CN110607260A - 一种用于猪肺炎支原体低血清培养的培养基及方法 - Google Patents
一种用于猪肺炎支原体低血清培养的培养基及方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN110607260A CN110607260A CN201910901404.0A CN201910901404A CN110607260A CN 110607260 A CN110607260 A CN 110607260A CN 201910901404 A CN201910901404 A CN 201910901404A CN 110607260 A CN110607260 A CN 110607260A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- culture
- mycoplasma hyopneumoniae
- serum
- culture medium
- low
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 241000204045 Mycoplasma hyopneumoniae Species 0.000 title claims abstract description 42
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 title claims abstract description 40
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 16
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims abstract description 55
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 38
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims abstract description 36
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims abstract description 19
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 claims abstract description 19
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 claims abstract description 19
- BELBBZDIHDAJOR-UHFFFAOYSA-N Phenolsulfonephthalein Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C1(C=2C=CC(O)=CC=2)C2=CC=CC=C2S(=O)(=O)O1 BELBBZDIHDAJOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 19
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 claims abstract description 19
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims abstract description 19
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims abstract description 19
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 claims abstract description 19
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 claims abstract description 19
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 claims abstract description 19
- 229960003531 phenolsulfonphthalein Drugs 0.000 claims abstract description 19
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims abstract description 19
- 241000204003 Mycoplasmatales Species 0.000 claims abstract description 14
- PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;potassium Chemical compound [K].OP(O)(O)=O PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 10
- LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K potassium phosphate Substances [K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 18
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 claims description 13
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims description 9
- 229910000396 dipotassium phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 9
- 235000019797 dipotassium phosphate Nutrition 0.000 claims description 9
- GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M potassium dihydrogen phosphate Chemical compound [K+].OP(O)([O-])=O GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 9
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 6
- 238000012807 shake-flask culturing Methods 0.000 claims description 2
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 abstract description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 4
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 abstract description 2
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 10
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 7
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 5
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 3
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 3
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 3
- 239000008176 lyophilized powder Substances 0.000 description 2
- 208000014085 Chronic respiratory disease Diseases 0.000 description 1
- 241000204031 Mycoplasma Species 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 238000012136 culture method Methods 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
Abstract
本发明公开了一种用于猪肺炎支原体低血清培养的培养基及方法，属于动物疫苗生产技术领域。该培养基包括以下组分：酵母粉、蛋白胨、葡萄糖、马血清冻干粉、氯化钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、苯酚红。通过使用该培养基对猪肺炎支原体进行培养，在添加少量的猪血清情况下，也能够保持猪肺炎支原体良好的生长状态以及较快的生长速度，故可以大大降低在培养猪肺炎支原体时的猪血清添加量，从而可以在保证猪肺炎支原体的高培养效率情况下，还能降低猪肺炎支原体的培养成本，以达到猪肺炎支原体疫苗的生产要求。
Description
技术领域
本发明涉及动物疫苗生产技术领域，具体是一种用于猪肺炎支原体低血清培养的培养基及方法。
背景技术
猪肺炎支原体，是引起猪的接触性慢性呼吸道疾病的重要病原之一，其会严重危害到猪的健康状况，尤其会导致猪的生长受阻以及使猪对饲料的转化率大幅度下降，继而引起其他疾病的发生。所以，对猪进行猪肺炎支原体疫苗预防是至关重要的。
另外，由于支原体是一种微小原核生物，其无细胞壁、生长速度慢、对培养的条件要求较为苛刻，故在猪肺炎支原体疫苗的生产和研究过程中，往往需要通过往培养基中添加猪血清，以便于对分离的猪肺炎支原体进行高效的培养。然而，使用传统培养基对猪肺炎支原体进行培养时，一般需要添加20%左右的猪血清，其血清用量较高，因此存在培养较高等问题。
发明内容
本发明的目的在于提供一种用于猪肺炎支原体低血清培养的培养基及方法，以解决上述背景技术中提出的问题。
为实现上述目的，本发明实施例提供如下技术方案：
一种用于猪肺炎支原体低血清培养的培养基，包括以下按照质量浓度计的组分：酵母粉3-7g/L、蛋白胨15-20g/L、葡萄糖8-12g/L、马血清冻干粉6-10g/L、氯化钠3-7g/L、磷酸二氢钾0.1-0.4g/L、磷酸氢二钾0.5-2.5g/L、苯酚红0.005-0.02g/L。
本发明实施例采用的另一种优选方案，所述的培养基包括以下按照质量浓度计的组分：酵母粉4-6g/L、蛋白胨16-18g/L、葡萄糖9-11g/L、马血清冻干粉7-9g/L、氯化钠4-6g/L、磷酸二氢钾0.2-0.3g/L、磷酸氢二钾1.3-1.7g/L、苯酚红0.008-0.012g/L。
本发明实施例采用的另一种优选方案，所述的培养基包括以下按照质量浓度计的组分：酵母粉5g/L、蛋白胨17.5g/L、葡萄糖10g/L、马血清冻干粉7.5g/L、氯化钠5.2g/L、磷酸二氢钾0.24g/L、磷酸氢二钾1.56g/L、苯酚红0.01g/L。
本发明实施例还提供了一种用于猪肺炎支原体低血清培养的方法，其包括以下步骤：
（1）在无菌条件下，往上述培养基中添加猪血清，得到培养液；
（2）往上述培养液中加入猪肺炎支原体菌液，并置于恒温条件下进行摇瓶培养。
本发明实施例采用的另一种优选方案，所述的步骤（1）中，猪血清与培养基的体积比为1:(8-12)。
本发明实施例采用的另一种优选方案，所述猪血清与培养基的体积比为1:9。
本发明实施例采用的另一种优选方案，所述的步骤（2）中，猪肺炎支原体菌液与培养液的体积比为1:(8-12)。
本发明实施例采用的另一种优选方案，所述猪肺炎支原体菌液与培养液的体积比为1:10。
本发明实施例采用的另一种优选方案，所述的步骤（2）中，摇瓶培养的温度为35-40℃。
与现有技术相比，本发明实施例的有益效果是：
本发明实施例提供的培养基成分简单、低廉、易获取，其通过添加酵母粉、蛋白胨、葡萄糖、马血清冻干粉、氯化钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾和苯酚红等组分，可以大大降低在培养猪肺炎支原体时的猪血清添加量（相对比传统培养方法，可降低50%左右的猪血清用量），从而可以降低猪肺炎支原体的培养成本，并且还能保持猪肺炎支原体良好的生长状态以及较快的生长速度。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
该实施例提供了一种用于猪肺炎支原体低血清培养的培养基，其包括以下组分：酵母粉、蛋白胨、葡萄糖、马血清冻干粉（选购慧嘉生物科技的市售产品）、氯化钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、苯酚红。其中，该培养基的制备方法包括以下步骤：先将3g的酵母粉、15g的蛋白胨、8g的葡萄糖、6g的马血清冻干粉、3g的氯化钠、0.1g的磷酸二氢钾、0.5g的磷酸氢二钾以及0.005g的苯酚红添加到1L的容量瓶中，然后往容量瓶中添加适量无菌水，摇匀后，再往容量瓶中添加无菌水，并定容至1L，即可得到培养基。
实施例2
该实施例提供了一种用于猪肺炎支原体低血清培养的培养基，其包括以下组分：酵母粉、蛋白胨、葡萄糖、马血清冻干粉、氯化钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、苯酚红。其中，该培养基的制备方法包括以下步骤：先将7g的酵母粉、20g的蛋白胨、12g的葡萄糖、10g的马血清冻干粉、7g的氯化钠、0.4g的磷酸二氢钾、2.5g的磷酸氢二钾以及0.02g的苯酚红添加到1L的容量瓶中，然后往容量瓶中添加适量无菌水，摇匀后，再往容量瓶中添加无菌水，并定容至1L，即可得到培养基。
实施例3
该实施例提供了一种用于猪肺炎支原体低血清培养的培养基，其包括以下组分：酵母粉、蛋白胨、葡萄糖、马血清冻干粉、氯化钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、苯酚红。其中，该培养基的制备方法包括以下步骤：先将4g的酵母粉、16g的蛋白胨、9g的葡萄糖、7g的马血清冻干粉、4g的氯化钠、0.2g的磷酸二氢钾、1.3g的磷酸氢二钾以及0.008g的苯酚红添加到1L的容量瓶中，然后往容量瓶中添加适量无菌水，摇匀后，再往容量瓶中添加无菌水，并定容至1L，即可得到培养基。
实施例4
该实施例提供了一种用于猪肺炎支原体低血清培养的培养基，其包括以下组分：酵母粉、蛋白胨、葡萄糖、马血清冻干粉、氯化钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、苯酚红。其中，该培养基的制备方法包括以下步骤：先将6g的酵母粉、18g的蛋白胨、11g的葡萄糖、9g的马血清冻干粉、6g的氯化钠、0.3g的磷酸二氢钾、1.7g的磷酸氢二钾以及0.012g的苯酚红添加到1L的容量瓶中，然后往容量瓶中添加适量无菌水，摇匀后，再往容量瓶中添加无菌水，并定容至1L，即可得到培养基。
实施例5
该实施例提供了一种用于猪肺炎支原体低血清培养的培养基，其包括以下组分：酵母粉、蛋白胨、葡萄糖、马血清冻干粉、氯化钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、苯酚红。其中，该培养基的制备方法包括以下步骤：先将5g的酵母粉、17.5g的蛋白胨、10g的葡萄糖、7.5g的马血清冻干粉、5.2g的氯化钠、0.24g的磷酸二氢钾、1.56g的磷酸氢二钾以及0.01g的苯酚红添加到1L的容量瓶中，然后往容量瓶中添加适量无菌水，摇匀后，再往容量瓶中添加无菌水，并定容至1L，即可得到培养基。
实施例6
该实施例提供了一种用于猪肺炎支原体低血清培养的方法，其包括以下步骤：
（1）先量取800mL上述实施例3得到的培养基，并进行过滤除菌处理；接着，在无菌条件下，往处理后的培养基中添加100mL猪血清，得到培养液，备用；
（2）量取40mL上述培养液转入到100mL的血清瓶中，然后往血清瓶中加入5mL的猪肺炎支原体菌液（选自美国ITCC细胞库），并置于35℃的恒温条件以及100rpm的转速条件下进行摇瓶培养48h，得到培养完成后的样品，即可完成对猪肺炎支原体的培养。
实施例7
该实施例提供了一种用于猪肺炎支原体低血清培养的方法，其包括以下步骤：
（1）先量取1200mL上述实施例4得到的培养基，并进行过滤除菌处理；接着，在无菌条件下，往处理后的培养基中添加100mL猪血清，得到培养液，备用；
（2）量取60mL上述培养液转入到100mL的血清瓶中，然后往血清瓶中加入5mL的猪肺炎支原体菌液，并置于40℃的恒温条件以及100rpm的转速条件下进行摇瓶培养48h，得到培养完成后的样品，即可完成对猪肺炎支原体的培养。
实施例8
该实施例提供了一种用于猪肺炎支原体低血清培养的方法，其包括以下步骤：
（1）先量取900mL上述实施例5得到的培养基，并进行过滤除菌处理；接着，在无菌条件下，往处理后的培养基中添加100mL猪血清，得到培养液，备用；
（2）量取50mL上述培养液转入到100mL的血清瓶中，然后往血清瓶中加入5mL的猪肺炎支原体菌液，并置于37℃的恒温条件以及100rpm的转速条件下进行摇瓶培养48h，得到培养完成后的样品，即可完成对猪肺炎支原体的培养。
其中，将上述实施例8得到的培养完成后的样品用颜色改变单位法(ColourChange Unit，CCU)对猪肺炎支原体进行计数，其计数结果为1010ccu，说明使用实施例5提供的培养基对猪肺炎支原体进行培养能够保证猪肺炎支原体处于较快的生长速度。
综上所述，本发明实施例提供的培养基，通过添加酵母粉、蛋白胨、葡萄糖、马血清冻干粉、氯化钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾和苯酚红等组分，可以大大降低在培养猪肺炎支原体时的猪血清添加量，从而可以降低猪肺炎支原体的培养成本，并且还能保持猪肺炎支原体良好的生长状态。
以上述依据本发明的理想实施例为启示，通过上述的说明内容，相关工作人员完全可以在不偏离本项发明技术思想的范围内，进行多样的变更以及修改。本项发明的技术性范围并不局限于说明书上的内容，必须要根据权利要求范围来确定其技术性范围。
Claims (9)
1.一种用于猪肺炎支原体低血清培养的培养基，其特征在于，包括以下按照质量浓度计的组分：酵母粉3-7g/L、蛋白胨15-20g/L、葡萄糖8-12g/L、马血清冻干粉6-10g/L、氯化钠3-7g/L、磷酸二氢钾0.1-0.4g/L、磷酸氢二钾0.5-2.5g/L、苯酚红0.005-0.02g/L。
2.根据权利要求1所述的一种用于猪肺炎支原体低血清培养的培养基，其特征在于，所述的培养基包括以下按照质量浓度计的组分：酵母粉4-6g/L、蛋白胨16-18g/L、葡萄糖9-11g/L、马血清冻干粉7-9g/L、氯化钠4-6g/L、磷酸二氢钾0.2-0.3g/L、磷酸氢二钾1.3-1.7g/L、苯酚红0.008-0.012g/L。
3.根据权利要求2所述的一种用于猪肺炎支原体低血清培养的培养基，其特征在于，所述的培养基包括以下按照质量浓度计的组分：酵母粉5g/L、蛋白胨17.5g/L、葡萄糖10g/L、马血清冻干粉7.5g/L、氯化钠5.2g/L、磷酸二氢钾0.24g/L、磷酸氢二钾1.56g/L、苯酚红0.01g/L。
4.一种用于猪肺炎支原体低血清培养的方法，其特征在于，包括以下步骤：
在无菌条件下，往如权利要求1-3中任一项所述的培养基中添加猪血清，得到培养液；
往上述培养液中加入猪肺炎支原体菌液，并置于恒温条件下进行摇瓶培养。
5.根据权利要求4所述的一种用于猪肺炎支原体低血清培养的方法，其特征在于，所述的步骤（1）中，猪血清与培养基的体积比为1:(8-12)。
6.根据权利要求5所述的一种用于猪肺炎支原体低血清培养的方法，其特征在于，所述猪血清与培养基的体积比为1:9。
7.根据权利要求4所述的一种用于猪肺炎支原体低血清培养的方法，其特征在于，所述的步骤（2）中，猪肺炎支原体菌液与培养液的体积比为1:(8-12)。
8.根据权利要求7所述的一种用于猪肺炎支原体低血清培养的方法，其特征在于，所述猪肺炎支原体菌液与培养液的体积比为1:10。
9.根据权利要求4所述的一种用于猪肺炎支原体低血清培养的方法，其特征在于，所述的步骤（2）中，摇瓶培养的温度为35-40℃。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201910901404.0A CN110607260A (zh) | 2019-09-23 | 2019-09-23 | 一种用于猪肺炎支原体低血清培养的培养基及方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201910901404.0A CN110607260A (zh) | 2019-09-23 | 2019-09-23 | 一种用于猪肺炎支原体低血清培养的培养基及方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN110607260A true CN110607260A (zh) | 2019-12-24 |
Family
ID=68892102
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201910901404.0A Pending CN110607260A (zh) | 2019-09-23 | 2019-09-23 | 一种用于猪肺炎支原体低血清培养的培养基及方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN110607260A (zh) |
Citations (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102154167A (zh) * | 2011-01-05 | 2011-08-17 | 北京大北农科技集团股份有限公司 | 一种猪肺炎支原体培养基及其制备方法 |
| CN103060220A (zh) * | 2012-08-31 | 2013-04-24 | 南京天邦生物科技有限公司 | 一种低血清高效培养猪肺炎支原体培养基及其制备方法 |
| CN103555641A (zh) * | 2013-11-19 | 2014-02-05 | 浙江美保龙生物技术有限公司 | 一种猪肺炎支原体培养基及其制备方法 |
| CN105779362A (zh) * | 2016-05-16 | 2016-07-20 | 南京大爻网络科技有限公司 | 一种低血清培养猪肺炎支原体培养基及其制备方法和应用 |
| CN106434502A (zh) * | 2016-12-23 | 2017-02-22 | 瑞普（保定）生物药业有限公司 | 一种猪肺炎支原体培养基及其制备方法和应用 |
| CN106497826A (zh) * | 2016-09-29 | 2017-03-15 | 内蒙古金源康生物工程有限公司 | 低血清高效培养猪肺炎支原体培养基及其制备方法 |
| CN106906159A (zh) * | 2017-03-03 | 2017-06-30 | 江苏南农高科技股份有限公司 | 一种猪肺炎支原体培养基及其制备方法 |
| CN109055255A (zh) * | 2018-07-13 | 2018-12-21 | 北京农学院 | 猪肺炎支原体培养基及制备方法和其在疫苗中的应用 |
-
2019
- 2019-09-23 CN CN201910901404.0A patent/CN110607260A/zh active Pending
Patent Citations (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102154167A (zh) * | 2011-01-05 | 2011-08-17 | 北京大北农科技集团股份有限公司 | 一种猪肺炎支原体培养基及其制备方法 |
| CN103060220A (zh) * | 2012-08-31 | 2013-04-24 | 南京天邦生物科技有限公司 | 一种低血清高效培养猪肺炎支原体培养基及其制备方法 |
| CN103555641A (zh) * | 2013-11-19 | 2014-02-05 | 浙江美保龙生物技术有限公司 | 一种猪肺炎支原体培养基及其制备方法 |
| CN105779362A (zh) * | 2016-05-16 | 2016-07-20 | 南京大爻网络科技有限公司 | 一种低血清培养猪肺炎支原体培养基及其制备方法和应用 |
| CN106497826A (zh) * | 2016-09-29 | 2017-03-15 | 内蒙古金源康生物工程有限公司 | 低血清高效培养猪肺炎支原体培养基及其制备方法 |
| CN106434502A (zh) * | 2016-12-23 | 2017-02-22 | 瑞普（保定）生物药业有限公司 | 一种猪肺炎支原体培养基及其制备方法和应用 |
| CN106906159A (zh) * | 2017-03-03 | 2017-06-30 | 江苏南农高科技股份有限公司 | 一种猪肺炎支原体培养基及其制备方法 |
| CN109055255A (zh) * | 2018-07-13 | 2018-12-21 | 北京农学院 | 猪肺炎支原体培养基及制备方法和其在疫苗中的应用 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 上海农业科学研究院畜牧兽医研究所编: "青海省畜牧业标准汇编 2", 出版发行 : 上海科学技术情报研究所, pages: 502 - 6 * |
| 郑传发: "猪肺炎支原体单克隆抗体的制备及初步应用", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库》, 15 December 2007 (2007-12-15), pages 22 * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN106906159B (zh) | 一种猪肺炎支原体培养基及其制备方法 | |
| CN109628359B (zh) | 一株可缓解过敏性哮喘的罗伊氏乳杆菌及其应用 | |
| CN101773667A (zh) | 一种猪圆环病毒ii型疫苗制备 | |
| CN103060221A (zh) | 一种连续增菌培养鸡毒支原体培养基及制备方法 | |
| CN109806389B (zh) | 一种副猪嗜血杆菌三价灭活疫苗及其应用 | |
| CN106479936A (zh) | 一种绵羊肺炎支原体低血清培养基及其制备方法 | |
| CN110201153B (zh) | 一种兔病毒性出血症、巴氏杆菌病、波氏杆菌病三联灭活疫苗及其制备方法 | |
| CN110812473A (zh) | 一种副猪嗜血杆菌病、猪链球菌病和猪多杀性巴氏杆菌病三联灭活疫苗及其制备方法 | |
| Tsai et al. | The effect of infection order of porcine circovirus type 2 and porcine reproductive and respiratory syndrome virus on dually infected swine alveolar macrophages | |
| CN102559531B (zh) | 一种副猪嗜血杆菌5型高密度发酵培养基及应用 | |
| CN110607260A (zh) | 一种用于猪肺炎支原体低血清培养的培养基及方法 | |
| CN111690554B (zh) | 用于制备羊支原体肺炎疫苗的组合菌株、羊支原体肺炎三价灭活疫苗及其制备方法 | |
| CN107201326B (zh) | 一株传染性胸膜肺炎放线杆菌及其应用 | |
| CN109010814B (zh) | 副猪嗜血杆菌和猪肺炎支原体二联灭活疫苗的生产方法 | |
| CN110804563A (zh) | 一种用于猪肺炎支原体低血清培养的培养基 | |
| KR101245029B1 (ko) | 한국형 돼지 생식기 호흡기 증후군 바이러스 예방 백신 조성물 | |
| CN109913396B (zh) | 一种液体培养基及利用其分离培养鸡毒支原体的方法 | |
| CN104017856A (zh) | 一种猪肺炎支原体选择性分离培养基及其制备方法 | |
| CN107090428B (zh) | 自体来源的间充质干细胞向鼻粘膜样上皮细胞分化方法及试剂盒 | |
| CN109082388A (zh) | 鸭大肠杆菌高密度发酵培养基及其制备方法 | |
| RU2438709C1 (ru) | Сыворотка против болезней крупного рогатого скота, вызываемых вирусами инфекционного ринотрахеита, парагриппа, рота, корона и диареи - болезни слизистых, полиспецифическая гипериммунная, способ профилактики и лечения болезней крупного рогатого скота, вызываемых вирусами инфекционного ринотрахеита, парагриппа, рота, корона и диареи - болезни слизистых | |
| WO2021134740A1 (zh) | 一种缓解断奶仔猪腹泻的藏猪粪菌胶囊及其制备方法 | |
| CN110241090B (zh) | 一种全悬浮细胞培养生产猪伪狂犬病毒抗原的方法 | |
| CN110452855A (zh) | 一种无血清绵羊肺炎支原体抗原的制备方法 | |
| CN112126628A (zh) | 山羊痘病毒的增殖方法、山羊痘活疫苗及其制备方法和应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20191224 |
|
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |