CN113069409B - 一种基于适应原调节上皮免疫微环境稳定的修护精华及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种基于适应原调节上皮免疫微环境稳定的修护精华及其制备方法，所述修护精华按照质量分数包括以下组分：β‑葡聚糖0.01‑1％，酵母菌溶胞物1‑20％，有机龙舌兰提取物1‑20％，四氢甲基嘧啶羧酸0.2‑5％，松茸提取物0.3‑10％，蓝绿藻提取物0.5‑10％，水解蜂王浆蛋白0.5‑5％，保湿剂1.6‑8.8％，防腐剂0.15‑1.2％，余量为水。本发明提供的修护精华基于生物体的免疫调节系统，促进成纤维细胞的增殖和细胞外基质的生产，并且抑制MMP‑1基质金属蛋白酶的表达，从而调节皮肤的免疫自稳和免疫防御能力，恢复皮肤组织免疫内外环境相对稳定，实现皮肤炎性症状快速缓解和修护。

Description

一种基于适应原调节上皮免疫微环境稳定的修护精华及其制备方法

技术领域

本发明涉及化妆品技术领域，具体涉及一种基于适应原调节上皮免疫微环境稳定的修护精华及其制备方法。

背景技术

在西方医学体系中，几乎所有的皮肤炎症都被统称为湿疹；湿疹被定义为“由多种内外因素引起的一种具有明显渗出倾向的炎症性皮肤病”，是一种表皮和真皮浅层慢性的、瘙痒的炎性皮肤疾病，具有一定的遗传倾向，与皮肤对环境的超敏反应和自身免疫异常有关。湿疹主要引起皮肤屏障的损伤的恶性循环，如：角质层薄，失水率增加，皮肤容易干燥，丝聚蛋白异常或者基因缺失，角质层结构松散，皮肤屏障渗透性增高，板层小体合成脂质比例失衡等。湿疹不仅仅局限于肌肤炎症的表现，同时也是Th1细胞和Th2细胞驱动的免疫系统性疾病，基于免疫系统功能的调节平衡对湿疹或皮炎的管理和控制有着积极地帮助。

现有的针对皮肤炎性症状(俗称皮炎或湿疹)的有效治疗方案主要是激素干预和其他免疫抑制剂干预。比如激素和他克莫司类属于免疫干预，是单一的负反馈机制，容易导致皮肤的防御系统变得脆弱，不具有可持续性，且副作用较多，例如：多毛，皮肤萎缩，水肿，干扰内分泌以及病原体持续感染，久治不愈或者反复等。且激素和其他免疫抑制剂均有抑制细胞的新生和细胞外基质的生成的作用，会严重的干扰细胞微环境和细胞的稳态，使生物学效应减弱，加重细菌感染，临床上外部使用治疗效果不理想或者基本无效。此外还有单一因素的中和调理炎性介质，因生物通路单一而无法快速改变症状。

发明内容

针对上述问题，本发明提供一种基于适应原调节上皮免疫微环境稳定的修护精华，针对生物体的免疫调节系统，选用天然生物产生的适应原进行调节，提高皮肤自身的免疫应答从而维持皮肤稳定性。

所述修护精华按照质量分数包括以下组分：β-葡聚糖0.01-1％，酵母菌溶胞物1-20％，有机龙舌兰提取物1-20％，四氢甲基嘧啶羧酸0.2-5％，松茸提取物0.3-10％，蓝绿藻提取物0.5-10％，水解蜂王浆蛋白0.5-5％，保湿剂1.6-8.8％，防腐剂0.15-1.2％，余量为水。

进一步地，所述保湿剂为甘油、全谱透明质酸钠和肌醇。更进一步地，所述甘油的质量分数为1-5％，所述全谱透明质酸钠的质量分数为0.1-0.8％，所述肌醇的质量分数为0.5-3％。

进一步地，所述防腐剂为葡糖酸内脂和苯甲酸钠。更进一步地，所述葡糖酸内脂的质量分数为0.1-1％，所述苯甲酸钠的质量分数为0.05-0.2％。

进一步地，所述修护精华按照质量分数包括以下组分：β-葡聚糖0.2-0.8％，酵母菌溶胞物5-15％，有机龙舌兰提取物1-20％，四氢甲基嘧啶羧酸0.2-5％，松茸提取物0.3-10％，蓝绿藻提取物0.5-10％，水解蜂王浆蛋白0.5-5％，保湿剂1.6-8.8％，防腐剂0.15-1.2％，余量为水。

进一步地，所述修护精华按照质量分数包括以下组分：β-葡聚糖0.01-1％，酵母菌溶胞物1-20％，有机龙舌兰提取物5-15％，四氢甲基嘧啶羧酸0.2-5％，松茸提取物0.3-10％，蓝绿藻提取物0.5-10％，水解蜂王浆蛋白0.5-5％，保湿剂1.6-8.8％，防腐剂0.15-1.2％，余量为水。

进一步地，所述修护精华按照质量分数包括以下组分：β-葡聚糖0.01-1％，酵母菌溶胞物1-20％，有机龙舌兰提取物1-20％，四氢甲基嘧啶羧酸1-4％，松茸提取物0.3-10％，蓝绿藻提取物0.5-10％，水解蜂王浆蛋白0.5-5％，保湿剂1.6-8.8％，防腐剂0.15-1.2％，余量为水。

进一步地，所述修护精华按照质量分数包括以下组分：β-葡聚糖0.01-1％，酵母菌溶胞物1-20％，有机龙舌兰提取物1-20％，四氢甲基嘧啶羧酸0.2-5％，松茸提取物2-8％，蓝绿藻提取物2-8％，水解蜂王浆蛋白0.5-5％，保湿剂1.6-8.8％，防腐剂0.15-1.2％，余量为水。

本发明还提供一种基于适应原调节上皮免疫微环境稳定的修护精华的制备方法，包括以下步骤：

按照质量份，获取β-葡聚糖0.01-1份，酵母菌溶胞物1-20份，有机龙舌兰提取物1-20份，四氢甲基嘧啶羧酸0.2-5份，松茸提取物0.3-10份，蓝绿藻提取物0.5-10份，水解蜂王浆蛋白0.5-5份，保湿剂1.6-8.8份，防腐剂0.15-1.2份；加水滴定至100份，混合均匀得到所述修护精华。

本发明提供的修护精华基于生物体的免疫调节系统精细设计而成，具有多种因素参与，可以感知自身的免疫强度并实施自我调节，提高皮肤的免疫应答；含有以下一个或多个有益效果：

1.针对外在因素，如大气污染物质、烟草烟雾，化学刺激、物理刺激、紫外线压力，光辐射，病原体等的攻击，提高免疫细胞的吞噬能力与攻击力，抵抗病原体侵染；

2.构建完整的表皮动态，提高皮肤屏障功能，促进相关的所有因子生成：促进角质形成细胞的生成，增加细胞间的连接，有利于神经酰胺的生成，促进丝聚蛋白FLG和天然保湿因子的生成；

3.刺激成纤维细胞的生成，重建细胞外基质并为皮肤细胞提供结构支撑；

4.含有抗氧化的作用，中和内毒素，激活皮肤的抗氧化酶的防御系统，修复老化和清除老化受损的组织碎片。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1为实施例2提供的修护精华对NF-κB结合活性的抑制效果对比图。

图2为实施例2提供的修护精华对成纤维细胞的增殖效果对比图。

图3为实施例2提供的修护精华对成纤维细胞的迁移率效果在放大不同倍数下的对比图。

图4为实施例3提供的修护精华使用效果对比图。

图5为实施例4提供的修护精华使用效果对比图。

图6为实施例5提供的修护精华使用效果对比图。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

当皮肤出现炎症时，皮肤的微型结构混乱，细胞器功能丧失和受阻，受损的和衰老细胞碎片的堆积，导致皮肤表面的机会致病菌加重感染；这又会引起免疫响应，以修复为主的急性皮肤炎症变成以损伤为主的慢性皮肤炎症，将导致进一步的损伤与衰老的无休止恶性循环。此时稳定细胞内外环境，全面提高机体的耐受性以及提高抗炎相关因子的生成，从源头上抑制炎性瀑布效应，提高皮肤屏障功能至关重要。

本发明提供的技术方案启发自长期生活在恶劣环境下的天然生物；在极大的温差和极强的辐射下，天然生物会产生具有保护性的高浓度次生代谢物，也就是“适应原”。通过模仿天然生物对抗自然产生的免疫防御系统来对抗病原体和炎性，来保护细胞的稳定性。从健康细胞的微环境着手，减轻细胞内外的压力，提高细胞的能量，提供细胞外基质的生成。

本发明提供的一种基于适应原调节上皮免疫微环境稳定的修护精华，按照质量分数包括以下组分：β-葡聚糖0.01-1％，酵母菌溶胞物1-20％，有机龙舌兰提取物1-20％，四氢甲基嘧啶羧酸0.2-5％，松茸提取物0.3-10％，蓝绿藻提取物0.5-10％，水解蜂王浆蛋白0.5-5％，保湿剂1.6-8.8％，防腐剂0.15-1.2％，余量为水。

所述β-葡聚糖、酵母菌溶胞物和松茸提取物通过减少上皮型钙粘蛋白的降解来维持屏障功能，上皮型钙黏蛋白是具有黏着性质的跨膜蛋白，对于表皮细胞连接的形成和保持有重要作用。这是所有钙黏蛋白中人们了解最多的分子，在细胞黏着强度中发挥核心作用，因此对表皮的完整性有重大影响。

龙舌兰具有防御不受沙漠恶劣环境伤害的卓越功能，通过酶解技术使龙舌兰提取物成为一种对抗阳光和极端酷热环境的理想天然保护剂。酶能分解植物细胞壁成分，使其活性物质充分释放；酶解技术显著提高从植物中提取天然多酚、黄酮类、多糖、蛋白质和氨基酸等营养成分的效率。龙舌兰具有对极端温度变化的耐受性，不仅需要面对巨大的昼夜温差，还要面对匮乏水资源的极端干旱条件。因此，可以利用龙舌兰的天然防御机制，有效地湿润肌肤，缓解损伤，能稳定细胞膜，对抗刺激物对它的破坏，同时黄酮类物质和多酚与AHR蛋白受体结合后，AHR蛋白受体被激活。通过TGF-β信号途径和树突细胞胞因子的表达，促进调节性T细胞的增殖与分化。调节T性细胞增殖后，抑制效应细胞增殖和细胞因子的分泌。从而减少自身免疫异常，抑制炎性渗出倾向的问题肌肤的发生。

所述四氢甲基嘧啶羧酸来自于沙漠菌分泌的天然保护性类氨基酸物质，可以减少高渗刺激，防止细胞因为脱水而死亡，细胞非正常死亡也是一切皮肤问题的根源。外界应激对颗粒层中的角质形成细胞有很大影响。颗粒层中的角质形成细胞被称为“真正的角质层工厂”，因为角质形成细胞正是在这里产生天然保湿因子前体和神经酰胺等物质。同样是在这里，角质形成细胞经过角质化过程变为角质细胞。所有这些过程对于建立牢固的角质层都有重大意义。

松茸生活在高海拔的极寒山区，富含二氢槲皮素和松茸多糖，既有抗氧化的活性又有抵抗病原微生物的黏附，保护蛋白，防止皮肤水疱发生的作用。在伤口修复过程中，各类细胞的活动无法在干燥的环境中发挥作用，干燥的环境也影响和阻碍上皮细胞迁移和上皮化率。松茸提取物，如松茸多糖，可以间接提升皮肤屏障关键蛋白丝聚蛋白、外皮蛋白和兜甲蛋白表达和平衡板层小体合成脂质比例，酵母发酵胞滤物可以刺激表皮分化、脂质合成与分泌，提升敏感肌肤的表皮屏障修复功能，进而锁住水分。

蓝绿藻提能将空气中的氮转化成氨基酸和蛋白质的独特藻类，是地球上含有最多抗氧化剂的藻类，富含氨基酸和多糖、维他命和矿物质等生命元素。从蓝绿藻中提取得到的蓝绿藻提取物可以及时补充细胞所需的生命元素意义：给予细胞能量，保护细胞，拯救衰弱的细胞，修复糜烂渗出的皮肤。

所述保湿剂为甘油、全谱透明质酸钠和肌醇；所述甘油的质量分数为1-5％，所述全谱透明质酸钠的质量分数为0.1-0.8％，所述肌醇的质量分数为0.5-3％。

所述防腐剂为葡糖酸内脂和苯甲酸钠；所述葡糖酸内脂的质量分数为0.1-1％，所述苯甲酸钠的质量分数为0.05-0.2％。

基于上述原理，本发明提供的修护精华可以包括但不限于以下效果：

1.提高成纤维细胞的增殖；这些成纤维细胞能产生胶原蛋白、弹性蛋白和透明质酸。复原丢失的/损坏的组织，在修复过程和最终炎症问题的解决中起关键性作用。

2.促进细胞外基质生产；提高总胶原蛋白产量，透明质酸产量增加，提高弹性蛋白产量。细胞外基质参与具有能动作用，是组织增生、再生和修复所需的重要组分，同时也是炎性反应的调节者，能够帮助加速伤口愈合。

3.抑制MMP-1基质金属蛋白酶；减少表达破坏细胞外基质中分解胶原蛋白和蛋白聚糖的酶，MMP-1是一种参与破坏细胞外基质组分，在一般情况下表达相对较低，皮肤损伤和炎症会导致MMP-1的增加。

【实施例1】

本实施例提供一种基于适应原调节上皮免疫微环境稳定的修护精华的制备方法，包括以下步骤：

按照质量份，获取β-葡聚糖0.5份，酵母菌溶胞物10份，有机龙舌兰提取物10份，四氢甲基嘧啶羧酸2份，松茸提取物5份，蓝绿藻提取物5份，水解蜂王浆蛋白3份，保湿剂5份，防腐剂0.8份；加水滴定至100份，混合均匀得到所述修护精华。

【实施例2】

本实施例提供一种基于适应原调节上皮免疫微环境稳定的修护精华，所述修护精华由实施例1提供的制备方法制得；按质量占比包括以下组分：β-葡聚糖0.5％，酵母菌溶胞物10％，有机龙舌兰提取物10％，四氢甲基嘧啶羧酸2％，松茸提取物5％，蓝绿藻提取物5％，水解蜂王浆蛋白3％，保湿剂5％，防腐剂0.8％；余量为水。

参见图1，NF-κB是炎性转录因子，抑制NF-κB的活性可以阻断炎症反应路径，抑制炎症反应发生。很多因素会引起NF-κB的活化，比如过敏原，紫外线照射，自由基、非正常凋亡的细胞、病原体感染以及TNF-α、白介素-1β亚基等细胞因子。将本实施例提供的修护精华稀释至0.8mg/L、4.0mg/L、20.0mg/L，将上述不同浓度梯度的修护精华分别加入LPS诱导的RAW264.7细胞中孵育1h，提取核蛋白，通过电泳迁移率变动分析检测NF-κB与DNA的结合活性；其中，对照组为不做任何处理的RAW264.7细胞。从图中可以看到：细胞水平上，本实施例提供的修护精华可明显降低脂多糖诱导下的RAW264.7细胞NF-κB的活化，并随着修护精华浓度提高，NF-κB结合活性降低。

参见图2、图3，对成纤维细胞的增殖和迁移测试需要进行伤口愈合的体外模型-划痕试验，将所述体外模型在37℃的加湿空气中培养48h，通过测量人类真皮的成纤维细胞层在机械损伤时，成纤维细胞的增殖和迁移，定量和定性研究所述修护精华对创面愈合活动的影响。将所述修护精华稀释至1mg/L和10mg/L作为实验组；阴性对照组为1％抗生素的培养基。损伤区的细胞数量作为创面修护中成纤维细胞增殖和迁徙的标志。图2为实施例2提供的修护精华对成纤维细胞的增殖效果对比图。图3为实施例2提供的修护精华对成纤维细胞的迁移率效果在放大不同倍数下的对比图。可以明显观察到本实施例提供的修护精华能显著地增加成纤维细胞的增殖和迁移来填补划伤部位。

此外，本实施例提供的修护精华还展示出了清除自由基能力，即抗氧化能力。将所述修护精华稀释至100mg/L，作为实验组，对照组为100mg/L的维生素C和100mg/L的维生素E。实验方法如下：用邻苯三酚法来评价清除剂对超氧阴离子的清除效率；在过氧化氢的铜离子的存在下，通过测量芳香烃的比例，来确定清除羟基自由基的能力。检测结果如表1所示：

表1修护精华与维生素C和维生素E的自由基清除能力的实验结果

	超氧阴离子自由基淬灭率	羟基自由基淬灭率
			修护精华(100mg/L)	78％	81％
维生素C(100mg/L)	12％	19％
			维生素E(100mg/L)	50％	75％

由此可见，本实施例提供的修护精华抗氧化能力显著。

【实施例3】

本实施例提供一种基于适应原调节上皮免疫微环境稳定的修护精华，按质量占比包括以下组分：

β-葡聚糖0.2％，酵母菌溶胞物5％，有机龙舌兰提取物5％，四氢甲基嘧啶羧酸1％，松茸提取物2％，蓝绿藻提取物2％，水解蜂王浆蛋白1％，葡萄酸内脂0.1％，苯甲酸钠0.05％，甘油1％，全谱透明质酸钠0.1％，肌醇0.5％，余量为水。

参见图4，被试1为急性皮肤过敏，使用本实施例提供的修护精华，每天湿敷3次，10天的效果对比如图4所示；皮肤红肿和瘙痒得到明显改善。

【实施例4】

本实施例提供一种基于适应原调节上皮免疫微环境稳定的修护精华，按质量占比包括以下组分：

β-葡聚糖0.8％，酵母菌溶胞物15％，有机龙舌兰提取物15％，四氢甲基嘧啶羧酸4％，松茸提取物8％，蓝绿藻提取物8％，水解蜂王浆蛋白4％，葡萄酸内脂1％，苯甲酸钠0.2％，甘油5％，全谱透明质酸钠0.8％，肌醇3％，余量为水。

参见图5，被试2为螨虫过敏引起的超变态皮肤反应，使用本实施例提供的修护精华，每天湿敷3-5次，4天后的效果如图5所示；皮肤刺痛得到缓解，并且各类皮肤炎性症状得到修护。

【实施例5】

本实施例提供一种基于适应原调节上皮免疫微环境稳定的修护精华，按质量占比包括以下组分：

β-葡聚糖0.01-1％，酵母菌溶胞物1-20％，有机龙舌兰提取物1-20％，四氢甲基嘧啶羧酸0.2-5％，松茸提取物0.3-10％，蓝绿藻提取物0.5-10％，水解蜂王浆蛋白0.5-5％，葡萄酸内脂0.1-1％，苯甲酸钠0.05-0.2％，甘油1-5％，全谱透明质酸钠0.1-0.8％，肌醇0.5-3％，余量为水。

参见图6，被试3因长期使用激素药膏造成激素依赖性皮炎，使用本实施例提供的修护精华，第1周每天湿敷3-5次，第2周每天湿敷2-3次，第3周开始每天湿敷至少1次，25天的效果如图6所示；使用一周时效果已经十分明显，起皮结痂正是皮肤开始自我修复的信号，随着修护精华的持续使用，受损的表皮不断脱落，最终恢复健康稳定的皮肤组织。

最后应说明的是：以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的精神和范围。

Claims (2)

1.一种基于适应原调节上皮免疫微环境稳定的修护精华，其特征在于，按照质量分数包括以下组分：β-葡聚糖0.5％，酵母菌溶胞物10％，有机龙舌兰提取物10％，四氢甲基嘧啶羧酸2％，松茸提取物5％，蓝绿藻提取物5％，水解蜂王浆蛋白3％，保湿剂5％，防腐剂0.8％；余量为水。

2.一种基于适应原调节上皮免疫微环境稳定的修护精华的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

按照质量份，获取β-葡聚糖0.5％，酵母菌溶胞物10％，有机龙舌兰提取物10％，四氢甲基嘧啶羧酸2％，松茸提取物5％，蓝绿藻提取物5％，水解蜂王浆蛋白3％，保湿剂5％，防腐剂0.8％；加水滴定至100％，混合均匀得到如权利要求1所述的修护精华。

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