：将步骤2的混合物加热到80℃，加入步骤3的混合物，溶解，混合均匀；

5.乳化：将水相和油相加入乳化罐中，保温在80℃，在3000rpm速度下均质乳化5分钟，乳化完成后加入16号原料；

6.加入8号原料，搅拌降温至40℃时加入11、12、15号原料，搅拌均匀后出料，得到所述抗皱乳液组合物。

对19名受试者使用上述配方的乳液4周，对使用情况进行主观评估。其中，有18人反映皮肤含水量显著增加，皮肤光滑细嫩有弹性；有15人反映法令纹和眼角皱纹有明显改善。

Claims (10)

1.(A)浓缩的桦树汁与(B)选自棕榈酰三肽-5、透明质酸钠、视黄醇、视黄醛、视黄醇棕榈酸酯、生育酚、泛醌和腺苷中的一种或多种的组合在制备抗衰老化妆品组合物中的用途，其中浓缩的桦树汁的浓缩倍数为1.2-4倍。

2.权利要求1的用途，其中浓缩的桦树汁的浓缩倍数为1.2-2倍。

3.一种抗衰老化妆品组合物，其包含(A)浓缩的桦树汁，其浓缩倍数为1.2-4倍，和(B)选自棕榈酰三肽-5、透明质酸钠、视黄醇、视黄醛、视黄醇棕榈酸酯、生育酚、泛醌和腺苷中的一种或多种物质。

4.权利要求3的抗衰老化妆品组合物，其中浓缩的桦树汁的浓缩倍数为1.2-2倍。

5.权利要求3的抗衰老化妆品组合物，其中所述组分(A)浓缩的桦树汁的含量为18-98％重量，基于所述化妆品组合物的总重量。

6.权利要求3的抗衰老化妆品组合物，其中所述组分(B)的含量为0.005-10％重量，基于所述抗衰老化妆品组合物的总重量。

7.权利要求6的抗衰老化妆品组合物，其中所述组分(B)的含量为0.01-8％重量。

8.权利要求7的抗衰老化妆品组合物，其中所述组分(B)的含量为0.1-6％重量。

9.权利要求8的抗衰老化妆品组合物，其中所述组分(B)的含量为0.5-5％重量。

10.权利要求3-9任何一项的抗衰老化妆品组合物，其中所述抗衰老化妆品组合物不包含任何外加的水。