CN110430903A - 组织基质材料和酶粘合剂 - Google Patents

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Abstract

本申请涉及转谷氨酰胺酶用于处理各种组织基质产品的用途。方法可以包括将转谷氨酰胺酶施加至含部分地变性的胶原的组织基质，以及植入组织基质。转谷氨酰胺酶可以促进与另一种含胶原的组织基质、在植入之后组织基质周围的组织或两者的粘附。

Description

组织基质材料和酶粘合剂
本申请根据35U.S.C.§119要求于2017年1月30日提交的美国临时申请第62/452,014号的优先权，该临时申请的全部内容通过引用并入本文。
本公开内容涉及组织产品，包括使用组织产品的方法和使用转谷氨酰胺酶处理组织产品的方法。
各种源自组织的产品被用于再生、修复或以其他方式治疗患病或受损的组织和器官。这样的产品可以包括完整的组织移植物或无细胞(acellular)组织或重构的无细胞组织(例如，来自皮肤、肠或其他组织的无细胞组织基质，具有或没有细胞接种)。这样的产品还可以包括杂化材料或复合材料，所述杂化材料或复合材料例如包含合成的组分的材料，诸如具有包括源自组织的材料的涂层或覆盖物的聚合物网状物基底。
在一些情况下，将含胶原的组织基质产品彼此连接或将含胶原的组织基质产品连接至体内的组织可以是合意的。目前存在连接这样的材料或组织的多种方式，包括例如粘合剂、机械固定系统(例如，缝合线)或化学修饰。然而，目前的装置和方法对于一些应用可能并不理想。
例如，一些手术粘合剂虽然适合于表面(superficial)使用，但不被推荐用于体内深处的植入。此外，机械固定机构的使用可以是耗时的，并且可能在组织平面之间留下间隙，这可能是不期望的，因为这样的间隙可以导致并发症，诸如血清肿形成。此外，粘合剂或其他化学连接机构可以在再生组织基质中产生不期望的变化，或者其自身可以产生阻止期望的细胞向内生长和血管生成的屏障层，并且一些粘合剂可以产生不适合于植入的毒性副产物。
因此，本公开内容提供了用于将含胶原的组织产品彼此连接或将含胶原的组织产品连接至组织的改进方法。
概述
根据一个实施方案，提供了生产组织产品的方法。所述方法可以包括：选择包含含胶原的组织基质的第一材料；处理第一材料的一部分以使第一材料的该部分的表面附近的胶原部分地变性；使已经被处理以使胶原部分地变性的部分与包含转谷氨酰胺酶的组合物接触；以及将已经与包含转谷氨酰胺酶的组合物接触的部分与包含含胶原的组织基质的第二材料物理接触地放置。
根据一个实施方案，提供了治疗方法。所述方法可以包括：选择包含含胶原的组织基质的材料；处理该材料的一部分以使该部分的表面附近的胶原部分地变性；使已经被处理以使胶原部分地变性的部分与包含转谷氨酰胺酶的组合物接触；以及将已经与包含转谷氨酰胺酶的组合物接触的部分与组织部位物理接触地放置。
根据另一个实施方案，提供了组织治疗产品。所述产品可以包含：包含含胶原的无细胞组织基质的第一材料；以及包含含胶原的无细胞组织基质的至少一种第二材料，其中第一材料和第二材料通过谷氨酰胺残基的γ-羧基酰胺基团与一级氨基酸(primary aminoacid)之间形成的键彼此连接。
根据另一个实施方案，提供了治疗方法。所述方法可以包括选择包含含胶原的组织基质的材料。靠近该材料的表面的该材料的部分包含部分地变性的胶原。所述方法可以包括使包含部分地变性的胶原的部分与包含转谷氨酰胺酶的组合物接触。所述方法可以包括将已经与包含转谷氨酰胺酶的组合物接触的部分与组织部位物理接触地放置。
根据另一个实施方案，提供了组织治疗产品。所述产品可以包含：无细胞组织基质，该无细胞组织基质具有基本上完整的无细胞胶原组织基质；以及表面区域，该表面区域包含部分地变性的胶原，其中部分地变性的胶原包含由与基本上完整的无细胞胶原组织基质相同的组织形成的胶原基质，使得部分地变性的胶原由完整的组织基质的天然胶原框架形成并且连接至完整的组织基质。
根据一个实施方案，提供了生产组织产品的方法。所述方法可以包括：选择包含含胶原的组织基质的第一材料，以及处理第一材料的一部分以使第一材料的该部分的表面附近的胶原部分地变性，从而形成与含胶原的组织基质连接的部分地变性的胶原的部分。
附图描述
图1示出了根据各种实施方案使用转谷氨酰胺酶连接组织产品的方法。
图2是可以使用所公开的方法处理的片层组织产品的透视图。
图3是根据各种实施方案的组织产品的侧视图，该组织产品与乳房植入物或组织扩张器一起植入并且掺入转谷氨酰胺酶以将该组织产品结合至周围组织。
图4示出了使用片层组织产品治疗腹部部位，其中可以结合所公开的转谷氨酰胺酶处理方法。
图5A示出了如实施例1中描述制备的具有Masson三色染色的组织基质组织学切片。
图5B示出了如实施例1中描述制备的具有Masson三色染色的组织基质组织学切片，其中表面区域具有通过激光处理产生的部分地变性的胶原。
某些示例性实施方案的描述
现在将详细参考根据本公开内容的某些示例性实施方案，所述示例性实施方案的某些实例在附图中示出。在可能的情况下，相同的附图标记(reference number)将贯穿附图被用于指代相同或相似的部件。
在本申请中，除非另外特别说明，否则单数的使用包括复数。在本申请中，除非另外说明，否则“或”的使用意指“和/或”。此外，术语“包括/包含/含有(including)”以及其他形式诸如“包括/包含/含有(includes)”和“包括/包含/含有(included)”的使用不是限制性的。本文描述的任何范围将被理解为包括端点和端点之间的所有值。
本文使用的章节标题仅用于组织目的，并且不应被解释为限制所描述的主题。在本申请中引用的所有文件或文件的部分，包括但不限于专利、专利申请、文章、书籍和论文，在此通过引用以其整体明确地并入以用于任何目的。
各种人类组织和动物组织可以被用于生产用于治疗患者的产品。例如，已经生产了各种组织产品，所述组织产品用于由于各种疾病和/或结构损伤(例如，因创伤、手术、萎缩和/或长期磨损和退化)而已经受损或丢失的人类组织的再生、修复、增大(augmentation)、强化和/或治疗。这样的产品可以包括，例如，无细胞组织基质、组织同种异体移植物或异种移植物和/或重构的组织(即，已经接种有细胞以产生有活力的材料的至少部分地脱细胞的组织)。
可以选择组织产品以提供各种不同的生物学性质和机械性质。例如，无细胞组织基质或其他组织产品可以被选择以允许组织向内生长和重塑，以帮助通常在基质植入部位处存在的组织的再生。例如，当被植入到筋膜上或被植入到筋膜内时，可以选择无细胞组织基质以允许筋膜的再生而没有过度的纤维化或瘢痕形成。在某些实施方案中，组织产品可以由或STRATTICETM形成，和STRATTICETM分别是人无细胞真皮基质和猪无细胞真皮基质。可选择地，其他合适的无细胞组织基质是可用的。例如，许多生物支架材料由Badylak等人,“Extracellular Matrix as a Biological ScaffoldMaterial:Structure and Function,”Acta Biomaterialia(2008),doi:10.1016/j.actbio.2008.09.013描述。
如本文使用的“组织产品”将指的是含有细胞外基质蛋白的任何人类组织或动物组织。“组织产品”可以包括无细胞组织基质或部分地脱细胞的组织基质、已经用外源细胞重新填充(repopulated)的脱细胞的组织基质、和/或细胞组织。“组织产品”可以呈各种形状或形式，例如，作为柔性片层、作为颗粒或裁片/成形的片、或作为块体(bulk mass)(例如，盒形、卵形、球形或不规则的三维形状)。组织产品可以包括杂化产品，该杂化产品包括两种或更多种不同的组织类型，例如，来自真皮和肌肉、真皮和筋膜、肌肉和筋膜、或真皮和脂肪组织或其他组合的组织基质。
如本文使用的术语“无细胞组织基质”(例如，ATM)通常指的是基本上不含细胞和/或细胞组分的任何组织基质。皮肤、皮肤的部分(例如，真皮)和其他组织诸如脂肪、血管、心脏瓣膜、筋膜、软骨、骨、肌肉(骨骼肌或非骨骼肌)和神经结缔组织可以被用于产生在本公开内容的范围内的无细胞基质。无细胞组织基质可以以多种方式进行测试或评估以确定它们是否基本上不含细胞和/或细胞组分。例如，可以通过光学显微术检查被处理的组织以确定细胞(活细胞或死细胞)和/或细胞组分是否残留。此外，某些测定可以被用于鉴定细胞或细胞组分的存在。
转谷氨酰胺酶是在细菌、植物和动物中表达的酶，其催化谷氨酰胺残基的γ-羧基酰胺基团与赖氨酸残基的氨基基团或其他伯氨基基团的结合。转谷氨酰胺酶在食品工业中用于富含蛋白质的食品诸如肉、酸奶和豆腐的结合和改善富含蛋白质的食品诸如肉、酸奶和豆腐的物理性质。转谷氨酰胺酶目前也被探索用于在医疗装置工业中作为水凝胶和密封剂使用。参见Aberle,T.等人，“Cell-type Specific Four Component Hydrogel,”PLoSONE 9(1):e86740(2004年1月)。
本发明人已经认识到转谷氨酰胺酶可以用于催化两种或更多种含胶原的材料的彼此结合。两种或更多种含胶原的材料可以包括如上文讨论的“组织产品”，包括无细胞组织基质，或者可以包括在患者中存在的组织产品和组织(例如，腹壁、乳房或其他组织部位中植入物部位周围的筋膜或其他组织)。
尽管转谷氨酰胺酶对含胶原的材料具有一些酶促作用，但本发明人还已经发现使用转谷氨酰胺酶结合或连接两种或更多种材料可以通过以下来改善：引起组织表面或表面附近的胶原的部分变性，从而使胶原氨基酸的胺基团和酰基基团更易于酶促交联。通过使包含在材料的表面或表面附近的胶原部分地变性，变性的胶原将保持与组织产品的原纤维胶原网络连接，并且将不需要外源明胶来帮助与其他材料诸如其他组织产品或在植入部位的组织结合。
根据一个实施方案，提供了生产组织产品的方法。所述方法可以包括：选择包含含胶原的组织基质的第一材料；处理第一材料的一部分以使该部分的表面附近的胶原部分地变性；使已经被处理以使胶原部分地变性的部分与包含转谷氨酰胺酶的组合物接触；以及将已经与包含转谷氨酰胺酶的组合物接触的部分与包含含胶原的组织基质的第二材料物理接触地放置。
根据另一个实施方案，提供了组织治疗产品。所述产品可以包含：无细胞组织基质，该无细胞组织基质具有基本上完整的无细胞胶原组织基质；以及表面区域，该表面区域包含部分地变性的胶原，其中部分地变性的胶原包含由与基本上完整的无细胞胶原组织基质相同的组织形成的胶原基质，使得部分地变性的胶原由天然胶原框架形成并且连接至完整的组织基质。
根据另一个实施方案，提供了治疗方法。所述方法可以包括：选择包含含胶原的组织基质的材料；处理该材料的一部分以使该部分的表面附近的胶原部分地变性；使已经被处理以使胶原部分地变性的部分与包含转谷氨酰胺酶的组合物接触；以及将已经与包含转谷氨酰胺酶的组合物接触的部分与组织部位物理接触地放置。
根据另一个实施方案，提供了组织治疗产品。所述产品可以包含：包含含胶原的无细胞组织基质的第一材料；以及包含含胶原的无细胞组织基质的至少一种第二材料，其中第一材料和第二材料通过谷氨酰胺残基的γ-羧基酰胺基团与一级氨基酸之间形成的键彼此连接。
根据一个实施方案，提供了生产组织产品的方法。所述方法可以包括：选择包含含胶原的组织基质的第一材料，以及处理第一材料的一部分以使第一材料的该部分的表面附近的胶原部分地变性，从而形成与含胶原的组织基质连接的部分地变性的胶原的部分。
现在提供上文描述的方法和产品的更详细的解释。图1示出了根据各种实施方案使用转谷氨酰胺酶连接组织产品的方法。图2是可以使用所公开的方法处理的片层组织产品的透视图。并且图3是根据各种实施方案的组织产品的侧视图，该组织产品与乳房植入物或组织扩张器一起植入并且掺入转谷氨酰胺酶以将该组织产品结合至周围组织，而图4示出了使用片层组织产品治疗腹部部位，其中可以结合所公开的转谷氨酰胺酶处理方法。
图1提供了用于实施将组织产品彼此连接的方法或用于将组织产品与体内的组织连接的方法的一般性方案。如示出的，该方法从选择期望的组织产品10(步骤100)开始。如上文讨论的，组织产品可以包括多种不同的含胶原的材料中的任一种，包括例如无细胞组织基质或部分地脱细胞的组织基质、已经用外源细胞重新填充的脱细胞的组织基质、和/或细胞组织。
组织产品可以包括选自以下的组织：皮肤、筋膜、脂肪、心包组织、硬脑膜、脐带组织、胎盘组织、心瓣膜组织、韧带组织、腱组织、动脉组织、静脉组织、神经结缔组织、膀胱组织、输尿管组织、肌肉和肠组织。在一些情况下，组织产品由源自皮肤的组织产生，并且可以包括具有或不具有附随的表皮的真皮组织基质。在一些情况下，组织产品由肌肉产生，并且可以包括包含骨骼组织或非骨骼组织的肌肉组织基质。
除了使用完整的无细胞组织基质片层或其他形式之外或者可选择地，组织产品可以包含被加工和重新形成为掺入颗粒状或重构的组织基质的海绵或类似材料的组织基质。例如，组织基质海绵可以通过将组织基质进行切割、研磨或切碎以产生颗粒或碎片来形成。然后，颗粒或碎片可以通过添加水来形成浆料，并且被浇铸在容器中(例如，作为片层或其他形状)，或者被施加至基底，然后进行干燥(例如，通过空气干燥或冷冻干燥)。在一些实施方案中，可以进行任选的稳定步骤以使该材料交联或以其他方式稳定该材料。包含与聚合物基底一起使用或不与聚合物基底一起使用的海绵或涂层的示例性组织产品在于2016年7月5日授予LifeCell Corporation的美国专利第9,382,422号中公开。
在一些实施方案中，组织基质海绵由脂肪组织形成。合适的脂肪组织在美国专利公布第2012/0310367A1号(由Connor于2012年5月30日提交的美国专利申请第13/483,674号)中被一般性地描述。这样的脂肪材料通常可以通过材料的机械均化、洗涤、重悬和稳定来形成。材料可以被干燥(例如，在稳定之前或之后通过冷冻干燥进行干燥)。稳定还可以用于将海绵结合或附接至其他材料。消毒可以在本文描述的装置的组件连接之后进行。此外，海绵可以在与完整的无细胞组织基质组件接触时形成，或者可以在连接之前单独形成。
在一些实施方案中，多层组织产品由肌肉组织基质形成。肌肉组织可以选自平滑肌、心肌、骨骼肌或其组合。每一层肌肉组织基质可以通过用转谷氨酰胺酶处理来连接。多层组织产品可以包括一层无细胞肌肉组织基质和至少一层源自任何天然组织的另外的无细胞组织基质。
接下来，在选择组织产品之后，组织产品的表面处或表面附近的部分可以被处理以使胶原变性或部分地变性(步骤110)。例如，如图1所示，平片层的表面13可以被处理以使胶原变性。并且，尽管示出了对片层一侧的整个表面13的处理，但应理解，取决于预期的用途，可以处理整个表面或表面的焦点区域(例如，特定的斑点、形状或区域)。
变性过程可以以多种方式进行。用于组织基质胶原的受控变性的方法可以包括物理或机械方法(例如，磨损)、热方法、化学方法(例如，酸、碱或其他蛋白质变性剂)、酶促变性、施加光(例如，激光加热或给予能量)或其组合。
在一些情况下，在变性之后，产品可以被包装以用于储存直至以后使用。如此，产品包括已经经历部分变性的包装的组织基质，并且其可以被外科医生使用，外科医生可以完成后续施加步骤，包括在植入之前或与植入同时施加转谷氨酰胺酶。
在变性之后，可以将转谷氨酰胺酶组合物16施加至已经被处理的组织的部分14(步骤120)，从而形成包含变性的胶原和转谷氨酰胺酶的区域20。
转谷氨酰胺酶组合物可以以多种方式产生。例如，转谷氨酰胺酶可以以溶液提供，或由储存形式(例如，干燥粉末或其他合适的储存形式)形成溶液。溶液可以包含任何合适的缓冲剂诸如磷酸盐缓冲盐水或其他生物相容的缓冲剂物质，它们将维持或支持酶促活性，并且将不损伤酶或组织产品。
此外，可以使用各种转谷氨酰胺酶，包括生物相容的、可以被植入患者中的、并且具有足够的活性以在期望的时间范围内提供期望的催化结果的任何转谷氨酰胺酶。转谷氨酰胺酶是已知的，并且可以包括微生物酶、植物酶、动物酶或重组产生的酶。取决于所使用的具体的酶，可能需要修饰，诸如添加辅因子、控制pH、或控制温度或其他环境条件，以允许适当的酶促活性。微生物转谷氨酰胺酶可以是有效的，因为它们可以不需要金属离子的存在，但可以使用任何合适的转谷氨酰胺酶。
酶组合物可以使用任何合适的机械手段施加至组织产品的表面。例如，组合物可以通过简单的刷涂(例如，使用机械施加器16)、喷涂、浸蘸、滚转或任何其他合适的方法来施加。
在施加转谷氨酰胺酶之后，可以使已经被处理以包括部分变性和转谷氨酰胺酶施加的含胶原的组织基质与一个或更多个另外的含胶原的组织产品10’或组织接触(步骤130)。例如，如图1所示，可以使包括经处理的部分20的组织产品10与另一个组织产品的表面22接触，从而使转谷氨酰胺酶与另一个组织产品10’或组织接触。
尽管图1中示出的方法包括对某些组织表面进行变性和转谷氨酰胺酶施加，但可以进行等效的变化。例如，在一些情况下，部分变性和/或转谷氨酰胺酶施加可以分开或重复进行。例如，在一种情况下，将酶施加至一个表面22，而将部分变性过程施加至另一个表面20。或者表面20、表面22两者都经受部分变性和转谷氨酰胺酶施加；或者表面20、表面22两者都经受部分变性，而将转谷氨酰胺酶直接施加至仅一个表面。
如上文所提及的，组织产品可以包括各种形状、形式和组织。例如，如图1和图2所示，组织产品10可以包括柔性软组织或无细胞组织基质的片层，该片层具有如讨论的被处理的至少一个表面20。在一些情况下，组织产品的多于一个(两个或更多个)片层10可以被连接以形成多层片层。片层可以包含例如无细胞真皮组织基质、无细胞肌肉组织基质或不同类型的组织基质产品的组合(例如，与骨骼肌基质、脂肪基质或其他组织一起层压的无细胞真皮基质或连接至骨骼肌基质、脂肪基质或其他组织的无细胞真皮基质)。
如上文讨论的，变性的胶原可以被形成使得其与组织基质整体地连接。也就是说，部分地变性的胶原包含由与基本上完整的无细胞胶原组织基质相同的组织形成的胶原基质，使得部分地变性的胶原由天然胶原框架形成并且连接至完整的组织基质。因此，例如，如图2所示，组织产品10可以由具有顶表面34和底表面32的无细胞基质的单个片层形成。在一些实施方案中，组织基质30可以被处理以使一个或更多个表面32、34附近的胶原的一部分变性。处理可以包括任何表面，诸如侧表面(未编号)，或任何期望的表面部分(例如，用于不规则地成形的材料或具有不同于平片层的形状的材料)。
如上文所提及的，不将两个或更多个组织产品彼此连接，或者除了将两个或更多个组织产品彼此连接之外，本方法可以用于将组织产品附接至组织，例如，在体内附接至组织。使用本方法用于将组织治疗产品结合至组织可以提供许多可能的优点。例如，在一些情况下，提供组织产品(例如，组织或组织基质的片层)到周围组织的稳固附接，可以帮助防止并发症诸如血清肿，或者如果担心迁移或移动，可以帮助将组织产品稳固在适当位置。
因此，本文提出的装置和方法可以在多种解剖部位使用，包括在乳房内或乳房附近(例如，用于增大、重建或美容程序)、腹壁(用于疝治疗、强化切口(例如，中线、造口周围)等)、其他结缔组织部位(腱、韧带、筋膜)、颅内(用于硬脑膜置换)或其中需要无细胞组织基质或类似产品的任何其他位置。
图3和图4仅通过示例性方式示出了其中可以使用本公开内容的组织产品的位置。例如，图3示出了组织产品10在乳房300中的植入。产品被植入在乳房植入物310或组织扩张器附近。重要地，具有被部分地变性并且用胶原酶处理的胶原的表面20与皮下组织或其他周围组织(在乳房皮肤320下方并且背对着植入物310)接触地放置。如此，产品10将被结合或粘附至周围组织，将产品10稳固在适当位置和/或防止空隙形成。
图4提供了其中组织基质10可以在腹壁150内使用的各种位置的图示，例如，在中线切口形成之后使用或与其他干预一起使用。如示出的，组织基质10可以位于各种位置170、171、172、173、174，这些位置对应于各种筋膜层之间的位置。并且，如先前所提及的，装置可以在一侧或两侧用本文讨论的方法处理。例如，位于两个筋膜层或其他组织层之间诸如图示为171、172、173的位置的产品可以在两侧进行处理，以防止移动或空隙形成。相反地，植入诸如腹膜内位置(项目174)的位置的装置可以仅在面向腹膜或腹壁的一侧进行处理，而在面向腹部脏器的一侧不进行处理。类似的概念将被考虑用于其他腹部位置或身体内的其他位置。
实施例1
如上文讨论的，存在可用于使组织基质的表面附近的胶原部分地变性的各种方式。作为实例，无细胞猪真皮的表面在暴露于Legend XL 120CO2激光后部分地变性，其使用在60W的5000Hz的频率，以及7.5cm/s的速度。然后产生的组织500被处理以使用Masson三色进行组织学染色，以评估与未处理的无细胞猪真皮(图5A)相比的胶原变性的程度(图5B)。如示出的，激光处理允许在距基质的表面的有限距离处的胶原的部分变性，从而允许形成与下面的基质紧密接触和连接的变性的表面510。
通过考虑本说明书和本文公开的本发明的实践，本发明的其他实施方案对本领域技术人员来说将是明显的。意图是说明书和实施例仅被认为是示例性的，本发明的真实范围和精神由所附权利要求指示。

Claims (35)

1.一种生产组织产品的方法，所述方法包括：
选择包含含胶原的组织基质的第一材料；
处理所述第一材料的一部分，以使所述部分的表面附近的胶原部分地变性；
使已经被处理以使胶原部分地变性的所述部分与包含转谷氨酰胺酶的组合物接触；以及
将已经与所述包含转谷氨酰胺酶的组合物接触的所述部分与包含含胶原的组织基质的第二材料物理接触地放置。
2.如权利要求1所述的方法，所述方法还包括选择包含含胶原的组织基质的至少一种另外的材料；
处理所述至少一种另外的材料的一部分，以使所述至少一种另外的材料的所述部分的表面附近的胶原部分地变性；
使所述至少一种另外的材料的已经被处理以使胶原部分地变性的所述部分与包含转谷氨酰胺酶的组合物接触；以及
将所述至少一种另外的材料的已经与所述包含转谷氨酰胺酶的组合物接触的所述部分与所述第一材料或所述第二材料物理接触地放置。
3.如权利要求1和2中任一项所述的方法，其中所述包含转谷氨酰胺酶的组合物包括水性溶液。
4.如权利要求1-3中任一项所述的方法，其中包含含胶原的组织基质的所述材料是颗粒状的。
5.如权利要求1-3中任一项所述的方法，其中包含含胶原的组织基质的所述材料呈片层的形式。
6.如权利要求1-5中任一项所述的方法，其中包含含胶原的组织基质的所述材料是无细胞组织基质。
7.如权利要求6所述的方法，其中所述含胶原的组织基质由源自选自以下的组织的组织产生：皮肤、筋膜、脂肪、心包组织、硬脑膜、脐带组织、胎盘组织、心瓣膜组织、韧带组织、腱组织、动脉组织、静脉组织、神经结缔组织、膀胱组织、输尿管组织、肌肉和肠组织。
8.如权利要求6所述的方法，其中所述含胶原的组织基质由源自肌肉的组织产生。
9.如权利要求6所述的方法，其中所述含胶原的组织基质包括肌肉组织基质。
10.如权利要求1所述的方法，其中所述第一材料和所述第二材料各自包含无细胞组织基质的片层，并且所述第一材料和所述第二材料彼此接触以产生多层片层。
11.如权利要求10所述的方法，其中所述多层片层包含无细胞肌肉基质。
12.一种组织产品，所述组织产品根据权利要求1-11中任一项所述的方法生产。
13.一种治疗方法，所述方法包括：
选择包含含胶原的组织基质的材料；
处理所述材料的一部分，以使所述部分的表面附近的胶原部分地变性；
使已经被处理以使胶原部分地变性的所述部分与包含转谷氨酰胺酶的组合物接触；以及
将已经与所述包含转谷氨酰胺酶的组合物接触的所述部分与组织部位物理接触地放置。
14.如权利要求13所述的方法，其中所述包含转谷氨酰胺酶的组合物包括水性溶液。
15.如权利要求13或14中任一项所述的方法，其中包含含胶原的组织基质的所述材料呈片层的形式。
16.如权利要求13-15中任一项所述的方法，其中包含含胶原的组织基质的所述材料包含无细胞组织基质。
17.如权利要求16所述的方法，其中所述含胶原的组织基质由源自选自以下的组织的组织产生：皮肤、筋膜、脂肪、心包组织、硬脑膜、脐带组织、胎盘组织、心瓣膜组织、韧带组织、腱组织、动脉组织、静脉组织、神经结缔组织、膀胱组织、输尿管组织和肠组织。
18.如权利要求16所述的方法，其中所述含胶原的组织基质由源自肌肉的组织产生。
19.如权利要求16所述的方法，其中所述含胶原的组织基质包括肌肉组织基质。
20.一种治疗方法，所述方法包括：
选择包含含胶原的组织基质的材料，其中靠近所述材料的表面的所述材料的部分包含部分地变性的胶原；
使包含部分地变性的胶原的所述部分与包含转谷氨酰胺酶的组合物接触；以及
将已经与所述包含转谷氨酰胺酶的组合物接触的所述部分与组织部位物理接触地放置。
21.如权利要求20所述的方法，其中所述包含转谷氨酰胺酶的组合物包括水性溶液。
22.如权利要求20或21中任一项所述的方法，其中包含含胶原的组织基质的所述材料呈片层的形式。
23.如权利要求20-22中任一项所述的方法，其中包含含胶原的组织基质的所述材料包含无细胞组织基质。
24.如权利要求23所述的方法，其中所述含胶原的组织基质由源自选自以下的组织的组织产生：皮肤、筋膜、脂肪、心包组织、硬脑膜、脐带组织、胎盘组织、心瓣膜组织、韧带组织、腱组织、动脉组织、静脉组织、神经结缔组织、膀胱组织、输尿管组织和肠组织。
25.如权利要求23所述的方法，其中所述含胶原的组织基质由源自肌肉的组织产生。
26.如权利要求23所述的方法，其中所述含胶原的组织基质包括肌肉组织基质。
27.如权利要求20-26中任一项所述的方法，其中使包含部分地变性的胶原的所述部分与包含转谷氨酰胺酶的组合物接触，以及将已经与所述包含转谷氨酰胺酶的组合物接触的所述部分与组织部位物理接触地放置的步骤通过以下进行：使所述组织部位与所述转谷氨酰胺酶接触并且将包含部分地变性的胶原的所述材料的表面与所述组织部位接触地放置。
28.一种组织治疗产品，所述组织治疗产品包含：
无细胞组织基质，所述无细胞组织基质具有基本上完整的无细胞胶原组织基质；以及表面区域，所述表面区域包含部分地变性的胶原，其中所述部分地变性的胶原包含由与所述基本上完整的无细胞胶原组织基质相同的组织形成的胶原基质，使得所述部分地变性的胶原由完整的组织基质的天然胶原框架形成并且连接至所述完整的组织基质。
29.如权利要求28所述的产品，其中包含含胶原的组织基质的材料是颗粒状的。
30.如权利要求28或29中任一项所述的产品，其中包含含胶原的组织基质的材料呈片层的形式。
31.如权利要求28-30中任一项所述的产品，其中含胶原的组织基质由源自选自以下的组织的组织产生：皮肤、筋膜、脂肪、心包组织、硬脑膜、脐带组织、胎盘组织、心瓣膜组织、韧带组织、腱组织、动脉组织、静脉组织、神经结缔组织、膀胱组织、输尿管组织和肠组织。
32.如权利要求28-30中任一项所述的产品，其中含胶原的组织基质由源自肌肉的组织产生。
33.如权利要求28-30中任一项所述的产品，其中含胶原的组织基质包括肌肉组织基质。
34.一种组织治疗产品，所述组织治疗产品包含：
包含含胶原的无细胞组织基质的第一材料；以及
包含含胶原的无细胞组织基质的至少一种第二材料；
其中所述第一材料和所述第二材料通过谷氨酰胺残基的γ-羧基酰胺基团与一级氨基酸之间形成的键彼此连接。
35.一种生产组织产品的方法，所述方法包括：
选择包含含胶原的组织基质的第一材料；以及
处理所述第一材料的一部分以使所述第一材料的所述部分的表面附近的胶原部分地变性，从而形成与所述含胶原的组织基质连接的部分地变性的胶原的部分。
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