CN110361543A - NTx检测试纸、NTx检测试剂盒和检测方法 - Google Patents
NTx检测试纸、NTx检测试剂盒和检测方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN110361543A CN110361543A CN201910689046.1A CN201910689046A CN110361543A CN 110361543 A CN110361543 A CN 110361543A CN 201910689046 A CN201910689046 A CN 201910689046A CN 110361543 A CN110361543 A CN 110361543A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- ntx
- detection
- test paper
- coated
- line
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 238000001514 detection method Methods 0.000 title claims abstract description 70
- 238000012360 testing method Methods 0.000 title claims abstract description 57
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims abstract description 25
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims abstract description 25
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims abstract description 25
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 14
- 229910001868 water Inorganic materials 0.000 claims abstract description 13
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 claims abstract description 10
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 claims abstract description 8
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 claims description 27
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 16
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims description 10
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 10
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 10
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 9
- 239000013047 polymeric layer Substances 0.000 claims description 7
- 239000002096 quantum dot Substances 0.000 claims description 7
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 claims description 4
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 claims description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 4
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 4
- 229910052761 rare earth metal Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 150000002910 rare earth metals Chemical class 0.000 claims description 4
- UHYPYGJEEGLRJD-UHFFFAOYSA-N cadmium(2+);selenium(2-) Chemical group [Se-2].[Cd+2] UHYPYGJEEGLRJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 claims description 3
- 238000000576 coating method Methods 0.000 claims description 3
- 239000010410 layer Substances 0.000 claims description 3
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 claims description 2
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 claims 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 abstract description 11
- 238000005259 measurement Methods 0.000 abstract description 8
- 238000004904 shortening Methods 0.000 abstract description 2
- 239000000123 paper Substances 0.000 description 37
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 12
- 208000001132 Osteoporosis Diseases 0.000 description 11
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 11
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 10
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 10
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 8
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 7
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 6
- 239000003365 glass fiber Substances 0.000 description 6
- 230000008569 process Effects 0.000 description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 5
- 208000006386 Bone Resorption Diseases 0.000 description 4
- BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N Borate Chemical compound [O-]B([O-])[O-] BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- PPBRXRYQALVLMV-UHFFFAOYSA-N Styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1 PPBRXRYQALVLMV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000024279 bone resorption Effects 0.000 description 4
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 4
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 4
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 4
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 4
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 4
- 239000000020 Nitrocellulose Substances 0.000 description 3
- 239000004372 Polyvinyl alcohol Substances 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 3
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 3
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 3
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 3
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 3
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 3
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 3
- 229920001220 nitrocellulos Polymers 0.000 description 3
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 description 3
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 3
- LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide Chemical compound CCN=C=NCCCN(C)C LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000012422 Collagen Type I Human genes 0.000 description 2
- 108010022452 Collagen Type I Proteins 0.000 description 2
- 239000007987 MES buffer Substances 0.000 description 2
- NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N N-Hydroxysuccinimide Chemical compound ON1C(=O)CCC1=O NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 2
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- -1 amino, hydroxyl Chemical group 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 2
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 2
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 2
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 2
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 2
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 2
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 2
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 2
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 description 2
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 2
- RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N Acetaminophen Chemical compound CC(=O)NC1=CC=C(O)C=C1 RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KHBLRHKVXICFMY-GUBZILKMSA-N Asp-Glu-Lys Chemical compound N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O KHBLRHKVXICFMY-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- 206010065687 Bone loss Diseases 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 101800001415 Bri23 peptide Proteins 0.000 description 1
- 102400000107 C-terminal peptide Human genes 0.000 description 1
- 101800000655 C-terminal peptide Proteins 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 101000609762 Gallus gallus Ovalbumin Proteins 0.000 description 1
- YPMDZWPZFOZYFG-GUBZILKMSA-N Gln-Leu-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YPMDZWPZFOZYFG-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HAXARWKYFIIHKD-ZKWXMUAHSA-N Gly-Ile-Ser Chemical compound NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O HAXARWKYFIIHKD-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 1
- 102000004889 Interleukin-6 Human genes 0.000 description 1
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 1
- 241000880493 Leptailurus serval Species 0.000 description 1
- 102400000108 N-terminal peptide Human genes 0.000 description 1
- 101800000597 N-terminal peptide Proteins 0.000 description 1
- 229910004844 Na2B4O7.10H2O Inorganic materials 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- PURRNJBBXDDWLX-ZDLURKLDSA-N Ser-Thr-Gly Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)NCC(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)N)O PURRNJBBXDDWLX-ZDLURKLDSA-N 0.000 description 1
- NMKJPMCEKQHRPD-IRXDYDNUSA-N Tyr-Gly-Tyr Chemical compound C([C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 NMKJPMCEKQHRPD-IRXDYDNUSA-N 0.000 description 1
- 230000003044 adaptive effect Effects 0.000 description 1
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 1
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 1
- 239000005030 aluminium foil Substances 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 238000009739 binding Methods 0.000 description 1
- 239000007844 bleaching agent Substances 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 230000037182 bone density Effects 0.000 description 1
- 230000008416 bone turnover Effects 0.000 description 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 1
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000011111 cardboard Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000012412 chemical coupling Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000005253 cladding Methods 0.000 description 1
- 230000011382 collagen catabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 1
- 208000029078 coronary artery disease Diseases 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000007850 degeneration Effects 0.000 description 1
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 1
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000006392 deoxygenation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000002274 desiccant Substances 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 208000016097 disease of metabolism Diseases 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 108060003552 hemocyanin Proteins 0.000 description 1
- 238000007654 immersion Methods 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 229940127121 immunoconjugate Drugs 0.000 description 1
- 230000036046 immunoreaction Effects 0.000 description 1
- 229940100601 interleukin-6 Drugs 0.000 description 1
- 208000030159 metabolic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004745 nonwoven fabric Substances 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 210000002997 osteoclast Anatomy 0.000 description 1
- 239000011087 paperboard Substances 0.000 description 1
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 1
- 229920006267 polyester film Polymers 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- USHAGKDGDHPEEY-UHFFFAOYSA-L potassium persulfate Chemical compound [K+].[K+].[O-]S(=O)(=O)OOS([O-])(=O)=O USHAGKDGDHPEEY-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000019394 potassium persulphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000003223 protective agent Substances 0.000 description 1
- 239000005297 pyrex Substances 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 238000002798 spectrophotometry method Methods 0.000 description 1
- 238000005507 spraying Methods 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 230000002123 temporal effect Effects 0.000 description 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/531—Production of immunochemical test materials
- G01N33/532—Production of labelled immunochemicals
- G01N33/533—Production of labelled immunochemicals with fluorescent label
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
- G01N33/54306—Solid-phase reaction mechanisms
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
- G01N33/54313—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals the carrier being characterised by its particulate form
- G01N33/54346—Nanoparticles
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
- G01N33/6893—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids related to diseases not provided for elsewhere
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
- G01N2800/10—Musculoskeletal or connective tissue disorders
- G01N2800/108—Osteoporosis
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Nanotechnology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
- Investigating, Analyzing Materials By Fluorescence Or Luminescence (AREA)
Abstract
本发明公开了一种具有较好灵敏度的NTx检测试纸、NTx检测试剂盒和检测方法。该NTx检测试纸包括依次连接的标记垫、包被膜和吸水垫，标记垫上包被有NTx荧光标记抗体，包被膜在沿层析方向上依次设有检测线和质控线，检测线上包被有NTx偶联抗原，质控线上包被有抗抗体，抗抗体特异性结合NTx荧光标记抗体，检测线和质控线相互分离。本发明所提供的NTx检测试纸利用竞争侧向层析检测的原理，基于测定检测线和质控线上的荧光强度结合标准浓度曲线来测定样品中所含抗原的浓度。本发明所提供的检测试纸能够明显的提高检测的特异性，缩短检测所需时间。通过荧光标记抗体，能够明显的提高检测灵敏度。
Description
技术领域
本发明涉及免疫检测技术领域，尤其是涉及一种NTx检测试纸、NTx检测试剂盒和检测方法。
背景技术
骨质疏松症(osteoporosis)是骨形成与骨吸收发生失衡，导致钙质由骨骼往血液净移动，其症状为骨质流失和骨组织破坏，骨质脆弱，容易骨折。随着人口寿命的增长和老龄人口的增多，原发性骨质疏松代谢性疾病已成为影响健康的严重疾病之一。在我国，目前有9700万骨质疏松患者，女性占三分之二。骨质疏松症现位居中老年人五大疾病患病率之首，已成为我国乃至世界广泛关注的社会问题，骨质疏松已与冠心病癌症一样危害着人们的健康，对其之诊治有极为迫切的重要性。
退行性骨质疏松症诊断需依靠临床表现、骨密度检测、X光片及骨转换生化指标等综合分析判断。双能X射线骨密度检测是诊断骨质疏松症的金标准，如果测得的骨矿物质密度低于年青人的标准值2.5个标准方差值，即可诊断为骨质疏松症。但是，基于骨密度的检测的敏感度差，往往需要到半年甚至一年以上才能有动态变化。因此，对骨转化生化指标，特别是骨转换过程中的标志物进行检测已经成为诊断骨质疏松症的重要手段。研究发现，骨质疏松患者的骨质吸收增多表现突出，所以骨吸收标志物的表达变化研究意义较高，而骨吸收标志物中I型胶原交联N-末端肽(NTx)、Ⅰ型胶原交联C-末端肽(CTx)和白介素-6(IL-6)对于骨胶原降解和破骨细胞调节作用明显，对骨吸收具有促进作用，是对骨转换敏感性较好的检测指标。
目前常见的人骨代谢标志物的检测方法是胶体金免疫层析法，胶体金检测相比于ELISA更快，但在灵敏度上有待提高，无法精确测量。因此，有必要提供一种具有较好灵敏度的NTx检测产品。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是如何提供一种具有较好灵敏度的NTx检测试纸、NTx检测试剂盒和检测方法。
根据本发明的第一个方面，本发明提供一种NTx检测试纸，根据本发明的实施例，该NTx检测试纸包括依次连接的标记垫、包被膜和吸水垫，标记垫上包被有NTx荧光标记抗体，包被膜在沿层析方向上依次设有检测线和质控线，检测线上包被有NTx偶联抗原，质控线上包被有抗抗体，抗抗体特异性结合NTx荧光标记抗体，检测线和质控线相互分离。
本发明的有益效果是：
本发明所提供的NTx检测试纸利用竞争侧向层析检测的原理，标记垫上包被的NTx荧光标记抗体能特异性结合包被膜上检测线位置包被的NTx偶联抗原，利用膜层析在包被膜上形成NTx偶联抗原-NTx荧光标记抗体复合物，多余的NTx荧光标记抗体则在质控线与抗抗体形成抗抗体-NTx荧光标记抗体复合物。当样品中存在NTx抗原时，样品抗原与NTx荧光标记抗体结合，层析到检测线时NTx偶联抗原无法捕获与样品抗原相结合的NTx荧光标记抗体。层析到质控线上与抗抗体结合的NTx荧光标记抗体的量也发生改变。基于测定检测线和质控线上的荧光强度结合标准浓度曲线来测定样品中所含抗原的浓度。本发明所提供的检测试纸能够明显的提高检测的特异性，缩短检测所需时间。通过荧光标记抗体，能够明显的提高检测灵敏度。
根据本发明的实施例，NTx荧光标记抗体的荧光标记为荧光微球，形成NTx荧光微球标记抗体，NTx抗体与荧光微球通过肽键共价结合，从而提高标记物的稳定性，避免了抗体空间位阻的影响，有利于提高灵敏度和特异性。
根据本发明的实施例，荧光微球直径在纳米级范围内，具体粒径范围为10nm～600nm，较佳地为40nm～300nm。其上负载有荧光物质，是受外界能量刺激能激发出荧光的固体微粒。
根据本发明的实施例，荧光微球包括荧光物质和包覆荧光物质的聚合物层。荧光物质可以是量子点或稀土络合物，相应地形成量子点荧光微球或稀土络合物荧光微球。这两种荧光物质在紫外光源激发下发射的荧光寿命长，不易漂白，其强度能够有效应用于定量检测。量子点优选是CdSe/CdS，稀土络合物优选是Eu(TTA)3Phen。
根据本发明的实施例，聚合物层为经活化的聚合物层。
根据本发明的实施例，对聚合物层进行活性官能基团的修饰，使NTx抗体能够以共价偶联的方式定向连接到荧光微球表面。活性官能基团可以是羧基、氨基、羟基、巯基。
根据本发明的实施例，聚合物层是苯乙烯-羧基聚乙烯醇共聚物层。单一的苯乙烯聚合物合成条件难以控制、荧光效率低、粒径不均一，而苯乙烯-羧基聚乙烯醇共聚物制得的荧光微球则具有较高的荧光效率和更为均一的粒径。
根据本发明的实施例，NTx偶联抗原为NTx多肽与载体蛋白的偶联物，NTx多肽的序列如SEQ ID NO.1所示。
优选的，NTx多肽与载体蛋白的偶联比为(5～50)：1。
其中，载体蛋白是任意能够使NTx获得免疫原性的载体，包括但不仅限于常规的载体蛋白，例如牛血清白蛋白BSA、鸡卵白蛋白OVA、血蓝蛋白KLH等。
根据本发明的实施例，标记垫、包被膜和吸水垫固定在同一固相基质的底板上。固相基质的底板主要起承载作用，方便检测过程中进行操作。固相基质的类型不作特别限定，可以为不会与待测样品发生反应或者不影响抗原抗体结合的惰性材料，比如纸板、塑料板等。
根据本发明的实施例，标记垫为玻璃纤维素膜，包被膜为硝酸纤维素膜(NC膜)。玻璃纤维素膜呈化学惰性，不含粘合剂，采用100％硼硅酸玻璃纤维制造而成，利于其上包被的NTx荧光标记抗体与待测样品中的目标抗原发生特异性结合。NC膜本身是已经添加了表面活性剂来改善亲水能力，而且已经存在有一定的缓冲系统，具有毛细纤维结构，能吸附比同等纤维素滤纸更多的水分，流速快、耐高温，利于其上包被的NTx偶联抗原与前述的NTx荧光标记抗体发生特异性结合反应，激发荧光。
根据本发明的实施例，NTx抗体可以特异性结合NTx抗原。NTx抗体可以是NTx多克隆抗体和单克隆抗体中的任一种。本发明的这一检测试纸是基于对荧光标记、抗原和抗体特性的研究，通过选择适合的荧光标记与特异性的抗体进行定向共价化学偶联，获得荧光标记抗体分析，并通过优化竞争法免疫反应的各种条件，制备得到上述检测NTx的检测试纸。
根据本发明的实施例，抗抗体为羊抗鼠IgG抗体。其能够与NTx抗体特异性结合，即与多余的带荧光标记NTx抗体结合形成免疫复合物，激发荧光，得以能够定性和/或定量检测该免疫复合物。
根据本发明的实施例，该NTx检测试纸具体可以采用以下制备方法进行制备：
S1：NTx荧光微球标记抗体的制备
采用适合的羧基修饰的荧光微球，活化其表面的羧基后，采用共价偶联的方式分别将NTx标记抗体定向连接到该羧基修饰的荧光微球表面。
S2：测试区T线和C线处抗原抗体的包被
采用喷膜仪器，在包被膜的检测线处喷涂NTx偶联抗原，在质控线处喷涂羊抗鼠IgG抗体。
S3：NTx荧光微球标记抗体的包被
采用喷涂仪器，在标记垫处喷涂NTx荧光微球标记抗体，该特定位置作为后续的“加样端”。
S4：检测试纸的组装成型
在塑料支撑背板中间粘贴作为测试区的包被膜，在包被膜靠近检测线的一端粘贴标记垫，靠近质控线的一端粘贴吸水垫。采用试纸分切机，将其分切为一定宽带的纸条，比如4mm宽，并装入夹片，用装有干燥剂的铝箔袋进行包装。
根据本发明的第二个方面，本发明还提供一种NTx检测试剂盒，根据本发明的实施例，该NTx检测试剂盒包括上述的NTx检测试纸。
根据本发明的第三个方面，本发明还提供一种非诊断目的检测NTx的方法，根据本发明的实施例，该非诊断目的检测NTx的方法包括以下步骤：
将待测样本加到上述NTx检测试纸或上述检测试剂盒中的标记垫；
测定检测线和质控线区域的荧光强度，确定待测样本中的NTx浓度。
根据本发明的实施例，该检测方法包括以下步骤：
将待测样本加到上述任一试纸/试剂盒中的标记垫区域；
检测包被膜上检测线区和质控线区的荧光强度，获得检测线区和质控线区的荧光强度的具体数值后，基于荧光强度比值(检测线荧光强度/质控线荧光强度)与浓度标准曲线公式，定量测定待测样本中的NTx浓度。
检测线区和质控线区的荧光强度，是指在检测线处和质控线处分别滞留下的结合荧光微球用荧光检测仪测定后所得到的数值。通过竞争免疫反应的条件，经大量测定不同标准浓度样本绘制标准浓度曲线，并得到标准浓度曲线方程，以此标准浓度曲线方程来计算检测样本的浓度。质控线测定结果则作为该测定方法的质控内标。
利用本发明的这一检测方法和本发明的上述试纸，能够实现对NTx的快速和定量测定，该方法具有灵敏度高、特异性强、快速、简便，可实现客观化测定的优点。
附图说明
图1是本发明的一个实施例的NTx检测试纸的结构示意图。
图2是本发明的一个实施例的NTx检测试纸的检测值与浓度标准曲线图。
具体实施方式
以下将结合实施例对本发明的构思、具体结构及产生的技术效果进行清楚、完整地描述，以充分地理解本发明的目的、特征和效果。显然，所描述的实施例只是本发明的一部分实施例，而不是全部实施例，基于本发明的实施例，本领域的技术人员在不付出创造性劳动的前提下所获得的其他实施例，均属于本发明保护的范围。另外，本发明中的术语“包被”为免疫学术语，包含固定和/或吸附之意。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从常规市售途径得到。
实施例1
图1是本发明的一个实施例的NTx检测试纸的结构示意图。如图1所示，该NTx检测试纸包括背板(图1中未示出)以及形成在背板上依次连接的标记垫1、包被膜2和吸水垫3，包被膜2上沿层析方向依次设有检测线21和质控线22。标记垫1为玻璃纤维素膜，其上包被有NTx荧光标记抗体。包被膜2为硝酸纤维素膜，检测线21上包被有NTx偶联抗原，质控线22上包被有羊抗鼠IgG抗体。
该NTx检测试纸的制备方法，具体包括以下步骤：
(一)NTx荧光微球标记标记抗体的制备
将苯乙烯用10％氢氧化钠溶液清洗去除保护剂后，加入0.1％CdSe/CdS量子点(制备方法参考Hanifi et al.,Science 363,1199–1202(2019))，超声混匀，得到a液。将1％羧基化聚乙烯醇和0.05％碳酸氢钠溶于水，得到b液。将a液加入b液超声15min后，通氮气30min搅拌除氧，然后加热到80℃。加入0.1％过硫酸钾反应24h，得到聚合物荧光微球，经过滤、离心和去离子水清洗，得到纯化的羧基修饰的荧光微球。
取10mg的上述羧基修饰的荧光微球用MES缓冲液(0.1M、pH4.7)洗涤并离心后，用1mL MES缓冲液(0.1M、pH4.7)重悬，加入1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺(EDC)至终浓度为5mM、加入NHS(N-羟基丁二酰亚胺)至终浓度为10mM，室温避光，反应半小时得到活化后羧基修饰的荧光微球。
用50mM pH8.5的硼砂缓冲液洗涤该活化后羧基修饰的荧光微球，分别取0.2mg待标记NTx抗体与上述活化后羧基修饰的荧光微球混合到50mM pH8.5的硼砂缓冲液中充分混匀。室温避光下反应2h，让抗体和荧光微球形成稳定的肽键共价结合得到荧光微球与抗体的偶联物。反应结束后，加入终浓度为1％(质量百分含量)的BSA溶液对荧光微球与抗体/抗原的偶联物上剩余活性羧基位点进行封闭，室温避光反应0.5h。完成后，用pH7.4的0.02MPBS缓冲液洗涤、重悬得到NTx荧光微球标记抗体，4℃保存待用。
(二)NTx检测试纸的制备
NTx多肽偶联载体蛋白的制备
NTx多肽和载体蛋白BSA按摩尔比20：1(多肽40μM，BSA 2μM)溶解于0.02M PBS，快速搅拌下加入20μM浓度10％的戊二醛，反应2小时后于0.02mol/L，pH为7.4的PBS溶液中4℃透析48h，用nanodrop分光光度计测定蛋白浓度，并将蛋白浓度配制为5mg/mL后分装冻存得到NTx偶联抗原。
以NTx偶联抗原与羊抗鼠IgG抗体制备包被膜，具体方法如下：
采用pH7.4的0.02M PBS缓冲液，将羊抗鼠IgG抗体配制为浓度0.8mg/mL溶液，将NTx偶联抗原的浓度配制为浓度1mg/mL溶液，选用BioDot的XYZ3050喷膜系统将羊抗鼠IgG抗体喷至包被膜的质控线(C线)位置，将NTx偶联抗原喷至检测线(T线)位置，于相对湿度为10％以下的干燥车间进行抽湿4小时后干燥待用，得到具有检测线和质控线的包被膜。
用膜处理缓冲液浸泡玻璃纤维素膜半小时，浸泡的温度为37℃，于同样的抽湿条件进行抽湿4小时后，用膜处理缓冲液稀释步骤(一)所得NTx荧光微球标记抗体的得到含量为1μg/mL混合液后，采用BioDot的XYZ3050喷膜系统将其喷涂至上述处理过的玻璃纤维素膜上制备形成标记垫，于同样的抽湿条件进行干燥。在10万级洁净和干燥的车间中把干燥好的具有检测线和质控线的包被膜、标记垫、吸水垫、背板按图1所示进行搭配组装后，采用BioDot的CM4000裁切系统将贴好的纸板裁切为4mm/条的宽度，装入检测用夹片待用。
其中：
待标记NTx抗体是购自深圳圳康科技有限公司的编号为NT-01的抗NTx的单克隆抗体。
羊抗鼠IgG抗体购自洛阳佰奥通实验材料中心，编号为C020201。
NTx多肽的氨基酸序列为QLSYGYDEKSTGGISVP(SEQ ID No.1)，由上海强耀公司合成。
玻璃纤维膜购自Millipore公司、商品目录号为GF-DX20300。
制作吸水垫的吸水纸购自Millipore公司、商品目录号为CF-SP22300。
硝酸纤维素膜购自Millipore公司、商品目录号为Hi-Flow Plus HF135。
PBS缓冲液按照如下方法配制：称取2.3g Na2HPO4、0.524gNaH2PO4.H2O、8.77gNaCl溶于纯水，用纯水定容至1L，调pH至7.4，得到pH为7.4的0.02M PBS缓冲液。
膜处理缓冲液按照如下方法配制：将Tween-20、BSA、蔗糖溶于上述pH为7.4的0.02M PBS缓冲液使Tween-20的质量百分含量为0.2％、BSA的质量百分含量为1％、蔗糖的质量百分含量为2％，调pH至7.4，得到膜处理缓冲液。
硼砂缓冲液按照如下方法配制：称取1.9g Na2B4O7.10H2O溶于100mL纯水，调pH至8.5得到50mM pH为8.5的硼砂缓冲液。
实施例2
试纸性能检测
(一)灵敏度检测
以NTx抗原作为待测样品来测定实施例1的NTx检测试纸的灵敏度。
将NTx抗原用含1％BSA的pH为7.4的0.02M PBS缓冲液配制成系列浓度(0、1、5、10、50、100、500、1000ng/mL)，分别加入由实施例1得到的NTx检测试纸的加样端中，并采用荧光检测仪检测。检测步骤：检测前先将待检测样品恢复室温(25℃)，用精确移液器取待检测样品60μL垂直缓慢滴入加样端中，10min后用荧光检测仪进行测试。
其检测结果如下表1所示。从检测结果中可以得出上述NTx检测试纸的灵敏度为5ng/mL。根据检测值比值与浓度所作校准曲线，相关系数R2＝0.9916，检测范围为5～1000ng/mL。
图2是本发明的一个实施例的NTx检测试纸的检测值与浓度标准曲线图。如图2所示，横轴表示NTx浓度，纵轴表示荧光强度的比值(T/C)。
表1.NTx不同样品浓度的检测试纸检测值
| 浓度(ng/mL) | 0 | 1 | 5 | 10 | 50 | 100 | 500 | 1000 |
| T/C检测值 | 1.1677 | 1.1290 | 0.9882 | 0.8333 | 0.6437 | 0.4481 | 0.1433 | 0.0452 |
(二)精密性检测
分别选取3份不同浓度的NTx抗原样本，按照本发明所述的方法重复测量10次，根据10次的结果计算批内平均偏差CV％值。按照本发明所述的方法制备的3批NTx检测试纸，分别选取3份不同浓度的样本，分别重复测量10次，根据结果计算批间平均偏差CV％值。其检测结果如下表2所示。
表2.NTx检测试纸批内批间差测定
实施例3
一种NTx检测试纸，与实施例1的区别在于，NTx荧光标记抗体为Eu(TTA)3Phen荧光微球标记的NTx抗体。
实施例4
一种NTx检测试纸，与实施例1的区别在于，在标记垫和包被膜之间还设有调速垫，调速垫可以是由无纺布、玻璃纤维或聚酯膜制成。调速垫的设置能够使NTx荧光标记抗体在调速垫处暂时聚集，然后继续涌向包被膜，使NTx荧光标记抗体以更加均匀的浓度和速度与检测线和质控线接触。
实施例5
一种NTx检测试剂盒，包括实施例1、3、4任一种NTx检测试纸。
以上是对本发明的较佳实施例进行了具体说明，但本发明并不限于所述实施例，熟悉本领域的技术人员在不违背本发明精神的前提下还可做出种种的等同变形或替换，这些等同的变形或替换均包含在本申请权利要求所限定的范围内。
SEQUENCE LISTING
<110> 清华大学深圳研究生院
<120> NTx检测试纸、NTx检测试剂盒和检测方法
<160> 1
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<400> 1
Gln Leu Ser Tyr Gly Tyr Asp Glu Lys Ser Thr Gly Gly Ile Ser Val
1 5 10 15
Pro
Claims (10)
1.一种NTx检测试纸，其特征在于，包括依次连接的标记垫、包被膜和吸水垫，所述标记垫上包被有NTx荧光标记抗体，所述包被膜在沿层析方向上依次设有检测线和质控线，所述检测线上包被有NTx偶联抗原，所述质控线上包被有抗抗体，所述抗抗体特异性结合所述NTx荧光标记抗体，所述检测线和所述质控线相互分离。
2.根据权利要求1所述的NTx检测试纸，其特征在于，所述NTx荧光标记抗体为NTx荧光微球标记抗体。
3.根据权利要求2所述的NTx检测试纸，其特征在于，所述NTx荧光微球标记抗体的荧光微球的粒径为10nm～600nm。
4.根据权利要求2所述的NTx检测试纸，其特征在于，所述NTx荧光微球标记抗体的荧光微球包括荧光物质和包覆所述荧光物质的聚合物层，所述荧光物质为量子点、稀土络合物中的任一种。
5.根据权利要求4所述的NTx检测试纸，其特征在于，所述量子点为CdSe/CdS量子点。
6.根据权利要求4所述的NTx检测试纸，其特征在于，所述聚合物层为苯乙烯-羧基聚乙烯醇共聚物层。
7.根据权利要求1所述的NTx检测试纸，其特征在于，所述NTx偶联抗原为NTx多肽与载体蛋白的偶联物，所述NTx多肽的序列如SEQ ID No.1所示。
8.根据权利要求7所述的NTx检测试纸，其特征在于，所述NTx多肽与所述载体蛋白的偶联比为(5～50)：1。
9.一种NTx检测试剂盒，其特征在于，包括权利要求1～8任一项所述的NTx检测试纸。
10.一种非诊断目的检测NTx的方法，其特征在于，包括以下步骤：
将待测样本加到权利要求1～8任一项所述的NTx检测试纸或权利要求9所述的NTx检测试剂盒中的标记垫；
测定检测线和质控线区域的荧光强度，确定所述待测样本中的NTx浓度。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201910689046.1A CN110361543A (zh) | 2019-07-29 | 2019-07-29 | NTx检测试纸、NTx检测试剂盒和检测方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201910689046.1A CN110361543A (zh) | 2019-07-29 | 2019-07-29 | NTx检测试纸、NTx检测试剂盒和检测方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN110361543A true CN110361543A (zh) | 2019-10-22 |
Family
ID=68221974
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201910689046.1A Pending CN110361543A (zh) | 2019-07-29 | 2019-07-29 | NTx检测试纸、NTx检测试剂盒和检测方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN110361543A (zh) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN111323605A (zh) * | 2020-02-27 | 2020-06-23 | 四川新健康成生物股份有限公司 | 一种提高层析线性范围的方法及β-HCG荧光层析检测试纸条 |
Citations (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6472504B1 (en) * | 1997-09-10 | 2002-10-29 | Mcp Hahnemann University | Inhibitors of collagen assembly |
| CN1891720A (zh) * | 2005-07-08 | 2007-01-10 | 中国科学院化学研究所 | 含有无机纳米微粒的聚合物微球及其制备方法和用途 |
| CN104849264A (zh) * | 2015-06-08 | 2015-08-19 | 中国科学院电子学研究所 | 一种化学发光免疫试条及其制备方法 |
| CN106248970A (zh) * | 2016-08-12 | 2016-12-21 | 江苏泽成生物技术有限公司 | 一种测定i型胶原c末端肽含量的试剂盒及其测试方法 |
| CN107688090A (zh) * | 2017-07-17 | 2018-02-13 | 润和生物医药科技(汕头)有限公司 | 一种NTx检测试纸、试剂盒及其制备方法 |
| CN108318691A (zh) * | 2017-04-17 | 2018-07-24 | 清华大学深圳研究生院 | A型流感病毒和b型流感病毒侧向层析检测试剂盒及方法 |
| CN109061159A (zh) * | 2018-05-24 | 2018-12-21 | 深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心 | Pedv免疫检测层析试纸条及其制备方法和应用 |
| CN110028575A (zh) * | 2019-04-18 | 2019-07-19 | 成都中医药大学 | 一种小分子胶原蛋白的制备方法 |
-
2019
- 2019-07-29 CN CN201910689046.1A patent/CN110361543A/zh active Pending
Patent Citations (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6472504B1 (en) * | 1997-09-10 | 2002-10-29 | Mcp Hahnemann University | Inhibitors of collagen assembly |
| US20030087315A1 (en) * | 1997-09-10 | 2003-05-08 | Mcp Hahnemann University | Inhibitors of collagen assembly |
| CN1891720A (zh) * | 2005-07-08 | 2007-01-10 | 中国科学院化学研究所 | 含有无机纳米微粒的聚合物微球及其制备方法和用途 |
| CN104849264A (zh) * | 2015-06-08 | 2015-08-19 | 中国科学院电子学研究所 | 一种化学发光免疫试条及其制备方法 |
| CN106248970A (zh) * | 2016-08-12 | 2016-12-21 | 江苏泽成生物技术有限公司 | 一种测定i型胶原c末端肽含量的试剂盒及其测试方法 |
| CN108318691A (zh) * | 2017-04-17 | 2018-07-24 | 清华大学深圳研究生院 | A型流感病毒和b型流感病毒侧向层析检测试剂盒及方法 |
| CN107688090A (zh) * | 2017-07-17 | 2018-02-13 | 润和生物医药科技(汕头)有限公司 | 一种NTx检测试纸、试剂盒及其制备方法 |
| CN109061159A (zh) * | 2018-05-24 | 2018-12-21 | 深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心 | Pedv免疫检测层析试纸条及其制备方法和应用 |
| CN110028575A (zh) * | 2019-04-18 | 2019-07-19 | 成都中医药大学 | 一种小分子胶原蛋白的制备方法 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 赵丽 等: "食品安全检测新方法", 厦门大学出版社, pages: 38 - 40 * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN111323605A (zh) * | 2020-02-27 | 2020-06-23 | 四川新健康成生物股份有限公司 | 一种提高层析线性范围的方法及β-HCG荧光层析检测试纸条 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Zhang et al. | Robust immunosensing system based on biotin-streptavidin coupling for spatially localized femtogram mL− 1 level detection of interleukin-6 | |
| JP4331895B2 (ja) | 新規キャリブレーターの使用法および本キャリブレーターを含む装置および試験キット | |
| CN107132359B (zh) | 胃蛋白酶原ⅰ和胃蛋白酶原ⅱ检测方法及其试剂盒 | |
| CN103033610B (zh) | 色谱试剂盒及色谱方法 | |
| NO301193B1 (no) | Testmetode og reagenssett for denne | |
| CN111426844A (zh) | 一种新型冠状病毒SARS-CoV-2 IgG-IgM抗体联检的荧光免疫层析试纸条 | |
| JP2002530643A (ja) | 質的及び量的な測定のための屈折計及び方法 | |
| EP0564494B1 (en) | Test method and reagent kit therefor | |
| EP2210103B1 (en) | Method for the immobilization of a capture molecule on a solid support | |
| CN107271669A (zh) | 胃蛋白酶原、抗幽门螺杆菌抗体和胃泌素17检测方法及其试剂盒 | |
| CN108918882A (zh) | 一种基于量子点的超敏c反应蛋白免疫层析试纸条的制备方法 | |
| CN107328938A (zh) | 胃蛋白酶原和抗幽门螺杆菌抗体检测方法及其试剂盒 | |
| CN110133281A (zh) | Crp和saa联合检测试剂盒及其制备方法 | |
| CN105388292A (zh) | 试剂盒及联合检测pct、crp及il-6的方法 | |
| CN105785041A (zh) | 用于定量检测钙卫蛋白的试纸条及其制备方法和钙卫蛋白浓度的测定方法 | |
| JP3484540B2 (ja) | 可溶性サブミクロン粒子上に固定化した抗体による抗原の無作為検出 | |
| CN102087285B (zh) | 急性胰腺炎免疫层析快速检测试纸条及其制备方法 | |
| CN104407134A (zh) | A型流感病毒h1亚型检测方法及其试剂盒 | |
| CN104407133A (zh) | A型流感病毒检测方法及其试剂盒 | |
| CN110361543A (zh) | NTx检测试纸、NTx检测试剂盒和检测方法 | |
| CN108152486A (zh) | 一种人可溶性st2的磁微粒化学发光检测试剂盒及制备方法 | |
| CN112334478A (zh) | 用于快速甲型流感诊断测试的抗体对 | |
| CN202837303U (zh) | Ngal荧光免疫层析定量检测试纸条 | |
| CN102183641A (zh) | 一种莱克多巴胺免疫层析检测试纸条 | |
| CN110361544A (zh) | P1np检测试纸、p1np检测试剂盒和检测方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20191022 |