CN110694047A - 治疗肥胖及高血脂症的苦瓜多肽复方植物药及制备方法 - Google Patents

治疗肥胖及高血脂症的苦瓜多肽复方植物药及制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种治疗肥胖及高血脂症的苦瓜多肽复方植物药及制备方法,按重量份计,其包括:苦瓜肽粉20‑25份、绿咖啡豆粉5‑8份、圆苞车前子壳粉5‑8份、奇亚籽油8‑10份、蓝莓粉3‑5份、决明子5‑8份、茯苓2‑4份、杜仲3‑5份、果蔬酵素粉3‑5份、桑叶5‑8份、山楂5‑10份、营养酵母1‑2份、魔芋葡甘聚糖5‑8份、荷叶5‑8份。其具有丰富的膳食纤维(包括果蔬酵素粉、蓝莓粉)以及苦瓜肽、奇亚籽油、决明子、茯苓、杜仲等降血糖、血脂成分,能够充分促进肠道吸收,可起到轻身减肥、降脂控糖等作用。

Description

治疗肥胖及高血脂症的苦瓜多肽复方植物药及制备方法
技术领域
本发明涉及药品开发与生物发酵领域。更具体地说,本发明涉及一种治疗肥胖及高血脂症的苦瓜多肽复方植物药及制备方法。
背景技术
随着人们生活节奏的加快、生活水平提高、加之食品烹调过程中重在提高食品单一的营养成分、色、香、味而忽略了综合的营养需求,从而使糖尿病、脂代谢异常、肥胖症、便秘等的发病率在世界范围内逐年增加。
越来越多的研究证明:冠心病、糖尿病、肠胃疾病、肥胖等生活中常见的慢性疾病的起因,已不仅仅是高热量、高脂肪食物的过多食用,还有就是膳食纤维的摄入严重不足。有研究表明,60%以上的肥胖和便秘相关。便秘会增加人体对食物中的能量物质的吸收,导致肥胖的发生,严重地,还会使有毒、有害物质对肠壁作用的时间延长,引发高血压、高脂血症、糖尿病、癌症等多种疾病。
因此,如何提供一种具有减肥降脂效果的植物药制剂显得尤为重要。
发明内容
为解决上述技术问题,本发明提供了一种治疗肥胖及高血脂症的苦瓜多肽复方植物药及其制备方法,其具有丰富的膳食纤维(包括果蔬酵素粉、蓝莓粉)以及苦瓜肽、奇亚籽油、决明子、茯苓、杜仲等降血糖、血脂成分,能够充分促进肠道吸收,可起到轻身减肥、降脂控糖等作用。
为了实现根据本发明的这些目的和其它优点,提供了一种治疗肥胖及高血脂症的苦瓜多肽复方植物药,其特征在于,按重量份计,其包括:苦瓜肽粉20-25份、绿咖啡豆粉5-8份、圆苞车前子壳粉5-8份、奇亚籽油8-10份、蓝莓粉3-5份、决明子5-8份、茯苓2-4份、杜仲3-5份、果蔬酵素粉3-5份、桑叶5-8份、山楂5-10份、营养酵母1-2份、魔芋葡甘聚糖5-8份、荷叶5-8份。
优选的,所述营养酵母包括富硒酵母和/或富铬酵母。
优选的,所述苦瓜肽粉的制备方法包括如下步骤:
S11、取新鲜苦瓜、干燥苦瓜、苦瓜籽中的一项或几项作为苦瓜原料,加入苦瓜原料重量5倍的去离子水,并在25℃水温下浸泡8-12h,取出再用去离子水冲洗2-3遍;
S12、将清洗后的苦瓜原料进行干燥,打碎磨浆,得到苦瓜浆液;
S13、取苦瓜浆液以及缓冲液进行混合,以获得混合体系,按重量比计,按照苦瓜浆液:缓冲液=1:(4.5-5.5);记录混合体系总体积数值,将pH值调节为7后对混合体系进行温度处理,以获得浸提物;
所述温度处理过程包括:
升温至45-55℃,保温45-60min,再降温至20-25℃,保温25-30min,并记录此时混合体系整体的第一体积数值;按照(总体积-第一体积)*60%补入含有去离子水和缓冲液的第一混合液,且按照重量比计,去离子水:缓冲液=4:1;补入第一混合液后,升温至60-75℃,保温60-75min,再降温至45-55℃,保温30-35min,并记录此时混合体系整体的第二体积数值;按照(总体积-第二体积)*75%补入含有去离子水和缓冲液的第二混合液,且按照重量比计,去离子水:缓冲液=3:1;补入第二混合液后,升温至80-90℃,保温75-85min,再降温至60-75℃,保温35-45min;
S14、将浸提物温度降至20-25℃后对所述浸提物进行酶解,以获得苦瓜肽酶解体系;其中,所述酶解过程包括:
第一次酶解:将浸提物的pH值调节至8.0,按浸提物重量的4.5%加入胰蛋白酶,80-100转/min条件下搅拌,且搅拌的同时升温至35-40℃,保温45-60min后得到第一酶解体系;
第二次酶解:待第一酶解体系温度降至20-25℃后,再调整其pH值至3.5,按第一酶解体系重量的3%加入果胶酶,80-100转/min条件下搅拌,且搅拌的同时升温至45-55℃,保温40-60min后得到第二酶解体系;
第三次酶解:待第二酶解体系温度降至20-25℃后,再调整其pH值至4.8,按第二酶解体系重量的2%加入纤维素酶,80-100转/min条件下搅拌,且搅拌的同时升温至55-60℃,保温30-45min后得到第三酶解体系;
S15、待步骤S14中的酶解过程完成后,对获得的第三酶解体系升温至90℃,维持10min,以完成灭酶活过程,获得苦瓜肽粗提体系;再在所述苦瓜肽粗提体系中按其重量的4-5%加入活性炭,搅拌均匀,在65℃下保温60-90min后离心,去沉渣后获得苦瓜肽粗提液;
将所述苦瓜肽粗提液经硅藻土过滤,以得到苦瓜肽清液,且过滤压力为0.2-0.3MPa;再在所述苦瓜肽清液中按其重量加入4.5%的活性炭,静置45-50min后离心,去沉渣;
S16、将去沉渣后的苦瓜肽清液经过滤孔径为0.5-0.8μm的微滤陶瓷膜进行过滤,过滤温度为60℃,以获得微滤膜透过液;
再将所述微滤膜透过液经截留分子量为100-200kDa卷式超滤膜进行过滤,过滤温度为45-50℃,以获得超滤膜透过液;
再将所述超滤膜截留液经截留分子量为150-1000Da的卷式高压反渗透膜进行浓缩,以除去水分及部分残留无机盐和小分子杂质,浓缩温度在40℃以下,以得到苦瓜肽浓缩液;
S17、通过真空冷冻干燥方法对所述苦瓜肽浓缩液进行干燥,以获得苦瓜多肽蛋白含量不低于30%的苦瓜肽粉。
优选的,所述缓冲液为磷酸盐缓冲液。
优选的,所述奇亚籽油的提取方法包括:
S21、取新鲜奇亚籽,在25℃下浸泡24-36h后取出,冲洗2-3遍,烘干后磨碎,过100目筛,以获得奇亚籽粉;
S22、取奇亚籽粉,并在其中加入其重量5-10倍的去离子水,以获得酶解原料,并对所述酶解原料进行酶解,以获得酶解体系;其中,所述酶解过程包括:
第一次酶解:按奇亚籽粉重量的3-4%加入胰蛋白酶以及按奇亚籽粉重量的8-10%加入用于调节细胞膜和/或细胞壁通透性的透性调节液,调节pH值至6.5-7.5,充分搅拌,且搅拌的同时升温至40-45℃,保温35-40min后得到第一酶解体系;所述透性调节液由酸溶液、甘油、氯化钠和溶菌酶组成,且按重量比计,酸溶液:甘油:氯化钠:溶菌酶=1:(0.5-0.8):(0.05-0.08):(0.01-0.03);
第二次酶解:待第一次酶解体系降至20-25℃后,再调整其pH值至3.5-4.5,按第一次酶解体系重量的3.0-4.5%加入果胶酶,充分搅拌,且搅拌的同时升温至50-60℃,保温30-35min后得到第二酶体系;
第三次酶解:待第二次酶体系降至20-25℃后,再调整其pH值至4.0-5.5,按第二次酶解体系重量的2-4%加入纤维素酶,充分搅拌,且搅拌的同时升温至50-65℃,保温25-35min后得到第三酶解体系;
S23、待酶解完成后,对获得的第三酶解体系升温至85℃,维持10min,以完成灭酶活过程,获得奇亚籽粗提体系;
S24、在奇亚籽粗提体系中按其重量的4%加入活性炭,搅拌均匀,在65℃下保温65-85min后离心,去沉渣,获得奇亚籽粗提液;再将奇亚籽粗提液经硅藻土过滤,得到奇亚籽油清液,且过滤压力控制在0.3-0.4MPa;再在奇亚籽油清液中按其重量加入3%的活性炭,静置45-50min,然后离心,去沉渣,静置2-3h后取上层油层,即得到所述奇亚籽油。
还提供一种治疗肥胖及高血脂症的苦瓜多肽复方植物药的制备方法,其包括:
S100、制备苦瓜肽粉以及奇亚籽油;
S200、将上述重量份的各原料充分混合,以获得原料混合物,再将所述原料混合物置于发酵罐中,加入所述原料混合物重量5-10倍的去离子水以及所述原料混合物重量0.1-0.3倍的纤维素酶和0.2-0.25倍的果胶酶,调节pH为6.5-7,且调节至35-45℃进行发酵,发酵36-48h后分离出液态的发酵液;
S300、在所述发酵液中添加其重量10-15%的絮凝剂;所述絮凝剂的制备包括:
(1)称取以下重量份数的各组分:甘蔗渣35-40份、芦荟粉20-30份、植物胶10-15份、魔芋淀粉5-10份、酵母粉2-3份以及水100-150份;
(2)将称量好的上述各组分混合均匀,向混合组分中加入其重量的2-3倍的去离子水,混合均匀并装密封容器中,于150-180rpm、25-30℃条件下避光发酵36-48h小时,再于100-120rpm、25-30℃条件下避光发酵12-24h小时,以获得絮凝剂发酵液;
(3)在所述絮凝剂发酵液中加入其重量10-15%的小麦粉和3-5%的膨润土,混合均匀后即得所述絮凝剂;
S400、于10000-15000rpm条件下对经过步骤S300处理的发酵液进行一次离心,获得第一清液;将所述第一清液依次通过孔径为4-8μm的滤膜、0.2-0.5μm的微滤膜、截流分子量为3000-10000Da的超滤膜以及截流分子量为300-800Da的纳滤膜进行过滤,以获得第二清液;其中,通过孔径为4-8μm的滤膜、0.2-0.5μm的微滤膜过滤时的过滤压力均为0.2-0.4MPa,过滤温度均为25-35℃;通过截流分子量为3000-10000Da的超滤膜以及截流分子量为300-800Da的纳滤膜进行过滤时的过滤压力均为1.5-2.0MPa,过滤温度均为25-35℃;
S500、将所述第二清液以3-5BV/h的流速流过大孔吸附树脂;
S600、流经大孔吸附树脂排的第二清液以3-5BV/h的流速依次流经阴、阳离子树脂柱;
S700、流经阴、阳离子树脂柱排出的第二清液以50-55mL/min的流速流经活性炭移动床,在对流经活性炭移动床的第二清液进行浓缩干燥,粉碎后得初级产品;
S800、将所述初级产品放入85%的乙醇中溶解,溶解温度75-85℃;降温结晶,将晶浆进行离心分离,获得一次晶体;再用85%的乙醇对所述一次晶体进行二次溶解;再次降温结晶,再次进行离心分离以获得二次晶体;
S900、对所述二次晶体经干燥、粉碎,以获得治疗肥胖及高血脂症的苦瓜多肽复方植物药。
本发明至少包括以下有益效果:
本发明通过阶段性升温、反复酶解以及多重过滤的提取工艺,使得苦瓜肽中苦瓜多肽蛋白含量不低于20%,以及通过反复酶解的方式获得奇亚籽油,由此可大幅提高Omega-3、亚油酸、亚麻酸的含量,使其充分发挥其降血脂、预防动脉硬化的功能,进一步的,苦瓜肽粉、奇亚籽油与其他富含膳食纤维、降脂控糖的组分(如绿咖啡豆粉、圆苞车前子壳粉、果蔬酵素粉、蓝莓粉、决明子、茯苓、杜仲、果蔬酵素粉、魔芋精粉、桑叶提取物、山楂提取物、营养酵母、荷叶等)复配使用后,其具有明显的降血糖、降血压血脂、减肥等功效。
本发明的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现,部分还将通过对本发明的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。
具体实施方式
下面结合实例对本发明做进一步的详细说明,以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。
应当理解,本文所使用的诸如“具有”、“包含”以及“包括”术语并不配出一个或多个其它元件或其组合的存在或添加。
需要说明的是,下述实施方案中所述试验方法,如无特殊说明,均为常规方法,所述试剂和材料,如无特殊说明,均可从商业途径获得。
<实施例1>
按重量份计,本实施例中的治疗肥胖及高血脂症的苦瓜多肽复方植物药包括:苦瓜肽粉20份、绿咖啡豆粉5份、圆苞车前子壳粉5份、奇亚籽油8份、蓝莓粉3份、决明子5份、茯苓2份、杜仲3份、果蔬酵素粉3份、桑叶5份、山楂5份、营养酵母1份、魔芋葡甘聚糖5份、荷叶5份。其中,所述营养酵母包括富硒酵母和/或富铬酵母。
进一步的,所述苦瓜肽粉的制备方法包括如下步骤:
S11、取新鲜苦瓜、干燥苦瓜、苦瓜籽中的一项或几项作为苦瓜原料,加入苦瓜原料重量5倍的去离子水,并在25℃水温下浸泡8-10h(优选8.5h),取出再用去离子水冲洗2-3遍,以去除农残药残以及杂质;
S12、将冲洗后的苦瓜原料风干干燥,取出打碎磨浆,得到苦瓜浆液;
S13、取苦瓜浆液以及缓冲液(所述缓冲液为包含有酸、碱、盐等试剂的缓冲体系,如磷酸盐缓冲液)进行混合,以获得混合体系,按重量比计,按照苦瓜浆液:缓冲液=1:(4.5-5.5)(优选为1:5);记录混合体系总体积数值,将pH值调节为7后对混合体系进行温度处理,以获得浸提物;
其中,所述温度处理过程包括:
升温至45-55℃(优选为50℃),保温45-60min(优选为55min),降温至20-25℃(优选为22℃),保温25-30min(优选为28min),并记录此时混合体系整体的第一体积数值;因在前述升温、保温过程中,其反应体系内的水、酸等会被蒸发,有可能会导致其中酸、碱以及无机离子的溶解度产生变化,从而影响浸提效果,因此,在前述升温、保温过程后,需按照(总体积-第一体积)*60%补入含有去离子水和所述缓冲液的第一混合液,且按照重量比计,去离子水:缓冲液=4:1,由此对水、酸等蒸发后的反应体系进行补偿,使反应体系始终处于较优的浸提环境中;补入第一混合液后,升温至60-75℃(优选为65℃),保温60-75min(优选为65min),降温至45-55℃(优选为50℃),保温30-35min(优选为32℃),并记录此时混合体系整体的第二体积数值;按照(总体积-第二体积)*75%补入含有去离子水和缓冲液的第二混合液,且按照重量比计,去离子水:缓冲液=3:1,该次升温、保温的温度相较第一次而言有所提高,因此,反应体系内的水、酸等的蒸发效果更为明显,因此此次补入的第二混合液的比例要有所上升(增加到75%),且第二混合液中缓冲液的比例有所增加;补入第二混合液后,升温至80-90℃(优选为85℃),保温75-85min(优选为80min),降温至60-75℃(优选为70℃),保温35-45min(优选为40min);
本步骤中,通过阶段性的升温、保温,可使得组分的细胞结构(如细胞壁等)组成在不同的温度变化环境下被反复冲击、破坏,同时,每一升温、保温阶段结束后补充相应比例的水以及缓冲液,由此对水、酸等蒸发后的反应体系进行补偿,使反应体系始终处于较优的浸提环境中,以达到最佳的浸提效果;
S14、将浸提物温度降至20-25℃后对所述浸提物进行酶解,以获得苦瓜肽酶解体系;其中,所述酶解过程包括:
第一次酶解:将浸提物的pH值调节至8.0,按浸提物重量的4.5%加入胰蛋白酶,80-100转/min条件下搅拌,且搅拌的同时升温至35-40℃(优选为37℃),保温45-60min(优选55min)后得到第一酶解体系;
第二次酶解:待第一酶解体系温度降至20-25℃后,再调整其pH值至3.5,按第一酶解体系重量的3%加入果胶酶,80-100转/min条件下搅拌,且搅拌的同时升温至45-55℃(优选为50℃),保温40-60min(优选50min)后得到第二酶解体系;
第三次酶解:待第二酶解体系温度降至20-25℃后,再调整其pH值至4.8,按第二酶解体系重量的2%加入纤维素酶,80-100转/min条件下搅拌,且搅拌的同时升温至55-60℃(优选为58℃),保温30-45min(优选35min)后得到第三酶解体系;
由于本发明中的组分多为植物组分,其细胞结构中包含有细胞壁,因此,本步骤中,通过在不同阶段采用不用的酶及酶解条件对细胞壁进行充分酶解,使细胞壁中的纤维素、果胶等成分破坏殆尽,可使得细胞壁内的有效成分(如苦瓜多肽蛋白)得以充分释放,以提高其提取效率;
S15、待步骤S14中的酶解过程完成后,对获得的第三酶解体系升温至90℃,维持10min,以完成灭酶活过程,获得苦瓜肽粗提体系;再在所述苦瓜肽粗提体系中按其重量的4-5%加入活性炭,搅拌均匀,在65℃下保温60-90min(优选75min)后离心,去沉渣后获得苦瓜肽粗提液;
将所述苦瓜肽粗提液经硅藻土过滤,以得到苦瓜肽清液,且过滤压力为0.2-0.3MPa(优选0.25MPa);再在所述苦瓜肽清液中按其重量加入4-5%的活性炭,静置45-50min后离心,去沉渣;
通过上述活性炭、硅藻土的吸附处理,苦瓜肽酶解液中的色素、悬浮颗粒以及胶体等杂质,使最后获得的成品纯度更高;
S16、将去沉渣后的苦瓜肽清液经过滤孔径为0.5-0.8μm的微滤陶瓷膜进行过滤,过滤温度为55-65℃(优选为60℃),以获得微滤膜透过液;进一步的,所述微滤陶瓷膜采用三支膜并联使用;
再将所述微滤膜透过液经截留分子量为100-200kDa卷式超滤膜进行过滤,除去大分子杂质,操作温度控制在55-65℃,以获得超滤膜透过液;其中,卷式超滤膜为能截留分子量为100-200kDa的卷式超滤膜,且所述卷式超滤膜采用两支膜并联使用;
再将所述超滤膜截留液经截留分子量为150-1000Da的卷式高压反渗透膜进行浓缩,以除去水分及部分残留无机盐和小分子杂质,浓缩温度在40℃以下,以得到苦瓜肽浓缩液,且苦瓜肽浓缩液的固形物含量≥40%;其中,卷式高压反渗透膜系统为高压浓缩膜,具体由(PS)聚砜或(PFS)聚醚砜材料等复合材料膜制成,且采用四支膜串联使用;
该步骤中采用多层次的膜分离纯化技术分离纯化苦瓜多肽蛋白,其浓缩温度低,有效保证苦瓜蛋白多肽的天然活性及其高含量;
S17、通过真空冷冻干燥方法对所述苦瓜肽浓缩液进行干燥,以获得苦瓜多肽蛋白含量不低于30%的苦瓜肽粉。
此外,奇亚籽富含人体必需脂肪酸α-亚麻酸,而亚麻酸是一种多不饱和脂肪酸,也是Omega-3的前体物质。Omega-3是一组多元不饱和脂肪酸,其含有的二十碳五烯酸(EPA)具有降低胆固醇和甘油三酯的含量、促进体内饱和脂肪酸代谢,从而起到降低血液粘稠度、增进血液循环、提高组织供氧而消除疲劳、防止脂肪在血管壁的沉积、预防动脉粥样硬化的形成和发展、预防脑血栓、脑溢血、高血压等功效;并且奇亚籽油自身含有多种抗氧化活性成分(绿原酸,咖啡酸,杨梅酮,槲皮素,山奈酚等),可保护Omega-3的品质,使其不易腐坏变质和产生有毒物质和异味。以此本发明还提供了一种奇亚籽油的提取方法,其具体包括:
S21、取新鲜奇亚籽,在25℃下浸泡24-36h(优选30h)后取出,冲洗2-3遍,烘干后磨碎,过100目筛,以获得奇亚籽粉;
S22、取奇亚籽粉,并在其中加入其重量5-10倍的去离子水,以获得酶解原料,并对所述酶解原料进行酶解,以获得酶解体系;其中,所述酶解过程包括:
第一次酶解:按奇亚籽粉重量的3-4%(优选3.5%)加入胰蛋白酶以及按奇亚籽粉重量的8-10%(优选8.5%)加入用于调节细胞膜和/或细胞壁通透性的透性调节液,调节pH值至6.5-7.5(优选7.0),充分搅拌,且搅拌的同时升温至40-45℃(优选为43.5℃),保温35-40min(优选为35min)后得到第一酶解体系;所述透性调节液由酸溶液、甘油、氯化钠和溶菌酶组成,且按重量比计,酸溶液:甘油:氯化钠:溶菌酶=1:(0.5-0.8):(0.05-0.08):(0.01-0.03)(优选为酸溶液:甘油:氯化钠:溶菌酶=1:0.7:0.05:0.02,且所述酸溶液为柠檬酸溶液);
第二次酶解:待第一次酶解体系温度降至20-25℃后,再调整其pH值至3.5-4.5(优选为4.0),按第一次酶解体系重量的3.0-4.5%(优选为4.0%)加入果胶酶,充分搅拌,且搅拌的同时升温至50-60℃(优选为55℃),保温30-35min(优选为32min)后得到第三酶解体系;
第三次酶解:待第二次酶解体系温度降至20-25℃后,再调整其pH值至4.0-5.5(优选为5.0),按第二次酶解体系重量的2-4%(优选为3.0%)加入纤维素酶,充分搅拌,且搅拌的同时升温至50-65℃(优选为60℃),保温25-35min(优选为30min)后得到第三酶解体系;
S23、待酶解完成后,对获得的第三酶解体系升温至85℃,维持10min,以完成灭酶活过程,获得奇亚籽粗提体系;
S24、在奇亚籽粗提体系中按其重量的4%加入活性炭,搅拌均匀,在65℃下保温65-85min(优选为70min)后离心,去沉渣,获得奇亚籽粗提液;再将奇亚籽粗提液经硅藻土过滤,得到奇亚籽油清液,且过滤压力控制在0.3-0.4MPa(优选为0.35Mpa);再在奇亚籽油清液中按其重量加入3%的活性炭,静置45-50min,然后离心,去沉渣,静置2-3h(优选为2.5h)后取上层油层,即得到所述奇亚籽油。
<实施例2>
本实施例与实施例1的不同之处仅在于,按重量份计,本实施例中的具有减肥降脂效果的苦瓜多肽复合营养素由以下组分组成:苦瓜肽粉24份、绿咖啡豆粉8份、圆苞车前子壳粉8份、奇亚籽油9份、蓝莓粉5份、决明子8份、茯苓4份、杜仲5份、果蔬酵素粉4份、桑叶8份、山楂10份、营养酵母2份、魔芋葡甘聚糖8份、荷叶7份。
<实施例3>
本实施例与实施例1的不同之处仅在于,按重量份计,本实施例中的具有减肥降脂效果的苦瓜多肽复合营养素由以下组分组成:苦瓜肽粉22份、绿咖啡豆粉7份、圆苞车前子壳粉6份、奇亚籽油9份、蓝莓粉4份、决明子6份、茯苓3份、杜仲4份、果蔬酵素粉4份、桑叶7份、山楂8份、营养酵母1.5份、魔芋葡甘聚糖7份、荷叶6份。
<苦瓜肽分子量检测结果>
采用申请号201710832199.8(“一种全程低温生产苦瓜多肽蛋白提取物的新方法、苦瓜多肽蛋白提取物及其应用”)的专利申请中实施例1所述的方法提取苦瓜肽,以作为对比例1,将其与通过本发明实施例1-3中的苦瓜肽粉制备方法制备获得的苦瓜肽粉进行高效凝胶过滤色谱法检测,以获得苦瓜肽分子量大小及分布范围,其结果如表1所示。
表1苦瓜肽分子量大小及分布范围
Figure BDA0002248264680000101
由此可见,本发明的苦瓜肽粉制备方法中,首先通过阶段性的升温、保温,可使得组分的细胞结构(如细胞壁等)组成在不同的温度变化环境下被反复冲击、破坏,同时,每一升温、保温阶段结束后补充相应比例的水以及缓冲液,由此对水、酸等蒸发后的反应体系进行补偿,使反应体系始终处于较优的浸提环境中,进一步再进行阶段性升温、反复酶解以及多层次的膜分离纯化技术提取工艺来制备苦瓜多肽蛋白,使得到的苦瓜多肽提取物中苦瓜多肽蛋白的含量高于30%,且提取物产品中不含大豆蛋白多肽等其他非苦瓜来源的多肽蛋白。从表1中可以看出,本发明制备获得的5000-7000Da范围内的苦瓜多肽片段占比接近30%,而5000-7000Da范围内的苦瓜多肽片段正是具有调节血糖功能、片段大小最接近胰岛素分子量的片段,因此得到的苦瓜多肽提取物具有非常好的调控血糖代谢效果,尤其是可大幅度提高胰岛素受体的结合能力及降血糖的效果。
<奇亚籽油检测结果>
首先取新鲜500g,于100℃烘箱内烘干10-12h,取出粉碎,过100目筛后按照料液比(mL/g)4:1加入石油醚,形成预混料,并将预混料投入到萃取罐中进行萃取,萃取温度为30℃、压力为5MPa,萃取时间为3-4h分钟,得到萃取液;将萃取液在常压下冷却至0℃,再加入吸附剂除杂,过滤即得做为对比例2的奇亚籽油,再将其通过本发明实施例1-3中的奇亚籽油提取方法获得的奇亚籽油进行检测,以获得奇亚籽油提取率、棕榈酸、硬脂酸、油酸、亚油酸及亚麻酸的相对含量,其结果如表2所示。
表2奇亚籽油提取率、棕榈酸、硬脂酸、油酸、亚油酸及亚麻酸含量
Figure BDA0002248264680000111
本发明通过在不同阶段采用不用的酶及酶解条件对奇亚籽细胞壁进行充分酶解,使细
胞壁中的纤维素、果胶等成分破坏殆尽,同时,酸溶液、甘油、氯化钠、溶菌酶可通过改变细胞壁或细胞膜结构来改变两者的通透性,因此本发明中通过采用调节细胞膜和/或细胞壁通透性的透性调节液来调节细胞膜和/或细胞壁透性,可使得细胞壁和/或细胞壁结构被破坏,使其内容的有效成分(如亚麻酸等)得以充分释放,进一步发挥其增强免免疫力、降血脂功效。具体的,由表2中可以看出,通过本发明的制备方法获得的奇亚籽油中,奇亚籽油提取率、棕榈酸、硬脂酸、油酸、亚油酸及亚麻酸含量均相对于对比例2有显著提高,其中,本发明制备获得的奇亚籽油中不饱和脂肪酸的含量约为86%,相较对比例2(约为35%)提高了约1.5倍,且其中亚麻酸的含量达到37%,相较对比例2(约为25%)提高了约0.5倍,而正是所述亚麻酸可起到增强免疫力,降低血脂的作用。
<实施例4>
本实施例还提供了一种实施例1-3任一项所述的治疗肥胖及高血脂症的苦瓜多肽复方植物药的制备方法,其包括:
S100、按照实施例1-3之一所述制备方法制备苦瓜肽粉以及奇亚籽油;
S200、将实施例1-3之一所述重量份的各原料充分混合,以获得原料混合物,再将所述原料混合物置于发酵罐中,加入所述原料混合物重量5-10倍(优选为9倍)的去离子水以及所述原料混合物重量0.1-0.3倍(优选为0.2倍)的纤维素酶和0.2-0.25倍(优选为0.22倍)的果胶酶,调节pH为6.5-7,且调节至35-45℃(优选为30℃)进行发酵,发酵36-48h(优选42h)后分离出液态的发酵液;
S300、在所述发酵液中添加其重量10-15%(优选12%)的絮凝剂;所述絮凝剂的制备包括:
(1)称取以下重量份数的各组分:甘蔗渣35-40份(优选为37份)、芦荟粉20-30份(优选为25份)、植物胶10-15份(优选为12份)、魔芋淀粉5-10份(优选为8份)、酵母粉2-3份(优选为2.5份)以及水100-150份(优选为120份);
(2)将称量好的上述各组分混合均匀,向混合组分中加入其重量的2-3倍的去离子水,混合均匀并装密封容器中,于150-180rpm(优选为160rpm)、25-30℃(优选为28℃)条件下避光发酵36-48h小时,再于100-120rpm(优选为110rpm)、25-30℃(优选为28℃)条件下避光发酵12-24h小时,以获得絮凝剂发酵液;
(3)在所述絮凝剂发酵液中加入其重量10-15%的小麦粉(优选12%)和3-5%的膨润土(优选4%),混合均匀后即得所述絮凝剂;
由此,可通过上述絮凝剂对发酵液中的无机离子进行去除,促进不溶物沉淀,降低有机物含量与吸附重金属,充分保障发酵液的活性成分纯度和质量;
S400、与10000-15000rpm(优选12000rpm)条件下对经过步骤S300处理的发酵液进行一次离心,获得第一清液;将所述第一清液依次通过孔径为4-8μm的滤膜、0.2-0.5μm的微滤膜、截流分子量为3000-10000Da的超滤膜以及截流分子量为300-800Da的纳滤膜进行过滤,以获得第二清液;其中,通过孔径为4-8μm的滤膜、0.2-0.5μm的微滤膜过滤时的过滤压力均为0.2-0.4MPa(优选为0.3Mpa),过滤温度均为25-35℃(优选为30℃);通过截流分子量为3000-10000Da的超滤膜以及截流分子量为300-800Da的纳滤膜进行过滤时的过滤压力均为1.5-2.0MPa(优选为1.8Mpa),过滤温度均为25-35℃(优选为30℃);
S500、将所述第二清液以3-5BV/h(优选4BV/h)的流速流过大孔吸附树脂;
S600、流经大孔吸附树脂的第二清液再以3-5BV/h(优选4BV/h)的流速依次流经阴、阳离子树脂柱;
S700、流经阴、阳离子树脂柱排出的第二清液以50-55mL/min的流速流经活性炭移动床,在对流经活性炭移动床的第二清液进行浓缩干燥,粉碎后得初级产品;其中,阳离子树脂柱中装填的是S2528型Lewatit阳离子交换树脂;阴离子树脂柱中装填的是315型阴离子交换树脂;
S800、将所述初级产品放入体积分数85%的乙醇中溶解,溶解温度75-85℃(优选为80℃),以通过高浓度乙醇沉淀产品中的核酸等杂质,提高产品纯度;降温结晶,将晶浆进行离心分离,获得一次晶体;再用体积分数85%的乙醇对所述一次晶体进行二次溶解;再次降温结晶,再次进行离心分离以获得二次晶体;
S900、对所述二次晶体经干燥、粉碎,以获得治疗肥胖及高血脂症的苦瓜多肽复方植物药。
<减重功效评价试验>
选取健康雌性大鼠60只,体重约在110-120g,在实验环境下预饲一周后随机分为4组,即正常对照组、高脂对照组、阳性对照组和本发明的苦瓜多肽复方植物药组。除正常对照组采用基础饲料组外,其它各组均采用高脂饲料,进行。造模8周后,以高脂造模组大鼠的体重明显大于对照组大鼠的平均体重(p<0.05)作为饮食诱导肥胖大鼠模型建立成功的标准,经记录高脂组大鼠最终的体重。
正常对照组以普通饲料喂养,自由进食饮水;高脂对照组以高脂饲料喂养,自由进食饮水;阳性对照组将辛伐他汀药物掺入高脂饲料喂养,自由进食饮水;苦瓜多肽复方植物药组将苦瓜多肽复方植物药(以下均为“苦瓜多肽复方植物药”)掺入高脂饲料中,自由进食饮水。记录初始体重,治疗期为8周,实验过程中每周检测1次体重变化情况,实验结束称量体重并记录,结果如表3所示。
表3苦瓜多肽复方植物药对大鼠体重的影响
Figure BDA0002248264680000131
由表3可以看出,随着试验时间的延长,各组大鼠体重均有所增长。在试验结束时,实施例1-3组的体重均显著低于高脂模型组且略高于空白对照组,与阳性对照相当甚至略低,效果均好于对比例,可起到降脂的作用,实施例2的效果最好。
<降血脂功效评价试验>
选取健康雌性大鼠110只,在实验环境下预饲一周后随机分为5组,即:正常对照组、高脂对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组。除正常对照组采用基础饲料组外,其它各组均采用高脂饲料。造模8周后,取血样检测生化指标确定高脂血症模型是否成功。以每天灌胃量为大鼠体重的2%,将苦瓜多肽复方植物药组配制成相应浓度的溶液,高、中和低剂量组每天分别按150mg/kg、100mg/kg和50mg/kg灌胃。其他组给予相应体积的蒸馏水,治疗期为8周。实验期间,动物在饲养房内饲养,室温(23±2)℃,12h明暗交替,自由摄食和饮水。末次喂养后,禁食不禁水10h,用水合氯醛麻醉后,腹主动脉取血。血样于室温静置30min后,4000r/min离心获得血清,用7600-20型全自动生化分析仪检测血清总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)含量,结果如表4所示。
表4苦瓜多肽复方植物药对大鼠TC和TG含量影响
Figure BDA0002248264680000142
Figure BDA0002248264680000151
由表4可见:高脂模型组中小鼠血清中的TC、TG含量均显著性高于正常对照组,说明通过试验期间高脂饲料的喂养,成功建立了小鼠高血脂模型;分别给予高、中、低剂量的苦瓜多肽复方植物药可降低大鼠血清中TC和TG浓度,其中中剂量组的降脂效果最为显著,实施例1,2,3的中剂量组与高脂模型对照组的TC浓度相比分别降低了34.3%,33.4%,32.9%;TG浓度分别降低了44.3%,38.4%,40.7%。由此可见,苦瓜多肽复方植物药对TG浓度的降低更为显著,可起到降低总胆固醇和甘油三酯的功效。
<人群减肥功效评价试验>
在自愿原则基础上挑选40名单纯性肥胖自愿者参加测试,人群要求:年龄区间25-40岁的成年脑力劳动者,体脂率≥35%,近期无疾病感染,未服用任何药物,设置空白组和实验组(实验组包括实施例1组、实施例2组和实施例3组),每组男女各5名。
按照分组制定60天的苦瓜多肽复方植物药减肥计划。实验组每日对应领取实施例1、2、3苦瓜多肽复方植物药各两份(10g/份),空白组领取空白对照剂各两份,用于中、晚餐前服用,实验组与空白组早餐、午餐与晚餐供应饮食种类和热量一致,早餐:脱脂牛奶250ml,鸡蛋1个,全麦吐司面包2片;午餐:果蔬180克,鱼或肉制品50g,豆制品75g,米饭若干;晚餐:蔬菜150克,鱼或肉制品75g,豆制品50g,米饭若干。全天正常饮水不少于1500ml。
测试苦瓜多肽复方植物药减肥计划前后,体重和体脂率变化。结果如表5所示:
表5人体减肥功效实验评价结果
Figure BDA0002248264680000152
Figure BDA0002248264680000161
由人体减肥功效实验评价结果可知,空白组实验前后的体重以及体脂率几乎没有变化;而实验组中男女志愿者的体重和体脂率在实验后均有所下降,体重和体脂率平均下降分别为3.2kg和2.3%;其中实施例2组的体重和体脂率较平均下降明显,分别为4.0kg和3.2%。同时,空白组和实验组参与者也均未出现身体不适感,工作生活质量未受任何影响。因此,本发明的具有减肥降脂效果的苦瓜多肽复方植物药,具有减肥减脂功效,适于肥胖人群日常食用。
<降血糖功效评价试验>
筛选初发肥胖2型糖尿病合并血脂异常患者,检测患者的空腹血糖、餐后血糖、糖化血红蛋白、血脂、体重、腰围、臀围、等指标,根据纳入和排除标准,筛选出合格病例150例。入组患者经过周的筛选期后经中央随机,分入降糖调脂方组和二甲双胍对照组,其中降糖调脂方组75例,二甲双胍组75例。男71例,女79例。患者年龄在35-66岁间。苦瓜多肽复方植物药平均年龄55.21±9.52,二甲双胍组平均年龄55.43±9.21。治疗组给予苦瓜多肽复方植物药,对照组给予二甲双胍,服药12周后测定患者餐前空腹血清中的血糖浓度,抽取静脉血,采用葡萄糖氧化酶法测定血糖,结果如表6所示。
苦瓜多肽复方植物药组:苦瓜多肽复方植物药(0.30g/片)每次一片,3次/日,口服,餐时服用,温开水送服。
二甲双胍组:二甲双胍0.25g/次,3次/日,口服,饭后服用,温开水送服。
表6苦瓜多肽复方植物药对患者空腹血糖浓度的影响
Figure BDA0002248264680000162
如表6所示,与治疗前相比,服用苦瓜多肽复方植物药组的患者的空腹血糖浓度显著下降,其在降低空腹血糖方面作用显著,效果与二甲双胍相当甚至更好一些,明显好于阳性对照组。
<降血压功效评价试验>
随机选取50例门诊高血压患者,年龄为33~65岁,平均年龄为51.66±10.35岁,其中男性30例,女性20例。入选标准:原发性高血压标准按照中国高血压防治指南推荐标准:收缩压(SBP)>140mmHg,舒张压(DBP)>90mmHg,家族中一级亲属没有原发性高血压病史,排除糖尿病及其它心血管系统疾病、肾脏血管疾病、肾功能衰竭、嗜铬细胞瘤、醛固酮增多症、内分泌等疾病,并能排除盐敏感性高血压及一些单基因遗传病等为高血压患者入选。在服药期间,患者的血压值标准为SBP:130~139mmHg,DBP:85~89mmHg之间。
筛选出的患者分成两组,一组服用苦瓜多肽复方植物药、一组服用西药。苦瓜多肽复方植物药组每次服用一片,一日3次;西药组每次按药物说明书服用西药,记录患者治疗前的初始血压,服药12周后分别对两组患者的舒张压和收缩压进行测量,其结果如表7所示。
表7苦瓜多肽复方植物药对患者血压的影响
Figure BDA0002248264680000171
如表7所示,与治疗前相比,服用苦瓜多肽复方植物药的患者的舒张压明显下降,实施例2下降最为明显(下降了13.87mmHg),具有明显的降低舒张压的作用,其效果与西药组相当甚至更好一些,明显好于阳性对照组。如表7所示,与治疗前相比,服用苦瓜多肽复方植物药的患者的收缩压明显下降,实施例2下降最为明显(下降了8.10mmHg),具有明显的降低舒张压的作用,其效果与西药组相当甚至更好一些,明显好于阳性对照组。
需要说明的是,上述实施例1至4中的技术方案可进行任意组合,且组合后获得的技术方案均属于本发明的保护范围。
综上所述,本发明通过阶段性升温、反复酶解以及多重过滤的提取工艺,使得苦瓜肽中苦瓜多肽蛋白含量不低于20%,以及通过反复酶解的方式获得奇亚籽油,由此可大幅提高Omega-3、亚油酸、亚麻酸的含量,使其充分发挥其降血脂、预防动脉硬化的功能,进一步的,苦瓜肽粉、奇亚籽油与其他富含膳食纤维、降脂控糖的组分(如绿咖啡豆粉、圆苞车前子壳粉、果蔬酵素粉、蓝莓粉、决明子、茯苓、杜仲、果蔬酵素粉、魔芋精粉、桑叶提取物、山楂提取物、营养酵母、荷叶等)复配使用后,其具有明显的降血糖、降血压血脂、减肥等功效。
这里说明的设备数量和处理规模是用来简化本发明的说明的。对本发明的应用、修改和变化对本领域的技术人员来说是显而易见的。
尽管本发明的实施方案已公开如上,但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用,它完全可以被适用于各种适合本发明的领域,对于熟悉本领域的人员而言,可容易地实现另外的修改,因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下,本发明并不限于特定的细节和这里示出与描述的实例。

Claims (6)

1.治疗肥胖及高血脂症的苦瓜多肽复方植物药,其特征在于,按重量份计,其包括:苦瓜肽粉20-25份、绿咖啡豆粉5-8份、圆苞车前子壳粉5-8份、奇亚籽油8-10份、蓝莓粉3-5份、决明子5-8份、茯苓2-4份、杜仲3-5份、果蔬酵素粉3-5份、桑叶5-8份、山楂5-10份、营养酵母1-2份、魔芋葡甘聚糖5-8份、荷叶5-8份。
2.如权利要求1所述的苦瓜多肽复方植物药,其特征在于,所述营养酵母包括富硒酵母和/或富铬酵母。
3.如权利要求1所述的苦瓜多肽复方植物药,其特征在于,所述苦瓜肽粉的制备方法包括如下步骤:
S11、取新鲜苦瓜、干燥苦瓜、苦瓜籽中的一项或几项作为苦瓜原料,加入苦瓜原料重量5倍的去离子水,并在25℃水温下浸泡8-12h,取出再用去离子水冲洗2-3遍;
S12、将清洗后的苦瓜原料进行干燥,打碎磨浆,得到苦瓜浆液;
S13、取苦瓜浆液以及缓冲液进行混合,以获得混合体系,按重量比计,按照苦瓜浆液:缓冲液=1:(4.5-5.5);记录混合体系总体积数值,将pH值调节为7后对混合体系进行温度处理,以获得浸提物;
所述温度处理过程包括:
升温至45-55℃,保温45-60min,再降温至20-25℃,保温25-30min,并记录此时混合体系整体的第一体积数值;按照(总体积-第一体积)*60%补入含有去离子水和缓冲液的第一混合液,且按照重量比计,去离子水:缓冲液=4:1;补入第一混合液后,升温至60-75℃,保温60-75min,再降温至45-55℃,保温30-35min,并记录此时混合体系整体的第二体积数值;按照(总体积-第二体积)*75%补入含有去离子水和缓冲液的第二混合液,且按照重量比计,去离子水:缓冲液=3:1;补入第二混合液后,升温至80-90℃,保温75-85min,再降温至60-75℃,保温35-45min;
S14、将浸提物温度降至20-25℃后对所述浸提物进行酶解,以获得苦瓜肽酶解体系;其中,所述酶解过程包括:
第一次酶解:将浸提物的pH值调节至8.0,按浸提物重量的4.5%加入胰蛋白酶,80-100转/min条件下搅拌,且搅拌的同时升温至35-40℃,保温45-60min后得到第一酶解体系;
第二次酶解:待第一酶解体系温度降至20-25℃后,再调整其pH值至3.5,按第一酶解体系重量的3%加入果胶酶,80-100转/min条件下搅拌,且搅拌的同时升温至45-55℃,保温40-60min后得到第二酶解体系;
第三次酶解:待第二酶解体系温度降至20-25℃后,再调整其pH值至4.8,按第二酶解体系重量的2%加入纤维素酶,80-100转/min条件下搅拌,且搅拌的同时升温至55-60℃,保温30-45min后得到第三酶解体系;
S15、待步骤S14中的酶解过程完成后,对获得的第三酶解体系升温至90℃,维持10min,以完成灭酶活过程,获得苦瓜肽粗提体系;再在所述苦瓜肽粗提体系中按其重量的4-5%加入活性炭,搅拌均匀,在65℃下保温60-90min后离心,去沉渣后获得苦瓜肽粗提液;
将所述苦瓜肽粗提液经硅藻土过滤,以得到苦瓜肽清液,且过滤压力为0.2-0.3MPa;再在所述苦瓜肽清液中按其重量加入4.5%的活性炭,静置45-50min后离心,去沉渣;
S16、将去沉渣后的苦瓜肽清液经过滤孔径为0.5-0.8μm的微滤陶瓷膜进行过滤,过滤温度为60℃,以获得微滤膜透过液;
再将所述微滤膜透过液经截留分子量为100-200kDa卷式超滤膜进行过滤,过滤温度为45-50℃,以获得超滤膜透过液;
再将所述超滤膜截留液经截留分子量为150-1000Da的卷式高压反渗透膜进行浓缩,以除去水分及部分残留无机盐和小分子杂质,浓缩温度在40℃以下,以得到苦瓜肽浓缩液;
S17、通过真空冷冻干燥方法对所述苦瓜肽浓缩液进行干燥,以获得苦瓜多肽蛋白含量不低于30%的苦瓜肽粉。
4.如权利要求3所述的苦瓜多肽复方植物药,其特征在于,所述缓冲液为磷酸盐缓冲液。
5.如权利要求1所述的苦瓜多肽复方植物药,其特征在于,所述奇亚籽油的提取方法包括:
S21、取新鲜奇亚籽,在25℃下浸泡24-36h后取出,冲洗2-3遍,烘干后磨碎,过100目筛,以获得奇亚籽粉;
S22、取奇亚籽粉,并在其中加入其重量5-10倍的去离子水,以获得酶解原料,并对所述酶解原料进行酶解,以获得酶解体系;其中,所述酶解过程包括:
第一次酶解:按奇亚籽粉重量的3-4%加入胰蛋白酶以及按奇亚籽粉重量的8-10%加入用于调节细胞膜和/或细胞壁通透性的透性调节液,调节pH值至6.5-7.5,充分搅拌,且搅拌的同时升温至40-45℃,保温35-40min后得到第一酶解体系;所述透性调节液由酸溶液、甘油、氯化钠和溶菌酶组成,且按重量比计,酸溶液:甘油:氯化钠:溶菌酶=1:(0.5-0.8):(0.05-0.08):(0.01-0.03);
第二次酶解:待第一次酶解体系降至20-25℃后,再调整其pH值至3.5-4.5,按第一次酶解体系重量的3.0-4.5%加入果胶酶,充分搅拌,且搅拌的同时升温至50-60℃,保温30-35min后得到第二酶体系;
第三次酶解:待第二次酶体系降至20-25℃后,再调整其pH值至4.0-5.5,按第二次酶解体系重量的2-4%加入纤维素酶,充分搅拌,且搅拌的同时升温至50-65℃,保温25-35min后得到第三酶解体系;
S23、待酶解完成后,对获得的第三酶解体系升温至85℃,维持10min,以完成灭酶活过程,获得奇亚籽粗提体系;
S24、在奇亚籽粗提体系中按其重量的4%加入活性炭,搅拌均匀,在65℃下保温65-85min后离心,去沉渣,获得奇亚籽粗提液;再将奇亚籽粗提液经硅藻土过滤,得到奇亚籽油清液,且过滤压力控制在0.3-0.4MPa;再在奇亚籽油清液中按其重量加入3%的活性炭,静置45-50min,然后离心,去沉渣,静置2-3h后取上层油层,即得到所述奇亚籽油。
6.一种治疗肥胖及高血脂症的苦瓜多肽复方植物药的制备方法,其特征在于,包括:
S100、制备苦瓜肽粉以及奇亚籽油;
S200、将如权利要求1所述重量份的各原料充分混合,以获得原料混合物,再将所述原料混合物置于发酵罐中,加入所述原料混合物重量5-10倍的去离子水以及所述原料混合物重量0.1-0.3倍的纤维素酶和0.2-0.25倍的果胶酶,调节pH为6.5-7,且调节至35-45℃进行发酵,发酵36-48h后分离出液态的发酵液;
S300、在所述发酵液中添加其重量10-15%的絮凝剂;所述絮凝剂的制备包括:
(1)称取以下重量份数的各组分:甘蔗渣35-40份、芦荟粉20-30份、植物胶10-15份、魔芋淀粉5-10份、酵母粉2-3份以及水100-150份;
(2)将称量好的上述各组分混合均匀,向混合组分中加入其重量的2-3倍的去离子水,混合均匀并装密封容器中,于150-180rpm、25-30℃条件下避光发酵36-48h小时,再于100-120rpm、25-30℃条件下避光发酵12-24h小时,以获得絮凝剂发酵液;
(3)在所述絮凝剂发酵液中加入其重量10-15%的小麦粉和3-5%的膨润土,混合均匀后即得所述絮凝剂;
S400、于10000-15000rpm条件下对经过步骤S300处理的发酵液进行一次离心,获得第一清液;将所述第一清液依次通过孔径为4-8μm的滤膜、0.2-0.5μm的微滤膜、截流分子量为3000-10000Da的超滤膜以及截流分子量为300-800Da的纳滤膜进行过滤,以获得第二清液;其中,通过孔径为4-8μm的滤膜、0.2-0.5μm的微滤膜过滤时的过滤压力均为0.2-0.4MPa,过滤温度均为25-35℃;通过截流分子量为3000-10000Da的超滤膜以及截流分子量为300-800Da的纳滤膜进行过滤时的过滤压力均为1.5-2.0MPa,过滤温度均为25-35℃;
S500、将所述第二清液以3-5BV/h的流速流过大孔吸附树脂;
S600、流经大孔吸附树脂排的第二清液以3-5BV/h的流速依次流经阴、阳离子树脂柱;
S700、流经阴、阳离子树脂柱排出的第二清液以50-55mL/min的流速流经活性炭移动床,在对流经活性炭移动床的第二清液进行浓缩干燥,粉碎后得初级产品;
S800、将所述初级产品放入85%的乙醇中溶解,溶解温度75-85℃;降温结晶,将晶浆进行离心分离,获得一次晶体;再用85%的乙醇对所述一次晶体进行二次溶解;再次降温结晶,再次进行离心分离以获得二次晶体;
S900、对所述二次晶体经干燥、粉碎,以获得治疗肥胖及高血脂症的苦瓜多肽复方植物药。
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