CN110354050B - 一种延缓衰老组合物、制备方法及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开一种延缓衰老组合物，所述延缓衰老组合物含有以下组分：海枣籽提取物、松口蘑提取物，可以以任意比例组成，但当海枣籽提取物与松口蘑提取物比例为1：1时，抗衰老效果最佳。本发明还提供了所述延缓衰老组合物的海枣籽提取物、松口蘑提取物的制备方法，分别以海枣籽、松口蘑为原料经过提取有效成分制得；制备过程简单，快捷，适用于大批量生产。本发明所述延缓衰老组合物可作为有效成分添加至化妆品中，具有显著的抗皱、抗衰老护效果，具有良好的市场前景。
Description
技术领域
本发明属于日化领域，涉及一种组合物，具体涉及一种延缓衰老的组合物、制备方法及其应用。
背景技术
随着生活水平的提高和科学技术的进步，人口老龄化日渐严重，人们对于抗衰老化妆品的需求和期待也日益增加。皮肤的老化是随着年龄的增长，细胞及结构逐步发生损伤积累的现象，其中分为内源性老化和外源性老化。内源性老化是指皮肤随着年龄增长的自然老化，表现为皮肤松弛，出现细小皱纹等情况；外源性老化的最主要原因是日晒所致的光老化，主要表现为皮肤松弛、粗糙、淡黄或灰黄色的皮肤变色、毛细血管扩张、色素形成等。
松口蘑(即松茸)，是一种较名贵的食用菌，具有多种氨基酸、不饱和脂肪酸以及核酸衍生物。研究发现，松口蘑不仅营养丰富，还具有抗辐射、抗衰老、抗癌等多种功效。目前，有点化妆品厂家已开发出了多种含有松口蘑的美容养颜产品。然而由于松口蘑的价格昂贵，往往这些产品中的松口蘑含量较低，很可能达不到真正的抗衰老作用；添加量较多的产品价格也相对较高，无法满足大多数普通消费者的需求。但经过我们的实验发现，在化妆品中，用海枣籽搭配松口磨使用可以更有效地延缓我们的皮肤衰老。
发明内容
本发明的目的在于针对上述现有技术的不足之处而提供一种含有海枣籽和松口蘑的能够显著减缓衰老效果的组合物。同时，本发明还提供了所述减缓衰老组合物的制备方法以及所述减缓衰老组合物在化妆品领域应用。
为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：
一种延缓衰老组合物，包含以下组分：海枣籽提取物、松口蘑提取物。
海枣(PHOENIX DACTYLIFERA)籽提取物是尚未报道用于延缓皮肤衰老的产品中。海枣(PHOENIX DACTYLIFERA)籽提取物富含多酚与没食子酸等有效成分，主要是通过减缓细胞分裂和减缓生物钟式的内在老化以及通过提供抗氧化防护、减少环境的影响来减缓内在老化。
松口蘑(TRICHOLOMA MATSUTAKE)提取物是尚未报道用于延缓皮肤衰老产品中。松茸富含蛋白质，有18种氨基酸，14种人体必需微量元素、49种活性营养物质、5种不饱和脂肪酸，核酸衍生物，肽类物质等稀有元素。另含有3种珍贵的活性物质，分别是双链松茸多糖、松茸多肽和全世界独一无二的抗癌物质——松茸醇，是世界上最珍贵的天然药用菌类。经研究发现，不同品种的松茸具有不同的生物活性，包括抗氧化，美白，免疫调节等功效。
具体地，所述海枣籽提取物的制备方法如下：
(1)将海枣籽粉碎至30～60目，置于干燥皿中待用；
(2)在超声波容器中加入为海枣籽质量30倍的水，并将粉碎后的海枣籽原料加入其中，浸泡4-6h；
(3)设置温度为65-70℃，频率为20--50kHz，超声浸取20-40min，过滤得到提取液；
(4)将提取液在旋转蒸发仪进行浓缩，浓缩温度为68-70℃，真空度-72.6至-70.0kPa；浓缩30倍后得到浓缩液即为所述海枣籽提取物。
具体地，所述松口蘑提取物的制备方法如下：
(1)将松口蘑干燥后粉碎至30-60目，置于干燥皿中待用；
(2)加入松口蘑质量30倍的蒸馏水，以400W的微波辐射功率搅拌混匀，辐照时间为3min后过滤取上清；
(3)在上清液中加入10％(g/mL)的粉末状活性炭，水浴60-70℃，脱色30-40min，重复操作直至颜色较浅为止；
(4)加入质量为松口蘑20倍的80％乙醇作为提取液，4℃静置12h，然后4000-5000r/min离心15-20min，分别收集上清液和沉淀；
(5)在步骤(4)中得到的上清液中加入20-30份70％乙醇，于4℃冰箱里静置24h后以4000-5000r/min离心15-20分钟，取上清液在旋转蒸发仪中进行浓缩，浓缩温度为68-70℃，真空度为-72.6至-70.0kPa；
(6)将步骤(4)中收集的沉淀用无水乙醇洗涤沉淀，过滤去除杂质后得到松茸多糖；
(7)将步骤(5)得到的溶液与步骤(6)得到的松茸多糖加蒸馏水至原松口蘑的质量即得到所述松口蘑提取物。
所述组合物中的海枣籽提取物及松口蘑提取物可以以任意比例组合，优选地，所述组合物中海枣籽提取物与松口蘑提取物的重量比为1：1。
本发明发现，海枣籽提取物与松口蘑提取物以任意配比结合都具有协同抗皱作用。当海枣籽提取物与松口蘑提取物以重量比为1:1的配比结合时，抗皱效果最佳。本发明的组合物可以作为延缓衰老的有效成分用于化妆品中。
具体地，所述化妆品包括水剂、乳液、膏霜等任何一种。
具体地，所述延缓衰老组合物在所述化妆品中的质量百分含量为0.1％～20％。
将所述组合物以质量百分含量为0.1％～20％添加至化妆品中，能有效减少皱纹生长。
优选地，所述延缓衰老组合物在所述化妆品中的质量百分含量为5％～10％。
综合考虑成本和所述组合物的效果，所述延缓衰老组合物在所述化妆品中的添加量为5％～10％。
本发明组合物能够作为抗衰老有效成分用于化妆品中，所述化妆品中的包括但不限于制备乳液、喷雾、膏霜、水剂等。
本发明所述延缓衰老组合物，采用海枣籽与松口蘑为原料，分别得到其提取物(海枣籽提取物与松口蘑提取物)，所述组合物中海枣籽提取物与松口蘑提取物可以以任意比例组合，普遍具有良好的抗衰老效果；所述组合物原料简单易得，制备过程简单，通过优选最佳比例，可得到疗效显著的延缓皮肤衰老的化妆品，具有广阔的市场前景。
具体实施方式
为更好的说明本发明的目的、技术方案和优点，下面将结合具体实施例对本发明作进一步说明。
实施例1-7
本发明延缓衰老组合物的实施例，实施例1-7所述延缓衰老组合物含有重量百分比如表1的组分。
表1
所述松口蘑提取物的制备方法如下：
(1)将松口蘑干燥后粉碎至30-60目，置于干燥皿中待用；
(2)加入松口蘑质量30倍的蒸馏水，以400W的微波辐射功率搅拌混匀，辐照时间为3min后过滤取上清；
(3)在上清液中加入10％(g/mL)的粉末状活性炭，水浴60-70℃，脱色30-40min，重复操作直至颜色较浅为止；
(4)加入质量为松口蘑20倍的80％乙醇作为提取液，4℃静置12h，然后4000-5000r/min离心15-20min，分别收集上清液和沉淀；
(5)在步骤(4)中得到的上清液中加入20-30份70％乙醇，于4℃冰箱里静置24h后以4000-5000r/min离心15-20分钟，取上清液在旋转蒸发仪中进行浓缩，浓缩温度为68-70℃，真空度为-72.6至-70.0kPa；
(6)将步骤(4)中收集的沉淀用无水乙醇洗涤沉淀，过滤去除杂质后得到松茸多糖；
(7)将步骤(5)得到的溶液与步骤(6)得到的松茸多糖加蒸馏水至原松口蘑的质量即得到所述松口蘑提取物。
所述海枣籽提取物的制备方法如下：
(1)将海枣籽粉碎至30～60目，置于干燥皿中待用；
(2)在超声波容器中加入为海枣籽质量30倍的水，并将粉碎后的海枣籽原料加入其中，浸泡4-6h；
(3)设置温度为65-70℃，频率为20--50kHz，超声浸取20-40min，过滤得到提取液；
(4)将提取液在旋转蒸发仪进行浓缩，浓缩温度为68-70℃，真空度-72.6至-70.0kPa；浓缩30倍得到浓缩液即为所述海枣籽提取物。
实施例8不同配比组合物对细胞分裂影响
(1)样品准备：将海枣籽提取物和松口蘑提取物按照实例1-7比例混合均匀，总质量百分比为100％。设置对照组及测试组进行测试；对照组：正常的细胞培养液；测试组：分别含有5％实施例1-7组合物的细胞培养液。
(2)测试方法：采用活细胞培养法培养活体细胞对实施例1～7中的组合物进行测试：
a、在无菌环境下取新切除的人体包皮，碘酒浸泡10-15分钟，放入0.1mol/L的磷酸缓冲盐溶液中清洗10-12分钟，剪下皮下组织，然后将皮下组织放入0.5％的分离酶中，4℃消化分散过夜，分离出表皮和真皮；
b、表皮加入2％EDTA和0.25％胰酶，37℃孵箱中消化10-15min，然后加入含10％小牛血清的RPMI1640培养基中止消化并用200目铜网过滤，将过滤液2000-2500r/min离心2次，每次时间为5分钟。用培养基重悬细胞并计数，取接种到细胞培养皿中，接种后细胞数密度为1.25*104/mL，放置于37℃、5％二氧化碳的细胞培养箱中培养一周得到表皮干细胞，记录细胞总数；
c、将a中分离的真皮用D-Hanks冲洗一遍细胞，然后加入2mL的混合酶溶液(0.25％胰酶和0.02％EDTA)消化，当在显微镜下观察到细胞发生明显的变形，缩成球状后，立即用含有10％胎牛血清的培养基中止消化，并用吸管轻轻吹打瓶底部，确保细胞完全脱落分离到悬液中，再把细胞悬液置于离心机上，以1000r/min，离心5min。最后，将离心得到的细胞团重悬，调整密度为1×105/mL后接种到细胞培养皿中，放置于37℃、5％二氧化碳的细胞培养箱中培养一周得到真皮干细胞，记录细胞总数；并计算抑制细胞分裂强度和抑制端粒缩短强度，计算公式如下：
细胞分裂抑制率＝(1-测试组值/对照组值)*100％
组合物的细胞分裂抑制率测试结果如表2和表3。
表2表皮干细胞分裂抑制率测试
| 实施例 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 |
| 细胞分裂抑制率％ | 0％ | 5.43％ | 17.66％ | 40.27％ | 63.85％ | 89.91％ | 97.88％ |
表3真皮干细胞分裂抑制率测试
| 实施例 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 |
| 细胞分裂抑制率％ | 0％ | 4.88％ | 16.95％ | 40.32％ | 61.96％ | 88.73％ | 97.21％ |
该实验数据表明：海枣籽提取物的添加量越大，其抑制细胞分裂的能力就越强，因此海枣籽提取物可以通过抑制细胞分裂而延缓皮肤衰老。
实施例9本发明延缓衰老组合物的皮肤抗皱效果试验
(1)样品准备：
试验组：分别由质量百分含量为5％的实施例1-7所述的组合物及质量百分含量为95％乳液基质(乳液基质如表4)组成的乳液。
对照组：未添加组合物的乳液基质。
表4乳液基质成分
(2)测试方法：各选择30名年龄在45-65岁之间的受试者使用试验组及对照组样品进行测试：每天早晚使用，以受试者的面部作为受试区域。洁面后，用脸部图像分析仪(VISIA7)拍原始照片。分别连续使用各实施例组合物一个月，并每个星期对脸部图形进行一次拍摄。计算每个浓度梯度的30名受试者的面部皱纹百分比的平均值。测试结果如表5。
表5
| 实施例 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 对照组 |
| 使用前 | 23.6％ | 17.1％ | 31.2％ | 33.6％ | 44.8％ | 38.7％ | 42.4％ | 46.1％ |
| 使用后 | 38.4％ | 41.3％ | 54.5％ | 72.3％ | 67.2％ | 65.9％ | 54.8％ | 46.5％ |
| 增加的百分比 | 14.8％ | 24.2％ | 23.3％ | 38.7％ | 22.4％ | 27.2％ | 12.4％ | 0.4％ |
*百分比：表示在同年龄段具有相同皮肤类型的每一百位同性中，皮肤比其中的百分比要好，百分比越高，则表示脸部的皱纹越少。
由以上结果显示：从实施例1、7中可以看出，单独使用松口蘑提取物或海枣籽提取物对延缓皮肤衰老有一定的作用；但经过对比各实施例，使海枣籽提取物与松口蘑进行复配时比单独使用松口蘑提取物或海枣籽提取物抗衰老效果更好，且当海枣(PHOENIXDACTYLIFERA)籽提取物和松口蘑(TRICHOLOMA MATSUTAKE)提取物的比例接近1:1时抗衰老的效果最为明显。
实施例10
本发明延缓衰老组合物的添加量抗皱效果测试
选择海枣籽提取物和松口蘑提取物的比例为1:1的组合物，以表4相同的乳液基质作为测试载体，设置对照乳液(不含本发明组合物)和组合物的添加量为0.1％-20％的乳液进行抗皱测试。
采用VISIA测试：随机招募70名受试者，均分为7组，分别对应使用一种受试物乳液。以受试者的眼部周围作为受试区域。洁面后，用脸部图像分析仪(VISIA7)拍原始照片，连续使用一个月，之后每星期拍一次。取每组受试者的眼部皱纹百分比的平均值，结果如表6。
表6
*百分比表示在同年龄段具有相同皮肤类型的每一百位同性中，皮肤比其中的百分比要好，百分比越高，则眼部皱纹越少。
由表6可结果可得，对照组的皱纹百分比几乎不变，略有增多。选择海枣籽提取物和松口蘑提取物的比例为1:1的组合物添加至乳液时，脸部皱纹都呈减少趋势，添加量为5％～20％时具有较好的抗皱效果。考虑到成本因素，优选添加量为5％-10％为最佳添加比例。
根据以上的实验所得：在化妆品中单独使用含有海枣籽或松口磨对延缓皮肤衰老的效果不明显，当两者搭配使用时，其效果更显著，更符合消费者的需求。
最后所应当说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对本发明保护范围的限制，尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
Claims (6)
1.一种延缓衰老组合物，其特征在于，包含以下组分：海枣籽提取物、松口蘑提取物，海枣籽提取物与松口蘑提取物的重量比为1：1，
其中，所述海枣籽提取物的制备方法如下：
（1）将海枣籽粉碎至30~60目，置于干燥皿中待用；
（2）在超声波容器中加入为海枣籽质量30倍的水，并将粉碎后的海枣籽原料加入其中，浸泡4-6h；
（3）设置温度为65-70℃，频率为20-50kHz，超声浸取20-40min，过滤得到提取液；
（4）将提取液在旋转蒸发仪进行浓缩，浓缩温度为68-70℃，真空度-72.6至-70.0kPa；浓缩30倍得到浓缩液即为所述海枣籽提取物；
所述松口蘑提取物的制备方法如下：
（1）将松口蘑干燥后粉碎至30-60目，置于干燥皿中待用；
（2）加入松口磨质量30倍的蒸馏水，以400W的微波辐射功率搅拌混匀，辐照时间为3min后过滤取上清；
（3）在上清液中加入以g/ml计10%的粉末状活性炭，水浴60-70℃，脱色30-40min，重复操作直至颜色较浅为止；
（4）加入质量为松口蘑20倍的80%乙醇作为提取液，4℃静置12 h，然后4000-5000r/min离心15-20min，分别收集上清液和沉淀；
（5）从步骤（4）中得到的上清液加入20-30份70%乙醇，于4℃冰箱里静置24h后以4000-5000r/min离心15-20分钟，取上清液在旋转蒸发仪中进行浓缩，浓缩温度为68-70℃，真空度为-72.6至-70.0kPa浓缩30倍；
（6）将步骤（4）中收集的沉淀用无水乙醇洗涤沉淀，过滤去除杂质后得到松茸多糖；
（7）将步骤（5）得到的溶液与步骤（6）得到的松茸多糖加蒸馏水至原松口蘑的质量即得到所述松口蘑提取物。
2.一种含有如权利要求1所述的延缓衰老组合物的化妆品，所述延缓衰老组合物在所述化妆品中的重量百分比为0.1%~20%。
3.根据权利要求2所述的化妆品，其特征在于，所述化妆品包括水剂、乳液、膏霜。
4.根据权利要求2所述的化妆品，其特征在于，所述延缓衰老组合物在所述化妆品中的重量百分比为5%~10%。
5.一种如权利要求1所述的延缓衰老组合物在化妆品中的应用。
6.根据权利要求5所述的延缓衰老组合物在化妆品中的应用，其特征在于，所述化妆品包括水剂、乳液、膏霜。
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