CN110464791A - 一种丝兰属植物在预防鸡坏死性肠炎的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了种丝兰属植物在预防鸡坏死性肠炎的应用,具体预防鸡坏死性肠炎丝兰属植物为丝兰属麟凤兰。其中丝兰属麟凤兰提取物应用于抑制产气荚膜梭菌生长,预防鸡坏死性肠炎。
Description
技术领域
本发明属于兽药领域,具体涉及一种真菌植物在防治鸡坏死性肠炎的应用。
背景技术
鸡坏死性肠炎(Necrotic enteritis,NE)是一种发病机制复杂的肠道疾病,主要由产气荚膜梭菌分泌外毒素引起鸡小肠黏膜坏死为主要特征的一种急性细菌性疾病。除此之外还包括一系列的诱发因素。通常继发于球虫病,导致肉鸡的增重率下降,死亡率上升,给家禽生产造成直接和间接的经济损失。
目前,通过在饲料中添加抗生素是预防并治疗家禽感染坏死性肠炎的主要手段,然而,由于抗生素大量使用所致的细菌耐药性问题及抗生素残留问题对公众健康造成了严重威胁,因此,开发安全有效的抗生素替代物正日益成为研究的热点。天然化合物具有毒性较低、来源丰富、安全范围广等优点,是筛选抗生素替代物的重要资源。
丝兰属麟凤兰植物是一种药用植物,原产于墨西哥南部和墨西哥北部的沙漠。该植物含有很多具有生理活性的植物化学成分。它是甾体皂苷的丰富来源,也是市场上作为皂苷的来源。传统医学上,这种植物被美国土著人用来预防和治疗关节炎等各种疾病。近来,丝兰产品被用在各种领域。Cheeke和Otero详细讨论了丝兰粉在动物上作为添加剂的应用。在畜禽上的有益作用包括:提高生长率和饲料转化率、降低畜舍中氨气、抗原虫和杀线虫活性、改善瘤胃微生物菌群、抑制革兰氏阳性菌、减少猪死胎、降低蛋和组织胆固醇含量。对马和狗上具有抗关节炎作用。其他的应用包括饮料中的发泡剂,作物生产中线虫和真菌控制剂、作物生长促进剂,土壤润湿剂等。丝兰产品具有GRAS认证,因此被FDA批准认可用于人类食用。
至今未见麟凤兰预防鸡坏死性肠炎报道。
发明内容
本发明旨在提供一种丝兰属植物在预防鸡坏死性肠炎的应用。
为实现上述发明目的,一种丝兰属植物在预防鸡坏死性肠炎的应用,具体实施方案为:
本发明公开了丝兰属植物在预防鸡坏死性肠炎中的应用。
本发明所述一种丝兰属植物在预防鸡坏死性肠炎的应用,预防鸡坏死性肠炎丝兰属植物为麟凤兰、凤尾丝兰、冬凤兰中的一种或者多种组合。
本发明所述一种丝兰属植物在预防鸡坏死性肠炎的应用,预防鸡坏死性肠炎丝兰属植物为麟凤兰。
本发明所述一种丝兰属植物在预防鸡坏死性肠炎的应用,所述麟凤兰应用于抑制产气荚膜梭菌生长,预防鸡坏死性肠炎。
本发明所述一种丝兰属植物在预防鸡坏死性肠炎的应用,所述麟凤兰提取物应用于抑制产气荚膜梭菌生长,预防鸡坏死性肠炎。
本发明所述一种丝兰属植物在预防鸡坏死性肠炎的应用,所述麟凤兰提取物为主要活性成分制成药学上可接受的任何剂型。
具体实施方式
下面实施例只为进一步说明本发明,不以任何形式限制本发明范围。
试验例1
预实验发现麟凤兰提取物对产气荚膜梭菌有抑制作用,筛选麟凤兰提取物不同浓度对产气荚膜梭菌抑制作用。
1.材料与方法
1.1 试验菌株
产气荚膜梭菌标准株ATCC13124
1.2 滤纸片的制备
选吸水性强而质地均匀的滤纸,用打孔机打成直径为8mm的圆片,分装于洁净的干燥试管中,121℃高压灭菌30min后备用。
1.3 菌株活化
将产气荚膜梭菌菌株,划线接种于TSC平板上,40℃厌氧培养24h。挑取典型的典型密集菌落,接种到10mLFT液体培养基中,40℃厌氧培养8h。按照0.5麦氏比浊管将菌液稀释至120CFU/mL。
1.4纸片扩散法
用移液枪吸取100μL120FU/mL试验菌液至FT营养琼脂培养基上,用涂布器均匀涂布3次然后绕平板边缘涂抹一周,盖好平皿,置室温干燥3~5min。每个平板贴放用灭菌的镊子小心夹取滤纸片,贴于培养基表面,并轻压纸片,使其紧贴培养基表面,各纸片中心相距大于24mm,纸片距平皿外缘大于15mm。分别吸取5μl待测品滴加到滤纸片上。将平皿倒置,40℃厌氧培养24h,观察并测量抑菌圈的直径,每组做3次重复,取平均值。
1.5 分组
空白对照组:0.9%氯化钠溶液
阳性对照组:恩拉霉素溶液(10μg/ml)
药物组:
A组(麟凤兰提取物浓度0.1μg /ml)
B组(麟凤兰提取物浓度0.5μg/ml)
C组(麟凤兰提取物浓度10μg/ml)
D组(麟凤兰提取物浓度100μg/ml)
E组(麟凤兰提取物浓度1000μg/ml)
1.6抑菌圈判定标准:抑菌作用效果以抑菌圈直径小于10mm为不敏感,在11~15mm之间为敏感,在16~20之间为中度敏感,大于20mm为高度敏感。
2 纸片扩散法结果
利用纸片扩散法检测下列不同浓度麟凤兰提取物对产气荚膜梭菌致病菌的敏感性和抑菌作用。结果见下表2
由试验结果看,当麟凤兰提取物浓度为0.1μg/ml 时,显示对产气荚膜梭菌致病菌不敏感;当浓度增大到0.5μg/ml就显示对产气荚膜梭菌致病菌敏感;继续增大浓度,浓度越大,抑菌圈直径越大,抑菌能力越强。
试验例2
(1)肠道病变评分标准
(2)操作
1.分组:将108只健康的体重±5g的1日龄肉鸡随机分为阴性对照组、阳性对照组、恩拉霉素组、麟凤兰提取物1组、麟凤兰提取物2组、麟凤兰提取物3组,共6组。每组18只,分别饲养于熏蒸消毒的鸡笼。
2.连续喂养27天,阴性对照组和阳性对照组均喂养普通饲料,恩拉霉素组喂养普通饲料+恩拉霉素(7mg/kg),麟凤兰提取物1组喂养普通饲料+麟凤兰提取物(50mg/kg),麟凤兰提取物2组喂养普通饲料+麟凤兰提取物(100mg/kg)、麟凤兰提取物3组喂养普通饲料+麟凤兰提取物(150mg/kg)、
3. 产气荚膜梭菌5×108cfu/只,每天1次,连续3天,进行攻毒,攻毒方式为经口腔灌胃。除阴性对照组不攻毒外,其他5组均进行攻毒。
4. 攻毒结束后,解剖观察,评分小肠病变情况、测定免疫器官指数(胸腺、脾脏、法氏囊)
5.结果:
(1)平均日增重的计算
记录攻毒前28天鸡的体重,每组以7日龄鸡体重为初始体重,每组以31日龄鸡体重为最终体重,最终得到平均每只鸡日增重。
计算公式如下:(最终总体重-初始总体重)/(18×21);
由结果可知,对比阴性对照组、阳性对照组、恩拉霉素组,麟凤兰提取物1-3组平均日增重均具有显著性差异(P<0.05),说明本发明的麟凤兰提取物能够显著提高肉鸡体重;而麟凤兰提取物1-3组间无显著性差异(P>0.05),说明麟凤兰提取物给食量不同对平均日增重影响不大。
(2)小肠病变情况
小肠病变记分
由结果可见麟凤兰提取物3组评分最低,说明小肠病变最少,其次麟凤兰提取物2组、麟凤兰提取物1组、恩拉霉素组;与阳性对照组相比,其他组均有显著差异(P<0.05);与恩拉霉素组对比,麟凤兰提取物2、3组均有显著差异(P<0.05),说明麟凤兰提取物2、3组预防鸡坏死性肠炎效果较恩拉霉素好。
(3)免疫器官影响情况
免疫器官指数在一定程度上能反映机体免疫器官的发育状况,免疫器官指数的降低说明免疫器官发育受到了抑制,免疫功能降低。反之则为免疫器官发育良好,免疫功能增强。
。
由结果可见麟凤兰提取物3组免疫器官指数最高,其次麟凤兰提取物2组、麟凤兰提取物1组、恩拉霉素组;与阳性对照组相比,其他组均有显著差异(P<0.05);与恩拉霉素组对比,麟凤兰提取物2、3组均有显著差异(P<0.05),说明麟凤兰提取物2、3组提高鸡免疫力、保护免疫器官作用较恩拉霉素好。
(4)攻毒期间鸡的死亡数
结果如下:
从结果可以看出,麟凤兰提取物能减少坏死性肠炎对肉鸡肠道的伤害,并大大降低了死亡率,预防鸡坏死性肠炎效果显著。
Claims (6)
1.丝兰属植物在预防鸡坏死性肠炎中的应用。
2.根据权利要求1所述一种丝兰属植物在预防鸡坏死性肠炎的应用,其特征在于,预防鸡坏死性肠炎丝兰属植物为麟凤兰、凤尾丝兰、冬凤兰中的一种或者多种组合。
3.根据权利要求1所述一种丝兰属植物在预防鸡坏死性肠炎的应用,其特征在于,预防鸡坏死性肠炎丝兰属植物为麟凤兰。
4.根据权利要求1所述一种丝兰属植物在预防鸡坏死性肠炎的应用,其特征在于:所述麟凤兰应用于抑制产气荚膜梭菌生长,预防鸡坏死性肠炎。
5.根据权利要求1所述一种丝兰属植物在预防鸡坏死性肠炎的应用,其特征在于:所述麟凤兰提取物应用于抑制产气荚膜梭菌生长,预防鸡坏死性肠炎。
6.根据权利要求5所述一种丝兰属植物在预防鸡坏死性肠炎的应用,其特征在于:所述麟凤兰提取物为主要活性成分制成药学上可接受的任何剂型。
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