CN110564508B - 一种复配精油、制备方法及其在饲料中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种复配精油、制备方法及其在饲料中的应用。该复配精油由葛缕子精油、柠檬草精油、香旱芹精油、紫苏叶精油按4‑6：1‑2：3‑5：2‑4的比例组成，按照单凝聚法制成含有10％复配精油的微囊，按0.05‑0.1％的比例添加到饲料中。该复配精油具有良好的抑菌作用，添加到禽类饲料中能调理肠胃，促进消化，增加食欲，从而促进动物增重，而且疗效确切，无明显毒副作用，安全可靠，应用前景广阔。
Description
技术领域
本发明涉及一种复配精油，更具体地涉及一种由葛缕子精油、柠檬草精油、香旱芹精油与紫苏叶精油组成的复配精油，该复配精油的制备方法以及该复配精油在动物饲料中的应用。
背景技术
近年来我国的养殖业飞速发展，安全高效、环境友好型活性功能饲料开发已成了当今养殖工作者研究的热点。植物精油作为一种绿色新型的添加剂，在动物饲料中产生积极的影响。精油具有抑菌、抗病毒、多功能性等特点，因此将其应用到畜禽生产上，可作为抗生素部分或全部替代品，符合畜禽健康养殖发展方向，促进动物生长、降低疾病发生率等，是一类安全、高效、绿色的饲料添加剂。
然而由于精油活性成分提取效率低、使用剂量难以确定、稳定性差、易挥发等问题的存在使得其在饲料加工过程中，经过动物消化道过程中，存在易损失、过胃难等问题，很难作为新型饲料添加剂实现产业化和推广。本发明根据植物精油提取率低、热稳定性差的特点，通过优化提取工艺以及先进的微囊包被技术，较好的解决了复配植物精油的提取效率低和稳定性差等问题。
本发明人经过大量的各配方比例的研究和实验，最后获得了本发明的最佳药物比例的复配精油，并证明了其在饲料中的积极作用，并由此完成了本发明。本发明提供了一种复配精油，该精油用于动物饲料中可以代替抗生素起到抑菌作用，调理肠胃，促进消化，增加食欲从而促进动物增重。根据中药配方规律，科学组方，安全有效，原料易得，制备工艺简单，易于操作，且生产成本低，发明成果具有的明显经济效益和显著的社会、生态效益。
发明内容
本发明第一个目的在于提供一种复配精油，该复配精油价廉易得、疗效确切、安全可靠，便于应用推广。
本发明第二个目的在于提供上述复配精油的制备方法。
本发明第三个目的在于提供上述复配精油在饲料中的应用。
本发明提供的一种复配精油，由葛缕子精油、柠檬草精油、香旱芹精油和紫苏叶精油按4-6：1-2：3-5：2-4的比例组成。
上述复配精油，其中葛缕子精油、柠檬草精油、香旱芹精油和紫苏叶精油的用量比例是5:2:4:3。
优选地，上述复配精油中葛缕子精油的制备方法是：
取葛缕子，粉碎，过筛，置圆底烧瓶中，加入15倍量蒸馏水，用盐酸调节pH至5.0后向容器中加入1.5％的纤维素酶，稍作搅拌，置于水浴锅内50℃恒温酶解40min，然后采用水蒸气蒸馏法，安装好挥发油提取器，加热至水沸腾后开始计时，蒸馏2h后，收集精油，即得。
上述复配精油中柠檬草精油的制备方法是：
取柠檬草，粉碎，过筛，置于圆底烧瓶中，加入15倍量石油醚进行超声提取，超声波频率设定在600W，在80℃下提取1h，过滤，滤液回收石油醚并挥干，即得。
上述复配精油中香旱芹精油的制备方法是：
取香旱芹，干燥，粉碎，过筛，放入超临界CO2萃取釜中，夹带剂乙醇用量固液比为1.5ml/mg，萃取条件为：萃取压力40MPa、萃取温度50℃、萃取时间3.0h、CO2流速25kg/h。萃取液过滤，用旋转蒸发仪回收乙醇并挥干，即得。
上述复配精油中紫苏叶精油的制备方法是：
取紫苏叶，干燥，粉碎，过筛，置圆底烧瓶中，加入16倍量蒸馏水，用盐酸调节pH至4.5后向容器中加入1％的复合酶(纤维素酶与果胶酶按1：1混合)，置于水浴锅内45℃恒温酶解40min，转入微波动态萃取设备料桶中，设置微波功率为800W，微波辐射30min。在微波萃取设备上接挥发油分离器，收集蒸馏出的精油，即得。
本发明还提供了该复配精油的优选的制备方法，包括：
(1)葛缕子精油的制备
取葛缕子，粉碎，过筛，置圆底烧瓶中，加入15倍量蒸馏水，用盐酸调节pH至5.0后向容器中加入1.5％的纤维素酶，稍作搅拌，置于水浴锅内50℃恒温酶解40min，然后采用水蒸气蒸馏法，安装好挥发油提取器，加热至水沸腾后开始计时，蒸馏2h后，收集精油，即得。
(2)柠檬草精油的制备
取柠檬草，粉碎，过筛，置于圆底烧瓶中，加入15倍量石油醚进行超声提取，超声波频率设定在600W,在80℃下提取1h，过滤，滤液回收石油醚并挥干，即得。
(3)香旱芹精油的制备
取香旱芹，干燥，粉碎，过筛，放入超临界CO2萃取釜中，夹带剂乙醇用量固液比为1.5ml/mg，萃取条件为：萃取压力40MPa、萃取温度50℃、萃取时间3.0h、CO2流速25kg/h。萃取液过滤，用旋转蒸发仪回收乙醇并挥干，即得。
(4)紫苏叶精油的制备
取紫苏叶，干燥，粉碎，过筛，置圆底烧瓶中，加入16倍量蒸馏水，用盐酸调节pH至4.5后向容器中加入1％的复合酶(纤维素酶与果胶酶按1：1混合)，置于水浴锅内45℃恒温酶解40min，转入微波动态萃取设备料桶中，设置微波功率为800W，微波辐射30min。在微波萃取设备上接挥发油分离器，收集蒸馏出的精油，即得。
(5)按比例选取葛缕子精油、柠檬草精油、香旱芹精油和紫苏叶精油均匀混合，即得。
所述用于饲料的复配精油，按照单凝聚法制成含有10％复配精油的微囊，按0.05-0.1％的比例添加到饲料中。。
本发明还阐述了复配精油在禽类饲料中的用途。
本发明复配精油在禽类饲料方面的有益效果如下：
1.本发明复配精油均来源于天然植物，价廉易得，工艺简单又能使其有效成分富集，在饲料中的积极作用可靠稳定不反弹且无毒副作用，适合长期使用。
2.本发明人独创地将葛缕子精油、柠檬草精油、香旱芹精油和紫苏叶精油进行组合，并通过大量实验确定这些组分之间的用量配比，使该复配精油具有明显的协同增效作用，在禽类饲料中具有抑菌作用，能够调理肠胃，促进消化，增加食欲从而促进动物增重。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明所述技术方案作进一步的说明。
实施例1：本发明复配精油及其制剂的制备
第一步：各种精油的制备
(1)葛缕子精油的制备方法是：
取葛缕子，粉碎，过筛，置圆底烧瓶中，加入15倍量蒸馏水，用盐酸调节pH至5.0后向容器中加入1.5％的纤维素酶，稍作搅拌，置于水浴锅内50℃恒温酶解40min，然后采用水蒸气蒸馏法，安装好挥发油提取器，加热至水沸腾后开始计时，蒸馏2h后，收集精油，即得。
(2)柠檬草精油的制备方法是：
取柠檬草，粉碎，过筛，置于圆底烧瓶中，加入15倍量石油醚进行超声提取，超声波频率设定在600W，在80℃下提取1h，过滤，滤液回收石油醚并挥干，即得。
(3)香旱芹精油的制备方法是：
取香旱芹，干燥，粉碎，过筛，放入超临界CO2萃取釜中，夹带剂乙醇用量固液比为1.5ml/mg，萃取条件为：萃取压力40MPa、萃取温度50℃、萃取时间3.0h、CO2流速25kg/h。萃取液过滤，用旋转蒸发仪回收乙醇并挥干，即得。
(4)紫苏叶精油的制备方法是：
取紫苏叶，干燥，粉碎，过筛，置圆底烧瓶中，加入16倍量蒸馏水，用盐酸调节pH至4.5后向容器中加入1％的复合酶(纤维素酶与果胶酶按1：1混合)，置于水浴锅内45℃恒温酶解40min，转入微波动态萃取设备料桶中，设置微波功率为800W，微波辐射30min。在微波萃取设备上接挥发油分离器，收集蒸馏出的精油，即得。
第二步：制剂的制备
本发明复配精油微囊的制备：
取一定温度下适量的水，加入海藻酸钠，搅拌，配成一定浓度的海藻酸钠溶液，然后在此溶液中加入按比例混合的复配精油，滴入1-2滴浓度为1％的吐温-80，在一定的乳化温度下，搅拌均匀备用。另取壳聚糖和氯化钙适量，加水溶解，制成一定浓度的固化液备用。用一次性注射针筒吸取海藻酸钠复配精油混合液，边搅拌边滴入壳聚糖-氯化钙固化液中，自发形成微囊，放入冰箱固化24h，取出过滤，水洗2次，再用石油醚洗涤1次，收集微胶囊置于表面皿上，于60℃干燥2h，得复配精油微囊。
第三步：将复配精油微囊添加到饲料中
本发明还提供一种所述复配精油在制备畜类饲料中的应用，优选所述复配精油在制备饲料中质量添加量为0.05-0.1％。
以下通过试验例进一步阐述本发明所述具有抑菌作用，能够调理禽类肠胃，促进消化，增加食欲从而促进动物增重的作用。
试验例1
本发明复配精油对沙门氏菌的体外抑菌活性：
1.材料与方法
1.1试验材料
致病沙门氏菌；BS琼脂培养基：购自青岛高科技工业园海博生物技术有限公司；
葛缕子：购自青岛众生大药房，经鉴定为伞形科植物的籽；
柠檬草：青岛栽培柠檬草，经鉴定为质量中等的柠檬香茅；
香旱芹：原产地印度，网上采购；
紫苏叶：新鲜紫苏，青岛栽培紫苏，经鉴定为唇形科植物的叶；
按上述实施方案分别制备葛缕子精油，柠檬草精油，香旱芹精油和紫苏叶精油。按组方比例制成葛缕子精油、柠檬草精油和香旱芹精油的复配精油(组合物1)；葛缕子精油、柠檬草精油和紫苏叶精油的复配精油(组合物2)；葛缕子精油、香旱芹精油和紫苏叶精油(组合物3)；柠檬草精油、香旱芹精油和紫苏叶精油(组合物4)；本发明复配精油(组合物5)。配成10、5、2.5、1.25和0.625mg/ml的溶液。
1.2试验方法
(1)菌悬液的制备无菌操作用烧红冷却的接种环挑取培养16-24h的沙门氏菌，置于无菌生理盐水中，摇匀制得沙门氏菌混悬液，并按照平板菌落计数法校正得出该混悬液的CFU。
(2)含菌培养基平板的制备
将经高压蒸汽灭菌后的BS培养基冷却到45～50℃时，加入105-106CFU/ml沙门氏菌，充分震荡混匀，倒入灭菌后的培养皿中，稍微放冷后，即得含菌培养基平板。
(3)抑菌圈测量待含有沙门氏菌的BS培养基凝固后，用直径为7mm的打孔器打孔，每个培养皿可以打四个孔，每一个孔加40μL精油，置于37℃的培养箱中培养24小时后，测量抑菌圈直径。
2.结果与分析
以沙门氏菌为试验细菌，以本发明复配精油及其他四种组合物对照为供试药剂，测定不同组合物的抑菌活性与效果，结果如表1所示。
表1 各复配精油对沙门氏菌的抑菌实验结果(
n＝10)
从表1可以，各组合物均对沙门氏菌有抑制作用，随着剂量增加抑菌活性增强，且组合物5抑菌作用最好，说明葛缕子精油，柠檬草精油，香旱芹精油和紫苏叶精油组合物中，缺少任何一味，都会导致抑菌活性下降。
3.结论：本发明复配精油在较低的浓度下就能抑制沙门氏菌，显示了较好的抑菌活性。
试验例2
复配精油对禽类摄食量和体重的影响
1.1材料与方法
各组合物精油的制备方法同试验例1。制备六组饲料(A、B、C、D、E、F)，A组饲料不添加复配精油，B组添加组合物1，C组饲料添加组合物2，D组饲料添加组合物3，E组饲料添加组合物4，F组饲料添加组合物5。
1.2实验鸽与分组饲养
挑选鸽子生长和健康状况基本相同的120只9天龄乳鸽，随机分成6组(标记为A、B、C、D、E和F组)，每组20只，分别投喂各组对应的饲料，三个重复实验，每日投喂3次，投喂3周。
2.结果与分析
投喂不同饲料3周后结束实验，各组鸽子的摄食量和体重如表2所示。
表2 不同饲料投喂鸽子的摄食量和体重(
n＝20)
从表2可以看出，与A组(无复配精油添加剂饲料喂养组)比较，其他各复配精油添加剂喂养的鸽子，其日均摄食量和日均增重均显著增加，其中以F组增重最显著，说明本发明复配精油作为饲料添加剂，能显著促进鸽子食欲，调理胃肠功能，增加摄食和体重，缺少其中任何一味精油，都导致其作用下降。
3.结论：本发明的复配精油添加到禽类饲料中可显著增加禽类的摄食量和体重。
Claims (5)
1.一种复配精油，其特征在于，该复配精油是由葛缕子精油、柠檬草精油、香旱芹精油、紫苏叶精油组合而成，其中所述葛缕子精油、柠檬草精油、香旱芹精油、紫苏叶精油的比例为4-6:1-2:3-5:2-4；
其中葛缕子精油的制备方法是：
取葛缕子，粉碎，过筛，置圆底烧瓶中，加入15倍量蒸馏水，用盐酸调节pH至5.0后向容器中加入1.5％的纤维素酶，稍作搅拌，置于水浴锅内50℃恒温酶解40min，然后采用水蒸气蒸馏法，安装好挥发油提取器，加热至水沸腾后开始计时，蒸馏2h后，收集精油，即得；
其中柠檬草精油的制备方法是：
取柠檬草，粉碎，过筛，置于圆底烧瓶中，加入15倍量石油醚进行超声提取，超声波频率设定在600W，在80℃下提取1h，过滤，滤液回收石油醚并挥干，即得；
其中香旱芹精油的制备方法是：
取香旱芹，干燥，粉碎，过筛，放入超临界CO2萃取釜中，夹带剂乙醇用量固液比为1.5mL/mg，萃取条件为：萃取压力40MPa、萃取温度50℃、萃取时间3.0h、CO2流速25kg/h萃取液过滤，用旋转蒸发仪回收乙醇并挥干，即得；
其中紫苏叶精油的制备方法是：
将纤维素酶与果胶酶按1:1混合制成复合酶；取紫苏叶，干燥，粉碎，过筛，置圆底烧瓶中，加入16倍量蒸馏水，用盐酸调节pH至4.5后向容器中加入1％的复合酶，置于水浴锅内45℃恒温酶解40min，转入微波动态萃取设备料桶中，设置微波功率为800W，微波辐射30min，在微波萃取设备上接挥发油分离器，收集蒸馏出的精油，即得；
按比例选取葛缕子精油、柠檬草精油、香旱芹精油与紫苏叶精油混合均匀，即所得复配精油。
2.如权利要求1所述的复配精油，其特征在于，葛缕子精油、柠檬草精油、香旱芹精油、紫苏叶精油的比例为5:2:4:3。
3.一种复配精油微囊，其特征在于，采用单凝聚法或复凝聚法，将如权利要求1所述的复配精油制成含有10％复配精油的微囊。
4.如权利要求3所述的复配精油微囊，其特征在于，所述复配精油微囊的制备方法是：
在水中加入海藻酸钠，搅拌，配成海藻酸钠溶液，然后在此溶液中加入复配精油，滴入1-2滴浓度为1％的吐温-80，在乳化温度下搅拌均匀备用；
另取壳聚糖和氯化钙并加水溶解，制成壳聚糖-氯化钙固化液备用；
用一次性注射针筒吸取海藻酸钠复配精油混合液，边搅拌边滴入壳聚糖-氯化钙固化液中，自发形成微囊，放入冰箱固化24h，取出过滤，水洗2次，再用石油醚洗涤1次，收集微胶囊置于表面皿上，于60℃干燥2h，得复配精油微囊。
5.一种复配精油微囊的应用，其特征在于，将如权利要求3所述的复配精油微囊按其质量占禽类饲料质量的0.05-0.1％添加于饲料中，均匀混合后饲喂。
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