CN110638883A

CN110638883A - 一种以复合菌种发酵制备改良常青散的制备方法

Info

Publication number: CN110638883A
Application number: CN201910938376.XA
Authority: CN
Inventors: 雷春林; 余智勇
Original assignee: Sichuan Aibang Weiye Bioengineering Co Ltd
Current assignee: Sichuan Aibang Weiye Bioengineering Co Ltd
Priority date: 2019-09-29
Filing date: 2019-09-29
Publication date: 2020-01-03

Abstract

本发明公开了一种以复合菌种发酵制备改良常青散的制备方法，包括以下步骤：配制中药粉剂，再复配其它原料制备发酵培养基，对复合菌种进行发酵，即得到改良常青散。本发明的有益效果为：将生物菌发酵技术应用到中药应用中，分解纤维素，让有效成分易于溶出，同时药物有效成分变成小分子更易被吸收，更易到达靶器官发挥作用，提高了中药的药效和生物利用度。凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌存在协同作用，而且均能产酸共同促进常青散中纤维素的降解，大幅提升有效成分的含量，提高常青散的疗效，三种菌共同发酵，大幅提升了常青散药效，解决了原来纯中药难于治疗的疾病，带来了丰厚的经济效益，更适应市场需求。

Description

一种以复合菌种发酵制备改良常青散的制备方法

技术领域

本发明涉及饲料添加剂发酵生产技术领域，具体涉及一种以复合菌种发酵制备改良常青散的制备方法。

背景技术

常青散主要由常山、青蒿、苦参、仙鹤草、黄芪等中药组成，这几种中药都是植物性药材，富含纤维素，尤其是常山，主要成分常山酮均镶嵌在纤维素中，而且禽类消化系统无法充分消化纤维素，常山中的常山酮难于溶出，而常山酮又是治疗禽球虫的有效成分，这样造成中药中的有效成分难于利用，严重影响常青散的药效。

发明内容

本发明的目的就是针对上述现有技术中的缺陷，提供了一种以复合菌种发酵制备改良常青散的制备方法。

为了实现上述目的，本发明提供的技术方案为：一种以复合菌种发酵制备改良常青散的制备方法，包括如下步骤：

1）按照重量份计取黄芪1～50份、常山1～50份、青蒿1～50份、仙鹤草1～50份、苦参1～50份；水洗后烘干，粉碎至细度为40-80目，得到中药粉剂；

2）采用复合菌种固态发酵菌种进行发酵，采用的复合菌种固态发酵菌种分别为：CGMCC保藏号为1.6576的凝结芽孢杆菌、CGMCC保藏号为1.8801的枯草芽孢杆菌和CGMCC保藏号为1.3450的解淀粉芽孢杆菌；

3）使用菌种培养基分别对凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌进行培养，分别获得凝结芽孢杆菌原菌液、枯草芽孢杆菌原菌液和解淀粉芽孢杆菌原菌液；然后将提纯后的凝结芽孢杆菌原菌液、枯草芽孢杆菌原菌液和解淀粉芽孢杆菌原菌液4%从斜面接入三角瓶中，振荡培养45-50小时；

4）取糖蜜、磷酸二氢钾、氯化钠、黄腐酸、豆粕和步骤1）得到的中药粉剂制作发酵培养基，各组分加入量按照重量百分比计为糖蜜4%、磷酸二氢钾0.3%、氯化钠0.5%、黄腐酸0.5%、豆粕8%、中药粉剂45%，余量为水；

5）将步骤4）获得的发酵培养基加热至35℃时接种，将步骤3）振荡培养后得到的凝结芽孢杆菌原菌液、枯草芽孢杆菌原菌液和解淀粉芽孢杆菌原菌液分别接种到发酵培养基中，总接种量为4%；

6）采用好氧发酵，温度35℃，发酵时间48～72小时，当PH值达到5.0时完成发酵，发酵完成以后晒干，即得所述的改良常青散。

进一步的，上述一种以复合菌种发酵制备改良常青散的制备方法，所述步骤1）的中药粉剂中，按照重量份计取黄芪50份、常山50份、青蒿50份、仙鹤草50份、苦参50份。

进一步的，上述一种以复合菌种发酵制备改良常青散的制备方法，所述步骤1）的中药粉剂中，按照重量份计取黄芪50份、常山20份、青蒿30份、仙鹤草20份、苦参50份。

进一步的，上述一种以复合菌种发酵制备改良常青散的制备方法，所述步骤3）的菌种培养基配比，各组分加入量按照重量百分比计为糖蜜5%、磷酸二氢钾0.5%、氯化钠0.6%、黄腐酸0.4%、豆粕10%、中药粉剂50%，余量为水；

进一步的，上述一种以复合菌种发酵制备改良常青散的制备方法，所述步骤4）中，发酵培养基的各组分加入量按照重量百分比计为糖蜜4%、磷酸二氢钾0.35%、氯化钠0.5%、黄腐酸0.5%、豆粕7.5%、中药粉剂45%，余量为水。

进一步的，上述一种以复合菌种发酵制备改良常青散的制备方法，所述步骤5）中，凝结芽孢杆菌原菌液、枯草芽孢杆菌原菌液、解淀粉芽孢杆菌原菌液的接种比例为：1：1：1。

本发明的有益效果为：本发明将现代生物工程技术与传统的中药制剂方法相结合，将生物菌发酵技术应用到中药应用中，分解纤维素，让有效成分易于溶出，同时药物有效成分变成小分子更易被吸收，更易到达靶器官发挥作用，从而提高了中药的药效和生物利用度。应用益生菌发酵生产的中药制剂中，不仅含有中药有效作用的生理活性成分，而且还富含有菌种和基质在发酵制备过程中产生的多种抗菌肽、丰富的有机酸及多种有益的氨基酸。这些成分组分合理，极易被机体吸收和利用。同时微生物在繁殖过程中加入了中药，对微生物进行了定向筛选，让微生物及其副产物表达出一部分中药的特性。凝结芽孢杆菌是兼性厌氧菌，能够产生的L-乳酸能降低肠道pH 值，抑制有害菌，并能促进双歧杆菌等有益菌的生长和繁殖，治疗因肠道菌群失调引起的急、慢性腹泻、慢性便秘、腹胀和消化不良等症。枯草芽孢杆菌能够有效抑制致病菌，促进有益厌氧菌生长，并产生乳酸等有机酸类，降低肠道PH值，间接抑制其它致病菌生长，提高免疫球蛋白和抗体水平，增强细胞免疫和体液免疫功能，提高群体免疫力。解淀粉芽孢杆菌在繁殖过程中产生大量的淀粉酶，纤维素酶，迅速分解了大量的纤维素，不但为机体提供了大量的能量，而且也快速释放了中药中的有效成分；这三种菌，凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌存在协同作用，而且均能产酸共同促进常青散中纤维素的降解，大幅提升有效成分的含量，提高常青散的疗效，三种菌共同发酵常青散大幅常青散提升了药效，解决了原来纯中药难于治疗的疾病，带来了丰厚的经济效益，更适应市场需求。

具体实施方式

本发明，所述的各种菌的原菌种，均从农业微生物菌种保藏管理中心（ACCC）引进。确保了各菌种的存活和质量。

实施例1：

一种以复合菌种发酵制备改良常青散的制备方法，包括如下步骤：

1）按照重量计取黄芪50kg、常山50kg、青蒿50kg、仙鹤草50kg、苦参50kg；水洗后烘干，粉碎至细度为40目，得到中药粉剂；

3）使用菌种培养基分别对凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌进行培养，分别获得凝结芽孢杆菌原菌液、枯草芽孢杆菌原菌液和解淀粉芽孢杆菌原菌液；然后将提纯后的凝结芽孢杆菌原菌液、枯草芽孢杆菌原菌液和解淀粉芽孢杆菌原菌液4%从斜面接入三角瓶中，振荡培养45小时；菌种培养基配比，发酵培养基的各组分加入量按照重量百分比计为糖蜜4%、磷酸二氢钾0.35%、氯化钠0.5%、黄腐酸0.5%、豆粕7.5%、中药粉剂45%，余量为水。

4）取糖蜜、磷酸二氢钾、氯化钠、黄腐酸、豆粕和步骤1）得到的中药粉剂制作发酵培养基，各组分加入量按照重量百分比计为糖蜜3%、磷酸二氢钾0.2%、氯化钠0.4%、黄腐酸0.4%、豆粕5%、中药粉剂40%，余量为水；

5）将步骤4）获得的发酵培养基加热至35℃时接种，将步骤3）振荡培养后得到的凝结芽孢杆菌原菌液、枯草芽孢杆菌原菌液和解淀粉芽孢杆菌原菌液分别接种到发酵培养基中，总接种量为4%；凝结芽孢杆菌原菌液、枯草芽孢杆菌原菌液、解淀粉芽孢杆菌原菌液的接种比例为：1：1：1；

6）采用好氧发酵，温度35℃，发酵时间48小时，当PH值达到5.0时完成发酵，发酵完成以后晒干，即得所述的改良常青散。

实施例2：

1）按照重量计取黄芪50kg、常山20kg、青蒿30kg、仙鹤草20kg、苦参50kg；水洗后烘干，粉碎至细度为80目，得到中药粉剂；

3）使用菌种培养基分别对凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌进行培养，分别获得凝结芽孢杆菌原菌液、枯草芽孢杆菌原菌液和解淀粉芽孢杆菌原菌液；然后将提纯后的凝结芽孢杆菌原菌液、枯草芽孢杆菌原菌液和解淀粉芽孢杆菌原菌液4%从斜面接入三角瓶中，振荡培养50小时；菌种培养基配比，各组分加入量按照重量百分比计为糖蜜5%、磷酸二氢钾0.5%、氯化钠0.6%、黄腐酸0.4%、豆粕10%、中药粉剂50%，余量为水。

4）取糖蜜、磷酸二氢钾、氯化钠、黄腐酸、豆粕和步骤1）得到的中药粉剂制作发酵培养基，发酵培养基的各组分加入量按照重量百分比计为糖蜜4%、磷酸二氢钾0.35%、氯化钠0.5%、黄腐酸0.5%、豆粕7.5%、中药粉剂45%，余量为水；

6）采用好氧发酵，温度35℃，发酵时间72小时，当PH值达到5.0时完成发酵，发酵完成以后晒干，即得所述的改良常青散。

实施例3：

1）按照重量计取黄芪50kg、常山20kg、青蒿30kg、仙鹤草20kg、苦参50kg；水洗后烘干，粉碎至细度为60目，得到中药粉剂；

3）使用菌种培养基分别对凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌进行培养，分别获得凝结芽孢杆菌原菌液、枯草芽孢杆菌原菌液和解淀粉芽孢杆菌原菌液；然后将提纯后的凝结芽孢杆菌原菌液、枯草芽孢杆菌原菌液和解淀粉芽孢杆菌原菌液4%从斜面接入三角瓶中，振荡培养48小时；菌种培养基配比，各组分加入量按照重量百分比计为糖蜜4%、磷酸二氢钾0.4%、氯化钠0.5%、黄腐酸0.5%、豆粕7.5%、中药粉剂45%，余量为水

4）取糖蜜、磷酸二氢钾、氯化钠、黄腐酸、豆粕和步骤1）得到的中药粉剂制作发酵培养基，各组分加入量按照重量百分比计为糖蜜5%、磷酸二氢钾0.45%、氯化钠0.4%、黄腐酸0.4%、豆粕10%、中药粉剂50%，余量为水；

6）采用好氧发酵，温度35℃，发酵时间60小时，当PH值达到5.0时完成发酵，发酵完成以后晒干，即得所述的改良常青散。

实施例4：

应用具体案例1：

2018年10月，绵阳市方水镇张某养殖肉鸡4000只，13龄，鸡体消瘦，采食量下降，有血便。问诊时，该养殖户说鸡群得了球虫病。

取本发明实施例1制备的改良常青散1000克拌料500斤，连用3天，3天后鸡群恢复正常，采食量迅速上升，粪便颜色变黑，血便消失，鸡群恢复正常。

应用具体案例2：2018年6月，绵阳市塔水镇张某饲养了3000只蛋鸡，常规饲养．按正常的免疫程序进行免疫。7月龄时，鸡群突然出现采食量下降，同时出现血便，经过兽医诊断鸡群得了球虫病，产蛋率迅速下降。

取本发明实施例1制备的改良常青散1000克拌料500斤，配合维生素和甜菜碱饮水。5天后鸡群粪便恢复正常，采食量迅速上升，10天后产蛋率已逐步回升到93%。

应用具体案例3：2017年8月，绵阳市清泉镇李某养殖肉鸡3000只，25龄，鸡群采食量下降，有血便。经兽医诊断鸡群得了盲肠球虫病。

取本发明实施例1制备的改良常青散1000克拌料500斤，连用4天，4天后鸡群恢复正常，采食量迅速上升，粪便颜色变黑，血便消失，鸡群恢复正常。

最后应说明的是：以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims

1.一种以复合菌种发酵制备改良常青散的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

1)按照重量份计取黄芪1～50份、常山1～50份、青蒿1～50份、仙鹤草1～50份、苦参1～50份；水洗后烘干，粉碎至细度为40-80目，得到中药粉剂；

2)采用复合菌种固态发酵菌种进行发酵，采用的复合菌种固态发酵菌种分别为：CGMCC保藏号为1.6576的凝结芽孢杆菌、CGMCC保藏号为1.8801的枯草芽孢杆菌和CGMCC保藏号为1.3450的解淀粉芽孢杆菌；

3)使用菌种培养基分别对凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌进行培养，分别获得凝结芽孢杆菌原菌液、枯草芽孢杆菌原菌液和解淀粉芽孢杆菌原菌液；然后将提纯后的凝结芽孢杆菌原菌液、枯草芽孢杆菌原菌液和解淀粉芽孢杆菌原菌液以接种量4％从斜面接入三角瓶中，振荡培养45-50小时；

4)取糖蜜、磷酸二氢钾、氯化钠、黄腐酸、豆粕和步骤1)得到的中药粉剂制作发酵培养基，各组分加入量按照重量百分比计为糖蜜3～5％、磷酸二氢钾0.2～0.5％、氯化钠0.4～0.6％、黄腐酸0.4～0.6％、豆粕5～10％、中药粉剂40～50％，余量为水；

5)将步骤4)获得的发酵培养基加热至35℃时接种，将步骤3)振荡培养后得到的凝结芽孢杆菌原菌液、枯草芽孢杆菌原菌液和解淀粉芽孢杆菌原菌液分别接种到发酵培养基中，总接种量为4％；

6)采用好氧发酵，温度35℃，发酵时间48～72小时，当PH值达到5.0时完成发酵，发酵完成以后晒干，即得所述的改良常青散。

2.根据权利要求1所述的一种以复合菌种发酵制备改良常青散的制备方法，其特征在于，所述步骤1)的中药粉剂中，按照重量份计取黄芪50份、常山50份、青蒿50份、仙鹤草50份、苦参50份。

3.根据权利要求1所述的一种以复合菌种发酵制备改良常青散的制备方法，其特征在于，所述步骤1)的中药粉剂中，按照重量份计取黄芪50份、常山20份、青蒿30份、仙鹤草20份、苦参50份。

4.根据权利要求1所述的一种以复合菌种发酵制备改良常青散的制备方法，其特征在于，所述步骤3)的菌种培养基配比，各组分加入量按照重量百分比计为糖蜜3％、磷酸二氢钾0.2％、氯化钠0.4％、黄腐酸0.4％、豆粕5％、中药粉剂40％，余量为水。

5.根据权利要求1所述的一种以复合菌种发酵制备改良常青散的制备方法，其特征在于，所述步骤4)中，发酵培养基的各组分加入量按照重量百分比计为糖蜜4％、磷酸二氢钾0.35％、氯化钠0.5％、黄腐酸0.5％、豆粕7.5％、中药粉剂45％，余量为水。

6.根据权利要求1所述的一种以复合菌发酵制备改良益母健的制备方法，其特征在于，所述步骤5)中，凝结芽孢杆菌原菌液、枯草芽孢杆菌原菌液、解淀粉芽孢杆菌原菌液的接种比例为：1：1：1。