CN110699282A - 一种肉羊专用酶菌复合制剂及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种肉羊专用酶菌复合制剂及其制备方法，包括以下组分：解淀粉芽孢杆菌、瘤胃双歧杆菌、动物双歧杆菌、地衣芽孢杆菌、热带假丝酵母、植酸酶、纤维素酶、木聚糖酶、甘露聚糖酶、蛋白酶、果胶酶。采用本发明肉羊专用酶菌复合制剂，可以有效补充肉羊体内有益菌含量，促进饲料中纤维素、木质素、蛋白质等大分子物质的降解，秸秆消化率大大提高；显著提高饲料利用率，促进肉羊的生长。

Description

一种肉羊专用酶菌复合制剂及其制备方法
技术领域
本发明涉及一种肉羊专用酶菌复合制剂及其制备方法，属于肉羊养殖技术领域。
背景技术
肉羊是适应外界环境最强的家畜之一，食性广、耐粗饲、抗逆性强。肉羊饲养量逐年增加。近年来，国内外羊肉市场发生了一些变化，为肉羊产业的发展提供了巨大空间，使肉羊养殖越来越受牲畜养殖户的欢迎。近20年来，肉羊养殖发展迅速。
在过去，养羊业以草场放牧为主，对其饲料研究甚少；但现在随着草场禁牧范围的扩大，传统的养羊方式受到限制，越来越多的肉羊只能通过圈养养殖。圈养养殖羊群，大大限制了羊群的活动范围，环境也跟天然牧场的大自然环境无法相比，导致羊群肠胃疾病增多，氮磷排泄率高，饲料利用率降低，羊群极易出现萎蔫、便秘、食欲不振等生病症状，严重的还会导致羊只死亡。为改善羊群的患病情况，往往需要给羊群添加预防生病的药剂，但这些药剂往往会有药物残留，随着使用次数的增多，羊群还会产生抗药性，导致效果越来越差。
先有技术中也有本领域的技术人员对这方面的肉羊养殖添加剂的研究，CN201510838135.X公开了一种提高羊肉肉质的复合饲料添加剂，按以下重量份的原料制成：中草药混合制剂20-25%，复合酶制剂6-8%，蛋白质复合剂15-20%，氨基酸复合剂3-5%，生姜提取物2-4%，葡萄籽提取物6-8%，载体35-40%。复合酶制剂由以下组份比的原料组成：植酸酶25-30%，枯草芽孢杆菌10-15%，纤维素酶15-25%，米曲霉8-12%，酵母5-10%，黑曲霉菌10-15%。
专利CN201310725602.9公开了一种发酵饲料专用复合生物预混料的配制及使用，具体微生物种类和配比如下：地衣芽孢杆菌（100×108CFU/g）5-20%，凝结芽孢杆菌（100×108CFU/g）5-20%，酿酒酵母（100×108CFU/g）10-20%，产朊假丝酵母（100×108CFU/g）10-20%，植物乳杆菌（100×108CFU/g）15-25%，干酪乳杆菌（100×108CFU/g）5-15%，嗜酸乳杆菌（100×108CFU/g）10-20%，嗜热链球菌（100×108CFU/g）10-20%，发酵乳杆菌（100×108CFU/g）10-20%，粪肠球菌（100×108CFU/g）10-25%。具体单酶种类和配比如下：木聚糖酶（100000U）10-15%，植酸酶（20000U）10-20%，甘露聚糖酶（50000U）5-10%，淀粉酶（2000U）10-20%，糖化酶（100000U）15-25%，酸性蛋白酶（50000U）10-15%，中性蛋白酶（50000U）10-15%，纤维素酶（10000U）15-25%，溶菌酶（100000U）5-10%，葡萄糖氧化酶（5000U）5-10%。
但现有技术的肉羊用酶菌复合制剂还存在以下技术缺陷：不能同时实现提高饲料利用率、降低氮磷排泄率，且无毒、无残留、无抗药性。
发明内容
本发明针对以上技术问题，提供一种肉羊专用酶菌复合制剂及其制备方法，要达到以下发明目的：制备的肉羊专用酶菌复合制剂，无毒、无残留、无抗药性，明显提高饲料利用率、降低氮磷排泄率、降低饲养成本。肉羊专用酶菌复合制剂的制备方法，成本低，操作简单。
为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是：
一种肉羊专用酶菌复合制剂，由以下重量份的原料混合制备而成：
解淀粉芽孢杆菌10-20份、瘤胃双歧杆菌10-25份、动物双歧杆菌 5-15份、地衣芽孢杆菌 5-10份、热带假丝酵母5-15份、植酸酶 1-8份、纤维素酶10-25份、木聚糖酶5-15份、甘露聚糖酶10-20份、蛋白酶1-10份、果胶酶5-15份。
所述解淀粉芽孢杆菌的保藏号为CICC21789，所述动物双歧杆菌的保藏号为CICC6165，所述地衣芽孢杆菌的保藏号为CICC20085，所述热带假丝酵母的保藏号为CICC1419。
所述植酸酶的酶活为2000U/g，所述纤维素酶的酶活为20000U/g，所述木聚糖酶的酶活为15000U/g，所述甘露聚糖酶的酶活为5000U/g，所述蛋白酶的酶活为2000U/g，所述果胶酶的酶活为1000U/g。
一种肉羊专用酶菌复合制剂的制备方法：
步骤1、培养解淀粉芽孢杆菌CICC21789
将纯化培养的斜面培养基上的解淀粉芽孢杆菌CICC21789菌种接种至锥形瓶中，所述锥形瓶内装有15～30%（体积百分数）的活化培养基；所述活化培养基的配方为牛肉膏蛋白胨培养基，培养温度为36～38℃，摇瓶转速150～170rpm培养12～14h；
将活化培养好的解淀粉芽孢杆菌菌种接种到种子罐内，所述种子罐内装有50～70%（体积百分数）的发酵培养基，所述接种：体积接种量为0.5～1%；培养温度为36～38℃，种子罐搅拌转速220～240rpm培养10～12h，菌种达到对数生长期；
将培养好的种子罐菌种接种到发酵罐内，所述发酵罐内装有体积比为50～70%发酵培养基；所述接种：体积接种量为5～10%；培养温度为36～38℃，发酵罐搅拌转速200～220rpm培养25～36h；发酵罐中解淀粉芽孢杆菌芽孢转化率为95%以上，含量≥1×1010个/ml，然后将发酵得到的解淀粉芽孢杆菌，经喷雾干燥制备成休眠体微生物干粉，解淀粉芽孢杆菌休眠体微生物干粉中解淀粉芽孢杆菌芽孢含量≥1.5×1011个/克。
所述种子罐和发酵罐的培养基配方相同，培养基的配方为：玉米淀粉15～25g/L、葡萄糖1～8g/L、豆粕20～30g/L、氯化钠1～6g/L、磷酸氢二钾1～3g/L、硫酸镁0.5～1g/L。
步骤2、培养瘤胃双歧杆菌
将纯化培养的斜面培养基上的瘤胃双歧杆菌菌种接种至厌氧瓶中，所述厌氧瓶装有60～80%（体积百分数）的活化培养基；所述活化培养基的配方为葡萄糖5～15g/L、酪蛋白胨10～20g/L、酵母粉5～10g/L、磷酸氢二钾1～5g/L、半胱氨酸0.1～1g/L、氯化钙0.2～0.6g/L、硫酸锌0.1～0.8g/L和氯化镁0.1～0.5g/L；培养温度为36～39℃,静置培养44～48h；
将活化培养好的瘤胃双歧杆菌菌种接种到种子罐内，所述种子罐内装有60～80%（体积百分数）的发酵培养基，所述接种：体积接种量为1～3%，培养温度为36～39℃，种子罐静置培养40～48h，菌体大量繁殖；
将培养好的种子罐菌种接种到发酵罐内，所述发酵罐内装有60～80%（体积百分数）发酵培养基；体积接种量为5～10%，在培养温度为36～39℃，发酵罐静置培养48～54h，发酵罐中瘤胃双歧杆菌含量≥108个/ml，然后将发酵得到的瘤胃双歧杆菌单菌添加保护剂经冷冻干燥制备成休眠体微生物干粉，干粉中瘤胃双歧杆菌含量≥1010个/克。
所述种子罐和发酵罐的培养基配方相同，培养基的配方为葡萄糖15～25g/L、酪蛋白胨20～30g/L、酵母粉10～20g/L、磷酸氢二钾1～5g/L、半胱氨酸0.1～1g/L、氯化钙0.2～0.6g/L、吐温80 1～3g/L、硫酸锌0.1～1g/L和氯化镁0.1～0.6g/L。
步骤3、培养动物双歧杆菌CICC6165
将纯化培养的斜面培养基上的动物双歧杆菌CICC6165菌种接种至厌氧瓶中，所述厌氧瓶装有60～80%（体积百分数）的活化培养基；所述活化培养基的配方为葡萄糖1～10g/L、蛋白胨5～15g/L、牛肉粉10～20g/L、酵母粉1～10g/L、磷酸氢二钾0.1～0.5g/L、磷酸二氢钾0.1～0.5g/L、L-半胱氨酸0.1～0.5g/L、氯化铵0.5～1.5g/L和硫酸镁0.1～0.3g/L，在培养温度为36～38℃，静置培养42～46h；
将活化培养好的动物双歧杆菌菌种接种到种子罐内，所述种子罐装有60～80%（体积百分数）发酵培养基；所述接种：体积接种量为1～3%；培养温度为36～38℃，种子罐静置培养42～46h，菌体大量繁殖；
将培养好的种子罐菌种接种到发酵罐内，所述发酵罐内装有60～80%（体积百分数）发酵培养基；体积接种量为5～10%，培养温度为36～38℃,发酵罐静置培养48～52h，发酵罐中动物双歧杆菌含量≥5×108个/ml，然后将发酵得到的动物双歧杆菌单菌添加保护剂经冷冻干燥制备成休眠体微生物干粉，干粉中动物双歧杆菌含量≥4×1010个/克。
所述种子罐和发酵罐的培养基配方相同，培养基的配方为葡萄糖5～15g/L、蛋白胨10～20g/L、牛肉粉10～20g/L、酵母粉5～15g/L、磷酸氢二钾0.2～0.6g/L、磷酸二氢钾0.1～0.5g/L、L-半胱氨酸0.1～0.5g/L、氯化铵0.5～1.5g/L和硫酸镁0.1～0.3g/L。
步骤4、培养地衣芽孢杆菌CICC20085
将纯化培养的斜面培养基上的地衣芽孢杆菌CICC20085菌种接种至锥形瓶中，所述锥形瓶中装有体积比为15～30%的活化培养基；所述活化培养基的配方为胰蛋白胨5～10g/L、酵母粉1～5g/L和氯化钠5～10g/L，在培养温度为36～39℃，摇瓶转速150～180rpm培养10～12h；
将活化培养好的地衣芽孢杆菌菌种接种到种子罐内，所述种子罐装有50～70%（体积百分数）发酵培养基；所述接种：体积接种量为0.1～0.5%，培养温度为36～39℃，种子罐搅拌转速220～240rpm培养15～17h，菌种达到对数生长期；
将培养好的种子罐菌种接种到发酵罐内，所述发酵罐装有体积比50～70%（体积百分数）发酵培养基；体积接种量为5～10%，在培养温度为36～39℃，发酵罐搅拌转速200～220rpm培养30～40h，发酵罐中地衣芽孢杆菌芽孢转化率为95%以上，含量≥1×1010个/ml，然后将发酵得到的地衣芽孢杆菌经喷雾干燥制备成休眠体微生物干粉，干粉中地衣芽孢杆菌芽孢含量≥1.5×1011个/克。
所述种子罐和发酵罐的配方相同，培养基的配方为玉米粉15～25g/L、葡萄糖1～5g/L、豆粕20～30g/L、玉米浆1～5g/L、磷酸氢二钾1～5g/L、磷酸二氢钾0.5～2g/L和硫酸锰0.01～0.06g/L。
步骤5、培养热带假丝酵母CICC1419
将纯化培养的斜面培养基上的热带假丝酵母CICC1419菌种接种至锥形瓶中，所述锥形瓶中装有体积比为15～30%的活化培养基；所述活化培养基的配方为胰蛋白胨10～20g/L、酵母粉5～10g/L和葡萄糖15～25g/L，pH为4.5～5.0；培养温度为28～30℃，摇瓶转速130～150rpm培养20～24h；
将活化培养好的热带假丝酵母菌种接种到种子罐内，所述种子罐装有50～70%（体积百分数）发酵培养基；所述接种：体积接种量为1～3%，培养温度为28～30℃，种子罐搅拌转速220～240rpm培养20～24h，菌体大量繁殖；
将培养好的种子罐菌种接种到发酵罐内，所述发酵罐装有体积比50～70%（体积百分数）发酵培养基；体积接种量为5～10%，在培养温度为28～30℃，发酵罐搅拌转速200～220rpm培养36～40h，发酵罐中热带假丝酵母含量≥5×109个/ml，然后将发酵得到的热带假丝酵母经流化床沸腾干燥制备成休眠体微生物干粉，干粉中热带假丝酵母含量≥3×1010个/克；
所述种子罐和发酵罐的培养基配方相同，培养基的配方为胰蛋白胨15～25g/L、糖蜜15～25g/L、葡萄糖10～20g/L、玉米浆5～10g/L、磷酸二氢钾3～10g/L、磷酸氢二钾3～10g/L和硫酸铵10～20g/L。
步骤6、制得成品
分别将解淀粉芽孢杆菌CICC21789、瘤胃双歧杆菌、动物双歧杆菌CICC6165、地衣芽孢杆菌CICC20085、和热带假丝酵母CICC1419制备成的休眠体微生物干粉，然后按照解淀粉芽孢杆菌（CICC21789）10-20份、瘤胃双歧杆菌10-25份、动物双歧杆菌（CICC6165）5-15份、地衣芽孢杆菌（CICC20085）5-10份、热带假丝酵母（CICC1419）5-15份、植酸酶（2000U/g）1-8份、纤维素酶（20000U/g）10-25份、木聚糖酶（15000U/g）5-15份、甘露聚糖酶（5000U/g）10-20份、蛋白酶（2000U/g）1-10份、果胶酶（1000U/g）5-15份的重量比，混合，得到肉羊专用酶菌复合制剂。
由于采用了上述技术方案，本发明的有益效果是：
（1）采用本发明肉羊专用酶菌复合制剂，可以有效补充肉羊体内有益菌含量，促进饲料中纤维素、木质素、蛋白质等大分子物质的降解，秸秆消化率大大提高；
（2）采用本发明肉羊专用酶菌复合制剂，显著提高饲料利用率，促进肉羊的生长，杂交肉羊的平均日增重提高了46%，湖羊的平均日增重提高了44%；
（3）采用本发明肉羊专用酶菌复合制剂，可大大降低饲养成本；杂交肉羊的料重比降低了32%，湖羊的料重比降低了31%；
（4）采用本发明肉羊专用酶菌复合制剂，肉羊的氮磷排泄率明显降低。
（5）本发明肉羊专用酶菌复合制剂无毒、无残留、无抗药性。
具体实施方式
下面结合具体的实施例，进一步阐述本发明。
实施例 1一种肉羊专用酶菌复合制剂
由以下重量份的原料混合制备而成：
解淀粉芽孢杆菌CICC21789 10份
瘤胃双歧杆菌 10份
动物双歧杆菌CICC6165 5份
地衣芽孢杆菌CICC20085 5份
热带假丝酵母CICC1419 5份
植酸酶 2份
纤维素酶 10份
木聚糖酶 5份
甘露聚糖酶 10份
蛋白酶 1份
果胶酶 5份。
所述解淀粉芽孢杆菌CICC21789：状态为休眠体微生物干粉，干粉中解淀粉芽孢杆菌芽孢含量1.8×1011个/克；所述瘤胃双歧杆菌：状态为休眠体微生物干粉，干粉中瘤胃双歧杆菌含量1.5×1010个/克；所述的动物双歧杆菌CICC6165：状态为休眠体微生物干粉，干粉中动物双歧杆菌含量4.5×1010个/克；所述的地衣芽孢杆菌CICC20085：状态为休眠体微生物干粉，干粉中地衣芽孢杆菌芽孢含量1.5×1011个/克；所述的培养热带假丝酵母CICC1419：状态为休眠体微生物干粉，干粉中热带假丝酵母含量3.8×1010个/克；
所述植酸酶的酶活为2000U/g，所述纤维素酶的酶活为20000U/g，所述木聚糖酶的酶活为15000U/g，所述甘露聚糖酶的酶活为5000U/g，所述蛋白酶的酶活为2000U/g，所述果胶酶的酶活为1000U/g。
实施例 2 一种肉羊专用酶菌复合制剂
由以下重量份的原料混合制备而成：
解淀粉芽孢杆菌CICC21789 20份
瘤胃双歧杆菌 20份
动物双歧杆菌CICC6165 10份
地衣芽孢杆菌CICC20085 8份
热带假丝酵母CICC1419 8份
植酸酶 5份
纤维素酶 20份
木聚糖酶 14份
甘露聚糖酶 15份
蛋白酶 5份
果胶酶 10份。
所述解淀粉芽孢杆菌CICC21789：状态为休眠体微生物干粉，干粉中解淀粉芽孢杆菌芽孢含量1.8×1011个/克；所述瘤胃双歧杆菌：状态为休眠体微生物干粉，干粉中瘤胃双歧杆菌含量1.5×1010个/克；所述的动物双歧杆菌CICC6165：状态为休眠体微生物干粉，干粉中动物双歧杆菌含量4.5×1010个/克；所述的地衣芽孢杆菌CICC20085：状态为休眠体微生物干粉，干粉中地衣芽孢杆菌芽孢含量1.5×1011个/克；所述的培养热带假丝酵母CICC1419：状态为休眠体微生物干粉，干粉中热带假丝酵母含量3.8×1010个/克；
所述植酸酶的酶活为2000U/g，所述纤维素酶的酶活为20000U/g，所述木聚糖酶的酶活为15000U/g，所述甘露聚糖酶的酶活为5000U/g，所述蛋白酶的酶活为2000U/g，所述果胶酶的酶活为1000U/g。
实施例 3一种肉羊专用酶菌复合制剂的制备方法
步骤1、培养解淀粉芽孢杆菌CICC21789
将纯化培养的斜面培养基上的解淀粉芽孢杆菌CICC21789菌种接种至锥形瓶中，所述锥形瓶内装有30%（体积百分数）的活化培养基；所述活化培养基的配方为牛肉膏蛋白胨培养基，培养温度为37℃，摇瓶转速150rpm培养14h；
将活化培养好的解淀粉芽孢杆菌菌种接种到种子罐内，所述种子罐内装有70%（体积百分数）的发酵培养基，所述接种：体积接种量为0.5%；培养温度为37℃，种子罐搅拌转速230rpm培养12h，菌种达到对数生长期；
将培养好的种子罐菌种接种到发酵罐内，所述发酵罐内装有体积比为70%发酵培养基；所述接种：体积接种量为10%；培养温度为37℃，发酵罐搅拌转速200rpm培养36h；发酵罐中解淀粉芽孢杆菌芽孢转化率为95%以上，含量1.2×1010个/ml，然后将发酵得到的解淀粉芽孢杆菌，经喷雾干燥制备成休眠体微生物干粉，解淀粉芽孢杆菌休眠体微生物干粉中解淀粉芽孢杆菌芽孢含量1.8×1011个/克。
所述种子罐和发酵罐的培养基配方相同，培养基的配方为：玉米淀粉25g/L、葡萄糖8g/L、豆粕30g/L、氯化钠6g/L、磷酸氢二钾3g/L、硫酸镁0.5g/L。
步骤2、培养瘤胃双歧杆菌
将纯化培养的斜面培养基上的瘤胃双歧杆菌菌种接种至厌氧瓶中，所述厌氧瓶装有60%（体积百分数）的活化培养基；所述活化培养基的配方为葡萄糖15g/L、酪蛋白胨20g/L、酵母粉10g/L、磷酸氢二钾5g/L、半胱氨酸1g/L、氯化钙0.6g/L、硫酸锌0.5g/L和氯化镁0.5g/L；培养温度为37℃,静置培养48h；
将活化培养好的瘤胃双歧杆菌菌种接种到种子罐内，所述种子罐内装有80%（体积百分数）的发酵培养基，所述接种：体积接种量为1%，培养温度为37℃，种子罐静置培养45h，菌体大量繁殖；
将培养好的种子罐菌种接种到发酵罐内，所述发酵罐内装有80%（体积百分数）发酵培养基；体积接种量为10%，在培养温度为37℃，发酵罐静置培养54h，发酵罐中瘤胃双歧杆菌含量为1.5×108个/ml，然后将发酵得到的瘤胃双歧杆菌单菌添加保护剂经冷冻干燥制备成休眠体微生物干粉，干粉中瘤胃双歧杆菌含量1.5×1010个/克。
所述种子罐和发酵罐的培养基配方相同，培养基的配方为葡萄糖25g/L、酪蛋白胨30g/L、酵母粉20g/L、磷酸氢二钾5g/L、半胱氨酸1g/L、氯化钙0.6g/L、吐温80 1g/L、硫酸锌1g/L和氯化镁0.6g/L。
步骤3、培养动物双歧杆菌CICC6165
将纯化培养的斜面培养基上的动物双歧杆菌CICC6165菌种接种至厌氧瓶中，所述厌氧瓶装有60%（体积百分数）的活化培养基；所述活化培养基的配方为葡萄糖10g/L、蛋白胨15g/L、牛肉粉20g/L、酵母粉10g/L、磷酸氢二钾0.5g/L、磷酸二氢钾0.5g/L、L-半胱氨酸0.5g/L、氯化铵1.5g/L和硫酸镁0.3g/L，在培养温度为37℃，静置培养46h；
将活化培养好的动物双歧杆菌菌种接种到种子罐内，所述种子罐装有80%（体积百分数）发酵培养基；所述接种：体积接种量为1%；培养温度为37℃，种子罐静置培养45h，菌体大量繁殖；
将培养好的种子罐菌种接种到发酵罐内，所述发酵罐内装有80%（体积百分数）发酵培养基；体积接种量为5%，培养温度为37℃,发酵罐静置培养52h，发酵罐中动物双歧杆菌含量5.2×108个/ml，然后将发酵得到的动物双歧杆菌单菌添加保护剂经冷冻干燥制备成休眠体微生物干粉，干粉中动物双歧杆菌含量4.5×1010个/克。
所述种子罐和发酵罐的培养基配方相同，培养基的配方为葡萄糖15g/L、蛋白胨20g/L、牛肉粉20g/L、酵母粉15g/L、磷酸氢二钾0.6g/L、磷酸二氢钾0.5g/L、L-半胱氨酸0.5g/L、氯化铵1.5g/L和硫酸镁0.3g/L。
步骤4、培养地衣芽孢杆菌CICC20085
将纯化培养的斜面培养基上的地衣芽孢杆菌CICC20085菌种接种至锥形瓶中，所述锥形瓶中装有体积比为15%的活化培养基；所述活化培养基的配方为胰蛋白胨10g/L、酵母粉5g/L和氯化钠10g/L，在培养温度为37℃，摇瓶转速180rpm培养10h；
将活化培养好的地衣芽孢杆菌菌种接种到种子罐内，所述种子罐装有70%（体积百分数）发酵培养基；所述接种：体积接种量为0.1%，培养温度为38℃，种子罐搅拌转速230rpm培养16h，菌种达到对数生长期；
将培养好的种子罐菌种接种到发酵罐内，所述发酵罐装有体积比70%（体积百分数）发酵培养基；体积接种量为5%，在培养温度为37℃，发酵罐搅拌转速220rpm培养40h，发酵罐中地衣芽孢杆菌芽孢转化率为95%以上，含量1.2×1010个/ml，然后将发酵得到的地衣芽孢杆菌经喷雾干燥制备成休眠体微生物干粉，干粉中地衣芽孢杆菌芽孢含量1.5×1011个/克。
所述种子罐和发酵罐的配方相同，培养基的配方为玉米粉25g/L、葡萄糖5g/L、豆粕30g/L、玉米浆5g/L、磷酸氢二钾5g/L、磷酸二氢钾2g/L和硫酸锰0.06g/L。
步骤5、培养热带假丝酵母CICC1419
将纯化培养的斜面培养基上的热带假丝酵母CICC1419菌种接种至锥形瓶中，所述锥形瓶中装有体积比为30%的活化培养基；所述活化培养基的配方为胰蛋白胨20g/L、酵母粉10g/L和葡萄糖25g/L，pH为4.5；培养温度为30℃，摇瓶转速150rpm培养20h；
将活化培养好的热带假丝酵母菌种接种到种子罐内，所述种子罐装有70%（体积百分数）发酵培养基；所述接种：体积接种量为1%，培养温度为29℃，种子罐搅拌转速240rpm培养24h，菌体大量繁殖；
将培养好的种子罐菌种接种到发酵罐内，所述发酵罐装有体积比70%（体积百分数）发酵培养基；体积接种量为10%，在培养温度为30℃，发酵罐搅拌转速220rpm培养40h，发酵罐中热带假丝酵母含量5.2×109个/ml，然后将发酵得到的热带假丝酵母经流化床沸腾干燥制备成休眠体微生物干粉，干粉中热带假丝酵母含量3.8×1010个/克；
所述种子罐和发酵罐的培养基配方相同，培养基的配方为胰蛋白胨25g/L、糖蜜25g/L、葡萄糖20g/L、玉米浆10g/L、磷酸二氢钾10g/L、磷酸氢二钾10g/L和硫酸铵20g/L。
步骤6、制得成品
分别将解淀粉芽孢杆菌CICC21789、瘤胃双歧杆菌、动物双歧杆菌CICC6165、地衣芽孢杆菌CICC20085、和热带假丝酵母CICC1419的休眠体微生物干粉，与植酸酶（2000U/g）、纤维素酶（20000U/g）、木聚糖酶（15000U/g）、甘露聚糖酶（5000U/g）、蛋白酶（2000U/g）、果胶酶（1000U/g）按照实施例1-2配方的比例混合，得到肉羊专用酶菌复合制剂。
实施例4 实验检测
为检测在本发明酶菌复合制剂对肉羊生产性能的影响，在安丘市潍坊普兰特汉羊场进行了为期三个月的试验。具体如下：
实验设计：
试验时间：2019年3月10日到6月10日
实验地点：山东省潍坊普兰特汉羊场
实验肉羊：选取25±0.5kg的健康的杂交肉羊和湖羊各60只，杂交肉羊和湖羊随机分成等数的两组，分别为实验组和对照组。
对照组：基础日粮
实验组：基础日粮加0.1%的实施例2的酶菌复合制剂（按照实施例3的制备方法制备获得）。
实验结果见表1和表2，本实验数据处理和分析采用Excel2007进行数据整理，SPSS17.0进行方差分析，数据以平均数±标准差表示。
表1日粮中添加实施例2中的酶菌复合制剂对杂交肉羊生长性能的影响
Figure DEST_PATH_IMAGE001
注：同行标注不同大写字母者差异极显著(P<0.01)，不同小写字母者差异显著(P<0.05)，相同字母或者不标注者差异不显著(P>0.05)。
表2日粮中添加实施例2中的酶菌复合制剂对湖羊生长性能的影响
Figure 16628DEST_PATH_IMAGE002
注：同行标注不同大写字母者差异极显著(P<0.01)，不同小写字母者差异显著(P<0.05)，相同字母或者不标注者差异不显著(P>0.05)。
从表1和表2可以看出，对照组和实验组杂交肉羊平均日采食量差异显著(P<0.05)，对照组和实验组湖羊平均日采食量差异不显著(P>0.05) ，对照组和实验组杂交肉羊和湖羊的平均日增重和平均料重比差异极显著(P<0.01)，杂交肉羊的平均日增重比对照组提高了约46%，湖羊的平均日增重比对照组提高了约44%，杂交肉羊的料重比比对照组降低了约32%，湖羊的料重比比对照组降低了约31%，说明本发明中的酶菌复合制剂可以明显提高肉羊的饲料利用率，提高肉羊的生产性能，降低了饲养成本。
另外，本发明有效补充肉羊体内有益菌含量，促进饲料中纤维素、木质素、蛋白质等大分子物质的降解，秸秆消化率提高10%以上，氮磷排泄率降低10%以上。
除特殊说明的外，本发明所述的百分数均为质量百分数，所述的比值均为质量比。
最后应说明的是：以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种肉羊专用酶菌复合制剂，其特征在于：包括以下组分：解淀粉芽孢杆菌、瘤胃双歧杆菌、动物双歧杆菌、地衣芽孢杆菌、热带假丝酵母、植酸酶、纤维素酶、木聚糖酶、甘露聚糖酶、蛋白酶、果胶酶。
2.根据权利要求1所述的一种肉羊专用酶菌复合制剂，其特征在于：所述的酶菌复合制剂由以下重量份的原料制备而成：解淀粉芽孢杆菌10-20份、瘤胃双歧杆菌10-25份、动物双歧杆菌 5-15份、地衣芽孢杆菌 5-10份、热带假丝酵母5-15份、植酸酶 1-8份、纤维素酶10-25份、木聚糖酶5-15份、甘露聚糖酶10-20份、蛋白酶1-10份、果胶酶5-15份。
3.根据权利要求1所述的一种肉羊专用酶菌复合制剂，其特征在于：所述植酸酶的酶活为1800-2200U/g，所述纤维素酶的酶活为20000U/g，所述木聚糖酶的酶活为15000U/g，所述甘露聚糖酶的酶活为5000U/g，所述蛋白酶的酶活为2000U/g，所述果胶酶的酶活为1000U/g。
4.根据权利要求1所述的一种肉羊专用酶菌复合制剂的制备方法，其特征在于：包括培养解淀粉芽孢杆菌CICC21789步骤；所述的培养解淀粉芽孢杆菌CICC21789：发酵培养的体积接种量为5～10%，发酵培养温度为36～38℃，发酵罐搅拌转速200～220rpm，培养时间为25～36h。
5.根据权利要求4所述的一种肉羊专用酶菌复合制剂的制备方法，其特征在于：还包括培养瘤胃双歧杆菌步骤；所述的培养瘤胃双歧杆菌：活化培养温度为36～39℃，活化培养时间为44～48h；发酵培养的体积接种量为5～10%，发酵培养温度为36～39℃，发酵培养时间为48～54h，发酵培养基的配方为葡萄糖15～25g/L、酪蛋白胨20～30g/L、酵母粉10～20g/L、磷酸氢二钾1～5g/L、半胱氨酸0.1～1g/L、氯化钙0.2～0.6g/L、吐温80 1～3g/L、硫酸锌0.1～1g/L和氯化镁0.1～0.6g/L，获得发酵液的瘤胃双歧杆菌含量≥108个/ml。
6.根据权利要求4所述的一种肉羊专用酶菌复合制剂的制备方法，其特征在于：还包括培养动物双歧杆菌CICC6165步骤；所述的培养动物双歧杆菌CICC6165：发酵培养的体积接种量为5～10%，发酵培养温度为36～38℃，发酵培养时间48～52h，获得发酵液的动物双歧杆菌含量≥5×108个/ml，发酵培养基的配方为葡萄糖5～15g/L、蛋白胨10～20g/L、牛肉粉10～20g/L、酵母粉5～15g/L、磷酸氢二钾0.2～0.6g/L、磷酸二氢钾0.1～0.5g/L、L-半胱氨酸0.1～0.5g/L、氯化铵0.5～1.5g/L和硫酸镁0.1～0.3g/L。
7.根据权利要求4所述的一种肉羊专用酶菌复合制剂的制备方法，其特征在于：还包括培养热带假丝酵母CICC1419步骤；所述的培养热带假丝酵母CICC1419：发酵培养的体积接种量为5～10%，发酵培养温度为28～30℃，发酵罐搅拌转速200～220rpm，发酵培养时间为36～40h，发酵罐获得的发酵液热带假丝酵母含量≥5×109个/ml。
8.根据权利要求4所述的一种肉羊专用酶菌复合制剂的制备方法，其特征在于：还包括培养地衣芽孢杆菌CICC20085步骤；所述的培养地衣芽孢杆菌CICC20085：采用的活化培养基的配方为胰蛋白胨5～10g/L、酵母粉1～5g/L和氯化钠5～10g/L，活化培养温度为36～39℃，摇瓶转速150～180rpm，培养时间为10～12h；发酵培养的体积接种量为5～10%，发酵培养温度为36～39℃，发酵罐搅拌转速200～220rpm，发酵培养时间为30～40h，发酵罐获得的发酵液：地衣芽孢杆菌芽孢转化率为95%以上，含量≥1×1010个/ml。
9.根据权利要求7所述的一种肉羊专用酶菌复合制剂的制备方法，其特征在于：所述的培养热带假丝酵母CICC1419：采用的活化培养基的配方为胰蛋白胨10～20g/L、酵母粉5～10g/L和葡萄糖15～25g/L，pH为4.5～5.0；活化培养温度为28～30℃，摇瓶转速130～150rpm，活化培养时间为20～24h。
10.根据权利要求4所述的一种肉羊专用酶菌复合制剂的制备方法，其特征在于：制备的解淀粉芽孢杆菌CICC21789：为解淀粉芽孢杆菌CICC21789休眠体微生物干粉，解淀粉芽孢杆菌芽孢含量≥1.5×1011个/克；制备的瘤胃双歧杆菌：为瘤胃双歧杆菌休眠体微生物干粉，瘤胃双歧杆菌含量≥1.5×1011个/克；制备的动物双歧杆菌CICC6165：为动物双歧杆菌CICC6165休眠体微生物干粉，动物双歧杆菌含量≥4×1010个/克；制备的地衣芽孢杆菌CICC20085：为地衣芽孢杆菌CICC20085休眠体微生物干粉，地衣芽孢杆菌芽孢含量≥1.5×1011个/克；制备的热带假丝酵母CICC1419：为热带假丝酵母CICC1419休眠体微生物干粉，热带假丝酵母含量≥3×1010个/克。
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