CN110627917A - 一种桑黄菌丝体多糖的提取方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种桑黄菌丝体多糖的提取方法，采用桑黄菌丝体作为提取原料，极大的节约了成本，且该方法步骤简单，操作方便，能够有效的对桑黄菌丝体中的多糖进行提取，多糖得率高。
Description
技术领域
本发明涉及一种桑黄菌丝体多糖的提取方法。
背景技术
现有的桑黄，又名桑黄菇、桑臣，是一种珍贵的药用真菌。桑黄中的多糖是一种重要的活性成分，具有抗肿瘤、抑菌消炎、免疫调节等一系列作用。
但是，目前针对桑黄多糖的提取制备，大多是针对桑黄子实体的，而桑黄子实体人工栽培难度大，生长周期长，一般为3~4年，因此桑黄子实体通常较为昂贵，成本较高，这限制了对桑黄的进一步开发和利用。为了满足日益增长的市场需求，选用性状稳定、人工栽培难度小的桑黄菌丝体作为提取桑黄多糖的原料是一个很好的选择。
发明内容
本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种桑黄菌丝体多糖的提取方法，该方法利用桑黄菌丝体提取多糖，成本较低，且步骤简单，操作方便，多糖得率较高。
为达到上述目的，本发明采用的技术方案是：
一种桑黄菌丝体多糖的提取方法，其包括以下步骤：
（1）取适量干燥的桑黄菌丝体，粉碎过40目筛，随后按照质量体积比为1:10~40的比例溶于水中，在80~100℃的水浴条件下水解1~3h后过滤，收集过滤液；
（2）取所述步骤（1）中过滤后的滤渣重复操作所述步骤（1）2~4次，并将收集的过滤液混合均匀，得到混合液；
（3）将所述步骤（2）中的混合液减压浓缩后加入有机溶剂中，并在2~5℃的条件下静置10~12h；
（4）将所述步骤（3）中静置后的所述混合液在温度为1~6℃、转速为5000~12000r/min的条件下离心10~20min后过滤，收集过滤后的沉淀物；
（5）将所述步骤（4）重复操作2~5次，并将收集的沉淀物混合均匀，得到混合沉淀物；
（6）将所述步骤（5）中的混合沉淀物脱水干燥后即得到所需的桑黄菌丝体多糖。
优选地，在所述步骤（1）中，所述桑黄菌丝体的制备方法如下：
①制备桑黄菌丝体培养基，并将所述培养基在温度为110~130℃、压强为0.1~0.3MPa的条件下灭菌1~3小时，随后冷却至室温；
②向所述培养基中接入桑黄菌种，随后在20℃~25℃的条件下密闭发菌3个月，发菌期间，向所述培养基照射黄光，照射时间为8~10h/天；
③发菌结束，将长出的菌丝烘干提取即得干燥的桑黄菌丝体；
其中，所述桑黄菌丝体培养基的干基按质量百分比计，包括如下组分：桑木屑90~95%、硫酸钙1~5%、麦麸1~5%、葡萄糖1~5%，将所述干基加水混合搅拌均匀，即得到所述的桑黄菌丝体培养基。
进一步优选地，所述干基和所述水的混合质量比为1:1.5~2。
进一步优选地，在所述步骤①中，所述培养基的灭菌温度为121℃，压强为0.12MPa。
进一步优选地，在所述步骤②中，所述菌种的投料质量占反应体系总质量的3~5%。
进一步优选地，在所述步骤③中，在第三个月的发菌期中，对接有菌种的所述培养基每天给予5~8℃的温差刺激。
优选地，在所述步骤（1）中，所述的桑黄菌丝体和所述水的质量体积比为1:15~25。
优选地，在所述步骤（3）中，所述有机溶剂为80%~95%浓度的乙醇。
进一步优选地，所述混合液和所述乙醇的体积比为1:2~5。
优选地，所述洗涤剂选自乙醚、丙酮的一种或多种。
由于上述技术方案的运用，本发明与现有技术相比具有下列优点：本发明的一种桑黄菌丝体多糖的提取方法，采用桑黄菌丝体作为提取原料，极大的节约了成本，且该方法步骤简单，操作方便，能够有效的对桑黄菌丝体中的多糖进行提取，多糖得率高。
具体实施方式
下面结合具体实施例来对本发明的技术方案作进一步的阐述。
实施例1
一种桑黄菌丝体多糖的提取方法，其包括以下步骤：
（1）取适量干燥的桑黄菌丝体，粉碎过40目筛，随后按照质量体积比为1:20的比例溶于水中，在90℃的水浴条件下水解2h后过滤，收集过滤液。（2）取步骤（1）中过滤后的滤渣重复操作步骤（1）3次，并将收集的过滤液混合均匀，得到混合液。（3）将步骤（2）中的混合液减压浓缩后加入3倍体积的80%浓度的乙醇中，并在4℃的条件下静置12h。（4）将步骤（3）中静置后的混合液在温度为4℃、转速为5000r/min的条件下离心20min后过滤，收集过滤后的沉淀物。（5）将步骤（4）重复操作3次，并将收集的沉淀物混合均匀，得到混合沉淀物，随后将混合沉淀物加入乙醚中清洗2次，去除小分子物质。（6）将步骤（5）中的混合沉淀物脱水干燥后即得到所需的桑黄菌丝体多糖。在这里，将混合沉淀物加入无水乙醇中进行脱水，随后真空干燥。
上述的桑黄菌丝体的制备方法如下：①制备桑黄菌丝体培养基，该培养基的干基按质量百分比计，包括：桑木屑92%、硫酸钙2%、麦麸5%、葡萄糖1%，将干基加水混合搅拌均匀，得到桑黄菌丝体培养基。其中干基和水的混合质量比为1:1.5。随后将培养基在温度为121℃、压强为0.12MPa的条件下灭菌2小时，随后冷却至室温。②向培养基中接入桑黄菌种，菌种的投料质量占反应体系总质量的5%，随后在23℃的条件下密闭发菌3个月，发菌期间，向培养基照射黄光，照射时间为8h/天。在第三个月的发菌期中，对接有菌种的培养基每天给予5~8℃的温差刺激。③发菌结束，将长出的菌丝烘干提取即得干燥的桑黄菌丝体。使用上述培养基按照上述方法制备菌丝体，更容易长出菌丝，易于桑黄多糖富集成长。
经检测，本实施例的多糖得率达到21.5%。
实施例2
一种桑黄菌丝体多糖的提取方法，其包括以下步骤：
（1）取适量干燥的桑黄菌丝体，粉碎过40目筛，随后按照质量体积比为1:25的比例溶于水中，在100℃的水浴条件下水解3h后过滤，收集过滤液。（2）取步骤（1）中过滤后的滤渣重复操作步骤（1）2次，并将收集的过滤液混合均匀，得到混合液。（3）将步骤（2）中的混合液减压浓缩后加入3倍体积的90%浓度的乙醇中，并在4℃的条件下静置11h。（4）将步骤（3）中静置后的混合液在温度为4℃、转速为10000r/min的条件下离心15min后过滤，收集过滤后的沉淀物。（5）将步骤（4）重复操作2次，并将收集的沉淀物混合均匀，得到混合沉淀物，随后将混合沉淀物加入丙酮中清洗2次，去除小分子物质。（6）将步骤（5）中的混合沉淀物脱水干燥后即得到所需的桑黄菌丝体多糖。
上述的桑黄菌丝体的制备方法如下：①制备桑黄菌丝体培养基，该培养基的干基按质量百分比计，包括：桑木屑90%、硫酸钙3%、麦麸5%、葡萄糖2%，将干基加水混合搅拌均匀，得到桑黄菌丝体培养基。其中干基和水的混合质量比为1:1.8。随后将培养基在温度为112℃、压强为0.2MPa的条件下灭菌2小时，随后冷却至室温。②向培养基中接入桑黄菌种，菌种的投料质量占反应体系总质量的3%，随后在20℃的条件下密闭发菌3个月，发菌期间，向培养基照射黄光，照射时间为9h/天。在第三个月的发菌期中，对接有菌种的培养基每天给予5~8℃的温差刺激。③发菌结束，将长出的菌丝烘干提取即得干燥的桑黄菌丝体。
经检测，本实施例的多糖得率达到20.9%。
实施例3
一种桑黄菌丝体多糖的提取方法，其包括以下步骤：
（1）取适量干燥的桑黄菌丝体，粉碎过40目筛，随后按照质量体积比为1:15的比例溶于水中，在80℃的水浴条件下水解2h后过滤，收集过滤液。（2）取步骤（1）中过滤后的滤渣重复操作步骤（1）4次，并将收集的过滤液混合均匀，得到混合液。（3）将步骤（2）中的混合液减压浓缩后加入5倍体积的95%浓度的乙醇中，并在4℃的条件下静置10h。（4）将步骤（3）中静置后的混合液在温度为4℃、转速为12000r/min的条件下离心10min后过滤，收集过滤后的沉淀物。（5）将步骤（4）重复操作4次，并将收集的沉淀物混合均匀，得到混合沉淀物，随后将混合沉淀物加入乙醚和丙酮的混合液中清洗2次，去除小分子物质。（6）将步骤（5）中的混合沉淀物脱水干燥后即得到所需的桑黄菌丝体多糖。
上述的桑黄菌丝体的制备方法如下：①制备桑黄菌丝体培养基，该培养基的干基按质量百分比计，包括：桑木屑95%、硫酸钙1%、麦麸3%、葡萄糖1%，将干基加水混合搅拌均匀，得到桑黄菌丝体培养基。其中干基和水的混合质量比为1:2。随后将培养基在温度为130℃、压强为0.3MPa的条件下灭菌2小时，随后冷却至室温。②向培养基中接入桑黄菌种，菌种的投料质量占反应体系总质量的4%，随后在25℃的条件下密闭发菌3个月，发菌期间，向培养基照射黄光，照射时间为10h/天。在第三个月的发菌期中，对接有菌种的培养基每天给予5~8℃的温差刺激。③发菌结束，将长出的菌丝烘干提取即得干燥的桑黄菌丝体。
经检测，本实施例的多糖得率达到21.7%。
上述实施例只为说明本发明的技术构思及特点，其目的在于让熟悉此项技术的人士能够了解本发明的内容并加以实施，并不能以此限制本发明的保护范围，凡根据本发明精神实质所作的等效变化或修饰，都应涵盖在本发明的保护范围内。
Claims (10)
1.一种桑黄菌丝体多糖的提取方法，其特征在于：其包括以下步骤：
（1）取适量干燥的桑黄菌丝体，粉碎过40目筛，随后按照质量体积比为1:10~40的比例溶于水中，在80~100℃的水浴条件下水解1~3h后过滤，收集过滤液；
（2）取所述步骤（1）中过滤后的滤渣重复操作所述步骤（1）2~4次，并将收集的过滤液混合均匀，得到混合液；
（3）将所述步骤（2）中的混合液减压浓缩后加入有机溶剂中，并在2~5℃的条件下静置10~12h；
（4）将所述步骤（3）中静置后的所述混合液在温度为2~5℃、转速为5000~12000r/min的条件下离心10~20min后过滤，收集过滤后的沉淀物；
（5）将所述步骤（4）重复操作2~3次，并将收集的沉淀物混合均匀，得到混合沉淀物；
（6）将所述步骤（5）中的混合沉淀物脱水干燥后即得到所需的桑黄菌丝体多糖。
2.根据权利要求1所述的一种桑黄菌丝体多糖的提取方法，其特征在于：在所述步骤（1）中，所述桑黄菌丝体的制备方法如下：
①制备桑黄菌丝体培养基，并将所述培养基在温度为110~130℃、压强为0.1~0.3MPa的条件下灭菌1~3小时，随后冷却至室温；
②向所述培养基中接入桑黄菌种，随后在20~25℃的条件下密闭发菌3个月，发菌期间，向所述培养基照射黄光，照射时间为8~10h/天；
③发菌结束，将长出的菌丝烘干提取即得干燥的桑黄菌丝体；
其中，所述桑黄菌丝体培养基的干基按质量百分比计，包括如下组分：桑木屑90~95%、硫酸钙1~5%、麦麸1~5%、葡萄糖1~5%，将所述干基加水混合搅拌均匀，即得到所述的桑黄菌丝体培养基。
3.根据权利要求2所述的一种桑黄菌丝体多糖的提取方法，其特征在于：所述干基和所述水的混合质量比为1:1.5~2。
4.根据权利要求2所述的一种桑黄菌丝体多糖的提取方法，其特征在于：在所述步骤①中，所述培养基的灭菌温度为121℃，压强为0.12MPa。
5.根据权利要求2所述的一种桑黄菌丝体多糖的提取方法，其特征在于：在所述步骤②中，所述菌种的投料质量占反应体系总质量的3~5%。
6.根据权利要求2所述的一种桑黄菌丝体多糖的提取方法，其特征在于：在所述步骤③中，在第三个月的发菌期中，对接有菌种的所述培养基每天给予5~8℃的温差刺激。
7.根据权利要求1所述的一种桑黄菌丝体多糖的提取方法，其特征在于：在所述步骤（1）中，所述的桑黄菌丝体和所述水的质量体积比为1:15~25。
8.根据权利要求1所述的一种桑黄菌丝体多糖的提取方法，其特征在于：在所述步骤（3）中，所述有机溶剂为80%~95%浓度的乙醇。
9.根据权利要求8所述的一种桑黄菌丝体多糖的提取方法，其特征在于：所述混合液和所述乙醇的体积比为1:2~5。
10.根据权利要求1所述的一种桑黄菌丝体多糖的提取方法，其特征在于：所述洗涤剂选自乙醚、丙酮的一种或多种。
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