CN110551232A - 一种药食两用百合多糖的提取方法及其在保健品中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种多糖提取技术，尤其是涉及一种药食两用兰州百合多糖的提取方法及其在保健品中的应用。一种药食两用百合多糖的提取方法，1）将干燥的兰州百合粉碎，过80～120目筛，得兰州百合粉；2）对百合粉进行脱脂处理后，进行多糖提取；3）酶灭活；浸取液离心；醇沉；抽滤；4）采用酶法联用Sevage法脱蛋白分离纯化，淋洗；干燥得百合多糖。本发明利用双酶解法通过酶的作用来提取百合多糖，其作用效率高，超声波加以辅助，考究了“双酶”与传统百合多糖提取方法的结合对百合多糖提取的影响，此方法操作简便，提取率高，同时也大大的降低了成本。
Description
技术领域
本发明涉及一种多糖提取技术，尤其是涉及一种药食两用兰州百合多糖的提取方法及其在保健品中的应用。
背景技术
兰州百合是百合科百合属川百合的一个交种，是一种多年生鳞茎类草本植物。兰州百合鳞茎扁圆形，且瓣大肉厚、洁白如玉、含糖量高、粗纤维少、肉质细腻、味醇香甜，含有较丰富的多糖、蛋白质、果胶质等多种营养成分，有很高的食用、药用、保健和观赏价值。
百合可以用于治疗很多病症如肠风下血、热痢脓血、痢疾等症状，药用价值很高。为了满足药业及医学以及对生活市场的要求，近年来很多人从事百合多糖功能研究。通过学者们对百合多糖的不断研究和探索，百合多糖的提取工作和药理研究已经取得了一定的进展。现在研究发现百合多糖具有抗肿瘤、抗癌、抗氧化、耐缺氧、调节免疫、抗抑郁、延缓肺组织纤维化的发展、抗炎、抗疲劳抑菌及降血糖等作用。但由于百合多糖提取率不高，造成百合多糖功能研究成本较高，为了改善百合多糖提取技术上的缺陷，因此我们提出了超声波协同双酶解提取百合多糖的方法。利用酶的高效性及超声波的辅助提高百合多糖提取率。此外，在食用方面,药食两用百合市场开发前景良好,成为国内外很多消费者喜好的食品,如以百合为原料的百合粥、百合酒、百合饮料和百合点心等,还可以做成月饼、面包和糕点等。如今，百合多糖及药理作用研究相对较多，但对于百合多糖在保健品中的应用相对较少。若将百合多糖的功能用于保健品，其应用价值不可估量。
常规多糖提取方法多采用水提醇沉法，利用大部分多糖不溶于冷水，在热水中呈黏液状，不溶于高浓度的乙醇溶液等特点对百合多糖进行提取。多糖在热水中的溶解度随时间、温度、pH 值等的变化而不同，所以，在实验过程中通过调整他们的相应值增加提取率，其实验步骤繁琐，操作难度较高，不定因素较多，成本较高且多糖提取率较低。因此，如何进行百合多糖的高效提取，针对百合多糖提取方法进行优化，是目前本领域技术人员研究的一个主要方向。双酶解法是近年来研究较广泛的提取方法，双酶解法在提取过程中所受影响因素较多，但在适宜的条件下提取率相对较高，并且研究成本相对较低，操作简单易懂，再与传统的超声波技术相结合，使提取率再次提高。
发明内容
本发明针对现有技术不足，提出一种利用双酶解法提取药食两用百合多糖的方法。
利用双酶解法通过酶的作用来提取百合多糖，其作用效率高，超声波加以辅助，考究了“双酶”与传统百合多糖提取方法的结合对百合多糖提取的影响，此方法操作简便，提取率高，同时也大大的降低了成本，在百合多糖提取率方面有重大突破。
本发明同时将百合多糖应用于保健品，提出一种药食两用百合多糖保健品饮料。
本发明采用的技术方案：
一种兰州百合多糖提取方法，包括以下步骤：
（1）双酶解协同超声波处理：将干燥的兰州百合粉碎，过80～120目筛，得兰州百合粉；
（2）对百合粉进行脱脂处理后，进行多糖提取；采用双酶解法协同超声波进行多糖有效成分提取，处理过程如下：脱脂（无水乙醇：无水乙醚1:1）后按固液比为1：30加水搅拌，固定PH至5.8～6.0加入双酶（胰蛋白酶、凝乳酶；胰蛋白酶、纤维素酶；凝乳酶、纤维素酶）再将盛有料液的容器加入到超声波提取器中进行超声波协同双酶解法水浴加热提取，超声功率为200-250W ,超声波频率为50Hz，提取温度为45-55℃，双酶浓度分别是1%，双酶解提取时间40min；
（3）酶灭活；浸取液离心；抽滤离心：水浴加热提取结束后，抽滤，除沉淀，得抽滤浸提溶液，将抽滤浸提溶液在4000r/ min的条件下离心分离15min，取上清液，去除沉淀，用同样的方法提取2-3次，合并上清液。醇沉离心：将上清液浓缩冷却后加入3倍体积的95％乙醇，至于低温30min，使其沉淀完全，去上清液待沉淀完全干燥后溶入去离子水中，在4000r/min的条件下离心15min，获得离心液。
（4）采用酶法联用Sevage法脱蛋白分离纯化，淋洗；干燥得百合多糖；取步骤3）离心液50ml，加入1％木瓜蛋白酶，固定PH至6.4，温度60℃，水解2h，抽滤；取抽滤后溶液采取sevage法（正丁醇：氯仿3:1）脱蛋白，震荡40min，离心，重复上述步骤2-3次，获得沉淀物依次用无水乙醇、丙酮、无水乙醚各淋洗，冷冻干燥机干燥即得。
所述的药食两用百合多糖的提取方法提取出的百合多糖在保健品中的应用。
一种药食两用百合多糖保健品饮料制备方法，原料包括前述药食两用百合多糖提取方法提取出的百合多糖，以500mL饮料计，以百合多糖、蜂蜜、白砂糖和苹果酸为原料，含有百合多糖18-25g，蜂蜜10-15g，白砂糖20-25g，苹果酸0.2-0.3g，山梨酸钾0.15-0.2g，用纯净水定容至500mL。
所述的药食两用百合多糖保健品饮料制备方法，制备过程步骤如下：
1）百合多糖预处理：百合多糖中加入适量水，在50℃下加热5 min，使其充分溶解，在4000 r/min、常温下离心15 min，除去下层水不溶性杂质，取上清液；
2）调配：取澄清上清液入配料锅, 开动搅拌器, 分别加入一定量的甜味料、酸味料、增味剂，将料液用纯净水定容至500mL，摇匀；
3）均质脱气：调配后在15～20 MPa下进行均质, 均质温度为75～80℃，均质时间为 5min，然后进行真空脱气；
4）杀菌、罐装、杀菌：将均质后的料液先进行1次杀菌, 罐装后再进行2次杀菌；1次杀菌采用高温瞬时杀菌 (120℃, 3 s)，2次杀菌采用巴氏杀菌 (90℃, 10 min)；杀菌后置于自然条件下冷却至室温，制得成品。
发明有益效果：
1、本发明利用双酶解法提取药食两用百合多糖的方法，利用双酶解法通过酶的作用来提取百合多糖，其作用效率高，步骤简便，便于操作，百合多糖提取率大大提升，为百合多糖的功能研究提供了前期的量的基础。
2、本发明利用双酶解法提取药食两用百合多糖的方法，采用超声波辅助提取，考究了“双酶”与传统百合多糖提取方法的结合对百合多糖提取的影响，降低了多糖提取过程的能源消耗，提高了百合多糖提取率，同时也大大的降低了成本。
3、本发明和现有已有技术对比，本发明研究相对较少，发展空间大，实验设计比较新颖，百合多糖率相对较高。
附图说明
图1：超声波＋双酶解中百合多糖提取率折线。
具体实施方式
下面通过具体实施方式，结合附图对本发明技术方案做进一步的详细描述。
实施例1
一种药食两用百合多糖的提取方法，包括如下步骤：
1）将干燥的兰州百合粉碎，过80～120目筛，得兰州百合粉；
2）对百合粉进行脱脂处理后，进行多糖提取；
3）酶灭活；浸取液离心；醇沉；抽滤；
4）采用酶法联用Sevage法脱蛋白分离纯化，淋洗；干燥得百合多糖；
步骤2）中，
（1）首先采用体积比为1:1的无水乙醇、无水乙醚溶液对百合粉进行脱脂处理；
（2）然后对脱脂处理后的百合粉按固液比为1：30的质量比加水搅拌，固定PH至5.8～6；
（3）采用双酶解法协同超声波进行多糖有效成分提取，处理过程如下：
加入胰蛋白酶、凝乳酶和纤维素酶中的任意两种，再将盛有料液的容器加入到超声波提取器中进行超声波协同双酶解法水浴加热提取，超声功率为200-250W，超声波频率为50Hz，提取温度为45-55℃，双酶浓度分别是1%，双酶解提取时间40～60min。
实施例2
本实施例药食两用百合多糖提取方法，包括以下步骤：
（1）双酶解协同超声波处理：将干燥的兰州百合粉碎，过100目筛，得兰州百合粉。脱脂（无水乙醇：无水乙醚1:1）后按固液比为1：30加水搅拌，固定PH至6.0加入双酶（胰蛋白酶×凝乳酶；胰蛋白酶×纤维素酶；凝乳酶×纤维素酶）再将盛有料液的容器加入到超声波提取器中进行超声波协同双酶解法水浴加热提取，超声功率为超声功率为200-250W ,超声波频率为50Hz，提取温度为45-55℃，双酶解提取时间40-60min；
（2）抽滤离心：水浴加热提取结束后，抽滤，除沉淀，得抽滤浸提溶液，将抽滤浸提溶液在4000r/ min的条件下离心分离15min，取上清液，去除沉淀，用同样的方法提取2-3次，合并上清液。
（3）醇沉离心：将上清液浓缩冷却后加入3倍体积的95％乙醇，至于低温30min，使其沉淀完全，去上清液待沉淀完全干燥后溶入去离子水中，在4000r/min的条件下离心15min，获得离心液。
（4）分离纯化：取（3）离心液50ml，加入1％木瓜蛋白酶，固定PH至6.4，温度60℃，水解2h，抽滤；取抽滤后溶液采取sevage法（正丁醇：氯仿3:1）脱蛋白，震荡40min，离心，重复上述步骤2-3次，获得沉淀物依次用无水乙醇、丙酮、无水乙醚各淋洗，冷冻干燥机干燥即得。
图1为超声波＋双酶解中百合多糖提取率折线图，从图可知超声波协同双酶解条件下兰州百合最佳提取工艺：胰酶加量1%，纤维素加量1%，超声温度50℃，超声时间40min，料也比1:25，超声功率225W。此条件下兰州百合多糖提取率为41.47%。与双酶解条件下相比多糖提取率明显提高。
实施例3
本实施例为药食两用百合多糖的提取方法提取出的百合多糖在保健品中的应用。提出了一种药食两用百合多糖保健品饮料，使用实施例1或实施例2所述的药食两用百合多糖的提取方法提取出的百合多糖，以500mL饮料计，以百合多糖、蜂蜜、白砂糖和苹果酸为原料，含有百合多糖18-25g，蜂蜜10-15g，白砂糖20-25g，苹果酸0.2-0.3g，山梨酸钾0.15-0.2g，用纯净水定容至500mL。
实施例4
本实施例为一种药食两用百合多糖保健品饮料，与实施例3不同的是，以百合多糖、蜂蜜、白砂糖和苹果酸为原料，含有百合多糖20g，蜂蜜12.5g,白砂糖25g,苹果酸0.3g,山梨酸钾0.1g, 用纯净水定容至500mL。
实施例5
本实施例为前述药食两用百合多糖保健品饮料制备方法，包括1）百合多糖预处理、2）调配、3）均质脱气以及4）杀菌、罐装、杀菌。各步骤：
步骤1) 百合多糖预处理：百合多糖中加入适量水，在50℃下加热5 min，使其充分溶解，在4 000 r/min、常温下离心15 min，除去下层水不溶性杂质，取上清液；
步骤2)调配：取澄清上清液入配料锅, 开动搅拌器, 分别加入一定量的甜味料、酸味料、增味剂，将料液用纯净水定容至500mL，摇匀；
步骤3) 均质脱气：调配后在15～20 MPa下进行均质, 均质温度为75～80℃，均质时间为 5 min，然后进行真空脱气；
步骤4）杀菌、罐装、杀菌：将均质后的料液先进行1次杀菌, 罐装后再进行2次杀菌；1次杀菌采用高温瞬时杀菌 (120℃, 3 s)，2次杀菌采用巴氏杀菌 (90℃, 10 min)；杀菌后置于自然条件下冷却至室温，制得成品。
甜味料:蜂蜜、白砂糖, 均为市售, 食用级。
酸味料:苹果酸、山梨酸钾, 抗坏血酸，均为分析纯试剂。
以上各实施例仅用于说明本发明，不应当构成对本发明专利要求保护范围的限定。可以预见，本领域技术人员在结合现有技术的情况下，实施情况可能产生种种变化。本领域普通技术人员对本发明的技术方案所做的其他修改或者等同替换，只要不脱离本发明技术方案的精神和范围，均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。
Claims (8)
1.一种药食两用百合多糖的提取方法，包括如下步骤：
1）将干燥的兰州百合粉碎，过80～120目筛，得兰州百合粉；
2）对百合粉进行脱脂处理后，进行多糖提取；
3）酶灭活；浸取液离心；醇沉；抽滤；
4）采用酶法联用Sevage法脱蛋白分离纯化，淋洗；干燥得百合多糖；
其特征在于：步骤2）中，
（1）首先采用体积比为1:1的无水乙醇、无水乙醚溶液对百合粉进行脱脂处理；
（2）然后对脱脂处理后的百合粉按固液比为1：30的质量比加水搅拌，固定PH至5.8～6；
（3）采用双酶解法协同超声波进行多糖有效成分提取，处理过程如下：
加入胰蛋白酶、凝乳酶和纤维素酶中的任意两种，再将盛有料液的容器加入到超声波提取器中进行超声波协同双酶解法水浴加热提取，超声功率为200-250W，超声波频率为50Hz，提取温度为45-55℃，双酶浓度分别是1%，双酶解提取时间40～60min。
2.根据权利要求1所述的药食两用百合多糖的提取方法，其特征在于：步骤3）中，抽滤离心：水浴加热提取结束后，抽滤，除沉淀，得抽滤浸提溶液，将抽滤浸提溶液在4000r/ min的条件下离心分离15min，取上清液，去除沉淀，用同样的方法提取2-3次，合并上清液。
3.根据权利要求2所述的药食两用百合多糖的提取方法，其特征在于：步骤3）中，醇沉离心：将上清液浓缩冷却后加入3倍体积的95％乙醇，置于低温30min，使其沉淀完全，去上清液待沉淀完全干燥后溶入去离子水中，在4000r/min的条件下离心15min，获得离心液。
4.根据权利要求1、2或3所述的药食两用百合多糖的提取方法，其特征在于：步骤4）中，分离纯化过程如下：取步骤3）离心液50ml，加入1％木瓜蛋白酶，固定PH至6.4，温度60℃，水解2h，抽滤；取抽滤后溶液采取sevage法脱蛋白，震荡40min，离心，重复上述步骤2-3次，获得沉淀物依次用无水乙醇、丙酮、无水乙醚各淋洗，冷冻干燥机干燥即得。
5.权利要求1～4任一项所述的药食两用百合多糖的提取方法提取的出百合多糖在保健品中的应用。
6.一种药食两用百合多糖保健品饮料制备方法，原料包括权利要求1～4任一项所述的药食两用百合多糖提取方法提取出的百合多糖，其特征在于：以500mL饮料计，以百合多糖、蜂蜜、白砂糖和苹果酸为原料，含有百合多糖18-25g，蜂蜜10-15g，白砂糖20-25g，苹果酸0.2-0.3g，山梨酸钾0.15-0.2g，用纯净水定容至500mL。
7.根据权利要求6所述的药食两用百合多糖保健品饮料制备方法，其特征在于：含有百合多糖20g，蜂蜜12.5g，白砂糖25g，苹果酸0.3g，山梨酸钾0.1g，用纯净水定容至500mL。
8.根据权利要求6或7所述的药食两用百合多糖保健品饮料制备方法，其特征在于：制备过程步骤如下：
1）百合多糖预处理：百合多糖中加入适量水，在50℃下加热5 min，使其充分溶解，在4000 r/min、常温下离心15 min，除去下层水不溶性杂质，取上清液；
2）调配：取澄清上清液入配料锅, 开动搅拌器, 分别加入一定量的甜味料、酸味料、增味剂，将料液用纯净水定容至500mL，摇匀；
3）均质脱气：调配后在15～20 MPa下进行均质, 均质温度为75～80℃，均质时间为 5min，然后进行真空脱气；
4）杀菌、罐装、杀菌：将均质后的料液先进行1次杀菌, 罐装后再进行2次杀菌；1次杀菌采用高温瞬时杀菌，2次杀菌采用巴氏杀菌；杀菌后置于自然条件下冷却至室温，制得成品。
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