CN110346467A - 一种同时测定金丝桃苷和金丝桃素含量的方法 - Google Patents

一种同时测定金丝桃苷和金丝桃素含量的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN110346467A
CN110346467A CN201910570100.0A CN201910570100A CN110346467A CN 110346467 A CN110346467 A CN 110346467A CN 201910570100 A CN201910570100 A CN 201910570100A CN 110346467 A CN110346467 A CN 110346467A
Authority
CN
China
Prior art keywords
hypericin
hyperoside
determination
extraction
measuring
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201910570100.0A
Other languages
English (en)
Inventor
马君义
李茂星
任晓霞
吕孝飞
田秀玉
陈丽萍
宋娜
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Northwest Normal University
Original Assignee
Northwest Normal University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Northwest Normal University filed Critical Northwest Normal University
Priority to CN201910570100.0A priority Critical patent/CN110346467A/zh
Publication of CN110346467A publication Critical patent/CN110346467A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
    • G01N30/06—Preparation
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/26—Conditioning of the fluid carrier; Flow patterns
    • G01N30/28—Control of physical parameters of the fluid carrier
    • G01N30/34—Control of physical parameters of the fluid carrier of fluid composition, e.g. gradient

Landscapes

  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)

Abstract

本发明公开了一种同时测定金丝桃苷和金丝桃素含量的方法，它包括以下步骤：（1）金丝桃苷和金丝桃素标准曲线的建立：a、对照品溶液的制备；b、对照品溶液的测定；（2）待测样品中金丝桃苷和金丝桃素的含量测定：c、供试品溶液的制备；d、供试品溶液的测定。本发明首次建立了同时测定贯叶金丝桃及相关药品中金丝桃苷和金丝桃素含量的RP‑HPLC方法，可以简便、快速、准确地测定贯叶金丝桃药材及相关药品中金丝桃苷和金丝桃素的含量。本发明准确、快速、专属性好、灵敏度高，可以用于贯叶金丝桃药材及相关药品的快速质量控制。

Description

一种同时测定金丝桃苷和金丝桃素含量的方法
技术领域
本发明属于中药技术领域，具体涉及一种对贯叶金丝桃及相关药品中的金丝桃苷和金丝桃素含量同时测定的方法。
背景技术
贯叶金丝桃（Hypericum perforatum L．）又名贯叶连翘、千层楼、赶山鞭、对叶草等，欧洲称其为圣约翰草（St. John's wort），该植物为藤黄科植物贯叶金丝桃的干燥地上部分。以金丝桃苷为代表的黄酮类和金丝桃素为代表的萘骈二蒽酮类是其主要化学成分，具有促进伤口愈合、利尿、抗菌消炎、抗癌、抗病毒和抗抑郁等功效，特别是对轻度和中度抑郁症的治疗显著，且副作用小，已成为欧、美地区治疗抑郁症的首选药。金丝桃苷可通过抑制突触体对5-羟色胺的提取、抑制HPA轴的过度激活、抑制因皮质酮而诱发的PC12细胞内Ca2+超载以及通过AC-cAMP-CREB信号通路，提高cAMP反应原件结合蛋白和脑源性神经营养因子，从而发挥抗抑郁的作用；同时，金丝桃苷还可使脑组织内SOD活性显著升高，改善抑郁症状。金丝桃素对抑郁症的治疗与海马5-HT的水平以及5-HT1A受体的表达有关。另外，金丝桃素可以减缓CUMS模型的抑郁症状，而且能够调控代谢物紊乱，因此这两类化合物常被用作评价药材的质量指标（Mennini T T M I, Gobbi M. The antidepressant mechanismof Hypericum perforatum [J]. Life Sciences, 2004,75(9):1021-1027； 欧阳辉, 谢丽艳, 黄小方, 等. 贯叶连翘的化学成分与药理研究进展及前景展望[J]. 江西中医药,2010,41(7):78-80； Galeotti N. Hypericum perforatum (St John's wort) beyonddepression: A therapeutic perspective for pain conditions[J]. Journal ofethnopharmacology, 2017,200:136-146；杨诗婷, 王晓倩, 廖广辉. 金丝桃苷的药理作用机制研究进展[J]. 中国现代应用药学, 2018,35(6):947-951； 龚宇, 周蕙祯, 江泓,等. 金丝桃素药理作用以及制备方法研究概况[J]. 中国民族民间医药, 2018,27(15):37-40.）。
《中国药典》2015版一部采用HPLC法，流动相：乙腈-1 mL·L-1磷酸（16：84），只测定了贯叶金丝桃中金丝桃苷含量（国家药典委员会. 中华人民共和国药典（一部）[M]. 北京：中国医药科技出版社, 2015.）；闫翠起等采用HPLC法，流动相：甲醇-6 mmol·L-1磷酸氢二钠（87.5∶12.5），测定了不同产地和不同部位贯叶金丝桃中金丝桃素含量（闫翠起, 赵曼茜, 王炜, 等. HPLC测定不同产地和不同部位贯叶金丝桃中的金丝桃素[J]. 华西药学杂志, 2017,32(2):211-213.）；樊敏伟等采用高效液相色谱法，流动相：水-乙腈-磷酸（825：175：1），测定了贯叶金丝桃提取物缓释胶囊中金丝桃苷含量（樊敏伟, 马能溢, 王冰, 等. 高效液相色谱法测定贯叶金丝桃提取物缓释胶囊中金丝桃苷的含量[J]. 中国实验方剂学杂志, 2007,13(11):9-11.）；王峰等采用RP-HPLC法，分别使用ODS和ODS-2色谱柱，流动相分别是1.56%磷酸二氢钠-甲醇-醋酸乙酯（1:4:1）及甲醇-0.5%磷酸（45：55），分别测定了贯叶连翘片剂中有效成分金丝桃素和金丝桃苷含量（王峰, 高天兵, 田金改.RP-HPLC法测定贯叶连翘片剂中有效成分金丝桃素和金丝桃苷的含量[J]. 药物分析杂志,2000,20(2):101-104.）；传娟娟等采用HPLC法，流动相：A相乙腈-甲醇-甲酸（89.8：10：0.2），B相水-甲醇-甲酸（79.8：20：0.2），同时测定了贯叶金丝桃中芦丁、金丝桃苷和槲皮素含量（传娟娟, 张宝阳. HPLC法同时测定贯叶金丝桃中芦丁、金丝桃苷和槲皮素的含量[J]. 西北药学杂志, 2016,31(4):356-360.）。
然而上述研究建立的方法均仅能测定样品中的金丝桃素或金丝桃苷一个物质，不利于药品的快速、整体质量控制。同时由于金丝桃苷和金丝桃素属于结构完全不同的两类化合物，色谱行为差异较大，目前利用RP-HPLC法同时测定金丝桃苷和金丝桃素含量的研究尚未见报道。因此，建立一种简单、可行、准确、快速地方法同时检测金丝桃苷和金丝桃素的含量不仅可以减少取样量，简化样品处理，缩短样品分析时间，更可以极大的降低质量控制成本，对贯叶金丝桃及其相关药材质量控制有着重要的现实意义。
发明内容
为了解决现有技术中存在的上述问题，本发明提供了一种用RP-HPLC同时测定贯叶金丝桃及相关药品中金丝桃苷和金丝桃素含量的方法。
本发明采用的技术方案如下：一种同时测定金丝桃苷和金丝桃素含量的方法，包括以下步骤：
步骤（1）.金丝桃苷和金丝桃素标准曲线的制备：取金丝桃苷和金丝桃素对照品，加甲醇配制成系列浓度的对照品溶液，分别注入高效液相色谱仪进行梯度洗脱，测定色谱峰面积，绘制金丝桃苷和金丝桃素的标准曲线；
步骤（2）.供试品溶液的制备：取待测样品，加乙醇提取，过滤得供试品溶液，
步骤（3）.供试品溶液中金丝桃苷和金丝桃素含量的测定：取供试品溶液，注入高效液相色谱仪，进行梯度洗脱，测定色谱峰面积，根据步骤（1）所得的标准曲线，计算待测样品中金丝桃苷和金丝桃素的含量；
其中高效液相色谱条件为：色谱柱：C18色谱柱；检测波长：360 nm，590 nm；柱温：18℃-25℃；流速：0.8-1.2 mL·min-1；进样量：8-12 µL；流动相：乙腈-0.05%磷酸水溶液-0.30mol·L-1乙酸铵缓冲液；
上述步骤（1）和步骤（3）中梯度洗脱的洗脱梯度为：
第一梯度，0-11 min，乙腈25%-0.05%磷酸水溶液75%；
第二梯度，11-18 min，乙腈90%-0.30 mol·L-1乙酸铵缓冲液10%；
第三梯度，18-22 min，乙腈25%-0.05%磷酸水溶液75%。
优选地，所述0.05%磷酸水溶液的pH为2.30-2.32，所述乙酸铵缓冲液的pH为4.10-4.34。
优选地，所述0.05%磷酸水溶液的pH为2.31，所述乙酸铵缓冲液的pH为4.22。
优选地，所述色谱柱为Hypersil GOLDTM C18 LC色谱柱，规格为150 mm×4.6 mm，5µm。
优选地，所述流速为1.0 mL·min-1，所述进样量为10 µL。
优选地，所述步骤（2）中乙醇的浓度为70%，所述乙醇体积与待测样品的质量比为25 mL：2 g。
优选地，所述步骤（2）中的提取方法为超声提取或回流提取。
优选地，所述提取方法为超声提取，超声功率为300 W，超声频率为40 kHz，提取时间为1 h。
本发明上述的方法在控制贯叶金丝桃及相关药品质量中的应用。
与现有技术相比，本发明的有益效果如下：
1.本发明的检测方法能够同时测定贯叶金丝桃及相关药品中金丝桃苷和金丝桃素成分，检测时间为22分钟，检测效率高，方法准确、快速、专属性好、灵敏度高；
2. 本发明的检测方法金丝桃苷和金丝桃素在一定范围内线性关系良好；
3. 本发明的检测方法能简便、快速、准确地测定贯叶金丝桃及相关药品中金丝桃苷和金丝桃素的含量，为金丝桃苷和金丝桃素进一步的研究奠定基础，为相关领域的研究者提供方法参考。
附图说明
图1为混合对照品溶液色谱图；
图中：1.金丝桃苷、2.金丝桃素；
图2为贯叶金丝桃及相关药品供试品溶液色谱图；
图中：a.贯叶金丝桃花；b.贯叶金丝桃叶；c.贯叶金丝桃茎；d.舒肝解郁胶囊；e.圣·约翰草提取物片；f.贯叶金丝桃提取物；
图3为金丝桃苷对照品标准曲线；
图4为金丝桃素对照品标准曲线。
具体实施方式
下面结合附图和实施例对本发明作进一步说明，但不作为对本发明的任何限制；
采用的仪器与试药
高效液相色谱仪（规格型号：Ultimate 3000 DGLC）；BP210S电子天平（德国Sartorius公司）；KQ-100A型超声波清洗机（上海科导超声仪器有限公司）；
贯叶金丝桃2018年5月采自甘肃省康县福祥中药材种植农民专业合作社，经联勤保障部队第九四〇医院李茂星副主任药师鉴定为贯叶金丝桃Hypericum perforatum L．的干燥地上部分；舒肝解郁胶囊（四川济生堂药业有限公司，批号：181118、180813、190103，规格：0.36 g/粒）；圣·约翰草提取物片（德国威玛舒培博士药厂生产，批号：0090817、2800113，规格：0.56 g/片）；贯叶金丝桃提取物（陕西明锐天然产物有限责任公司，批号：180514，规格：0.3%）；金丝桃苷对照品（纯度≥98%，北京索莱宝科技有限公司，批号：1102D021）；金丝桃素对照品（纯度＞98%，江苏永健医药科技有限公司，批号：102628）；甲醇、乙腈均为色谱纯；磷酸（分析纯），成都化学试剂厂；乙酸铵（分析纯），成都市科龙化工试剂厂；乙酸、无水乙醇（分析纯），烟台市双双化工有限公司。灭菌注射用水（四川科伦药业股份有限公司）。
实施例1
一种同时测定贯叶金丝桃及相关药品中金丝桃苷和金丝桃素含量的RP-HPLC方法，具体包括以下步骤：
步骤（1）金丝桃苷和金丝桃素标准曲线的制备：
对照品溶液的制备：精密称取金丝桃苷和金丝桃素对照品各0.0086，0.0015 g，分别用色谱纯甲醇定容于10 mL容量瓶中，上述金丝桃素对照品溶液稀释5倍，最终配制成金丝桃苷和金丝桃素的质量浓度分别为860 µg·mL-1，30 µg·mL-1的对照品溶液，4℃冰箱保存，备用；
金丝桃苷和金丝桃素成分含量测定标准曲线的建立：
采用Hypersil GOLDTM C18 LC色谱柱；以乙腈-0.05%磷酸水溶液（pH：2.30～2.32）-0.30 mol·L-1乙酸铵缓冲液（pH：4.10～4.34）为流动相，进行梯度洗脱，洗脱梯度为：
0～11 min，乙腈25%-0.05%磷酸水溶液75%；
11～18 min，乙腈90%-0.30 mol·L-1乙酸铵缓冲液10%；
18～22 min，乙腈25%-0.05%磷酸水溶液75%；
其中， 25%、75%、90%、10%为所占体积分数；
流速1.0 mL·min-1；检测波长为360 nm和590 nm；柱温：18℃-25℃；进样量10 µL；分析时间22 min。
分别精密量取860 µg·mL-1金丝桃苷和30 µg·mL-1金丝桃素对照品溶液适量，甲醇依次稀释，得含金丝桃苷（172，344，516，688，860 µg·mL-1），金丝桃素（3.75，7.5，15，22.5，30 µg·mL-1）的对照品溶液。将上述稀释后的两种溶液分别等体积混合，进样测定，记录色谱图。以峰面积积分值（y）为纵坐标，进样量（x，µg）为横坐标，进行线性回归，得金丝桃苷的回归方程为y=21.135x+1.811（r=0.9996），线性范围为0.86～4.30 µg；金丝桃素的回归方程为y=32.165x-0.4939（r=0.9998），线性范围为0.01875～0.15 µg。结果表明，对照品溶液分别在各自线性范围内与其峰面积积分值呈良好线性关系。
步骤（2）供试品溶液的制备
贯叶金丝桃花供试品溶液的制备：贯叶金丝桃花粉碎，过5号筛（80目），精密称取样品2g，置具塞锥形瓶中，加入70%乙醇25 mL，密塞，称定质量，超声提取1 h（功率：300 W，频率：40 kHz），放冷，再称定质量，用70%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，将续滤液转移至25 mL容量瓶中，70%乙醇定容。所得溶液稀释，4℃冰箱保存备用。
步骤（3）供试品溶液中金丝桃苷和金丝桃素含量的测定：
按照上述标准曲线色谱条件对制备的供试品溶液进行测定，利用线性回归方程，计算供试品溶液中金丝桃苷和金丝桃素的含量。
实施例2
其余步骤同实施例1。
步骤（2）.供试品溶液的制备
贯叶金丝桃叶供试品溶液的制备：贯叶金丝桃叶粉碎，过5号筛（80目），精密称取样品2g，置具塞锥形瓶中，加入70%乙醇25 mL，密塞，称定质量，超声提取1 h（功率：300 W，频率：40 kHz），放冷，再称定质量，用70%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，将续滤液转移至25 mL容量瓶中，70%乙醇定容。所得溶液稀释，4℃冰箱保存备用。
步骤（3）供试品溶液中金丝桃苷和金丝桃素含量的测定：
按照上述标准曲线色谱条件对制备的供试品溶液进行测定，利用线性回归方程，计算供试品溶液中金丝桃苷和金丝桃素的含量。
实施例3
其余步骤同实施例1。
步骤（2）.供试品溶液的制备
贯叶金丝桃茎供试品溶液的制备：贯叶金丝桃茎粉碎，过5号筛（80目），精密称取样品2g，置具塞锥形瓶中，加入70%乙醇25 mL，密塞，称定质量，超声提取1 h（功率：300 W，频率：40 kHz），放冷，再称定质量，用70%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，将续滤液转移至25 mL容量瓶中，70%乙醇定容。所得溶液稀释，4℃冰箱保存备用。
步骤（3）供试品溶液中金丝桃苷和金丝桃素含量的测定：
按照上述标准曲线色谱条件对制备的供试品溶液进行测定，利用线性回归方程，计算供试品溶液中金丝桃苷和金丝桃素的含量。
实施例4
其余步骤同实施例1。
步骤（2）.供试品溶液的制备
舒肝解郁胶囊供试品溶液的制备：舒肝解郁胶囊去胶囊壳，粉末混匀，精密称取粉末2g，置具塞锥形瓶中，加入70%乙醇25 mL，密塞，称定质量，超声提取1 h（功率：300 W，频率：40 kHz），放冷，再称定质量，用70%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，将续滤液转移至25 mL容量瓶中，70%乙醇定容。所得溶液稀释，4℃冰箱保存备用。
步骤（3）供试品溶液中金丝桃苷和金丝桃素含量的测定：
按照上述标准曲线色谱条件对制备的供试品溶液进行测定，利用线性回归方程，计算供试品溶液中金丝桃苷和金丝桃素的含量。
实施例5
其余步骤同实施例1。
步骤（2）.供试品溶液的制备
圣·约翰草提取物片供试品溶液的制备：圣·约翰草提取物片去薄膜衣，内容物研细，过5号筛（80目），精密称取粉末2 g，置具塞锥形瓶中，加入70%乙醇25 mL，密塞，称定质量，超声提取1 h（功率：300 W，频率：40 kHz），放冷，再称定质量，用70%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，将续滤液转移至25 mL容量瓶中，70%乙醇定容。所得溶液稀释，4℃冰箱保存备用。
其余步骤同实施例1。
步骤（3）供试品溶液中金丝桃苷和金丝桃素含量的测定：
按照上述标准曲线色谱条件对制备的供试品溶液进行测定，利用线性回归方程，计算供试品溶液中金丝桃苷和金丝桃素的含量。
实施例6
其余步骤同实施例1。
步骤（2）.供试品溶液的制备
贯叶金丝桃提取物供试品溶液的制备：精密称取贯叶金丝桃提取物2 g，置具塞锥形瓶中，加入70%乙醇25 mL，密塞，称定质量，超声提取1 h（功率：300 W，频率：40 kHz），放冷，再称定质量，用70%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，将续滤液转移至25 mL容量瓶中，70%乙醇定容。所得溶液稀释，4℃冰箱保存备用。
步骤（3）供试品溶液中金丝桃苷和金丝桃素含量的测定：
按照上述标准曲线色谱条件对制备的供试品溶液进行测定，利用线性回归方程，计算供试品溶液中金丝桃苷和金丝桃素的含量。
实施例1-6的测量结果如下：
表1：贯叶金丝桃药材及相关药品中金丝桃苷及金丝桃素含量测定（n＝3）
针对本发明进行的方法学考察：
精密度试验：精密吸取金丝桃苷和金丝桃素浓度分别为258 µg·mL-1和7.5 µg·mL-1的混合对照品溶液，连续进样6次，每次进样 10 µL，测定金丝桃苷和金丝桃素峰面积积分值，计算其RSD，结果分别为0.44％、1.31％（n=6），表明仪器的精密度良好。
重复性试验：精密称取贯叶金丝桃花样品粉末2 g，共5份，按“实施例1”制备供试品溶液，进样量为10 µL，记录峰面积积分值，计算贯叶金丝桃花样品的金丝桃苷和金丝桃素峰面积RSD，结果分别为：0.25%，0.47%，表明该方法重复性良好。
稳定性试验：按“实施例1”制备供试品溶液，分别在配制后0，2，4，8，12，24 h进样分析，每次进样10 µL，记录峰面积积分值，计算样品中金丝桃苷、金丝桃素峰面积RSD，结果分别为：1.35%、1.76%，表明供试品溶液在24h内稳定性良好。
加样回收率试验：取已知含量的贯叶金丝桃花样品粉末6份，每份0.25 g，分别精密加入混合对照品溶液适量，按“实施例1”制备供试品溶液，进样分析，计算加样回收率，结果见表2。
表2：加样回收率试验结果（n＝6）
综上所述，本发明测定贯叶金丝桃药材及相关药品中金丝桃苷和金丝桃素含量的RP-HPLC方法，能简便、快速、准确地同时测定贯叶金丝桃药材及相关药品中金丝桃苷和金丝桃素的含量，可以真实地反映药品的内在质量，为金丝桃苷和金丝桃素进一步的研究奠定基础，为相关领域的研究者提供方法参考。
当然，以上只是本发明的具体应用范例，本发明还有其他的实施方式，凡采用等同替换或等效变换形成的技术方案，均落在本发明所要求的保护范围内。

Claims (9)

1.一种同时测定金丝桃苷和金丝桃素含量的方法，其特征在于：包括以下步骤：
步骤（1）金丝桃苷和金丝桃素标准曲线的制备：取金丝桃苷和金丝桃素对照品，加甲醇配制成系列浓度的对照品溶液；分别注入高效液相色谱仪进行梯度洗脱，测定色谱峰面积，绘制金丝桃苷和金丝桃素的标准曲线；
步骤（2）供试品溶液的制备：取待测样品，加乙醇提取，过滤得供试品溶液；
步骤（3）供试品溶液中金丝桃苷和金丝桃素含量的测定：取供试品溶液，注入高效液相色谱仪，进行梯度洗脱，测定色谱峰面积，根据步骤（1）所得的标准曲线，计算待测样品中金丝桃苷和金丝桃素的含量；
其中，上述步骤（1）和步骤（3）中高效液相色谱条件为：
色谱柱：C18色谱柱；
检测波长：360 nm，590 nm；
柱温：18℃-25℃；流速：0.8-1.2 mL·min-1；进样量：8-12 µL；
流动相：乙腈-0.05%磷酸水溶液-0.30 mol·L-1乙酸铵缓冲液；
梯度洗脱为：
第一梯度：0-11 min，乙腈25%-0.05%磷酸水溶液75%；
第二梯度：11-18 min，乙腈90%-0.30 mol·L-1乙酸铵缓冲液10%；
第三梯度：18-22 min，乙腈25%-0.05%磷酸水溶液75%。
2.如权利要求1所述的一种同时测定金丝桃苷和金丝桃素含量的方法，其特征在于：所述0.05%磷酸水溶液的pH为2.30-2.32，所述乙酸铵缓冲液的pH为4.10-4.34。
3.如权利要求1所述的一种同时测定金丝桃苷和金丝桃素含量的方法，其特征在于：所述0.05%磷酸水溶液的pH为2.31，所述乙酸铵缓冲液的pH为4.22。
4.如权利要求1-3任一项所述的一种同时测定金丝桃苷和金丝桃素含量的方法，其特征在于：所述色谱柱为Hypersil GOLDTM C18 LC色谱柱，规格为150 mm×4.6 mm，5 µm。
5.如权利要求4所述的一种同时测定金丝桃苷和金丝桃素含量的方法，其特征在于：所述流速为1.0 mL·min-1，所述进样量为10 µL。
6.如权利要求1、 2 、3或5所述的一种同时测定金丝桃苷和金丝桃素含量的方法，其特征在于：所述步骤（2）中乙醇的浓度为70%，所述乙醇的体积与待测样品的质量比为25 mL：2g。
7.如权利要求6所述的一种同时测定金丝桃苷和金丝桃素含量的方法，其特征在于：所述步骤（2）中的提取方法为超声提取或回流提取。
8.如权利要求6所述的一种同时测定金丝桃苷和金丝桃素含量的方法，其特征在于：所述提取方法为超声提取，超声功率为300 W，超声频率为40 kHz，提取时间为1 h。
9.一种如权利要求1 、7或8所述的方法在控制贯叶金丝桃药材及相关药品质量中的应用。
CN201910570100.0A 2019-06-27 2019-06-27 一种同时测定金丝桃苷和金丝桃素含量的方法 Pending CN110346467A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910570100.0A CN110346467A (zh) 2019-06-27 2019-06-27 一种同时测定金丝桃苷和金丝桃素含量的方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910570100.0A CN110346467A (zh) 2019-06-27 2019-06-27 一种同时测定金丝桃苷和金丝桃素含量的方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN110346467A true CN110346467A (zh) 2019-10-18

Family

ID=68177187

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201910570100.0A Pending CN110346467A (zh) 2019-06-27 2019-06-27 一种同时测定金丝桃苷和金丝桃素含量的方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN110346467A (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110988194A (zh) * 2019-12-26 2020-04-10 广州白云山敬修堂药业股份有限公司 一种补肾填精中药复方制剂的检测方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107340345A (zh) * 2017-07-27 2017-11-10 贵州信邦制药股份有限公司 参茸酒中菟丝子的含量测定方法
CN107860848A (zh) * 2017-11-15 2018-03-30 成都中医药大学 一种检测鱼腥草黄酮类成分含量的hplc方法
CN107894466A (zh) * 2017-10-16 2018-04-10 贾忠 一种金桑芪抗毒制剂hplc指纹图谱的测定方法及金桑芪抗毒制剂质量控制方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107340345A (zh) * 2017-07-27 2017-11-10 贵州信邦制药股份有限公司 参茸酒中菟丝子的含量测定方法
CN107894466A (zh) * 2017-10-16 2018-04-10 贾忠 一种金桑芪抗毒制剂hplc指纹图谱的测定方法及金桑芪抗毒制剂质量控制方法
CN107860848A (zh) * 2017-11-15 2018-03-30 成都中医药大学 一种检测鱼腥草黄酮类成分含量的hplc方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
KONSTANTINA ZELIOU等: "Optimized and Validated HPLC Analysis of St. John’s Wort Extract and Final Products by Simultaneous Determination of Major Ingredients", 《JOURNAL OF CHROMATOGRAPHIC SCIENCE》 *
毛晶磊 等: "不同采收期及药用部位的长柱金丝桃中有效成分的含量变化", 《中南药学》 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110988194A (zh) * 2019-12-26 2020-04-10 广州白云山敬修堂药业股份有限公司 一种补肾填精中药复方制剂的检测方法
CN110988194B (zh) * 2019-12-26 2022-04-12 广州白云山敬修堂药业股份有限公司 一种补肾填精中药复方制剂的检测方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Xia et al. Accumulation of saponins in Panax notoginseng during its growing seasons
CN107796892B (zh) 艽龙胶囊的指纹图谱及其在质量控制与成分分析中的应用
CN105911154A (zh) 金银花中绿原酸、木犀草苷和总黄酮含量的测定方法
CN107340348B (zh) 一种白及药材hplc指纹图谱的建立方法
CN109239224A (zh) 酸枣仁水提物中9种入血成分的同时定量测定方法
CN103207255A (zh) 一种脑心通胶囊的含量检测方法
CN110441409A (zh) 一种苓桂术甘汤的质量检测方法
CN109613166A (zh) 一种首荟通便胶囊质量检测方法
CN109342591A (zh) 一种同时检测葛根中11种黄酮类成分的方法
Gong et al. Bioactivity, compounds isolated, chemical qualitative, and quantitative analysis of Cymbaria daurica extracts
CN110346467A (zh) 一种同时测定金丝桃苷和金丝桃素含量的方法
CN109991330A (zh) 一种林下山参的指纹图谱的检测方法
CN109406681A (zh) 白芷药材的uplc特征图谱构建方法和检测方法
CN109856270A (zh) 一种用高效液相色谱法同时测定华盖散配方颗粒中7个指标成分的方法
CN109187799A (zh) 一种紫苏子标准汤剂的指纹图谱建立方法及其标准指纹图谱
CN109692291A (zh) 肺力咳合剂浸膏及其用途和质量控制方法
CN111443154B (zh) 一种甘草属药用亲缘关系的研究方法
CN104155371A (zh) 治疗糖尿病的中药复方制剂消渴丸hplc指纹图谱的建立方法及其hplc指纹图谱
CN105606744A (zh) 快速测定中药知母口服给药后活性成分药代动力学的方法
CN110501433A (zh) 一种不同产地裸花紫珠药材的鉴别方法
CN115575551B (zh) 白及的检测方法
CN109939106A (zh) 驱虫斑鸠菊中分离的倍半萜类化合物在制备治疗白癜风的药物中的用途
CN103926366B (zh) 一种芪参益气滴丸有效成分的检测方法
CN102628838B (zh) 一种药材马蓝的hplc指纹图谱构建方法
CN102288712A (zh) Hplc法同时测定荜茇中胡椒碱和荜茇明宁碱含量的方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20191018