CN110591966A - 一种环境除臭复合菌剂及制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及微生物环境保护领域，目的是提供一种能高效除臭的环境除臭复合菌剂及制备方法。本发明含荚膜光合菌8％—20％；沼泽红假单胞菌5％—10％；红萍红球菌8％—12％；枯草芽孢杆菌6％—10％；植物乳杆菌8％—15％；硝化细菌3％—10％；反硝化细菌5％—8％；酒精酵母2％—5％；地衣芽孢杆菌8％—15％；醋杆菌5％—10％。本发明优选菌种配伍，并经过复合发酵，菌种之间互补拮抗，和谐生长，实用性强，且提高畜禽的免疫力。本发明所述方法制得的“复合菌剂”稀释50—100倍喷洒在畜禽圈舍地面上，只需20分钟左右，可将有害氨气、硫化氢气体从100ppm降到18ppm以下；不造成二次污染。

Description

一种环境除臭复合菌剂及制备方法
技术领域
本发明涉及微生物环境保护领域，尤其涉及一种环境除臭复合菌剂的制备方法。
背景技术
随着农业结构的不断调整、变化，我国畜禽牧业在养殖规模和质量上都得到了快速发展；但与此同时，畜禽养殖所带来的环境污染问题十分严重。受养殖模式、养殖成本等因素的影响，畜禽养殖过程中产生的污水、粪便、饲料残渣等污染物堆积如山，无法得到科学集中处理，畜禽圈舍内氨气有害气体高达50ppm—100ppm以上，硫化氢气体有的高达20ppm—50ppm以上。不仅对生态环境造成负面影响，也给畜禽健康成长、无害化养殖与人类健康造成严重威胁(当空气中氨达到37.5mg/m3时，能使生猪增重滞缓，达到50mg/m3时，饲喂的小猪4周采食量下降15.6％，饲料利用率下降18％；当空气中的硫化氢达到30mg/m3时，猪变得畏光、丧失食欲、神经质；当达到75mg/m3时，猪会突然呕吐、失去知觉，最后呼吸中枢和运动中枢麻痹而死亡)，严重制约了我国畜禽牧业的可持续发展。
市场上目前有很多“环境除臭剂”，多是利用化学芳香类物质化学掩盖，治标不治本，造成二次环境污染。虽然市场上流通许多“微生物除臭制剂”，但活性不高，加上复合菌配伍不合理，造成“除臭剂”效果不理想，或是前期有效果、后期效果差。
发明内容
本发明的目的是提供一种能高效除臭的环境除臭复合菌剂及制备方法。
为实现上述发明目的，本发明所采用的技术方案是：一种环境除臭复合菌剂，由如下活菌数比例的微生物组成：荚膜光合菌8％—20％；沼泽红假单胞菌5％—10％；红萍红球菌8％—12％；枯草芽孢杆菌6％—10％；植物乳杆菌8％—15％；硝化细菌3％—10％；反硝化细菌5％—8％；酒精酵母2％—5％；地衣芽孢杆菌8％—15％；醋杆菌5％—10％。
相应的，一种环境除臭复合菌剂的制备方法，步骤包括：
将各菌种的种子液按照重量进行百分比配合：荚膜光合菌8％—20％；沼泽红假单胞菌5％—10％；红萍红球菌8％—12％；枯草芽孢杆菌6％—10％；植物乳杆菌8％—15％；硝化细菌3％—10％；反硝化细菌5％—8％；酒精酵母2％—5％；地衣芽孢杆菌8％—15％；醋杆菌5％—10％；无菌地接入含有复合培养基的发酵罐中，接种量8％—12％，培养温度为30度—34度；加消泡剂0.02％；转速160r/min—200r/min；通气量1:0.8(发酵罐培养液体积：纯净空气体积)；培养时间36—65小时，即得到液体复合除臭菌剂。
优选的，所述的复合培养基由如下重量比组分组成：糖蜜0.8％— 2.0％；葡萄糖0.6％—1.0％；土豆粉1.4％—1.8％；豆粕粉(过70目筛) 1.3％——1.7％；硫酸镁0.02％—0.04％；木醋酸1.2％—1.8％；尿素0.1％—0.12％；磷酸二氢钾0.02％—0.06％；蛋白胨0.09％—0.13％；酵母膏0.03％—0.07％；余量为水；调至PH值7—7.2；在温度121度情况下灭菌30 分钟。
优选的，所述种子液中，夹馍光合菌、沼泽红假单胞菌、红萍红球菌是由试管母种在无菌条件下，分别接种于液体500ml三角瓶，在光合细菌专用液体培养基中进行培养，每瓶装液量200ml，温度设定32度— 34度，在180r/min摇床中培养2—3天获得。
优选的，光合菌专用液体培养基组份(重量比)为：乙酸钠0.15％—0.35％；酵母膏0.03％—0.1％；糖蜜1.2％—2.0％；氯化铵0.04％—0.1％；磷酸二氢钾0.01％—0.02％；氯化镁0.001％—0.002％；氯化钙0.02％— 0.03％；硫酸镁0.01％—0.03％；土豆粉0.5％—1.0％；氯化钠0.05％—0.1％；碳酸氢钠0.05％—0.1％；氢氧化钠0.01％—0.02；六水氯化亚铁0.5mg％；硼酸0.1mg％—0.2mg％；四水氯化锰0.02mg％—0.03mg％；余量为水；121 度灭菌30分钟。
优选的，所述种子液中，枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌、硝化细菌、反硝化细菌、酒精酵母、地衣芽孢杆菌、醋杆菌是由试管母种在无菌的条件下，接种于液体500ml三角瓶，装液量200ml,在“牛肉膏蛋白胨”肉汤培养基中进行培养(培养基121度灭菌30分钟)，温度设置32度—34度，在200r/min摇床中培养2—3天获得。
优选的，所述的试管母种是将荚膜光合菌、沼泽红假单胞菌、红萍红球菌、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌、硝化细菌、反硝化细菌、酒精酵母、地衣芽孢杆菌、醋杆菌分别在“牛肉膏蛋白胨固体”营养培养基上进行母种斜面试管培养，设定温度32度—34度，培养2—3天获得。
优选的：所述种子液重量配比为：荚膜光合菌20％；沼泽红假单胞菌10％；红萍红球菌12％；枯草芽孢杆菌10％；植物乳杆菌10％；硝化细菌10％；反硝化细菌8％；酒精酵母5％；地衣芽孢杆菌5％；醋杆菌10％。
优选的：所述复合培养基重量配比为：糖蜜2.o％；葡萄糖1.0％；土豆粉1.8％；豆粕粉1.7％；硫酸镁0.03％；木醋酸1.8％；尿素0.1％；磷酸二氢钾0.03％；蛋白胨0.2％；酵母膏0.1％；余量为水。
优选的，所述复合菌剂制备为固体粉剂，具体步骤是：制备好的液体复合菌剂作为原液与轻质碳酸钙、腐熟好的有机肥、白炭黑载体混合；混合比例为：液体菌剂：载体＝＝1:1.2；其中载体含有机肥20％、轻质碳酸钙30％、白炭黑50％；用搅拌机充分搅拌均匀，放入干燥室进行45度干燥到水分低于8％；然后粉碎至80目以上细度；包装即得到固体粉状复合微生物除臭菌剂。
本发明具有以下有益效果：现有技术的微生物除臭剂，大多都是单菌培养，然后勾兑的产品，本身复配后产生相互拮抗，再加上复合菌配伍不合理，造成“除臭剂”效果不理想，或是前期有效果、后期效果差。而本发明优选菌种配伍，并经过复合发酵，菌种之间互补拮抗，和谐生长，实用性强，且提高畜禽的免疫力。本发明所述方法制得的“复合菌剂”稀释50—100倍喷洒在畜禽圈舍地面上，只需20分钟左右，可将有害氨气、硫化氢气体从100ppm降到18ppm以下；不造成二次污染。
具体实施方式
下面提供本发明的优选实施例，方便技术人员理解本发明的构思，但本发明的保护范围绝不仅限于下述实施例而是包含所有类似、等同的变换。
实施例一
步骤a：斜面培养：
将荚膜光合菌、沼泽红假单胞菌、红萍红球菌、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌、硝化细菌、反硝化细菌、酒精酵母、地衣芽孢杆菌、醋杆菌分别在“牛肉膏蛋白胨固体”营养培养基上进行母种斜面试管培养，设定温度32度—34度，培养2—3天备用。
步骤b：种子培养：
1：将步骤a培养的夹馍光合菌、沼泽红假单胞菌、红萍红球菌试管母种在无菌条件下，分别接种于液体500ml三角瓶(光合细菌专用培养基，装液量200ml)中进行培养，温度设定32度—34度，在180r/min 摇床中培养2—3天；
其中，光合菌专用液体培养基组份：
乙酸钠0.15％—0.35％；酵母膏0.03％—0.1％；糖蜜1.2％—2.0％；氯化铵0.04％—0.1％；磷酸二氢钾0.01％—0.02％；氯化镁0.001％—0.002％；氯化钙0.02％—0.03％；硫酸镁0.01％—0.03％；土豆粉0.5％—1.0％；氯化钠0.05％—0.1％；碳酸氢钠0.05％—0.1％；氢氧化钠0.01％—0.02；六水氯化亚铁0.5mg％；硼酸0.1mg％—0.2mg％；四水氯化锰0.02mg％— 0.03mg％；余量为水。121度灭菌30分钟。
2：将步骤a培养的枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌、硝化细菌、反硝化细菌、酒精酵母、地衣芽孢杆菌、醋杆菌试管母种在无菌的条件下，接种于500ml三角瓶中，“牛肉膏蛋白胨”肉汤培养基中进行培养(装液量200ml，培养基121度灭菌30分钟)，温度设置32度—34度，在200r/min摇床中培养2—3天。
实施例二
复合发酵培养：
步骤c:菌种类配比：
将实施例一中步骤b中的三角瓶中的种子液按照重量进行百分比配合：荚膜光合菌10％；沼泽红假单胞菌5％；红萍红球菌8％；枯草芽孢杆菌10％；植物乳杆菌15％；硝化细菌10％；反硝化细菌8％；酒精酵母2％；地衣芽孢杆菌8％；醋杆菌10％；
步骤d:发酵罐复合培养基：称取百分比如下的原料制作培养基进行灭菌处理：
糖蜜2.0％；葡萄糖1.0％；土豆粉1.8％；豆粕粉(过70目筛)1.7％；硫酸镁0.04％；木醋酸1.8％；尿素0.1％；磷酸二氢钾0.02％；蛋白胨0.09％；酵母膏0.03％；余量为水。调至PH值7.2；在温度121度情况下灭菌30 分钟。
步骤e：将步骤c中配比好的液体种子液，在无菌条件下接入灭好菌且温度降至35度左右的有复合培养基的发酵罐中，接种量10％，培养温度为30度；加消泡剂0.02％；转速200r/min；通气量1:0.8(发酵罐培养液体积：纯净空气体积)；培养时间48小时，即得到液体复合除臭菌剂。
实施例三
复合发酵培养：
步骤c:菌种类配比：
将实施例一中步骤b中的三角瓶中的种子液按照重量进行百分比配合：荚膜光合菌15％；沼泽红假单胞菌8％；红萍红球菌10％；枯草芽孢杆菌8％；植物乳杆菌12％；硝化细菌6％；反硝化细菌6％；酒精酵母3％；地衣芽孢杆菌12％；醋杆菌6％；
步骤d:发酵罐复合培养基：称取百分比如下的原料制作培养基进行灭菌处理：
糖蜜1.2％；葡萄糖0.8％；土豆粉1.6％；豆粕粉(过70目筛)1.5％；硫酸镁0.02％；木醋酸1.6％；尿素0.1％；磷酸二氢钾0.06％；蛋白胨0.1％；酵母膏0.05％；余量为水。调至PH值7；在温度121度情况下灭菌30 分钟。
步骤e：将步骤c中配比好的液体种子液，在无菌条件下接入灭好菌且温度降至35度左右的有复合培养基的发酵罐中，接种量10％，培养温度为32度；加消泡剂0.02％；转速180r/min；通气量1:0.8(发酵罐培养液体积：纯净空气体积)；培养时间64小时，即得到液体复合除臭菌剂。
实施例四
复合发酵培养：
步骤c:菌种类配比：
将实施例一中步骤b中的三角瓶中的种子液按照重量进行百分比配合：荚膜光合菌20％；沼泽红假单胞菌10％；红萍红球菌12％；枯草芽孢杆菌10％；植物乳杆菌10％；硝化细菌10％；反硝化细菌8％；酒精酵母 5％；地衣芽孢杆菌5％；醋杆菌10％：
步骤d:发酵罐复合培养基：称取百分比如下的培养基进行灭菌处理：糖蜜2.0％；葡萄糖1.0％；土豆粉1.8％；豆粕粉1.7％；硫酸镁0.03％；木醋酸1.8％；尿素0.1％；磷酸二氢钾0.03％；蛋白胨0.2％；酵母膏0.1％；余量为水。
步骤e：将步骤c中配比好的液体种子液，在无菌条件下接入灭好菌且温度降至35度左右的有复合培养基的发酵罐中，接种量10％，培养温度为32度；加消泡剂0.02％；转速180r/min；通气量1:0.8(发酵罐培养液体积：纯净空气体积)；培养时间64小时，即得到液体复合除臭菌剂。
实施例五
复合发酵培养：
步骤c:菌种类配比：
将实施例一中步骤b中的三角瓶中的种子液按照重量进行百分比配合：荚膜光合菌20％；沼泽红假单胞菌10％；红萍红球菌12％；枯草芽孢杆菌10％；植物乳杆菌8％；硝化细菌3％；反硝化细菌5％；酒精酵母5％；地衣芽孢杆菌8％；醋杆菌5％；
步骤d:发酵罐复合培养基：称取百分比如下的原料制作培养基进行灭菌处理：
糖蜜0.8％；葡萄糖0.6％；土豆粉1.4％；豆粕粉(70目)1.3％；硫酸镁0.02％；木醋酸1.8％；尿素0.12％；磷酸二氢钾0.06％；蛋白胨0.13％；酵母膏0.07％；余量为水。调至PH值7；在温度121度情况下灭菌30 分钟。
步骤e：将步骤c中配比好的液体种子液，在无菌条件下接入灭好菌且温度降至35度左右的有复合培养基的发酵罐中，接种量10％，培养温度为30度；加消泡剂0.02％；转速200r/min；通气量1:0.8(发酵罐培养液体积：纯净空气体积)；培养时间36小时，即得到液体复合除臭菌剂。即得到有效活菌数150亿/ml的液体除臭菌剂。
实施例六
固体粉剂的制备：
实施例三中步骤e做好的液体复合菌剂作为原液与轻质碳酸钙、腐熟好的有机肥、白炭黑载体混合。混合比例为：液体菌剂：载体＝＝1:1.2；其中载体为有机肥20％、轻质碳酸钙30％、白炭黑50％、按重量比复配获得。有机肥为市售有机质达到60％、总养分达到8以上的有机肥。用搅拌机充分搅拌均匀，放入干燥室进行45度干燥到水分低于8％；然后粉碎至80目以上细度；包装即得到固体粉状复合微生物除臭菌剂。
使用方法：
1：将本发明的“环境除臭复合菌剂”稀释50—100倍，用喷雾器均匀的喷洒在有害设施的空间(或地面上)中，在封闭的空间内只需20 分钟至30分钟即可消除其臭味。
2：在封闭的20平方设施内，用菌量50ml；厕所马桶用量10ml,倒进15分钟即可消除异味。
3、形状：银灰色粉剂，1公斤/袋，含有效活菌数150亿/ml
褐红色液体，1升/瓶，含有效活菌数150亿/ml
除臭效果：
1：材料与方法
1.1供试药剂：本发明实施例四的环境除臭复合菌剂液体(菌液)，含有效活菌数150亿/ml；试验场地安排在河南省洛阳市正大牧业有限公司6600育成示范场内。
1.2除臭的方法与实测过程
主要对NH3和H2S有害气体的变化、降解程度进行实测，用数据来验证“复合除臭剂”消除臭味的效果。
1.2.1实验设计
(1)专门设计在冬季寒冷季节、封闭的猪舍(圏)内，由于猪场封闭保温，圈舍内有害气体含量高；将“菌液”稀释100倍，用喷雾器在猪舍内的地面上均匀喷洒；在喷洒“菌液”之前，首先检测猪舍内NH3和H2S有害气体的含量，记录在案；然后待喷雾“复合菌剂”20分钟后再进行检测NH3与H2S的含量，查看其除臭效果。监测点分为：A猪场进口内2米处；B猪舍中间处；C猪舍离后窗两米处。
(2)恶臭检测设备方法
a.NH3采用次氯酸钠水杨酸分光光度法(GB/T14679—1993)；H2S采用(GB/T14678—1993)气象色谱仪—火焰光度检测仪(GCFPD)。
NH3与H2S测定还用了QG—1型大气采样仪(北京劳动保护科学研究所)的有害气体采样仪；进气速度1L/min，为了加快进气速度，专门配备了抽气泵装置。
(3)检测结果
表1：用NH3大气采样仪检测使用效果
表2：用H2S大气采样仪检测使用效果
表3：采用次氯酸钠水杨酸分光光度仪检测除NH3效果
表4：采用气象色谱仪火焰光度仪检测除H2S效果
总结：从以上4个表格的不同方法验证除臭效果数据，可以看出在猪舍内地面上喷洒本发明的“环境除臭复合菌剂”20分钟后，有害气体去除率大于70％以上，该菌剂具有显著消除NH3和H2S的功能。

Claims (10)

1.一种环境除臭复合菌剂，其特征在于：由如下活菌数比例的微生物组成：荚膜光合菌8％—20％；沼泽红假单胞菌5％—10％；红萍红球菌8％—12％；枯草芽孢杆菌6％—10％；植物乳杆菌8％—15％；硝化细菌3％—10％；反硝化细菌5％—8％；酒精酵母2％—5％；地衣芽孢杆菌8％—15％；醋杆菌5％—10％。
2.一种环境除臭复合菌剂的制备方法，其特征在于：步骤包括：将各菌种的种子液按照重量进行百分比配合：荚膜光合菌8％—20％；沼泽红假单胞菌5％—10％；红萍红球菌8％—12％；枯草芽孢杆菌6％—10％；植物乳杆菌8％—15％；硝化细菌3％—10％；反硝化细菌5％—8％；酒精酵母2％—5％；地衣芽孢杆菌8％—15％；醋杆菌5％—10％；
然后无菌地接入含有复合培养基的发酵罐中，接种量8％—12％，培养温度为30度—34度；加消泡剂0.02％；转速160r/min—200r/min；通气量1:0.8；培养时间36—65小时，即得到液体复合除臭菌剂。
3.根据权利要求2所述的环境除臭复合菌剂的制备方法，其特征在于：所述的复合培养基由如下重量比组分组成：糖蜜0.8％—2.0％；葡萄糖0.6％—1.0％；土豆粉1.4％—1.8％；豆粕粉(过70目筛)1.3％——1.7％；硫酸镁0.02％—0.04％；木醋酸1.2％—1.8％；尿素0.1％—0.12％；磷酸二氢钾0.02％—0.06％；蛋白胨0.09％—0.13％；酵母膏0.03％—0.07％；余量为水；调至PH值7—7.2。
4.根据权利要求2所述的环境除臭复合菌剂的制备方法，其特征在于：所述种子液中，夹馍光合菌、沼泽红假单胞菌、红萍红球菌是由试管母种在无菌条件下，分别接种于液体500ml三角瓶，在光合细菌专用液体培养基中进行培养，每瓶装液量200ml，温度设定32度—34度，在180r/min摇床中培养2—3天获得。
5.根据权利要求4所述的环境除臭复合菌剂的制备方法，其特征在于：所述光合菌专用液体培养基组份重量比为：乙酸钠0.15％—0.35％；酵母膏0.03％—0.1％；糖蜜1.2％—2.0％；氯化铵0.04％—0.1％；磷酸二氢钾0.01％—0.02％；氯化镁0.001％—0.002％；氯化钙0.02％—0.03％；硫酸镁0.01％—0.03％；土豆粉0.5％—1.0％；氯化钠0.05％—0.1％；碳酸氢钠0.05％—0.1％；氢氧化钠0.01％—0.02；六水氯化亚铁0.5mg％；硼酸0.1mg％—0.2mg％；四水氯化锰0.02mg％—0.03mg％；余量为水。
6.根据权利要求2所述的环境除臭复合菌剂的制备方法，其特征在于：所述种子液中，枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌、硝化细菌、反硝化细菌、酒精酵母、地衣芽孢杆菌、醋杆菌是由试管母种在无菌的条件下，接种于液体500ml三角瓶，装液量200ml,在“牛肉膏蛋白胨”肉汤培养基中进行培养，温度设置32度—34度，在200r/min摇床中培养2—3天获得。
7.根据权利要求4或6所述的环境除臭复合菌剂的制备方法，其特征在于：所述的试管母种是将荚膜光合菌、沼泽红假单胞菌、红萍红球菌、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌、硝化细菌、反硝化细菌、酒精酵母、地衣芽孢杆菌、醋杆菌分别在“牛肉膏蛋白胨固体”营养培养基上进行母种斜面试管培养，设定温度32度—34度，培养2—3天获得。
8.根据权利要求2-7任意一项所述的环境除臭复合菌剂的制备方法，其特征在于：所述种子液重量配比为：荚膜光合菌20％；沼泽红假单胞菌10％；红萍红球菌12％；枯草芽孢杆菌10％；植物乳杆菌10％；硝化细菌10％；反硝化细菌8％；酒精酵母5％；地衣芽孢杆菌5％；醋杆菌10％。
9.根据权利要求2-7任意一项所述的环境除臭复合菌剂的制备方法，其特征在于：所述复合培养基重量配比为：糖蜜2.o％；葡萄糖1.0％；土豆粉1.8％；豆粕粉1.7％；硫酸镁0.03％；木醋酸1.8％；尿素0.1％；磷酸二氢钾0.03％；蛋白胨0.2％；酵母膏0.1％；余量为水。
10.根据权利要求2-7任意一项所述的环境除臭复合菌剂的制备的固体粉剂，其特征在于：制备好的液体复合菌剂作为原液与轻质碳酸钙、腐熟好的有机肥、白炭黑载体混合；混合比例为：液体菌剂：载体＝＝1:1.2；其中载体含有机肥20％、轻质碳酸钙30％、白炭黑50％；用搅拌机充分搅拌均匀，放入干燥室进行45度干燥到水分低于8％；然后粉碎至80目以上细度；包装即得到固体粉状复合微生物除臭菌剂。
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