CN110447463A - 一种冬虫夏草子实体的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种冬虫夏草子实体的制备方法,包括以下步骤:提取天然冬虫夏草菌菌种、冬虫夏草活体消毒、冬虫夏草活体组织分离步骤、冬虫夏草子实体的培育所述的天然冬虫夏草菌菌种培养基组成为:4‑5龄蝙蝠蛾幼虫15%‑20%,大米10%‑15%,葡萄糖1.5%‑2%,蛋白胨1%‑2%,鸡蛋清1%‑2%,牛肉膏0.5%‑1%,腺嘌呤0.1%‑0.2%,甘氨酸0.2%‑0.4%,谷氨酰胺1%‑2%,琼脂10‑15%,蒸馏水70%‑80%。由于本发明提取的是天然冬虫夏草菌的菌种,利用蛹虫草的栽培技术,栽培出天然的冬虫夏草的子实体,使得产品保留天然冬虫夏草原有的有效成分和药用价值。有效提高虫草素含量,加强保健功效。
Description
技术领域
本发明涉及蛹虫草的培植领域,特别涉及一种冬虫夏草子实体的制备方法。
背景技术
冬虫夏草(Ophiocordyceps Sinensis),别称冬虫草,是冬虫夏草菌和蝙蝠蛾科幼虫的复合体。冬虫夏草功效众多,它是由肉座菌目、蛇形虫草科、蛇形虫草属的冬虫夏草菌寄生于高山草甸土中的蝠蛾幼虫,使幼虫身躯僵化,并在适宜条件下,夏季由僵虫头端抽生出长棒状的子座而形成的,即冬虫夏草菌的子实体与僵虫菌核(幼虫尸体)构成的复合体。主要活性成分是虫草素,冬虫夏草功效主要有调节免疫系统功能、抗肿瘤、抗疲劳、补肺益肾,止血化痰,秘精益气、美白祛黑等多种功效。食用方法有打粉、泡酒、泡水等。冬虫夏草在我国主要产于中国大陆青海、西藏、四川、云南、甘肃五省的高寒地带和雪山草原。全球仅分布于中国、印度、尼泊尔、不丹四个国家。
蛹虫草又名北冬虫夏草,蛹草等。它寄生于夜蛾科昆虫蛹上,真菌分类学上与冬虫夏草相似,是一种药用兼食用真菌。蛹虫草,冬虫夏草的子实体,已被认为是理想的冬虫夏草替代品。然而,现有技术中,因为冬虫夏草子实体里的有效成分:虫草素,虫草多糖,硒元素和微量元素含量不足,使得其保健功效不明显。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种冬虫夏草子实体的制备方法,该方法有效提高冬虫夏草子实体的保健功效。
为了解决上述技术问题,本发明的技术方案为:
一种冬虫夏草子实体的制备方法,包括以下步骤:
S1)提取天然冬虫夏草菌菌种:挖掘天然冬虫夏草的活体,并4℃低温无菌保存;
S2)冬虫夏草活体消毒:在无菌室接种箱内,用无菌生理盐水清洗冬虫夏草活体3次,再用超声波清洗仪器深度清洗3次,每次30分钟,然后用75%酒精溶液消毒表面3次,每次2分钟,最后用无菌水擦洗所留下的酒精2次;
S3)冬虫夏草活体组织分离步骤:用无菌接种刀将冬虫夏草的子实体与虫体剖开,取子实体剖成两半,从其中一半处取出1-2立方毫米的内部组织一块,然后立刻接在备好的试管天然冬虫夏草菌菌种培养基上面,放置在生物恒温箱16℃-18℃培养培养10天,再经纯化和出草试验后,筛选出冬虫夏草菌母种;
S4)冬虫夏草子实体的培育:将筛选出冬虫夏草菌母种转代出第一代菌种,将第一代菌种以4℃无菌保存180天,生长成冬虫夏草子实体;
所述的天然冬虫夏草菌菌种培养基组成为:4-5龄蝙蝠蛾幼虫15%-20%,大米10%-15%,葡萄糖1.5%-2%,蛋白胨1%-2%,鸡蛋清1%-2%,牛肉膏0.5%-1%,腺嘌呤0.1%-0.2%,甘氨酸0.2%-0.4%,谷氨酰胺1%-2%,琼脂10-15%,蒸馏水70%-80%。
最佳的提取天然冬虫夏草菌菌种的时间地点为每年的4月下旬,在西藏那曲现场挖掘出天然冬虫夏草的活体。所述的冬虫夏草子实体的培育属于蛹虫草人工培植技术。
优选的,所述的天然冬虫夏草菌菌种培养基组成为:4-5龄蝙蝠蛾幼虫15%-18%,大米10%-13%,葡萄糖1.5%-1.8%,蛋白胨1%-1.5%,鸡蛋清1%-1.5%,牛肉膏0.5%-0.8%,腺嘌呤0.1%-0.15%,甘氨酸0.2%-0.3%,谷氨酰胺1%-1.5%,琼脂10-13%,蒸馏水70%-75%。
更优选的,所述的天然冬虫夏草菌菌种培养基组成为:4-5龄蝙蝠蛾幼虫18%-20%,大米13%-15%,葡萄糖1.8%-2%,蛋白胨1.5%-2%,鸡蛋清1.5%-2%,牛肉膏0.8%-1%,腺嘌呤0.15%-0.2%,甘氨酸0.3%-0.4%,谷氨酰胺1.5%-2%,琼脂13-15%,蒸馏水75%-80%。
更优选的,所述的天然冬虫夏草菌菌种培养基组成为:4-5龄蝙蝠蛾幼虫15%,大米10%,葡萄糖1.5%,蛋白胨1%,鸡蛋清1%,牛肉膏0.5%,腺嘌呤0.1%,甘氨酸0.2%,谷氨酰胺1%,琼脂10%,蒸馏水70%。
特别优选的,所述的天然冬虫夏草菌菌种培养基组成为:4-5龄蝙蝠蛾幼虫18%,大米13%,葡萄糖1.8%,蛋白胨1.5%,鸡蛋清1.5%,牛肉膏0.8%,腺嘌呤0.15%,甘氨酸0.3%,谷氨酰胺1.5%,琼脂13%,蒸馏水75%。
优选的,所述的天然冬虫夏草菌菌种培养基组成为:4-5龄蝙蝠蛾幼虫20%,大米15%,葡萄糖2%,蛋白胨2%,鸡蛋清2%,牛肉膏1%,腺嘌呤0.2%,甘氨酸0.4%,谷氨酰胺2%,琼脂15%,蒸馏水80%。
采用上述技术方案,由于提取的是天然冬虫夏草菌的菌种,利用蛹虫草的栽培技术,栽培出天然的冬虫夏草的子实体,使得产品保留天然冬虫夏草原有的有效成分和药用价值。有效提高虫草素含量,加强保健功效。
具体实施方式
下面对本发明的具体实施方式作进一步说明。在此需要说明的是,对于这些实施方式的说明用于帮助理解本发明,但并不构成对本发明的限定。此外,下面所描述的本发明各个实施方式中所涉及的技术特征只要彼此之间未构成冲突就可以相互组合。
实施例1
本实施例一种冬虫夏草子实体的制备方法,包括以下步骤:
S1)提取天然冬虫夏草菌菌种:挖掘天然冬虫夏草的活体,并4℃低温无菌保存;
S2)冬虫夏草活体消毒:在无菌室接种箱内,用无菌生理盐水清洗冬虫夏草活体3次,再用超声波清洗仪器深度清洗3次,每次30分钟,然后用75%酒精溶液消毒表面3次,每次2分钟,最后用无菌水擦洗所留下的酒精2次;
S3)冬虫夏草活体组织分离步骤:用无菌接种刀将冬虫夏草的子实体与虫体剖开,取子实体剖成两半,从其中一半处取出2立方毫米的内部组织一块,然后立刻接在备好的试管天然冬虫夏草菌菌种培养基上面,放置在生物恒温箱18℃培养培养10天,再经纯化和出草试验后,筛选出冬虫夏草菌母种;
S4)冬虫夏草子实体的培育:将筛选出冬虫夏草菌母种转代出第一代菌种,将第一代菌种以4℃无菌保存180天,生长成冬虫夏草子实体;
天然冬虫夏草菌菌种培养基组成为:4-5龄蝙蝠蛾幼虫15%,大米10%,葡萄糖1.5%,蛋白胨1%,鸡蛋清1%,牛肉膏0.5%,腺嘌呤0.1%,甘氨酸0.2%,谷氨酰胺1%,琼脂10%,蒸馏水70%。
最佳的提取天然冬虫夏草菌菌种的时间地点为每年的4月下旬,在西藏那曲现场挖掘出天然冬虫夏草的活体。所述的冬虫夏草子实体的培育属于蛹虫草人工培植技术。
实施例2
按照实施例1的制备方法,使用以下成分的培养基制备出冬虫夏草子实体:
天然冬虫夏草菌菌种培养基组成为:4-5龄蝙蝠蛾幼虫18%,大米13%,葡萄糖1.8%,蛋白胨1.5%,鸡蛋清1.5%,牛肉膏0.8%,腺嘌呤0.15%,甘氨酸0.3%,谷氨酰胺1.5%,琼脂13%,蒸馏水75%。
实施例3
按照实施例1的制备方法,使用以下成分的培养基制备出冬虫夏草子实体:
天然冬虫夏草菌菌种培养基组成为:4-5龄蝙蝠蛾幼虫20%,大米15%,葡萄糖2%,蛋白胨2%,鸡蛋清2%,牛肉膏1%,腺嘌呤0.2%,甘氨酸0.4%,谷氨酰胺2%,琼脂15%,蒸馏水80%。
本发明的重要成分测试结果如表一所示:
表一:本发明重要成分测试结果
以上对本发明的实施方式作了详细说明,但本发明不限于所描述的实施方式。对于本领域的技术人员而言,在不脱离本发明原理和精神的情况下,对这些实施方式进行多种变化、修改、替换和变型,仍落入本发明的保护范围内。
Claims (6)
1.一种冬虫夏草子实体的制备方法,其特征在于:包括以下步骤:
S1)提取天然冬虫夏草菌菌种:挖掘天然冬虫夏草的活体,并4℃低温无菌保存;
S2)冬虫夏草活体消毒:在无菌室接种箱内,用无菌生理盐水清洗冬虫夏草活体3次,再用超声波清洗仪器深度清洗3次,每次30分钟,然后用75%酒精溶液消毒表面3次,每次2分钟,最后用无菌水擦洗所留下的酒精2次;
S3)冬虫夏草活体组织分离步骤:用无菌接种刀将冬虫夏草的子实体与虫体剖开,取子实体剖成两半,从其中一半处取出1-2立方毫米的内部组织一块,然后立刻接在备好的试管天然冬虫夏草菌菌种培养基上面,放置在生物恒温箱16℃-18℃培养培养10天,再经纯化和出草试验后,筛选出冬虫夏草菌母种;
S4)冬虫夏草子实体的培育:将筛选出冬虫夏草菌母种转代出第一代菌种,将第一代菌种以4℃无菌保存180天,生长成冬虫夏草子实体;
所述的天然冬虫夏草菌菌种培养基组成为:4-5龄蝙蝠蛾幼虫15%-20%,大米10%-15%,葡萄糖1.5%-2%,蛋白胨1%-2%,鸡蛋清1%-2%,牛肉膏0.5%-1%,腺嘌呤0.1%-0.2%,甘氨酸0.2%-0.4%,谷氨酰胺1%-2%,琼脂10-15%,蒸馏水70%-80%。
2.根据权利要求1所述的冬虫夏草子实体的制备方法,其特征在于:所述的天然冬虫夏草菌菌种培养基组成为:4-5龄蝙蝠蛾幼虫15%-18%,大米10%-13%,葡萄糖1.5%-1.8%,蛋白胨1%-1.5%,鸡蛋清1%-1.5%,牛肉膏0.5%-0.8%,腺嘌呤0.1%-0.15%,甘氨酸0.2%-0.3%,谷氨酰胺1%-1.5%,琼脂10-13%,蒸馏水70%-75%。
3.根据权利要求1所述的冬虫夏草子实体的制备方法,其特征在于:所述的天然冬虫夏草菌菌种培养基组成为:4-5龄蝙蝠蛾幼虫18%-20%,大米13%-15%,葡萄糖1.8%-2%,蛋白胨1.5%-2%,鸡蛋清1.5%-2%,牛肉膏0.8%-1%,腺嘌呤0.15%-0.2%,甘氨酸0.3%-0.4%,谷氨酰胺1.5%-2%,琼脂13-15%,蒸馏水75%-80%。
4.根据权利要求1所述的冬虫夏草子实体的制备方法,其特征在于:所述的天然冬虫夏草菌菌种培养基组成为:4-5龄蝙蝠蛾幼虫15%,大米10%,葡萄糖1.5%,蛋白胨1%,鸡蛋清1%,牛肉膏0.5%,腺嘌呤0.1%,甘氨酸0.2%,谷氨酰胺1%,琼脂10%,蒸馏水70%。
5.根据权利要求1所述的冬虫夏草子实体的制备方法,其特征在于:所述的天然冬虫夏草菌菌种培养基组成为:4-5龄蝙蝠蛾幼虫18%,大米13%,葡萄糖1.8%,蛋白胨1.5%,鸡蛋清1.5%,牛肉膏0.8%,腺嘌呤0.15%,甘氨酸0.3%,谷氨酰胺1.5%,琼脂13%,蒸馏水75%。
6.根据权利要求1所述的冬虫夏草子实体的制备方法,其特征在于:所述的天然冬虫夏草菌菌种培养基组成为:4-5龄蝙蝠蛾幼虫20%,大米15%,葡萄糖2%,蛋白胨2%,鸡蛋清2%,牛肉膏1%,腺嘌呤0.2%,甘氨酸0.4%,谷氨酰胺2%,琼脂15%,蒸馏水80%。
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