CN110663818B

CN110663818B - 一种发酵蒲公英饲料添加剂及其制备方法和应用

Info

Publication number: CN110663818B
Application number: CN201910785205.8A
Authority: CN
Inventors: 齐景伟; 王瑞芳; 安晓萍; 刘娜; 王园; 任雪荣; 安禹宁; 宋懿峰
Original assignee: Inner Mongolia Agricultural University
Current assignee: Inner Mongolia Agricultural University
Priority date: 2019-08-23
Filing date: 2019-08-23
Publication date: 2023-04-18
Anticipated expiration: 2039-08-23
Also published as: CN110663818A

Abstract

本发明公开了一种发酵蒲公英饲料添加剂及其制备方法和应用。所述方法包括：利用菌剂对包含蒲公英、麸皮、玉米粉和水的发酵底物进行发酵而制备出发酵蒲公英；将发酵蒲公英与腐植酸钠混合。所述饲料添加剂包含发酵蒲公英和腐植酸钠，发酵蒲公英的发酵底物包含蒲公英、麸皮、玉米粉和水。本发明还提供包含所述饲料添加剂的饲料以及该饲料添加剂在制备饲料尤其是用于促进生长、提高饲料消化率和增强血液抗氧化功能的饲料中的应用。本发明的饲料添加剂富含多糖、黄酮、多酚等活性物质，抗氧化性强，具有抑制有害菌生长、清除自由基、提高饲料消化率和机体抗氧化能力等功效，是一种新型的抗生素替代品。

Description

一种发酵蒲公英饲料添加剂及其制备方法和应用

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种发酵蒲公英饲料添加剂及其制备方法和应用。

背景技术

蒲公英是一种多年生菊科草本植物。据统计，我国共有70种蒲公英，其中药用蒲公英至少有27种，除东南和华南以外，全国各地均有其生长。蒲公英味苦、性寒，入肝、胃二经，作为传统中药，具有清热解毒、消肿散结和保肝利胆等功效，是我国常见的药食两用植物。

目前，采用蒲公英作为原料都是发酵成发酵液，或者将少量的蒲公英作为中草药配合其他的原料发酵，从未见到将蒲公英作为主要发酵底物之一生产饲料或饲料添加剂，推测可能是因为如下原因：

(1)有报道蒲公英常规用量煎服后，偶见有胃肠道反应，如恶心、呕吐、腹部不适及轻度泄泻；大剂量(30g/kg)灌服煎剂3天，可见实验兔子肝细胞及肾小管上皮细胞轻度浊肿，肾小管变窄，其它无明显改变。小鼠和兔亚急性毒性试验，尿中可出现少量管型，肾小管上皮细胞浊肿。

(2)过敏反应：服用蒲公英煎剂、蒲公英酒浸剂后，个别会出现荨麻疹、全身瘙痒等过敏反应。蒲公英注射剂静脉滴注后，亦偶有寒战、面色苍白、青紫或精神症状。

(3)用蒲公英对于阴寒证，无热象，病程多较长，病人体质虚弱，容易出现食欲减退、倦怠、疲乏、出虚汗、面色苍白。

(4)阳虚外寒、脾胃虚弱者忌用蒲公英，并且性苦寒，归经肝胃，因此一般不会以蒲公英作为主要原料之一进行发酵制备饲料或饲料添加剂。

发明内容

本发明在第一方面提供了一种制备发酵蒲公英饲料添加剂的方法，所述方法包括：

(1)利用菌剂对包含蒲公英、麸皮、玉米粉和水的发酵底物进行发酵而制备出发酵蒲公英；(2)将所述发酵蒲公英与腐植酸钠混合，制得所述发酵蒲公英饲料添加剂。

本发明在第二方面提供了一种发酵蒲公英饲料添加剂，所述饲料添加剂包含如下组分：(1)发酵蒲公英，所述发酵蒲公英的发酵底物包含蒲公英、麸皮、玉米粉和水；和(2)腐植酸钠。

本发明在第三方面提供了一种饲料，所述饲料包含由本发明第一方面所述的方法制得的饲料添加剂或本发明第二方面所述的饲料添加剂。

本发明在第四方面提供由本发明第一方面所述的方法制得的饲料添加剂或本发明第二方面所述的饲料添加剂在制备饲料中的应用。

本发明的优点：

(1)本发明提供的发酵蒲公英饲料添加剂是利用蒲公英为主要发酵原料，通过混菌协同发酵制备而成，原料成本低廉，可进行大规模生产。

(2)所述发酵蒲公英饲料添加剂中富含多糖、黄酮和多酚等活性物质，可抑制有害菌生长、清除自由基、提高饲料消化率和机体抗氧化能力。

(3)所述发酵蒲公英饲料添加剂来源天然、无药物残留、不产生耐药性，是一种新型的健康、安全、高效的抗生素替代产品。

附图说明

图1显示发酵温度对发酵蒲公英多糖产量的影响。

图2显示含水量对发酵蒲公英多糖产量的影响。

图3显示接种量对发酵蒲公英多糖产量的影响。

图4显示发酵时间对发酵蒲公英多糖产量的影响。

具体实施方式

为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行更加清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

本发明在第一方面提供了一种制备发酵蒲公英饲料添加剂的方法，所述方法包括：(1)利用菌剂对包含蒲公英、麸皮、玉米粉和水的发酵底物进行发酵而制备出发酵蒲公英；(2)将所述发酵蒲公英与腐植酸钠混合，制得所述发酵蒲公英饲料添加剂。

在一些优选的实施方式中，所述发酵底物还包含碳酸氢钠、辣椒粉和生姜粉。

在另一些优选的实施方式中，以所述发酵底物的总质量计，所述发酵底物包含：20质量％～30质量％(例如25质量％)的蒲公英；15质量％～25质量％(例如20质量％)的麸皮；2.5质量％～5质量％(例如3质量％或4质量％)的玉米粉；0.05质量％～0.2质量％(例如0.1质量％或0.15质量％)的碳酸氢钠；0.05质量％～0.2质量％(例如0.1质量％或0.15质量％)的辣椒粉；0.05质量％～0.1质量％(例如0.08质量％)的生姜粉；和45质量％～55质量％(例如50质量％)的水。

本发明对发酵底物中的固体物料(即除了水之外的物料，下文有时简称为固体发酵底物)的粒度没有特别限制，例如可以为经过目数为20目至40目(例如为30目)的网筛。

在另一些优选的实施方式中，所述发酵蒲公英与所述腐植酸钠的质量比为(2～4):1，例如为3:1。优选的是，所述方法在步骤(1)和步骤(2)之间还包括将制备得到的所述发酵蒲公英进行烘干的步骤。更优选的是，所述烘干的温度为40℃至50℃，例如45℃。于是，在一些具体的实施方式中，本发明的发酵蒲公英饲料添加剂为由发酵蒲公英在40～50℃烘干后与腐植酸钠以(2～4):1的比例混合制备而成，其富含多糖和抗氧化物质例如黄酮和/或多酚。

在另一些优选的实施方式中，在步骤(1)中：所述发酵蒲公英的发酵条件如下：总接种量为5～10％(v/w)(例如8％(v/w))，发酵时间为48～72h(例如60h)，发酵温度为30～34℃(例如31、32、33或34℃)。

在另一些优选的实施方式中，所述菌剂为复合菌剂，优选为液态复合菌剂，更优选为由质量比为1：(0.75～4)：(0.75～4)，例如为1:1:1、4:3:3、3:4:3、3:3:4，优选为4:3:3的枯草芽孢杆菌、酿酒酵母和植物乳杆菌组成的液态复合菌剂。在一些优选的实施方式中，所述液态复合菌剂中，枯草芽孢杆菌为1～9×10⁹CFU/g，酿酒酵母为1～9×10⁹CFU/g，植物乳杆菌为1～9×10⁹CFU/g。枯草芽孢杆菌、酿酒酵母和植物乳杆菌的菌种可以例如购自内蒙古自治区草食家畜饲料工程技术研究中心。

本发明在第二方面提供了一种发酵蒲公英饲料添加剂，所述饲料添加剂包含如下组分：(1)发酵蒲公英，所述发酵蒲公英的发酵底物包含蒲公英、麸皮、玉米粉和水；(2)腐植酸钠。

在另一些优选的实施方式中，所述发酵蒲公英与所述腐植酸钠的质量比为(2～4):1，例如3:1。

在另一些优选的实施方式中，所述饲料添加剂中的多糖含量为110～150mg/g(例如120、130或140mg/g)，黄酮含量为15～30mg/g(例如20mg/g或25mg/g)，多酚含量为10～15mg/g(例如为12mg/g)。

在另一些优选的实施方式中，所述饲料添加剂由本发明第一方面所述的方法制得。

本发明在第三方面提供了一种饲料，所述饲料包含由本发明第一方面所述的方法制得的添加剂或本发明第二方面所述的添加剂。优选的是，以所述饲料的总质量计，所述饲料添加剂在所述饲料中的含量为0.1～0.8g/kg(例如0.2g/kg、0.3g/kg、0.4g/kg、0.5g/kg、0.6g/kg或0.7g/kg)，更优选为0.2～0.5g/kg。所述饲料添加剂在所述饲料中的含量可以实现抑制有害菌生长、清除自由基、提高饲料消化率和机体抗氧化能力的效果。更优选的是，所述饲料为用于促进生长、提高饲料消化率和增强血液抗氧化功能的饲料。进一步优选的是，所述饲料为羊饲料。更进一步优选的是，所述饲料为用于将羊的平均日增重提高至190g以上的羊饲料。

本发明在第四方面提供由本发明第一方面所述的方法制得的添加剂或本发明第二方面所述的添加剂在制备饲料中的应用。优选的是，以所述饲料的总质量计，所述饲料添加剂在所述饲料中的含量为0.1～0.8g/kg(例如0.2g/kg、0.3g/kg、0.4g/kg、0.5g/kg、0.6g/kg或0.7g/kg)，更优选为0.2～0.5g/kg。更优选的是，所述饲料为用于促进生长、提高饲料消化率和增强血液抗氧化功能的饲料。进一步优选的是，所述饲料为羊饲料。更进一步优选的是，所述饲料为用于将羊的平均日增重提高至190g以上的羊饲料。

本发明选用蒲公英作为主要原料，采用混菌协同发酵的方式制备发酵蒲公英饲料添加剂。本发明人发现，这样的饲料添加剂富含多糖和抗氧化物质，还能代替抗生素使用，减少药物残留，推动养殖业的健康快速发展，为蒲公英的功能开发提供有效途径。而且，蒲公英易生长，可广泛种植，成本低廉，可满足大规模生产。另外，蒲公英经发酵后得到的发酵蒲公英饲料添加剂富含多糖、黄酮和多酚等活性成分，可抑制有害菌生长，清除自由基，提高饲料消化率和机体抗氧化能力，能够替代抗生素使用，具有良好的开发价值和广阔的应用前景。

实施例

下文将以实施例的形式对本发明的技术方案进行举例说明，但是本发明的保护范围不限于这些实施例。

实施例1：发酵蒲公英饲料添加剂的制备

发酵蒲公英饲料添加剂的固体发酵底物由50质量％蒲公英，45质量％麸皮和5质量％玉米粉以及各自分别为0、0.025质量％、0.05质量％、0.1质量％和0.2质量％的碳酸氢钠、辣椒素和生姜粉组成。包括蒲公英、麸皮、玉米粉在内的固体发酵底物均购于市场，粉碎过40目筛，得到固体发酵底物。

发酵菌种：枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)和植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)均购自内蒙古自治区草食家畜饲料工程技术研究中心。

枯草芽孢杆菌种子液的制备：将甘油保存的枯草芽孢杆菌接种于营养肉汤固体培养基中活化24h后，挑取生长良好的单个菌落，接种于上述营养肉汤培养基中，37℃，120rpm摇床培养24h，即为枯草芽孢杆菌种子液。

酿酒酵母种子液的制备：将甘油保存的酿酒酵母接种于麦芽汁固体培养基中活化24h后，挑取生长良好的单个菌落，接种于上述麦芽汁培养基中，28℃，120rpm摇床培养24h，即为酿酒酵母种子液。

植物乳杆菌种子液的制备：将甘油保存的植物乳杆菌接种于MRS固体培养基中活化24h后，挑取生长良好的单个菌落，接种于上述MRS液体培养基中，37℃静止培养24h，即为植物乳杆菌种子液。

(1)不同菌种比例对发酵蒲公英多糖产量的影响

将上述培养获得的枯草芽孢杆菌种子液、酿酒酵母种子液和植物乳杆菌种子液分别以1:1:1、4:3:3、3:4:3、3:3:4的比例配制得到混合菌液(在混合菌液中，枯草芽孢杆菌、酿酒酵母和植物乳杆菌各自为约5×10⁹CFU/g，下同)。所述混合菌液按10质量％的总接种量分别接种于灭菌后的上述固体发酵底物(50质量％的蒲公英，45质量％的麸皮和5质量％的玉米粉、0.1质量％的碳酸氢钠、0.1质量％的辣椒素和0.1质量％的生姜粉)中，加入水至含水量50质量％，于30℃恒温光照培养箱中静置发酵培养72h，发酵结束后45℃烘干，通过测定发酵蒲公英多糖产量来筛选最优菌种比例。

表1.不同菌种比例对发酵蒲公英多糖产量的影响

枯草芽孢杆菌：酿酒酵母：植物乳杆菌	多糖产量(mg/g)
		1:1:1	<![CDATA[74.12±4.05<sup>bc</sup>]]>
4:3:3	<![CDATA[80.57±2.18<sup>a</sup>]]>
		3:4:3	<![CDATA[75.98±3.06<sup>bc</sup>]]>
3:3:4	<![CDATA[70.28±5.49<sup>c</sup>]]>
		未发酵	<![CDATA[62.44±3.68<sup>d</sup>]]>

不同菌种比例对发酵蒲公英多糖产量的影响见表1。由表1可以看出，经过固态发酵，蒲公英多糖产量由高到低所对应的菌种比例依次为4:3:3、3:4:3、1:1:1、3:3:4。其中，枯草芽孢杆菌、酿酒酵母和植物乳杆菌以4:3:3的比例发酵蒲公英的多糖产量显著高于其他各组(P<0.05)，为80.57mg/g，比未发酵组多糖产量提高了29.03％，因此选择最佳菌种比例4:3:3。

(2)发酵温度对发酵蒲公英多糖产量的影响

将枯草芽孢杆菌种子液、酿酒酵母种子液和植物乳杆菌种子液以4:3:3的比例按10质量％的总接种量接种于灭菌后的固体发酵底物(50质量％的蒲公英，45质量％的麸皮和5质量％的玉米粉、0.1质量％的碳酸氢钠、0.1质量％的辣椒素和0.1质量％的生姜粉)中，加入水至含水量50质量％，用玻璃棒搅拌均匀，分别置于28℃、30℃、32℃、34℃、36℃恒温培养箱中发酵72h，发酵结束后于45℃烘干，通过测定发酵蒲公英多糖产量来筛选最佳发酵温度。

发酵温度对发酵蒲公英多糖产量的影响见图1。由图1可知，随着发酵温度的增加，多糖含量呈现先增加后减少的趋势。发酵温度为30～34℃时，多糖产量差异不显著，但是发酵温度为34℃时多糖产量最高，达96.25mg/g。所以，选择34℃为最佳发酵温度。

(3)含水量对发酵蒲公英多糖产量的影响

将枯草芽孢杆菌种子液、酿酒酵母种子液和植物乳杆菌种子液以4:3:3的比例按10质量％的总接种量接种于灭菌后的固体发酵底物(50质量％的蒲公英，45质量％的麸皮和5质量％的玉米粉、0.1质量％的碳酸氢钠、0.1质量％的辣椒素和0.1质量％的生姜粉)中，加水至含水量分别达40质量％、45质量％、50质量％、55质量％和60质量％，用玻璃棒搅拌均匀，置于34℃恒温培养箱中发酵72h，发酵结束后发酵结束后于45℃烘干，通过测定发酵蒲公英多糖产量来筛选最佳含水量。

含水量对发酵蒲公英多糖产量的影响见图3。由图3可知，蒲公英多糖产量由高到低所对应的含水量依次为50质量％>55质量％>45质量％>60质量％>40质量％。其中，含水量为50质量％时，多糖产量达到105.80mg/g。因此，选择最佳含水量为50质量％。

(4)接种量对发酵蒲公英多糖产量的影响

将枯草芽孢杆菌种子液、酿酒酵母种子液和植物乳杆菌种子液以4:3:3的比例分别按6质量％、8质量％、10质量％、12质量％、14质量％的总接种量接种于灭菌后的固体发酵底物(50质量％的蒲公英，45质量％的麸皮和5质量％的玉米粉、0.1质量％的碳酸氢钠、0.1质量％的辣椒素和0.1质量％的生姜粉)中，含水量50质量％，用玻璃棒搅拌均匀，置于34℃恒温培养箱中发酵72h，发酵结束后于45℃烘干，通过测定多糖产量来筛选最佳接种量。

接种量对发酵蒲公英多糖产量的影响见图3。由图3可知，随着菌种接种量的增加，多糖含量先增加后趋于稳定。当接种量为10质量％时，多糖产量达到最大值113.87mg/g。因此，选择菌种最佳接种量为10质量％。

(5)发酵时间对发酵蒲公英多糖产量的影响

将枯草芽孢杆菌、酿酒酵母和植物乳杆菌以4:3:3的比例按10质量％的总接种量接种于灭菌后的固体发酵底物(50质量％的蒲公英，45质量％的麸皮和5质量％的玉米粉、0.1质量％的碳酸氢钠、0.1质量％的辣椒素和0.1质量％的生姜粉)中，含水量50质量％，用玻璃棒搅拌均匀，置于34℃恒温培养箱中分别发酵48h、60h、72h、84h和96h，发酵结束后于45℃烘干，通过测定多糖产量来筛选最佳发酵时间。

发酵时间对蒲公英多糖产量的影响见图4。由图4可知，多糖产量先增加后降低，发酵48h～72h差异不显著，但是发酵时间为72h时多糖产量最高。

因此，以蒲公英50质量％、麸皮45质量％、玉米粉5质量％为固体发酵底物，枯草芽孢杆菌：酿酒酵母：植物乳杆菌4:3:3为发酵菌种，总接种量为10质量％，含水量50质量％，在34℃条件下发酵72h，平行发酵3次，将发酵产物于45℃烘干后与腐植酸钠以2:1的比例进行复配，制备出一种发酵蒲公英饲料添加剂产品。产品中的多糖含量为120.15±3.46mg/g。

实施例2：本发明提供的发酵蒲公英饲料添加剂中活性成分的测定

(1)多糖的提取与测定

多糖的提取与测定：取产品1g加入20ml蒸馏水中，80℃水浴浸提30min，离心(5000r/min，10min)后取上清液进行多糖产量的测定。多糖的测定采用苯酚－浓硫酸法，由下列公式计算得出：

(2)黄酮的提取与测定

①黄酮的提取

取干燥的饲料添加剂1g加入20ml蒸馏水中，80℃水浴浸提30min，冷却，离心(5000r/min，10min)后取上清液待测。

②黄酮的测定

黄酮的测定采用分光光度法。

取2.5mL样品于试管中，在每个试管中加入5体积％的亚硝酸钠溶液0.2mL，摇匀，放置6min，加入10体积％的硝酸铝溶液0.2ml，摇匀，放置6min，再加入4体积％的氢氧化钠2ml，摇匀，放置15min，加入蒸馏水滴定到刻度(5ml)，在510nm波长下测定吸光度。以芦丁为标准品，制作标准曲线测定多酚的含量。单位为mg/g。

(3)多酚的提取与测定

①多酚的提取

取干燥的饲料添加剂1g加入16ml蒸馏水中，90℃水浴浸提60min，冷却，离心(5000r/min，10min)后取上清液待测。

②多酚的测定

多酚的测定采用福林酚比色法。取0.5mL样品于试管中，在每个试管中加入10体积％的福林酚试剂2.5mL，摇匀，反应3～8min，加入2mL 20体积％的碳酸钙溶液，加水至刻度，摇匀。室温下放置60min，在765nm波长下测定吸光度，以没食子酸为标准品，制作标准曲线测定多酚的含量。单位为mg/g。

根据实施例1的方法制备发酵蒲公英饲料添加剂，测定发酵蒲公英多糖等活性成分，结果参加下表2。

表2.发酵蒲公英饲料添加剂的多糖等活性成分

从表2的结果可以看出，NaHCO₃、辣椒素和生姜粉的最适添加量为0.1mg/g。

另外，还对发酵之前的固体发酵底物和发酵之后制得的发酵蒲公英饲料添加剂的活性成分进行对比分析，结果参见表3。

表3.固体发酵底物和发酵蒲公英饲料添加剂的活性成分分析

营养成分	发酵前固体底物	发酵蒲公英饲料添加剂
			多糖(mg/g)	<![CDATA[65.38±1.22<sup>b</sup>]]>	<![CDATA[120.15±3.46<sup>a</sup>]]>
黄酮(mg/g)	<![CDATA[10.17±0.92<sup>b</sup>]]>	<![CDATA[20.07±2.41<sup>a</sup>]]>
			多酚(mg/g)	<![CDATA[4.78±0.25<sup>b</sup>]]>	<![CDATA[11.65±0.84<sup>a</sup>]]>

注：发酵之前的固体发酵底物的组成如下：50质量％的蒲公英，45质量％的麸皮和5质量％的玉米粉、0.1质量％的碳酸氢钠、0.1质量％的辣椒素和0.1质量％的生姜粉；发酵蒲公英饲料添加剂为以50质量％的水和实施例1所述的液态复合菌剂以实施例1中相同的方式制得。

发酵蒲公英前后的活性成分对比见表3。由表3可以看出，与发酵前底物相比，发酵蒲公英饲料添加剂中的多糖、黄酮、多酚含量显著增加(P<0.05)。其中，多糖含量提高83.77％，黄酮含量提高97.35％，多酚含量提高143.72％。

实施例3：本发明提供的发酵蒲公英饲料添加剂对肉羊饲喂效果、血液抗氧化指标的影响

在配方如表4所示的肉羊基础日粮的基础上分别添加0、0.1、0.2、0.4、0.8g/kg发酵蒲公英抗氧化饲料添加剂。

表4.基础日粮组分及其营养组成(饲喂基础)

1预混料每公斤包含：Ca，130g；P，65g；盐，85g；维生素A，140000U；维生素D3，37500U；维生素E，375mg；维生素K3，25mg；维生素B1，25mg；维生素B6，25mg；核黄素，75mg；维生素B12，0.28mg；尼克酸，300mg；泛酸，200mg；叶酸，15mg；生物素，1.5mg；铁，1300mg；铜，200mg；锌，1200mg；Mn，1000mg；碘，9mg；硒，7mg；Co，12mg。

将体况良好、体重相近(34.65±0.82kg)的4月龄杜蒙杂交肉羊50只，随机分为5组，每组10只。试验期为75天，其中预饲期15天，正试期60天。结合前期试验基础，对照组正常饲喂基础日粮，不添加抗氧化饲料添加剂，试验组在基础日粮中分别添加0.1、0.2、0.5、0.8g/kg发酵蒲公英饲料添加剂。

试验羊自由饮水，每天晨饲前，记录前一天的剩料量，并根据剩料量调整饲喂量以确保10％的剩料，每天饲喂2次(08:00和18:00)。试验在自然通风羊舍内进行，保持舍内清洁，随时观察并记录羊只的食欲、精神状况、腹泻等情况。试验期间，按场内的常规免疫程序进行免疫、驱虫。试验开始时，称量初始体重，于试验第60天，早上空腹称重，计算平均日增重；每天记录喂料量和剩料量，采集饲料和剩料样品测定干物质，计算干物质采食量和饲料转化效率。

于正试期第60天晨饲前利用真空采血管对试验羊(每组随机选取1只羊)的颈静脉进行采血。测定总抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)水平。

表5.发酵蒲公英饲料添加剂对肉羊饲喂效果的影响

1饲料转换率，每公斤体增重的干物质采食量。

a，b同行肩标不同表示差异显著。(P<0.05)

日粮添加不同浓度发酵蒲公英饲料添加剂对杜蒙杂交肉羊生长性能的影响见表5。各处理组肉羊初始体重差异不显著。由表5可知，日粮添加0.2～0.5g/kg抗氧化饲料添加剂组的平均日增重显著高于其它各组。日粮添加0.1～0.8g/kg抗氧化饲料添加剂组的肉羊饲料转化率均高于对照组，但差异不显著。说明在肉羊饲料中添加0.2～0.5g/kg发酵蒲公英抗氧化饲料添加剂可以提高肉羊平均日增重，添加0.1～0.8g/kg抗氧化饲料添加剂可以提高饲料消化率。

表6.发酵蒲公英抗氧化饲料添加剂对肉羊血液抗氧化指标的影响

发酵蒲公英抗氧化饲料添加剂对肉羊血液抗氧化指标的影响见表6。由表6可知，与对照组相比，日粮添加0.2～0.5g/kg抗氧化饲料添加剂组的肉羊血浆中总抗氧化能力(T-AOC)显著高于其他各组(P<0.01)。各处理组间母羊血浆中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)水平差异不显著(P>0.50)。说明日粮添加0.2～0.5g/kg发酵蒲公英抗氧化饲料添加剂对肉羊血液抗氧化指标具有改善作用。

综合以上实施例的结果可以看出，本发明的发酵蒲公英饲料添加剂是一种促进肉羊生长、提高饲料消化率和增强血液抗氧化功能的安全、健康的抗氧化性饲料添加剂产品。

最后应说明的是：以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的精神和范围。

Claims

1.一种制备发酵蒲公英饲料添加剂的方法，其特征在于，所述方法包括：

(1)利用菌剂对包含蒲公英、麸皮、玉米粉、碳酸氢钠、辣椒粉、生姜粉和水的发酵底物进行发酵而制备出发酵蒲公英，所述菌剂为包含枯草芽孢杆菌、酿酒酵母和植物乳杆菌的复合菌剂；

(2)将所述发酵蒲公英与腐植酸钠混合，制得所述发酵蒲公英饲料添加剂；

其中：以所述发酵底物的总质量计，所述发酵底物包含：20质量％～30质量％的蒲公英；15质量％～25质量％的麸皮；2.5质量％～5质量％的玉米粉；0.05质量％～0.2质量％碳酸氢钠；0.05质量％～0.2质量％辣椒粉；0.05质量％～0.1质量％生姜粉；和45质量％～55质量％的水；

所述发酵蒲公英与所述腐植酸钠的质量比为(2～4):1；

所述菌剂为由质量比为1：(0.75～4)：(0.75～4)的枯草芽孢杆菌、酿酒酵母和植物乳杆菌组成的液态复合菌剂；

在步骤(1)中，所述发酵蒲公英的发酵条件如下：总接种量为5～10％(v/w)，发酵时间为48～72h，发酵温度为30～34℃。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法在步骤(1)和步骤(2)之间还包括将制备得到的所述发酵蒲公英进行烘干的步骤。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：

所述烘干的温度为40℃至50℃。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：

所述菌剂为由质量比为4:3:3的枯草芽孢杆菌、酿酒酵母和植物乳杆菌组成的液态复合菌剂。

5.一种发酵蒲公英饲料添加剂，其特征在于，所述饲料添加剂由权利要求1至4中任一项所述的方法制得。

6.根据权利要求5所述的饲料添加剂，其特征在于，所述饲料添加剂中的多糖含量为110～150mg/g，黄酮含量为15～30mg/g，多酚含量为10～15mg/g。

7.一种饲料，其特征在于，所述饲料包含由权利要求1至4中任一项所述的方法制得的饲料添加剂或权利要求5或6所述的饲料添加剂。

8.根据权利要求7所述的饲料，其特征在于，以所述饲料的总质量计，所述饲料添加剂在所述饲料中的含量为0.2～0.5g/kg。

9.由权利要求1至4中任一项所述的方法制得的饲料添加剂或权利要求5或6所述的饲料添加剂在制备饲料中的应用。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，以所述饲料的总质量计，所述饲料添加剂在所述饲料中的含量为0.2～0.5g/kg。

11.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述饲料为用于促进生长、提高饲料消化率和增强血液抗氧化功能的饲料。

12.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述饲料为羊饲料。

13.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述饲料为用于将羊的平均日增重提高至190g以上的羊饲料。