CN110476851B - 一种提高稚鲍转饵期存活率的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及工厂化水产养殖技术领域。针对稚鲍转饵期机械损伤、摄食不佳、病菌侵害、死亡率较高等问题，本发明提供如下技术方案为：包括步骤：稚鲍剥离前一周，每天定时1次，向稚鲍附着的波纹板间播撒XS1412C菌株发酵液；稚鲍剥离后，将网箱收集的稚鲍，先在干净海水冲洗剥离液，再将稚鲍浸泡于低聚壳聚糖‑褐藻寡糖溶液中20‑90s；稚鲍转移至脊瓦附着基后，稚鲍养殖池长流水，保持水质澄清，定期投喂添加XS1412C菌株发酵液的饵料，投喂15‑20天。本发明提供的方法能显著提高稚鲍转饵期的存活率，同时也有利于促进稚鲍的生长。
Description
技术领域
本发明涉及工厂化水产养殖技术领域，特别涉及一种稚鲍转饵期增加存活率的方法。
背景技术
鲍在养殖过程中存在许多困难，由于禁药原因，鲍养殖过程中不能使用任何药物辅助养殖，而稚鲍养殖的死亡率很高，尤其是稚鲍转饵期。稚鲍转饵期就是稚鲍从摄食底栖硅藻转换成人工饲料的时期。稚鲍培育后，前期生长主要以底栖硅藻为食，通常底栖硅藻培育在塑料波纹板上，稚鲍附着于波纹板上摄食，当稚鲍长到一定大小时，需要更换饵料，将稚鲍从波纹板上剥离下来，转到脊瓦附着基上，之后投喂稚鲍饲料。但稚鲍在转移到脊瓦附着基上培养半个月至二十天后，稚鲍就会出现大量死亡的现象。推测稚鲍死亡的原因，一方面可能是稚鲍剥离液或毛刷对稚鲍造成不适或机械损伤，导致稚鲍受到致病微生物的侵染；另一方面可能稚鲍对突然变化的环境和饵料的不适应，稚鲍摄食异常或消化不良等问题，最终造成稚鲍死亡。
据报道，蛭弧菌能够快速侵入宿主细菌使其裂解，在防治稚鲍死亡具有见效快的特点（CN 201010270955.0），但蛭弧菌的这种寄生繁殖通常表现出严格的特异性，对特定致病菌的杀灭效果很好，而稚鲍死亡的致病菌很多，采用蛭弧菌进行防治具有偶然性。近年来，随着动物免疫的深入研究发现，提高水产动物的免疫力具有较好的抗病，抗损伤效果。虽然益生菌复合制剂具有较好的抗病及提高免疫力的作用，但益生菌在水产动物体内的定植效果仍不理想，往往需要长期投喂才能见效，从而增加养殖成本。尤其鲍的养殖需要长流水环境，施用益生菌的效果更加缓慢，成本更大。因此，需要寻找有效的防治稚鲍转饵期死亡的措施，特别是能提高其免疫力、存活率的养殖方法，从而降低稚鲍的养殖成本和死亡率。
发明内容
本发明的目的在于针对稚鲍转饵期机械损伤、摄食不佳、病菌侵害、死亡率较高等问题，提供了一种新型、绿色无污染、可显著提高稚鲍存活率的养殖方法。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案为：用于向稚鲍喷洒XS1412C菌株发酵液或投喂添加XS1412C菌株发酵液的饵料，其中棒状菌菌株XS1412C，该菌株已保藏于中国典型培养物保藏中心，其保藏编号为CCTCC NO：M 2015149，保藏时间为2015年3月30日。
一种提高稚鲍转饵期存活率的方法，其特征在于，包括步骤：
（1）稚鲍剥离前一周，每天定时1次，向稚鲍附着的波纹板间播撒XS1412C菌株发酵液；
（2）稚鲍剥离后，将网箱收集的稚鲍，先在干净海水冲洗剥离液，再将稚鲍浸泡于低聚壳聚糖-褐藻寡糖溶液中20-90s；
（3）稚鲍转移至脊瓦附着基后，稚鲍养殖池长流水，保持水质澄清，定期投喂添加XS1412C菌株发酵液的饵料，投喂15-20天。
优选的，所述每天定时1次，是指在每天的19:00-20:00之间进行播撒。
优选的，所述XS1412C菌株发酵液的播撒或添加到饵料中的浓度为1×103-1×108cfu/mL。
进一步的，所述低聚壳聚糖-褐藻寡糖溶液，其制备方法为，低聚壳聚糖先用0.5%醋酸溶液溶解制备壳聚糖溶液，低聚壳聚糖溶液与褐藻寡糖溶液按1:5比例混合，低聚壳聚糖终浓度的质量百分比为0.1-2%，褐藻寡糖终浓度的质量百分比为0.1-3%。
进一步的，所述褐藻寡糖溶液，其制备方法为，海水溶解质量分数为3-7%低粘度褐藻酸钠，加入20-50mLXS1412C菌株发酵液，30-40℃发酵酶解4-10h，沸水浴10min灭活菌株，冷却后既得褐藻寡糖溶液。
进一步的，所述XS1412C菌株发酵液，其制备方法是单菌落接种种子培养液26-30℃培养6-10h，1-5%种子液接种发酵培养液，28-35℃发酵培养12-24h。
进一步的，所述XS1412C菌株种子培养液为2216E，发酵培养液成分质量比为0.5-0.9%褐藻酸钠，0.03-0.1%磷酸二氢钾，0.15-0.35%氯化铵，0.1-0.3%蛋白胨过滤的陈海水溶解，不调pH值。
本发明相较于现有技术，具有如下的优势及效果：
（1）混有XS1412C菌株是从鲍肠道中筛选的一种棒状杆菌，溶血性试验验证其不具有溶血性，是能够产褐藻胶裂解酶、蛋白酶及淀粉酶等多种酶的鲍肠道益生菌，在稚鲍肠道的定植效果优于其他来源益生菌制剂。
（2）稚鲍剥离前后饲喂XS1412C菌株发酵液，其中含有褐藻酸钠降解形成的褐藻寡糖，褐藻寡糖与菌株共同作用，有助于调节稚鲍肠道菌群，饵料消化，抗菌消炎，显著提高其免疫力。
（3）稚鲍剥离后，利用低聚壳聚糖和褐藻寡糖的成膜性及抗菌消炎功能，可有效降低稚鲍的机械性损伤及病菌感染风险。
（4）方法所用菌株及低聚壳聚糖-褐藻寡糖溶液的制备，操作简单，成本低，有利于育苗企业成本控制。
具体实施方式
实施例1
XS1412C菌株发酵液制备：
挑取单菌落接种2216E培养液，26℃振荡培养6-8h，按3%接种量接种发酵培养液，30℃发酵培养12-24h，细菌浓度达到1×103-1×108cfu/mL即可。
低聚壳聚糖-褐藻寡糖溶液制备：10g低聚壳聚糖用100mL 0.5%醋酸溶液溶解；500mL海水溶解35g低粘度褐藻酸钠，加入30mL 1×107-1×108cfu/mL XS1412C菌株发酵液，35℃发酵酶解6h，沸水浴灭活10min，冷却后得褐藻寡糖溶液；低聚壳聚糖溶液与褐藻寡糖溶液按1:5比例混合后，加过滤海水至2L，备用。
一种提高稚鲍转饵期存活率的方法，操作如下：
（1）稚鲍剥离前一周，每天19:00-20:00之间，向稚鲍附着的波纹板间播撒1×103-1×106cfu/mL XS1412C菌株发酵液，由于该时间段稚鲍摄食活动较频繁；；
（2）稚鲍剥离后，将网箱收集的稚鲍，先在干净的过滤海水中冲洗剥离液，再将稚鲍浸泡于低聚壳聚糖-褐藻寡糖溶液中60s；
（3）稚鲍转移至脊瓦附着基后，稚鲍养殖池长流水，保持水质澄清，定期投喂添加浓度为1×106-1×108cfu/mL XS1412C菌株发酵液的饵料，投喂20天。
实施例2
XS1412C菌株发酵液制备：
挑取单菌落接种2216E培养液，26℃振荡培养6-8h，按4%接种量接种发酵培养液，30℃发酵培养12-20h，细菌浓度达到1×103-1×108cfu/mL即可。
低聚壳聚糖-褐藻寡糖溶液制备：16g低聚壳聚糖用100mL 0.5%醋酸溶液溶解；500mL海水溶解21g低粘度褐藻酸钠，加入25mL 1×107-1×108cfu/mL XS1412C菌株发酵液，35℃发酵酶解5h，沸水浴灭活10min，冷却后得褐藻寡糖溶液；低聚壳聚糖溶液与褐藻寡糖溶液按1:5比例混合后，加过滤海水至2L，备用。
一种提高稚鲍转饵期存活率的方法，操作如下：
（1）稚鲍剥离前一周，每天19:00-20:00之间，向稚鲍附着的波纹板间播撒1×103-1×106cfu/mL XS1412C菌株发酵液，由于该时间段稚鲍摄食活动较频繁；
（2）稚鲍剥离后，将网箱收集的稚鲍，先在干净的过滤海水中冲洗剥离液，再将稚鲍浸泡于低聚壳聚糖-褐藻寡糖溶液中75s；
（3）稚鲍转移至脊瓦附着基后，稚鲍养殖池长流水，保持水质澄清，定期投喂添加浓度为1×107-1×108cfu/mL XS1412C菌株发酵液的饵料，投喂15天。
本发明设置对照组与处理组。对照组是稚鲍不进行任何处理，正常剥离，清洗，饵料饲喂。对照组和处理组分别设置3个平行，每个平行随机选取2000粒，稚鲍体长在6.47-9.36mm；稚鲍转移至脊瓦附着基30天，统计存活率。
注：初始平均壳长即稚鲍剥离后测得的壳长；30天后平均壳长即稚鲍转移至脊瓦附着基生长30天后的壳长。
通过上述实验可看出，本发明提供的方法能显著提高稚鲍转饵期的存活率，同时也有利于促进稚鲍的生长。
Claims (7)
1.一种提高稚鲍转饵期存活率的方法，其特征在于，包括步骤：
稚鲍剥离前一周，每天定时1次，向稚鲍附着的波纹板间播撒XS1412C菌株发酵液；
稚鲍剥离后，将网箱收集的稚鲍，先在干净海水冲洗剥离液，再将稚鲍浸泡于低聚壳聚糖-褐藻寡糖溶液中20-90s；
稚鲍转移至脊瓦附着基后，稚鲍养殖池长流水，保持水质澄清，定期投喂添加XS1412C菌株发酵液的饵料，投喂15-20天。
2.根据权利要求1所述的一种提高稚鲍转饵期存活率的方法，其特征在于：所述每天定时1次，是指在每天的19:00-20:00之间进行播撒。
3.根据权利要求1所述的一种提高稚鲍转饵期存活率的方法，其特征在于：所述XS1412C菌株发酵液的播撒或添加到饵料中的浓度为1×103-1×108cfu/mL。
4.根据权利要求1所述的一种提高稚鲍转饵期存活率的方法，其特征在于：所述低聚壳聚糖-褐藻寡糖溶液，其制备方法为，低聚壳聚糖先用0.5%醋酸溶液溶解制备壳聚糖溶液，低聚壳聚糖溶液与褐藻寡糖溶液按1:5比例混合，低聚壳聚糖终浓度的质量百分比为0.1-2%，褐藻寡糖终浓度的质量百分比为0.1-3%。
5.根据权利要求1或4所述的一种提高稚鲍转饵期存活率的方法，其特征在于：所述褐藻寡糖溶液，其制备方法为，海水溶解质量分数为3-7%低粘度褐藻酸钠，加入20-50mLXS1412C菌株发酵液，30-40℃发酵酶解4-10h，沸水浴10min灭活菌株，冷却后既得褐藻寡糖溶液。
6.根据权利要求1所述的一种提高稚鲍转饵期存活率的方法，其特征在于：所述XS1412C菌株发酵液，其制备方法是单菌落接种种子培养液26-30℃培养6-10h，1-5%种子液接种发酵培养液，28-35℃发酵培养12-24h。
7.根据权利要求6所述的一种提高稚鲍转饵期存活率的方法，其特征在于：所述种子培养液为2216E，发酵培养液成分质量比为0.5-0.9%褐藻酸钠，0.03-0.1%磷酸二氢钾，0.15-0.35%氯化铵，0.1-0.3%蛋白胨过滤的陈海水溶解，不调pH值。
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