CN110261623A - 一种检测羊细粒棘球蚴病抗体间接elisa检测试剂盒及其应用 - Google Patents

一种检测羊细粒棘球蚴病抗体间接elisa检测试剂盒及其应用 Download PDF

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Abstract

本发明属于生物诊断、检测技术领域，尤其涉及一种检测羊细粒棘球蚴病抗体间接ELISA检测试剂盒及其应用。本发明的试剂盒包括细粒棘球蚴重组抗原Eg95‑5蛋白包被的96孔酶标板、血清稀释板、稀释液、阳性对照液、阴性对照液、酶标二抗结合物、洗涤液、底物显色液和终止液。本发明以重组蛋白Eg95‑5作为包被抗原能快速、简捷、灵敏的检测羊细粒棘球蚴病抗体，为羊细粒棘球蚴病的血清学检测提供重要方法。

Description

一种检测羊细粒棘球蚴病抗体间接ELISA检测试剂盒及其 应用
技术领域
本发明属于生物诊断、检测技术领域，尤其涉及一种检测羊细粒棘球蚴病抗体间接ELISA检测试剂盒及其应用。
背景技术
细粒棘球蚴病(echinococcosis)，又称囊型包虫病，是由细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus,Eg)感染动物机体引起的一种人畜共患寄生虫病。幼虫寄生于家畜的肝、肺等脏器，其中羊感染最为严重，成虫寄生于犬科动物、猫科动物及鬣狗科动物小肠中，人可通过接触病犬感染该病。细粒棘球蚴病流行范围广，我国是该病高发国家之一，给畜牧业养殖带来了巨大损害。
该病的检测方法从最初的镜检法发展到现在的分子生物学及免疫学检测方法，检测效率及准确度越来越高。其中ELISA检测方法灵敏度高，特异性强，操作简便，被越来越多的用于检测。
Eg95是良好的保护性抗原，在细粒棘球绦虫的生长发育中发挥重要作用。Eg95基因是一个家族基因，主要包括Eg95-1、Eg95-2A、Eg95-2B、Eg95-3、Eg95-4、Eg95-5、Eg95-6、Eg95-7和Eg95-XJ等9个家族成员，其中，Eg95-7是一个假基因，Eg95-2、Eg95-3、Eg95-4只存在于六钩蚴期间，Eg95-6只存在于成虫阶段，Eg95-5在不同阶段均可检测到。Eg95-5较为保守，因此，本发明中针对该目的蛋白研究对细粒棘球蚴病的感染检测具有意义重大。
发明内容
针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种检测羊细粒棘球蚴病抗体间接ELISA检测试剂盒及其应用。
本发明是这样实现的，一种检测羊细粒棘球蚴病抗体间接ELISA检测试剂盒，其特征在于：所述检测试剂盒包括羊细粒棘球蚴重组抗原Eg95-5蛋白包被酶标板、血清稀释板、稀释液、阳性对照液、阴性对照液、酶标二抗结合物、洗涤液、底物显色液和终止液。
进一步，所述酶标二抗结合物为辣根过氧化物酶标记的兔抗羊IgG。
进一步，抗原包被的方法为：将重组蛋白Eg95-5用碳酸氢钠溶液稀释至0.5-2μg/mL，包被酶标板，置于4℃中包被12h-18h。
进一步，所述稀释液和洗涤液均为0.01％-0.1％Tween-20的磷酸盐缓冲液。
进一步，所述阴性对照液为诊断健康未患细粒棘球蚴病的羊的血清。
进一步，所述阳性对照液为确诊有细粒棘球蚴感染的羊的血清。
进一步，所述检测试剂盒的检测方法包括：
步骤1：将待测血清、阳性对照液和阴性对照液加入至血清稀释板，混匀，并移至抗原包被板，常规温度条件下孵育；
步骤2：洗涤，加入酶标二抗结合物，常规温度条件下孵育；
步骤3：洗涤，加入底物显色液，常规温度条件下避光显色；
步骤4：加入终止液，利用酶标仪测定吸光值。
如上述的检测羊细粒棘球蚴病抗体间接ELISA检测试剂盒在检测羊细粒棘球蚴病抗体中的应用。
综上所述，本发明的优点及积极效果为：
本发明特异性强、敏感性高、稳定性好，可快速、简捷、灵敏的检测出羊血清中抗体有无，用于检测羊血清中细粒棘球蚴病抗体，适用于羊群感染状况监测和评估、发现隐性感染和进出境检疫。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例对本发明进行进一步详细说明，各实施例及试验例中所用的设备和试剂如无特殊说明，均可从商业途径得到。此处所描述的具体实施例仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
本发明披露了一种检测羊细粒棘球蚴病抗体间接ELISA检测试剂盒及其应用。本发明取羊细粒棘球蚴病阳性血清和阴性血清，以Eg95-5蛋白作为抗原制备羊细粒棘球蚴抗体间接ELISA检测试剂盒，来检测羊细粒棘球蚴病血清抗体样品。在此过程中，优化抗原包被浓度、待检血清和酶标二抗稀释比例、封闭液的种类和封闭时间、待检血清和酶标二抗孵育时间及显色时间。在确定最佳反应条件时，通常选择阳性OD值/阴性OD值(P/N值)比较大时为最佳反应条件。本发明涉及的ELISA 96孔板购于Costar公司；兔抗羊HRP-IgG购于康为世纪生物科技有限公司；底物显色液和终止液购于北京索莱宝科技有限公司；细粒棘球蚴病阳性血清、阴性血清采自屠宰场。
具体实验方案及实验结果如下各实施例所示。
实施例1间接ELISA及条件优化
1.制备Eg95-5重组蛋白
参照发明人于2019年5月发表于《黑龙江畜牧兽医》期刊的文献《细粒棘球绦虫Eg95-5蛋白生物信息学分析及鉴定》一文中的方法制备、纯化Eg95-5重组蛋白。
2.间接ELISA
于-80℃冰箱取出已纯化好的Eg95蛋白，放于-20℃冰箱2h之后放于4℃冰箱融化，备用。间接ELISA步骤如下：
包被：将重组蛋白Eg95-5用50mM碳酸氢钠溶液(pH＝9.6)稀释至0.5-4μg/mL，包被酶标板，每孔100μl，置于4℃中包被12h-18h。
封闭：包被完成后，取出，弃包被液，用配置好的0.05％PBST(pH＝7.4)洗涤3次，每次300μL/孔，静置3min，最后一次拍板，加入2％BSA封闭液，每孔200μL，置于37℃恒温培养箱封闭。
一抗孵育：取出，弃封闭液，用0.05％PBST洗涤3次，每次300μL/孔，静置3min，最后一次拍板，加入稀释好的阴阳性血清(临床与商品化试剂盒共同鉴定)，每孔100μL，置于37℃恒温培养箱。
酶标二抗孵育：取出，弃血清，用0.05％PBST洗涤3次，每次300μL/孔，静置3min，最后一次拍板，将辣根过氧化物酶(HRP)标记的兔抗羊IgG稀释成一定比例，每孔100μL，置于37℃恒温培养箱。
显色：取出，弃二抗，用0.05％PBST洗涤3次，每次300μL/孔，静置3min，最后一次拍板，加入底物显色液，每孔100μL，置37℃避光恒温培养箱显色。
终止：取出加入终止液(2M硫酸)，每孔50μL。
检测：酶标仪测定OD450nm值。
3.间接ELISA条件优化
3.1蛋白浓度及一抗、二抗稀释度的确定
将Eg95-5蛋白使用ELISA包被液按0.5μg/mL、1μg/mL、2μg/mL、4μg/mL稀释，待检血清使用0.05％PBST按1:20、1:50、1:100、1:200进行稀释，HRP标记的兔抗羊IgG使用0.05％PBST按1:5000、1:10000、1:20000进行稀释，使用方阵滴定法，对蛋白浓度、一抗和二抗稀释度进行试验，测量OD值。结果显示，Eg95蛋白的稀释浓度为0.5-2μg/mL，待检血清稀释度为1:20-100，兔抗羊IgG-HRP稀释度为1:10000-20000，试验效果较佳。本试验取Eg95蛋白的稀释浓度为1μg/mL，待检血清稀释度为1:20，兔抗羊IgG-HRP稀释度为1:20000时，试验结果最佳，P/N值最大，为9.657，详细结果见表1。
表1抗原浓度、一抗及二抗稀释度的测定(OD450nm)
3.2最佳封闭液及封闭时间的确定
本发明选取了三种封闭液，分别为5％脱脂奶粉、2％BSA和1％明胶放入37℃恒温培养箱进行封闭。封闭时间分别按照0.5h、1h、1.5h、2h放入37℃恒温培养箱进行封闭。结果显示当封闭液为2％BSA时，P/N值最大，为8.791，详细结果见表2。
表2最佳封闭液的确定
确定封闭液为2％BSA，结果显示当封闭时间为2h时，P/N值最大，为7.93，详细结果见表3。
表3最佳封闭时间的确定
3.3一抗孵育时间的确定
用浓度为1μg/mL的Eg95-5蛋白包被，封闭液使用2％BSA封闭2h，将待检血清按1:20稀释，37℃分别孵育0.5h、1h、1.5h、2h进行实验。结果显示当待检血清孵育时间为0.5h时，P/N值最大，为8.651，详细结果见表4。
表4一抗孵育时间的确定
3.4二抗孵育时间的确定
用浓度为1μg/mL的Eg95-5蛋白包被，封闭液使用2％BSA封闭2h，将待检血清按1:20稀释，37℃孵育0.5h，将二抗按1:20000稀释，37℃分别孵育0.5h、1h、1.5h、2h进行实验。结果显示当二抗孵育时间为0.5h时，P/N值最大，为11.234，详细结果见表5。
3.5显色液时间的确定
用浓度为1μg/mL的Eg95-5蛋白包被，封闭液使用2％BSA封闭2h，将待检血清按1:20稀释，37℃孵育0.5h，将二抗按1:20000稀释，37℃孵育0.5h，加入底物显色液37℃分别避光显色5min、10min、15min、20min进行实验。结果显示当显色时间为15min时，P/N值最大，为8.416，详细结果见表6。
表6显色液时间的确定
3.6临界值(Cut-off值)的确定
选取30份阴性的羊血清，进行临界值(Cut-off值)的确定实验。蛋白浓度为1μg/mL，4℃，过夜；2％BSA，37℃，2h；血清1:20，37℃，0.5h；二抗1:20000，37℃，0.5h；显色液37℃避光显色15min，加入终止液，测定吸光度。对所得数据进行分析，分别计算出30份血清吸光值的平均值(X)及标准差(S)。计算X值、S值、X+2S及X+3S值，即当OD450nm>X+3S时，该血清判断为阳性，当OD450nm<X+2S时，该血清判断为阴性，当X+2S≤OD450nm≤X+3S时，该血清为可疑样本，复检，结果仍在可疑区间，则判定为阳性。
结果见表7，结果显示30份血清OD450nm平均值(X)为0.31，标准差值(S)为0.18，X+2S为0.67，X+3S为0.85；当OD450nm>0.85时，该血清判断为阳性，当OD450nm<0.67时，该血清判断为阴性，当0.67≤OD450nm≤0.85时，该血清为可疑样本，复检，结果仍在可疑区间，则判定为阳性。
表7间接ELISA临界值(Cut-off值)
实施例2羊细粒棘球蚴抗体间接ELISA检测试剂盒检测方法
试剂盒包括羊细粒棘球蚴重组抗原Eg95-5蛋白包被酶标板、血清稀释板、稀释液、阳性对照液、阴性对照液、酶标二抗结合物、洗涤液、TMB单组份底物显色液和终止液。稀释液为0.01％-0.1％Tween-20的磷酸盐缓冲液，洗涤液0.01％-0.1％Tween-20的磷酸盐缓冲液(pH＝7.4)，待检血清稀释度为1:20，待检血清反应条件为37℃下孵育0.5h。酶标二抗结合物为辣根过氧化物酶标记的兔抗羊IgG稀释度为1:20000，酶标二抗反应条件为37℃下孵育0.5h。底物显色液为TMB单组份底物显色液，终止液为2mol/L的硫酸溶液。阴性对照液为诊断健康未患细粒棘球蚴病的羊的血清，阳性对照液为确诊有细粒棘球蚴感染的羊的血清。
(1)从冰箱取出真空抗原包被板，打开包装后至室温；同时将待检血清分别稀释20倍；待检样品设1-2孔，阴性对照和阳性对照各设2孔，将稀释好的待检血清和阴、阳性对照各取100μL加入到血清稀释板，充分混匀后，每孔100μL移至抗原包被板孔中，盖上封板膜，常规温度条件下孵育30min，本实施例中选择37℃孵育30min；
(2)揭开封板膜，弃掉板孔中的溶液，每孔加入洗涤液300μL，静置2-3min后倒掉，再在吸水纸上拍干，洗涤3-4次；
(3)将每孔加稀释成20000倍的兔抗羊酶标二抗100μL，盖上封板膜，常规温度条件下孵育30min，本实施例中选择37℃孵育30min；
(4)洗涤过程同(2)；
(5)每孔先加底物显色液100μL，常规温度下避光显色，本实施例中选择37℃避光显色15min；
(6)每孔加终止液50μL，10min内测定结果；
(7)利用酶标仪在OD450nm测定光吸收OD值；
结果判定标准：当OD450nm>0.85时，该血清判断为阳性，当OD450nm<0.67时，该血清判断为阴性，当0.67≤OD450nm≤0.85时，该血清为可疑样本，复检，结果仍在可疑区间，则判定为阳性。
实施例3羊细粒棘球蚴抗体间接ELISA检测试剂盒效果评价
1.敏感性检测
设计试验检测建立的间接ELISA检测方法对阳性血清的敏感性，将细粒棘球蚴病阳性血清按1:10、1:20、1:40、1:80、1:160、1:320、1:640、1:1280进行梯度稀释，每个梯度做3个平行，其他步骤按照采用已经建立的ELISA检测方法，于OD450nm下测定吸光度。
检测结果见表8，结果显示，Eg95-5抗原所能检测到的最低阳性血清稀释比为1:160。
表8间接ELISA敏感性的检测结果
2.符合率
将采集的192份绵羊待检血清按比例稀释，同时使用商品化试剂盒和本研究建立的间接ELISA检测方法进行检测，测定吸光度后，统计计算本间接ELISA检测方法接准确性及符合率。
检测结果见表9，结果显示，商品化试剂盒检测出8份阳性样品，本方法检测出6份阳性样品，阳性符合率为75％，阴性符合率为98％，总体符合率为97％。本发明能够用来进行临床羊细粒棘球蚴病的诊断。
表9间接ELISA符合率的检测结果
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (8)

1.一种检测羊细粒棘球蚴病抗体间接ELISA检测试剂盒，其特征在于：所述检测试剂盒包括羊细粒棘球蚴重组抗原Eg95-5蛋白包被酶标板、血清稀释板、稀释液、阳性对照液、阴性对照液、酶标二抗结合物、洗涤液、底物显色液和终止液。
2.根据权利要求1所述的一种检测羊细粒棘球蚴病抗体间接ELISA检测试剂盒，其特征在于：所述酶标二抗结合物为辣根过氧化物酶标记的兔抗羊IgG。
3.根据权利要求1所述的一种检测羊细粒棘球蚴病抗体间接ELISA检测试剂盒，其特征在于，抗原包被的方法为：将重组蛋白Eg95-5用碳酸氢钠溶液稀释至0.5-2μg/mL，包被酶标板，包被12h-18h。
4.根据权利要求1所述的一种检测羊细粒棘球蚴病抗体间接ELISA检测试剂盒，其特征在于：所述稀释液和洗涤液均为0.01％-0.1％Tween-20的磷酸盐缓冲液。
5.根据权利要求1所述的一种检测羊细粒棘球蚴病抗体间接ELISA检测试剂盒，其特征在于：所述阴性对照液为诊断健康未患细粒棘球蚴病的羊的血清。
6.根据权利要求1所述的一种检测羊细粒棘球蚴病抗体间接ELISA检测试剂盒，其特征在于：所述阳性对照液为确诊有细粒棘球蚴感染的羊的血清。
7.根据权利要求1-6任一所述的一种检测羊细粒棘球蚴病抗体间接ELISA检测试剂盒，其特征在于，所述检测试剂盒的检测方法包括：
步骤1：将待测血清、阳性对照液和阴性对照液加入至血清稀释板中，混匀，并移至抗原包被板，常规温度条件下孵育；
步骤2：洗涤，加入酶标二抗结合物，常规温度条件下孵育；
步骤3：洗涤，加入底物显色液，常规温度条件下避光显色；
步骤4：加入终止液，利用酶标仪测定吸光值。
8.如权利要求7所述的检测羊细粒棘球蚴病抗体间接ELISA检测试剂盒在检测羊细粒棘球蚴病抗体中的应用。
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Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111665367A (zh) * 2020-07-17 2020-09-15 青海省人民医院 一种诊断泡型棘球蚴病的elisa方法
CN111896744A (zh) * 2020-07-28 2020-11-06 重庆澳龙生物制品有限公司 一种羊棘球蚴抗体elisa检测试剂盒及其制备方法和应用
CN113341160A (zh) * 2021-06-09 2021-09-03 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心) 一种检测犬、羊等家畜细粒棘球绦虫感染的elisa试剂盒
CN116223799A (zh) * 2022-12-29 2023-06-06 北京亿森宝生物科技有限公司 羊包虫病抗体微孔板式化学发光检测试剂盒及应用

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107831319A (zh) * 2017-12-18 2018-03-23 中国农业科学院兰州兽医研究所 一种羊棘球蚴Eg95蛋白抗体间接ELISA检测试剂盒

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107831319A (zh) * 2017-12-18 2018-03-23 中国农业科学院兰州兽医研究所 一种羊棘球蚴Eg95蛋白抗体间接ELISA检测试剂盒

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
MAJID PIRESTANI等: "Evaluation of Immunogenicity of Novel Isoform of EG95 (EG95-5G1) From Echinococcus granulosus", 《IRANIAN J PARASITOL 》 *
胡尊楠等: "细粒棘球绦虫 Eg95－5 蛋白生物信息学分析及鉴定", 《黑龙江畜牧兽医》 *

Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111665367A (zh) * 2020-07-17 2020-09-15 青海省人民医院 一种诊断泡型棘球蚴病的elisa方法
CN111896744A (zh) * 2020-07-28 2020-11-06 重庆澳龙生物制品有限公司 一种羊棘球蚴抗体elisa检测试剂盒及其制备方法和应用
CN111896744B (zh) * 2020-07-28 2022-02-22 重庆澳龙生物制品有限公司 一种羊棘球蚴抗体elisa检测试剂盒及其制备方法和应用
CN113341160A (zh) * 2021-06-09 2021-09-03 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心) 一种检测犬、羊等家畜细粒棘球绦虫感染的elisa试剂盒
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