CN110692519A - 一种金边假连翘组培快繁方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种金边假连翘组培快繁方法,属于金边假连翘繁殖技术领域。本发明利用金边假连翘无病虫害的当年生幼嫩枝条通过外植体灭菌、启动培养、初代培养、继代培养即可获得健壮的金边假连翘无菌苗,其中初代培养基为1/2MS+蔗糖30g/L+琼脂5g/L,pH6.3~6.7,增殖培养基为WPM+0.2mg/LIBA+蔗糖30g/L+琼脂5g/L,pH6.3~6.7,继代培养基为WPM+0.2mg/LIBA+蔗糖30g/L+琼脂5g/L,pH6.3~6.7。本发明采用特定的培养基和培养条件实现了金边假连翘的快速繁殖,能快速获得遗传性状一致的金边假连翘无菌苗,为金边假连翘工厂化育苗及其深加工提供了技术支持。
Description
技术领域
本发明属于金边假连翘繁殖技术领域,尤其涉及一种金边假连翘组培快繁方法。
背景技术
金边假连翘(Duranta repens Linn)别名为篱笆树、花墙刺、甘露花、金露花,属于被子植物门、马鞭草科、假连翘属、金边假连翘,四季开花,既可观花又可赏果,令人心旷神怡,适合于做绿篱、庭植美化或盆栽。
金边假连翘为常绿灌木,枝长,下垂,叶对生,卵状椭圆形或倒卵形,先端短尖而浑圆,基部楔形,边缘在中部以上有锯齿,总状花序腋生,排成一个顶生圆锥花序,花通常着生于中轴一侧,花冠蓝紫色或白色,核果肉质、卵形、金黄色,成串包在萼片内,有光泽,花期全年。
金边假连翘性喜温暖和阳光充足的环境,稍耐阴,耐寒性稍差,对土壤不甚选择,一般的土壤可生长良好,萌芽力强,耐修剪,天气暖和可终年开花不断,生长适温为22℃~32℃。
金边假连翘原产于墨西哥、巴西和印度群岛中部地区,现阶段传统方法主要采用播种和扦插繁殖。播种在果实变黄后收取种子,洗净晾干后即播,经20余天发芽,待有2片真叶时,移植在花盆中培养。扦插选取半年生至一年生的枝条做插穗,插于沙质土壤内,遮荫、保湿。由于金边假连翘的观赏价值极高,传统方法已无法满足市场需求。
发明内容
为了解决上述技术问题,本发明提供一种金边假连翘组培快繁方法,通过组织培养技术进行繁殖,能有效提高其繁殖速度,缩短其繁殖周期,保持其优良的品种特性,并为进一步开展品种改良奠定基础。
为达上述目的,本发明采用如下的技术方案:
金边假连翘组培快繁方法,包括如下步骤:
(1)外植体灭菌:取金边假连翘无病虫害的当年生幼嫩枝条,去掉叶片,将茎段切割成2~3cm带芽茎段,放置在超净工作台上,灭菌处理,无菌水冲洗;
(2)启动培养:将经过灭菌处理后的带芽茎段接种到装有初代培养基的培养瓶中进行初代培养,并在培养室中培养2~3周;培养光照强度为2000~3000LX,光照时间为14~18h/d,温度为24~30℃;
所述初代培养基为1/2MS+蔗糖30g/L+琼脂5g/L,pH6.3~6.7;
(5)初代培养:将得到的腋芽切下接种到增殖培养基中进行初代培养,在培养室中培养1~2周,得到健壮的生根金边假连翘无菌组培苗,培养3~4周后;培养光照强度为2000~3000LX,光照时间为14~18h/d,温度为24~30℃;
所述增殖培养基为WPM+0.2mg/LIBA+蔗糖30g/L+琼脂5g/L,pH6.3~6.7;
(6)继代培养:以健壮的金边假连翘无菌组培苗为母本,将其茎段切割成3~5段带芽茎段,接种到继代培养基中培养1~2周,得到健壮的生根金边假连翘无菌组培苗;培养光照强度为2000~3000LX,光照时间为14~18h/d,温度为24~30℃;
所述继代培养基为WPM+0.2mg/LIBA+蔗糖30g/L+琼脂5g/L,pH6.3~6.7。
进一步的,所述步骤(1)中灭菌处理采用75%酒精灭菌3~5s,2%次氯酸钠灭菌3~5min,无菌水冲洗4~6次。
进一步的,所述步骤(2)中培养2~3周后,其腋芽伸长3~5cm。
进一步的,所述步骤(3)中培养3~4周后,植株生长6~7cm,生根数为2~5根,根长2~4cm,在腋芽处重新生长出腋芽,增殖系数3~5。
与现有技术相比,本发明具有如下有益效果:
(1)本发明利用组织培养技术进行金边假连翘外植体培养,获得金边假连翘无菌苗,提供了一种金边假连翘的组培快繁方法,组培所用培养基配方简单,培养基成本低,组培流程简便,而且繁殖速度较快,提高了金边假连翘繁殖的效率,能快速获得遗传性状一致的金边假连翘无菌苗。
(2)本发明利用组织培养技术,进行外植体培养获得了金边假连翘无菌苗,不受季节气候变化、自然灾害的影响,为金边假连翘工厂化育苗及其深加工提供了技术支持。
附图说明
图1为实施例1中生根培养3周得到的金边假连翘无菌苗图。
图2为实施例1中生根培养3周得到的金边假连翘无菌苗的根系图。
具体实施方式
对比例1
金边假连翘组培快繁方法,包括如下步骤:
(1)外植体灭菌:取金边假连翘无病虫害的当年生幼嫩枝条,去掉叶片,将茎段切割成2~3cm带芽茎段,放置在超净工作台上,用75%酒精灭菌3~5s,2%次氯酸钠灭菌3~5min,无菌水冲洗4~6次;
(2)启动培养:将经过灭菌处理后的带芽茎段接种到装有初代培养基的培养瓶中进行初代培养,并在培养室中培养2~3周;培养光照强度为2000~3000LX,光照时间为14~18h/d,温度为24~30℃;
所述初代培养基为1/2MS+蔗糖30g/L+琼脂5g/L,pH6.3~6.7;
(7)初代培养:将得到的腋芽切下接种到增殖培养基中进行初代培养,在培养室中培养1~2周,得到健壮的生根金边假连翘无菌组培苗,培养3~4周后;培养光照强度为2000~3000LX,光照时间为14~18h/d,温度为24~30℃;
所述增殖培养基为WPM+0.2mg/LIBA+蔗糖30g/L+琼脂5g/L,pH6.3~6.7;
(8)继代培养:以健壮的金边假连翘无菌组培苗为母本,将其茎段切割成3~5段带芽茎段,接种到继代培养基中培养1~2周,得到健壮的生根金边假连翘无菌组培苗;培养光照强度为2000~3000LX,光照时间为14~18h/d,温度为24~30℃;
所述继代培养基为NN69+0.2mg/LIBA+蔗糖30g/L+琼脂5g/L,pH6.3~6.7。
对比例2
采用如下培养基:MS+0.2mg/LIBA+蔗糖30g/L+琼脂5g/L,pH6.3~6.7,代替对比例1中的继代培养基,其他操作和培养基同对比例1。
实施例1
采用如下培养基:WPM+0.2mg/LIBA+蔗糖30g/L+琼脂5g/L,pH6.3~6.7,代替对比例1中的继代培养基,其他操作和培养基同对比例1。采用本实施例的操作以及培养基培养3周后得到的金边假连翘无菌苗和根系分别如图1和图2所示。由图1和2可知,采用本实施例的培养方法和培养基可以得到根系比较发达并且健壮的金边假连翘无菌苗。
针对生根数、生根率、平均根数、平均根长以及开始生根时间,本实施例与对比例1、对比例2进行比较,结果如表1所示。
表1
备注:数据统计时间为植株生长4周后。
由表1可知,在接种数量相同的情况下,不仅包括生根数、生根率、平均根数,而且包括平均根长和开始生根时间,本实施例的效果都远超对比例1和对比例2。
以上所述的实施例仅是对本发明的优选方式进行描述,并非对本发明的范围进行限定,在不脱离本发明设计精神的前提下,本领域普通技术人员对本发明的技术方案做出的各种变形和改进,均应落入本发明权利要求书确定的保护范围内。
Claims (4)
1.一种金边假连翘组培快繁方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)外植体灭菌:取金边假连翘无病虫害的当年生幼嫩枝条,去掉叶片,将茎段切割成2~3cm带芽茎段,放置在超净工作台上,灭菌处理,无菌水冲洗;
(2)启动培养:将经过灭菌处理后的带芽茎段接种到装有初代培养基的培养瓶中进行初代培养,并在培养室中培养2~3周;培养光照强度为2000~3000LX,光照时间为14~18h/d,温度为24~30℃;
所述初代培养基为1/2MS+蔗糖30g/L+琼脂5g/L,pH6.3~6.7;
(3)初代培养:将得到的腋芽切下接种到增殖培养基中进行初代培养,在培养室中培养1~2周,得到健壮的生根金边假连翘无菌组培苗,培养3~4周后;培养光照强度为2000~3000LX,光照时间为14~18h/d,温度为24~30℃;
所述增殖培养基为WPM+0.2mg/LIBA+蔗糖30g/L+琼脂5g/L,pH6.3~6.7;
(4)继代培养:以健壮的金边假连翘无菌组培苗为母本,将其茎段切割成3~5段带芽茎段,接种到继代培养基中培养1~2周,得到健壮的生根金边假连翘无菌组培苗;培养光照强度为2000~3000LX,光照时间为14~18h/d,温度为24~30℃;
所述继代培养基为WPM+0.2mg/LIBA+蔗糖30g/L+琼脂5g/L,pH6.3~6.7。
2.根据权利要求1所述的金边假连翘组培快繁方法,其特征在于,所述步骤(1)中灭菌处理采用75%酒精灭菌3~5s,2%次氯酸钠灭菌3~5min,无菌水冲洗4~6次。
3.根据权利要求1所述的金边假连翘组培快繁方法,其特征在于,所述步骤(2)中培养2~3周后,其腋芽伸长3~5cm。
4.根据权利要求1所述的金边假连翘组培快繁方法,其特征在于,所述步骤(3)中培养3~4周后,植株生长6~7cm,生根数为2~5根,根长2~4cm,在腋芽处重新生长出腋芽,增殖系数3~5。
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