CN110522942A - 一种皮肤修护敷料及皮肤修护敷料的制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种皮肤修护敷料及皮肤修护敷料的制备方法。本发明的目的在于提供一种皮肤修护敷料及皮肤修护敷料的制备方法，其中，该皮肤修护敷料，包括以下组分：丝素蛋白和/或丝素肽0.1％～5％重量份、透明质酸盐0.3％‑15％重量份、甘油1％～20％重量份、防腐剂0.2％～2％重量份、水58％～98.4％重量份。该皮肤修护敷料在皮肤表面形成保护屏障，促进皮肤表面伤口愈合。

Description

一种皮肤修护敷料及皮肤修护敷料的制备方法
技术领域
本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种皮肤修护敷料及皮肤修护敷料的制备方法。
背景技术
目前，皮肤是保护机体与自然界之间的第一道屏障，能够防止环境致病微生物的入侵以及自身体液的流失。随着时代的发展与进步，医学整形美容是未来的发展趋势，例如面部激光、光子嫩肤、微晶磨削、果酸活肤术等，这些医疗美容可导致皮肤表面的皮脂膜、角质层、皮肤“砖墙结构”等损伤，从而影响皮肤的屏障功能，表现为术后皮肤变得异常脆弱，易出现缺水、色素沉着、水肿、脱色、红斑、皮肤灼热等症状，需要对创面进行护理。人体皮肤及粘膜的创面愈合是一个涉及多种细胞及其分泌产物对细胞外基质进行重建和再生的过程。保持创面的湿度和促进皮肤细胞增殖、修复对伤口愈合有着非常重要的作用，不仅得到动物实验证实，而且在临床护理实践中也得到肯定。因此，需要开发一种既具有良好保湿性，可促进表皮创面快速还原的安全、无刺激的皮肤修护材料，以满足不同皮肤问题的需求，成为目前亟待解决的技术问题。
发明内容
为了克服现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种皮肤修护敷料及皮肤修护敷料的制备方法，在皮肤表面形成保护屏障，促进皮肤表面伤口愈合。
本发明的目的采用如下技术方案实现：
本发明提供一种皮肤修护敷料，包括以下组分：丝素蛋白和/或丝素肽0.1％～5％重量份、透明质酸盐0.3％-15％重量份、甘油1％～20％重量份、防腐剂0.2％～2％重量份、水58％～98.4％重量份。
在一个具体实施例中，透明质酸盐包括中分子量透明质酸钠0.1％～5％重量份、低分子量透明质酸钠0.1％～5％重量份、寡聚透明质酸钠0.1％～5％重量份。
在一个具体实施例中，防腐剂包括对羟基苯乙酮0.1％～1％重量份、1,2-己二醇0.1％～1％重量份。
在一个具体实施例中，所述中分子量透明质酸钠的分子量为1×106～1.8×106Da；所述低分子量透明质酸钠的分子量为2×105～4×105Da；所述寡聚透明质酸钠的分子量小于10000Da。
在一个具体实施例中，丝素蛋白和/或丝素肽0.1％～0.5％重量份、中分子量透明质酸钠0.25％重量份、低分子量透明质酸钠0.25％重量份、寡聚透明质酸钠0.5％重量份、甘油10％重量份、对羟基苯乙酮0.5％重量份、1,2-己二醇0.5％重量份，水87.5％～87.9％重量份。
本发明还提供一种皮肤修护敷料的制备方法，按照配比将丝素蛋白和/或丝素肽、透明质酸盐、甘油、防腐剂，加入水中，搅拌至完全溶解。
在一个具体实施例中，，在40℃～60℃条件下加热搅拌。
在一个具体实施例中，所述丝素蛋白的制备方法包括以下步骤：脱胶步骤：将蚕丝浸没在质量分数为0.1％～0.3％的碳酸钠溶液，将蚕丝和碳酸钠的混合物在85℃～100℃下加热20～40min后，除去碳酸钠，再进行干燥，得到脱胶后的蚕丝，其中，所述蚕丝与碳酸钠溶液的质量体积比为1:(50～200)(kg/L)；溶解步骤：将所述脱胶后的蚕丝溶解在溴化锂水溶液或含氯化钙的三元溶液中，其中所述脱胶后的蚕丝与所述溴化锂水溶液或含氯化钙、乙醇、水的三元溶液的浴比为1:(4～50)，溶解温度为60℃～100℃，溶解时间为0.5～24h，获得溶解后的丝素蛋白；透析步骤：使用水或蛋白变性剂对所述溶解后的丝素蛋白透析40～72h，获得丝素蛋白溶液；获得丝素蛋白：将所述丝素蛋白溶液经过离心、抽滤、冷冻干燥，获得丝素蛋白。
在一个具体实施例中，所述丝素肽的制备方法包括以下步骤：脱胶步骤：将蚕丝浸没在质量分数为0.1％～0.3％的碳酸钠溶液，将蚕丝和碳酸钠的混合物在85℃～100℃下加热20～40min后，除去碳酸钠，再进行干燥，得到脱胶后的蚕丝，其中，所述蚕丝与碳酸钠溶液的质量体积比为1:(50～200)(kg/L)；溶解步骤：将所述脱胶后的蚕丝溶解在溴化锂水溶液或含氯化钙的三元溶液中，其中所述脱胶后的蚕丝与所述溴化锂水溶液或含氯化钙、乙醇、水的三元溶液的浴比为1:(4～50)，溶解温度为60℃～100℃，溶解时间为0.5～24h，获得溶解后的丝素蛋白；透析步骤：使用水或蛋白变性剂对所述溶解后的丝素蛋白透析40～72h，获得丝素蛋白溶液；酶解步骤：将所述丝素蛋白溶液用酶在pH为6～8.5、温度为45℃～60℃酶解15min～12h，获得酶解产物；灭酶步骤：将所述酶解产物在70～100℃条件下加热10～20min，使所述酶失去活性，获得丝素肽溶液；获得丝素肽：将所述丝素肽溶液经过离心、抽滤、冷冻干燥，得到丝素肽。
在一个具体实施例中，所述酶为碱性蛋白酶、复合风味蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶中的一种或两种以上。
相比现有技术，本发明的有益效果在于：
本发明提供的皮肤修护敷料中加入丝素肽和/或丝素蛋白促进细胞增殖，丝素肽和/或丝素蛋白、中分子量透明质酸钠、低分子量透明质酸钠、寡聚透明质酸钠协同作用阻止外界不良环境对皮肤的伤害，同时为内部皮肤提供湿润环境，减少皮肤表面水分流失，促进皮肤表面伤口愈合，使得皮肤湿润、柔软、富有弹性和光泽。
附图说明
图1为本发明聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)法测定丝素肽和丝素蛋白分子量分布图；
图2为本发明使用不同丝素肽比例的皮肤修护敷料的细胞增殖情况。
具体实施方式
以下对本发明进行更为详细的描述，需要说明的是，以下对本发明进行的描述仅是示意性的，而非限制性的。各个不同实施例之间可以进行相互组合，以构成未在以下描述中示出的其他实施例。
在一个具体实施例中，本发明提供一种皮肤修护敷料，包括以下组分：丝素蛋白和/或丝素肽0.1％～5％重量份、透明质酸盐0.3％-15％重量份、甘油1％～20％重量份、防腐剂0.2％～2％重量份、水58％～98.4％重量份。本发明提供的皮肤修护敷料可以是液态、凝胶态或敷料形式，该皮肤修护敷料中丝素蛋白和/或丝素肽与中分子量透明质酸钠、低分子量透明质酸钠、寡聚透明质酸钠相互协同作用，在皮肤表面形成一个屏障，阻止外界不良环境对皮肤的伤害，促进皮肤表面细胞增殖，加快创伤愈合；还能为内部皮肤提供一个湿润环境，减少皮肤表面水分流失，促进皮肤表面伤口愈合，同时给予肌肤滑润触感。
其中，丝素蛋白是从蚕丝中提取的天然高分子材料，与人体皮肤角朊细胞结构极为相似，与皮肤有良好的亲和性，丝素蛋白保持了蚕丝蛋白的原始结构和化学组成，仍然具有蚕丝蛋白特有的柔和光泽，由于丝素蛋白中含有较多能吸收紫外线的氨基酸，如酪氨酸、色氨酸、苯丙氨酸等，使其能有效抑制皮肤黑色素的生成，防止强烈的日光辐射对人体皮肤造成损害。丝素蛋白光滑、细腻、透气性好、附着力强，能随环境温湿度的变化而吸收和释放水分，对皮肤角质层水分有较好的保持作用。
丝素肽由丝素蛋白水解而来，因水解程度不同，其分子量从几百到几千不等。由于丝素肽分子侧链中含有较多的亲水基，使丝素肽具有较好的保湿作用。丝素肽分子量较小，渗透性强，可透过角质层与上皮细胞结合，参与和改善上皮细胞的代谢，营养、活化细胞，抑制黑色素形成，促进皮肤组织再生，使皮肤湿润、柔软，富有弹性和光泽。
应当理解的是，皮肤修护敷料中可以包含丝素肽或丝素蛋白中的一种，或丝素肽和丝素蛋白同时存在；皮肤修护敷料中也可以包含不同分子量的丝素肽和/或丝素蛋白。
在一个具体实施例中，透明质酸盐包括中分子量透明质酸钠0.1％～5％重量份、低分子量透明质酸钠0.1％～5％重量份、寡聚透明质酸钠0.1％～5％重量份。在一个具体实施例中，防腐剂包括对羟基苯乙酮0.1％～1％重量份、1,2-己二醇0.1％～1％重量份。
在一个具体实施例中，中分子量透明质酸钠的分子量为1×106～1.8×106Da；低分子量透明质酸钠的分子量为2×105～4×105Da；寡聚透明质酸钠的分子量小于10000Da。其中，中分子量透明质酸钠具有良好的润滑性和成膜性，可在皮肤表面形成透气网状水化膜，调节皮肤的水分平衡并能够有效地隔绝外界细菌微生物等病原体的侵入；低分子量透明质酸钠具有细胞迁移作用，在透明质酸酶的作用下水解，有效促进组织损伤的修复；寡聚透明质酸钠能够渗透至皮肤基底层，从根源处提供补水养护，同时清除过多的自由基，促进血液循环、血管增生并调控胶原的合成。本发明通过不同大小分子量的透明质酸钠的配比，发挥协同作用，对皮肤的屏障保护及修复作用最大化，使皮肤湿润、柔软、富有弹性和光泽。
在一个具体实施例中，丝素蛋白和/或丝素肽0.1％～0.5％重量份、中分子量透明质酸钠0.25％重量份、低分子量透明质酸钠0.25％重量份、寡聚透明质酸钠0.5％重量份、甘油10％重量份、对羟基苯乙酮0.5％重量份、1,2-己二醇0.5％重量份，水87.5％～87.9％重量份。在一定范围内，丝素肽或丝素蛋白含量越大，细胞增殖显著增加，对皮肤修护具有更好的修护效果。
本发明的皮肤修护敷料可应用于面部激光、光子嫩肤、微晶磨削、果酸活肤术等术后创伤皮肤的保护和护理、以及皮肤湿疹、敏感性皮肤、激素依赖性皮炎等屏障受损皮肤的保护和护理。
在另一个具体实施例中，本发明还提供一种皮肤修护敷料的制备方法，按照配比将丝素蛋白和/或丝素肽、透明质酸盐、甘油、防腐剂，加入水中，并搅拌至完全溶解。即，将0.1％～5％丝素蛋白和/或丝素肽、0.1％～5％中分子量透明质酸钠、0.1％～5％低分子量透明质酸钠、0.1％～5％寡聚透明质酸钠、1％～20％甘油、0.1％～1％对羟基苯乙酮、0.1％～1％1,2-己二醇，58％～98.4％水混合，并搅拌至完全溶解。在一个具体实施例中，上述混合物在40℃～60℃条件下加热搅拌至完全溶解，将溶解后的混合物封装。也就是说，按上述配比将丝素蛋白和/或丝素肽、中分子量透明质酸钠、低分子量透明质酸钠、寡聚透明质酸钠、甘油、对羟基苯乙酮、1,2-己二醇加入水中，40℃～60℃加热搅拌至完全溶解，进行封装。
在一个具体实施例中，中分子量透明质酸钠的分子量为1×106～1.8×106Da；低分子量透明质酸钠的分子量为2×105～4×105Da；寡聚透明质酸钠的分子量小于10000Da。其中，中分子量透明质酸钠具有良好的润滑性和成膜性，可在皮肤表面形成透气网状水化膜，调节皮肤的水分平衡并能够有效地隔绝外界细菌微生物等病原体的侵入；低分子量透明质酸钠具有细胞迁移作用，在透明质酸酶的作用下水解，有效促进组织损伤的修复；寡聚透明质酸钠能够渗透至皮肤基底层，从根源处提供补水养护，同时清除过多的自由基，促进血液循环、血管增生并调控胶原的合成。本发明通过不同大小分子量的透明质酸钠的配比，发挥协同作用，对皮肤的屏障保护及修复作用最大化，使皮肤湿润、柔软、富有弹性和光泽。
在一个具体实施例中，丝素蛋白和/或丝素肽0.1％～0.5％重量份、中分子量透明质酸钠0.25％重量份、低分子量透明质酸钠0.25％重量份、寡聚透明质酸钠0.5％重量份、甘油10％重量份、对羟基苯乙酮0.5％重量份、1,2-己二醇0.5％重量份，水87.5％～87.9％重量份。其中，水为纯化水、蒸馏水或注射用水。在一定范围内，丝素肽或丝素蛋白含量越大，细胞增殖显著增加，对皮肤修护具有更好的修护效果。
在一个具体实施例中，丝素蛋白的制备方法包括以下步骤：
脱胶步骤：将蚕丝浸没在质量分数为0.1％～0.3％的碳酸钠溶液，其中，蚕丝与碳酸钠溶液的质量体积比为1:(50～200)(kg/L)，碳酸钠溶液作为脱胶液。将蚕丝和碳酸钠的混合物水浴加热至85℃～100℃，持续加热20～40min进行脱胶过程；再用与脱胶液等体积的水清洗，进行去除碳酸钠过程，并将上述脱胶过程和碳酸钠去除过程重复2～5次，去除碳酸钠和丝胶；将最后一次经过脱胶过程和去除碳酸钠过程的蚕丝用与脱胶液等体积的水清洗3～10次，将蚕丝分散；再在40℃～90℃条件下进行干燥，得到脱胶后的蚕丝。
溶解步骤：将脱胶后的蚕丝溶解在溴化锂水溶液或氯化钙、乙醇、水的三元溶液中，其中脱胶后的蚕丝与溴化锂水溶液或氯化钙、乙醇、水三元溶液的浴比为1:(4～50)，溶解温度为60℃～100℃，溶解时间为0.5h～24h，获得溶解后的丝素蛋白，其中，溴化锂的浓度为9.1～9.5M，含氯化钙的三元溶液中氯化钙、水、乙醇的摩尔比为1:8:2。
透析步骤：使用水或蛋白变性剂(如尿素溶液)对溶解后的丝素蛋白透析40～72h，获得丝素蛋白溶液，其中透析步骤中使用的蛋白变性剂可以是不同浓度梯度的溶液，获得更纯的丝素蛋白或丝素肽，且丝素蛋白或丝素肽具有更好的溶解性，能够更好的促进细胞增殖，如蛋白变性剂浓度分别为4M、2M、1M的尿素溶液，每个浓度进行一次透析，每次透析时间为1～5h，然后用水透析5～15次，去除氯化钙或溴化锂。
获得丝素蛋白：将丝素蛋白溶液经过离心、抽滤、冷冻干燥，获得丝素蛋白。
在一个具体实施例中，丝素肽的制备方法包括以下步骤：
脱胶步骤：将蚕丝浸没在质量分数为0.1％～0.3％的碳酸钠溶液，其中，蚕丝与碳酸钠溶液的质量体积比为1:(50～200)(kg/L)，碳酸钠溶液作为脱胶液。将蚕丝和碳酸钠的混合物加热至85℃～100℃，持续加热20～40min进行脱胶过程；再用与脱胶液等体积的水清洗，进行去除碳酸钠过程，并将上述脱胶过程和碳酸钠去除过程重复2～5次，去除碳酸钠和丝胶；将最后一次经过脱胶过程和去除碳酸钠过程的蚕丝用于脱胶液等体积的水清洗3～10次，将蚕丝分散；再在40～90℃条件下进行干燥，得到脱胶后的蚕丝。
溶解步骤：将脱胶后的蚕丝溶解在溴化锂水溶液或氯化钙、乙醇、水的三元溶液中，其中脱胶后的蚕丝与溴化锂水溶液或氯化钙、乙醇、水的三元溶液的浴比为1:(4～50)，溶解温度为60℃～100℃，溶解时间为0.5～24h，获得溶解后的丝素蛋白，其中，溴化锂的浓度为9.1～9.5M，含氯化钙的三元溶液中氯化钙、水、乙醇的摩尔比为1:8:2。
透析步骤：使用水或蛋白变性剂(如尿素溶液)对溶解后的丝素蛋白透析40～72h，获得丝素蛋白溶液，其中透析步骤中使用的蛋白变性剂可以是不同浓度梯度的溶液，获得更纯的丝素蛋白或丝素肽，且丝素蛋白或丝素肽具有更好的溶解性，能够更好的促进细胞增殖，如蛋白变性剂浓度分别为4M、2M、1M的尿素溶液，每次浓度进行一次透析，每次透析时间为1～5h，然后用水透析5～15次，去除氯化钙或溴化锂。
酶解步骤：将丝素蛋白溶液用酶在pH为6～8.5、温度为45℃～60℃酶解15min～12h，获得酶解产物。在一个具体实施例中，酶为碱性蛋白酶、复合风味蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶中的一种或两种以上。也就是说，用于酶解丝素蛋白的酶可以是一种，也可以是两种以上组合，当酶为两种以上组合时，各种酶可以组合同时使用，或者各种酶依次使用，如碱性蛋白酶(Alcalase)和复合风味蛋白酶(Flavourzyme)中的一种或两种同时使用或两种依次使用，优选两种酶依次使用。
灭酶步骤：将酶解产物在70～100℃条件下加热10～20min进行灭酶，使酶失去活性，获得丝素肽溶液；
获得丝素肽：将丝素肽溶液经过离心、抽滤、冷冻干燥，得到丝素肽。
实施例一 丝素蛋白和丝素肽的制备方法，包括以下步骤：
1)将蚕丝浸没在碳酸钠(Na2CO3)水溶液中，其中Na2CO3与水的质量体积比为212：100(g/L)(碳酸钠的质量分数为0.212％)，蚕丝与Na2CO3溶液的质量体积比为1：100(kg/L)，将蚕丝与碳酸钠的混合物水浴加热至温度达到90℃，持续加热30min后，将蚕丝与碳酸钠的混合物置于质量体积比为1：100(kg/L)的水中清洗，除去Na2CO3水溶液；以上脱胶和清洗过程重复3次后，将最后一次脱胶及清洗完成后蚕丝用与脱胶液等体积的水清洗3次，将丝素蛋白纤维分散，于55℃进行干燥处理，得到脱胶后的蚕丝。
2)脱胶后的蚕丝按照浴比为1:5溶解在9.3M±2％的溴化锂溶液中，溶解温度为63℃，溶解2小时，用水透析46小时，换水10次，再经过离心，抽滤，得到溴化锂溶解制得的丝素蛋白溶液。或者将脱胶后的蚕丝使用含氯化钙的三元溶液(氯化钙、水和乙醇的摩尔比为1:8:2)按照浴比为1:10、温度78℃、溶解1小时。用蛋白变性剂尿素溶液按浓度梯度为4M、2M和1M，每次透析时间3小时，之后用水透析46小时，换水10次，再经过离心，抽滤，得到氯化钙溶解制得的丝素蛋白溶液。
3)将溴化锂溶解制得的丝素蛋白溶液用碱性蛋白酶(Alcalase)按12AU/kg蛋白在pH为7.5、温度55℃条件下，酶解15min，再分别按1.43LAPU/g和35LAPU/g蛋白加入复合风味蛋白酶(Flavourzyme)，在pH为6.5，温度50℃，分别酶解0.5h、1h、2h，85℃水浴加热15分钟灭酶。离心、抽滤得到六种不同分子量的丝素蛋白和丝素肽溶液。
4)丝素蛋白和丝素肽溶液冷冻干燥即可制得冻干粉。用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDA-PAGE)法测定丝素蛋白和丝素肽分子量分布如图1所示，其中，其中图1中丝素蛋白的酶解条件分别为：编号1：碱性蛋白酶(Alcalase)12AU/kg，酶解15min，复合风味蛋白酶(Flavourzyme)1.43LAPU/g，酶解0.5h；编号2：碱性蛋白酶(Alcalase)12AU/kg，酶解15min，复合风味蛋白酶(Flavourzyme)1.43LAPU/g，酶解1h；编号3：碱性蛋白酶(Alcalase)12AU/kg，酶解15min，复合风味蛋白酶(Flavourzyme)1.43LAPU/g，酶解2h；编号4：碱性蛋白酶(Alcalase)12AU/kg，酶解15min，复合风味蛋白酶(Flavourzyme)35LAPU/g，酶解0.5h；编号5：碱性蛋白酶(Alcalase)12AU/kg，酶解15min，复合风味蛋白酶(Flavourzyme)35LAPU/g，酶解1h；编号6：碱性蛋白酶(Alcalase)12AU/kg，酶解15min，复合风味蛋白酶(Flavourzyme)35LAPU/g，酶解2h；编号7和编号8的丝素蛋白溶解条件分别为CaCl2和LiBr，未经酶解。
实施例二 皮肤修护敷料的制备，包括如下步骤：
按丝素肽0.1％、中分子量透明质酸钠0.25％、低分子量透明质酸钠0.25％、寡聚透明质酸钠0.5％、甘油10％、对羟基苯乙酮0.5％、1,2-己二醇0.5％的配比称取各物质质量加入水中，50℃加热搅拌至完全溶解，灌装至辐照灭菌后的装有折叠无纺布的铝箔袋中，封口，包装，得到丝素皮肤修护材料。其中，丝素肽的分子量为1～5KDa，中分子量透明质酸钠的分子量为1.46×106Da，低分子量透明质酸钠的分子量为3.5×105Da，寡聚透明质酸钠的分子量为8812Da。
实施例三 皮肤修护敷料的制备，包括如下步骤：
按丝素肽0.25％、中分子量透明质酸钠0.25％、低分子量透明质酸钠0.25％、寡聚透明质酸钠0.5％、甘油10％、对羟基苯乙酮0.5％、1,2-己二醇0.5％的配比称取各物质质量加入水中，50℃加热搅拌至完全溶解，灌装至辐照灭菌后的装有折叠无纺布的铝箔袋中，封口，包装，得到丝素皮肤修护材料。其中，丝素肽的分子量为1～5KDa，中分子量透明质酸钠的分子量为1.46×106Da，低分子量透明质酸钠的分子量为3.5×105Da，寡聚透明质酸钠的分子量为8812Da。
实施例四 皮肤修护敷料的制备，包括如下步骤：
按丝素肽0.5％、中分子量透明质酸钠0.25％、低分子量透明质酸钠0.25％、寡聚透明质酸钠0.5％、甘油10％、对羟基苯乙酮0.5％、1,2-己二醇0.5％的配比称取各物质质量加入水中，50℃加热搅拌至完全溶解，灌装至辐照灭菌后的装有折叠无纺布的铝箔袋中，封口，包装，得到丝素皮肤修护材料。其中，丝素肽的分子量为1～5KDa，中分子量透明质酸钠的分子量为1.46×106Da，低分子量透明质酸钠的分子量为3.5×105Da，寡聚透明质酸钠的分子量为8812Da。皮肤修护敷料的细胞增殖试验
将生长旺盛的小鼠成纤维细胞L929消化下来，用MEM培养基配制成细胞悬液，接种于96孔板，置于细胞培养箱于5％的CO2浓度中，37℃培养24h，待细胞贴壁后加入分别加入实施例二、实施例三、实施例四，未加入批复修护敷料的细胞培养孔作为空白对照组。分别于1天、3天、5天用CCK-8检测细胞活力。如图2结果显示，实施例二、实施例三、实施例四的细胞增殖与空白对照组相比有显著增加，并且随着丝素肽浓度的增大，细胞增殖显著增加。结果表明，丝素皮肤修护敷料具有促进细胞增殖的效果。
皮肤修护敷料的创面愈合试验
新西兰兔背部建立全层创面模型，创面建立后实验组用实施例2、3、4的丝素皮肤修护材料覆盖创面，对照组用纱布覆盖创面，观察创面的愈合情况和愈合时间。
表1不同丝素肽比例的皮肤修护材料的创面愈合情况
表1结果显示，实施例二、实施例三、实施例四的创面愈合情况明显优于空白对照组，随着皮肤修护材料中丝素肽含量的增大，创面愈合时间明显缩短。结果表明，丝素皮肤修护敷料具有促进创面愈合的效果。
上述实施方式仅为本发明的优选实施方式，不能以此来限定本发明保护的范围，本领域的技术人员在本发明的基础上所做的任何非实质性的变化及替换均属于本发明所要求保护的范围。

Claims (10)

1.一种皮肤修护敷料，其特征在于，包括以下组分：丝素蛋白和/或丝素肽0.1％～5％重量份、透明质酸盐0.3％-15％重量份、甘油1％～20％重量份、防腐剂0.2％～2％重量份、水58％～98.4％重量份。
2.如权利要求1所述的皮肤修护敷料，其特征在于，所述透明质酸盐包括中分子量透明质酸钠0.1％～5％重量份、低分子量透明质酸钠0.1％～5％重量份、寡聚透明质酸钠0.1％～5％重量份。
3.如权利要求2所述的皮肤修护敷料，其特征在于，所述防腐剂包括对羟基苯乙酮0.1％～1％重量份、1,2-己二醇0.1％～1％重量份。
4.如权利要求2所述的皮肤修护敷料，其特征在于，所述中分子量透明质酸钠的分子量为1×106～1.8×106Da；所述低分子量透明质酸钠的分子量为2×105～4×105Da；所述寡聚透明质酸钠的分子量小于10000Da。
5.如权利要求3所述的皮肤修护敷料，其特征在于，所述丝素蛋白和/或丝素肽0.1％～0.5％重量份、所述中分子量透明质酸钠0.25％重量份、所述低分子量透明质酸钠0.25％重量份、所述寡聚透明质酸钠0.5％重量份、所述甘油10％重量份、所述对羟基苯乙酮0.5％重量份、所述1,2-己二醇0.5％重量份，所述水87.5％～87.9％重量份。
6.一种制备权利要求1至5中任一项所述皮肤修护敷料的方法，其特征在于，按照配比将丝素蛋白和/或丝素肽、透明质酸盐、甘油、防腐剂，加入水中，搅拌至完全溶解。
7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，在40℃～60℃条件下加热搅拌。
8.如权利要求6所述的方法，其特征在于，所述丝素蛋白的制备方法包括以下步骤：
脱胶步骤：将蚕丝浸没在质量分数为0.1％～0.3％的碳酸钠溶液，将蚕丝和碳酸钠的混合物在85℃～100℃下加热20～40min后，除去碳酸钠，再进行干燥，得到脱胶后的蚕丝，其中，所述蚕丝与碳酸钠溶液的质量体积比为1:(50～200)(kg/L)；
溶解步骤：将所述脱胶后的蚕丝溶解在溴化锂水溶液或氯化钙、乙醇、水的三元溶液中，其中所述脱胶后的蚕丝与所述溴化锂水溶液或所述氯化钙、乙醇、水的三元溶液的浴比为1:(4～50)，溶解温度为60℃～100℃，溶解时间为0.5～24h，获得溶解后的丝素蛋白；
透析步骤：使用水或蛋白变性剂对所述溶解后的丝素蛋白透析40～72h，获得丝素蛋白溶液；
获得丝素蛋白：将所述丝素蛋白溶液经过离心、抽滤、冷冻干燥，获得丝素蛋白。
9.如权利要求6所述的皮肤修护敷料的制备方法，其特征在于，所述丝素肽的制备方法包括以下步骤：
脱胶步骤：将蚕丝浸没在质量分数为0.1％～0.3％的碳酸钠溶液，将蚕丝和碳酸钠的混合物在85℃～100℃下加热20～40min后，除去碳酸钠，再进行干燥，得到脱胶后的蚕丝，其中，所述蚕丝与碳酸钠溶液的质量体积比为1:(50～200)(kg/L)；
溶解步骤：将所述脱胶后的蚕丝溶解在溴化锂水溶液或含氯化钙的三元溶液中，其中所述脱胶后的蚕丝与所述溴化锂水溶液或含氯化钙、乙醇、水的三元溶液的浴比为1:(4～50)，溶解温度为60℃～100℃，溶解时间为0.5～24h，获得溶解后的丝素蛋白；
透析步骤：使用水或蛋白变性剂对所述溶解后的丝素蛋白透析40～72h，获得丝素蛋白溶液；
酶解步骤：将所述丝素蛋白溶液用酶在pH为6～8.5、温度为45℃～60℃酶解15min～12h，获得酶解产物；
灭酶步骤：将所述酶解产物在70～100℃条件下加热10～20min，使所述酶失去活性，获得丝素肽溶液；
获得丝素肽：将所述丝素肽溶液经过离心、抽滤、冷冻干燥，得到丝素肽。
10.如权利要求9所述的皮肤修护敷料的制备方法，其特征在于，所述酶为碱性蛋白酶、复合风味蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶中的一种或两种以上。
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