CN110354282A - 一种负载二氧化锰和阿霉素的纳米水凝胶及其制备和应用 - Google Patents

一种负载二氧化锰和阿霉素的纳米水凝胶及其制备和应用 Download PDF

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Abstract

本发明涉及一种负载二氧化锰和阿霉素的纳米水凝胶及其制备和应用，包括：聚N‑乙烯基己内酰胺纳米水凝胶负载二氧化锰和药物。本发明制备方法简单，产物易于纯化，成本低廉。制备的纳米水凝胶粒径较小，分布均匀，具有良好的水溶性、胶体稳定性和生物相容性。制备的纳米水凝胶可以作为核磁共振成像造影剂，结合超声靶向微泡破坏技术后可以显著抑制肿瘤细胞的增殖，在肿瘤诊疗领域具有潜在的应用价值。

Description

一种负载二氧化锰和阿霉素的纳米水凝胶及其制备和应用
技术领域
本发明属于纳米医学诊疗试剂及其制备和应用领域，特别涉及一种负载二氧化锰和阿霉素的纳米水凝胶及其制备和应用。
背景技术
恶性肿瘤具有生长速度快、转移能力强、复发率高等特点，目前已经成为当前威胁人类健康的主要杀手。通过诊疗一体化手段不仅可以实现恶性肿瘤的早期精准诊断，而且可以实现癌症高效治疗和减少药物毒副作用，目前已经成为现代医学中关注和追求的重要目标。近年来，纳米医学的高速发展为实现癌症的诊疗一体化开辟了一道崭新的大门。
肿瘤的早期诊断手段包括超声成像、X射线计算机断层扫描成像、正电子发射计算机断层扫描以及核磁共振(MR)成像等。其中，MR成像由于其非侵入性、无电离辐射、空间分辨率高等特点，已经成为临床上一种常用的诊断方式。为了增强MR成像效果，临床上常用钆类小分子螯合物作为T1-MR造影剂。但是，由于钆离子的肾毒性较大，代谢时间太短等缺点，其在临床医学上的发展受到了很大的限制。近年来，二氧化锰(MnO2)作为一种新型的T1-MR成像造影剂，由于其良好的生物相容性、肿瘤部位特异性响应和高弛豫性能等特点，将来或可成为钆类造影剂的替代品(ACS Nano,2016.10(1):p.633-647)。当MnO2进入肿瘤部位后，被肿瘤细胞高表达的谷胱甘肽还原成为顺磁性Mn2+，从而影响水质子的弛豫时间达到成像效果。此外，由于MnO2对小分子药物具有高效的吸附能力，MnO2可以作为纳米医学诊疗一体化理想的载体(Adv.Mater.,2014.26(41):p.7019-7026)。
化疗是目前临床中最常用的癌症治疗手段。目前，将纳米载体如胶束、脂质体、纳米水凝胶(NGs)和树状大分子等应用到传统化疗之中，可以有效延长药物血液循环时间，促进肿瘤部位对药物的吸收，增强传统化疗的治疗效果。其中，NGs是由亲水性或两亲性的高分子链通过物理或者化学交联的方式组成的三维网状结构的水凝胶颗粒，其具有良好的胶体稳定性、生物相容性、高负载能力、易进入肿瘤组织等优点，因此可以作为优良的药物载体。聚N-乙烯基己内酰胺(PVCL)NGs是由VCL通过单体聚合形成的聚合物凝胶网络。根据之前的文献报道，以PVCL NGs作为理想载体负载造影剂可用于肿瘤的诊断(ACSAppl.Mater.Interfaces,2017.9(4):p.3411-3418)，但并未涉及肿瘤的治疗。本发明构建的纳米凝胶平台可实现肿瘤的诊疗一体化。
超声靶向微泡破坏技术(Ultrasound Targeted Microbubble Destruction，UTMD)是一种可促进载药纳米体在靶向组织富集的新兴技术。UTMD的作用机制是微泡或微囊在超声交变声压的作用下，产生瞬间空化效应引起细胞膜通透性增加以及产生非致死性可逆开闭的声孔，使递送载体通过声孔进入细胞发挥作用。史向阳课题组之前的文献报道(Theranostics,2018.8(7):p.1923-1939)，借助UTMD技术可促进癌细胞对负载化疗药物吉西他滨和基因药物的树状大分子纳米载体的摄取，从而增强肿瘤化疗效果。
检索国内外文献尚没有发现关于负载MnO2和DOX的PVCLNGs的制备及其应用于肿瘤MR成像和UTMD增强的肿瘤化疗的研究报道。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种负载二氧化锰和阿霉素的纳米水凝胶制备方法及其在肿瘤诊疗中的应用，填补了之前聚N-乙烯基己内酰胺(PVCL)NGs没有负载过二氧化锰的空缺。本发明中通过沉淀聚合的方法制备合成聚N-乙烯基己内酰胺(PVCL)NGs，然后在凝胶表面修饰乙二胺形成PVCL-NH2NGs，将制备的PVCL-NH2NGs作为纳米反应器，原位合成二氧化锰纳米颗粒，得到MnO2@PVCL NGs。最后，通过亲疏水作用和静电作用负载化疗药物DOX得到DOX/MnO2/PVCL NGs。
本发明的一种负载二氧化锰的纳米水凝胶，所述聚N-乙烯基己内酰胺纳米水凝胶PVCL-COOHNGs表面氨基化后作为纳米反应器，原位合成并负载二氧化锰纳米颗粒。
本发明的一种负载二氧化锰的纳米水凝胶的制备方法，包括：
(1)将N-乙烯基己内酰胺VCL、N,N'-双丙烯酰胱胺BAC和十二烷基硫酸钠SDS溶于水中，在N2氛围中水浴搅拌并逐滴加入引发剂、丙烯酸AAC，继续搅拌反应，透析后，得到含羧基的聚N-乙烯基己内酰胺纳米水凝胶PVCL-COOHNGs；
(2)将PVCL-COOHNGs的羧基用1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐EDC和N-羟基琥珀酰亚胺NHS活化，加入乙二胺EDA继续搅拌反应，透析后，得到氨基化的聚N-乙烯基己内酰胺纳米水凝胶PVCL-NH2NGs；
(3)将上述PVCL-NH2 NGs溶于超纯水，逐滴加入KMnO4溶液，继续搅拌12-24h，透析后，得到负载二氧化锰的纳米水凝胶MnO2/PVCL NGs。
所述步骤(1)中引发剂为偶氮二羧乙基-2-异丁基脒水合物ACMA；VCL、BAC、SDS、ACMA和AAC的质量比为450-470:15-30:5-8:10-24:23-28。
所述步骤(1)中水浴搅拌的温度为50-90℃，水浴加热时间为10-50min；搅拌反应的时间为3-4h。
所述步骤(1)中透析时采用截留分子量为20-70kDa透析袋，透析时间2-5天，每天换水2-5次。
所述步骤(2)中PVCL-COOHNGs的羧基、EDC、NHS和EDA的摩尔比为1:5-10:5-10:8-10；
所述活化时间为1-3h，EDA反应时间为2-5天。
所述步骤(2)中透析时采用截留分子量为0.5-2kDa透析袋，透析时间2-5天，每天换水2-5次。
所述步骤(3)中PVCL-NH2NGs和KMnO4的质量比为1:0.1-2；KMnO4的浓度为2-10mg/mL，滴加速度为0.1-5mL/min。
所述步骤(3)中透析是采用截留分子量为0.5-2kDa透析袋，透析2-5天，每天换水2-5次。
本发明提供一种载药纳米水凝胶，其特征在于，将DOX盐酸盐溶于水中，逐滴加到权利要求1所述的负载二氧化锰的纳米水凝胶MnO2/PVCL NGs溶液中，随后将混合液pH调至6-9，搅拌，离心，即得到载药纳米水凝胶DOX/MnO2/PVCL NGs。
所述MnO2/PVCL NGs和DOX盐酸盐的质量比为1:0.25-2；DOX盐酸盐的水溶液的浓度为1.5-2mg/mL；所述搅拌时间为24-48h；离心转速为13000-15000rpm，离心时间为30-40min。
本发明的一种所述载药纳米水凝胶在肿瘤T1-核磁共振(MR)成像剂中的应用。
本发明的一种所述载药纳米水凝胶在超声靶向微泡破坏技术UTMD增强的肿瘤化疗药物中的应用。
所述DOX/MnO2@PVCL NGs应用于肿瘤诊疗一体化研究中，包括：
(1)利用二氧化锰在肿瘤微环境中转化为二价锰离子实现增强的T1 MR成像；
(2)将PVCLNGs和MnO2两种药物载体巧妙地结合从而实现良好的肿瘤化疗效果；
(3)利用UTMD辅助技术，提高材料递送至肿瘤的能力，从而实现增强的肿瘤治疗效果。
本发明通过沉淀聚合的方法制备合成聚N-乙烯基己内酰胺(PVCL)NGs，然后在凝胶表面修饰乙二胺形成PVCL-NH2NGs，将制备的PVCL-NH2NGs作为纳米反应器，原位合成二氧化锰纳米颗粒，得到MnO2@PVCL NGs。最后，通过亲疏水作用和静电作用负载化疗药物DOX得到DOX/MnO2@PVCL NGs。
本发明使用Zeta电势及动态光散射分析(DLS)、场发射扫描电子显微镜(SEM)、透射电子显微镜(TEM)、热重分析(TGA)、X射线光电子能谱分析(XPS)、磁共振(MR)成像分析等手段表征制备的PVCLNGs。然后利用CCK-8法评价纳米凝胶的细胞毒性，利用流式细胞术检测细胞对材料的吞噬情况。最后建立白鼠皮下肿瘤模型进行MR成像以及抗肿瘤实验。具体测试结果如下：
1.Zeta电势及水动力学直径测试结果
取合成的PVCL-COOHNGs、PVCL-NH2NGs、MnO2@PVCL NGs及DOX/MnO2@PVCL NGs(1mg),用超纯水稀释至50μg/mL用于测表面电势和水动力学直径。如表1所示，PVCL-COOHNGs的电势为-8.21mV，PVCL-NH2NGs的电势为9.79mV，电势由负到正的变化证明了PVCL-NH2NGs的成功合成。当MnO2负载到水凝胶上后，电势转变为负值，证明MnO2@PVCLNGs的成功合成。当MnO2@PVCLNGs负载化疗药物DOX后，电势有所上升，水合粒径有所升高，证明了DOX的成功负载。DOX/MnO2@PVCLNGs在各种溶液(水、生理盐水、1640培养基)中的水动力直径几乎不变(如图2)，证明了DOX/MnO2@PVCLNGs具有良好的胶体稳定性。
2.UV-Vis测试：
本发明通过UV-Vis测试对制备出的DOX/MnO2@PVCLNGs进行表征，如图3所示，DOX/MnO2@PVCLNGs在489nm处出现紫外吸收峰证明了DOX的成功负载。
3.TEM测试：
本发明通过TEM测试对制备出的DOX/MnO2@PVCLNGs进行尺寸和形貌的表征，TEM结果(如图4)显示DOX/MnO2@PVCLNGs形态接近球形，尺寸约为106.8nm，可观察到DOX/MnO2@PVCLNGs分散均匀。
4.XPS测试：
本发明通过XPS测试来测试DOX/MnO2@PVCLNGs中锰元素的价态，如图5所示，锰元素在2P1/2轨道的峰值(653.4eV)和在2P3/2轨道的峰值(641.6eV)相差11.8eV，证明锰元素的价态为+4价。
5.材料的T1弛豫性能测试：
通过ICP-OES测试法测定DOX/MnO2@PVCLNGs中Mn元素的含量，分别配制不同Mn元素浓度的DOX/MnO2@PVCLNGs溶液以及DOX/MnO2@PVCLNGs+GSH溶液各2mL(Mn元素浓度分别为0.1625，0.2325，0.465，0.93和0.86mM，GSH浓度为10mM)。通过磁共振成像分析仪测定材料在不同Mn元素浓度下的T1弛豫效应，如图6，通过计算后得出DOX/MnO2@PVCLNGs+GSH和DOX/MnO2@PVCLNGs的r1值分别为8.3313和0.0444mM-1s-1，表明DOX/MnO2@PVCLNGs在高浓度GSH溶液中的弛豫率显著提高，这是由于MnO2在高浓度的GSH溶液中被还原为Mn2+，Mn2+具有比MnO2更高的弛豫率。肿瘤微环境中GSH浓度明显高于正常组织，因此DOX/MnO2@PVCLNGs到达肿瘤组织可以转化为Mn2+从而实现良好的T1成像效果。
6.体外药物释放测试：
分别配置pH＝7.4、pH＝6.5和pH＝6.5(GSH浓度：10mM)的缓冲溶液，将制备的DOX/MnO2@PVCLNGs固体分别用1mL不同的缓冲溶液溶解为1mg/mL的溶液并置于透析袋中，将透析袋置于含有9mL上述不同的pH缓冲溶液的容器中，置于37℃的摇床中振荡。在不同的时间点取样，取透析袋外液体1mL溶液，再向容器中补充对应的pH缓冲溶液，取出的液体测量其在480nm处的吸光度。缓释结束后，绘制DOX/MnO2@PVCLNGs在不同条件下的药物释放曲线，如图7所示，DOX/MnO2@PVCLNGs在pH＝6.5(GSH浓度：10mM)条件下的释放率为89.5％,DOX/MnO2@PVCLNGs在不含GSH，pH＝6.5条件下的释放率为22.87％,前者明显高于后者，说明DOX/MnO2@PVCLNGs的DOX释放具有显著的GSH响应性。另外，pH＝6.5(无GSH)条件下的药物释放率高于pH＝7.4(无GSH)条件下的药物释放率，这是由于DOX在酸性条件下比中性条件具有更大的溶解性，更有利于其释放。
7.细胞毒性试验：
收集对数生长期B16细胞，按照1×104细胞每孔的密度接种在4个96孔板的细胞培养板上，置于5％CO2、37℃条件下孵育12小时。弃掉培养基，每个孔板分别加入不同弄浓度的Free DOX(DOX浓度为0.5、1、2.5、5、7.5、10μg/mL)，不同浓度的DOX/MnO2@PVCLNGs(DOX浓度为0.5、1、2.5、5、7.5、10μg/mL)、不同浓度的MnO2@PVCLNGs(DOX/MnO2@PVCLNGs中DOX对应的MnO2@PVCL浓度)、以及不同浓度的DOX/MnO2@PVCLNGs+UTMD(DOX浓度为0.5、1、2.5、5、7.5、10μg/mL)，每个孔板设立PBS组作为空白对照组。之后将孔板放置在5％CO2、37℃培养箱中继续孵育24小时。对于DOX/MnO2@PVCLNGs+UTMD组，加入含有20％(v/v)Sono Vue和含有DOX/MnO2@PVCLNGs的新鲜培养基共1mL(DOX在混合液中的浓度分别为0.5、1、2.5、5、7.5、10μg/mL)，在0.4W/cm2,1KHz PRF条件下超声30s，处理后置于培养箱培养24小时。之后，取出相应的孔板，弃掉原培养基，加入含10％(v/v)CCK-8的新鲜培养基溶液，继续培养3到4h，放置在多功能酶标仪中于测试波长450nm下测试吸光值，结果如图8所示，在试验浓度范围内，与MnO2@PVCL NGs共孵育的细胞存活率均在80％以上，证明MnO2@PVCLNGs有良好的细胞相容性。随着DOX浓度的增加，DOX/MnO2@PVCLNGs的细胞毒性逐渐增强，证明DOX/MnO2@PVCLNGs有抑制肿瘤细胞增殖的效果。在相同的DOX浓度下，DOX/MnO2@PVCLNGs+UTMD的细胞毒性比DOX/MnO2@PVCLNGs高，证明UTMD技术具有增强的抑制癌细胞增殖的效果。
8.细胞吞噬实验：
收集对数生长期的B16细胞，按照15×104细胞每孔的密度接种在12孔板中，置于5％CO2、37℃条件下孵育12小时。弃掉培养基，每个孔板分别加入1mL不同浓度的DOX/MnO2@PVCLNGs(DOX浓度为0.25、0.5、1.25、0.5μg/mL)、不同浓度的MnO2@PVCLNGs(DOX/MnO2@PVCLNGs中DOX对应的MnO2@PVCLNGs浓度)以及不同浓度的DOX/MnO2@PVCLNGs+UTMD(DOX浓度为0.25、0.5、1.25、0.5μg/mL)，并设立PBS组作为空白对照组。之后将孔板放置在5％CO2、37℃培养箱中继续孵育6小时。对于DOX/MnO2@PVCLNGs+UTMD组，加入含DOX/MnO2@PVCLNGs的培养基和20％(v/v)微泡的混合液共1mL(DOX在混合液中的浓度为DOX浓度为0.25、0.5、1.25、0.5μg/mL)，置于声空化装置中，在0.4W/cm2、1KHz PRF条件下超声30s，然后在培养箱中培育6小时。之后将所有孔板的细胞消化、离心、收集，用流式细胞仪检测样品的荧光强度。由图9可以看出，随着DOX浓度的增加，与细胞共孵育6小时的DOX/MnO2@PVCLNGs及DOX/MnO2@PVCLNGs+UTMD均显示逐渐增强的荧光强度。通过比较DOX/MnO2@PVCL NGs和DOX/MnO2@PVCLNGs+UTMD的荧光强度可以看出，在相同的条件下，DOX/MnO2@PVCLNGs+UTMD比DOX/MnO2@PVCLNGs具有更高的荧光强度，这可能是由于UTMD导致的声致穿孔效应的结果。由上述分析可得出结论，UTMD可以促进细胞对DOX/MnO2@PVCL NGs的吞噬。
9.体内肿瘤MR成像结果
在白鼠体内构建B16皮下瘤模型，通过尾静脉注射MnO2@PVCL NGs的生理盐水溶液(100μL)，[Mn]＝10mM)来评价肿瘤部位MR成像效果(如图10)。与注射前的空白组相比较，小鼠肿瘤部位的MR信号明显增强且在40min达到峰值，说明DOX/MnO2@PVCL NGs可以实现良好的体内肿瘤MR成像效果。
10.体内肿瘤治疗结果
在白鼠体内构建B16皮下瘤模型，将小鼠随机分为5组(每组5只)，按照如下分组：对照组(Saline、100μL)；Free DOX([DOX]＝5mg/kg、100μL)；MnO2@PVCL NGs(浓度为DOX/MnO2@PVCL NGs中DOX对应的MnO2@PVCL NGs浓度、100μL)；DOX/MnO2@PVCL NGs([DOX]＝5mg/kg、100μL)；DOX/MnO2@PVCL NGs+UTMD([DOX]＝5mg/kg、100μL)。注射方式为尾静脉。5组分别在实验第0天，第4天尾静脉注射不同的材料，每隔2天给白鼠称体重并测量肿瘤体积。由图11(a)可以看出，在治疗结束后，MnO2@PVCL NGs组和NS组的相对肿瘤体积相差较小，说明MnO2@PVCL NGs基本上不会影响肿瘤的生长。Free DOX组、DOX/MnO2@PVCL NGs组以及DOX/MnO2@PVCL NGs+UTMD组均体现不同程度的抗肿瘤效果。DOX/MnO2@PVCLNGs组的抗肿瘤效果高于Free DOX组，可能是由于DOX/MnO2@PVCL NGs在体内有较长的血液循环时间并且当DOX/MnO2@PVCL NGs到达肿瘤部位时具有EPR效应，说明MnO2@PVCL NGs可以作为良好的药物载体。DOX/MnO2@PVCL NGs+UTMD组的治疗效果优于DOX/MnO2@PVCLNGs组，说明在UTMD技术的辅助下可以进一步增强化疗效果。另外，从图11(b)可以看出，Free DOX组白鼠的体重出现了明显的下降，其他组体重变化不明显，证明Free DOX可能对老鼠产生一定的毒性。
有益效果
(1)本发明采用较简单的工艺制备合成DOX/MnO2@PVCL NGs，产率高，生物相容性好，具有产业化实施的前景；
(2)本发明制备的DOX/MnO2@PVCL NGs尺寸较小，分布均匀，具有良好的胶体稳定性及生物相容性；
(3)本发明制备的DOX/MnO2@PVCL NGs具有显著的T1 MR成像效果及抗肿瘤效果，利用UTMD辅助技术，体现增强的化疗效果，具有潜在的应用价值。
附图说明
图1为本发明中纳米材料DOX/MnO2@PVCL NGs的合成示意图；
图2为实施例1中制备的DOX/MnO2@PVCL NGs在水中、生理盐水中及1640培养基中的水动力学直径变化图；
图3为实施例1中制备的MnO2@PVCL NGs及DOX/MnO2@PVCL NGs的紫外光谱图；
图4为实施例1中制备的DOX/MnO2@PVCL NGs的TEM图(a)，其中插图为单个水凝胶的TEM图；图(b)为DOX/MnO2@PVCL NGs的粒径分布图；
图5为实施例1中制备的DOX/MnO2@PVCL NGs的XPS图；
图6为实施例1中制备的DOX/MnO2@PVCL NGs及DOX/MnO2@PVCL NGs+GSH的T1弛豫时间的倒数随Mn浓度变化的线性关系图；
图7为实施例1中制备的DOX/MnO2@PVCL NGs在不同条件下的药物释放曲线图；
图8为Free DOX、MnO2@PVCL NGs、DOX/MnO2@PVCL NGs和DOX/MnO2@PVCL NGs+UTMD(DOX浓度为0.5,1,2.5,5,7.5,10μg/mL)与B16细胞共孵育24小时后的细胞活力图；
图9为MnO2@PVCL NGs、DOX/MnO2@PVCL NGs和DOX/MnO2@PVCL NGs+UTMD与B16细胞共孵育6小时后的流式分析图。
图10为实施例7中将实施例1制备的DOX/MnO2@PVCL NGs的生理盐水溶液(100μL，[Mn]＝10mM)经尾静脉注射前和注射后不同时间点小鼠肿瘤的MR成像图(a)，相应的肿瘤部位信噪比变化(b)。
图11为实施例8中分别将生理盐水(100μL)、Free DOX的生理盐水溶液(100μL,[DOX]＝5mg/kg)、实例例1中制备的MnO2@PVCL NGs的生理盐水溶液(100μL，浓度为DOX/MnO2@PVCL NGs中DOX对应的MnO2@PVCL NGs浓度)、DOX/MnO2@PVCL NGs的生理盐水溶液(100μL、[DOX]＝5mg/kg)及DOX/MnO2@PVCL NGs+UTMD的生理盐水溶液(100μL、[DOX]＝5mg/kg)经尾静脉注射后，记录12天内肿瘤体积(a)和体重变化图(b)。
具体实施方式
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。此外应理解，在阅读了本发明讲授的内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。
实施例1
(1)PVCL-COOHNGs通过沉淀聚合法合成：首先，将1.878g VCL(来源：J&K百灵威，规格：100g)、98.28mg BAC(来源：阿法埃莎，规格：1g)、20mg SDS(来源：西格玛奥德里奇，规格：1g)溶于120mL水中，在N2保护的氛围中，在70℃下搅拌30min使混合物充分混匀。之后往混合物中缓慢滴加引发剂ACMA(70mg,10mL水)(来源：日本和光纯药工业株式会社，规格：25g)，8min后，逐滴加入AAC的水溶液(0.108g,25mL水)，在搅拌下反应4h，反应结束后冷却到室温。用12000到14000的透析袋透析除杂，之后将溶液冻干并称量质量。
(2)取10mg PVCL-COOHNGs粉末溶于30mL水中，在搅拌下，往PVCL-COOHNGs溶液中滴加EDC(287.55mg,3mL水),30min后，滴加NHS(172.635mg,3mL水),搅拌3h后，往溶液中注入乙二胺(200.4μL)，反应3天，之后用分子量为1000的透析袋透析3天，即获得PVCL-NH2NGs，之后将溶液冻干并称量质量。
(3)PVCL-NH2NGs和KMnO4按照质量比1:0.75反应。将6.3mL KMnO4溶液(5mg/mL)(来源：J&K百灵威，规格：10g)逐滴加入到6mLPVCL-NH2NGs(1.17mg/mL)溶液中，反应12h，反应完后用分子量为500的透析袋透析除杂。透析三天后即获得MnO2@PVCL NGs，之后将溶液冻干并称量质量。
(4)取MnO2@PVCL NGs溶液(16mg，6.4mL水)与盐酸DOX溶液(8mg，5.2mL水)(来源：北京黄风药业，规格：1g)混合，将混合液调制pH＝8，在室温下搅拌24h，离心30min(r＝13000rpm)，取出上清液，通过紫外测量其在480nm处的吸光度，从而计算出上载率为33.34％，包封率为81.22％。
实施例2
取实施例1中合成的PVCL-COOHNGs、PVCL-NH2NGs、MnO2@PVCL NGs及DOX/MnO2@PVCLNGs各1mg，用超纯水稀释至50μg/mL用于测量表面电势和水动力学直径。如表1所示，PVCL-COOHNGs的电势为-8.21mV,PVCL-NH2NGs的电势为9.79mV，电势由负到正的变化证明了PVCL-NH2NGs的成功合成。当MnO2负载到水凝胶上后，电势转变为负值，证明MnO2@PVCL NGs的成功合成。当MnO2@PVCL NGs负载化疗药物DOX后，电势有所上升,水合粒径有所升高，证明DOX的成功负载。
另外，如图3所示，DOX/MnO2@PVCL NGs在489nm处出现紫外吸收峰也证明了DOX的成功负载。DOX/MnO2@PVCL NGs在各种溶液(水、生理盐水、1640培养基)中的水动力直径几乎不变，证明了DOX/MnO2@PVCL NGs具有良好的胶体稳定性(如图2所示)。接下来通过TEM测试对制备出的DOX/MnO2@PVCL NGs进行尺寸和形貌的表征，TEM结果(如图4)显示，DOX/MnO2@PVCL NGs形态接近球形，尺寸约为106.8nm，可观察到DOX/MnO2@PVCL NGs分散均匀。通过XPS测试来测试DOX/MnO2@PVCL NGs中锰元素的价态，如图5所示，锰元素在2P1/2轨道的峰值(653.4eV)和在2P3/2轨道的峰值(641.6eV)相差11.8eV，证明锰元素的价态为+4价。
表1为实施例1中制备的PVCL-COOHNGs、PVCL-NH2NGs、MnO2@PVCL NGs及DOX/MnO2@PVCL NGs在水中的分散系数、表面电势及水动力学直径，参见下表。
表1：
样品 水动力学直径(nm) 多分散性指数(PDI) 表面电势(mV)
PVCL-COOHNGs 282.9±11.34 0.02±0.02 -8.21±0.20
PVCL-NH<sub>2</sub> NGs 422.7±12.25 0.07±0.03 9.79±0.44
MnO<sub>2</sub>@PVCL NGs 278.1±2.75 0.11±0.02 -21.1±0.28
DOX/MnO<sub>2</sub>@PVCL NGs 354.0±8.98 0.05±0.02 -8.04±0.35
实施例3
通过ICP-AES测试法测定DOX/MnO2@PVCL NGs中Mn元素的含量，分别配制不同Mn元素浓度的DOX/MnO2@PVCL NGs溶液以及DOX/MnO2@PVCL NGs+GSH溶液各2mL(Mn元素浓度为0.1625、0.2325、0.465、0.93和0.86mM，GSH浓度为10mM)。通过磁共振成像分析仪测定材料在不同Mn元素浓度下的T1弛豫效应，如图6，通过计算后得出DOX/MnO2@PVCL NGs+GSH和DOX/MnO2@PVCL NGs的r1值分别为8.3313mM-1s-1和0.0444mM-1s-1，表明DOX/MnO2@PVCL NGs在高浓度GSH溶液中弛豫率显著提高，这是由于MnO2在高浓度的GSH溶液中被还原为Mn2+，而Mn2+具有比MnO2更高的弛豫率。肿瘤微环境中GSH浓度明显高于正常组织，因此DOX/MnO2@PVCL NGs到达肿瘤组织可以转化为Mn2+从而实现良好的T1成像效果。
实施例4
分别配置pH＝7.4、pH＝6.5、pH＝6.5(GSH浓度：10mM)的磷酸盐缓冲液，将制备的DOX/MnO2@PVCL NGs固体分别用1mL上述不同的缓冲溶液溶解为1mg/mL的溶液并置于透析袋中，将透析袋置于含有9mL上述不同的pH缓冲溶液的容器中，置于37℃的摇床中振荡。在不同的时间点取样，取透析袋外液体1mL溶液，再向容器中补充对应的pH缓冲溶液，取出的液体测量其在480nm处的吸光度。缓释结束后，绘制DOX/MnO2@PVCL NGs在不同条件下的药物释放曲线，如图7所示，DOX/MnO2@PVCL NGs在pH＝6.5(GSH浓度：10mM)条件下的释放率为89.5％，DOX/MnO2@PVCL NGs在pH＝6.5(无GSH)条件下的释放率为22.87％，前者明显高于后者，说明DOX/MnO2@PVCL NGs的DOX释放具有明显的GSH响应。另外，pH＝6.5(无GSH)条件下的药物释放率高于pH＝7.4(无GSH)条件下的药物释放率，这是由于DOX在酸性条件下比中性条件具有更大的溶解性，更有利于其释放。
实施例5
收集对数生长期B16细胞，按照1×104细胞每孔的密度接种在4个96孔板的细胞培养板上，置于5％CO2，37℃条件下孵育12小时。弃掉培养基，每个孔板分别加入不同浓度的Free DOX(DOX浓度为0.5、1、2.5、5、7.5、10μg/mL)，不同浓度的DOX/MnO2@PVCL NGs(DOX浓度为0.5、1、2.5、5、7.5、10μg/mL)，不同浓度的MnO2@PVCL NGs(浓度为DOX/MnO2@PVCL NGs中DOX对应的MnO2@PVCL NGs浓度)，以及不同浓度的DOX/MnO2@PVCL NGs+UTMD(DOX浓度为0.5、1、2.5、5、7.5、10μg/mL)，每个孔板设立PBS组作为空白对照组。将孔板放置在5％CO2、37℃培养箱中继续孵育24小时。对于DOX/MnO2@PVCL NGs+UTMD组，加入含有20％(v/v)Sono Vue和含有DOX/MnO2@PVCL NGs的新鲜培养基共1mL(DOX在混合液中的浓度分别为0.5、1、2.5、5、7.5、10μg/mL)，在0.4W/cm2、1KHz PRF条件下超声30s，处理完置于培养箱培养24小时。之后，取出相应的孔板，弃掉原培养基，加入含10％(v/v)CCK-8的新鲜培养基溶液，继续培养3到4h，放置在多功能酶标仪中于波长450nm下测试吸光值，结果如图8所示，在试验浓度范围内，与MnO2@PVCL NGs共孵育的细胞存活率均在80％以上，证明MnO2@PVCL NGs有良好的细胞相容性。随着DOX浓度的增加，DOX/MnO2@PVCL NGs的细胞毒性逐渐增强，证明DOX/MnO2@PVCLNGs有抑制肿瘤细胞增殖的效果。在相同的DOX浓度下，DOX/MnO2@PVCL NGs+UTMD组的细胞毒性比DOX/MnO2@PVCL NGs组高，证明UTMD技术具有增强的抑制癌细胞增殖的效果。
实施例6
收集对数生长期B16细胞，按照15×104细胞每孔的密度接种在12孔板中，置于5％CO2、37℃条件下孵育12小时。弃掉培养基，每个孔板分别加入1mL不同浓度的DOX/MnO2@PVCLNGs(DOX浓度为0.25、0.5、1.25、0.5μg/mL)以及不同浓度的DOX//MnO2@PVCL NGs+UTMD(DOX浓度为0.25、0.5、1.25、0.5μg/mL)，并设立PBS组作为空白对照组。之后将孔板放置在5％CO2、37℃培养箱中继续孵育6小时。对于DOX/MnO2@PVCL NGs+UTMD组，加入含DOX/MnO2@PVCLNGs的培养基和20％(v/v)微泡的混合液共1mL(DOX在混合液中的浓度为0.25、0.5、1.25、0.5μg/mL)，置于声空化装置中，在0.4W/cm2、1KHz PRF条件下超声30s，然后在培养箱中培育6小时。之后将所有孔板的细胞消化、离心、收集，用流式细胞仪检测样品的荧光强度。由图9可以看出，随着DOX浓度的增加，与细胞共孵育6小时的DOX/MnO2@PVCL NGs及DOX/MnO2@PVCL NGs+UTMD均显示逐渐增强的荧光强度。通过比较DOX/MnO2@PVCL NGs和DOX/MnO2@PVCLNGs+UTMD的荧光强度可以看出，在相同的条件下，DOX/MnO2@PVCL NGs+UTMD组比DOX/MnO2@PVCL NGs组具有更高的荧光强度，这可能是由于UTMD导致的声致穿孔效应的结果。由上述分析可得出结论，UTMD可以促进细胞对DOX/MnO2@PVCL NGs的吞噬。
实施例7
在白鼠体内构建B16皮下瘤模型，通过尾静脉注射DOX/MnO2@PVCL NGs的生理盐水溶液(100μL，[Mn]＝10mM)来评价肿瘤部位MR成像效果(如图10)。与注射前的空白组相比较，小鼠肿瘤部位的MR信号明显增强且在40min达到峰值，说明DOX/MnO2@PVCL NGs可以实现良好的体内肿瘤MR成像效果。
实施例8
以实施例7构建的B16白鼠肿瘤模型来研究实施例1制备的DOX/MnO2@PVCL NGs在生物体内的肿瘤化疗效果。将小鼠随机分为5组(每组5只)，按照如下分组：对照组(Saline，100μL)；Free DOX([DOX]＝5mg/kg，100μL)；MnO2@PVCLNGs(浓度为DOX/MnO2@PVCL NGs中DOX对应的MnO2@PVCL NGs浓度，100μL)；DOX/MnO2@PVCL NGs([DOX]＝5mg/kg，100μL)；DOX/MnO2@PVCL NGs+UTMD([DOX]＝5mg/kg，100μL)。注射方式为尾静脉。对于DOX/MnO2@PVCL NGs+UTMD组，配制好20％(v/v)SonoVue悬液备用。先在尾静脉注射MnO2@PVCL NGs+DOX溶液，再将配制好的200μL SonoVue悬液经过尾静脉注射进入体内，同时涂抹上一定厚度的耦合剂在肿瘤的表面，厚度范围约为1cm，将3.5cm的超声探头放置在涂有耦合剂的肿瘤上方进行超声辐照(1MHz、0.4W/cm2、2min)。治疗第1天记作实验开始第0天，5组分别在实验第0天、第4天尾静脉注射不同的材料，每隔2天给白鼠称体重并测量肿瘤体积。从图11(a)可以看出，在治疗结束后，MnO2@PVCL NGs组和Saline组的相对肿瘤体积相差较小，说明MnO2@PVCLNGs基本上不会影响肿瘤的生长。Free DOX组、DOX/MnO2@PVCL NGs组以及DOX/MnO2@PVCL NGs+UTMD组均体现不同程度的抗肿瘤效果。在相同的条件下，DOX/MnO2@PVCLNGs组的抗肿瘤效果高于Free DOX组，可能是由于DOX/MnO2@PVCLNGs在体内有较长的血液循环时间，并且通过EPR效应其到达肿瘤部位，说明MnO2@PVCL NGs可以作为良好的药物载体。在相同的条件下，DOX/MnO2@PVCL NGs+UTMD组的治疗效果好于DOX/MnO2@PVCL NGs组，说明在UTMD技术的辅助下可以增强化疗效果。另外，从图11(b)可以看出，Free DOX组白鼠的体重出现了明显的下降，其他组体重变化不明显，说明Free DOX可能对老鼠产生一定的毒性。

Claims (10)

1.一种负载二氧化锰的纳米水凝胶，其特征在于，所述聚N-乙烯基己内酰胺纳米水凝胶PVCL-COOHNGs表面氨基化后作为纳米反应器，原位合成并负载二氧化锰纳米颗粒。
2.一种负载二氧化锰的纳米水凝胶的制备方法，包括：
(1)将N-乙烯基己内酰胺VCL、N,N'-双丙烯酰胱胺BAC和十二烷基硫酸钠SDS溶于水中，在N2氛围中水浴搅拌并逐滴加入引发剂、丙烯酸AAC，继续搅拌反应，透析后，得到含羧基的聚N-乙烯基己内酰胺纳米水凝胶PVCL-COOHNGs；
(2)将PVCL-COOHNGs的羧基用EDC和NHS活化，加入乙二胺EDA继续搅拌反应，透析后，得到含氨基的聚N-乙烯基己内酰胺纳米水凝胶PVCL-NH2NGs；
(3)将上述PVCL-NH2 NGs溶于超纯水，逐滴加入KMnO4溶液，继续搅拌12-24h，透析后，得到负载二氧化锰的纳米水凝胶MnO2/PVCL NGs。
3.根据权利要求2所述制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中引发剂为偶氮二羧乙基-2-异丁基脒水合物ACMA；VCL、BAC、SDS、ACMA和AAC的质量比为450-470:15-30:5-8:10-24:23-28。
4.根据权利要求2所述制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中水浴搅拌的温度为50-90℃，水浴加热时间为10-50min；搅拌反应的时间为3-4h。
5.根据权利要求2所述制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中PVCL-COOHNGs的羧基、EDC、NHS和EDA的摩尔比为1:5-10:5-10:8-10；所述活化时间为1-3h，EDA反应时间为2-5天。
6.根据权利要求2所述制备方法，其特征在于，所述步骤(3)中PVCL-NH2NGs和KMnO4的质量比为1:0.1-2；KMnO4的浓度为2-10mg/mL，滴加速度为0.1-5mL/min。
7.一种载药纳米水凝胶，其特征在于，将DOX盐酸盐溶于水中，逐滴加到权利要求1所述的负载二氧化锰的纳米水凝胶MnO2/PVCL NGs溶液中，随后将混合液pH调至6-9，搅拌，离心，即得到载药纳米水凝胶DOX/MnO2/PVCL NGs。
8.根据权利要求7所述载药纳米水凝胶，其特征在于，所述MnO2/PVCL NGs和DOX盐酸盐的质量比为1:0.25-2；DOX盐酸盐的水溶液的浓度为1.5-2mg/mL；所述搅拌时间为24-48h；离心转速为13000-15000rpm，离心时间为30-40min。
9.一种权利要求7所述载药纳米水凝胶在制备肿瘤的T1-核磁共振(MR)成像剂中的应用。
10.一种权利要求7所述载药纳米水凝胶在制备超声靶向微泡破坏技术UTMD增强的肿瘤化疗药物中的应用。
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Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113499452A (zh) * 2021-06-11 2021-10-15 东华大学 一种负载金和二氧化锰纳米颗粒的聚n-乙烯基己内酰胺纳米凝胶及其制备和应用
CN113577316A (zh) * 2021-07-15 2021-11-02 东华大学 一种巨噬细胞膜包覆的负载二氧化锰MnO2和顺铂Pt的仿生纳米水凝胶及其制备和应用
CN114983932A (zh) * 2022-06-06 2022-09-02 上海市第一人民医院 一种用于多形性胶质母细胞瘤的诊疗纳米复合物及其制备方法和应用

Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103304733A (zh) * 2013-06-19 2013-09-18 复旦大学 一种可降解环境响应性聚合物纳米水凝胶的制备方法和应用
CN104292388A (zh) * 2014-09-30 2015-01-21 南京大学 具酰胺基和羟基且负载纳米水合氧化锰的复合水凝胶的制备方法和应用
WO2016201382A1 (en) * 2015-06-11 2016-12-15 The Regents Of The University Of California Novel hyaluronic acid-based hydrogels having medical applications
CN106810636A (zh) * 2016-12-29 2017-06-09 华中科技大学 肿瘤微环境智能响应的纳米凝胶及纳米凝胶载药系统
CN107693803A (zh) * 2017-11-03 2018-02-16 东华大学 一种负载氧化锰的杂化海藻酸钠纳米凝胶的制备方法
CN108172408A (zh) * 2017-12-27 2018-06-15 合肥工业大学 一种NH2-rGO/MnO2复合材料、制备方法及应用
CN109821030A (zh) * 2019-02-26 2019-05-31 东华大学 一种基于utmd的双载药纳米平台及其制备方法和应用

Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103304733A (zh) * 2013-06-19 2013-09-18 复旦大学 一种可降解环境响应性聚合物纳米水凝胶的制备方法和应用
CN104292388A (zh) * 2014-09-30 2015-01-21 南京大学 具酰胺基和羟基且负载纳米水合氧化锰的复合水凝胶的制备方法和应用
WO2016201382A1 (en) * 2015-06-11 2016-12-15 The Regents Of The University Of California Novel hyaluronic acid-based hydrogels having medical applications
CN106810636A (zh) * 2016-12-29 2017-06-09 华中科技大学 肿瘤微环境智能响应的纳米凝胶及纳米凝胶载药系统
CN107693803A (zh) * 2017-11-03 2018-02-16 东华大学 一种负载氧化锰的杂化海藻酸钠纳米凝胶的制备方法
CN108172408A (zh) * 2017-12-27 2018-06-15 合肥工业大学 一种NH2-rGO/MnO2复合材料、制备方法及应用
CN109821030A (zh) * 2019-02-26 2019-05-31 东华大学 一种基于utmd的双载药纳米平台及其制备方法和应用

Non-Patent Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
FANG XU ET AL: ""Multifunctional PVCL nanogels with redox-responsiveness enable enhanced MR imaging and Ultrasound-promoted Tumor Chemotherapy"", 《THERANOSTICS》 *
TING-TING ZHANG ET AL: ""A redox-activated theranostic nanoagent: toward multi-mode imaging guided chemo-photothermal therapy"", 《CHEM. SCI》 *
WENJIE SUN ET AL: ""Gadolinium-Loaded Poly(N‑vinylcaprolactam) Nanogels: Synthesis,Characterization, and Application for Enhanced Tumor MR Imaging"", 《ACS APPL. MATER. INTERFACES》 *
YANG WANG ET AL: ""Poly(vinylcaprolactam)-Based Biodegradable Multiresponsive Microgels for Drug Delivery"", 《BIOMACROMOLECULES》 *
YUAN LIU ET AL: ""Core-shell metal-organic frameworks with fluorescence switch to trigger an enhanced photodynamic therapy"", 《THERANOSTICS》 *
孙文杰: ""功能性杂化纳米凝胶的设计及其肿瘤磁共振诊断"", 《中国博士学位论文全文数据库 工程科技Ⅰ辑》 *
曾戎 编著: "《多糖基高分子药物轭合物的设计、合成、表征和评价》", 31 May 2011, 华南理工大学出版社 *
黄夏青: ""α、δ-MnO2的制备及对邻二甲苯深度催化氧化的研究"", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库 工程科技Ⅰ辑》 *

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113499452A (zh) * 2021-06-11 2021-10-15 东华大学 一种负载金和二氧化锰纳米颗粒的聚n-乙烯基己内酰胺纳米凝胶及其制备和应用
CN113499452B (zh) * 2021-06-11 2022-12-23 东华大学 一种负载金和二氧化锰纳米颗粒的聚n-乙烯基己内酰胺纳米凝胶及其制备和应用
CN113577316A (zh) * 2021-07-15 2021-11-02 东华大学 一种巨噬细胞膜包覆的负载二氧化锰MnO2和顺铂Pt的仿生纳米水凝胶及其制备和应用
CN114983932A (zh) * 2022-06-06 2022-09-02 上海市第一人民医院 一种用于多形性胶质母细胞瘤的诊疗纳米复合物及其制备方法和应用

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