CN1105857A - 水剂 - Google Patents

Abstract

含至少一种精氨酰胺和至少一种选自环糊精和 咖啡因的化合物的水剂，所述精氨酰胺选自(2R，4R)-4-甲基-1-[N²-((RS)-3-甲基-1，2，3，4-四氢-8-喹啉磺酰基)-L-精氨酰基]-2-哌啶羧酸、其一水合物及其药学上可接受的盐；改善精氨酰胺水溶性的方法，它包括添加至少一种选自环糊精和咖啡因的化合物；和在水中稳定精氨酰胺的方法，它包括添加咖啡因。按照本发明，精氨酰胺的水溶性可增加至例如在内视手术时能抑制纤维蛋白形成的浓度。此外可以增强精氨酰胺在水中的稳定性而对眼睛的刺激较小。

Description

本发明涉及含至少一种精氨酰胺的水剂，所述精氨酰胺选自（2R，4R）-4-甲基-1-[N²-（（RS）-3-甲基-1，2，3，4-四氢-8-喹啉磺酰基）-L-精氨酰基]-2-哌啶羧酸、其一水合物及其药学上可接受的盐；所述水剂可在例如内视手术（cntopic operation）中用作抑制纤维蛋白形成的活性成分，其中，精氨酰胺作为药物的有效效用已得到改进。更具体地讲，本发明涉及水性组合物，其中精氨酰胺的溶解性得到提高；并涉及精氨酰胺的稳定性得到增强的水性组合物。此外，本发明涉及增进作为药物的精氨酰胺的有效效用的方法，尤其是涉及提高精氨酰胺溶解性的方法和增强其稳定性的方法。

按常规，白内障、玻璃体、青光眼等的内视手术后使用类固醇或消炎痛，这是因为常常形成纤维蛋白而引起术后并发症。但手术后服用几周所述化合物后，并未显示出可靠的效应，却导致伤口的愈合延迟，或者引起角膜的疾病，尽管这种情况并不常见。

纤维蛋白由纤维蛋白原经凝血酶裂解纤维蛋白原的精氨酸-苷键而形成。由于上述的精氨酰胺具有强效选择性的抗凝血酶作用（日本专利公开第48829/1986号），因此预期该化合物可作为滴眼剂或内视灌注液（cntopic    perfusate）用于在内视手术中抑制纤维蛋白的形成。

以上述的精氨酰胺之一，（2R，4R）-4-甲基-1-[N²-（（RS）-3-甲基-1，2，3，4-四氢-8-喹啉磺酰基）-L-精氨酰基]-2-哌啶羧酸-水合物（通常称作argatroban）为例，作为用于上述目的的滴眼剂或内视灌注液，它按1mg/ml或大于1mg/ml的浓度来使用。所述argatroban在水中的溶解度极小，在pH范围为7.2-7.8    25℃时，其溶解度为约0.9mg/ml，优选用于局部眼部位。因此，有必要改善其溶解性，并因而改善argatroban作为药物的效用。虽然argatroban的水溶液可稳定地保存在棕色瓶中，但提高其稳定性会使argatroban作为药物发挥更大的效用。

迄今已知精氨酰胺用包括加糖和醇（美国专利第5214052号）的方法来溶解。

由于局部眼部位如角膜对刺激具有极强的敏感性，而糖和醇本身刺激眼睛且这些化合物的加量较大，因此这样的加糖和醇的方法是不合需要的。因此实际上还没有令人满意的含精氨酰胺特别是argatroban的作为滴眼剂或内视灌注液的水剂。

本发明的目的是提供含作为药物的有效效用得到增强的含精氨酰胺的水剂，尤其是提供溶解性得到提高的精氨酰胺的水剂和稳定性得到增强的精氨酰胺的水剂。

本发明的另一个目的是提供增进精氨酰胺作为水剂形式药物的有效效用的方法，具体来讲，是提供提高精氨酰胺的溶解性的方法和增强其稳定性的方法。

现已发现：环糊精或咖啡因甚至少量就能显著提高精氨酰胺特别是argatroban在水中的溶解性；咖啡因甚至少量就能显著增强精氨酰胺特别是argatroban在水中对光的稳定性；以及含精氨酰胺并加有咖啡因和/或环糊精的水剂对眼睛刺激较小。

因此，本发明提供一种水剂，它包括至少一种选自结构为下式的精氨酰胺：（2R，4R）-4-甲基-1-[N²-（（RS）-3-甲基-1，2，3，4-四氢-8-喹啉磺酰基）-L-精氨酰基]-2-哌啶羧酸、其一水合物及其药学上可接受的盐，并包括至少一种选自环糊精和咖啡因的化合物。所述化学式如下：

本发明也提供提高精氨酰胺在水中的溶解性的方法，它包括加入至少一种选自环糊精和咖啡因的化合物。

此外，本发明提供使精氨酰胺在水中稳定的方法，它包括加入咖啡因。

用于本发明的精氨酰胺的药学上可接受的盐是与无机酸形成的盐如盐酸盐、硫酸盐、氢溴酸盐和磷酸盐；有机酸形成的盐如富马酸盐、酒石酸盐、琥珀酸盐、柠檬酸盐和甲磺酸盐；碱金属盐如钠盐和钾盐；碱土金属盐如钙盐；以及其它盐类如铵盐。优选的精氨酰胺是argatroban。

本发明的水性组合物优选用作滴眼剂或内视灌注液。

在本发明中，通过加入至少一种选自环糊精和咖啡因的化合物而使精氨酰胺在水中的溶解性得以提高。

在本发明中为增强精氨酰胺在水中的稳定性而加入咖啡因。

本发明的水性组合物可通过将精氨酰胺和上述的化合物溶于水中来获得。若用作滴眼剂，本发明水性组合物中精氨酰胺的浓度一般为约0.01-1（W/V）%，优选约0.05-0.5（W/V）%。若用作内视灌注液，本发明水性组合物中精氨酰胺的浓度一般为约0.0001-1（W/V）%，优选约0.001-0.5（W/V）%。

用在本发明中的环糊精可以是α-化合物，β-化合物或γ-化合物，优选β-化合物。

环糊精一般按0.01-20（W/V）%、优选约0.05-10（W/V）%的浓度来添加，根据本发明中所用的环糊精的种类来变动。咖啡因按0.01-3.0（W/V）%、优选约0.05-2.0（W/V）%的浓度来添加。当按特定的量添加时，精氨酰胺的溶解性和稳定性得到改善。

本发明的水性组合物可以含有下列可用于水剂、特别是可用于滴眼剂和内视灌注液的各种添加剂。

适于用作缓冲剂的例子有磷酸盐缓冲剂、硼酸盐缓冲剂、柠檬酸盐缓冲剂、酒石酸盐缓冲剂、乙酸盐缓冲剂和氨基酸。

适于用作等渗调节剂的例子有糖类，如山梨酸、葡萄糖和甘露糖醇，多元醇类，如甘油和丙二醇，以及盐类如氯化钠。

适于用作防腐剂的例子有季铵盐类，如氯苄烷铵和氯苄乙铵，对羟苯甲酸酯类，如对羟苯甲酸甲酯和对羟苯甲酸乙酯，苄醇，苯乙醇和山梨酸及其盐，硫汞撒和氯代丁醇。

适于用作增稠剂的例子有羟乙基纤维素、羟丙基纤维素、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羧甲基纤维素及其盐。

当本发明水性组合物用作滴眼剂时，其pH一般为约3-9，优选为约4-8；若用作内视灌注液，其pH一般为约6-8.5，优选为约7-8。

尽管生产本发明水剂的方法因该水剂的种类而有差异，但本身已知的方法可用于各液剂。

本发明将通过实施例和参考例的说明进一步详述。

实施例1-溶解性试验

argatroban在水中的溶解性通过使用多种化合物来测定。

将过量的argatroban加至含浓度为1.0W/V%的一种化合物的磷酸盐缓冲液（pH7.0）中，并将混合物于25℃振摇12小时。用HPLC测定溶于该溶液中的argatroban的量以测定溶解度。结果见表1。

表1

化合物        添加量(W/V%)        溶解度(%)

未加        -        0.0930

α-环糊精        1.0        0.1340

β-环糊精        1.0        0.2590

γ-环糊精        1.0        0.1324

咖啡因        1.0        0.2001

如表1所示，α-环糊精、β-环糊精、γ-环糊精和咖啡因均可使溶解度得到较大改善，尤其是β-环糊精和咖啡因，它们所获得的argatroban的溶解度分别约为未加化合物的三倍和二倍。

下文中所要述及的参考实施例1清楚地表明，纤维蛋白的形成被浓度为0.1W/V%的argatroban抑制约50%，被浓度为0.2W/V%的argatroban完全抑制。

应该懂得：添加环糊精和/或咖啡因、特别是咖啡因和β-环糊精有助于得到argatroban的临床有效浓度。

用家兔分别检测由上述的α-环糊精、β-环糊精、γ-环糊精和咖啡因的溶液产生的眼睛刺激作用，结果未发现特殊问题，因而表明对眼组织无害。

基于上述试验结果，发现使用环糊精和/或咖啡因有助于显著增强溶解度。

实施例2-稳定性试验

将含0.05W/V%或0.1W/V%argatroban和具有下表2所示的配方1-6的水溶液（pH7）灌入玻璃安瓿中并于暗中并于暗处保存或在每小时600000勒的光照射下保存。检测各溶液的pH、外观、不溶物和argatroban的残留量。结果见表3。

表2

0.05W/V%argatroban        配方1        配方2        配方3

水溶液

Argatroban        0.05%        0.05%        0.05%

咖啡因        -        0.25%        0.5%

磷酸二氢钠        0.1%        0.1%        0.1%

0.1%argatroban        配方4        配方5        配方6

水溶液

Argatroban        0.1%        0.1%        0.1%

咖啡因        -        0.5%        1.0%

磷酸二氢钠        0.1%        0.1%        0.1%

注:%=W/V%

表3

argatroban水溶液(pH7)对光的稳定性

外观        pH        残留量(%)

配方1

(遮光)        无色且清彻        7.05        100

(光照)        淡棕色且略混浊        6.83        32.1

配方2

(遮光)        无色且清彻        7.04        100

(光照)        淡棕色且略混浊        6.93        73.6

配方3

(遮光)        无色且清彻        7.08        100

(光照)        淡棕色且略混浊        7.01        78.7

配方4

(遮光)        无色且清彻        7.00        100

(光照)        淡棕色且略混浊        6.88        66.3

配方5

(遮光)        无色且清彻        7.00        100

(光照)        淡棕色且略混浊        6.97        82.1

配方6

(遮光)        无色且清彻        7.00        100

(光照)        淡棕色且略混浊        6.99        87.6

如表3结果所示，咖啡因使argatroban对光的稳定性得到改善。

参考实施例-Argatroban的浓度和前囊（anterior    sac）中纤维蛋白形成的抑制作用

所用动物：18只重2Kg的着色家兔且经肉眼观察其眼睛未见异常

所用药物：试验药物（按实施例1的滴眼剂制备的浓度为0.1W/V%或0.2W/V%的argatroban的溶液）

：对照（生理盐水）

试验：用氩激光器（AC-3500，Nidek）照射虹膜的四个部位使在前囊形成纤维蛋白。该照射按斑大小为100μm、时间0.2秒及输出为1瓦来进行。在照射结束直至照射后3小时，按照下述用狭缝灯随时间肉眼观察的评估标准，评估前囊中的纤维蛋白。

在从激光照射前30分钟至照射后30分钟这段时间，每隔10分钟给一只眼睛滴注50μl试验药物argatroban，共给药7次，另一只眼睛给生理盐水。

狭缝灯观察：给用激光器照射的4个部位存在的纤维蛋白分级（0或1）。若纤维蛋白的量大，则该级加倍。瞳孔区中的纤维蛋白按0-4点五个等级区分，总点数是：照射部位：4点×2+瞳孔区：4点=12点。

试验结果

在激光照射后0.5小时，对照组中前囊中的纤维蛋白的量达到最大值，并且纤维蛋白在1小时内随时间消失。浓度为0.1W/V%的试验药物显著抑制每个测定点的纤维蛋白的形成。抑制百分数为约50%。试验药物在浓度为0.2W/V%时完全抑制纤维蛋白的形成。

制剂实施例1-滴眼剂

按以下配方制备滴眼剂。

argatroban        0.2g

咖啡因        0.5g

吐温-80        0.1g

氯苄烷铵        0.01g

磷酸二氢钠        0.1g

氯化钠        0.8g

1N盐酸        1ml

氢氧化钠        适量

灭菌净化水        适量

总计        100ml（pH7）

制剂实施例2-滴眼剂

按以下配方制备滴眼剂。

Argatroban        0.2g

β-环糊精        1.0g

硼酸        1.8g

四硼酸钠        0.5g

氢氧化钠        适量

灭菌净化水        适量

总计        100ml（pH7）

制剂实施例3-内视灌注液。

按以下配方制备内视灌注液。

Argatroban        0.15g

葡萄糖        0.15g

咖啡因        0.5g

氯化钠        0.6g

氯化钾        0.05g

氯化钙        0.02g

硫酸镁        0.03g

碳酸氢钠        0.2g

盐酸        适量

灭菌净化水        适量

总计        100ml（pH7）

按照本发明的水剂，通过使用至少一种选自环糊精和咖啡因的化合物可以增强精氨酰胺在水中的溶解性，因此，其浓度可以增加至例如在内视手术时能抑制纤维蛋白形成的浓度。此外，与精氨酰胺一同使用咖啡因能增强精氨酰胺对光的稳定性。

因此，本发明可以增进精氨酰胺作为药物的有效效用。

Claims (12)

1、一种水剂，它包含至少一种精氨酰胺，所述精氨酰胺选自(2R，4R)-4-甲基-1-[N²((RS)-3-甲基-1，2，3，4-四氢-8-喹啉磺酰基)-L-精氨酰基]-2-哌啶羧酸、其一水合物及其药学上可接受的盐，它并包含至少一种选自环糊精和咖啡因的化合物。

2、权利要求1的水剂，它包含浓度为0.01-20W/V%的环糊精。

3、权利要求2的水剂，它包含浓度为0.05-10W/V%的环糊精。

4、权利要求1的水剂，它包含浓度为0.01-3.0W/V%的咖啡因。

5、权利要求4的水剂，它包含浓度为0.05-2.0W/V%的咖啡因。

6、权利要求1的水剂，其中，环糊精是β-化合物。

7、权利要求1的水剂，其pH为3-9。

8、权利要求1的水剂，其pH为6-8.5。

9、提高精氨酰胺溶解性的方法，它包括：将至少一种选自环糊精和咖啡因的化合物加至含至少一种精氨酰胺的水溶液中，所述精氨酰胺选自（2R，4R）-4-甲基-1-[N²-（（RS）-3-甲基-1，2，3，4-四氢-8-喹啉磺酰基）-L-精氨酰基]-2-哌啶羧酸、其一水合物及其药学上可接受的盐。

10、稳定精氨酰胺的方法，它包括将咖啡因加至含至少一种精氨酰胺的水溶液中，所述精氨酰胺选自（2R，4R）-4-甲基-1-[N²-（（RS）-3-甲基-1，2，3，4-四氢-8-喹啉磺酰基）-L-精氨酰基]-2-哌啶羧酸、其一水合物及其药学上可接受的盐。

11、权利要求1的水剂，它是滴眼剂。

12、权利要求1的水剂，它是内视灌注液。