CN110638739A - 一种蓝绿藻提取物的制备方法与应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种蓝绿藻提取物的制备方法及其在化妆品中的应用。本发明公开的蓝绿藻提取物制备方法包括如下步骤：将蓝绿藻干粉和水混合得到初始体系，对所述初始体系进行水浴提取，然后对提取液进行醇沉。本发明利用水浴提取法从蓝绿藻制备提取物，操作简单，提取率高，制备得到的蓝绿藻提取物具有保湿、清除自由基、抗衰老的功效。
Description
技术领域
本发明属于化学领域，具体涉及一种蓝绿藻提取物的制备方法与应用。
背景技术
蓝绿藻是一种全球广泛存在的原核生物,没有细胞核及细胞器,在以内囊体形式存在的色素区内，可进行光合作用，以无性方式繁殖。
当前，蓝绿藻大量繁殖是引起水体富营养化的主要因素。处理蓝绿藻最直接的方式就是打捞，但是此种处理方法不仅占用大量土地，藻体在死亡腐败过程中产生的毒素对周围环境还会产生危害。
近年来，蓝绿藻资源化成为了研究热点之一。
本领域对于如何对蓝绿藻进行有效利用仍存在需求。
发明内容
本发明的目的是提供一种蓝绿藻提取物的制备方法与应用，该方法利用水浴提取法从蓝绿藻中进行提取，操作简单，提取率高，制备得到的蓝绿藻提取物具有保湿、清除自由基、提高谷胱甘肽过氧化酶和超氧化物岐化酶活性的能力。
本发明提供了一种蓝绿藻提取物的制备方法，其包括如下步骤：将蓝绿藻干粉和水混合得到初始体系，对初始体系进行水浴提取，然后对提取液进行醇沉。
本发明还提供了蓝绿藻提取物，其根据上述方法制备得到。
本发明还提供了通过上述方法制备的蓝绿藻提取物在制备具有下述1)-4)中至少一种功能的化妆品中的应用或在直接作为具有下述1)-4)中至少一种功能的化妆品中的应用：
1)清除DPPH自由基；
2)清除羟自由基；
3)抗衰老；以及
4)保湿。
本发明具有如下有益效果：
(1)本发明提供的蓝绿藻提取物制备方法采用水浴提取，通过选择合适的提取温度和提取时间，从蓝绿藻中获得蓝绿藻提取物。一方面，可最大程度将蓝绿藻资源进行废物利用，解决蓝绿藻废物处理问题的同时获得有益的成分。另一方面，此法提取得到的蓝绿藻提取物具有抗衰老、保湿作用，提取方法简单，提取效率高，不仅节约生产成本，而且最大化地简化了生产步骤，使该方法在充分保障成分稳定性的同时能够实现工业化提取。
(2)本发明制备的蓝绿藻提取物，具有较强的抗氧化能力，可清除DPPH自由基和羟自由基，提高机体生命力，从而延缓细胞老化，具有抗衰老的功效。
(3)本发明制备的蓝绿藻提取物能够减缓皮肤水分流失速度、增加皮肤锁水能力，从而达到皮肤保湿的功效。
附图说明
图1为根据本发明制备的蓝绿藻提取物对DPPH自由基清除率的关系曲线。
图2为根据本发明制备的蓝绿藻提取物对羟自由基清除率的关系曲线。
图3示出了根据本发明制备的蓝绿藻提取物对皮肤水分流失的影响。
具体实施方式
在以下的说明中，包括某些具体的细节以对各个公开的实施方案提供全面的理解。然而，相关领域的技术人员会认识到，不采用一个或多个这些具体的细节，而采用其它方法、部件、材料等的情况下可实现实施方案。
本发明提供了一种蓝绿藻提取物的制备方法，其包括如下步骤：将蓝绿藻干粉和水混合得到初始体系，对初始体系进行水浴提取，然后对提取液进行醇沉。
在某些实施方案中，蓝绿藻干粉和水的比例为(5～15g)：(100～300mL)。在某些优选的实施方案中，蓝绿藻干粉和水的比例为(8～12g)：(150～250mL)。在某些更优选的实施方案中，蓝绿藻干粉和水的比例为(9～11g)：(180～220mL)。
在某些实施方案中，水浴提取的提取温度为75～95℃，提取时间为4～8h。在某些优选的实施方案中，提取温度为80～90℃，提取时间为5～7h。在某些更优选的实施方案中，提取温度为85℃，提取时间为6h。
在某些实施方案中，水浴摇床转速为150～200rpm。在某些优选的实施方案中，水浴摇床转速为170～190rpm。在某些更优选的实施方案中，水浴摇床转速为180rpm。
在某些实施方案中，蓝绿藻来自水华湖面，经烘箱烘干后由粉碎机粉碎得到蓝绿藻干粉。
在某些实施方案中，醇沉条件如下：将提取液与乙醇以1:6～1:10的体积比混合，于1～8℃下静置8～15h。在某些优选的实施方案中，提取液与乙醇的体积比为1:7～1:9，静置时间为9～13h，静置温度为2～6℃。在某些更优选的实施方案中，提取液与乙醇的体积比为1:8，静置时间为12h，静置温度为4℃。
在某些实施方案中，制备方法还包括在醇沉之后对提取液依次进行离心、弃上清液的步骤。
在某些优选的实施方案中，离心条件如下：离心转速为3500～5500r/min，离心时间为5～15min，离心半径为4～14cm。在某些更优选的实施方案中，离心转速为4000～5000r/min，离心时间为8～12min，离心半径为7～11cm。在某些进一步优选的实施方案中，离心转速为4500r/min，离心时间为10min，离心半径为9cm。
本发明还提供了蓝绿藻提取物，其根据上述方法制备得到。
本发明还提供了通过上述方法制备的蓝绿藻提取物在制备具有下述1)-4)中至少一种功能的化妆品中的应用：
1)清除DPPH自由基；
2)清除羟自由基；
3)抗衰老；以及
4)保湿。
本发明还提供了通过上述方法制备的蓝绿藻提取物在直接作为具有下述1)-4)中至少一种功能的化妆品中的应用：
1)清除DPPH自由基；
2)清除羟自由基；
3)抗衰老；以及
4)保湿。
在某些实施方案中，化妆品包括但不限于：面膜、精华液和爽肤水。
下文中，本发明将通过如下实施例进行详细解释以便更好地理解本发明的各个方面及其优点。然而，应当理解，以下的实施例是非限制性的而且仅用于说明本发明的某些实施方案。
下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。
下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
实施例1、蓝绿藻提取物制备
按照如下步骤提取蓝绿藻提取物：
(1)将10g蓝绿藻干粉和200mL水混合；
(2)将上述混合物于85℃水浴摇床中提取6小时，水浴摇床转速为180rpm，得到蓝藻提取液；
(3)将上述提取液与乙醇以1:8的体积比混合，于4℃静置沉淀12h。将产物在4500r/min、离心半径为9cm的条件下离心10min，弃上清液，收集沉淀，即得蓝绿藻提取物，呈淡黄色固体。
对该蓝绿藻提取物的提取率进行测定。
提取物提取率(％)＝提取物重量/蓝绿藻总重量×100％
本发明制得的蓝绿藻提取物提取率为69.51％。
实施例2、DPPH自由基清除实验
DPPH是一种早期合成的有机自由基，常用来评估抗氧化物的供氢能力，它在有机溶剂中非常稳定，呈紫色，而且在517nm处有一个特征吸收峰，当遇到自由基清除剂时，DPPH的孤对电子被配对而使其退色，也就是在最大吸收波长处的吸光值变小。因此，可通过测定吸光值的变化来评价样品对DPPH自由基的清除效果。
取不同量的实施例1制备得到的蓝绿藻提取物溶于去离子水中，制得浓度为0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mg/mL的一系列蓝绿藻提取物待测液。
DPPH自由基清除实验的具体实验步骤为：
(1)取等体积(3mL)的待测液与2×10-4mol/L的DPPH溶液混匀(A1管)；
(2)取等体积的无水乙醇(待测物溶剂)与2×10-4mol/L的DPPH溶液混匀(A2管)；
(3)取等体积的无水乙醇与待测液混匀(A3管)；
(4)反应30min后，在517nm下测A1、A2、A3管吸光度值。
清除率计算公式为：清除率(％)＝[(A2+A3)-A1]/A2 (1)
以蓝绿藻提取物待测液的质量浓度为横坐标，清除率为纵坐标，制作蓝绿藻提取物对DPPH自由基清除作用曲线，结果见图1。
由图1可知，实施例1所得蓝绿藻提取物为1mg/mL时其对DPPH自由基清除率达87.65％，0.293mg/mL的蓝绿藻提取物可清除50％的DPPH自由基。说明蓝绿藻提取物具有很强的抗氧化能力，可清除自由基，促进细胞代谢，增强细胞活力，改善机体的结构和功能，提高机体生命力，从而延缓细胞老化，发挥其抗衰老的作用。
实施例3、羟自由基清除实验
根据如下步骤进行羟自由基清除实验：
(1)在25ml比色管中加入2mmol/L FeSO4 3ml、1mmol/L H2O2 3ml，摇匀；其中H2O2是最后加入并启动整个反应；
(2)接着加入6mmol/L水杨酸3ml，摇匀；
(3)于37℃水浴加热15min后取出，测其吸光度A0；
(4)然后分别加入一定浓度的待测液0.2ml、0.4ml、0.6ml、0.8ml、1.0ml；
(5)然后再分别加入蒸馏水0.8ml、0.6ml、0.4ml、0.2ml、0ml，摇匀，继续水浴加热15min，取出测其吸光度AX；
(6)为消除后加的共1.0ml待测液和蒸馏水所造成的体系吸光度值的降低，方法同上，恒温15min后测其吸光度值A00，加1ml蒸馏水，摇匀后再测一次其吸光度AXX，A降低＝A00－AXX。
结果见图2。从图2可以看出，本发明得到的蓝绿藻提取物对羟自由基有一定的清除作用，随蓝绿藻提取物浓度增大，其清除羟自由基的能力逐渐增强，表明蓝绿藻提取物清除羟自由基的能力与其浓度有显著的量效关系。1mg/mL蓝绿藻提取物能够清除35.82％羟自由基。
实施例4、TEWL法测定蓝绿藻提取物保湿功效
TEWL值不能直接表示角质层的水分含量，而是表明角质层水分散失的情况，表征角质层屏障的功能，是评价角质层状态的重要参数。
测试仪器型号及来源：德国CK公司，CK850。
测试方法：选择好测试时间，将筒状探头垂直置于被测皮肤上20s，测定值稳定后才可读取数据，仪器自动采集TEWL数据并按时间顺序显示出来，成为一条TEWL时间曲线。仪器可自动显示皮肤水分流失的TEWL数值、曲线、平均值和标准偏差，可取数次不同的测定时间测试数值的平均值为最终结果。结果见图3。
由图3可以看到：随着时间的增加，未添加蓝绿藻提取物(去离子水)受试者的受试区域的TEWL值无明显变化，添加2％蓝绿藻提取物组(溶剂为去离子水)的水分流失速度逐渐下降，证实蓝绿藻提取物具有一定保湿功效。
从前述中可以理解，尽管为了示例性说明的目的描述了本申请的具体实施方案，但是在不偏离本申请的精神和范围的条件下，本领域所述技术人员可以作出各种变形或改进。这些变形或修改都应落入本申请所附权利要求的范围。
Claims (10)
1.一种蓝绿藻提取物的制备方法，其包括如下步骤：将蓝绿藻干粉和水混合得到初始体系，对所述初始体系进行水浴提取，然后对提取液进行醇沉。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述初始体系中，所述蓝绿藻干粉和水的比例为(5～15g)：(100～300mL)，优选(8～12g)：(150～250mL)，更优选(9～11g)：(180～220mL)。
3.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于：所述水浴提取的温度为75～95℃，优选80～90℃，更优选85℃，时间为4～8h，优选5～7h，更优选6h。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的制备方法，其特征在于：水浴摇床转速为150～200rpm，优选170～190rpm，更优选180rpm。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的制备方法，其特征在于：醇沉时将所述提取液与乙醇以1:6～1:10、优选1:7～1:9、更优选1:8的体积比混合，于1～8℃、优选2～6℃、更优选4℃下静置8～15h、优选9～13h、更优选12h。
6.根据权利要求1-5中任一项所述的制备方法，其特征在于：在所述醇沉之后，还包括对提取液依次进行离心、弃上清液的步骤。
7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于：
所述离心的条件如下：离心转速为3500～5500r/min、优选4000～5000r/min、更优选4500r/min，离心时间为5～15min、优选8～12min、更优选10min，离心半径为4～14cm、优选7～11cm、更优选9cm。
8.一种蓝绿藻提取物，其根据权利要求1-7中任一项所述的方法制备得到。
9.权利要求8所述的蓝绿藻提取物在制备具有下述1)-4)中至少一种功能的化妆品中的应用：
1)清除DPPH自由基；
2)清除羟自由基；
3)抗衰老；以及
4)保湿。
10.权利要求8所述的蓝绿藻提取物在直接作为具有下述1)-4)中至少一种功能的化妆品中的应用：
1)清除DPPH自由基；
2)清除羟自由基；
3)抗衰老；以及
4)保湿。
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| CN101822630A (zh) * | 2010-03-24 | 2010-09-08 | 湖南炎帝生物工程有限公司 | 葛仙米提取物及其在化妆品中的应用 |
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2019
- 2019-09-26 CN CN201910918441.2A patent/CN110638739A/zh active Pending
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