CN110652595B - 一种聚亮氨酸-聚天冬氨酸嵌段共聚物立构复合载药胶束及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种聚亮氨酸‑聚天冬氨酸嵌段共聚物立构复合载药胶束及其制备方法,将聚L‑亮氨酸单体与聚L‑天冬氨酸单体进行嵌段共聚;同样聚D‑亮氨酸单体与聚D‑天冬氨酸单体进行嵌段共聚;得到的聚L‑氨基酸嵌段共聚物与聚D‑氨基酸嵌段共聚物先分别与SOCl2进行酰卤化反应,再加入DMF、三乙胺和第一药物反应得到聚L‑氨基酸‑第一药物共聚物和聚D‑氨基酸‑第一药物共聚物;最后聚L‑氨基酸‑第一药物共聚物和聚D‑氨基酸‑第一药物共聚物在PBS缓冲液中等质量混合,加入第二药物,高速均质,用孔径为100nm的滤膜挤出即得。本发明制备的载药胶束具有较高的包封率,且释放速率较缓慢,巨噬细胞的摄取速率也较低,这样能达到长循环靶向肿瘤给药的目的。
Description
技术领域
本发明属于生物医用材料领域,具体是一种聚亮氨酸-聚天冬氨酸嵌段共聚物立构复合载药胶束及其制备方法。
背景技术
高分子药物输送系统是指将高分子载体用于包载、吸附或者化学连接药物,运用药物载体本身的选择性分布以及理化性质等特点,将药物输送到病灶部位,通过扩散等方式使药物能缓慢地释放出来,从而达到安全有效地治疗疾病的目的。但生物相容性、生物降解性和安全性制约了部分药用高分子材料的使用,开发安全的且具有新型功能的高分子材料一直是药剂学研究的热点领域。氨基酸是生物功能大分子蛋白质的基本组成单位,是构成动物营养所需蛋白质的基本物质。选用一种或多种氨基酸合成聚合物能在体内酶的作用下降解为氨基酸,生物相容性好,且安全无毒,聚氨基酸的研究已受到广泛的关注。采用天冬氨酸、谷氨酸、赖氨酸、丙氨酸、苯丙氨酸等制备聚氨基酸是一类低毒、生物相容性好、容易被机体吸收、代谢的生物降解高分子,在医药领域如药物控释、人造皮肤等方面具有广泛的应用。目前聚氨基酸作为药物载体的研究主要集中在聚氨基酸-药物偶联物、聚氨基酸复合载体、氨基酸共聚物几个方面: 聚氨基酸与药物通过化学键形成偶联物,在体内酸性环境及酶的作用下化学键断裂释放药物,达到缓释、靶向的作用,并且可以降低药物的毒性;聚氨基酸与其他高分子材料形成复合载体以克服单一材料的不足以及实现新的功能;氨基酸共聚物亦可形成两亲性材料作为药物载体,以提高药物溶解性能,延长体内循环时间和实现靶向目的。但是,现有的聚氨基酸药物载体仍然存在包封率低,药物半衰期较短等缺陷。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是针对现有的聚氨基酸药物载体仍然存在包封率低,药物半衰期较短等缺陷,采用嵌段共聚氨基酸实现载药立构结构,以提高载药量和缓慢释放的效果。
为了达到上述发明目的,本发明采取的技术方案如下:
一种聚亮氨酸-聚天冬氨酸嵌段共聚物立构复合载药胶束的制备方法,包括如下步骤:
(1)将聚L-亮氨酸单体与催化剂混合构成反应体系,经液氮冷却后抽真空,在氮气氛围中于20-100℃聚合反应1-48h,再加入聚L-天冬氨酸单体继续聚合反应1-48h,反应产物经沉淀处理后过滤,干燥后得到聚L-氨基酸嵌段共聚物;
(2)将聚D-亮氨酸单体与催化剂混合构成反应体系,经液氮冷却后抽真空,在氮气氛围中于20-100℃聚合反应1-48h,再加入聚D-天冬氨酸单体继续聚合反应1-48h,反应产物经沉淀处理后过滤,干燥后得到聚D-氨基酸嵌段共聚物;
(3)将步骤(1)得到的聚L-氨基酸嵌段共聚物与聚D-氨基酸嵌段共聚物先分别经液氮冷却后抽真空,在氮气氛围中冰浴下加入SOCl2,酰卤化反应4-24h,反应结束后减压蒸馏去除未反应的SOCl2,再加入DMF、三乙胺和第一药物,室温反应4-24h,反应产物经沉淀处理后过滤,干燥后分别得到聚L-氨基酸-第一药物共聚物和聚D-氨基酸-第一药物共聚物;
(4)将步骤(3)得到的聚L-氨基酸-第一药物共聚物和聚D-氨基酸-第一药物共聚物在PBS缓冲液中等质量混合,加入第二药物,高速均质,用孔径为100nm的滤膜挤出即得。
具体地,步骤(1)中,所述聚L-亮氨酸单体为N-羧基-L-亮氨酸-环内酸酐,聚 L-天冬氨酸单体为N-羧基-L-天冬氨酸-环内酸酐;步骤(2)中,所述聚D-亮氨酸单体为N-羧基-D-亮氨酸-环内酸酐,聚D-天冬氨酸单体为N-羧基-D-天冬氨酸-环内酸酐。
优选地,步骤(1)和(2)中,所述催化剂为Co(PMe3)4,其中Me为甲基。
优选地,步骤(1)中,所述聚L-亮氨酸单体、聚L-天冬氨酸单体、催化剂的质量比为10~20:30~190:1;步骤(2)中,所述聚D-亮氨酸单体、聚D-天冬氨酸单体、催化剂的质量比为10~20:30~190:1。
步骤(1)的作用是使得聚亮氨酸和聚天冬氨酸长链分开,为后期形成立构结构做准备。
具体地,步骤(3)中,所述第一药物为具有氨基的药物,包括但不限于吉西他滨、巯鸟嘌呤、阿糖胞苷中的一种。
优选地,步骤(3)中,聚L-氨基酸嵌段共聚物、SOCl2、DMF、三乙胺、第一药物的用量比为1g:(1~2ml):(4~8ml):(1~1.5ml):(0.1~1g);聚D-氨基酸嵌段共聚物、SOCl2、DMF、三乙胺、第一药物的用量比为1g:(1~2ml):(4~8ml):(1~1.5ml): (0.1~1g)。利于酰卤与氨基缩合形成酰胺键,将第一药物分别负载在聚L-氨基酸嵌段共聚物与聚D-氨基酸嵌段共聚物中。
具体地,步骤(4)中,所述第二药物包括但不限于紫杉醇、三尖杉酯碱、依托泊苷中的一种。
优选地,步骤(4)中,所述聚L-氨基酸-第一药物共聚物、聚D-氨基酸-第一药物共聚物、PBS缓冲液、第二药物的用量比为1g:1g:(40~100ml):(0.1~0.3g)。在立构胶束中,聚亮氨酸形成的疏水区域可以包覆第二药物。另外等量混合目的是为了形成疏水立构区域,这样比单一的疏水区域更稳定,包覆的药物量也更大。
上述方法制备得到的聚亮氨酸-聚天冬氨酸嵌段共聚物立构复合载药胶束也在本发明的保护范围之内。
有益效果:
1、本发明采用双联抗肿瘤药物,且以不同的方式结合到胶束中。利用吉西他滨的氨基与聚合物链上天冬氨酸单元的羧基形成酰胺键,能够使载体更有效地携带药物。同时,利用胶束的疏水核心包载紫杉醇。这样可以使用一种载体携带两种药物实现靶向给药。
2、本发明聚亮氨酸-聚天冬氨酸嵌段共聚物立构复合载药胶束从结构上来看,采用嵌段共聚氨基酸实现立构结构使胶束更加稳定,药物不易逸出,脱落,保证药物的包载量,温度响应性可以使得载药胶束在温度影响下控制释放药物,增强药物治疗效果。
附图说明
下面结合附图和具体实施方式对本发明做更进一步的具体说明,本发明的上述和/ 或其他方面的优点将会变得更加清楚。
图1是实施例1所制备的聚亮氨酸-聚天冬氨酸嵌段共聚物立构复合载药胶束电镜图。
图2是实施例与对比例材料的吉西他滨体外释放曲线图。
图3是实施例与对比例材料的紫杉醇体外释放曲线图。
具体实施方式
根据下述实施例,可以更好地理解本发明。
实施例1
步骤一:将20gN-羧基-L-亮氨酸-环内酸酐与1gCo(PMe3)4混合构成反应体系,经液氮冷却后抽真空,在氮气氛围中于60℃聚合反应24h,再加入80gN-羧基-L-天冬氨酸-环内酸酐继续聚合反应24h,反应产物经沉淀处理后过滤,干燥后得到聚L-氨基酸嵌段共聚物;
步骤二:将20gN-羧基-D-亮氨酸-环内酸酐与1gCo(PMe3)4混合构成反应体系,经液氮冷却后抽真空,在氮气氛围中于60℃聚合反应24h,再加入80gN-羧基-L-天冬氨酸-环内酸酐继续聚合反应24h,反应产物经沉淀处理后过滤,干燥后得到聚D-氨基酸嵌段共聚物;
步骤三:将1g聚L-氨基酸嵌段共聚物与1g聚D-氨基酸嵌段共聚物先分别经液氮冷却后抽真空,在氮气氛围中冰浴下加入1.5ml SOCl2,酰卤化反应12h,反应结束后减压蒸馏去除未反应的SOCl2,再加入6ml DMF、1.2ml三乙胺和0.5g吉西他滨,室温反应12h,反应产物经沉淀处理后过滤,干燥后得到聚L-氨基酸-吉西他滨共聚物和聚D-氨基酸-吉西他滨共聚物;
步骤四:将1g聚L-氨基酸-吉西他滨共聚物和1g聚D-氨基酸-吉西他滨共聚物在80ml PBS缓冲液中混合,加入0.2g紫杉醇,高速均质,用孔径为100nm的滤膜挤出,得聚亮氨酸-聚天冬氨酸嵌段共聚物立构复合载药胶束。
图1给出了本实施例所制备的聚亮氨酸-聚天冬氨酸嵌段共聚物立构复合载药胶束电镜图。
实施例2
步骤一:将10gN-羧基-L-亮氨酸-环内酸酐与1gCo(PMe3)4混合构成反应体系,经液氮冷却后抽真空,在氮气氛围中于20℃聚合反应1h,再加入190gN-羧基-L-天冬氨酸-环内酸酐继续聚合反应48h,反应产物经沉淀处理后过滤,干燥后得到聚L-氨基酸嵌段共聚物;
步骤二:将10gN-羧基-D-亮氨酸-环内酸酐与1gCo(PMe3)4混合构成反应体系,经液氮冷却后抽真空,在氮气氛围中于20℃聚合反应1h,再加入190gN-羧基-L-天冬氨酸-环内酸酐继续聚合反应48h,反应产物经沉淀处理后过滤,干燥后得到聚D-氨基酸嵌段共聚物;
步骤三:将1g聚L-氨基酸嵌段共聚物与1g聚D-氨基酸嵌段共聚物先分别经液氮冷却后抽真空,在氮气氛围中冰浴下加入1ml SOCl2,酰卤化反应4h,反应结束后减压蒸馏去除未反应的SOCl2,再加入4ml DMF、1ml三乙胺和0.1g阿糖胞苷,室温反应4h,反应产物经沉淀处理后过滤,干燥后得到聚L-氨基酸-阿糖胞苷共聚物和聚D- 氨基酸-阿糖胞苷共聚物;
步骤四:将1g聚L-氨基酸-阿糖胞苷共聚物和1g聚D-氨基酸-阿糖胞苷共聚物在40ml PBS缓冲液中混合,加入0.1g依托泊苷,高速均质,用孔径为100nm的滤膜挤出,得聚亮氨酸-聚天冬氨酸嵌段共聚物立构复合载药胶束。
实施例3
步骤一:将15gN-羧基-L-亮氨酸-环内酸酐与1gCo(PMe3)4混合构成反应体系,经液氮冷却后抽真空,在氮气氛围中于100℃聚合反应48h,再加入30gN-羧基-L-天冬氨酸-环内酸酐继续聚合反应1h,反应产物经沉淀处理后过滤,干燥后得到聚L-氨基酸嵌段共聚物;
步骤二:将15gN-羧基-D-亮氨酸-环内酸酐与1gCo(PMe3)4混合构成反应体系,经液氮冷却后抽真空,在氮气氛围中于100℃聚合反应48h,再加入30gN-羧基-L-天冬氨酸-环内酸酐继续聚合反应1h,反应产物经沉淀处理后过滤,干燥后得到聚D-氨基酸嵌段共聚物;
步骤三:将1g聚L-氨基酸嵌段共聚物与1g聚D-氨基酸嵌段共聚物先分别经液氮冷却后抽真空,在氮气氛围中冰浴下加入2ml SOCl2,酰卤化反应24h,反应结束后减压蒸馏去除未反应的SOCl2,再加入8ml DMF、1.5ml三乙胺和1g巯鸟嘌呤,室温反应24h,反应产物经沉淀处理后过滤,干燥后得到聚L-氨基酸-巯鸟嘌呤共聚物和聚D- 氨基酸-巯鸟嘌呤共聚物;
步骤四:将1g聚L-氨基酸巯鸟嘌呤共聚物和1g聚D-氨基酸-巯鸟嘌呤共聚物在100ml PBS缓冲液中混合,加入0.3g三尖杉酯碱,高速均质,用孔径为100nm的滤膜挤出,得聚亮氨酸-聚天冬氨酸嵌段共聚物立构复合载药胶束。
对比例1(无立构)
步骤一:将20gN-羧基-L-亮氨酸-环内酸酐与1gCo(PMe3)4混合构成反应体系,经液氮冷却后抽真空,在氮气氛围中于60℃聚合反应24h,再加入80gN-羧基-L-天冬氨酸-环内酸酐继续聚合反应24h,反应产物经沉淀处理后过滤,干燥后得到聚L-氨基酸嵌段共聚物;
步骤二:将1g聚L-氨基酸嵌段共聚物经液氮冷却后抽真空,在氮气氛围中冰浴下加入1.5ml SOCl2,酰卤化反应12h,反应结束后减压蒸馏去除未反应的SOCl2,再加入6mlDMF、1.2ml三乙胺和0.5g吉西他滨,室温反应12h,反应产物经沉淀处理后过滤,干燥后得到聚L-氨基酸-吉西他滨共聚物;
步骤三:将1g聚L-氨基酸-吉西他滨共聚物加入到80ml PBS缓冲液中,加入0.2g紫杉醇,高速均质,用孔径为100nm的滤膜挤出,得聚亮氨酸-聚天冬氨酸嵌段共聚物复合载药胶束。
对比例2(无共价结合吉西他滨)
步骤一:将20gN-羧基-L-亮氨酸-环内酸酐与1gCo(PMe3)4混合构成反应体系,经液氮冷却后抽真空,在氮气氛围中于60℃聚合反应24h,再加入80gN-羧基-L-天冬氨酸-环内酸酐继续聚合反应24h,反应产物经沉淀处理后过滤,干燥后得到聚L-氨基酸嵌段共聚物;
步骤二:将20gN-羧基-D-亮氨酸-环内酸酐与1gCo(PMe3)4混合构成反应体系,经液氮冷却后抽真空,在氮气氛围中于60℃聚合反应24h,再加入80gN-羧基-L-天冬氨酸-环内酸酐继续聚合反应24h,反应产物经沉淀处理后过滤,干燥后得到聚D-氨基酸嵌段共聚物;
步骤三:将1g聚L-氨基酸嵌段共聚物和1g聚D-氨基酸嵌段共聚物在80ml PBS 缓冲液中混合,加入0.2g依托泊苷和0.5g阿糖胞苷,高速均质,用孔径为100nm的滤膜挤出,得聚亮氨酸-聚天冬氨酸嵌段共聚物立构复合载药胶束。
对比例3(部分立构)
步骤一:将20gN-羧基-L-亮氨酸-环内酸酐与1gCo(PMe3)4混合构成反应体系,经液氮冷却后抽真空,在氮气氛围中于60℃聚合反应24h,再加入80gN-羧基-L-天冬氨酸-环内酸酐继续聚合反应24h,反应产物经沉淀处理后过滤,干燥后得到聚L-氨基酸嵌段共聚物;
步骤二:将20gN-羧基-D-亮氨酸-环内酸酐与1gCo(PMe3)4混合构成反应体系,经液氮冷却后抽真空,在氮气氛围中于60℃聚合反应24h,再加入80gN-羧基-L-天冬氨酸-环内酸酐继续聚合反应24h,反应产物经沉淀处理后过滤,干燥后得到聚D-氨基酸嵌段共聚物;
步骤三:将1g聚L-氨基酸嵌段共聚物经液氮冷却后抽真空,在氮气氛围中冰浴下加入1.5ml SOCl2,酰卤化反应12h,反应结束后减压蒸馏去除未反应的SOCl2,再加入6mlDMF、1.2ml三乙胺和0.5g巯鸟嘌呤,室温反应12h,反应产物经沉淀处理后过滤,干燥后得到聚L-氨基酸-巯鸟嘌呤共聚物;
步骤四:将1g聚L-氨基酸-巯鸟嘌呤共聚物和1g聚D-氨基酸嵌段共聚物在80mlPBS缓冲液中混合,加入0.2g三尖杉酯碱,高速均质,用孔径为100nm的滤膜挤出,得聚亮氨酸-聚天冬氨酸嵌段共聚物立构复合载药胶束。
以上实施例中,吉西他滨的HPLC检测方法如下:
色谱柱采用Kromasil C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇:0.075mol/L的醋酸铵溶液(用醋酸调pH值至5.0),流速比为80:20,流速为1mL/min,柱温30℃,检测波长为275nm,进样量为20μl。
紫杉醇HPLC检测方法如下:
色谱柱采用Inersil ODS-3C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈:水,流速比为60:40,流速为1mL/min,柱温30℃,检测波长为227nm,进样量为20μl。
巯鸟嘌呤HPLC检测方法如下:
色谱柱采用Hypersil ODS(250mm×4.6mm,2.5μm),流动相:乙腈:水:醋酸,流速比为12:399:1,流速为1mL/min,柱温30℃,检测波长为340nm,进样量为20μl。
阿糖胞苷HPLC检测方法如下:
色谱柱采用XTerra C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为0.01mol/L磷酸缓冲液(pH6.0),流速为0.95mL/min,柱温30℃,检测波长为280nm,进样量为20μl。
依托泊苷HPLC检测方法如下:
色谱柱采用Shim-pack CLC-ODS(150mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇:水,流速比为60:40,流速1mL/min,柱温25℃,荧光检测激发波长为240nm,发射波长为326nm。
三尖杉酯碱HPLC检测方法如下:
色谱柱采用Thermo-C18(150mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈:0.2%醋酸溶液(用0.5%三乙胺溶液调pH6.5),流速比为24:76,流速为1mL/min,柱温25℃,检测波长为288nm,进样量为20μl。
包封率的测定方法:取100mg材料,加入10ml PBS缓冲液,充分搅拌后,15000r/min离心30min,取沉淀用DMF充分溶解后用HPLC法分别测定第一药物和第二药物的含量。
其中包封率采用如下公式计算:
其中W总制备100mg材料时所加入的第一药物或者第二药物的量;W沉淀为离心后沉淀中的第一药物或者第二药物的质量。
表1 实施例与对比例制备材料的包封率
从表1可知,本发明所制备的材料其包封率都明显高于对比例,说明本发明制备方法能够大大提高材料的吸附载药性能。
巨噬细胞摄取实验:
吸取1mL小鼠巨噬细胞(RAW264.7)悬液(4×105个细胞)与50mg各种材料混合,在37℃分别孵育1h、2h、4h、8h,每10min振摇1次,使细胞-材料悬液混合均匀。将混合液置冰浴中以终止细胞吞噬作用后,1500r/min离心5min,细胞沉淀经PBS 缓冲液洗涤(3次,每次0.5mL)后破碎细胞测定胞内第一药物和第二药物的含量,计算巨噬细胞对材料的摄取百分率。
摄取百分率采用如下公式计算:
其中WC为胞内所含第一药物或者第二药物的质量;WD为50mg材料中所包载第一药物或者第二药物的质量。
表2 实施例和对比例材料巨噬细胞摄取实验结果
从表2可知,与对比例相比,本发明实施例制备的三种材料均可显著减少巨噬细胞摄取(P<0.01)。
体外释放曲线测定方法:
取材料100mg,加到1LPBS缓冲液中,放入37℃恒温水浴中,低速振荡进行释放实验。设置取样时间点为,1h,3h,6h,10h,1d,2d,4d,7d,在指定时间点取5ml 样品溶液,20000r/min离心10min,取上清液用HPLC法分别测量释放出来第一药物和者第二药物的含量。
由图2和图3可知,对比例的材料两种药物的体外释放速率均较快;而本发明制备的材料突释效应很小,第一药物和者第二药物的释放速率基本符合线性规律,且释放速率很小,特别是第一药物由于和聚天冬氨酸单体形成酰胺键,其体外释放速率更小,表明材料的控释效果较好,这有利于减小药物的毒副作用。
本发明提供了一种聚亮氨酸-聚天冬氨酸嵌段共聚物立构复合载药胶束及其制备方法的思路及方法,具体实现该技术方案的方法和途径很多,以上所述仅是本发明的优选实施方式,应当指出,对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明原理的前提下,还可以做出若干改进和润饰,这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。本实施例中未明确的各组成部分均可用现有技术加以实现。
Claims (9)
1.一种聚亮氨酸-聚天冬氨酸嵌段共聚物立构复合载药胶束的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)将聚L-亮氨酸单体与催化剂混合构成反应体系,经液氮冷却后抽真空,在氮气氛围中于20-100℃聚合反应1-48h,再加入聚L-天冬氨酸单体继续聚合反应1-48h,反应产物经沉淀处理后过滤,干燥后得到聚L-氨基酸嵌段共聚物;
(2)将聚D-亮氨酸单体与催化剂混合构成反应体系,经液氮冷却后抽真空,在氮气氛围中于20-100℃聚合反应1-48h,再加入聚D-天冬氨酸单体继续聚合反应1-48h,反应产物经沉淀处理后过滤,干燥后得到聚D-氨基酸嵌段共聚物;
(3)将步骤(1)得到的聚L-氨基酸嵌段共聚物与聚D-氨基酸嵌段共聚物先分别经液氮冷却后抽真空,在氮气氛围中冰浴下加入SOCl2,酰卤化反应4-24h,反应结束后减压蒸馏去除未反应的SOCl2,再加入DMF、三乙胺和第一药物,室温反应4-24h,反应产物经沉淀处理后过滤,干燥后分别得到聚L-氨基酸-第一药物共聚物和聚D-氨基酸-第一药物共聚物;
(4)将步骤(3)得到的聚L-氨基酸-第一药物共聚物和聚D-氨基酸-第一药物共聚物在PBS缓冲液中等质量混合,加入第二药物,高速均质,用孔径为100 nm的滤膜挤出即得;
步骤(1)中,所述聚L-亮氨酸单体、聚L-天冬氨酸单体、催化剂的质量比为10~20:30~190:1;步骤(2)中,所述聚D-亮氨酸单体、聚D-天冬氨酸单体、催化剂的质量比为10~20:30~190:1。
2.根据权利要求1所述的聚亮氨酸-聚天冬氨酸嵌段共聚物立构复合载药胶束的制备方法,其特征在于,步骤(1)中,所述聚L-亮氨酸单体为N-羧基-L-亮氨酸-环内酸酐,聚L-天冬氨酸单体为N-羧基-L-天冬氨酸-环内酸酐;步骤(2)中,所述聚D-亮氨酸单体为N-羧基-D-亮氨酸-环内酸酐,聚D-天冬氨酸单体为N-羧基-D-天冬氨酸-环内酸酐。
3.根据权利要求1所述的聚亮氨酸-聚天冬氨酸嵌段共聚物立构复合载药胶束的制备方法,其特征在于,步骤(1)和(2)中,所述催化剂为Co(PMe3)4,其中Me为甲基。
4.根据权利要求1所述的聚亮氨酸-聚天冬氨酸嵌段共聚物立构复合载药胶束的制备方法,其特征在于,步骤(3)中,所述第一药物为具有氨基的抗肿瘤药物。
5.根据权利要求4所述的聚亮氨酸-聚天冬氨酸嵌段共聚物立构复合载药胶束的制备方法,其特征在于,所述第一药物为吉西他滨、巯鸟嘌呤、阿糖胞苷中的一种。
6.根据权利要求4所述的聚亮氨酸-聚天冬氨酸嵌段共聚物立构复合载药胶束的制备方法,其特征在于,步骤(3)中,聚L-氨基酸嵌段共聚物、SOCl2、DMF、三乙胺、第一药物的用量比为1g:(1~2ml):(4~8ml):(1~1.5 ml):(0.1~1g);聚D-氨基酸嵌段共聚物、SOCl2、DMF、三乙胺、第一药物的用量比为1g:(1~2ml):(4~8ml):(1~1.5 ml):(0.1~1g)。
7.根据权利要求1所述的聚亮氨酸-聚天冬氨酸嵌段共聚物立构复合载药胶束的制备方法,其特征在于,步骤(4)中,所述第二药物为紫杉醇、三尖杉酯碱、依托泊苷中的一种。
8.根据权利要求7所述的聚亮氨酸-聚天冬氨酸嵌段共聚物立构复合载药胶束的制备方法,其特征在于,步骤(4)中,所述聚L-氨基酸-第一药物共聚物、聚D-氨基酸-第一药物共聚物、PBS缓冲液、第二药物的用量比为1g:1g:(40~100ml):(0.1~0.3g)。
9.权利要求1~8中任意一种制备方法制备得到的聚亮氨酸-聚天冬氨酸嵌段共聚物立构复合载药胶束。
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