CN114642606A - 一种具有皮肤屏障修复功能的组合物及其制备方法和应用 - Google Patents
一种具有皮肤屏障修复功能的组合物及其制备方法和应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN114642606A CN114642606A CN202210402987.4A CN202210402987A CN114642606A CN 114642606 A CN114642606 A CN 114642606A CN 202210402987 A CN202210402987 A CN 202210402987A CN 114642606 A CN114642606 A CN 114642606A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- salt
- molecular weight
- composition
- hyaluronic acid
- skin
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 70
- 230000008591 skin barrier function Effects 0.000 title claims abstract description 33
- 230000008439 repair process Effects 0.000 title claims abstract description 28
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title abstract description 17
- KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N (2S,3S,4S,5R,6R)-6-[(2S,3R,4R,5S,6R)-3-Acetamido-2-[(2S,3S,4R,5R,6R)-6-[(2R,3R,4R,5S,6R)-3-acetamido-2,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-2-carboxy-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2-carboxylic acid Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N 0.000 claims abstract description 37
- 229920002674 hyaluronan Polymers 0.000 claims abstract description 37
- 229960003160 hyaluronic acid Drugs 0.000 claims abstract description 37
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 35
- 108010022355 Fibroins Proteins 0.000 claims abstract description 26
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims abstract description 22
- 108010031318 Vitronectin Proteins 0.000 claims abstract description 18
- 102100035140 Vitronectin Human genes 0.000 claims abstract description 18
- 206010072170 Skin wound Diseases 0.000 claims abstract description 7
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 28
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 26
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 21
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 15
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 claims description 15
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 claims description 14
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 13
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 12
- IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 1-palmitoyl-2-arachidonoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical group CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 0.000 claims description 9
- 235000010445 lecithin Nutrition 0.000 claims description 9
- 229940067606 lecithin Drugs 0.000 claims description 9
- 239000000787 lecithin Substances 0.000 claims description 9
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims description 8
- 238000001816 cooling Methods 0.000 claims description 5
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 5
- 150000005846 sugar alcohols Polymers 0.000 claims description 5
- 230000037314 wound repair Effects 0.000 claims description 5
- WCDDVEOXEIYWFB-VXORFPGASA-N (2s,3s,4r,5r,6r)-3-[(2s,3r,5s,6r)-3-acetamido-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy-4,5,6-trihydroxyoxane-2-carboxylic acid Chemical compound CC(=O)N[C@@H]1C[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](C(O)=O)O[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O WCDDVEOXEIYWFB-VXORFPGASA-N 0.000 claims description 4
- 229940014041 hyaluronate Drugs 0.000 claims description 4
- 229920005862 polyol Polymers 0.000 claims description 3
- 150000003077 polyols Chemical class 0.000 claims description 3
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 claims description 3
- TZCPCKNHXULUIY-RGULYWFUSA-N 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoserine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OC[C@H](N)C(O)=O)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC TZCPCKNHXULUIY-RGULYWFUSA-N 0.000 claims description 2
- ZWZWYGMENQVNFU-UHFFFAOYSA-N Glycerophosphorylserin Natural products OC(=O)C(N)COP(O)(=O)OCC(O)CO ZWZWYGMENQVNFU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 159000000007 calcium salts Chemical class 0.000 claims description 2
- 159000000003 magnesium salts Chemical class 0.000 claims description 2
- XAEFZNCEHLXOMS-UHFFFAOYSA-M potassium benzoate Chemical compound [K+].[O-]C(=O)C1=CC=CC=C1 XAEFZNCEHLXOMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 2
- 150000003242 quaternary ammonium salts Chemical class 0.000 claims description 2
- 150000003751 zinc Chemical class 0.000 claims description 2
- 239000002131 composite material Substances 0.000 claims 1
- 229920005668 polycarbonate resin Polymers 0.000 claims 1
- 239000004431 polycarbonate resin Substances 0.000 claims 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 abstract description 20
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 abstract description 19
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 17
- 230000029663 wound healing Effects 0.000 abstract description 14
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 abstract description 8
- 230000012292 cell migration Effects 0.000 abstract description 6
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 abstract description 6
- 210000004207 dermis Anatomy 0.000 abstract description 5
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 abstract description 5
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 abstract description 4
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 abstract description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 abstract description 4
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 abstract description 4
- 210000000434 stratum corneum Anatomy 0.000 abstract description 4
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 abstract description 3
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 abstract description 2
- 239000003357 wound healing promoting agent Substances 0.000 abstract description 2
- 230000006870 function Effects 0.000 description 24
- 229920002385 Sodium hyaluronate Polymers 0.000 description 22
- 229940010747 sodium hyaluronate Drugs 0.000 description 22
- YWIVKILSMZOHHF-QJZPQSOGSA-N sodium;(2s,3s,4s,5r,6r)-6-[(2s,3r,4r,5s,6r)-3-acetamido-2-[(2s,3s,4r,5r,6r)-6-[(2r,3r,4r,5s,6r)-3-acetamido-2,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-2-carboxy-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2- Chemical compound [Na+].CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 YWIVKILSMZOHHF-QJZPQSOGSA-N 0.000 description 22
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 21
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 16
- 206010052428 Wound Diseases 0.000 description 13
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 13
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 11
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 10
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 9
- 239000000047 product Substances 0.000 description 9
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 8
- 229920002683 Glycosaminoglycan Polymers 0.000 description 7
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 7
- 238000004945 emulsification Methods 0.000 description 7
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 6
- 108010087230 Sincalide Proteins 0.000 description 6
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 6
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 6
- 238000010609 cell counting kit-8 assay Methods 0.000 description 6
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 6
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 6
- IZTQOLKUZKXIRV-YRVFCXMDSA-N sincalide Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O)C1=CC=C(OS(O)(=O)=O)C=C1 IZTQOLKUZKXIRV-YRVFCXMDSA-N 0.000 description 6
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 5
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 5
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 5
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 5
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 5
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 5
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 5
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 5
- 230000008569 process Effects 0.000 description 5
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 5
- 239000011449 brick Substances 0.000 description 4
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 4
- 210000002744 extracellular matrix Anatomy 0.000 description 4
- RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N glutathione Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N 0.000 description 4
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- 108010037362 Extracellular Matrix Proteins Proteins 0.000 description 3
- 102000010834 Extracellular Matrix Proteins Human genes 0.000 description 3
- 108010073385 Fibrin Proteins 0.000 description 3
- 102000009123 Fibrin Human genes 0.000 description 3
- BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N Fibrin monomer Chemical compound CNC(=O)CNC(=O)CN BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 3
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 3
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 3
- 230000009471 action Effects 0.000 description 3
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 description 3
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 3
- 210000002615 epidermis Anatomy 0.000 description 3
- 229950003499 fibrin Drugs 0.000 description 3
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 3
- 239000008213 purified water Substances 0.000 description 3
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 3
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 3
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 3
- KEQXNNJHMWSZHK-UHFFFAOYSA-L 1,3,2,4$l^{2}-dioxathiaplumbetane 2,2-dioxide Chemical group [Pb+2].[O-]S([O-])(=O)=O KEQXNNJHMWSZHK-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 244000146462 Centella asiatica Species 0.000 description 2
- 235000004032 Centella asiatica Nutrition 0.000 description 2
- SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N D-xylopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N 0.000 description 2
- 108010024636 Glutathione Proteins 0.000 description 2
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 2
- SSISHJJTAXXQAX-ZETCQYMHSA-N L-ergothioneine Chemical compound C[N+](C)(C)[C@H](C([O-])=O)CC1=CNC(=S)N1 SSISHJJTAXXQAX-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 2
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N Tartaric acid Natural products [H+].[H+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 2
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 2
- 230000003796 beauty Effects 0.000 description 2
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 2
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 2
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- 238000002737 cell proliferation kit Methods 0.000 description 2
- 238000013329 compounding Methods 0.000 description 2
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 2
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- WQXNXVUDBPYKBA-YFKPBYRVSA-N ectoine Chemical compound CC1=[NH+][C@H](C([O-])=O)CCN1 WQXNXVUDBPYKBA-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- 229940093497 ergothioneine Drugs 0.000 description 2
- 229960003180 glutathione Drugs 0.000 description 2
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 2
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 2
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 2
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 210000002510 keratinocyte Anatomy 0.000 description 2
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 2
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 2
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 2
- 230000003020 moisturizing effect Effects 0.000 description 2
- 230000002980 postoperative effect Effects 0.000 description 2
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 2
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 2
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 2
- 239000012679 serum free medium Substances 0.000 description 2
- 210000001626 skin fibroblast Anatomy 0.000 description 2
- 238000013112 stability test Methods 0.000 description 2
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 2
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 description 2
- 239000011975 tartaric acid Substances 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- MPDGHEJMBKOTSU-YKLVYJNSSA-N 18beta-glycyrrhetic acid Chemical compound C([C@H]1C2=CC(=O)[C@H]34)[C@@](C)(C(O)=O)CC[C@]1(C)CC[C@@]2(C)[C@]4(C)CC[C@@H]1[C@]3(C)CC[C@H](O)C1(C)C MPDGHEJMBKOTSU-YKLVYJNSSA-N 0.000 description 1
- OSCJHTSDLYVCQC-UHFFFAOYSA-N 2-ethylhexyl 4-[[4-[4-(tert-butylcarbamoyl)anilino]-6-[4-(2-ethylhexoxycarbonyl)anilino]-1,3,5-triazin-2-yl]amino]benzoate Chemical compound C1=CC(C(=O)OCC(CC)CCCC)=CC=C1NC1=NC(NC=2C=CC(=CC=2)C(=O)NC(C)(C)C)=NC(NC=2C=CC(=CC=2)C(=O)OCC(CC)CCCC)=N1 OSCJHTSDLYVCQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 1
- 241000972773 Aulopiformes Species 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 235000008708 Morus alba Nutrition 0.000 description 1
- 240000000249 Morus alba Species 0.000 description 1
- 102000003945 NF-kappa B Human genes 0.000 description 1
- 108010057466 NF-kappa B Proteins 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- GAOXEGSQPILJSU-UHFFFAOYSA-N OC1(OCCCC1)CCCO Chemical compound OC1(OCCCC1)CCCO GAOXEGSQPILJSU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010057249 Phagocytosis Diseases 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 239000013566 allergen Substances 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000007123 defense Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 230000003292 diminished effect Effects 0.000 description 1
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 1
- 230000002500 effect on skin Effects 0.000 description 1
- 230000001804 emulsifying effect Effects 0.000 description 1
- 230000003511 endothelial effect Effects 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 210000005175 epidermal keratinocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 235000019688 fish Nutrition 0.000 description 1
- 238000005189 flocculation Methods 0.000 description 1
- 230000016615 flocculation Effects 0.000 description 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 239000003862 glucocorticoid Substances 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 239000006481 glucose medium Substances 0.000 description 1
- 150000002337 glycosamines Chemical class 0.000 description 1
- 210000003714 granulocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 238000000265 homogenisation Methods 0.000 description 1
- 230000005745 host immune response Effects 0.000 description 1
- 230000003301 hydrolyzing effect Effects 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 1
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000028709 inflammatory response Effects 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 230000001788 irregular Effects 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 238000005461 lubrication Methods 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000008986 metabolic interaction Effects 0.000 description 1
- 244000000010 microbial pathogen Species 0.000 description 1
- 239000013081 microcrystal Substances 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 1
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 230000000242 pagocytic effect Effects 0.000 description 1
- 210000004738 parenchymal cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000012466 permeate Substances 0.000 description 1
- 230000008782 phagocytosis Effects 0.000 description 1
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 210000005059 placental tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000005498 polishing Methods 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000001172 regenerating effect Effects 0.000 description 1
- 235000019515 salmon Nutrition 0.000 description 1
- 210000002374 sebum Anatomy 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 210000002536 stromal cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 1
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 1
- 229910052905 tridymite Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000003606 umbilical vein Anatomy 0.000 description 1
- 210000003556 vascular endothelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000003809 water extraction Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/72—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic macromolecular compounds
- A61K8/73—Polysaccharides
- A61K8/735—Mucopolysaccharides, e.g. hyaluronic acid; Derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
- A61K8/49—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing heterocyclic compounds
- A61K8/4973—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing heterocyclic compounds with oxygen as the only hetero atom
- A61K8/498—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing heterocyclic compounds with oxygen as the only hetero atom having 6-membered rings or their condensed derivatives, e.g. coumarin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
- A61K8/60—Sugars; Derivatives thereof
- A61K8/608—Derivatives containing from 2 to 10 oxyalkylene groups
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
- A61K8/64—Proteins; Peptides; Derivatives or degradation products thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L26/00—Chemical aspects of, or use of materials for, wound dressings or bandages in liquid, gel or powder form
- A61L26/0009—Chemical aspects of, or use of materials for, wound dressings or bandages in liquid, gel or powder form containing macromolecular materials
- A61L26/0023—Polysaccharides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L26/00—Chemical aspects of, or use of materials for, wound dressings or bandages in liquid, gel or powder form
- A61L26/0009—Chemical aspects of, or use of materials for, wound dressings or bandages in liquid, gel or powder form containing macromolecular materials
- A61L26/0028—Polypeptides; Proteins; Degradation products thereof
- A61L26/0047—Specific proteins or polypeptides not covered by groups A61L26/0033 - A61L26/0042
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L26/00—Chemical aspects of, or use of materials for, wound dressings or bandages in liquid, gel or powder form
- A61L26/0061—Use of materials characterised by their function or physical properties
- A61L26/0066—Medicaments; Biocides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q19/00—Preparations for care of the skin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
- A61K2800/40—Chemical, physico-chemical or functional or structural properties of particular ingredients
- A61K2800/59—Mixtures
- A61K2800/592—Mixtures of compounds complementing their respective functions
- A61K2800/5922—At least two compounds being classified in the same subclass of A61K8/18
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Birds (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Materials Engineering (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Cosmetics (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
本发明公开了一种具有皮肤屏障修复功能的组合物及其制备方法和应用，其包括以下成分：高分子量透明质酸或其盐0.01‑0.5%，水解透明质酸或其盐0.1‑1.0%，丝素蛋白0.01‑10%，多聚脱氧核糖核酸0.05‑1%，玻色因0.1‑10%。本发明的高分子量透明质酸或其盐能靶向作用皮肤角质层，在皮肤表面形成水润透气保护膜，极低分子量的水解透明质酸或其盐能透皮吸收进入皮肤真皮层，发挥刺激血管生成的功效。PDRN、丝素蛋白及玻色因能促进胶原蛋白的合成及促进细胞迁移。这几种成分协同搭配，具有突出的促进伤口愈合功效，能修复受损的皮肤屏障，达到快速修复皮肤创面的效果。
Description
技术领域
本发明涉及一种具有皮肤屏障修复功能的组合物及其制备方法和应用，属于个人护理品及医疗器械技术领域。
背景技术
皮肤覆盖于人体表面，是人体最大的器官之一。皮肤由表皮和真皮两部分组成，其中表皮的关键功能是在生物体和外界之间形成屏障，对人体有重要的保护作用。皮肤的天然屏障指由角质层细胞和细胞之间的“脂质”和“天然保湿因子”组成的“砖墙结构”，其表面附有“皮脂膜”，由此共同形成了一道人体天然保护屏障。这就是美国学者Elias PM提出的著名的砖墙学说。皮肤的天然屏障可防止水分和溶质的流失，同时维持体内环境的平衡。皮肤屏障破坏的常见原因有：缺乏科学的皮肤护理知识，滥用化妆品，主要为含糖皮质激素类化妆品；或接受不规范的美容治疗如激光、果酸，使皮肤屏障受损，导致防御功能减弱。特别是近几年来各种医美项目愈来愈受到女性的亲睐，特别是水光注射类产品，水光术后皮肤创面一旦形成，这些部位就失去了第一道天然屏障，细菌等病原体微生物或其他过敏源就可能透过伤口部位入侵，造成细菌感染等。因此，及时保护和修复伤口或创面至关重要。
皮肤的细胞外基质（ECM）间存在大量的粘多糖，大部分都是由糖醛酸和氨基糖组成的糖类聚合物（GAG），这些粘多糖对皮肤起到了非常重要的作用。透明质酸就是其中的一种酸性黏多糖，天然存在于无血管的机体腔室中，是人体分布最广的一种糖胺聚糖，也是皮肤天然保湿因子的成分之一，主要由真皮成纤维细胞和表皮角质细胞合成，能够有效吸收和锁住水分，与角质形成细胞形成的砖墙结构强化锁水屏障。因HA的生物活性和使用效果与其相对分子量直接相关，所以应根据使用目的的不同选择不同的分子量。如高分子量的HA (HMWHA，Mr >1×106Da)具有较好的粘弹性、保湿性、抑制炎性反应、润滑等功能； HA 寡聚糖( o-HA，Mr<1×104Da )有抗肿瘤、促进创伤愈合、促进骨和血管生成、免疫调节等作用。有研究表明当机体表面发生创伤时，局部 HA 含量立刻明显升高，HA 在创伤愈合过程中所发挥的作用有：（1） 与血纤维蛋白组成的凝块在伤口愈合过程中发挥构造功能。（2）通过促进粒细胞的吞噬活性调节炎症反应。（3）局部降解产生的低分子量的HA（LMWHA）和 o-HA促进血管生成。（4）调控胶原的合成。LMWHA 和 o-HA能刺激血管生成，伤口中的HA在酶的作用下，降低成 LMWHA 和 o-HA，进而促进伤口愈合。在创伤早期给予大量高分子HA，能促使再生性愈合的产生，且有抗炎的作用。其作用机制： HA能促进巨噬细胞的吞噬作用，激活重要的宿主免疫反应调节系统，NF-kB转录调节系统，诱导多种细胞表达多种炎性因子、促进血管形成，这些作用是通过巨噬细胞、血管内皮细胞等细胞表面 HA 受体。研究表明，在大鼠皮肤上涂抹寡聚HA后，可以检测到最大深度为800 μm，从皮肤内层次起到相关的功效作用。不同分子量HA的功效显著且多样，根据不同的应用场景选择不同分子量HA的复配是一种比较好的解决HA应用于不同技术领域的方案。
多聚脱氧核糖核酸简称PDRN，由50到2000个碱基对结合成的长链，一般是由鲑鱼鱼精及哺乳动物胎盘组织中提取得到，由于伦理学的限制，目前一般是从鱼类中提取的居多，其具有较好的促成纤维细胞增殖能力及伤口恢复能力，目前广泛应用于水光注射美容，韩国的婴儿针，主要成分就是PDRN。
丝素蛋白是一种从天然桑蚕丝中提取的天然高分子纤维蛋白，含量约占蚕丝的70%～80%，含有18种氨基酸，其中甘氨酸 (Gly)、 丙氨酸(Ala)和丝氨酸(Ser)约占总组成的80%以上，包含8种人体必须氨基酸，是被美国FDA批准可用于人体植入的生物材料，同时也被中国食药监局批准用于创伤及烧伤治疗。因其具有良好的生物相容性、可降解性及促进伤口愈合的功效，目前广泛应用于组织工程领域。
玻色因（Pro-Xylane）是由木糖衍生而来的糖蛋白混合物，INCI名为羟丙基四氢吡喃醇，研究表明其作用在细胞基质间(ECM)，主要影响糖胺聚糖（GAG）分泌，有促进创伤愈合的作用。此外有研究表明玻色因也能通过促进胶原蛋白的合成，起到紧密链接细胞外基质的作用。
目前，上述几种成分均是以单一或者以与其他成分复合的方式制成了不同的产品，目前未见这几者之间的复配。
发明内容
本发明的目的是提供一种具有皮肤屏障修复功能的组合物，该组合物原料种类少，能靶向作用于皮肤角质层及真皮层，通过各有效成分的协同搭配，具有优异的修复皮肤屏障、促进伤口愈合、快速修复皮肤创面的效果。
为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：
一种具有皮肤屏障修复功能的组合物，其包括以下重量百分含量的有效成分：高分子量透明质酸或其盐0.01-0.5%，水解透明质酸或其盐0.1-1.0%，丝素蛋白0.01-10%，多聚脱氧核糖核酸0.05-1%，玻色因0.1-10%。
进一步的，所述高分子量透明质酸或其盐的分子量为1000kDa~3000kDa，优选为1000-1500 kDa。
进一步的，所述水解透明质酸或其盐的分子量为800Da~10kDa，优选为800Da~3kDa。
进一步的，所述高分子量透明质酸的盐或水解透明质酸的盐指的均为钠盐、钾盐、镁盐、锌盐、钙盐或季铵盐中的一种或几种。这几种盐在本发明中效果类似，常用的为钠盐。
进一步的，所述水解透明质酸或其盐可以通过市购的方式或通过对高分子量的透明质酸或其盐酶解的方式得到，所用的酶可以是细菌酶，也可以是动物酶，优选为细菌酶。
进一步的，所述丝素蛋白可以通过市购的方式或者通过水提取的方式得到，分子量接近天然丝素蛋白。
进一步的，所述多聚脱氧核糖核酸可以通过市购或通过提取法得到。
进一步的，所述玻色因为化学合成产物，且优选为【β，S】构型，该构型性能更佳。
优选的，上述组合物中，包括以下重量百分含量的有效成分：高分子量透明质酸或其盐0.1-0.4%，水解透明质酸或其盐0.5%，丝素蛋白1.0%，多聚脱氧核糖核酸0.5%，玻色因2.5%。
进一步的，在实验过程中发现，高分子透明质酸盐和PDRN在此浓度下进行混合后会形成絮状物，絮凝现象会导致组合物的稳定性降低，长期储存容易出现分层、沉淀等问题。本发明经过研究筛选，通过增溶剂的加入解决了这一问题，提高了产品的稳定性。本发明所用增溶剂为卵磷脂或者磷脂酰丝氨酸，这两种成分具有一定的亲脂性，能使体系中各成分更为均匀的混合，形成均一的体系，还能增加活性物质的透皮吸收能力，特别是其能与高分子量透明质酸或其盐形成稳定的乳化体系，增加产品的稳定性。
进一步的，增溶剂的含量可以根据需要进行调整，一般增溶剂在整个组合物中的含量为0.1-0.5wt%，优选为0.3-0.5%。
进一步的，上述组合物中，还可以包括多元醇、防腐剂和溶剂中的至少一种。
进一步的，所述多元醇可以为甘油等，多元醇的加入可以使高分子量透明质酸或其盐、多聚脱氧核糖核酸等大分子物质更好的溶解。多元醇的含量可以根据大分子物质的含量进行调整，一般在整个组合物中的含量为2-5wt%。
进一步的，防腐剂可以选择化妆品中常用的各种类型的防腐剂，其用量根据实际需要进行调整，不具有难度。
进一步的，所述溶剂可以是各种化妆品中允许的溶剂，溶剂的选择根据其他成分的性质和剂型决定，可以是油性溶剂，也可以是水，优选为水。
本发明还提供了一种具有皮肤屏障修复功能的组合物的制备方法，该方法包括以下步骤：
（1）将高分子量透明质酸或其盐、多聚脱氧核糖核酸与多元醇混合均匀；
（2）将溶剂升温，然后加入步骤（1）的混合物和增溶剂，搅拌至溶解，然后进行均质；
（3）将步骤（2）的混合物降温后加入水解透明质酸盐、丝素蛋白和玻色因，搅拌均匀，加入防腐剂，得到具有皮肤屏障修复功能的组合物。
进一步的，步骤（2）中，溶剂升温至85℃-95℃后加入步骤（1）的混合物和增溶剂，然后在此温度下进行搅拌、均质。
进一步的，步骤（3）中，待混合物降温至40-50℃后加入水解透明质酸盐、丝素蛋白和玻色因。
本发明的组合物制备方法简单，便于工业化生产，所得可广泛适用于激光、果酸换肤、微晶磨削、水光、微针术后创面的辅助修复，可以制成皮肤创面修复产品用于创面护理，也可以将其用于医美类医疗器械的制备中，在手术过程中起到修复皮肤屏障、促进伤口愈合、创面修复的作用。
本发明还提供了上述具有皮肤屏障修复功能的组合物在制备皮肤创面修复产品或医疗器械中的应用。
本发明具有以下有益效果：
1、本发明将高分子量透明质酸或其盐、水解透明质酸或其盐、丝素蛋白、多聚脱氧核糖核酸（PDRN）、玻色因进行复配，高分子量透明质酸或其盐能靶向作用皮肤角质层，在皮肤表面形成水润透气保护膜，极低分子量的水解透明质酸或其盐能透皮吸收进入皮肤真皮层，发挥刺激血管生成的功效。PDRN、丝素蛋白及玻色因能促进胶原蛋白的合成及促进细胞迁移。这几种成分协同搭配，具有突出的促进伤口愈合功效，能修复受损的皮肤屏障，达到快速修复皮肤创面的效果。
2、本发明组合物原料种类少、成分精简，能靶向作用于皮肤角质层及真皮层，具有优异的皮肤屏障修复作用及透皮吸收功效，可广泛适用于激光、果酸换肤、微晶磨削、水光、微针术后创面的辅助修复。
3、本发明制备方法简单，在制备时先将高分子量透明质酸或其盐、多聚脱氧核糖核酸与多元醇预混，然后再与增溶剂进行混合乳化，高分子量透明质酸与增溶剂经均质后形成稳定的乳化体系，不分层，使配制成的成品具有更好的亲脂性，形成稳定的水凝胶-脂质体，更有利于活性物质的透皮吸收以及促愈合功效的发挥。
附图说明
图1为本发明具有皮肤屏障修复功能的组合物的外观图。
图2为实施例1、对比例1和对照组的细胞迁移图，其中，A：初始，B：对照组T24h，C：实施例1 T24h，D：对比例1 T24h。
具体实施方式
下面通过具体实施例对本发明进行进一步解释和说明，下述说明仅是示例性的，并不对其内容进行限制。
下述实施例中，所用高分子量透明质酸或其盐、水解透明质酸或其盐购自华熙生物科技股份有限公司，所用丝素蛋白购自浙江思路传人生物科技有限公司，所用多聚脱氧核糖核酸购自华熙生物科技股份有限公司，所用玻色因（β，S构型）购自梅奥华卫。
下述实施例中，如无特别说明，含量均为质量百分含量。
实施例1
一种具有皮肤屏障修复功能的组合物，其成分为（wt%）：高分子量透明质酸钠0.3%，水解透明质酸钠0.5%，丝素蛋白1.0%，玻色因2.5%，多聚脱氧核糖核酸0.5%，卵磷脂0.5%，甘油3.0%，防腐剂适量，水补足100%，其中高分子量透明质酸钠的分子量为1500kDa，水解透明质酸钠的分子量为800Da。
该组合物的制备方法为：
1、将甘油、高分子量透明质酸钠及多聚脱氧核糖核酸进行混合，得到混合均匀的预混物；
2、向乳化罐中加入剩余的纯化水，然后升温至85℃-95℃，升温后将步骤1的预混物加入乳化罐中，再加入卵磷脂，加入后搅拌至溶解，然后均质3-5分钟。
3、均质完成后，将步骤2中的物料自然降温至40-45℃，然后加入水解透明质酸钠、丝素蛋白及玻色因，搅拌至溶解完全，然后加入适量的防腐剂，200目滤网过滤，得均一的乳白色液体，如图1所示，即为具有皮肤屏障修复功能的组合物。
实施例2-10
按照实施例1的方法制备具有皮肤屏障修复功能的组合物，不同的是：组合物配方中，高分子量透明质酸钠、水解透明质酸钠、丝素蛋白、玻色因、多聚脱氧核糖核酸的具体情况如下表1所示，卵磷脂、甘油、防腐剂的含量与实施例1相同。
对比例1-6
按照实施例1的方法制备具有皮肤屏障修复功能的组合物，不同的是：组合物配方中，高分子量透明质酸钠、水解透明质酸钠、丝素蛋白、玻色因、多聚脱氧核糖核酸的具体情况如下表2所示，卵磷脂、甘油、防腐剂的含量与实施例1相同。
对比例7
一种具有皮肤屏障修复功能的组合物，其成分为（wt%）：高分子量透明质酸钠（1500 kDa）0.3%，水解透明质酸钠（800Da）0.5%，丝素蛋白1.0%，积雪草2.0%，依克多因1.0%，卵磷脂0.5%，甘油3.0%，防腐剂适量，水补足100%。
制备方法为：
1、将甘油、高分子量透明质酸钠进行混合，得到混合均匀的预混物；
2、向乳化罐中加入剩余的纯化水，然后升温至85℃-95℃，升温后将步骤1的预混无加入乳化罐中，再加入卵磷脂，加入后搅拌至溶解，然后均质3-5分钟。
3、均质完成后，将步骤2中的物料自然降温至40-45℃，然后加入水解透明质酸钠、丝素蛋白、积雪草、依克多因，搅拌至溶解完全，然后加入适量的防腐剂，200目滤网过滤，得均一的乳白色液体，即为具有皮肤屏障修复功能的组合物。
对比例8
一种具有皮肤屏障修复功能的组合物，其成分为（wt%）：低分子量透明质酸钠（200-400kDa）0.3%，水解透明质酸钠（800Da）0.5%，麦角硫因1.0%，谷胱甘肽2.0%，多聚脱氧核糖核酸1.0%，卵磷脂0.5%，甘油3.0%，防腐剂适量，水补足100%。
制备方法为：
1、将甘油、低分子量透明质酸钠及多聚脱氧核糖核酸进行混合，得到混合均匀的预混物；
2、向乳化罐中加入剩余的纯化水，然后升温至85℃-95℃，升温后将步骤1的预混无加入乳化罐中，再加入卵磷脂，加入后搅拌至溶解，然后均质3-5分钟。
3、均质完成后，将步骤2中的物料自然降温至40-45℃，然后加入水解透明质酸钠、麦角硫因、谷胱甘肽，搅拌至溶解完全，然后加入适量的防腐剂，200目滤网过滤，得均一的乳白色液体，即为具有皮肤屏障修复功能的组合物。
试验例1 组合物对成纤维细胞增殖的影响
1.实验材料及仪器设备
实验材料：各实施例和对比例的皮肤屏障修复功能的组合物、人皮肤成纤维细胞株HFF-1、DMEM高糖培养基（凯基生物）、胎牛血清（Gibco）、胰蛋白酶（StemCell）、CCK-8细胞毒性及细胞增殖试剂盒（proteintech）。
仪器设备：超净工作台（北京东联哈尔仪器制造有限公司，SCB-1520）、二氧化碳培养箱（SANYO）、倒置显微镜（OLYMPUS，CKX41）、数显恒温水浴锅（金坛市中大仪器厂）、多功能微孔板酶标仪（TECAN，Spark）。
2.实验方法
1）铺板
取对数生长期HFF-1细胞，以1×105个/mL密度接种于96孔板，每孔100µL，培养体系是DMEM高糖培养液，添加15%胎牛血清，接种的细胞置二氧化碳培养箱37℃、5% CO2常规培养24h。
2）样品溶液配制
用无血清培养液配制各皮肤屏障修复功能的组合物溶液，10倍稀释后0.22µm滤膜过滤除菌现配现用。
3）加药
常规培养24h后，弃去旧培养液，实验组换成100μL样品溶液，对照组（control）加入等量无血清培养液，每个水平3个平行孔。
4）检测
继续培养24h后，采用CCK-8法检测细胞相对增殖率。弃去培养液，每孔加入100μL用无血清培养液稀释10倍的CCK-8，放入细胞培养箱中继续孵育2h，于450nm波长处用酶标仪测定吸光度。相对增殖率（RGR）为实验组吸光度与正常对照组吸光度的比值。
3 实验结果
实施例样品与对比例样品稀释10倍后，实施例1样品具有对皮肤成纤维细胞最强的促增殖作用，实施例2-3也有较好的促细胞增殖作用，对比例2，7，8对细胞增殖无显著促进效果。
伤口愈合是正常状况下需要增强细胞增殖的生理过程。愈合的伤口代表了典型的微环境，在该环境中，必须扩展数量以修复受损组织的实质细胞与提供环境支持的相关基质细胞和免疫细胞之间相互作用。伤口愈合是高度协调的过程，涉及了各种细胞类型之间复杂的代谢相互作用。在上皮再生过程中，免疫细胞和成纤维细胞释放的生长因子富集到伤口周围成为信号，允许营养物质被剩余的增殖细胞吸收和扩散，从而支持上皮再生。
从上表可以看出，实施例1的样品具有最强的促人成纤维细胞增殖的能力，其次是实施例3、实施例2、实施例6、实施例7、实施例5、实施例9、实施例10、实施例8、实施例4。通过实施例1与对比例1-8的对比看，本发明组合物对促进细胞增殖具有明显的增效作用。
试验例2组合物对样品创伤修复的影响
1.实验材料及仪器设备
实验材料：各实施例和对比例的皮肤屏障修复功能的组合物、人皮肤角质形成细胞HaCaT、DMEM高糖培养基（凯基生物）、胎牛血清（Gibco）、胰蛋白酶（StemCell）、创伤愈合插件（ibidi）。
仪器设备：超净工作台（北京东联哈尔仪器制造有限公司，SCB-1520）、二氧化碳培养箱（SANYO）、倒置显微镜（OLYMPUS，CKX41）、数显恒温水浴锅（金坛市中大仪器厂）。
2.实验方法
在新的24孔培养板中，放置ibidi小室，取处于对数生长期的HacaT细胞，消化后以3×105个/mL的密度接种于24孔板中的ibidi小室中，小室的左、右两孔各加入70μL细胞悬液，小室外补充400μL培养液，37℃、5% CO2条件下培养24h。取出小室，拍照，然后弃旧培养液，加入1mL用无血清DMEM培养液10倍稀释的实施例及对比例的样品溶液。对照组用不含样品的培养液代替。继续培养一定时间后观察并拍照。
3. 照片中划痕区域的面积用Image J软件分析。
细胞迁移率（%）=（1-加药后划痕区域面积/初始划痕区域面积）×100
4实验结果
从上表可以看出，实施例1具有最好的促伤口愈合的作用，细胞迁移率达55.79%，其次是实施例3、实施例2、实施例6、实施例7、实施例5、实施例8、实施例9、实施例10、实施例4。通过实施例1与对比例1-8的对比看，本发明组合物对促进细胞迁移具有明显的增效作用。其中，实施例1、对比例1和对照组的细胞迁移图如图2所示。
试验例3促血管生成功效测定
1、实验材料：
实施例及对比例的各样品、人脐静脉内皮融合细胞EA.hy926、DMEM高糖培养基（凯基生物）、胎牛血清（Gibco）、胰蛋白酶（STEMCELL）、CCK-8细胞毒性及细胞增殖试剂盒（proteintech）。
2、仪器设备：
超净工作台（北京东联哈尔仪器制造有限公司，SCB-1520）、二氧化碳培养箱（SANYO）、倒置显微镜（OLYMPUS，CKX41）、数显恒温水浴锅（金坛市中大仪器厂）、微孔板振荡器（其林贝尔）、多功能微孔板酶标仪（TECAN，Spark）。
3.实验方法
3.1铺板
取对数生长期EA.hy926细胞，以1×105个/mL密度接种于96孔板，每孔100µL，培养体系是DMEM高糖培养液，添加10%胎牛血清，接种的细胞置二氧化碳培养箱37℃、5% CO2常规培养24h。
3.2样品溶液配制
用无血清培养液配制样品溶液，实施例与对比例样品均10倍稀释，0.22µm滤膜过滤除菌现配现用。
3.3加药
常规培养24h后，弃去旧培养液，实验组换成100μL样品，对照组（control）加入等量无血清培养液，每个水平6个平行孔。
3.4检测
继续培养24h后，采用CCK-8法检测细胞相对增殖率。弃去培养液，每孔加入100μL用无血清培养液稀释10倍的CCK-8，放入细胞培养箱中继续孵育2h，于450nm波长处用酶标仪测定吸光度。相对增殖率（RGR）为实验组吸光度与正常对照组吸光度的比值。
4.实验结果
从上表结果可以看出，实施例1样品具有最好的促血管生成的作用，其次是实施例2、实施例3、实施例5、实施例6-10、实施例4，通过实施例1与对比例1-8的对比看，本发明组合物对促进血管生成具有明显的增效作用。
实施例11增溶剂的筛选
一种具有皮肤屏障修复功能的组合物，其成分为（wt%）：高分子量透明质酸钠0.3%，水解透明质酸钠0.5%，丝素蛋白1.0%，玻色因2.5%，多聚脱氧核糖核酸0.5%，增溶剂0.1-0.5%，甘油3.0%，防腐剂适量，水补足100%，其中高分子量透明质酸钠的分子量为1500kDa，水解透明质酸钠的分子量为800Da。制备方法同实施例1。
所用增溶剂情况如下表6所示。
上述5组样品经制备后，所得最终产品为乳白色液体，装入带刻度的透明容器内，对这5组样品进行60℃稳定性试验，用分层比表征稳定性，即分层的上层高度与样品整体液面高度的比值。试验方法如下：
将制备好的样品放入60℃稳定性试验箱，分别于第5天及第10天时拿出肉眼观察是否分层，若分层计算分层比。
试验结果如下表7所示。
Claims (10)
1.一种具有皮肤屏障修复功能的组合物，其特征是包括以下重量百分含量的有效成分：高分子量透明质酸或其盐0.01-0.5%，水解透明质酸或其盐0.1-1.0%，丝素蛋白0.01-10%，多聚脱氧核糖核酸0.05-1%，玻色因0.1-10%。
2.根据权利要求1所述的组合物，其特征是：高分子量透明质酸或其盐的分子量为1000kDa~3000kDa，水解透明质酸或其盐的分子量为800Da~10kDa；优选的，高分子量透明质酸或其盐的分子量为1000kDa~1500kDa，水解透明质酸或其盐的分子量为800Da~3kDa。
3.根据权利要求1或2所述的组合物，其特征是：高分子量透明质酸的盐或水解透明质酸的盐指的均为钠盐、钾盐、镁盐、锌盐、钙盐或季铵盐中的一种或几种。
4.根据权利要求1所述的组合物，其特征是：玻色因为（β，S）构型。
5.根据权利要求1、2或4所述的组合物，其特征是：包括以下重量百分含量的有效成分：高分子量透明质酸或其盐0.1%-0.4%，水解透明质酸或其盐0.5%，丝素蛋白1.0%，多聚脱氧核糖核酸0.5%，玻色因2.5%。
6.根据权利要求1、2或4所述的组合物，其特征是：还包括增溶剂，所述增溶剂优选为卵磷脂或磷脂酰丝氨酸，增溶剂含量优选为0.1-0.5wt%。
7.根据权利要求6所述的组合物，其特征是：还包括多元醇、防腐剂和溶剂中的至少一种，所述多元醇优选为甘油，所述溶剂优选为水。
8.一种权利要求7所述的具有皮肤屏障修复功能的组合物的制备方法，其特征是包括以下步骤：
（1）将高分子量透明质酸或其盐、多聚脱氧核糖核酸与多元醇混合均匀；
（2）将溶剂升温，然后加入步骤（1）的混合物和增溶剂，搅拌至溶解，然后进行均质；
（3）将步骤（2）的混合物降温后加入水解透明质酸盐、丝素蛋白和玻色因，搅拌均匀，加入防腐剂，得到具有皮肤屏障修复功能的组合物。
9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征是：步骤（2）中，溶剂升温至85℃-95℃后加入其他物料，然后在此温度下进行搅拌、均质；步骤（3）中，待混合物降温至40-50℃后加入其他物料。
10.权利要求1-7中任一项所述的具有皮肤屏障修复功能的组合物在制备皮肤创面修复产品或医疗器械中的应用。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210402987.4A CN114642606B (zh) | 2022-04-18 | 2022-04-18 | 一种具有皮肤屏障修复功能的组合物及其制备方法和应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210402987.4A CN114642606B (zh) | 2022-04-18 | 2022-04-18 | 一种具有皮肤屏障修复功能的组合物及其制备方法和应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN114642606A true CN114642606A (zh) | 2022-06-21 |
| CN114642606B CN114642606B (zh) | 2024-02-13 |
Family
ID=81997643
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202210402987.4A Active CN114642606B (zh) | 2022-04-18 | 2022-04-18 | 一种具有皮肤屏障修复功能的组合物及其制备方法和应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN114642606B (zh) |
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN115105645A (zh) * | 2022-06-28 | 2022-09-27 | 北京化工大学 | 一种复合微球、伤口修复敷料的制备方法 |
| CN115814054A (zh) * | 2022-09-05 | 2023-03-21 | 华熙生物科技股份有限公司 | 一种皮肤护理组合物、皮肤护理产品及其应用 |
| CN116440319A (zh) * | 2023-05-15 | 2023-07-18 | 湖南美媛本草生物工程有限公司 | 一种医用修复水凝胶的制备方法与应用 |
| WO2024049923A1 (en) * | 2022-08-31 | 2024-03-07 | L'oreal | Compositions and methods for skin |
| FR3143355A1 (fr) * | 2022-12-14 | 2024-06-21 | L'oreal | Compositions et procédés de prévention et/ou de traitement des cicatrices |
| CN115814054B (zh) * | 2022-09-05 | 2024-10-29 | 华熙生物科技股份有限公司 | 一种皮肤护理组合物、皮肤护理产品及其应用 |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108289825A (zh) * | 2015-11-24 | 2018-07-17 | 株式会社Bmi韩国 | 含透明质酸衍生物和dna片段的注射用透明质酸组合物及其应用 |
| CN110522942A (zh) * | 2019-10-16 | 2019-12-03 | 浙江星月生物科技股份有限公司 | 一种皮肤修护敷料及皮肤修护敷料的制备方法 |
| CN111773130A (zh) * | 2020-07-17 | 2020-10-16 | 贝乐科(上海)生物科技有限公司 | 羟丙基四氢吡喃三醇复配物及其制备方法和用途 |
| CN112190503A (zh) * | 2020-11-11 | 2021-01-08 | 华熙生物科技股份有限公司 | 具有促渗透作用的透明质酸组合物、制备方法及其应用 |
| CN113456571A (zh) * | 2021-08-02 | 2021-10-01 | 常州碧研医疗科技有限公司 | 一种含有pdrn的修复再生组合物及其制备方法 |
-
2022
- 2022-04-18 CN CN202210402987.4A patent/CN114642606B/zh active Active
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108289825A (zh) * | 2015-11-24 | 2018-07-17 | 株式会社Bmi韩国 | 含透明质酸衍生物和dna片段的注射用透明质酸组合物及其应用 |
| CN110522942A (zh) * | 2019-10-16 | 2019-12-03 | 浙江星月生物科技股份有限公司 | 一种皮肤修护敷料及皮肤修护敷料的制备方法 |
| CN111773130A (zh) * | 2020-07-17 | 2020-10-16 | 贝乐科(上海)生物科技有限公司 | 羟丙基四氢吡喃三醇复配物及其制备方法和用途 |
| CN112190503A (zh) * | 2020-11-11 | 2021-01-08 | 华熙生物科技股份有限公司 | 具有促渗透作用的透明质酸组合物、制备方法及其应用 |
| CN113456571A (zh) * | 2021-08-02 | 2021-10-01 | 常州碧研医疗科技有限公司 | 一种含有pdrn的修复再生组合物及其制备方法 |
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN115105645A (zh) * | 2022-06-28 | 2022-09-27 | 北京化工大学 | 一种复合微球、伤口修复敷料的制备方法 |
| WO2024049923A1 (en) * | 2022-08-31 | 2024-03-07 | L'oreal | Compositions and methods for skin |
| CN115814054A (zh) * | 2022-09-05 | 2023-03-21 | 华熙生物科技股份有限公司 | 一种皮肤护理组合物、皮肤护理产品及其应用 |
| CN115814054B (zh) * | 2022-09-05 | 2024-10-29 | 华熙生物科技股份有限公司 | 一种皮肤护理组合物、皮肤护理产品及其应用 |
| FR3143355A1 (fr) * | 2022-12-14 | 2024-06-21 | L'oreal | Compositions et procédés de prévention et/ou de traitement des cicatrices |
| CN116440319A (zh) * | 2023-05-15 | 2023-07-18 | 湖南美媛本草生物工程有限公司 | 一种医用修复水凝胶的制备方法与应用 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN114642606B (zh) | 2024-02-13 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN114642606B (zh) | 一种具有皮肤屏障修复功能的组合物及其制备方法和应用 | |
| US11844878B2 (en) | Crosslinked hyaluronic acid-collagen gels for improving tissue graft viability and soft tissue augmentation | |
| JP5735965B2 (ja) | 充填剤および線維芽細胞成長培地を組合せる注射用組成物 | |
| Duranti et al. | Injectable hyaluronic acid gel for soft tissue augmentation: A clinical and histological study | |
| DK2307065T3 (en) | COMPOSITIONS AND METHODS FOR TISSUE FILLING AND REGULATION | |
| KR102034645B1 (ko) | 콜라겐 및 히알루론산 유도체를 포함하는 의료용 복합 생체 소재 | |
| KR101236363B1 (ko) | 연조직 증강을 위한 입자 | |
| AU2017315431A1 (en) | Co-crosslinked hyaluronic acid-silk fibroin hydrogels for improving tissue graft viability and for soft tissue augmentation | |
| US20120264689A1 (en) | Methods and compositions for skin regeneration | |
| WO2013106715A1 (en) | Crosslinked hyaluronic acid-collagen gels for improving tissue graft viability and soft tissue augmentation | |
| JPH01265970A (ja) | ヒアルロン酸を含有させたコラーゲン水溶液又は水分散液 | |
| CN107308494A (zh) | 一种注射用胶原蛋白、制备方法及填充剂 | |
| CN113679886A (zh) | 一种胶原蛋白凝胶及其制备方法和应用 | |
| CN103386145B (zh) | 一种含有卡拉胶的创伤修复敷料及其制备方法和应用 | |
| CN114225007B (zh) | 一种用于修复浅表性创面的乳清蛋白喷雾剂及制备方法 | |
| US20190184064A1 (en) | Composition for Soft Tissue Augmentation Providing Protection from Infection | |
| KR102324076B1 (ko) | 엘라스틴 및 콜라겐 유도를 이용한 피부 주름 및 탄력 개선 효과 조성물 | |
| WO2009012367A1 (en) | Composition and method of use for soft tissue augmentation/drug delivery | |
| CN114591419B (zh) | 一种热水解蛋白及其制备方法和应用 | |
| CN117122737A (zh) | 一种可注射组合物及其制备方法 | |
| CN115645613A (zh) | 一种塑形材料及其制备方法和应用 | |
| CN116831943A (zh) | 一种注射用复合透明质酸钠溶液及其制备方法 | |
| CN116440319A (zh) | 一种医用修复水凝胶的制备方法与应用 | |
| CN102497851B (zh) | 联用填充剂和成纤维细胞生长介质的可注射组合物 | |
| CN117618320A (zh) | 具有清洁皮肤功能的外泌体制剂及其制备方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |