CN110250007A

CN110250007A - 一种用于花生小孢子愈伤再分化的培养基

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Publication number: CN110250007A
Application number: CN201910680111.4A
Authority: CN
Inventors: 林祥艳
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2019-07-26
Filing date: 2019-07-26
Publication date: 2019-09-20

Abstract

本发明公开了一种用于花生小孢子愈伤再分化的培养基，该培养基由一定配比的KNO₃、NH₄NO₃、MgSO₄·7H₂O、NaH₂PO₄·H₂O、KI、H₃BO₃、MnSO₄·4H₂O、ZnSO₄·7H₂O等微量元素、葡萄糖酸钙、甘氨酸铁、肌醇、烟酸、盐酸吡哆醇、盐酸硫胺素、苏氨酸、苯丙氨酸、谷胱甘肽、天门冬酰胺、阿魏酸、6‑BA、KT‑30、康多酚、褪黑素、氢化可的松、腐胺、碳纳米管、麦芽糖、聚乙烯醇、花生秧浸提液和琼脂组成。利用本发明的培养基对花生小孢子愈伤组织进行分化培养，首次获得了完整的再生植株，平均绿苗分化率达到12.95%，为花生游离小孢子培养体系的建立提供了技术支持。

Description

一种用于花生小孢子愈伤再分化的培养基

技术领域

本发明属于大田作物培育技术领域，具体涉及一种用于花生小孢子愈伤再分化的培养基。

背景技术

花生（Arachis hypogaea L.）又名长生果、落花生，豆科一年生草本植物，是我国重要油料作物和经济作物。花生含油率为50%左右，在几种主要油料作物中，花生的油脂含量仅次于芝麻，而高于油菜籽、大豆和棉籽。花生本身也是高蛋白、高碳水化合物的植物性食物。花生中含有25%~35%的蛋白，其营养价值在植物性蛋白质中仅次于大豆蛋白。花生中含有大量人体所需的氨基酸及不饱和脂肪酸，不含胆固醇和反式脂肪酸。花生富含微量营养素，含有13种维生素和26种矿物元素，特别是维生素E、烟酸、叶酸、维生素B1、镁、钙、铜、钾等微量营养素的含量丰富。花生另一个显著的特点是富含植物活性化合物，如植物固醇、皂角苷、白藜芦醇、抗氧化剂等，藜芦醇是葡萄含量的908倍。花生集营养、保健和防病功能于一身，对平衡膳食、预防心血管病、糖尿病和肥胖，抑制癌细胞生长和抗衰老具有重要作用。花生是大宗的优质蛋白原料，发展花生产业有助于满足中国食物和饲料蛋白不断增长的需求。花生也是国际公认的豆科固氮作物，可以在土壤贫瘠和气候较为干旱的地方种植。种植花生不仅能减少化肥的使用，还能改善土壤和生态环境，防治荒漠化，有利于农业的可持续发展。

中国是花生的生产和出口大国，从市场对花生总量的需求来看，我国应继续推进高产、高油花生品种的发展。一方面，花生作为净出口农产品和优质食用油原料，国内外市场需求量均不断增大，另一方面，花生加工市场空间巨大，客观上增加了食用花生的需求量。因此，今后花生作为营养食品开发利用的程度将进一步扩大，同时将促进更大的花生产量需求。从不同消费方式对品质的要求来看，中国虽然在花生高产育种和早熟育种方面有较大进展，但品质育种与发达国家有较大差距。优质专用型花生新品种的选育成为品质育种的主要目标，例如高亚油酸含量花生、高蛋白含量花生、高锌高硒花生等保健型花生的选育。从高产稳产以及优质品种对抗逆性的依赖来看，选育高抗性的花生品种、减少农药用量、降低花生农残及黄曲霉含量是我国扩大花生出口和实现绿色生态化发展的育种方向。我国花生多种植在土壤瘠薄、其它作物不宜生长的土地上，且常年连作，导致病虫害的发生非常严重，造成巨大的经济损失。因此增强花生抗逆性是实现高产稳产、优质的基础，培育高抗性的花生品种对减少农药残留、保障花生质量至关重要。

近年来，我国的花生育种工作虽然取得了长足的进展，但花生是闭花授粉作物，天然杂交率低，杂种优势不明显，常规的育种手段进程缓慢，育种效率不高，已经不能满足人们需求。随着生物技术在花生育种上的应用，丰富了花生的研究内容，推动着花生育种研究向更深层次发展。

单倍体是指仅携有配子染色体数目的个体，在作物育种实践和遗传育种理论研究中均具有重要意义。单倍体经染色体加倍即可获得纯合的双单倍体。在育种实践中，对单倍体进行染色体加倍当代就可以获得纯系即双单倍体群体，而利用常规育种手段培育自交系需要6~7 年，甚至更长的时间。同时，双单倍体在理论上是绝对纯合的，基因型与表现型完全一致，而通过高代自交获得的自交系仍会有少数位点是杂合的。因此，利用单倍体或双单倍体进行新品种选育和品种改良可以大大缩短育种周期，提高选择效率。

单倍体材料的获得途径包括自然发生单倍体及人工诱导单倍体。前者发生频率极低，难以应用。目前人工诱导单倍体的方法主要有化学药剂诱导孤雌生殖获得单倍体、种间远缘授粉或辐射花粉授粉诱导孤雌生殖获得单倍体、延迟授粉、未授粉子房和胚珠培养、花药培养和游离小孢子培养等。其中游离小孢子培养技术能在科研及生产应用方面取得一定的成果，主要是由于其自身具有以下优势：1）直接从花蕾中游离出来天然分散的单倍体细胞的小孢子，便于单细胞培养的操作；2）单倍体细胞核中的全套染色体为一个基因组，借助使染色体组加倍的方法，理论上可获得纯合基因的二倍体；3）利用单倍体再生植株的突变性，能够筛选抗逆性强和髙产的植株；4）小孢子培养获得的再生植株后代一般性状表现一致，活力稳定。因此，可以利用游离小孢子培养技术获得单倍体再生植株，再用于创新育种材料、选育新品种以及遗传学等方面的研究。

游离小孢子培养是指将小孢子从花药中游离出来，在人工培养基上进行脱分化和再分化培养并获得再生植株的过程。诸多研究表明，植物游离小孢子培养受多种因子的影响，其中基因型对植物小孢子胚胎发生具有决定性的作用，其次培养基的组成对诱发小孢子启动、分裂、生长和分化常起绝对作用，其它的如供体植株的生长状况、花粉发育时期、材料的预处理、温度、湿度和光照等也对小孢子培养的成功率有重要影响。目前，关于花生游离小孢子培养的研究很少，已有的文献报道只是获得了愈伤组织，而从愈伤组织分化出再生植株的方法还有待进一步研究。而在花生花药培养研究中，袁美等获得了由愈伤组织分化形成的胚状体，张景景等获得了由愈伤组织分化形成的茎和根，均尚未获得完整再生植株。由此看来，无论是由花生游离小孢子培养还是花药培养获得再生植株都十分困难。

发明内容

针对现有技术存在的不足，本发明的目的是提供一种用于花生小孢子愈伤再分化的培养基，利用该培养基对花生小孢子愈伤组织进行分化培养，能够获得完整的再生植株。

本发明的目的是通过以下技术方案解决的：

一种用于花生小孢子愈伤再分化的培养基，其特征在于，该培养基的成分及配比为：KNO₃1780~1960mg/L，NH₄NO₃1030~1210mg/L，MgSO₄·7H₂O 347~375mg/L，NaH₂PO₄·H₂O 140~160mg/L，KI 0.80~0.86mg/L，H₃BO₃ 5.3~5.9mg/L，MnSO₄·4H₂O 20~23mg/L，ZnSO₄·7H₂O3.5~4.0mg/L，Na₂MoO₄·2H₂O 0.22~0.26mg/L，CuSO₄·5H₂O 0.02~0.03mg/L，CoCl₂·6H₂O0.02~0.03mg/L，葡萄糖酸钙410~430mg/L，甘氨酸铁28.7~30.3mg/L，肌醇95~105mg/L，烟酸1.0~1.4mg/L，盐酸吡哆醇0.8~1.2mg/L，盐酸硫胺素8.6~9.0mg/L，苏氨酸3.7~4.1mg/L，苯丙氨酸 40~50mg/L，谷胱甘肽350~400mg/L，天门冬酰胺230~270mg/L，阿魏酸29~33mg/L，6-BA 0.4~0.6mg/L，KT-30 1.4~1.6mg/L，康多酚0.07~0.09mg/L，褪黑素1.7~2.3μmol/L，氢化可的松0.15~0.17mg/L，腐胺21.7~23.5mg/L，碳纳米管13~17mg/L，麦芽糖26~34g/L，聚乙烯醇0.9~1.1g/L，花生秧浸提液45~55mL/L，琼脂9~11g/L。

所述培养基的最佳成分配比为：KNO₃1870mg/L，NH₄NO₃1120mg/L， MgSO₄·7H₂O361mg/L，NaH₂PO₄·H₂O 150mg/L，KI 0.83mg/L，H₃BO₃ 5.6mg/L，MnSO₄·4H₂O 21.5mg/L，ZnSO₄·7H₂O 3.75mg/L，Na₂MoO₄·2H₂O 0.24mg/L，CuSO₄·5H₂O 0.025mg/L，CoCl₂·6H₂O0.025mg/L，葡萄糖酸钙420mg/L，甘氨酸铁29.5mg/L，肌醇100mg/L，烟酸1.2mg/L，盐酸吡哆醇1.0mg/L，盐酸硫胺素8.8mg/L，苏氨酸3.9mg/L，苯丙氨酸 45mg/L，谷胱甘肽375mg/L，天门冬酰胺250mg/L，阿魏酸31mg/L，6-BA 0.5mg/L，KT-30 1.5mg/L，康多酚0.08mg/L，褪黑素2.0μmol/L，氢化可的松0.16mg/L，腐胺22.6mg/L，碳纳米管15mg/L，麦芽糖30g/L，聚乙烯醇1.0g/L，花生秧提取液50mL/L，琼脂10g/L。

所述碳纳米管为多壁碳纳米管，其管径<8nm，长度10~30μm，纯度>98%，比表面积>500m²/g。

所述花生秧浸提液是通过以下方法制备的：将花生秧洗净后粉碎，按照固液比1g:50-60ml加入蒸馏水，65-70℃蒸煮1-2h，过60目筛网后取滤液即为花生秧浸提液。

本发明具有以下有益效果：

1、本发明提供的分化培养基根据花生小孢子的发育特性调整了大量元素、微量元素、维生素等的浓度，添加了更多的有机成分如葡萄糖酸钙、甘氨酸铁、苏氨酸、苯丙氨酸、谷胱甘肽、天门冬酰胺，提高了琼脂的浓度，均有利于花生小孢子愈伤组织的分化；植物生长调节剂采用了6-BA以及更高效的KT-30 和康多酚进行复配；还添加了阿魏酸、褪黑素、氢化可的松、腐胺、碳纳米管、聚乙烯醇和花生秧提取液，进一步提高了花生小孢子愈伤组织的绿苗分化率。

2、采用本发明所提供的培养基对花生小孢子愈伤组织进行分化培养，首次获得了完整的再生植株，为建立花生游离小孢子培养体系以及开展花生单倍体育种的研究奠定了基础。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明作进一步说明，但本发明并不限于以下实施例。

一种用于花生小孢子愈伤再分化的培养基，该培养基的成分及配比为：KNO₃1780~1960mg/L，NH₄NO₃1030~1210mg/L，MgSO₄·7H₂O 347~375mg/L，NaH₂PO₄·H₂O 140~160mg/L，KI 0.80~0.86mg/L，H₃BO₃ 5.3~5.9mg/L，MnSO₄·4H₂O 20~23mg/L，ZnSO₄·7H₂O 3.5~4.0mg/L，Na₂MoO₄·2H₂O 0.22~0.26mg/L，CuSO₄·5H₂O 0.02~0.03mg/L，CoCl₂·6H₂O 0.02~0.03mg/L，葡萄糖酸钙410~430mg/L，甘氨酸铁28.7~30.3mg/L，肌醇95~105mg/L，烟酸1.0~1.4mg/L，盐酸吡哆醇0.8~1.2mg/L，盐酸硫胺素8.6~9.0mg/L，苏氨酸3.7~4.1mg/L，苯丙氨酸 40~50mg/L，谷胱甘肽350~400mg/L，天门冬酰胺230~270mg/L，阿魏酸29~33mg/L，6-BA0.4~0.6mg/L，KT-30 1.4~1.6mg/L，康多酚0.07~0.09mg/L，褪黑素1.7~2.3μmol/L，氢化可的松0.15~0.17mg/L，腐胺21.7~23.5mg/L，碳纳米管13~17mg/L，麦芽糖26~34g/L，聚乙烯醇0.9~1.1g/L，花生秧浸提液45~55mL/L，琼脂9~11g/L。

该培养基成分中的碳纳米管为多壁碳纳米管，其管径<8nm，长度10~30μm，纯度>98%，比表面积>500m²/g；花生秧浸提液是通过以下方法制备的：将花生秧洗净后粉碎，按照固液比1g:50-60ml加入蒸馏水，65-70℃蒸煮1-2h，过60目筛网后取滤液即为花生秧浸提液。

花生小孢子愈伤组织的获取：在花生的盛花期，从健壮植株上采摘花蕾，经染色镜检筛选出小孢子发育时期处于单核靠边期的花蕾，放入4℃冰箱预处理12h。将预处理后的花蕾用70%酒精消毒30s，然后用0.1%升汞消毒10min，最后用无菌水冲洗3~4次。沥干水分后，在B₅洗涤培养基中用玻璃棒碾压花蕾使小孢子释放出来，再用200目细胞筛过滤，滤液以1000r/min、5min低速离心，弃上清液。重复离心3次至上清液无色透明，弃上清液，沉淀即为纯化的小孢子。按2.0×10⁵个/mL的接种密度，将纯化的小孢子接种于诱导培养基中，先置于33℃暗培养24h，再置于28℃暗培养21d左右诱导出愈伤组织。

愈伤组织分化培养：将诱导出的愈伤组织转接至分化培养基上，置于26℃、光照强度1500lx、光照时间14h/d的条件下培养25~30d，直至分化出绿色小苗，30d时统计愈伤组织分化率。愈伤组织分化率（%）=（分化出绿色小苗的愈伤组织数目/接种的愈伤组织总数）×100%

实施例1

1材料

供试材料为发明人前期进行花生游离小孢子诱导培养获得的愈伤组织，分别来源于‘徐花13号’和‘丰花5号’2个花生栽培品种。

2方法

将上述诱导出的愈伤组织转接至分化培养基上，置于26℃、光照强度1500lx、光照时间14h/d的条件下培养30d至分化出绿色小苗，统计愈伤组织分化率。愈伤组织分化率（%）=（分化出绿色小苗的愈伤组织数目/接种的愈伤组织总数）×100%。

分化培养基的成分及配比为：KNO₃1870mg/L，NH₄NO₃1120mg/L，MgSO₄·7H₂O361mg/L，NaH₂PO₄·H₂O 150mg/L，KI 0.83mg/L，H₃BO₃ 5.6mg/L，MnSO₄·4H₂O 21.5mg/L，ZnSO₄·7H₂O 3.75mg/L，Na₂MoO₄·2H₂O 0.24mg/L，CuSO₄·5H₂O 0.025mg/L，CoCl₂·6H₂O0.025mg/L，葡萄糖酸钙420mg/L，甘氨酸铁29.5mg/L，肌醇100mg/L，烟酸1.2mg/L，盐酸吡哆醇1.0mg/L，盐酸硫胺素8.8mg/L，苏氨酸3.9mg/L，苯丙氨酸 45mg/L，谷胱甘肽375mg/L，天门冬酰胺250mg/L，阿魏酸31mg/L，6-BA 0.5mg/L，KT-30 1.5mg/L，康多酚0.08mg/L，褪黑素2.0μmol/L，氢化可的松0.16mg/L，腐胺22.6mg/L，碳纳米管15mg/L，麦芽糖30g/L，聚乙烯醇1.0g/L，花生秧提取液50mL/L，琼脂10g/L。

对比例1

供试材料和方法与实施例1相同，分化培养基的成分及配比为：KNO₃1870mg/L，NH₄NO₃1120mg/L， MgSO₄·7H₂O 361mg/L，NaH₂PO₄·H₂O 150mg/L，KI 0.83mg/L，H₃BO₃ 5.6mg/L，MnSO₄·4H₂O 21.5mg/L，ZnSO₄·7H₂O 3.75mg/L，Na₂MoO₄·2H₂O 0.24mg/L，CuSO₄·5H₂O0.025mg/L，CoCl₂·6H₂O 0.025mg/L，葡萄糖酸钙420mg/L，甘氨酸铁29.5mg/L，肌醇100mg/L，烟酸1.2mg/L，盐酸吡哆醇1.0mg/L，盐酸硫胺素8.8mg/L，苏氨酸3.9mg/L，苯丙氨酸45mg/L，谷胱甘肽375mg/L，天门冬酰胺250mg/L，阿魏酸31mg/L，6-BA 0.5mg/L，KT-301.5mg/L，康多酚0.08mg/L，氢化可的松0.16mg/L，腐胺22.6mg/L，碳纳米管15mg/L，麦芽糖30g/L，聚乙烯醇1.0g/L，花生秧提取液50mL/L，琼脂10g/L。

对比例2

供试材料和方法与实施例1相同，分化培养基的成分及配比为：KNO₃1870mg/L，NH₄NO₃1120mg/L， MgSO₄·7H₂O 361mg/L，NaH₂PO₄·H₂O 150mg/L，KI 0.83mg/L，H₃BO₃ 5.6mg/L，MnSO₄·4H₂O 21.5mg/L，ZnSO₄·7H₂O 3.75mg/L，Na₂MoO₄·2H₂O 0.24mg/L，CuSO₄·5H₂O0.025mg/L，CoCl₂·6H₂O 0.025mg/L，葡萄糖酸钙420mg/L，甘氨酸铁29.5mg/L，肌醇100mg/L，烟酸1.2mg/L，盐酸吡哆醇1.0mg/L，盐酸硫胺素8.8mg/L，苏氨酸3.9mg/L，苯丙氨酸45mg/L，谷胱甘肽375mg/L，天门冬酰胺250mg/L，阿魏酸31mg/L，6-BA 0.5mg/L，KT-301.5mg/L，康多酚0.08mg/L，褪黑素2.0μmol/L，腐胺22.6mg/L，碳纳米管15mg/L，麦芽糖30g/L，聚乙烯醇1.0g/L，花生秧提取液50mL/L，琼脂10g/L。

对比例3

分化培养基的成分及配比为：KNO₃1870mg/L，NH₄NO₃1120mg/L， MgSO₄·7H₂O 361mg/L，NaH₂PO₄·H₂O 150mg/L，KI 0.83mg/L，H₃BO₃ 5.6mg/L，MnSO₄·4H₂O 21.5mg/L，ZnSO₄·7H₂O 3.75mg/L，Na₂MoO₄·2H₂O 0.24mg/L，CuSO₄·5H₂O 0.025mg/L，CoCl₂·6H₂O 0.025mg/L，葡萄糖酸钙420mg/L，甘氨酸铁29.5mg/L，肌醇100mg/L，烟酸1.2mg/L，盐酸吡哆醇1.0mg/L，盐酸硫胺素8.8mg/L，苏氨酸3.9mg/L，苯丙氨酸 45mg/L，谷胱甘肽375mg/L，天门冬酰胺250mg/L，阿魏酸31mg/L，6-BA 0.5mg/L，KT-30 1.5mg/L，康多酚0.08mg/L，褪黑素2.0μmol/L，氢化可的松0.16mg/L，腐胺22.6mg/L，麦芽糖30g/L，聚乙烯醇1.0g/L，花生秧提取液50mL/L，琼脂10g/L。

实施例1、对比例1、对比例2、对比例3的花生小孢子愈伤组织分化结果如表1所示。

从表1可以看出，采用实施例1以及对比例1-3的分化培养基对‘徐花13号’和‘丰花5号的愈伤组织进行培养，均能获得一定的愈伤组织分化率。实施例1的分化培养基相比于对比例1-3的分化培养基，在成分上分别添加了褪黑素2.0μmol/L、氢化可的松0.16mg/L、碳纳米管15mg/L，因此在愈伤组织分化率上存在较大的差异。褪黑素是由松果腺合成的一种广泛存在于动物界的激素，具有调节昼夜节律、促进睡眠、抗氧化、清除自由基等作用。后来研究发现褪黑素也广泛存在于植物中，可能对植物生长具有促进作用，对植物抗环境胁迫方面具有防护作用等。氢化可的松是一种甾体类激素，具有很多生物活性，与植物体内普遍存在的生长调节物质油菜素内酯结构相似。碳纳米管具备良好的生物相容性，能够穿透完整植物细胞壁和细胞膜进入到细胞当中以完成分子的传送，可能对愈伤组织具有生长调节作用。从实施例1与对比例1-3的数据可知，添加一定浓度的褪黑素、氢化可的松、碳纳米管均有利于花生小孢子愈伤组织的分化和绿苗的形成，因此实施例1的愈伤组织分化率最高，分别为‘徐花13号’10.2%，‘丰花5号’15.7%。

实施例2

待实施例1分化形成的绿色小苗长至1.5~2.0 cm高时，及时转移至生根培养基上，生根培养基成分为为：1/2MS基本培养基+ NAA 0.05mg/L+矮壮素3mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6g/L，置于26℃、光照强度2000lx、光照时间14h/d的条件下培养，3d后植株基部陆续发根，30d左右就能长成根系发达的完整再生植株，‘徐花13号’和‘丰花5号’的平均生根率分别为75.7%和78.0%。

在已有的文献报道如《花生花药和游离小孢子培养研究》、《花生花药培养的初步研究》中，愈伤组织分化培养基是在MS培养基或MSB5培养基的基础上附加6-BA、NAA等常规植物激素，有的分化出胚状体，有的分化出茎或根，但均未能获得完整再生植株。而在本发明的研究中，徐花13号’和‘丰花5号’的小孢子愈伤组织成功分化出绿苗，在生根培养中也有较高的生根率，表明本发明与现有技术相比更有利于花生小孢子分化培养，具有较大的技术进步。

以上实施例仅为说明本发明的技术思想，不能以此限定本发明的保护范围，凡是按照本发明提出的技术思想，在技术方案基础上所做的任何改动，均落入本发明保护范围之内；本发明未涉及的技术均可通过现有技术加以实现。

Claims

1.一种用于花生小孢子愈伤再分化的培养基，其特征在于，该培养基的成分及配比为：KNO₃1780~1960mg/L，NH₄NO₃1030~1210mg/L，MgSO₄·7H₂O 347~375mg/L，NaH₂PO₄·H₂O 140~160mg/L，KI 0.80~0.86mg/L，H₃BO₃ 5.3~5.9mg/L，MnSO₄·4H₂O 20~23mg/L，ZnSO₄·7H₂O3.5~4.0mg/L，Na₂MoO₄·2H₂O 0.22~0.26mg/L，CuSO₄·5H₂O 0.02~0.03mg/L，CoCl₂·6H₂O0.02~0.03mg/L，葡萄糖酸钙410~430mg/L，甘氨酸铁28.7~30.3mg/L，肌醇95~105mg/L，烟酸1.0~1.4mg/L，盐酸吡哆醇0.8~1.2mg/L，盐酸硫胺素8.6~9.0mg/L，苏氨酸3.7~4.1mg/L，苯丙氨酸 40~50mg/L，谷胱甘肽350~400mg/L，天门冬酰胺230~270mg/L，阿魏酸29~33mg/L，6-BA 0.4~0.6mg/L，KT-30 1.4~1.6mg/L，康多酚0.07~0.09mg/L，褪黑素1.7~2.3μmol/L，氢化可的松0.15~0.17mg/L，腐胺21.7~23.5mg/L，碳纳米管13~17mg/L，麦芽糖26~34g/L，聚乙烯醇0.9~1.1g/L，花生秧浸提液45~55mL/L，琼脂9~11g/L。

2.根据权利要求1所述的一种用于花生小孢子愈伤再分化的培养基，其特征在于，所述培养基的最佳成分配比为：KNO₃1870mg/L，NH₄NO₃1120mg/L， MgSO₄·7H₂O 361mg/L，NaH₂PO₄·H₂O 150mg/L，KI 0.83mg/L，H₃BO₃ 5.6mg/L，MnSO₄·4H₂O 21.5mg/L，ZnSO₄·7H₂O3.75mg/L，Na₂MoO₄·2H₂O 0.24mg/L，CuSO₄·5H₂O 0.025mg/L，CoCl₂·6H₂O 0.025mg/L，葡萄糖酸钙420mg/L，甘氨酸铁29.5mg/L，肌醇100mg/L，烟酸1.2mg/L，盐酸吡哆醇1.0mg/L，盐酸硫胺素8.8mg/L，苏氨酸3.9mg/L，苯丙氨酸 45mg/L，谷胱甘肽375mg/L，天门冬酰胺250mg/L，阿魏酸31mg/L，6-BA 0.5mg/L，KT-30 1.5mg/L，康多酚0.08mg/L，褪黑素2.0μmol/L，氢化可的松0.16mg/L，腐胺22.6mg/L，碳纳米管15mg/L，麦芽糖30g/L，聚乙烯醇1.0g/L，花生秧提取液50mL/L，琼脂10g/L。

3.根据权利要求1和2所述的一种用于花生小孢子愈伤再分化的培养基，其特征在于，所述碳纳米管为多壁碳纳米管，其管径<8nm，长度10~30μm，纯度>98%，比表面积>500m²/g。

4.根据权利要求1和2所述的一种用于花生小孢子愈伤再分化的培养基，其特征在于，所述花生秧浸提液是通过以下方法制备的：将花生秧洗净后粉碎，按照固液比1g:50-60ml加入蒸馏水，65-70℃蒸煮1-2h，过60目筛网后取滤液即为花生秧浸提液。