CN110478267A

CN110478267A - 一种高效防龋齿儿童牙膏及其制备方法

Info

Publication number: CN110478267A
Application number: CN201910924121.8A
Authority: CN
Inventors: 张学记; 程晓紊; 吴耀辉
Original assignee: Zhonghetec (nanjing) Biotechnology Co Ltd
Current assignee: Zhonghetec (nanjing) Biotechnology Co Ltd
Priority date: 2019-09-27
Filing date: 2019-09-27
Publication date: 2019-11-22

Abstract

本发明公开了一种高效防龋齿儿童牙膏及其制备方法，具体涉及保健儿童牙膏技术领域，本发明制备的儿童牙膏包含有变异性链球菌型IgY和溶菌酶。变异性链球菌型IgY能够与口腔中的变异性链球菌特异性结合，从而杀死变异性链球菌，抑制或者消灭口腔中的变异性链球菌，而溶菌酶能够溶解口腔中的变异性链球菌的细胞壁从而杀死该细菌，与变异性链球菌型IgY共同作用，大量抑制或者消灭口腔中的变异性链球菌，从而能够防控口腔龋齿。

Description

一种高效防龋齿儿童牙膏及其制备方法

技术领域

本发明属保健儿童牙膏技术领域，具体涉及一种高效防龋齿儿童牙膏。

背景技术

龋齿是一种由口腔中多种因素复合作用所导致的牙齿硬组织进行性病损，表现为无机质脱矿和有机质分解，随病程发展而从色泽改变到形成实质性病损的演变过程。龋齿是细菌性疾病，因此它可以继发牙髓炎和根尖周炎，甚至能引起牙槽骨和颌骨炎症。龋齿的继发感染可以形成病灶，致成或加得关节炎、心骨膜炎、慢性肾为和多种眼病等全身其他疾病。龋齿应以保健预防为主。而最主要的保健预防方式是使用防龋齿牙膏进行口腔的维护，现在市场上常见的抗龋齿牙膏是含氟牙膏，对于儿童而言，容易将牙膏吃进胃里，而氟对人体有害，具有一定的副作用。

因此，急需一种解决现有问题的高效防龋齿儿童牙膏及其制备方法。

发明内容

本发明的目的是提供一种高效防龋齿儿童牙膏及其制备方法，制备的儿童牙膏能够抑制或者消灭口腔中的变异性链球菌，从而能够防控口腔龋齿，同时无副作用，对人体无伤害。

本发明采用的技术方案为：

一种高效防龋齿儿童牙膏，包含有变异性链球菌型IgY和溶菌酶。变异性链球菌型IgY能够与口腔中的变异性链球菌特异性结合，从而杀死变异性链球菌，抑制或者消灭口腔中的变异性链球菌，而溶菌酶能够溶解口腔中的变异性链球菌的细胞壁从而杀死该细菌，与变异性链球菌型IgY共同作用，大量抑制或者消灭口腔中的变异性链球菌，从而能够防控口腔龋齿。

优选的，各原料质量比例如下：

山梨(糖)醇20-30％、水合硅石10-30％、甘油15-20％、月桂酰肌氨酸钠3.5-5.5％、椰油酰肌氨酸钠2.5-4.5％、食用香精0.6-2％、纤维素胶6-8％、皱波角叉菜(CHONDRUS CRISPUS)提取物1-5％、柠檬酸锌4.5-7.5％、甜菊糖1.3-1.5％、木糖醇6.5-8％、半乳糖3.5-6.5％、苯甲酸钠0.05-1.0％、变异性链球菌型IgY 0.1-0.5％、溶菌酶0.1-0.5％，余量为去离子水。牙膏的基础成分不影响变异性链球菌型IgY和溶菌酶的活性。

优选的，变异性链球菌型IgY 0.2-0.4％、溶菌酶0.2-0.4％。

优选的，各原料质量比例如下：

山梨(糖)醇20％、水合硅石15％、甘油18％、月桂酰肌氨酸钠4％、椰油酰肌氨酸钠3.5％、食用香精1.3％、纤维素胶7％、皱波角叉菜提取物3％、柠檬酸锌6％、甜菊糖1.4％、木糖醇7％、半乳糖4％、苯甲酸钠0.3％、变异性链球菌型IgY 0.3％、溶菌酶0.2％，余量为去离子水。

一种高效防龋齿儿童牙膏的制备方法，包括如下步骤：

S1、将山梨(糖)醇、甘油、皱波角叉菜提取物、柠檬酸锌、甜菊糖、木糖醇、半乳糖、苯甲酸钠、变异性链球菌型IgY(卵黄抗体)、溶菌酶和去离子水混合搅拌均匀，得混合液；

S2、向步骤S1中获得的混合液中加入水合硅石、月桂酰肌氨酸钠、椰油酰肌氨酸钠和纤维素胶，混合搅拌均匀，并进行乳化处理，得膏状物；

S3、向步骤S2中获得的膏状物中加入食用香精，混合搅拌均匀，进行均质处理，抽真空得儿童牙膏。

优选的，变异性链球菌型IgY的制备方法如下：

1)以变异性链球菌菌株作为抗原，与弗氏不完全佐剂1:1混合并吹打使其乳化均匀得到变异性链球菌菌株乳化液；

2)在蛋鸡的两侧鸡翅及大腿根部注射步骤1)获得的变异性链球菌菌株乳化液，每个部位0.25mL，每7天免疫一次，共免疫4次；

3)免疫后每日收集并标记鸡蛋，用注射器抽取蛋黄液，并提取蛋黄液中的变异性链球菌型IgY，冷冻干燥成产品。

有益效果：

1、变异性链球菌型IgY(卵黄抗体)能够与口腔中的变异性链球菌特异性结合，从而杀死变异性链球菌，抑制或者消灭口腔中的变异性链球菌，而溶菌酶能够溶解口腔中的变异性链球菌的细胞壁从而杀死该细菌同时还可以杀死其他有害菌，与变异性链球菌型IgY共同作用，大量抑制或者消灭口腔中的变异性链球菌，从而能够防控口腔龋齿。

2、该产品无副作用。

具体实施方式

实施例1

变异性链球菌型IgY的制备：

(1)蛋鸡免疫

38周龄的白来航蛋鸡，饲养于超洁净的工作台中，饲料与水(pH 6.2需要经过高压蒸汽灭菌。蛋鸡免疫前，以菌体浓度为10⁸-10¹⁰CFU/mL变异性链球菌菌株作为抗原，与弗氏不完全佐剂1:1混合并吹打使其乳化均匀。在实验组(A组)蛋鸡的两侧鸡翅及大腿根部注射预先处理好的变异性链球菌菌株乳化液，每个部位0.25mL，每7天免疫一次，共免疫4次。对照组(B组)蛋鸡注射生理盐水和弗氏不完全佐剂的等体积混合液。给药部位和剂量同实验组。免疫后每日收集并标记鸡蛋，4℃存储。

(2)提取和纯化IgY

用医用酒精棉擦拭鸡蛋表面，磕破鸡蛋外壳，用10mL注射器抽取蛋黄液并记录体积，用预冷的超纯水(1:9)稀释并充分混合(0.1mol HCl调节至pH 5.0)，然后在4℃下储存过夜。将溶液在5000g,4℃下离心45min,向上清液中加入硫酸铵使最终饱和度为45，然后在4℃下放置2.5h。在5000g,4℃下离心12min后，弃去上清液，1:1加超纯水溶解蛋白质沉淀，然后加入硫酸钠使溶液的最终质量分数达到13，室温搅拌溶解后静置2.5h；4℃条件下5000g再次离心12min，并将沉淀物溶解PBS中。将溶液透析6h(每1.5h更换一次超纯水)，然后在PBS中浸泡过夜并在一20℃下储存。免疫后从A组卵中纯化的IgY是特异性IgY(S-IgY),B组是阴性对照IgY(C-IgY。用Amicon Ultra-15离心过滤装置(Millipore，伯灵顿，美国)将纯化的IgY以4000g超滤离心10min以达到脱盐和浓缩抗体的目的，冷冻干燥成产品。

以B组作对照，采用ELISA(酶联免疫吸附实验)测得A组的特异性卵黄抗体效价达1:2000000。

实施例2

按照如下配比制作对照组牙膏和3组实验组牙膏，4组实验组牙膏分别命名为实验1、实验2、实验3和实验4。

表1儿童牙膏原料配比

实施例3

性能测试

考察本产品防龋齿实验方法：选择150名患有初期龋齿的同龄儿童，只有2个牙齿表面有菌斑，口腔健康情况基本相当，日常生活条件一致，分为治疗组1(30人)、治疗组2(30人)、治疗组3(30人)、治疗组4(30人)和对照组(30人)，治疗组1、治疗组2、治疗组3以及治疗组4分别采用实施例2中的实验1、实验2、实验3以及实验4获得的牙膏刷牙，每天2次(早晚各一次)，对照组采用实施例2中的对照组牙膏常规刷牙，每天早晚2次，使用周期为1个月，然后观察菌斑去除情况，结果如下：

表2菌斑去除实验结果

从以上结果可知，加入溶菌酶和变异性链球菌型IgY能够增强抗龋齿效果，且该种牙膏的其他成分不影响溶菌酶和变异性链球菌型IgY的活性，皱波角叉菜提取物能够增强抗龋齿效果。

以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。

Claims

1.一种高效防龋齿儿童牙膏，其特征在于，包含有变异性链球菌型IgY和溶菌酶。

2.根据权利要求1所述的高效防龋齿儿童牙膏，其特征在于，各原料质量比例如下：

山梨（糖）醇20-30%、水合硅石10-30%、甘油15-20%、月桂酰肌氨酸钠3.5-5.5%、椰油酰肌氨酸钠2.5-4.5%、食用香精0.6-2%、纤维素胶6-8%、皱波角叉菜提取物1-5%、柠檬酸锌4.5-7.5%、甜菊糖1.3-1.5%、木糖醇6.5-8%、半乳糖3.5-6.5%、苯甲酸钠0.05-1.0%、变异性链球菌型IgY 0.1-0.5%、溶菌酶0.1-0.5%，余量为去离子水。

3.根据权利要求2所述的高效防龋齿儿童牙膏，其特征在于，变异性链球菌型IgY 0.2-0.4%、溶菌酶0.2-0.4%。

4.根据权利要求2所述的高效防龋齿儿童牙膏，其特征在于，各原料质量比例如下：

山梨（糖）醇20%、水合硅石15%、甘油18%、月桂酰肌氨酸钠4%、椰油酰肌氨酸钠3.5%、食用香精1.3%、纤维素胶7%、皱波角叉菜提取物3%、柠檬酸锌6%、甜菊糖1.4%、木糖醇7%、半乳糖4%、苯甲酸钠0.3%、变异性链球菌型IgY 0.3%、溶菌酶0.2%，余量为去离子水。

5.一种根据权利要求2-4任意一项所述的高效防龋齿儿童牙膏的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1、将山梨（糖）醇、甘油、皱波角叉菜提取物、柠檬酸锌、甜菊糖、木糖醇、半乳糖、苯甲酸钠、变异性链球菌型IgY、溶菌酶和去离子水混合搅拌均匀，得混合液；

6.根据权利要求5所述的高效防龋齿儿童牙膏，其特征在于，变异性链球菌型IgY的制备方法如下：

1）以变异性链球菌菌株作为抗原，与弗氏不完全佐剂1:1混合并吹打使其乳化均匀得到变异性链球菌菌株乳化液；

2）在蛋鸡的两侧鸡翅及大腿根部注射步骤1）获得的变异性链球菌菌株乳化液，每个部位0.25 mL，每7天免疫一次，共免疫4次；

3）免疫后每日收集并标记鸡蛋，用注射器抽取蛋黄液，并提取蛋黄液中的变异性链球菌型IgY，冷冻干燥成产品。