CN110251539A - 一种马桑树皮总多酚的分离纯化方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种马桑树皮总多酚的分离纯化方法,包括以下步骤:将马桑树皮粉碎后得到马桑树皮粉,往马桑树皮粉中加入乙醇水溶液,常温浸泡后升温提取,提取完毕后过滤,得马桑树皮乙醇提取液和提取渣;往提取渣中加入酸性混合液,在超声条件下浸泡,浸泡完毕后过滤,得到酸性提取液;合并马桑树皮乙醇提取液和酸性提取液,得到总提取液;将总提取液浓缩后以水稀释,然后萃取除杂,得到马桑树皮稀释液;采用大孔树脂对马桑树皮稀释液进行纯化,收集洗脱液,减压浓缩干燥后即得马桑树皮总多酚。本发明的工艺操作简单,马桑树皮总多酚的分离纯化效率高,得到的总多酚纯度达到80%以上,适合于工业化生产,具有广泛的应用前景。
Description
技术领域
本发明属于植物提取技术领域,具体涉及一种马桑树皮总多酚的分离纯化方法。
背景技术
马桑(Coriaria nepalensis Wall.)为马桑科马桑属落叶灌木,又名千年红、黑龙须、野马桑、水马桑,分布于地中海以东及中南美洲国家,我国主要分布于西部各省市,如西藏、四川、甘肃、陕西等地,海拔400-3200米。马桑的根、茎、叶及果实可做药用,治疗精神分裂症、黄水疮、疥癣、烧伤、结膜炎、跌倒损伤、风湿麻木等。
多酚是一类含有多元酚类物质的总称,作为植物次生代谢产物之一,在自然界中分布广泛。多酚类物质具有较强的抗氧化作用,多应用于日化、食品、药品等行业中,尤其是在医药生产中,多酚类物质被报道具有抗肿瘤、抗炎、抗菌、降血压、降血糖等功效。
现有的多酚提取工艺有溶剂提取法和离子沉淀法等,溶剂提取法虽然稳定可靠,但是提取率低,产品的纯度也低,产品在提取过程中容易氧化;离子沉淀法虽然减少了溶剂用量,但是损失较大,提取效率低。基于此,本发明提出了一种马桑树皮总多酚的分离纯化方法,以马桑树皮为原料,建立了有效的马桑树皮总多酚分离纯化工艺条件,以期克服现有技术中多酚提取的缺陷,为马桑资源的开发利用提供参考,为工业生产开辟了新的天然多酚资源。
发明内容
本发明提供了一种马桑树皮总多酚的分离纯化方法,解决了现有技术中多酚提取时提取率低、产品纯度也低的问题,为马桑资源的开发利用提供参考,为工业生产开辟了新的天然多酚资源。
一种马桑树皮总多酚的分离纯化方法,包括以下步骤:
步骤1,将马桑树皮粉碎后过80目筛,得到马桑树皮粉,往马桑树皮粉中加入乙醇水溶液,常温浸泡后升温提取,提取完毕后过滤,得马桑树皮乙醇提取液和提取渣;
步骤2,往提取渣中加入酸性混合液,在超声条件下浸泡,浸泡完毕后过滤,得到酸性提取液;
其中,酸性混合液由三氟乙酸、乙酸与水按照5-8:1-2:50的体积比混合而成;
步骤3,合并马桑树皮乙醇提取液和酸性提取液,得到总提取液;将总提取液浓缩后以水稀释,然后用等体积的萃取液进行萃取,除去油脂、小分子萜类等小极性杂质,水相即为马桑树皮稀释液;
其中,萃取液由石油醚与乙酸乙酯按照1-2:1的体积比组成;
步骤4,采用大孔树脂对马桑树皮稀释液进行纯化,收集洗脱液,减压浓缩干燥后即得马桑树皮总多酚。
优选的,步骤1中马桑树皮粉与乙醇水溶液的用量比为1g:10-25mL。
优选的,步骤1中乙醇水溶液的质量浓度为50-80%,常温浸泡时间为8-10h、升温提取温度为60-80℃,提取次数为1-3次,每次提取时间为20-40min。
优选的,步骤2中提取渣与酸性混合液的用量比为1g:10-20mL。
优选的,步骤2中超声功率为500-1000W,超声时间为2-3h。
优选的,步骤3中马桑树皮稀释液的浓度为1-3mg/mL。
优选的,步骤4中的大孔树脂为D101、X-5、AB-8、HP-20、LSA-40、HPD100中的任意一种。
优选的,步骤4中采用大孔树脂对马桑树皮稀释液进行纯化时,上样1-3BV体积后以质量浓度为50-90%的乙醇水溶液进行洗脱,洗脱液用量为2-4BV。
与现有技术相比,本发明的有益效果在于:
本发明以乙醇水溶液为提取溶剂对马桑树皮中的多酚进行提取,将马桑树皮中大部分的多酚类物质均提取到乙醇提取液中,然后采用酸性混合液对上述提取得到的提取渣进行提取,将提取渣中剩余的多酚类物质也提取到酸性混合液中,提高了多酚的提取率;
此外,本发明在对提取渣进行提取时,采用三氟乙酸、乙酸、水配制成的混合溶液进行提取,提取渣中的多酚被分离出来,然后将乙醇提取液和酸性提取液混合,酸性提取液中三氟乙酸能够对多酚形成保护,避免其被氧化分解,从而影响其含量。
本发明采用石油醚与乙酸乙酯组成的萃取液对混合后的乙醇提取液和酸性提取液进行萃取,除去一些小极性杂质,如油脂及小分子萜类物质等,萃取液继续采用大孔吸附树脂进行纯化,得到高纯度的马桑树皮总多酚。
本发明的工艺操作简单,马桑树皮总多酚的分离纯化效率高,得到的总多酚纯度达到80%以上,适合于工业化生产,具有广泛的应用前景。
具体实施方式
为了使本领域技术人员更好地理解本发明的技术方案能予以实施,下面结合具体实施例对本发明作进一步说明,但所举实施例不作为对本发明的限定。
下述各实施例中所述实验方法如无特殊说明,均为常规方法;所述试剂和材料,如无特殊说明,均可在市场上购买得到。
实施例1
一种马桑树皮总多酚的分离纯化方法,包括以下步骤:
步骤1,将10g马桑树皮粉碎后得到马桑树皮粉,往马桑树皮粉中加入100mL质量浓度为50%的乙醇水溶液,常温浸泡10h后升温至60℃,提取3次,每次提取20min,提取完毕后过滤,得马桑树皮乙醇提取液和提取渣;
步骤2,按照1g:10mL的比例往提取渣中加入酸性混合液,在500W的超声功率下超声3h,超声完毕后过滤,得到酸性提取液;
其中,酸性混合液由三氟乙酸、乙酸与水按照5:1:50的体积比混合而成;
步骤3,合并马桑树皮乙醇提取液和酸性提取液,得到总提取液;将总提取液浓缩后加水稀释,然后用萃取液进行萃取,除去小极性杂质,得到浓度为1mg/mL的马桑树皮稀释液;
其中,萃取液由石油醚与乙酸乙酯按照1:1的体积比组成;
步骤4,采用D101大孔树脂对马桑树皮稀释液进行纯化,上样1BV体积后以质量浓度为50%的乙醇水溶液进行洗脱,洗脱液用量为2BV,收集洗脱液,减压浓缩干燥后即得1.903g的马桑树皮总多酚。
实施例2
一种马桑树皮总多酚的分离纯化方法,包括以下步骤:
步骤1,将10g马桑树皮粉碎后得到马桑树皮粉,往马桑树皮粉中加入150mL质量浓度为60%的乙醇水溶液,常温浸泡9h后升温至70℃,提取2次,每次提取30min,提取完毕后过滤,得马桑树皮乙醇提取液和提取渣;
步骤2,按照1g:15mL的比例往提取渣中加入酸性混合液,在800W的超声功率下超声2.5h,超声完毕后过滤,得到酸性提取液;
其中,酸性混合液由三氟乙酸、乙酸与水按照6:1.5:50的体积比混合而成;
步骤3,合并马桑树皮乙醇提取液和酸性提取液,得到总提取液;将总提取液浓缩后水稀释,然后用萃取液进行萃取,除去小极性杂质,得到浓度为2mg/mL的马桑树皮稀释液;
其中,萃取液由石油醚与乙酸乙酯按照2:1的体积比组成;
步骤4,采用AB-8大孔树脂对马桑树皮稀释液进行纯化,上样2BV体积后以质量浓度为70%的乙醇水溶液进行洗脱,洗脱液用量为3BV,收集洗脱液,减压浓缩干燥后即得1.95g的马桑树皮总多酚。
实施例3
一种马桑树皮总多酚的分离纯化方法,包括以下步骤:
步骤1,将10g马桑树皮粉碎后得到马桑树皮粉,往马桑树皮粉中加入250mL质量浓度为80%的乙醇水溶液,常温浸泡8h后升温至80℃,提取1次,提取40min,提取完毕后过滤,得马桑树皮乙醇提取液和提取渣;
步骤2,按照1g:20mL的比例往提取渣中加入酸性混合液,在1000W的超声功率下超声2h,超声完毕后过滤,得到酸性提取液;
其中,酸性混合液由三氟乙酸、乙酸与水按照8:2:50的体积比混合而成;
步骤3,合并马桑树皮乙醇提取液和酸性提取液,得到总提取液;将总提取液浓缩后加水稀释,然后用萃取液进行萃取,除去小极性杂质,得到浓度为3mg/mL的马桑树皮稀释液;
其中,萃取液由石油醚与乙酸乙酯按照2:1的体积比组成;
步骤4,采用HPD100大孔树脂对马桑树皮稀释液进行纯化,上样3BV体积后以质量浓度为90%的乙醇水溶液进行洗脱,洗脱液用量为4BV,收集洗脱液,减压浓缩干燥后即得1.928g的马桑树皮总多酚。
为了进一步说明本发明的效果,本发明还设置了对比例,具体如下。
对比例1
一种马桑树皮总多酚的分离纯化方法,包括以下步骤:
步骤1,将10g马桑树皮粉碎后得到马桑树皮粉,往马桑树皮粉中加入100mL质量浓度为50%的乙醇水溶液,常温浸泡10h后升温至60℃,提取3次,每次提取20min,提取完毕后过滤,得马桑树皮乙醇提取液;
步骤2,将马桑树皮乙醇提取液浓缩后加水稀释,然后用萃取液进行萃取,除去小极性杂质,得到浓度为1mg/mL的马桑树皮稀释液;
其中,萃取液由石油醚与乙酸乙酯按照1:1的体积比组成;
步骤3,采用D101大孔树脂对马桑树皮稀释液进行纯化,上样1BV体积后以质量浓度为50%的乙醇水溶液进行洗脱,洗脱液用量为2BV,收集洗脱液,减压浓缩干燥后即得1.615g的马桑树皮总多酚。
对比例2
一种马桑树皮总多酚的分离纯化方法,包括以下步骤:
步骤1,将10g马桑树皮粉碎后得到马桑树皮粉,往马桑树皮粉中加入100mL质量浓度为50%的乙醇水溶液,常温浸泡10h后升温至60℃,提取3次,每次提取20min,提取完毕后过滤,得马桑树皮乙醇提取液;
步骤2,将马桑树皮乙醇提取液浓缩后加水稀释,得到浓度为1mg/mL的马桑树皮稀释液;
步骤3,采用D101大孔树脂对马桑树皮稀释液进行纯化,上样1BV体积后以质量浓度为50%的乙醇水溶液进行洗脱,洗脱液用量为2BV,收集洗脱液,减压浓缩干燥后即得1.687g的马桑树皮总多酚。
对实施例1-3和对比例1-2提取出的总多酚的提取率和纯度进行检测,具体结果见表1,其中,总多酚纯度采用福林酚法以没食子酸为标准进行总多酚含量测定。
表1总多酚性能参数
项目 | 提取率(mg/g) | 纯度(%) |
实施例1 | 190.3 | 83.6 |
实施例2 | 195.0 | 85.7 |
实施例3 | 192.8 | 83.5 |
对比例1 | 161.5 | 84.2 |
对比例2 | 168.7 | 79.3 |
从表1可以看出,实施例1-3提取出的总多酚的提取率和纯度均较高。对比例1中总多酚的提取率低,纯度和实施例1-3相当,这是因为对比例1中对乙醇提取渣没有进行二次提取,从而导致部分总多酚损失在提取渣中;对比例2中总多酚提取率较实施例1-3低,但较对比例1高,且对比例2中总多酚的纯度相对较低,这是因为对比例2中既没有对乙醇提取渣没有进行二次提取,也没有对乙醇提取液进行萃取,从而使一些小极性杂质保留在提取液中,大孔树脂处理也不能完全将其除去,从而使最终得到的总多酚的纯度低,但是因为含有部分杂质,因此提取率较对比例1率高。
本发明的描述了优选的实施例,但本领域内的技术人员一旦得知了基本创造性概念,则可对这些实施例作出另外的变更和修改。所以,所附权利要求意欲解释为包括优选实施例以及落入本发明范围的所有变更和修改。
显然,本领域的技术人员可以对本发明进行各种改动和变型而不脱离本发明的精神和范围。这样,倘若本发明的这些修改和变型属于本发明权利要求及其等同技术的范围之内,则本发明也意图包含这些改动和变型在内。
Claims (8)
1.一种马桑树皮总多酚的分离纯化方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤1,将马桑树皮粉碎后得到马桑树皮粉,往马桑树皮粉中加入乙醇水溶液,常温浸泡后升温提取,提取完毕后过滤,得马桑树皮乙醇提取液和提取渣;
步骤2,往提取渣中加入酸性混合液,在超声条件下浸泡,浸泡完毕后过滤,得到酸性提取液;
其中,酸性混合液由三氟乙酸、乙酸与水按照5-8:1-2:50的体积比混合而成;
步骤3,合并马桑树皮乙醇提取液和酸性提取液,得到总提取液;将总提取液浓缩后以水稀释,然后用萃取液进行萃取,除去小极性杂质,水相即为马桑树皮稀释液;
其中,萃取液由石油醚与乙酸乙酯按照1-2:1的体积比混合而成;
步骤4,采用大孔树脂对马桑树皮稀释液进行纯化,收集洗脱液,减压浓缩干燥后即得马桑树皮总多酚。
2.根据权利要求1所述的马桑树皮总多酚的分离纯化方法,其特征在于,步骤1中马桑树皮粉与乙醇水溶液的用量比为1g:10-25mL。
3.根据权利要求1所述的马桑树皮总多酚的分离纯化方法,其特征在于,步骤1中乙醇水溶液的质量浓度为50-80%,常温浸泡时间为8-10h、升温提取温度为60-80℃,提取次数为1-3次,每次提取时间为20-40min。
4.根据权利要求1所述的马桑树皮总多酚的分离纯化方法,其特征在于,步骤2中提取渣与酸性混合液的用量比为1g:10-20mL。
5.根据权利要求1所述的马桑树皮总多酚的分离纯化方法,其特征在于,步骤2中超声功率为500-1000W,超声时间为2-3h。
6.根据权利要求1所述的马桑树皮总多酚的分离纯化方法,其特征在于,步骤3中马桑树皮稀释液的浓度为1-3mg/mL。
7.根据权利要求1所述的马桑树皮总多酚的分离纯化方法,其特征在于,步骤4中的大孔树脂为D101、X-5、AB-8、HP-20、LSA-40、HPD100中的任意一种。
8.根据权利要求1所述的马桑树皮总多酚的分离纯化方法,其特征在于,步骤4中采用大孔树脂对马桑树皮稀释液进行纯化时,上样1-3BV体积后以质量浓度为50-90%的乙醇水溶液进行洗脱,洗脱液用量为2-4BV。
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CN107468731A (zh) * | 2017-07-12 | 2017-12-15 | 浙江理工大学 | 一种白簕叶片中总多酚分离纯化工艺 |
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