CN116672296B - 具有舒缓修护功效的复方植物提取物、其制备方法及应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了具有舒缓修护功效的复方植物提取物、其制备方法及应用，属于功能护肤品技术领域。本发明采用龙胆、野菊花、蒲公英、仙人掌和长角豆作为原料，经乙醇水溶液提取制备得到复方植物提取物，利用不同植物原料中的多种功能成分，有针对性的对抗炎症介质的释放、抑制炎症介质对正常细胞的伤害，同时减少皮肤水分散失、增强皮肤屏障功能，从而提升皮肤的自我保护能力、降低皮肤敏感程度，全方位多角度保护皮肤，在最快的时间内解除肌肤的异常状态。所述复方植物提取物可用于保湿水、保湿霜、保湿精华、保湿乳等多种舒缓修护护肤产品。

Description

具有舒缓修护功效的复方植物提取物、其制备方法及应用
技术领域
本发明属于功能护肤品技术领域，具体涉及具有舒缓修护功效的复方植物提取物、其制备方法及应用。
背景技术
皮肤作为人体抵御外界侵害的第一道保护层，具有保护、吸收与排泄、调节体温和感受外界刺激等作用，即皮肤具有特殊的屏障作用。广义上，皮肤屏障包括物理屏障、色素屏障、神经屏障以及免疫屏障等。狭义上，皮肤屏障主要指物理屏障，其由皮脂膜、角质层角蛋白、脂质、“三明治”结构、砖墙结构等共同构成，能有效抵御外界有害物对肌肤造成损伤，同时具有保湿及调节抗炎作用。
随着现代工业对环境的影响以及人们社会生活习惯的改变，导致人们出现不同程度的皮肤屏障损伤现象，过敏性皮肤病的发病率呈上升趋势。而当皮肤出现红斑、干燥、紧绷、灼热、瘙痒、刺痛等现象时，说明皮肤屏障功能已经受损，严重的屏障功能受损还会诱发多种皮肤病，如特应性皮炎、银屑病、湿疹等。
现阶段的护肤品中，大部分商家为了避免引起皮肤过敏，通常会加入抗敏剂来抑制炎症因子对皮肤造成损伤，其作用机理是：通过添加抗组胺类抗敏剂或者草本组合物切断过敏反应。肌肤屏障损伤并没有得到根本上得解决，有害物质仍然可以进入表皮层从而对肌肤造成损伤。
期刊文献（“复合植物提取物对皮肤刺激的舒缓作用研究”，周利丹等，《中国美容医学》，2022年11期）探讨了由苦参根、胀果甘草根、黄芩根制备而成的复合植物提取物对十二烷基硫酸钠刺激皮肤后的保护作用，结果显示复合植物提取物对十二烷基硫酸钠诱导的皮肤细胞刺激性反应具有明显的保护作用，其作用机制包括降低外界刺激对细胞活力和组织结构的损伤、减少细胞因子的分泌、修复皮肤屏障和缓解血管性出血反应。
专利（CN108434063A）公开了一种具有舒缓修复敏感肌肤功效的护肤组合物，所述组合物由植物提取物10%-20%，甜菜碱5%-10%，1,3-丙二醇20%-30%和水组成；所述的植物提取物包括野菊花提取物、铁皮石斛提取物、苦参提取物和芦荟提取物。将去离子水加热到70-90℃，加入甜菜碱、1,3-丙二醇搅拌溶解均匀；降温至45℃以下，加入植物提取物，搅拌溶解均匀，得到所述具有舒缓修复敏感肌肤功效的护肤组合物。所述组合物选用天然舒缓原料制成，应用于护肤品中能减少组胺释放，抑制透明质酸酶活性，修复皮肤屏障功能，降低护肤品的刺激性，具有温和、舒缓修复敏感肌肤的功效。
由以上现有技术可知，某些植物提取物具有抑制透明质酸酶活性或减少皮肤细胞刺激性反应的作用。但上述现有技术的植物提取物作用机制单一，主要通过抑制透明质酸酶的作用发挥功效，并不能多方位全面的修复皮肤。
因此，从消费者需求以及安全性等方面出发，有必要研发一款具有舒缓修护功效的复方植物提取物，可以舒缓修复肌肤屏障，应用在护肤品中，在对抗炎症介质的释放、抑制炎症介质对正常细胞的伤害作用的同时，减少皮肤水分散失、增强皮肤屏障功能，从而提升皮肤的自我保护能力、降低皮肤敏感程度，全方位保护皮肤。
发明内容
本发明针对现有技术存在的问题，提供了具有舒缓修护功效的复方植物提取物、其制备方法及应用。本发明采用龙胆、野菊花、蒲公英、仙人掌和长角豆作为原料，经乙醇水溶液提取制备得到复方植物提取物，利用不同植物原料中的多种功能成分，有针对性的对抗炎症介质的释放、抑制炎症介质对正常细胞的伤害，同时减少皮肤水分散失、增强皮肤屏障功能，从而提升皮肤的自我保护能力、降低皮肤敏感程度，全方位多角度保护皮肤，在最快的时间内解除肌肤的异常状态。
为实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：
第一方面，本发明提供了具有舒缓修护功效的复方植物提取物，其特征在于，所述复方植物包括龙胆、野菊花、蒲公英、仙人掌和长角豆；所述龙胆、野菊花、蒲公英、仙人掌和长角豆的质量比均为（0.5-5）:（0.5-5）:（0.5-5）:（0.5-5）:（0.5-5）。
在现代药理学研究中发现龙胆中含有龙胆苦甙、龙胆二糖、龙胆酸等成分，被证实具有较好的抗菌消炎止痒的功效。龙胆含有的大量龙胆苦苷，能抑制组胺的生成，同时具有抗炎、镇痛止痒、抑制刺激的作用，从而大大减弱皮肤因受刺激而产生的过敏反应，并降低中枢系统对敏感原的过度反应。除此之外，龙胆提取物体外对葡萄球菌、某些常见皮肤真菌有抑制作用，尤其对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和变形杆菌都有很强的抑制作用。
野菊花提取物具有抗炎抗氧化、抗肿瘤、抗菌抗病毒等生物活性。据调查，野菊花水提取物中含有多糖、绿原酸、19种氨基酸等成分，对中枢神经有镇静作用，因此对实验性的高热家兔有解热作用。除此之外，大鼠试验验证了野菊花水提取物对于二甲苯导致的大鼠耳廓肿胀具有明显抑制作用，通过腹腔注射，可使毛细血管抵抗力增强，血管通透性抑制，具有抗炎作用。其原理是野菊花多糖提高免疫受抑制大鼠的免疫功能，在提升免疫器官指数、提高巨噬细胞活性、增加外周溶菌酶含量、增强T淋巴细胞功能、提高白细胞介素-2的水平和提高B淋巴细胞功能等方面促进机体免疫功能。
蒲公英中含有黄酮、多酚及多糖类物质，具有抗氧化、抗衰老、抗肿瘤、提高免疫力、光谱抑菌等保健作用。作为药物，蒲公英提取物被应用于肝脏炎症和充血、肝脏和胆囊阻塞，改善肝功能，促进胆汁分泌和作为利尿剂使用。《蒲公英护肤作用研究》表明，蒲公英提取物中含有的绿原酸等抗菌成分，具有极强抗菌消炎能力，避免炎症初期多形核白细胞和巨噬细胞参与反应，避免产生花生四烯酸的分解产物超氧自由基的不断产生和堆积导致毒性更强的羟基自由基产生，使皮肤组织、粘膜、细胞避免受到损伤导致的红肿热痛的炎症反应。
仙人掌具有清热解毒和抑菌抗炎等功效。仙人掌所富含的氨基酸、超氧化物歧化酶（SOD）、粘多糖等化学成分都是对皮肤有滋养作用的活性成分。研究表明，透明质酸酶与炎症、过敏反应有强相关性。在发炎的过程中，组织胺激活透明质酸酶，破坏周围组织以便于发炎细胞的侵入，抑制透明质酸酶意味着抗炎效果。而仙人掌提取物可以抑制透明质酸酶活性的作用，具有较好的抗过敏效果。
长角豆提取物中含有半乳甘露寡聚糖，可恢复因年龄增长而退化的天然组织再生系统的体内平衡，加速受损肌肤的再生，从而有利于本质功能的恢复。一方面，长角豆提取物对蛋白裂解酶活性有促进作用，将促使皮肤的水合能力加强，有保湿作用。另一方面，可增强皮肤新陈代谢，可促进a‐SMA（平滑肌动蛋白）与TGF‐β1（转化生长因子）的正常合成，它们是皮肤修复系统中的生长因子。a‐SMA是肌成纤维细胞的显著标志，其新陈代谢活动以及提高的收缩能力在真皮的修复过程中发挥了积极作用，在恢复细胞的迁移能力、真皮的修复具有重要作用。而TGF‐β是一多功能蛋白质，可影响多种细胞的生长、分化、细胞凋亡及免疫调节等功能。TGF‐β可以结合到细胞表面的TGF‐β受体结合而激活其受体，其受体是丝氨酸/苏氨酸激酶受体，可促进受损人成纤维细胞的迁移，将真皮的再生成能力恢复至正常成纤维细胞的同等水平。
本发明采用龙胆、野菊花、蒲公英、仙人掌和长角豆作为原料，经乙醇水溶液提取制备得到复方植物提取物，利用以上不同植物原料中的多种功能成分，有针对性的对抗炎症介质的释放、抑制炎症介质对正常细胞的伤害，同时减少皮肤水分散失、增强皮肤屏障功能，从而提升皮肤的自我保护能力、降低皮肤敏感程度，全方位多角度保护皮肤，在最快的时间内解除肌肤的异常状态。
第二方面，本发明提供了上述复方植物提取物的制备方法，包括如下步骤：以复方植物为原料，经乙醇水溶液提取制备得到。
优选的，所述乙醇水溶液为体积浓度为15-60%的乙醇水溶液。
优选的，经乙醇水溶液提取的工艺包括如下步骤：
1）称取龙胆、野菊花、蒲公英、长角豆、仙人掌，净选除杂；
2）加入乙醇水溶液，提取，回收乙醇后得粗提液，用澄清剂澄清，滤过，取滤液冷冻干燥得复方植物提取物。
优选的，所述乙醇水溶液与植物原料的体积质量比为10-40L/kg。
优选的，步骤2）中提取条件为在40-90℃下提取3-10h。
优选的，所述澄清剂为壳聚糖。
优选的，澄清剂与粗提液的质量体积为10-30g/L，澄清工艺为在室温下搅拌1-4h。
优选的，步骤2）中所述干燥选自烘干、冷冻干燥。
进一步的，冷冻干燥后还包括配置的步骤，所述配置的步骤工艺为：取复方植物提取物溶解于水，配置成质量浓度为1-20%的植物提取物水溶液。
第三方面，本发明提供了上述复方植物提取物在舒缓保湿水、舒缓保湿精华、舒缓保湿乳、舒缓保湿霜中的应用。
第四方面，本发明提供了一种舒缓保湿水，按质量百分比，包括以下原料：
复方植物提取物 1-10%；
增稠剂0.01-5%；
防腐剂0.1-1.5%；
小分子多元醇1-10%；
EDTA二钠0.01-0.5%；
pH调节剂0.01-0.5%；
水余量；
所述复方植物提取物为上述复方植物提取物。
优选的，所述增稠剂选自卡波姆、丙烯酸（酯）类/C10-30 烷醇丙烯酸酯交联聚合物、黄原胶、聚丙烯酸酯交联聚合物-6中的至少一种；所述防腐剂选自对羟基苯乙酮和/或苯氧乙醇；所述小分子多元醇选自1,2-己二醇、1,2-戊二醇、甘油和丁二醇、1,3-丙二醇中的至少一种；所述pH调节剂选自柠檬酸、三乙醇胺、精氨酸、氨甲基丙醇中的至少一种。
第五方面，本发明提供了上述舒缓保湿水的制备方法，包括如下步骤：
将水、小分子多元醇、EDTA二钠、增稠剂混合加热到70-90℃，搅拌溶解后降温至35-60℃，加入防腐剂、复方植物提取物搅拌均匀，用pH调节剂调节pH即得。
第六方面，本发明提供了一种舒缓保湿精华，按质量百分比，包括以下原料：
复方植物提取物 1-10%；
增稠剂0.1-5%；
防腐剂0.1-1.5%；
小分子多元醇1-10%；
pH调节剂0.05-0.5%；
水余量；
所述复方植物提取物为上述复方植物提取物。
优选的，所述增稠剂选自卡波姆、丙烯酸（酯）类/C10-30 烷醇丙烯酸酯交联聚合物、黄原胶、聚丙烯酸酯交联聚合物-6中的至少一种；所述防腐剂选自对羟基苯乙酮和/或苯氧乙醇；所述小分子多元醇选自1,2-己二醇、1,2-戊二醇、甘油、1,3-丁二醇、1,3-丙二醇中的至少一种；所述pH调节剂选自柠檬酸、三乙醇胺、精氨酸、氨甲基丙醇中的至少一种。
第七方面，本发明提供了上述舒缓保湿精华的制备方法，包括如下步骤：
将水、小分子多元醇、增稠剂混合加热到70-90℃，搅拌溶解后降温至35-60℃，加入pH调节剂、防腐剂、复方植物提取物搅拌均匀，即得。
第八方面，本发明提供了一种舒缓保湿乳，按质量百分比，包括以下原料：
复方植物提取物 1-10%；
乳化剂1-6%；
防腐剂0.1-1.5%；
聚二甲基硅氧烷 1-6%；
角鲨烷0.05-3%；
氢化聚癸烯3-10%；
小分子多元醇1-10%；
增稠剂0.1-5%；
pH调节剂0.01-0.5%；
水余量；
所述复方植物提取物为上述复方植物提取物。
优选的，所述增稠剂选自卡波姆、丙烯酸（酯）类/C10-30 烷醇丙烯酸酯交联聚合物、黄原胶、聚丙烯酸酯交联聚合物-6、SIMULGEL INS 100中的至少一种；所述防腐剂选自对羟基苯乙酮和/或苯氧乙醇；述小分子多元醇选自1,2-己二醇、1,2-戊二醇、甘油、1,3-丁二醇、1,3-丙二醇中的至少一种；所述pH调节剂选自柠檬酸、三乙醇胺、精氨酸、氨甲基丙醇中的至少一种；所述乳化剂选自EMU POWER 165、BONDERM 10 OLIVE NAT、Montanov68MBMontanov 68MB、SIMULGEL EG、SEPINOV EMT 10中的至少一种。
第九方面，本发明提供了上述舒舒缓保湿乳的制备方法，包括如下步骤：
1）将乳化剂、聚二甲基硅氧烷、角鲨烷、氢化聚癸烯在65-95℃混合均匀，得油相；
2）水、小分子多元醇和增稠剂在65-95℃混合均匀，得水相；
3）将油相与水相混合均匀，均质乳化，加入pH调节剂、防腐剂、复方植物提取物，混合均匀。
第十方面，本发明提供了一种舒缓保湿霜，按质量百分比，包括以下原料：
复方植物提取物 1-10%；
乳化剂2-8%；
防腐剂0.1-1.5%；
聚二甲基硅氧烷 1-6%；
角鲨烷0.05-3%；
氢化聚癸烯3-10%；
小分子多元醇1-10%；
增稠剂0.1-5%；
pH调节剂0.01-0.5%；
水余量；
所述复方植物提取物为上述复方植物提取物。
优选的，所述增稠剂选自卡波姆、丙烯酸（酯）类/C10-30 烷醇丙烯酸酯交联聚合物、黄原胶、聚丙烯酸酯交联聚合物-6、SIMULGEL INS 100中的至少一种；所述防腐剂选自对羟基苯乙酮和/或苯氧乙醇；述小分子多元醇选自1,2-己二醇、1,2-戊二醇、甘油和丁二醇、1,3-丙二醇中的至少一种；所述pH调节剂选自柠檬酸、三乙醇胺、精氨酸、氨甲基丙醇中的至少一种；所述乳化剂选自EMU POWER 165、BONDERM 10 OLIVE NAT、Montanov 68MB、SIMULGEL EG、SEPINOV EMT 10中的至少一种。
第十一方面，本发明提供了上述舒舒缓保湿霜的制备方法，包括如下步骤：
1）将乳化剂、聚二甲基硅氧烷、角鲨烷、氢化聚癸烯在65-95℃混合均匀，得油相；
2）水、小分子多元醇和增稠剂在65-95℃混合均匀，得油相；
3）将油相与水相混合均匀，加入pH调节剂、防腐剂、复方植物提取物，混合均匀。
相对于现有技术，本发明具有以下有益效果：
1、本发明采用龙胆、野菊花、蒲公英、仙人掌和长角豆作为原料，经乙醇水溶液提取制备得到复方植物提取物，利用不同植物原料中的多种功能成分，有针对性的对抗炎症介质的释放、抑制炎症介质对正常细胞的伤害，同时减少皮肤水分散失、增强皮肤屏障功能，从而提升皮肤的自我保护能力、降低皮肤敏感程度，全方位多角度保护皮肤，在最快的时间内解除肌肤的异常状态。
2、本发明的复方植物提取物可用于保湿水、保湿霜、保湿精华、保湿乳等多种舒缓修复护肤产品。
附图说明
图1 对照组成纤维细胞的迁移图；
图2 实施例1成纤维细胞的迁移图；
图3 对照组角化细胞的迁移图；
图4 实施例1角化细胞的迁移图。
具体实施方式
值得说明的是，本发明中使用的原料均为普通市售产品，对其来源不做具体限定。
以下原料来源，为示例性说明：
小分子多元醇：甘油、1,3-丁二醇，市售；
防腐剂：对羟基苯乙酮、苯氧乙醇，市售；
聚二甲基硅氧烷：型号DM 10，购自江西蓝星星火有机硅有限公司；
增稠剂：卡波姆，购自广州兆衡贸易有限公司；聚丙烯酸酯交联聚合物-6，购自广州百好博贸易有限公司；SIMULGEL INS 100，市售；
乳化剂：Montanov 68MB、EMU POWER 165、SIMULGEL EG、SEPINOV EMT 10，市售；
pH调节剂：三乙醇胺，市售；
其余原料均为普通市售。
实施例1 具有舒缓修护功效的复方植物提取物制备例
1）取总量为0.6kg的质量比为1:1:1:2:1的龙胆、野菊花、蒲公英、长角豆和仙人掌，净选除杂；
2）加入18L体积浓度为40%的乙醇水溶液，在70℃下提取5h，回收乙醇后得粗提液，按澄清剂与粗提液的质量体积比为20g/L加入澄清剂壳聚糖，室温下搅拌3h，滤过，取滤液冷冻干燥得复方植物提取物。
实施例2 具有舒缓修护功效的复方植物提取物制备例
1）取总量为0.6kg的质量比为5:0.5:3:3:0.5的龙胆、野菊花、蒲公英、长角豆和仙人掌，净选除杂；
2）加入12L体积浓度为60%的乙醇水溶液，在80℃下提取3h，回收乙醇后得粗提液，按澄清剂与粗提液的质量体积比为10g/L加入澄清剂壳聚糖，室温下搅拌3h，滤过，取滤液冷冻干燥得复方植物提取物。
实施例3 具有舒缓修护功效的复方植物提取物制备例
1）取总量为0.6kg的质量比为0.5:5:0.5:1:5的龙胆、野菊花、蒲公英、长角豆和仙人掌，净选除杂；
2）加入24L体积浓度为20%的乙醇水溶液，在40℃下提取10h，回收乙醇后得粗提液，按澄清剂与粗提液的质量体积比为30g/L加入澄清剂壳聚糖，室温下搅拌3h，滤过，取滤液冷冻干燥得复方植物提取物。
对比例1
除采用总量为0.6kg的质量比为3:0:0:2:1的龙胆、野菊花、蒲公英、长角豆和仙人掌作为原料（即采用龙胆替代野菊花和蒲公英）外，其余同实施例1。
对比例2
除采用总量为0.6kg的质量比为0:3:0:2:1的龙胆、野菊花、蒲公英、长角豆和仙人掌作为原料（即采用野菊花替代龙胆和蒲公英）外，其余同实施例1。
对比例3
除采用总量为0.6kg的质量比为0:0:3:2:1的龙胆、野菊花、蒲公英、长角豆和仙人掌作为原料（即采用蒲公英替代野菊花和龙胆）外，其余同实施例1。
对比例4
除采用总量为0.6kg的质量比为1.5:1.5:0:2:1的龙胆、野菊花、蒲公英、长角豆和仙人掌作为原料（即将蒲公英等比例替换成龙胆和野菊花）外，其余同实施例1。
对比例5
除采用总量为0.6kg的质量比为1.5:0:1.5:2:1的龙胆、野菊花、蒲公英、长角豆和仙人掌作为原料（即将野菊花等比例替换成龙胆和蒲公英）外，其余同实施例1。
对比例6
除采用总量为0.6kg的质量比为0:1.5:1.5:2:1的龙胆、野菊花、蒲公英、长角豆和仙人掌作为原料（即将龙胆等比例替换成野菊花和蒲公英）外，其余同实施例1。
对比例7
除采用总量为0.6kg的质量比为1:1:1:0:3的龙胆、野菊花、蒲公英、长角豆和仙人掌作为原料（即将长角豆替换成仙人掌）外，其余同实施例1。
对比例8
除采用总量为0.6kg的质量比为1:1:1:3:0的龙胆、野菊花、蒲公英、长角豆和仙人掌作为原料（即将仙人掌替换成长角豆）外，其余同实施例1。
对比例9
除采用总量为0.6kg的质量比为2:2:2:0:0的龙胆、野菊花、蒲公英、长角豆和仙人掌作为原料（即将仙人掌和长角豆按比例替换成龙胆、野菊花和蒲公英）外，其余同实施例1。
对比例10
除采用总量为0.6kg的质量比为0:0:0:4:2的龙胆、野菊花、蒲公英、长角豆和仙人掌作为原料（即将龙胆、野菊花和蒲公英按比例替换成仙人掌和长角豆）外，其余同实施例1。
对比例11
除步骤2）中采用水作为提取溶剂外，其余同实施例1。
应用例1舒缓保湿水的制备
制备工艺如下：将去离子水、聚丙烯酸酯交联聚合物-6、丁二醇、EDTA二钠混合加热到80℃，搅拌溶解后降温至45℃，加入防腐剂、复方植物提取物搅拌均匀，用三乙醇胺调节pH，放置后得到保舒缓保湿水1#、2#、3#、4#和5#。
应用例2舒缓保湿精华的制备
制备工艺如下：将去离子水、1,3-丁二醇、甘油、卡波姆混合加热到80℃，搅拌溶解后降温至45℃，加入三乙醇胺、防腐剂、复方植物提取物搅拌均匀，放置后得到保湿精华1#、2#、3#、4#和5#。
应用例3舒缓保湿乳的制备
制备工艺如下：
1）将乳化剂、聚二甲基硅氧烷、角鲨烷、氢化聚癸烯在80℃混合均匀，得油相；
2）将去离子水、甘油和聚丙烯酸酯交联聚合物-6在80℃混合均匀，得水相；
3）乳化锅预热，抽真空至-0.06mpa，先抽入水相，再抽入油相，均质8分钟，搅拌降温至45℃，加入三乙醇胺、防腐剂、复方植物提取物，搅拌20分钟，检验合格出料。
应用例4舒缓保湿霜的制备
制备工艺如下：
1）将乳化剂、聚二甲基硅氧烷、角鲨烷、氢化聚癸烯在80℃混合均匀，得油相；
2）将去离子水、甘油和卡波姆在80℃混合均匀，得水相；
3）乳化锅预热，抽真空至-0.06mpa，先抽入水相，再抽入油相，均质8分钟，搅拌降温至45℃，加入三乙醇胺、防腐剂、复方植物提取物，搅拌20分钟，检验合格出料。
测试例
1、复方植物提取物缓解瘙痒、水肿、红肿试验
1.1、人体测试：组胺手臂测试。
1.2、测试样品：将实施例1-3、对比例1-6和对比例11的复方植物提取物，用去离子水溶解配置成质量浓度4%的水溶液，作为测试样品。
1.3、测试方法：
在测试者手臂内侧选取11个2cm*2cm的测试区域作为试验区域，用组胺涂抹刺激至发痒、红肿、起疙瘩丘疹，一般3-15min，因人而异，然后其中10个区域分别涂上以上10种样品，空白组不做处理，记录痒感消失的时间、痛感消失的时间、红肿消失的时间。
1.4测试人数：30人。
1.5测试纳入标准：
a.年龄18-60岁，男女均可；
b.无严重系统性疾病、无免疫缺陷或自身免疫性疾病者；
c.无活动过敏性疾病者；
d.既往对护肤类化妆品无过敏史；
e.近一个月没有参加临床和消费者测试；
f.近一个月内未曾全身使用激素类药物及免疫制剂者；
g.志愿者参加并能按规定要求完成测试者。
1.6、测试结果：
从实验结果可知，实施例1-3将三者复配，能明显减轻组胺对肌肤的所有不良症状，效果显著优于对比例1-6三者单独使用或者两两复配的效果。此外，比较实施例1和对比例11可以看出，复方植物提取物的提取溶剂对所制备得到的复方植物提取物的性能有显著的影响，采用乙醇水溶液作为溶剂，制备得到的复方植物提取物具有明显更优的缓解瘙痒、水肿和红肿的效果。
2、抑制透明质酸酶作用的测试方法
2.1实验方法：
采用双抗体夹心法，检测样品对透明质酸酶的抑制率。样品中可能存在的抑制因子使透明质酸酶活性受到抑制，仍具有活性的透明质酸酶与生物素标记的抗体结合，再与链霉和素-HRP结合，形成免疫复合物，温育，洗涤，然后加入显色液显色，在终止反应后通过酶标仪测试其吸光值。通过比较分析试验数据，来评估样品对透明质酸酶的抑制效果。
2.2测试样品：实施例1的复方植物提取物，用去离子水溶解配置成质量浓度4%的水溶液，作为测试样品，为试样组；不含植物提取物的去离子水作为对照样品，作为对照组；不加酶不加测试样品的为空白组。
2.3评价标准：
观察试样对透明质酸酶的抑制率，抑制率越大表明试样的舒缓效果促进作用越好。
2.4方法：
a.样品预处理，准备实验试剂；
b.在试样组、对照组的孔中，加入试样和透明质酸钠酶；
c.37℃孵育10min；
d.在试样组、对照组对应的孔中加入生物素的抗体、酶标试剂；
e.加入终止液；
f.10min内，用酶标仪测试450nm处的OD值（吸光值）；
g.计算透明质酸酶活性抑制率。
2.5、测试结果：
2.6、结果评价：
经试验，实施例1的复方植物提取物对透明质酸酶抑制率为76%，其对透明质酸酶具有较好的抑制作用。
3、促进真皮层修复的体外试验
3.1构建细胞受损模型：
①成纤维细胞：通过对比年老捐赠者与年轻捐赠者的成纤维细胞发现，受损成纤维细胞的TGF‐b1合成减少42%。
②角化细胞：通过对比年老捐赠者与年轻捐赠者的成纤维细胞发现，受损角化细胞激活素A的合成减少22%。
3.2测试样品：实施例1的复方植物提取物，用去离子水溶解配置成质量浓度4%的水溶液，作为测试样品；不含植物提取物的去离子水作为对照组。
3.3测试方法
①成纤维细胞：本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法，检测样品中TGF-b1的合成增长率。样品中TGF-b1与生物素标记的抗体结合包被于酶标板上，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，加入底物工作液显蓝色，最后加终止液硫酸，在450nm处测OD值，TGF-b1浓度与OD值成正比，可通过绘制标准曲线求出标本中TGF-b1浓度。同时做对照组、空白组。通过比较分析试验数据，来评估样品对TGF-b1的合成促进效果。
②角化细胞：采用双抗体夹心法测定人激活素A（ATA）水平。用纯化的人激活素A（ATA）抗体包被微孔板，制成固相载体，实验时依次在微孔板中加入样本及标准品，并加入HRP标记的ATA抗体，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，反复洗涤后加底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化为蓝色，再用硫酸终止反应，转变成黄色。颜色的深浅和样品中的ATA含量呈正相关。采用酶标仪在450nm波长测定吸光度（OD值），根据标准曲线，计算测试样品中ATA浓度。同时做对照组、空白组。通过比较分析试验数据，来评估样品对激活素A的合成促进效果。
3.4细胞受损模型的试验结果：
①成纤维细胞：实施例1和对照组的成纤维细胞的迁移结果见附图1-2，可见，实施例1的成纤维细胞的TGF‐b1合成显著提高17%。
②角化细胞：实施例1和对照组的成纤维细胞的迁移结果见附图3-4，实施例1的角化细胞激活素A的合成显著提高93%。
3.5试验结论：实施例1含有长角豆提取物，能恢复皮肤修复系统中的生长因子-激活素A和TGF‐b1的正常合成，能恢复细胞的迁移能力。试验显示，受损细胞的迁移能力恢复至正常细胞的同等水平，因而可促进受损真皮和表皮的再生成。
4、复方植物提取物的使用满意度评价-人体受到机械侵害后恢复能力的作用测试
4.1测试样品：将实施例1和对比例7-11的复方植物提取物，用去离子水溶解配置成质量浓度4%的水溶液，作为测试样品。
4.2测试方法：
在30位健康志愿者（平均年龄为35±10岁）的大腿上进行试验，选取7个3cm*3cm的测试区域，用作试验区，其中6个区域分别涂抹该试验的六种样品，空白组不做处理，使其大腿受到胶带连续性机械侵害后，用色差计来测定肌肤受到侵害后的发红现象，用TEWAMETER测定经皮水分流失，以及在该研究条件下经过14天每天两次的应用后，使用问卷调查形式统计测试者主观评价的测试效果。
4.3测试者选择标准
a.以自愿原则为标准，项目知情同意并签订知情同意书；
b.身体健康，对样品无过敏反应；
c.对整个测试共14天的时间能够按要求完成随访；
d.测试期间，能按规定使用样品，不使用相同功效的产品；
e.乳酸刺激试验阳性；
f.试验期间不再参与其他任何研究中心的临床试验；
g.试验期间同意不使用任何对结果有影响的化妆品、药物和保健品。
4.4剔除标准
a.无故自行退出或未完成规定观察期；
b.处于怀孕或者哺乳期内；
c.活动性皮肤患者（例如银屑病、湿疹、牛皮癣、皮肤癌等）；
d.测试区域或附近有明显的红斑、晒斑、伤口、磨损、纹身等。
4.5测试评价标准：
本实验采用评分标准，评分项目有五项：褪红满意度、止痒满意度、止痛满意度、消肿满意度、皮肤恢复过程满意度。0分为非常不满意，1分为较不满意，2分为一般，3分为满意，4分为非常满意。
4.6测试结果：
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4.7测试结论
从测试反馈中可知，复方植物提取物同时含有龙胆提取物、野菊花提取物、蒲公英提取物、仙人掌提取物、长角豆提取物，各成分协同作用，可以从不同方面起到抗炎、增强肌肤屏障从而达到在测试过程中，提升皮肤的自我保护能力，降低敏感程度，在最快的时间内解除肌肤的异常状态，其效果显著优于未采用全部植物成分的对比例7-10。并且，比较实施例1和对比例11可知，复方植物提取物的提取溶剂对所制备得到的复方植物提取物的性能有显著的影响，采用乙醇水溶液作为溶剂，制备得到的复方植物提取物具有明显更优的使用效果。
5.功效检测一
5.1样品：应用例1的舒缓保湿水1#-5#。
5.2测试方法：
在测试者手臂内侧选取5个2cm*2cm的测试区域，用组胺涂抹刺激至发痒、红肿、起疙瘩丘疹，一般3-15min，因人而异，然后每个区域分别涂上以上5种样品，记录痒感消失的时间、痛感消失的时间、红肿消失的时间。
5.3测试人数：30人。
5.4测试纳入标准：
a.年龄18-60岁，男女均可；
b.无严重系统性疾病、无免疫缺陷或自身免疫性疾病者；
c.无活动过敏性疾病者；
d.既往对护肤类化妆品无过敏史；
e.近一个月没有参加临床和消费者测试；
f.近一个月内未曾全身使用激素类药物及免疫制剂者；
g.志愿者参加并能按规定要求完成测试者。
5.5测试结果：
5.6结果总结：
由于受测试者个体间差异、以及外部因素对肌肤收敛控油情况的影响，对产品的使用感也会有不同程度的差异。但从表中可以明显看出，通过添加复方植物提取物可达到消炎、抗敏、镇痛，缓解肌肤异常状态的效果，且加入比例越大，效果越明显。并且采用乙醇水溶液作为提取溶剂的舒缓保湿水1#-3#效果显著优于采用水作为提取溶剂的舒缓保湿水5#。
6.功效检测二
6.1样品：应用例2中制备的舒缓保湿精华1#-5#。
6.2测试方法：
在测试者手臂内侧选取5个2cm*2cm的测试区域，用组胺涂抹刺激至发痒、红肿、起疙瘩丘疹，一般3-15min，因人而异，然后每个区域分别涂上以上5种样品，记录痒感消失的时间、痛感消失的时间、红肿消失的时间。
6.3测试人数：30人。
6.4测试纳入标准：
a.年龄18-60岁，男女均可；
b.无严重系统性疾病、无免疫缺陷或自身免疫性疾病者；
c.无活动过敏性疾病者；
d.既往对护肤类化妆品无过敏史；
e.近一个月没有参加临床和消费者测试；
f.近一个月内未曾全身使用激素类药物及免疫制剂者；
g.志愿者参加并能按规定要求完成测试者。
6.5测试结果：
6.6结果总结：
由于受测试者个体间差异、以及外部因素对肌肤收敛控油情况的影响，对产品的使用感也会有不同程度的差异。但从表中可以明显看出，通过添加复方植物提取物可达到消炎、抗敏、镇痛，缓解肌肤异常状态的效果，且加入比例越大，效果越明显。并且采用乙醇水溶液作为提取溶剂的舒缓保湿精华1#-3#效果显著优于采用水作为提取溶剂的舒缓保湿精华5#。
7.功效检测三
7.1样品：应用例3中制备的舒缓保湿乳1#-5#。
7.2测试方法：
在测试者手臂内侧选取5个2cm*2cm的测试区域，用组胺涂抹刺激至发痒、红肿、起疙瘩丘疹，一般3-15min，因人而异，然后每个区域分别涂上以上5种样品，记录痒感消失的时间、痛感消失的时间、红肿消失的时间。
7.3测试人数：30人。
7.4测试纳入标准：
a.年龄18-60岁，男女均可；
b.无严重系统性疾病、无免疫缺陷或自身免疫性疾病者；
c.无活动过敏性疾病者；
d.既往对护肤类化妆品无过敏史；
e.近一个月没有参加临床和消费者测试；
f.近一个月内未曾全身使用激素类药物及免疫制剂者；
g.志愿者参加并能按规定要求完成测试者。
7.5测试结果：
7.6结果总结：
由于受测试者个体间差异、以及外部因素对肌肤收敛控油情况的影响，对产品的使用感也会有不同程度的差异。但从表中可以明显看出，通过添加复方植物提取物可达到消炎、抗敏、镇痛，缓解肌肤异常状态的效果，且加入比例越大，效果越明显。并且采用乙醇水溶液作为提取溶剂的舒缓保湿乳1#-3#效果显著优于采用水作为提取溶剂的舒缓保湿乳5#。
8.功效检测四
8.1样品：应用例4中制备的舒缓保湿霜1#-5#。
8.2测试方法：
在测试者手臂内侧选取5个2cm*2cm的测试区域，用组胺涂抹刺激至发痒、红肿、起疙瘩丘疹，一般3-15min，因人而异，然后每个区域分别涂上以上5种样品，记录痒感消失的时间、痛感消失的时间、红肿消失的时间。
8.3测试人数：30人。
8.4测试纳入标准：
a.年龄18-60岁，男女均可；
b.无严重系统性疾病、无免疫缺陷或自身免疫性疾病者；
c.无活动过敏性疾病者；
d.既往对护肤类化妆品无过敏史；
e.近一个月没有参加临床和消费者测试；
f.近一个月内未曾全身使用激素类药物及免疫制剂者；
g.志愿者参加并能按规定要求完成测试者。
8.5测试结果：
8.6结果总结：
由于受测试者个体间差异、以及外部因素对肌肤收敛控油情况的影响，对产品的使用感也会有不同程度的差异。但从表中可以明显看出，通过添加复方植物提取物可达到消炎、抗敏、镇痛，缓解肌肤异常状态的效果，且加入比例越大，效果越明显。并且采用乙醇水溶液作为提取溶剂的舒缓保湿霜1#-3#效果显著优于采用水作为提取溶剂的舒缓保湿霜5#。
最后应当说明的是，以上内容仅用以说明本发明的技术方案，而非对本发明保护范围的限制，本领域的普通技术人员对本发明的技术方案进行的简单修改或者等同替换，均不脱离本发明技术方案的实质和范围。

Claims (7)

1.具有舒缓修护功效的复方植物提取物，其特征在于，所述复方植物由龙胆、野菊花、蒲公英、仙人掌和长角豆组成；所述龙胆、野菊花、蒲公英、仙人掌和长角豆的质量比均为（0.5-5）:（0.5-5）:（0.5-5）:（0.5-5）:（0.5-5）；
所述的具有舒缓修护功效的复方植物提取物的制备方法，具体工艺如下：以复方植物为原料，经乙醇水溶液提取制备得到；所述乙醇水溶液为体积浓度为15-60%的乙醇水溶液；
所述提取的条件为在40-90℃下提取3-10h。
2.如权利要求1所述的复方植物提取物，其特征在于，经乙醇水溶液提取的工艺包括如下步骤：
1）称取龙胆、野菊花、蒲公英、长角豆、仙人掌，净选除杂；
2）加入乙醇水溶液，提取，回收乙醇后得粗提液，用澄清剂澄清，滤过，取滤液干燥得复方植物提取物。
3.如权利要求2所述的复方植物提取物，其特征在于，所述乙醇水溶液与植物原料的体积质量比为10-40L/kg。
4.如权利要求2所述的复方植物提取物，其特征在于，所述澄清剂为壳聚糖。
5.如权利要求2所述的复方植物提取物，其特征在于，澄清剂与粗提液的质量体积为10-30g/L，澄清工艺为在室温下搅拌1-4h。
6.如权利要求2所述的复方植物提取物，其特征在于，步骤2）中所述干燥选自烘干、冷冻干燥。
7.具有舒缓修护功效的复方植物提取物在舒缓保湿水、舒缓保湿精华、舒缓保湿乳、舒缓保湿霜中的应用，其特征在于，所述复方植物提取物为权利要求1-6任一项所述的具有舒缓修护功效的复方植物提取物。
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