CN110678736B - 观察容器及微小粒子测量装置 - Google Patents

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Abstract

观察容器(10)对作为样品的液体样品(O)进行收容，该样品包含成为拍摄装置的拍摄部(30A)、(30B)所涉及的拍摄对象的微小粒子，该观察容器(10)具有由相互交叉的底壁(12A)(第1板部)和底壁(12B)(第2板部)构成的底部，具有针对在微小粒子的观察中使用的光的波长具有透光性的区域。

Description

观察容器及微小粒子测量装置
技术领域
本发明涉及观察容器及微小粒子测量装置。
背景技术
对取得细胞等微小粒子的图像，进行微小粒子的立体形状所涉及的评价的方法进行了各种研究(例如，专利文献1、2等)。
专利文献1：日本特表2014－517263号公报
专利文献2：日本特表2004－532405号公报
发明内容
但是，在进行微小粒子所涉及的拍摄的情况下，有时由于观察容器的立体形状等而光发生折射，拍摄出形状失真的像。在该情况下，难以高精度地计算微小粒子的立体形状。
本发明就是鉴于上述情况而提出的，其目的在于，提供能够更高精度地拍摄微小粒子的立体形状的观察容器及包含该观察容器的微小粒子测定装置。
关于本发明，
(1)一种观察容器，其对包含成为拍摄装置所涉及的拍摄对象的微小粒子的样品进行收容，具有由相互交叉的第1板部及第2板部构成的底部，
所述第1板部具有相互平行的平面即第1内表面和第1外表面，
所述第2板部具有相互平行的平面即第2内表面和第2外表面，
在所述第1板部及所述第2板部这两者中，具有针对在所述微小粒子的观察中使用的光的波长具有透光性的区域。
(2)一种观察容器，其对包含成为拍摄装置所涉及的拍摄对象的微小粒子的样品进行收容，具有由相互交叉的第1板部及第2板部构成的底部，
所述第1板部具有第1内表面和由平面构成的第1外表面，
所述第2板部具有第2内表面和由平面构成的第2外表面，
所述第1外表面和所述第2外表面的相交线以直线状延伸，
在相对于所述第1外表面和所述第2外表面的相交线垂直的剖面中，所述第1内表面和所述第1外表面相互平行，并且所述第2内表面和所述第2外表面相互平行，
所述第1板部的厚度及所述第2板部的厚度各自沿所述第1外表面和所述第2外表面的相交线变化，
所述第1内表面和所述第2内表面的相交线在所述底部的中央部接近所述第1外表面和所述第2外表面的相交线，并且其曲率半径为1mm～10mm，
在所述第1板部及所述第2板部这两者中，具有针对在所述微小粒子的观察中使用的光的波长具有透光性的区域。
发明的效果
根据本发明，提供能够更高精度地拍摄微小粒子的立体形状的观察容器及包含该观察容器的微小粒子测定装置。
附图说明
图1是微小粒子测量装置的概略结构图。
图2是观察容器的概略结构图。
图3是对微小粒子测量装置进行说明的图。
图4是表示通过近红外光及可见光得到的测量结果的图。
图5是表示观察容器的变形例的图。
图6是表示微小粒子测量装置的变形例的图。
图7是表示观察容器的变形例的图。
图8是表示观察容器及微小粒子测量装置的变形例的图。
图9是表示观察容器的变形例的图。
图10是表示观察容器的变形例的图。
图11是表示观察容器的变形例的图。
具体实施方式
[本发明的实施方式的说明]
首先，列举本发明的实施方式而进行说明。
本申请的观察容器的第1方式是一种观察容器，其对包含成为拍摄装置所涉及的拍摄对象的微小粒子的样品进行收容，具有由相互交叉的第1板部及第2板部构成的底部，所述第1板部具有相互平行的平面即第1内表面和第1外表面，所述第2板部具有相互平行的平面即第2内表面和第2外表面，在所述第1板部及所述第2板部这两者中，具有针对在所述微小粒子的观察中使用的光的波长具有透光性的区域。
根据上述的观察容器，能够在由相互交叉的第1板部及第2板部构成的底部，对在容器的下方滞留的微小粒子，从第1板部及第2板部的外侧通过拍摄装置进行拍摄。因此，能够从多个方向高精度地对微小粒子的形状进行拍摄。
另外，所述第1板部及所述第2板部能够设为配置为彼此正交的方式。如上所述，在配置为彼此正交的情况下，能够适当地对用于掌握微小粒子的立体形状的像进行拍摄。
另外，本申请的观察容器的第2方式是一种观察容器，其对包含成为拍摄装置所涉及的拍摄对象的微小粒子的样品进行收容，具有由相互交叉的第1板部及第2板部构成的底部，所述第1板部具有第1内表面和由平面构成的第1外表面，所述第2板部具有第2内表面和由平面构成的第2外表面，所述第1外表面和所述第2外表面的相交线以直线状延伸，在相对于所述第1外表面和所述第2外表面的相交线垂直的剖面中，所述第1内表面和所述第1外表面相互平行，并且所述第2内表面和所述第2外表面相互平行，所述第1板部的厚度及所述第2板部的厚度各自沿所述第1外表面和所述第2外表面的相交线变化，所述第1内表面和所述第2内表面的相交线在所述底部的中央部接近所述第1外表面和所述第2外表面的相交线，并且其曲率半径为1mm～10mm，在所述第1板部及所述第2板部这两者中，具有针对在所述微小粒子的观察中使用的光的波长具有透光性的区域。
根据上述的观察容器，能够在由相互交叉的第1板部及第2板部构成的底部，对在容器的下方滞留的微小粒子，从第1板部及第2板部的外侧通过拍摄装置进行拍摄。因此，能够从多个方向高精度地拍摄微小粒子的形状。并且，根据上述的观察容器，第1内表面和第2内表面的相交线在中央部向所述第1外表面和所述第2外表面的相交线接近，并且其曲率半径成为1mm～10mm。通过设为如上所述的结构，从而微小粒子容易滞留于第1内表面和第2内表面的相交线的中央部附近，能够更容易地进行微小粒子的拍摄。
具有所述透光性的区域能够设为使350nm～2000nm的波段的光透过的方式。如上所述，如果设为使350nm～2000nm的波段的光透过的方式，则能够进行使用该波段的光进行的拍摄。上述的波段的光也适合于微小粒子的内部构造等的更详细的分析，因此能够将该观察容器用于微小粒子所涉及的更详细的分析。
本申请的微小粒子测量装置具有：上述的观察容器；光源部，其对所述样品照射测定光；以及多个拍摄部，它们在所述观察容器的所述第1板部及所述第2板部各自的外侧，对由从所述光源部照射的测定光产生的所述微小粒子的像进行拍摄，所述观察容器中的处于由所述拍摄部受光的光的光路上的区域，针对在所述微小粒子的观察中使用的光的波长具有透光性。
根据上述的微小粒子测量装置，能够在由相互交叉的第1板部及第2板部构成的底部，对在观察容器的下方滞留的微小粒子，从第1板部及第2板部的外侧通过拍摄装置进行拍摄。因此，能够从多个方向高精度地拍摄微小粒子的形状。
另外，能够设为下述方式，即，所述拍摄部设置于所述受光的光的光轴与在所述拍摄部前设置的所述第1板部或所述第2板部正交的位置。拍摄部设置在与第1板部或第2板部正交的位置，由此能够防止由拍摄部对第1板部或第2板部处的反射光、折射光等进行受光。
另外，能够设为下述方式，即，从所述光源部照射的光包含350nm～2000nm的波段的一部分。如果设为使350nm～2000nm的波段的光透过的方式，则能够进行使用该波段的光进行的拍摄。上述的波段的光也适于微小粒子的内部构造等的更详细的分析，因此能够将该观察容器用于微小粒子所涉及的更详细的分析。
另外，能够设为下述方式，即，所述光源部在隔着所述微小粒子而与所述多个拍摄部相对的位置设置多个。在隔着微小粒子与多个拍摄部相对的位置设置多个光源部的情况下，能够由拍摄部以大的光量对将微小粒子透过的光进行受光，因此能够更高精度地拍摄微小粒子的透过像。
另外，能够设为下述方式，即，所述拍摄部对由所述微小粒子针对从所述光源部照射出的测定光而发出的荧光进行拍摄。通过设为如上所述的结构，从而能够在拍摄部中对由微小粒子发出的荧光进行拍摄，能够取得微小粒子所涉及的详细的信息。
[本发明的实施方式的详细内容]
下面，参照附图，对本发明所涉及的观察容器及微小粒子测定装置的具体例进行说明。此外，本发明并不限定于这些例示，而是由权利要求书示出，包含与权利要求书等同的内容及其范围内的全部变更。
图1是本发明的一个实施方式所涉及的微小粒子测量装置的概略结构图。另外，图2是观察容器的概略结构图，图3是对微小粒子测量装置进行说明的图。如图1及图3等所示，微小粒子测量装置1是进行在样品中分散的微小粒子所涉及的测量的装置。微小粒子及分散有微小粒子的对象并不特别受到限定，例如能够设为液体。作为在液体样品中分散有微小粒子的例子，举出下述情况，即，微小粒子为细胞、细胞的凝聚对或者受精卵等，分散有微小粒子的液体为细胞用培养基或生理盐水等，细胞、细胞的凝聚体或者受精卵等微小粒子能够适应的水溶液或水等。此外，在本实施方式中，对样品为液体样品，微小粒子分散于液体中的例子进行说明，但样品只要包含有成为拍摄对象的微小粒子即可，并不限定于分散于液体中的结构。
如图1所示，在微小粒子测量装置1中，包含作为对象物2的微小粒子的液体样品O储存于测量用的观察容器10中，并且对将测定光向观察容器10内的对象物2照射而得到的透过光进行检测而拍摄透过像，基于该透过像进行对象物2所涉及的测量、分析等。因此，微小粒子测量装置1具有：观察容器10、光源部20A、20B、拍摄部30A、30B(拍摄装置)及分析部40。
观察容器10是在进行微小粒子所涉及的测量时对包含微小粒子的液体样品O进行收容的容器。将对液体样品O进行收容的区域称为收容部10A。观察容器10如图2所示，在俯视观察时为长方形状，具有：在长边侧相对的一对侧壁11A、11B；在短边侧相对的一对侧壁11C、11D；以及形成观察容器10的底部的底壁12A(第1板部)、12B(第2板部)。
如图1、2等所示，底壁12A、12B由相互交叉的2个板状的部件构成，交叉的部位成为底部中的最下方。另外，如图3所示，底壁12A由内表面121(第1内表面)和外表面122(第1外表面)构成。底壁12A为平板，内表面121和外表面122相互平行。底壁12B由内表面123(第2内表面)和外表面124(第2外表面)构成。底壁12B为平板，内表面123和外表面124相互平行。作为容器的深度成为最大的位置是底壁12A、12B的边界即边界部13，更详细地说，底壁12A的内表面121和底壁12B的内表面123的相交线处于底部中的最下方。底壁12A、12B在观察容器10的情况下，底壁12A、12B的边界部13沿观察容器10的长边(底壁12A、12B的延伸方向)延伸。
如上所述，观察容器10的收容部10A(对包含成为对象物2的微小粒子的液体样品O进行收容的空间)，在通过与长度方向正交的剖面(参照图3)观察时成为五边形。具体地说，由2片底壁12A、12B、一对侧壁11A、11B及将侧壁11A、11B的与底壁12A、12B侧的一端相反侧的另一端彼此连结的线(相当于收容部的上端)形成了五边形的剖面。
底壁12A、12B所成的角并不特别受到限定，但优选为90°或其±30°以内的程度。通过将底壁12A、12B所成的角设定在上述的范围，从而能够通过拍摄部30A、30B适宜地得到用于对作为对象物2的微小粒子的形状立体地掌握的像。特别地，如果底壁12A、12B配置为彼此正交，则能够通过拍摄部30A、30B更适宜地对作为对象物2的微小粒子的形状进行拍摄。
观察容器10的大小并不特别受到限定，根据光源部20A、20B及拍摄部30A、30B的配置及作为对象物2的微小粒子的大小等而适当设定。
观察容器10的材质并不特别受到限定，例如能够使用玻璃、PC树脂、PS树脂等。观察容器10中的至少向拍摄部30A、30B射入的光所经过的区域，即，观察容器10中的配置为拍摄部30A、30B的拍摄区域的区域，需要针对测定光而具有透光性。另外，观察容器10中的配置为拍摄部30A、30B的拍摄区域的区域，观察容器10的厚度(壁厚)设为均匀，即，一对主面相互平行。在观察容器10的厚度不均匀的情况下，来自拍摄区域的光折射而射入至拍摄部30A、30B，因此有可能在拍摄部30A、30B中取得形状失真的对象物2的像。通过将观察容器10的上述区域的厚度设为均匀，从而能够通过拍摄部30A、30B拍摄到防止受到测定光或透过光经过观察容器10时的失真等影响的透过像。
在观察容器10的底部，由底壁12A、12B的边界部13形成最深部的情况下，液体样品O中的微小粒子容易向底部中的最深部移动。因此，如果构成为通过拍摄部30A、30B对最深部及其附近进行拍摄，则容易进行微小粒子的拍摄。
光源部20A、20B分别将测定光对观察容器10的规定的区域、特别是最深部附近进行照射。作为光源部20A、20B的光源，能够使用卤素灯、LED等。另外，光源部20A、20B也可以具有对强度进行调制的功能。
如图1所示，优选构成为光源部20A、20B设置多个，且与拍摄部30A、30B相对应地从相互不同的角度对观察容器10进行照射。通过设为如上所述的配置，从而能够更高精度地进行通过拍摄部30A、30B实现的测量。
此外，在本实施方式中作为由光源部20A、20B照射的测定光，优选使用近红外光。近红外光是指波长范围为630nm～2000nm的波段的光。能够将上述的波长范围中的一部分的波长范围的光作为测定光使用。此外，作为测定光，除了近红外光也能够使用可见光。可见光是指波长范围为400nm～630nm的波段的光。另外，也可以将近红外光和可见光组合而作为测定光。另外，测定光也可以仅是可见光。
拍摄部30A、30B具有对从光源部20A、20B照射的测定光透过对象物2后的光进行受光，对其强度进行检测的功能。即，拍摄部30A、30B设置于隔着观察容器10而与光源部20A、20B相对的位置。拍摄部30A、30B分别具有多个像素以2维状配置的检测器，将由像素受光的光变换为强度信息。由拍摄部30A、30B得到的检测结果向分析部40发送。
如图3所示，拍摄部30A优选配置于向拍摄部30A射入的光的光轴与底壁12B正交的位置。而且，拍摄部30A对来自在侧壁11A侧配置的光源部20A的测定光透过对象物2后的光进行受光。另外，拍摄部30B优选配置于向拍摄部30B射入的光的光轴与底壁12A正交的位置。而且，拍摄部30B对来自配在侧壁11B配置侧的光源部20B的测定光透过对象物2后的光进行受光。在向拍摄部30A、30B射入的光的光轴与底壁正交的位置配置有拍摄部30A、30B的情况下，能够防止拍摄部30A、30B对底壁处的反射光、折射光等进行受光。
拍摄部30A、30B优选构成为同时对同一拍摄对象进行拍摄。通过设为如上所述的结构，从而能够从相互不同的方向掌握观察容器10内的一个拍摄对象(对象物2)。可想到对象物2会伴随液体样品O的移动等而旋转。因此，拍摄部30A、30B构成为进行观察容器10的特定的位置的拍摄，从而能够取得对象物2所涉及的更详细的信息。
拍摄部30A、30B也可以构成为，例如仅检测能够区分对象物2和其他成分的特定波长的光的强度。另外，在拍摄部30A、30B中，也可以构成为对包含与多个波长对应的强度值的分光光谱进行检测。分光光谱是指从分光信息对任意的波长的强度值进行提取，与对应的波长成对的一系列的数据。
作为拍摄部30A、30B的检测器，能够使用例如CMOS、CCD、InGaAs检测器、或由水银、镉及碲构成的MCT检测器等。另外，在拍摄部30A、30B构成为对分光光谱进行检测的情况下，拍摄部30A、30B在检测器的前级还包含分光器，该分光器具有将分别射入的光针对每个波长进行分光的功能。作为分光器，能够使用例如波长选择滤光器、干涉光学系统、衍射光栅或棱镜。
另外，拍摄部30A、30B可以是取得超频谱图像的超频谱传感器。超频谱图像是指一个像素由N个波长数据构成的图像，针对每个像素分别包含有由与多个波长相对应的反射强度数据构成的光谱信息。即，超频谱图像的特征在于，针对构成图像的每个像素，分别具有多个波长的强度数据，由此是将作为图像的二维要素和作为光谱数据的要素汇集在一起的三维结构的数据。此外，在本实施方式中，超频谱图像是指，由针对每1个像素保有至少4个波段的强度数据的像素构成的图像。
此外，在上述中，说明了在拍摄部30A、30B中对来自对象物2的透过光进行分光后取得分光光谱的情况，但在拍摄部30A、30B中取得分光光谱的情况下的结构并不限定于上述。例如，也可以构成为从光源部20A、20B射出的光的波长可变。
拍摄部30A、30B优选具有位置调整机构，该位置调整机构能够对观察容器10的底壁12B、12A之间的距离进行调整。位置调整机构能够通过设置例如沿轨道使拍摄部30A、30B移动等的单元而实现，但具体的结构并不特别受到限定。通过设置用于使拍摄部30A、30B和观察容器10之间的距离变化的位置调整机构，从而能够实现在与拍摄部30A、30B的焦点位置不同的位置配置有观察容器10(内的对象物2)的拍摄。如上所述，通过利用拍摄部30A、30B对在与焦点位置不同的位置配置的观察容器10进行拍摄，从而作为对象物2所涉及的信息，能够对包含与对在现有的焦点位置配置的对象物进行拍摄得到的结果不同的信息的图像进行拍摄。位置调整机构优选是能够以0.1μm的精度移动的结构。通过设为如上所述的结构，从而能够得到对象物2所涉及的更详细的信息。此外，也可以构成为将位置调整机构设置于观察容器10侧，但为了实现对多个拍摄部和观察容器10的距离单独地进行调整，优选位置调整机构设置于拍摄部侧。
并且，拍摄部30A、30B还可以具有能够沿观察容器10的最深部，即，底壁12A、12B的边界部13移动的位置调整机构。通过设为如上所述的结构，从而例如能够追随对象物2进行拍摄。此外，也可以构成为通过对观察容器10侧进行移动，从而对拍摄部30A、30B的拍摄位置进行变更。
分析部40具有下述功能，即，取得从拍摄部30A、30B发送的对象物2所涉及的拍摄结果，进行运算处理等，由此进行对象物2的图像显示、记录及这些图像所涉及的测量、分析等。另外，可以构成为基于分析部40中的测量等的结果，进行各种判定、评价等。例如，在对象物2为细胞的情况下，可以构成为在分析部40中对拍摄到的对象物2是否是液体样品所包含的特定种类的细胞进行判定、或构成为对拍摄到的对象物2的细胞的分化度进行识别。如上所述，在分析部40中进行对象物2所涉及的判定、评价的情况下，通过将成为判定、评价的基准的信息由分析部40预先保存而将拍摄对象物2得到的结果与成为基准的信息相比较，由此能够进行判定、评价。另外，分析部40可以构成为使用统计性的方法、机械学习或图案识别，进行对象物2所涉及的判定、评价。
分析部40构成为计算机，具有：CPU(Central Processing Unit)；作为主存储装置的RAM(Random Access Memory)及ROM(Read Only Memory)；进行与其他仪器之间的通信的通信模块；以及硬盘等辅助存储装置等硬件。而且，通过由这些结构要素进行动作，从而发挥作为分析部40的功能。
接下来，对微小粒子测量装置1所涉及的测量方法进行说明。在微小粒子测量装置1中，包含下述工序：针对观察容器10内的包含对象物2的液体样品从光源部20A、20B照射测定光，通过拍摄部30A、30B对液体样品的透过光进行检测，由此对象物2进行拍摄；基于由拍摄部30A、30B拍摄到的拍摄结果，在分析部40中，进行对象物2所涉及的测量、分析；以及将测量、分析的结果输出。作为对象物2所涉及的测量、分析，例如举出下述内容：根据拍摄结果对液体样品所包含的对象物2的个数进行确定；推定对象物2的体积；在对象物2为细胞的情况下对细胞的种类进行识别；以及对细胞的分化度进行识别等，但并不限定于这些。另外，举出下述内容：在对象物2为细胞的凝聚体的情况下对凝聚体的内部构造进行识别；以及对凝聚体的培养状态进行管理等，但并不限定于这些。另外，举出下述内容：在对象物2为受精卵的情况下进行受精卵的筛选；以及对受精卵的培养状态进行管理等，但并不限定于这些。此外，在对象物2为牛或者猪的受精卵的情况下，在现有的观察装置中散射的影响强，观察困难，但通过使用近红外区域的光进行观察，从而能够对散射的影响进行抑制，因此观察变得容易。
在这里，在本实施方式所涉及的微小粒子测量装置1中，特征在于，构成为拍摄部30A、30B能够取得相互不同的方向的对象物2所涉及的透过像。具体地说，拍摄部30A设置于底壁12B侧而对经过底壁12B的透过光进行受光。另外，拍摄部30B设置于底壁12A侧而对经过底壁12A的透过光进行受光。如上所述，拍摄部30A、30B构成为从相互不同的方向拍摄对象物2的透过光。具有如上所述的结构，从而能够更详细地掌握对象物2所涉及的信息。因此，如图3所示，在拍摄部30A、30B中，能够取得同一对象物2所涉及的来自相互不同的角度的像。因此，在根据2个图像计算对象物2的3维形状时，能够以更高的精度求出3维形状。
更具体地说，如图3所示，关于拍摄部30A、30B，在配置为各自的光轴分别与底壁12B、12A正交的情况下，拍摄方向(向拍摄部30A、30B射入的透过光的方向)成为彼此正交的关系。在设为如上所述的结构的情况下，能够根据由拍摄部30A、30B得到的拍摄结果更详细地取得对象物2的信息，能够更高精度地计算对象物2的3维形状，并且还能够更高精度地进行对象物2所涉及的分析。
拍摄部30A、30B的拍摄方向所成的角度优选大于或等于60°而小于或等于120°。如果拍摄部30A、30B的拍摄方向所成的角度为90°，则如上所述，能够得到对象物2所涉及的更详细的信息，但通过设为大于或等于60°而小于或等于120°，从而能够一定程度充分地取得用于进行对象物2的测量、分析的信息。另外，用于进行对象物2的测量、分析的信息是指在测量、分析内容中使用的信息。例如，在推定对象物2的体积的情况下，不仅需要来自一个方向的2维的信息，还需要对象物2所涉及的3维的信息，因此对象物2的3维的构造所涉及的信息成为用于进行分析、评价的信息。因此，如果拍摄部30A、30B的拍摄方向所成的角度超过120°，则有可能无法充分地取得对象物2所涉及的3维的信息。
此外，拍摄部30A、30B配置为各个拍摄方向成为与底壁12B、12A正交的方向。因此，拍摄部30A、30B的拍摄方向所成的角度包含观察容器10内的成为拍摄对象的对象物2，且成为沿与底壁12A、12B垂直的剖面观察时的角度。因此，为了将拍摄部30A、30B的拍摄方向所成的角度设为大于或等于60°，底壁12A、12B所成的角并不特别受到限定，但成为90°或其±30°以内。
如以上所述，根据本实施方式所涉及的微小粒子测量装置1及观察容器10，在由于底壁12A(第1板部)和底壁12B(第2板部)相互交叉而形成的底部，能够从底壁12A、12B的外侧通过拍摄部30A、30B对在观察容器的下方滞留的作为对象物2的微小粒子进行拍摄，该底壁12A(第1板部)具有相互平行的平面即内表面121(第1内表面)和外表面122(第1外表面)，该底壁12B(第2板部)具有相互平行的平面即内表面123(第2内表面)和外表面124(第2外表面)。因此，能够从多个方向高精度地对微小粒子的形状进行拍摄。
另外，在观察容器10中，底壁12A(第1板部)及12B(第2板部)能够设为配置为彼此正交的方式。如上所述，在以彼此正交的方式配置有底壁12A、12B的情况下，能够适宜地对用于掌握微小粒子的立体形状的像进行拍摄。
另外，在本实施方式所涉及的微小粒子测量装置1及观察容器10中，使用近红外光即630nm～2000nm的波段的光。该近红外光也适合于微小粒子的内部构造等的更详细的分析，因此如果使用该微小粒子测量装置1及观察容器10，则能够用于微小粒子所涉及的更详细的分析。此外，如后面记述，在使用微小粒子测量装置1及观察容器10对由微小粒子发出的荧光进行观察的情况下，将350nm～2000nm的波段的光利用于观察。
图4(A)及图4(B)是对将近红外光用于微小粒子的测量测定的情况下的效果进行说明的图。图4(A)是在拍摄部中拍摄作为微小粒子的细胞的凝聚体而得到的图像，作为测定光而使用近红外光。另一方面，图4(B)是在拍摄部中拍摄相同的凝聚体而得到的图像，但作为测定光而使用了可见光。在图4(B)所示的可见光的图像中，透过微小粒子(细胞的凝聚体)的内部的光的光量少，无法根据拍摄到的图像掌握微小粒子的内部构造。另一方面，在图4(A)所示的近红外光的图像中，根据微小粒子的内部构造(细胞密度分布)的差异，在微小粒子的内侧在细胞密度高的部分和细胞密度低的部分，透过光量产生差，得到与内部构造相关的信息。在微小粒子为细胞的情况下，与可见光相比较，近红外光透过微小粒子内的光的光量更大。因此，通过如微小粒子测量装置1这样构成为将近红外光用于测量，从而能够更详细地进行微小粒子的内部构造所涉及的测量。
另外，在上述实施方式的微小粒子测量装置1中，配置为光源部20A、20B和拍摄部30A、30B各自分别对应。通过设为如上所述的结构，从而能够增大由拍摄部30A、30B受光的光量，因此能够更高精度地对微小粒子的透过像进行拍摄。但是光源部的数量能够适当变更。光源部至少设置1个，就能够进行微小粒子的测量。
另外，拍摄部30A、30B设置于受光的光的光轴与在拍摄部前设置的底壁12A、12B正交的位置。在设为如上所述的结构的情况下，能够防止拍摄部30A、30B对在底壁12A、12B处的反射光、折射光等进行受光。
另外，多个拍摄部30A、30B构成为进行观察容器10内的同一位置的透过像的拍摄，由此能够更准确地取得微小粒子的透过像，能够提高分析的精度。
此外，本发明所涉及的微小粒子测量装置1及观察容器10并不限定于上述实施方式。例如，可以取代如上述实施方式这样，微小粒子测量装置1具有观察容器10、光源部20A、20B、拍摄部30A、30B及分析部40的结构，而是构成为例如不具有光源部。另外，也可以将光源部和拍摄部的组合设为大于或等于3个。
另外，观察容器10的形状能够适当变更。观察容器10只要至少具有相互交叉的底壁12A、12B，则在其边界部13容易滞留微小粒子，因此通过由拍摄部30A、30B对该区域进行拍摄，从而能够高精度地对微小粒子进行拍摄。
图5是表示变形例所涉及的观察容器50的图。图5(A)是沿图2中的观察容器10的边界部13的剖视图。另外，图5(B)及图5(C)示出沿图5(A)中的虚线B及虚线C，从与边界部13延伸方向垂直的剖面(与外表面122和外表面124的相交线垂直的剖面)观察的图。
观察容器50与观察容器10的相同点在于，底壁12A(第1板部)具有内表面121(第1内表面)和外表面122(第1外表面)，底壁12B(第2板部)具有内表面123(第2内表面)和外表面124(第2外表面)。但是，外表面122、124是平面，但内表面121、123呈曲面。即，与观察容器10的不同点在于，底壁12A、12B不是平板。
在观察容器50中，外表面122(第1外表面)和外表面124(第2外表面)的相交线132(参照图5(A))，与观察容器10同样地以直线状延伸。另外，在与外表面122和外表面124的相交线132垂直的剖面，即，图5(B)及图5(C)所示的剖面中，底壁12A的内表面121(第1内表面)和外表面122(第1外表面)相互平行，并且底壁12B的内表面123(第2内表面)和外表面124(第2外表面)相互平行。即，在与外表面122和外表面124的相交线132垂直的剖面中，内表面121、123均成为直线状。但是，内表面121(第1内表面)和内表面123(第2内表面)各自沿相交线132的延伸方向弯曲，其结果，内表面121、123的相交线131(参照图5(A))成为曲线状。即，底壁12A及底壁12B的厚度沿外表面122(第1外表面)和外表面124(第2外表面)的相交线132变化。内表面121、123的相交线131在底部的中央部，向外表面122(第1外表面)和外表面124(第2外表面)的相交线132接近。另外，相交线131的曲率半径成为1mm～10mm。
在具有上述的结构的观察容器50中，作为对象物2的微小粒子，在内表面121、123的相交线131与外表面122、124的相交线132最接近、容器内部的深度成为最大的中央部附近容易滞留(参照图5(A))。如上所述，如果以使边界部13的一部分与其他区域相比变深的方式对边界部13的形状(特别是容器内的底部的形状)进行变更，则对象物2的微小粒子容易移动至变深的区域。因此，如果通过拍摄部30A、30B对该边界部13的中央部附近进行拍摄，则微小粒子的拍摄变得容易。此外，内表面121、123的相交线131与外表面122、124的相交线132接近的区域，可以设置在与中央部不同的区域。
另外，在观察容器50中，内表面121、123各自成为曲线的底壁12A及底壁12B不是平板。但是，在与外表面122和外表面124的相交线132垂直的剖面中，成为底壁12A的内表面121(第1内表面)和外表面122(第1外表面)相互平行，并且底壁12B的内表面123(第2内表面)和外表面124(第2外表面)相互平行的直线状。因此，通过拍摄部30A、30B的拍摄范围、底部的曲率半径等的组合能够不受失真的影响而进行拍摄。例如，在将拍摄部30A、30B各自的拍摄范围设为300μm×500μm，将内表面121、123的相交线131的曲率半径设为1.25mm的情况下，能够消除失真而对微小粒子进行拍摄。此外，在将相交线131的曲率半径设为1mm～10mm的范围的情况下，即使在将拍摄部30A、30B各自的拍摄范围从上述的300μm×500μm进行了变更的情况下，也能够进行仅抑制微小粒子的失真的拍摄。此外，也可以将曲率半径设为大于或等于10mm，将曲率半径从10mm增大为无限大的情况相当于图1～图3等所示的观察容器10。
另外，在上述实施方式中，对观察容器10具有透光性的情况进行了说明，但也可以是并不是观察容器10整体针对测定光具有透光性，而是成为由拍摄部30A、30B受光的光的光路的区域具有透光性即可。
另外，在上述实施方式中，对利用观察容器10拍摄相对于从光源部照射的测定光的微小粒子的透过像的情况进行了说明，但也能够构成为使用观察容器10进行荧光观察。图6是表示利用观察容器10对由作为对象物2的微小粒子发出的荧光进行观察的情况下的微小粒子测量装置1中的光源部和拍摄部的配置的一个例子的图。如图6所示，在利用观察容器10对由对象物2发出的荧光进行观察的情况下，与图3所示的例子同样地，拍摄部30A、30B能够与各个底壁12A、12B相对配置。另一方面，光源部20C无需配置于隔着观察容器10内的对象物2而与拍摄部30A、30B相对的位置，例如，能够配置于观察容器10的上方等。另外，光源部20C可以与拍摄部30A、30B的数量不一致。此外，在拍摄部30A、30B中对由对象物2发出的荧光进行观察的情况下，从光源部20C向对象物2照射作为激励光的光(例如，能够使用波长350nm～800nm的波段的光)。另外，在拍摄部30A、30B中，对与从光源部20C照射的激励光的波段不同的波段的光进行受光。
此外，在使用观察容器10进行作为对象物2的微小粒子所涉及的荧光观察的情况下，观察容器10优选针对用于对象物2的观察的光、即、来自光源部20C的光(激励光)及由对象物2发出的荧光这两者具有透光性。此外，也可以是并不是观察容器10整体针对用于测定的光具有透光性，而是成为由拍摄部30A、30B受光的光的光路的区域具有透光性即可。另外，如图6所示，可以构成为在拍摄部30A、30B各自的光路上设置滤光器35，对由拍摄部30A、30B受光的光的波长进行限制。
接下来，一边参照图7一边对变形例所涉及的观察容器60进行说明。如图7(A)所示，观察容器60成为下述构造，即，容器内部划分为多个收容部61。多个收容部61如图7(A)所示，能够构成为将观察容器10的容器内部沿长度方向配置多个分隔壁62而进行分隔。并且，可以构成为将观察容器60设为长条的柱状的部件，在中央附近对多个收容部61进行配置。通过设为如上所述的形状，从而如图7(A)所示，能够将观察容器60中的没有形成收容部61的区域(例如，观察容器60的端部)由支撑台63支撑。
此外，观察容器60的多个收容部61各自如上所述是将观察容器10的内部通过分隔壁62分隔而成的。因此，各收容部61的底由通过2个板状的部件形成的底壁12A、12B构成。因此，如图7(B)所示，能够使用2个拍摄部30A、30B适当地得到用于立体地掌握作为对象物2的微小粒子的形状的像。这点与观察容器10相同。
另外，在如观察容器60这样构成为将多个收容部61独立地设置的情况下，例如，能够构成为将对象物2一个一个地收容于相互不同的收容部61。通过设为如上所述的结构，从而能够防止弄错多个对象物2而观察的情况，并且也限制对象物2的移动，因此能够适宜地进行对象物2所涉及的分析。
此外，在如观察容器60这样，构成为设置有多个收容部61的情况下，在观察对象物2时，需要使拍摄部30A、30B或者观察容器60移动。因此，如图8(A)所示，优选通过使支撑台63上的观察容器60或者拍摄部30(拍摄部30A、30B)沿观察容器60的延伸方向(长度方向)移动，从而使进入至拍摄部30的视野的对象物2(收容有对象物2的收容部61)变更。因此，微小粒子测量装置1优选设置有使观察容器60移动的移动机构，或者使拍摄部30移动的移动机构。此外，作为使观察容器60移动的移动机构，可以使观察容器60本身移动，也可以通过将支撑台63设为能够移动而使支撑台63和观察容器10C同时移动。
另外，如图8(B)所示，优选即使在如观察容器10这样内部的空间为1个的情况下，也与图8(A)同样地，微小粒子测量装置1具有使观察容器10移动的移动机构，或者使拍摄部30移动的移动机构。
图9是对将观察容器60的多个收容部61所涉及的结构变更后的观察容器70进行说明的局部剖视图。图9所示的观察容器70与图7所示的观察容器60同样地具有多个收容部61，但将多个收容部61连结的分隔壁62的高度低于容器的侧壁11A、11B的高度。因此，对象物2的微小粒子收容于多个收容部61内而其移动被限制，但在液体样品O充满至比分隔壁62高的位置的情况下，液体样品能够在多个收容部61间移动。如上所述，分隔壁62的高度能够适当变更，但通过设置分隔壁62而设置多个收容部61，从而能够限制对象物2的移动。
图10是对具有盖部的观察容器80进行说明的图。图10(A)及图10(B)所示的观察容器80与图7所示的观察容器60相比较，设置有收容部61(参照图10(B))。另外，设置有盖部65以将收容部61覆盖。盖部65的形状并不特别受到限定，但优选在俯视观察时设置于与观察容器80的收容部61重叠的位置。通过设为如上所述的构造，从而能够防止来自外部的异物等混入至收容部61(即，容器内部)。
但是，在成为对象物2的微小粒子是细胞等生物的情况下，如果利用盖部65将容器内部密闭，则也有可能使对象物2及液体样品O受到影响。因此，如图10(B)所示，可以构成为在盖部65的顶面65a(观察容器80侧的面)和观察容器80的上端80a之间设置间隙，在安装有盖部65的情况下，也能够使观察容器80的收容部61和外部之间通气。通过设为如上所述的结构，从而能够确保收容部61内的通气性。
此外，如图7(A)所示，在观察容器60设置有多个收容部61的情况下，盖部65可以构成为将各收容部61单独地覆盖，也可以设为将多个收容部61一体地覆盖。另外，盖部65的形状也能够适当变更。
图11是对将端部的构造变更后的观察容器90进行说明的斜视图。图11所示的观察容器90与图1～图2所示的观察容器10同样地在中央附近能够收容液体样品O，但端部的形状进行了变更。即，在观察容器90中，在中央部具有收容部91，该收容部91具有作为容器的功能。收容部91的形状与观察容器10等相同。另一方面，在观察容器90中，与观察容器60等同样地具有沿长度方向延伸的端部92。观察容器90的两方的端部92作为进行观察容器90的支撑的支撑部起作用。具体地说，观察容器90的两方的端部92均是剖面为四边形状，底面92a平坦。即，观察容器90在作为容器起作用的收容部91中的底壁的边界部(图2中的与边界部13相对应的部分)处于下方的状态下，两方的端部92的底面92a处于下侧。因此，观察容器90利用端部92的底面92a，能够在收容部91的开口处于上方的状态(底壁的边界部处于下方的状态)下可自立。因此，例如，能够不使用图7(A)所示的支撑台63等而将观察容器90载置于期望的位置，因此操作性提高。
此外，与收容部91不同的端部92的形状能够适当变更。例如，观察容器90的端部92的剖面成为四边形状，但为了将观察容器90设为可自立，只要至少端部92(支撑部)的底面92a平坦即可。因此，端部92(与收容部91不同的部分，且在观察时不与光源部及拍摄部干涉的部分)的形状能够适当变更。
标号的说明
1…微小粒子测量装置，10…观察容器，12A、12B…底壁，13…边界部，20A、20B…光源部，30A、30B…拍摄部，40…分析部。

Claims (12)

1.一种观察容器，其对包含成为拍摄装置所涉及的拍摄对象的微小粒子的样品进行收容，具有由相互交叉的第1板部及第2板部构成的底部，
所述第1板部具有相互平行的平面即第1内表面和第1外表面，
所述第2板部具有相互平行的平面即第2内表面和第2外表面，
在所述第1板部及所述第2板部这两者中，具有针对在所述微小粒子的观察中使用的光的波长具有透光性的区域，
该观察容器具有支撑部，该支撑部的底面为平坦，将所述观察容器可自立地支撑，
该观察容器具有多个收容部，该收容部对包含所述微小粒子的样品进行收容，
所述多个收容部通过低于所述收容部的侧壁的分隔壁被划分，在与所述分隔壁相比的上侧所述多个收容部相连。
2.根据权利要求1所述的观察容器，其中，
所述第1板部及所述第2板部配置为彼此正交。
3.根据权利要求1或2所述的观察容器，其中，
具有所述透光性的区域使350nm～2000nm的波段的光透过。
4.根据权利要求1或2所述的观察容器，其中，
具有盖部，该盖部覆盖对包含所述微小粒子的样品进行收容的收容部的上方，并且确保所述收容部内和外部的通气性。
5.一种观察容器，其对包含成为拍摄装置所涉及的拍摄对象的微小粒子的样品进行收容，具有由相互交叉的第1板部及第2板部构成的底部，
所述第1板部具有第1内表面和由平面构成的第1外表面，
所述第2板部具有第2内表面和由平面构成的第2外表面，
所述第1外表面和所述第2外表面的相交线以直线状延伸，
在相对于所述第1外表面和所述第2外表面的相交线垂直的剖面中，所述第1内表面和所述第1外表面相互平行，并且所述第2内表面和所述第2外表面相互平行，
所述第1板部的厚度及所述第2板部的厚度各自沿所述第1外表面和所述第2外表面的相交线变化，
所述第1内表面和所述第2内表面的相交线在所述底部的中央部接近所述第1外表面和所述第2外表面的相交线，并且其曲率半径为1mm～10mm，
在所述第1板部及所述第2板部这两者中，具有针对在所述微小粒子的观察中使用的光的波长具有透光性的区域，
该观察容器具有支撑部，该支撑部的底面为平坦，将所述观察容器可自立地支撑，
该观察容器具有多个收容部，该收容部对包含所述微小粒子的样品进行收容，
所述多个收容部通过低于所述收容部的侧壁的分隔壁被划分，在与所述分隔壁相比的上侧所述多个收容部相连。
6.根据权利要求5所述的观察容器，其中，
具有所述透光性的区域使350nm～2000nm的波段的光透过。
7.根据权利要求5或6所述的观察容器，其中，
具有盖部，该盖部覆盖对包含所述微小粒子的样品进行收容的收容部的上方，并且确保所述收容部内和外部的通气性。
8.一种微小粒子测量装置，其具有：
权利要求1至7中任一项所述的观察容器；
光源部，其对所述样品照射测定光；以及
多个拍摄部，它们在所述观察容器的所述第1板部及所述第2板部各自的外侧，对由从所述光源部照射出的测定光产生的所述微小粒子的像进行拍摄，
所述观察容器中的处于由所述拍摄部受光的光的光路上的区域，针对在所述微小粒子的观察中使用的光的波长具有透光性。
9.根据权利要求8所述的微小粒子测量装置，其中，
所述拍摄部设置于所述受光的光的光轴与在所述拍摄部之前设置的所述第1板部或所述第2板部正交的位置。
10.根据权利要求8或9所述的微小粒子测量装置，其中，
从所述光源部照射的光包含350nm～2000nm的波段的一部分。
11.根据权利要求8或9所述的微小粒子测量装置，其中，
所述光源部在隔着所述微小粒子而与所述多个拍摄部相对的位置设置多个。
12.根据权利要求8或9所述的微小粒子测量装置，其中，
所述拍摄部对由所述微小粒子针对从所述光源部照射出的测定光而发出的荧光进行拍摄。
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