CN110652501A - 一种制备口腔用双层结构的蜂胶中药黏附片的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种用于口腔的双层结构的含蜂胶的中药黏附片的制备方法以及由该方法制备得到的含蜂胶的中药黏附片。该方法采用超声波辅助双相萃取和冷冻干燥有效保留了蜂胶中的有效成分，特别是利用蜂胶的提取物，结合草珊瑚流浸膏和积雪草苷作为主要活性成分，协同作用，增强药效，治疗效果显著。同时由于联合应用草珊瑚流浸膏和积雪草苷作为主要活性成分，降低了蜂胶的使用量，有效降低了蜂胶味道苦略带辛辣味道，改善患者用药顺应性。

Description

一种制备口腔用双层结构的蜂胶中药黏附片的制备方法

技术领域

本发明属于医药生产领域，具体而言，涉及一种用于口腔的双层结构的含蜂胶的中药黏附片的制备方法以及由该方法制备得到的含蜂胶的中药黏附片。

背景技术

口腔溃疡，中医上又称口疮，为口腔粘膜疾病中最常见的疾病，发病率越来越高，现代医学目前缺乏有效的治疗手段。口腔溃疡病因复杂，与自身免疫机能低下、内分泌功能紊乱和遗传因素等均有着密切的关系。口腔溃疡的早期临床表现为在病损局部有发紧发涩、灼热或轻微疼痛；发作时口腔内粘膜坏死，口腔粘膜反复出现孤立的圆形或椭圆形的浅表性溃疡，局部有剧烈的自发性灼热疼痛，且由于受到咀嚼、说话的刺激，可能日益加重。

口腔溃疡属于非特异性炎症。初期出现严重的血管及炎性反应，形成溃疡后，其表面有纤维素性假膜覆盖，下方有少量坏死组织。固有层有大量炎症细胞浸润，胶原纤维可水肿、玻璃样变或断裂消失。目前主要采用化学药物通过杀菌消炎的方法治疗口腔溃疡，比如甲硝唑、替硝唑、西地碘、地塞米松等。剂型主要有口漱液、散剂、凝胶和含片等。其中，作为液体制剂口漱液存在药物稳定性较低、储藏、运输和使用不便等诸多问题；作为粉末给药的散剂无法做到定量给药，且散剂中的药粉或含片在口腔内接触唾液后，可被唾液稀释并分散至其他部位，或随吞咽动作咽下，极大的影响了治疗效果。更重要的是，口漱液、散剂和含片在患处停留时间短，药物无法与溃疡部位长时间接触从而影响疗效。

中国发明专利申请200510032791.7公开了一种有效治疗口腔溃疡及牙周肿痛的药物及其制备方法，它是以99％～1％(重量)的黄蜀葵花和1％～99％(重量)的蜂胶为原料，采用药剂学的制备方法制成凝胶。凝胶制剂是药物与能形成凝胶的辅料制成均一、混悬或乳状型的乳胶稠厚液体或半固体制剂，因此，凝胶制剂在口腔内接触唾液后，也可以被唾液稀释并分散至其他部位，除了极大影响治疗效果外，由于凝胶剂属于乳胶稠厚液体，能在口腔中经过口腔的活动而粘附到口腔各个部位，严重引起口腔的不适。

中国发明专利申请200610171085.5公开了一种治疗口腔溃疡的外用内服口腔崩解片及其制备方法，其主要采用蜂胶、青黛、薄荷等药粉混合而成，并辅以各种辅料。其中的蜂胶仅经过除杂质、常规处理，但治疗效果仍然不够理想。

发明内容

针对现有技术的问题，根据本发明的一个方面，本发明的一个目的是提供一种用于口腔的具有双层结构的含蜂胶中药黏附片的制备方法，所述方法包括以下步骤：

1)首先将原料蜂胶在-10至-20℃下冷冻4小时，然后用球磨机粉碎，然后将粉碎的原料蜂胶粉末加入提取罐中，所述提取罐中装有阳离子交换树脂，然后按照蜂胶与乙醇的体积比为1:6加入无水乙醇，20℃下搅拌10小时，然后用滤网为600至700目的过滤机进行过滤，将滤液在真空浓缩罐中浓缩除去乙醇溶剂，得到预处理蜂胶粉末；

2)然后将预处理的蜂胶加入配有超声波发生器的萃取器中，加入质量百分比浓度为95％的乙醇溶液和石油醚，在40℃下搅拌萃取30分钟，冷却后过滤，重复3次合并萃取液，减压浓缩，即得蜂胶萃取物，其中预处理的蜂胶、95％的乙醇溶液和石油醚的重量比为1:3.75:1.25，超声波频率为40kHz，功率为100W；

3)将步骤2)中得到的萃取物在-35℃下直接进行冷冻干燥，然后同样温度下进行研磨，得到平均粒径为20至40微米的蜂胶提取物；

4)将配方量的步骤3)中得到的蜂胶提取物与积雪草苷、草珊瑚流浸膏、生物可粘性聚合物和填充剂混合均匀后，采用60％乙醇溶液作为润湿剂制粒，湿颗粒用20目筛整粒，颗粒干燥后，加入矫味剂和硬脂酸镁，混合均匀后压片；

5)将保护层高分子材料溶解于质量百分比浓度为95％的乙醇中，形成溶液，然后用喷膜机将该保护层溶液喷洒在步骤4)中的压片一个表面上，然后通过热空气干燥处理，在压片上形成单面保护膜。

按照重量份计，步骤4)中得到的所述压片含有蜂胶提取物30至100份、积雪草苷5至30份、草珊瑚流浸膏5至20份、生物可粘性聚合物30至100份、填充剂15至50份、矫味剂1至10份和硬脂酸镁1至10份。

优选地，按照重量份计，步骤4)中得到的所述压片含有蜂胶提取物40至80份、积雪草苷10至25份、草珊瑚流浸膏5至10份、生物可粘性聚合物40至60份、填充剂20至37份、矫味剂4至5份和硬脂酸镁3至6份。

更优选地，按照重量份计，步骤4)中得到的所述压片含有蜂胶提取物50份、积雪草苷10份、草珊瑚流浸膏5份、生物可粘性聚合物40份、填充剂37份、矫味剂5份和硬脂酸镁3份；或者

步骤4)中得到的所述压片含有蜂胶提取物40份、积雪草苷25份、草珊瑚流浸膏5份、生物可粘性聚合物40份、填充剂32份、矫味剂5份和硬脂酸镁3份；或者

步骤4)中得到的所述压片含有蜂胶提取物80份、积雪草苷10份、草珊瑚流浸膏5份、生物可粘性聚合物54份、填充剂20份、矫味剂5份和硬脂酸镁6份；或者

步骤4)中得到的所述压片含有蜂胶提取物40份、积雪草苷15份、草珊瑚流浸膏10份、生物可粘性聚合物60份、填充剂28份、矫味剂4份和硬脂酸镁3份。

优选地，步骤4)中所述生物可粘性聚合物选自羟丙基纤维素、羟丙甲基纤维素、聚维酮，进一步优选为羟丙基纤维素。

优选地，步骤4)中所述填充剂选自甘露醇和微晶纤维素中的一种或两种，若选自甘露醇和微晶纤维素两者，则两者可以按任何比例混合。

优选地，步骤4)中所述矫味剂选自薄荷醇和山梨醇中的一种。

优选地，步骤5)中所述保护层高分子材料选自甲基纤维素、乙基纤维素、药用丙烯酸酯类中的一种，更优选为甲基纤维素或乙基纤维素。

根据本发明的另一个方面，本发明的另一个目的是提供一种用于口腔的具有双层结构的含蜂胶中药黏附片，所述黏附片根据上述方法制备得到。

有益效果

根据本发明的制备方法工艺简单，可以最大程度地保留蜂胶中的有效成分，同时不采用例如甲硝唑、替硝唑、西地碘、地塞米松等的化学药物，而采用蜂胶、积雪草苷、草珊瑚流浸膏等纯天然物质，利用蜂胶的提取物，结合草珊瑚流浸膏和积雪草苷作为主要活性成分，协同作用，增强药效，治疗效果显著。同时由于联合应用草珊瑚流浸膏和积雪草苷作为主要活性成分，降低了蜂胶的使用量，有效降低了蜂胶味道苦略带辛辣味道，改善患者用药顺应性。

另外，制备的口腔用含蜂胶的中药黏附片替代常用的漱口水，片剂，含片等剂型，利用高分子材料，将药物定位于病灶部位，上药位置精准，提高上药效果；可以克服药物被唾液稀释、生物利用度低的问题，延长作用时间；同时有效成分由粘膜吸收，避免药物的肝脏首过效应，提高生物利用度；另外口腔用中药黏附片直接粘附于溃疡表面，还可以直接保护溃疡面、有效促进溃疡愈合；且贴片易于给药，移去制剂即可终止给药，患者使用方便。

具体实施方式

以下，将详细地描述本发明。在进行描述之前，应当理解的是，在本说明书和所附的权利要求书中使用的术语不应解释为限制于一般含义和字典含义，而应当在允许发明人适当定义术语以进行最佳解释的原则的基础上，根据与本发明的技术方面相应的含义和概念进行解释。因此，这里提出的描述仅仅是出于举例说明目的的优选实例，并非意图限制本发明的范围，从而应当理解的是，在不偏离本发明的精神和范围的情况下，可以由其获得其他等价方式或改进方式。

本发明选择蜂胶是因为蜂胶具有强的抗炎镇痛和抗溃疡功效，蜂胶是一种极为稀少的天然资源，素有“紫色黄金”之称。它能够促进口腔溃疡的愈合，促进组织的修复。局部应用蜂胶可减轻损伤局部的毛细血管扩张充血和炎症细胞浸润，并增加巨噬细胞和肥大细胞数目，促进牙髓新生和纤维牙质的形成。但由于蜂胶在常温下质软，不易提纯，在常规的醇提法中往往造成大量活性成分的散失或失活，因此一直不能得到充分利用。本发明中采用超声波辅助双相萃取和冷冻干燥相结合的方式，最大程度地保留蜂胶中的有效成分。

另外，本发明还选择草珊瑚流浸膏作为主要活性成分之一，因为草珊瑚是民间著名的中草药。现代医学证明草珊瑚流浸膏是含有多酚羟基、羟基和酮基的苯环、大环和杂环类化合物。具有清热解毒、抗菌消炎、止血止痛、散淤消肿、清除口臭、加速溃疡面愈合等功能。

另外，本发明还选择积雪草苷作为主要活性成分之一，因为积雪草含有能够帮助伤口愈合的三萜类化合物。三萜类化合物能增进伤口中抗氧化剂浓度和通过增加血液供应修复发炎组织。

通过蜂胶的提取物，结合草珊瑚流浸膏和积雪草苷作为主要活性成分，协同作用，增强药效，治疗效果显著。

黏附片是生物粘附制剂，是一类新型给药系统。它用生物可粘性聚合物作为药物载体，利用药用高分子材料与口腔粘膜发生生物粘附的特性，将药物定位于病灶部位，加强药物与粘膜接触的紧密度，缓慢释放药物。因此黏附片具有速效和延效的作用，且具有载药量少，给药方便和避免首过效应等优点，因此很快被应用于口腔疾病的治疗。本发明将含有蜂胶的提取物，结合草珊瑚流浸膏和积雪草苷作为主要活性成分的压片外侧包覆保护膜层，从而形成两层结构。使用时将不含保护膜的一侧置于口疮病灶处，外侧保护膜层起到防止药物层因唾液等体液的快速崩解或失效，使药物可以更持久地施用于病灶位置。

以下实施例仅是作为本发明的实施方案的例子列举，并不对本发明构成任何限制，本领域技术人员可以理解在不偏离本发明的实质和构思的范围内的修改均落入本发明的保护范围。除非特别说明，以下实施例中使用的试剂和仪器均为市售可得产品。

实施例1

1)首先将原料蜂胶在-10至-20℃下冷冻4小时，然后用球磨机粉碎，然后将粉碎的原料蜂胶粉末加入提取罐中，所述提取罐中装有阳离子交换树脂，然后按照蜂胶与乙醇的体积比为1:6加入无水乙醇，20℃下搅拌10小时，然后用滤网为600至700目的过滤机进行过滤，将滤液在真空浓缩罐中浓缩除去乙醇溶剂，得到预处理蜂胶粉末；

2)然后将预处理的蜂胶加入配有超声波发生器的萃取器中，加入质量百分比浓度为95％的乙醇溶液和石油醚，在40℃下搅拌萃取30分钟，冷却后过滤，重复3次合并萃取液，减压浓缩，即得蜂胶萃取物，其中预处理的蜂胶、95％的乙醇溶液和石油醚的重量比为1:3.75:1.25，超声波频率为40kHz，功率为100W；

3)将步骤2)中得到的萃取物在-35℃下直接进行冷冻干燥，然后同样温度下进行研磨，得到平均粒径为20至40微米的蜂胶提取物；

4)将配方量的步骤3)中得到的蜂胶提取物与积雪草苷、草珊瑚流浸膏、生物可粘性聚合物和填充剂混合均匀后，采用60％乙醇溶液作为润湿剂制粒，湿颗粒用20目筛整粒，颗粒干燥后，加入矫味剂和硬脂酸镁，混合均匀后压片；

5)将保护层高分子材料溶解于质量百分比浓度为95％的乙醇中，形成溶液，然后用喷膜机将该保护层溶液喷洒在步骤4)中的压片一个表面上，然后通过热空气干燥处理，在压片上形成单面保护膜，得到用于口腔的具有双层结构的含蜂胶中药黏附片。

其中步骤4)中各种组分的用量按照下表1中所示。

表1

组成	每片用量/mg
		蜂胶	50
积雪草苷	10
		草珊瑚流浸膏	5
聚维酮	40
		甘露醇	37
薄荷醇	5
		硬脂酸镁	3

实施例2

按照下表2中的配方，按照实施例1中相同的方式制备用于口腔的具有双层结构的含蜂胶中药黏附片。

表2

组成	每片用量/mg
		蜂胶	40
积雪草苷	25
		草珊瑚流浸膏	5
聚维酮	40
		甘露醇	32
薄荷醇	5
		硬脂酸镁	3

实施例3

按照下表3中的配方，按照实施例1中相同的方式制备用于口腔的具有双层结构的含蜂胶中药黏附片。

表3

实施例4

按照下表4中的配方，按照实施例1中相同的方式制备用于口腔的具有双层结构的含蜂胶中药黏附片。

表4

组成	每片用量/mg
		蜂胶	40
积雪草苷	15
		草珊瑚流浸膏	10
羟丙基纤维素	60
		微晶纤维素	28
山梨醇	4
		硬脂酸镁	3

测试实施例1：用于口腔的具有双层结构的含蜂胶中药黏附片疗效评价

参照文献方法(“一种简便使用的口腔溃疡实验模型”，安徽医科大学学报，2002年8月，37(4))，评价根据本发明的制备方法得到的用于口腔的具有双层结构的含蜂胶中药黏附片对口腔溃疡的治疗作用。实验动物采用新西兰纯种健康白兔，雌雄兼用，雌者无孕。通过醋酸损伤法建立兔口腔黏膜溃疡模型。选择溃疡面直径4.0-6.5mm之间的白兔20只，随机分为空白组、实施例1中制备得到的中药黏附片组、醋酸地塞米松贴片组和甲硝唑贴片组。给药前，各组平均溃疡面积统计学处理无明显差异(P<0.05)。空白组每日用蒸馏水冲冼黏膜两次；实施例1中制备得到的中药黏附片组、醋酸地塞米松贴片组和甲硝唑贴片组每日2涂敷受试药1次。醋酸地塞米松贴片组和甲硝唑贴片组使用市场购买的醋酸地塞米松贴片和甲硝唑贴片。从给药2天后每两天用游标卡尺测量各兔口腔溃疡直径一次，详细记录数据，结果列于下表5中。

表5：治疗醋酸损伤性口腔溃疡试验结果(n＝5，单位：mm²)

结果显示，根据本发明的制备方法得到的中药黏附片组、醋酸地塞米松贴片组和甲硝唑贴片组溃疡面积缩小与空白组相比有显著统计学意义。根据本发明的制备方法得到的中药黏附片组对醋酸所致口腔溃疡模型具有显著的治疗效果，优于醋酸地塞米松贴片组和甲硝唑贴片组，这与中药黏附片在创面长时间驻留有关，还与中药黏附片中蜂胶、草珊瑚流浸膏和积雪草苷协同作用有关，能够显著增强治疗口腔溃疡的效果。

Claims (8)

1.一种用于口腔的具有双层结构的含蜂胶中药黏附片的制备方法，所述方法包括以下步骤：

1)首先将原料蜂胶在-10至-20℃下冷冻4小时，然后用球磨机粉碎，然后将粉碎的原料蜂胶粉末加入提取罐中，所述提取罐中装有阳离子交换树脂，然后按照蜂胶与乙醇的体积比为1:6加入无水乙醇，20℃下搅拌10小时，然后用滤网为600至700目的过滤机进行过滤，将滤液在真空浓缩罐中浓缩除去乙醇溶剂，得到预处理蜂胶粉末；

2)然后将预处理的蜂胶加入配有超声波发生器的萃取器中，加入质量百分比浓度为95％的乙醇溶液和石油醚，在40℃下搅拌萃取30分钟，冷却后过滤，重复3次合并萃取液，减压浓缩，即得蜂胶萃取物，其中预处理的蜂胶、95％的乙醇溶液和石油醚的重量比为1:3.75:1.25，超声波频率为40kHz，功率为100W；

3)将步骤2)中得到的萃取物在-35℃下直接进行冷冻干燥，然后同样温度下进行研磨，得到平均粒径为20至40微米的蜂胶提取物；

4)将配方量的步骤3)中得到的蜂胶提取物与积雪草苷、草珊瑚流浸膏、生物可粘性聚合物和填充剂混合均匀后，采用60％乙醇溶液作为润湿剂制粒，湿颗粒用20目筛整粒，颗粒干燥后，加入矫味剂和硬脂酸镁，混合均匀后压片；

5)将保护层高分子材料溶解于质量百分比浓度为95％的乙醇中，形成溶液，然后用喷膜机将该保护层溶液喷洒在步骤4)中的压片一个表面上，然后通过热空气干燥处理，在压片上形成单面保护膜；

按照重量份计，步骤4)中得到的所述压片含有蜂胶提取物30至100份、积雪草苷5至30份、草珊瑚流浸膏5至20份、生物可粘性聚合物30至100份、填充剂15至50份、矫味剂1至10份和硬脂酸镁1至10份。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，按照重量份计，步骤4)中得到的所述压片含有蜂胶提取物40至80份、积雪草苷10至25份、草珊瑚流浸膏5至10份、生物可粘性聚合物40至60份、填充剂20至37份、矫味剂4至5份和硬脂酸镁3至6份。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，按照重量份计，步骤4)中得到的所述压片含有蜂胶提取物50份、积雪草苷10份、草珊瑚流浸膏5份、生物可粘性聚合物40份、填充剂37份、矫味剂5份和硬脂酸镁3份；或者

步骤4)中得到的所述压片含有蜂胶提取物40份、积雪草苷25份、草珊瑚流浸膏5份、生物可粘性聚合物40份、填充剂32份、矫味剂5份和硬脂酸镁3份；或者

步骤4)中得到的所述压片含有蜂胶提取物80份、积雪草苷10份、草珊瑚流浸膏5份、生物可粘性聚合物54份、填充剂20份、矫味剂5份和硬脂酸镁6份；或者

步骤4)中得到的所述压片含有蜂胶提取物40份、积雪草苷15份、草珊瑚流浸膏10份、生物可粘性聚合物60份、填充剂28份、矫味剂4份和硬脂酸镁3份。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤4)中所述生物可粘性聚合物选自羟丙基纤维素、羟丙甲基纤维素、聚维酮，进一步优选为羟丙基纤维素。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤4)中所述填充剂选自甘露醇和微晶纤维素中的一种或两种，若选自甘露醇和微晶纤维素两者，则两者可以按任何比例混合。

6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤4)中所述矫味剂选自薄荷醇和山梨醇中的一种。

7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤5)中所述保护层高分子材料选自甲基纤维素、乙基纤维素、药用丙烯酸酯类中的一种，更优选为甲基纤维素或乙基纤维素。

8.一种用于口腔的具有双层结构的含蜂胶中药黏附片，所述黏附片根据权利要求1至7中任意一项所述方法制备得到。