CN110558562A - 一种sod复合酶的制备方法 - Google Patents
一种sod复合酶的制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN110558562A CN110558562A CN201911007105.9A CN201911007105A CN110558562A CN 110558562 A CN110558562 A CN 110558562A CN 201911007105 A CN201911007105 A CN 201911007105A CN 110558562 A CN110558562 A CN 110558562A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- sod
- complex enzyme
- leaching
- dried
- roxburgh rose
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 title claims abstract description 42
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 title claims abstract description 42
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title abstract description 14
- 238000002386 leaching Methods 0.000 claims abstract description 70
- 241000220317 Rosa Species 0.000 claims abstract description 48
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 claims abstract description 44
- 235000017784 Mespilus germanica Nutrition 0.000 claims abstract description 38
- 235000000560 Mimusops elengi Nutrition 0.000 claims abstract description 38
- 235000007837 Vangueria infausta Nutrition 0.000 claims abstract description 38
- 239000000463 material Substances 0.000 claims abstract description 32
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 28
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 26
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 claims abstract description 26
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 claims abstract description 26
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 claims abstract description 17
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 claims abstract description 17
- 238000000859 sublimation Methods 0.000 claims abstract description 13
- 230000008022 sublimation Effects 0.000 claims abstract description 13
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims abstract description 12
- 238000012216 screening Methods 0.000 claims abstract description 9
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 claims abstract description 8
- 240000002624 Mespilus germanica Species 0.000 claims abstract 8
- 239000012530 fluid Substances 0.000 claims description 16
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 16
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 15
- 238000001816 cooling Methods 0.000 claims description 8
- 238000011049 filling Methods 0.000 claims description 8
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims description 8
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 8
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 8
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 3
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 claims description 2
- 238000000034 method Methods 0.000 claims 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 23
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 21
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 abstract description 11
- 238000000605 extraction Methods 0.000 abstract description 9
- 239000000284 extract Substances 0.000 abstract description 3
- 239000013543 active substance Substances 0.000 abstract description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 41
- 244000182216 Mimusops elengi Species 0.000 description 30
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 24
- FPIPGXGPPPQFEQ-UHFFFAOYSA-N 13-cis retinol Natural products OCC=C(C)C=CC=C(C)C=CC1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- ZZZCUOFIHGPKAK-UHFFFAOYSA-N D-erythro-ascorbic acid Natural products OCC1OC(=O)C(O)=C1O ZZZCUOFIHGPKAK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- UPYKUZBSLRQECL-UKMVMLAPSA-N Lycopene Natural products CC(=C/C=C/C=C(C)/C=C/C=C(C)/C=C/C1C(=C)CCCC1(C)C)C=CC=C(/C)C=CC2C(=C)CCCC2(C)C UPYKUZBSLRQECL-UKMVMLAPSA-N 0.000 description 12
- FPIPGXGPPPQFEQ-BOOMUCAASA-N Vitamin A Natural products OC/C=C(/C)\C=C\C=C(\C)/C=C/C1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-BOOMUCAASA-N 0.000 description 12
- 229930003268 Vitamin C Natural products 0.000 description 12
- FPIPGXGPPPQFEQ-OVSJKPMPSA-N all-trans-retinol Chemical compound OC\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-OVSJKPMPSA-N 0.000 description 12
- 150000001746 carotenes Chemical class 0.000 description 12
- 235000005473 carotenes Nutrition 0.000 description 12
- 229930003935 flavonoid Natural products 0.000 description 12
- 235000017173 flavonoids Nutrition 0.000 description 12
- 150000002215 flavonoids Chemical class 0.000 description 12
- 235000019155 vitamin A Nutrition 0.000 description 12
- 239000011719 vitamin A Substances 0.000 description 12
- NCYCYZXNIZJOKI-UHFFFAOYSA-N vitamin A aldehyde Natural products O=CC=C(C)C=CC=C(C)C=CC1=C(C)CCCC1(C)C NCYCYZXNIZJOKI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 235000019154 vitamin C Nutrition 0.000 description 12
- 239000011718 vitamin C Substances 0.000 description 12
- 229940045997 vitamin a Drugs 0.000 description 12
- 150000003254 radicals Chemical class 0.000 description 10
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 9
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 9
- 239000003223 protective agent Substances 0.000 description 6
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 5
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 5
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 5
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 4
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 4
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 4
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 4
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 3
- 240000002547 Rosa roxburghii Species 0.000 description 3
- 235000000640 Rosa roxburghii Nutrition 0.000 description 3
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 3
- 235000020776 essential amino acid Nutrition 0.000 description 3
- 239000003797 essential amino acid Substances 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 101000836247 Aquifex pyrophilus Superoxide dismutase [Fe] Proteins 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OUUQCZGPVNCOIJ-UHFFFAOYSA-M Superoxide Chemical compound [O-][O] OUUQCZGPVNCOIJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 102000019197 Superoxide Dismutase Human genes 0.000 description 2
- 108010012715 Superoxide dismutase Proteins 0.000 description 2
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 2
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 2
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 2
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 1
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 1
- 235000001635 Vangueriopsis lanciflora Nutrition 0.000 description 1
- 244000006396 Vangueriopsis lanciflora Species 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000002238 attenuated effect Effects 0.000 description 1
- 239000003637 basic solution Substances 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 210000000748 cardiovascular system Anatomy 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 208000026106 cerebrovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 230000002526 effect on cardiovascular system Effects 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 210000000750 endocrine system Anatomy 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 1
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 229910017053 inorganic salt Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 229910052752 metalloid Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002738 metalloids Chemical class 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- -1 oxygen radicals Chemical class 0.000 description 1
- 239000008055 phosphate buffer solution Substances 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 239000002516 radical scavenger Substances 0.000 description 1
- 239000012465 retentate Substances 0.000 description 1
- 239000012266 salt solution Substances 0.000 description 1
- 230000001568 sexual effect Effects 0.000 description 1
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; PREPARATION OR TREATMENT THEREOF
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/105—Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; PREPARATION OR TREATMENT THEREOF
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/17—Amino acids, peptides or proteins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Mycology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Botany (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
本发明提供一种SOD复合酶的制备方法，其首先净选刺梨干果和枸杞干果、清洗，然后将刺梨干果和枸杞干果分别粉碎至10～25目，筛选去除刺梨籽，得到刺梨粉碎物和枸杞粉碎物，接着以水为溶剂在45～65℃进行浸提，超滤、添加海藻糖、真空浓缩得到浓缩液，最后对浓缩液进行冻干升华除水制得粉末状的SOD复合酶。本发明以水为溶剂浸提SOD复合酶，在浸提过程中水其它活性物质不会发生化学反应生成新的衍生物，从而避免了衍生物抑制SOD酶活性的问题，确保了所提取SOD的活性；同时，在浸提温度45～65℃的范围下，各种浸提物之间不会发生化合反应，即不会有新的衍生物生成，进而不但确保了所提取SOD复合酶的纯度，而且进一步的确保了所提取SOD复合酶的活性。
Description
技术领域
本发明涉及保健食品技术领域，具体涉及一种SOD复合酶的制备方法。
背景技术
科学研究发现，有八十多种疾病的产生与自由基直接相关，有两百多种疾病的产生与自由基相关。人在25～40岁时，自由基攻击胶原系统，造成皮肤松弛、老化；人在35～50岁时，自由基攻击内分泌系统，造成性功能减退；人在50岁以上时，自由基攻击攻击心血管系统，造成各种心脑血管疾病。
经过大量的医学研究证明，SOD是一种重要的人体超氧阴离子自由基的清除剂。然而，随着年龄递增至衰老期后，机体各个脏器中SOD活性下降；老年人基体生成自由基增加，SOD破坏或消耗严重；基体内的SOD生物学特性发生变化，无活性SOD增加，导致SOD功能衰减；衰老的红细胞非酶性糖基化作用增强，导致SOD活性下降。
因此，为预防疾病的发生，从机体外向基体内补充SOD是行之有效的手段。目前，SOD来源是从动物血液、胰脏和植物中提取，从动物血液、胰脏中提取的SOD为单一性的Cu/Zn-SOD,其综合抗氧化性差，且所提取的Cu/Zn-SOD会因动物各种疾病的影响而存较差感染的因素；从植物中提取SOD，虽然所提取SOD为包含Cu/Zn-SOD、Mn-SOD、 Fe-SOD三类金属辅基的复合酶，但从植物中提取SOD,一般在适当的缓冲液中进行，多数抽提是以缓冲液（盐液）为基础液进行提取，并在提取液总加入硫酸铵，其沉淀用磷酸缓冲液溶解后，梯度洗脱，动态透析去除无机盐，浓缩后干燥既得SOD纯品。该从植物提取SOD的过程中使用了有机溶剂（硫酸铵、磷酸），由于有机溶剂在SOD提取过程中会与其它活性发生化学反应，生成新的衍生物，新的衍生物会抑制SOD的活性，进而影响了SOD的抗氧化功能。
发明内容
本发明的目的在于提供一种SOD复合酶的制备方法，旨在解决现有技术中SOD复合酶在制备过程中使用有机溶剂而导致SOD活性低的问题。
为实现上述目的，本发明一种SOD复合酶的制备方法采用的技术方案是，所述SOD复合酶的制备方法包括以下步骤：
（1）净选刺梨干果和枸杞干果、清洗；
（2）将清洗后的刺梨干果和枸杞干果分别粉碎至10～25目，筛选去取刺梨籽，得到刺梨粉碎物和枸杞粉碎物，备用；
（3）取刺梨粉碎物和枸杞粉碎物，混合均匀，放入浸提容器内进行浸提，浸提溶剂为水，每100kg物料加入8～10倍的水，浸提温度为45～65℃，浸提时间为12～16h，得到含有可溶性固形物的浸提液；
（4）将浸提液静置冷却温度至25～32℃时进行超滤，截留分子量1000道尔顿，截留液待用，通过液废弃；
（5）将截留液升温至50～60℃，每100L的截留液体中加入1.6～2.8kg的海藻糖进行搅拌均匀10～30min，得到含有海藻糖的截留液；
（6）将含有海藻糖的截留液在50～60℃进行真空浓缩，浓缩至固形物含量46%，得到浓缩液；
（7）将浓缩液灌装并送入冷冻干燥机内进行冻干，冻干温度为-35～-31℃，冻干时间19～24h，然后进行升华除水，升华的温度为0～25℃，升华时的真空度为60～100Pa，得到粉末状的SOD复合酶。
优选的，所述步骤（2）中将将清洗后的刺梨干果和枸杞干果分别粉碎至18目。
优选的，所述步骤（3）中的浸提温度为58℃。
优选的，所述步骤（7）中的冻干温度为-26～-24℃。
优选的，所述步骤（1）中的刺梨干果为野生刺梨干果，枸杞干果为野生枸杞干果。
本发明的有益效果：本发明以刺梨干果和枸杞干果为原料，对原料粉碎后以水为溶剂并控制温度在45～65℃下进行SOD浸提，水溶剂取代了有机溶剂，避免了在浸提过程中有机溶剂与其它活性物质发生化学反应生成新衍生物而抑制SOD活性的问题，从而确保了所提取SOD的抗氧化功能；同时，在浸提过程中，温度控制45～65℃，经实验证明，在该温度范围下，各种浸提物之间不会发生化合反应，不会有新的衍生物生成，进而不但确保了所提取SOD的纯度，而且进一步的确保了提取SOD的抗氧化功能。
本发明以刺梨干果和枸杞干果为原料制备出的酶为包括Cu/Zn-SOD、Mn-SOD、 Fe-SOD三类金属辅基的SOD复合酶，其不但包含了可清除人体超氧阴离子自由基的酶，而且包括了可清除人体非氧自由基的非酶类自由基的酶。
通过本发明制备出的SOD复合酶，其综合抗氧化性好，具有全方位、无死角的清除细胞内、外的自由基，抗疾病、抗辐射、抗衰老、增加免疫力等方面的效果好。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做一步的说明。
实施例1
本实施例的SOD复合酶的制备方法，包括以下步骤：
（1）净选野生刺梨干果和野生枸杞干果、清洗；
（2）将清洗后的刺梨干果和枸杞干果分别粉碎至18目，筛选去取刺梨籽，得到刺梨粉碎物和枸杞粉碎物，备用；
（3）取刺梨粉碎物和枸杞粉碎物，混合均匀，放入浸提容器内进行浸提，浸提溶剂为水，每100kg物料加入8倍的水，浸提温度为58℃；浸提时间为14h，得到pH值为4.2的浸提液，浸提液中含有SOD、维生素A、维生素C、胡萝卜素、人体必须的氨基酸、类黄酮等可溶性固形物；
（4）将浸提液静置冷却温度至25℃时进行超滤，截留分子量1000道尔顿，截留液待用，通过液废弃，该步骤的目的是过滤掉浸提液中的小分子物质（维生素A、维生素C、胡萝卜素、人体必须的氨基酸、类黄酮等可溶性物物质），以提高SOD的纯度和避免小分子物质之间发生化学反应生成衍生物而抑制SOD活性的问题；
（5）将截留液升温至55℃，每100L的截留液体中加入2kg的海藻糖进行搅拌均匀20min，得到含有海藻糖的截留液，海藻糖是一种保护剂，其作用是保护SOD的活性；
（6）将含有海藻糖的截留液在55℃进行真空浓缩，浓缩至固形物含量46%，得到浓缩液；
（7）将浓缩液灌装并送入冷冻干燥机内进行冻干，冻干温度为-35℃，冻干时间19h，然后进行升华除水，升华的温度为25℃，升华时的真空度为60Pa，得到粉末状的SOD复合酶。
实施例2
本实施例的SOD复合酶的制备方法，包括以下步骤：
（1）净选野生刺梨干果和野生枸杞干果、清洗；
（2）将清洗后的刺梨干果和枸杞干果分别粉碎至10目，筛选去取刺梨籽，得到刺梨粉碎物和枸杞粉碎物，备用；
（3）取刺梨粉碎物和枸杞粉碎物，混合均匀，放入浸提容器内进行浸提，浸提溶剂为水，每100kg物料加入10倍的水，浸提温度为65℃；浸提时间为12h，得到pH值为4.5的浸提液，浸提液中含有SOD、维生素A、维生素C、胡萝卜素、人体必须的氨基酸、类黄酮等可溶性固形物；
（4）将浸提液静置冷却温度至28℃时进行超滤，截留分子量1000道尔顿，截留液待用，通过液废弃，该步骤的目的是过滤掉浸提液中的小分子物质（维生素A、维生素C、胡萝卜素、人体必须的氨基酸、类黄酮等可溶性物物质），以提高SOD的纯度和避免小分子物质之间发生化学反应生成衍生物而抑制SOD活性的问题；
（5）将截留液升温至60℃，每100L的截留液体中加入1.6kg的海藻糖进行搅拌均匀10min，得到含有海藻糖的截留液，海藻糖是一种保护剂，其作用是保护SOD的活性；
（6）将含有海藻糖的截留液在60℃进行真空浓缩，浓缩至固形物含量46%，得到浓缩液；
（7）将浓缩液灌装并送入冷冻干燥机内进行冻干，冻干温度为-31℃，冻干时间20h，然后进行升华除水，升华的温度为20℃，升华时的真空度为80Pa，得到粉末状的SOD复合酶。
实施例3
本实施例的SOD复合酶的制备方法，包括以下步骤：
（1）净选野生刺梨干果和野生枸杞干果、清洗；
（2）将清洗后的刺梨干果和枸杞干果分别粉碎至25目，筛选去取刺梨籽，得到刺梨粉碎物和枸杞粉碎物，备用；
（3）取刺梨粉碎物和枸杞粉碎物，混合均匀，放入浸提容器内进行浸提，浸提溶剂为水，每100kg物料加入9倍的水，浸提温度为45℃，浸提时间为16h，得到pH值为4.3的浸提液，浸提液中含有SOD、维生素A、维生素C、胡萝卜素、人体必须的氨基酸、类黄酮等可溶性固形物；
（4）将浸提液静置冷却温度至32℃时进行超滤，截留分子量1000道尔顿，截留液待用，通过液废弃，该步骤的目的是过滤掉浸提液中的小分子物质（维生素A、维生素C、胡萝卜素、人体必须的氨基酸、类黄酮等可溶性物物质），以提高SOD的纯度和避免小分子物质之间发生化学反应生成衍生物而抑制SOD活性的问题；
（5）将截留液升温至50℃，每100L的截留液体中加入2.8kg的海藻糖进行搅拌均匀30min，得到含有海藻糖的截留液，海藻糖是一种保护剂，其作用是保护SOD的活性；
（6）将含有海藻糖的截留液在50℃进行真空浓缩，浓缩至固形物含量46%，得到浓缩液；
（7）将浓缩液灌装并送入冷冻干燥机内进行冻干，冻干温度为-33℃，冻干时间22h，然后进行升华除水，升华的温度为10℃，升华时的真空度为100Pa，得到粉末状的SOD复合酶。
实施例4
本实施例的SOD复合酶的制备方法，包括以下步骤：
（1）净选刺梨干果和枸杞干果、清洗；
（2）将清洗后的刺梨干果和枸杞干果分别粉碎至14目，筛选去取刺梨籽，得到刺梨粉碎物和枸杞粉碎物，备用；
（3）取刺梨粉碎物和枸杞粉碎物，混合均匀，放入浸提容器内进行浸提，浸提溶剂为水，每100kg物料加入8倍的水，浸提温度为60℃，浸提时间为15h，得到pH值为4.8的浸提液，浸提液中含有SOD、维生素A、维生素C、胡萝卜素、人体必须的氨基酸、类黄酮等可溶性固形物；
（4）将浸提液静置冷却温度至26℃时进行超滤，截留分子量1000道尔顿，截留液待用，通过液废弃，该步骤的目的是过滤掉浸提液中的小分子物质（维生素A、维生素C、胡萝卜素、人体必须的氨基酸、类黄酮等可溶性物物质），以提高SOD的纯度和避免小分子物质之间发生化学反应生成衍生物而抑制SOD活性的问题；
（5）将截留液升温至58℃，每100L的截留液体中加入1.8kg的海藻糖进行搅拌均匀20min，得到含有海藻糖的截留液，海藻糖是一种保护剂，其作用是保护SOD的活性；
（6）将含有海藻糖的截留液在58℃进行真空浓缩，浓缩至固形物含量46%，得到浓缩液；
（7）将浓缩液灌装并送入冷冻干燥机内进行冻干，冻干温度为-25℃，冻干时间22h，然后进行升华除水，升华的温度为5℃，升华时的真空度为70Pa，得到粉末状的SOD复合酶。
实施例5
本实施例的SOD复合酶的制备方法，包括以下步骤：
（1）净选刺梨干果和枸杞干果、清洗；
（2）将清洗后的刺梨干果和枸杞干果分别粉碎至22目，筛选去取刺梨籽，得到刺梨粉碎物和枸杞粉碎物，备用；
（3）取刺梨粉碎物和枸杞粉碎物，混合均匀，放入浸提容器内进行浸提，浸提溶剂为水，每100kg物料加入10倍的水，浸提温度为48℃，浸提时间为13h，得到pH值为4.6的浸提液，浸提液中含有SOD、维生素A、维生素C、胡萝卜素、人体必须的氨基酸、类黄酮等可溶性固形物；
（4）将浸提液静置冷却温度至30℃时进行超滤，截留分子量1000道尔顿，截留液待用，通过液废弃，该步骤的目的是过滤掉浸提液中的小分子物质（维生素A、维生素C、胡萝卜素、人体必须的氨基酸、类黄酮等可溶性物物质），以提高SOD的纯度和避免小分子物质之间发生化学反应生成衍生物而抑制SOD活性的问题；
（5）将截留液升温至53℃，每100L的截留液体中加入2.2kg的海藻糖进行搅拌均匀20min，得到含有海藻糖的截留液，海藻糖是一种保护剂，其作用是保护SOD的活性；
（6）将含有海藻糖的截留液在53℃进行真空浓缩，浓缩至固形物含量46%，得到浓缩液；
（7）将浓缩液灌装并送入冷冻干燥机内进行冻干，冻干温度为-26℃，冻干时间21h，然后进行升华除水，升华的温度为0℃，升华时的真空度为70Pa，得到粉末状的SOD复合酶。
实施例6
本实施例的SOD复合酶的制备方法，包括以下步骤：
（1）净选刺梨干果和枸杞干果、清洗；
（2）将清洗后的刺梨干果和枸杞干果分别粉碎至12目，筛选去取刺梨籽，得到刺梨粉碎物和枸杞粉碎物，备用；
（3）取刺梨粉碎物和枸杞粉碎物，混合均匀，放入浸提容器内进行浸提，浸提溶剂为水，每100kg物料加入8倍的水，浸提温度为62℃，浸提时间为14h，得到pH值为4.7的浸提液，浸提液中含有SOD、维生素A、维生素C、胡萝卜素、人体必须的氨基酸、类黄酮等可溶性固形物；
（4）将浸提液静置冷却温度至27℃时进行超滤，截留分子量1000道尔顿，截留液待用，通过液废弃，该步骤的目的是过滤掉浸提液中的小分子物质（维生素A、维生素C、胡萝卜素、人体必须的氨基酸、类黄酮等可溶性物物质），以提高SOD的纯度和避免小分子物质之间发生化学反应生成衍生物而抑制SOD活性的问题；
（5）将截留液升温至54℃，每100L的截留液体中加入2.6kg的海藻糖进行搅拌均匀20min，得到含有海藻糖的截留液，海藻糖是一种保护剂，其作用是保护SOD的活性；
（6）将含有海藻糖的截留液在57℃进行真空浓缩，浓缩至固形物含量46%，得到浓缩液；
（7）将浓缩液灌装并送入冷冻干燥机内进行冻干，冻干温度为-24℃，冻干时间24h，然后进行升华除水，升华的温度为15℃，升华时的真空度为90Pa，得到粉末状的SOD复合酶。
经试验证明，在制备SOD复合酶的步骤（1）中，将原料（刺梨干果、枸杞干果）粉碎成10～25目大小的颗粒，在粒度大小的原料容易浸提SOD，且SOD的浸出率高。
经实验证明，在步骤（3）中，浸提温度在45～65℃范围内，各种浸提物之间不会发生化合反应，即不会有新的衍生物生成，这样避免了衍生物抑制SOD活性的问题，进而确保了所提取SOD的抗氧化功能和纯度。
Claims (5)
1.一种SOD复合酶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）净选刺梨干果和枸杞干果、清洗；
（2）将清洗后的刺梨干果和枸杞干果分别粉碎至10～25目，筛选去取刺梨籽，得到刺梨粉碎物和枸杞粉碎物，备用；
（3）取刺梨粉碎物和枸杞粉碎物，混合均匀，放入浸提容器内进行浸提，浸提溶剂为水，每100kg物料加入8～10倍的水，浸提温度为45～65℃，浸提时间为12～16h，得到含有可溶性固形物的浸提液；
（4）将浸提液静置冷却温度至25～32℃时进行超滤，截留分子量1000道尔顿，截留液待用，通过液废弃；
（5）将截留液升温至50～60℃，每100L的截留液体中加入1.6～2.8kg的海藻糖进行搅拌均匀10～30min，得到含有海藻糖的截留液；
（6）将含有海藻糖的截留液在50～60℃进行真空浓缩，浓缩至固形物含量46%，得到浓缩液；
（7）将浓缩液灌装并送入冷冻干燥机内进行冻干，冻干温度为-35～-31℃，冻干时间19～24h，然后进行升华除水，升华的温度为0～25℃，升华时的真空度为60～100Pa，得到粉末状的SOD复合酶。
2.根据权利要求1所述的SOD复合酶的制备方法，其特征在于：所述步骤（2）中将将清洗后的刺梨干果和枸杞干果分别粉碎至18目。
3.根据权利要求1中所述的SOD复合酶的制备方法，其特征在于：所述步骤（3）中的浸提温度为58℃。
4.根据权利要求1所述的SOD复合酶的制备方法，其特征在于：所述步骤（7）中的冻干温度为-26～-24℃。
5.根据权利要求1～4任一项所述的SOD复合酶的制备方法，其特征在于，所述步骤（1）中的刺梨干果为野生刺梨干果，枸杞干果为野生枸杞干果。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201911007105.9A CN110558562A (zh) | 2019-10-22 | 2019-10-22 | 一种sod复合酶的制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201911007105.9A CN110558562A (zh) | 2019-10-22 | 2019-10-22 | 一种sod复合酶的制备方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN110558562A true CN110558562A (zh) | 2019-12-13 |
Family
ID=68785684
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201911007105.9A Pending CN110558562A (zh) | 2019-10-22 | 2019-10-22 | 一种sod复合酶的制备方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN110558562A (zh) |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1297947A (zh) * | 1999-12-01 | 2001-06-06 | 上海国宝企业发展中心 | 一种枸杞活性成分提取物的制备方法 |
| CN101797353A (zh) * | 2009-02-06 | 2010-08-11 | 刘登明 | 一种植物sod复合健身片(丸)及其制备方法 |
| CN106318919A (zh) * | 2016-02-20 | 2017-01-11 | 武熙熙 | 一种野生刺梨sod复合酶的制作方法 |
| CN107535787A (zh) * | 2016-06-23 | 2018-01-05 | 上海蓝王医药科技发展有限公司 | 一种刺梨冻干颗粒的制备方法 |
| CN107929133A (zh) * | 2017-12-08 | 2018-04-20 | 王颖 | 一种祛斑美白sod复合酶配方 |
-
2019
- 2019-10-22 CN CN201911007105.9A patent/CN110558562A/zh active Pending
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1297947A (zh) * | 1999-12-01 | 2001-06-06 | 上海国宝企业发展中心 | 一种枸杞活性成分提取物的制备方法 |
| CN101797353A (zh) * | 2009-02-06 | 2010-08-11 | 刘登明 | 一种植物sod复合健身片(丸)及其制备方法 |
| CN106318919A (zh) * | 2016-02-20 | 2017-01-11 | 武熙熙 | 一种野生刺梨sod复合酶的制作方法 |
| CN107535787A (zh) * | 2016-06-23 | 2018-01-05 | 上海蓝王医药科技发展有限公司 | 一种刺梨冻干颗粒的制备方法 |
| CN107929133A (zh) * | 2017-12-08 | 2018-04-20 | 王颖 | 一种祛斑美白sod复合酶配方 |
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| GUANGJING CHEN: "Characterization of a novel polysaccharide isolated from Rosa roxburghii Tratt fruit and assessment of its antioxidant in vitro and in vivo", 《INTERNATIONAL JOURNAL OF BIOLOGICAL MACROMOLECULES》 * |
| 付安妮: "刺梨中SOD的提取和酶活测定", 《广州化工》 * |
| 常映明: "《抗衰老漫谈》", 30 November 2017, 中国医药科技出版社 * |
| 袁勤生: "《超氧化物歧化酶》", 30 April 2019, 华东理工大学出版社 * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN107857806B (zh) | 一种鲟鱼精蛋白及鲟鱼精蛋白多肽的制备方法 | |
| CN107488515B (zh) | 一种提取液及采用该提取液提取茶树花精油的方法 | |
| CN103450366B (zh) | 一种综合制备水溶性和碱溶性茶多糖复合物的方法 | |
| CN102824377A (zh) | 灵芝子实体中功能性成分的提取方法 | |
| CN105001184B (zh) | 一种提取岩藻黄素用褐藻样品的前处理方法 | |
| CN106674185A (zh) | 从黑果腺肋花楸果实或果渣中提取原花青素的方法 | |
| CN103767046A (zh) | 用于加工高花青素含量的果蔬的装置和方法 | |
| CN106579443A (zh) | 一种桑葚中花青素的提取方法 | |
| CN107468738A (zh) | 一种菊花总黄酮的提取方法 | |
| JP2010006783A (ja) | 海藻からのフコキサンチンの抽出方法とその装置 | |
| CN106699916B (zh) | 一种莲藕多酚和多糖的联合提取方法 | |
| CN108741071A (zh) | 一种紫苏花色苷微胶囊的制备方法 | |
| CN104372057A (zh) | 一种胎盘素的提取方法 | |
| CN104762356A (zh) | 一种南瓜叶多糖与多肽及其制备方法 | |
| CN111096454A (zh) | 一种植物萃取冻干粉的技术 | |
| CN110558562A (zh) | 一种sod复合酶的制备方法 | |
| CN110540973A (zh) | 一种刺梨中sod的提取方法 | |
| CN105037571A (zh) | 一种酶法制备低黏度车前子多糖的方法 | |
| CN113208111A (zh) | 一种复合壁材的甜菜红素微胶囊的制备方法 | |
| CN110577937A (zh) | 一种祛斑美肤sod复合酶及其制备方法 | |
| CN109091409B (zh) | 一种西番莲花青素及卵白蛋白肽面膜干粉的制备方法 | |
| CN112442136A (zh) | 一种银耳功能性成分的提取方法 | |
| CN102366003A (zh) | 胶原蛋白速溶茶及其制作方法 | |
| CN114149982B (zh) | 一种刺梨超氧化物歧化酶的提取方法 | |
| CN101933944B (zh) | 骨肽注射液的制备方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20191213 |
|
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |