CN110200829B - 一种白藜芦醇纳米醇质体及其制备方法与应用 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及化学制剂领域，具体涉及一种白藜芦醇纳米醇质体及其制备方法与应用，制备方法如下：S1.称取大豆卵磷脂、稳定剂、白藜芦醇溶入乙醇中；S2.将步骤S1的混合溶液在30~35℃水浴条件下以800~1500r/min的转速搅拌1~5min；S3.将步骤S2搅拌后的溶液密封，然后用加入60~80mL的蒸馏水；S4.将步骤S3的混合液再以800~1500r/min的转速搅拌2~8min；S5.将步骤S4的液体在冰浴条件下超声2.2~2.5min；S6.过滤即得。本发明采用复合蔗糖酯、吐温‑80稳定剂得到的白藜芦醇纳米醇质体具有包封率高、稳定性更好的特点。

Description

一种白藜芦醇纳米醇质体及其制备方法与应用
技术领域
本发明涉及化学制剂领域，具体涉及一种白藜芦醇纳米醇质体及其制备方法与应用。
背景技术
白藜芦醇（Resveratrol，简称Res）化学名称为(E)-3，5，4-三羟基二苯乙烯。又称为芪三酚，多酚类化合物。分子式C14H12O3，相对分子质量228.25。1940年，日本研究人员从植物的根部分离出白黎芦醇。1963年科学家从中药虎杖中首次提纯出白藜芦醇。如今己经在70多种植物中发现了白黎芦醇，含有白黎芦醇的植物通常均为药用植物，如决明、虎杖等；有的是食物，如葡萄、花生等。葡萄中的白黎芦醇含量最高，红葡萄酒一直以来来都是人类摄取白藜芦醇的主要方式。二十世纪出现著名的“法国悖论”现象，说明法国人通过日常适量的饮用葡萄酒，来帮助预防心血管疾病，也让人们重视到了白黎芦醇的价值。白藜芦醇具有抗衰老、抗癌、美白等作用。
白藜芦醇是一种非黄酮类的植物多酚抗氧化化合物，作为一种天然抗氧化剂，具有很强的生理活性，是国际公认的一种绿色抗癌物质。同时它可降低血液粘稠度，有心血管保护作用；可预防心脏和肝脏损伤；可抗氧化，清除体内自由基，抗衰老；可提高免疫活性等，并广泛应用于化妆品、新型药品和保健食品中。但是白藜芦醇单体本身理化性质极其不稳定，易发生光化学反应，在热、氧气、pH不稳定和水溶性差，影响其生物利用度。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术中的问题，提供了一种白藜芦醇纳米醇质体的制备方法。
本发明的另一个目的在于提供一种白藜芦醇纳米醇质体。
本发明的另一个目的在于提供一种白藜芦醇纳米醇质体在制备面膜精华液中的应用。
本发明的另一个目的在于提供一种白藜芦醇纳米醇质体在制备皮肤给药类药物中的应用。
本发明的目的通过以下技术方案予以实现：
一种白藜芦醇纳米醇质体的制备方法，包括以下步骤：S1.称取大豆卵磷脂、稳定剂、白藜芦醇溶入乙醇中；S2.将步骤S1的混合溶液在30~35℃水浴条件下以800~1500r/min的转速搅拌1~5min；S3.将步骤S2搅拌后的溶液密封，然后加入60~80mL的蒸馏水，加入蒸馏水之后使得所述大豆卵磷脂的质量百分含量为1.2~1.8%，所述白藜芦醇的质量百分含量为0.18~0.22%，所述乙醇的质量百分含量为28~32%，所述稳定剂的质量百分含量为1.3~1.82%；S4.将步骤S3的混合液再以800~1500r/min的转速搅拌4~8min；S5.将步骤S4的液体在冰浴冰浴条件下超声 2.2~2.5min；S6.使用微滤膜进行过滤。
优选地，所述步骤S3中加入蒸馏水以后，所述大豆卵磷脂的质量百分含量为1.2~1.5%，白藜芦醇的质量百分含量为0.18~0.21%，乙醇质量百分含量为28~31%，稳定剂质量百分含量为0.09~0.12%，吐温-80的质量百分含量为1.4~1.6%。
优选地，所述步骤S3中加入蒸馏水以后，所述大豆卵磷脂的质量百分含量为1.5%，白藜芦醇的质量百分含量为0.2%，乙醇质量百分含量为30%，稳定剂质量百分含量为0.1%。
优选地，所述步骤S3加入蒸馏水时，采用微孔注射器注入。
将白藜芦醇单体制备成纳米醇质体的形式，是因为醇质体的包封率高、皮肤渗透性好，包埋后能显著提高白藜芦醇的稳定性及生物利用度。
在本发明提供的脂质体制备体系中，白藜芦醇、乙醇及稳定剂的浓度对纳米醇质体的稳定有很大的影响，本发明通过调控其浓度得到了稳定性最佳的白藜芦醇纳米醇质体。
在脂质体制备体系中，随白藜芦醇浓度的增加，白藜芦醇纳米醇质体包封率先缓慢上升，后显著下降。出现这种情况可能是由于白藜芦醇的饱和性。当白藜芦醇浓度过高，醇质体包埋不下更多的白藜芦醇，反而过高的白藜芦醇浓度呈游离状态会破坏囊泡结构，稳定性下降，引发醇质体泄露。
在低浓度的乙醇中白藜芦醇分散不够均匀，乙醇未能满足包封所需要的量，包埋效果较差，包封率较低；而高浓度的乙醇破坏已形成的醇质体囊泡结构，使已包封的醇质体发生泄漏，包封率有所降低。
稳定剂的加入能有效避免白藜芦醇易光解、被氧化等性质，同时能降低醇质体体系中的表面张力，保持化学平衡。在稳定的作用下，纳米醇质体胶囊结构才能保持，白藜芦醇的稳定性也较好。由于白藜芦醇自身的性质，稳定剂增加越多，包封率会反而下降。
同时，配合超声的方法可以提高白藜芦醇的包封率，合理调整超声的时间使得纳米醇质体稳定性较好。
超声时间增加，醇质体粒径大小更均匀，粒子树增加，表面积比增加，包埋到的白藜芦醇更多，包封率增大。但是过长的超声会不利于已经包封的醇质体。
优选地，所述稳定剂为蔗糖酯和吐温-80的混合物，其中步骤S3中加入蒸馏水之后，所述蔗糖酯的质量百分含量为1.3~1.82%，所述吐温-80的质量百分含量为1.2~1.7%。
优选地，所述步骤S5中超声时间为2.4~2.5min。
不同的稳定剂对白藜芦醇纳米醇质体的稳定性和包封率和有很大的影响。蔗糖酯和吐温-80作为白藜芦醇纳米醇质体的稳定剂，不仅在新制得的白藜芦醇纳米醇质体具有良好的包封率。而且放置较长时间以后白藜芦醇的包封率仍然不会下降。
本发明同时保护所述白藜芦醇纳米醇质体的制备方法获得的白藜芦醇纳米醇质体。
所述白藜芦醇纳米醇质体在制备化妆品或皮肤给药类药物中的应用也属于本发明的保护范围。
白藜芦醇纳米醇质体具有很好的稳定性和皮肤渗透性。用于制作面膜精华液、乳霜、面霜等化妆品中。也可以用在皮肤给药类药物上，比如凝胶、贴剂及乳膏等。渗透性好，药物作用更好。
与现有技术相比本发明具有以下技术效果：
一种白藜芦醇纳米醇质体的制备方法。采用更合理的白藜芦醇、乙醇以及稳定剂等原料的浓度配比，得到的白藜芦醇纳米醇质体具有包封率高、稳定性更好的特点，长时间放置，白藜芦醇纳米醇质体释放量很少,可保持较高的包封率。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面结合具体实施例和对比例将对本发明的技术方案进行详细的描述。显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所得到的所有其它实施方式，都属于本发明所保护的范围。
除特殊说明，本实施例、对比例以及实验例中所用的设备均为常规实验设备，所用的试剂均为市售可得。
实施例1
一种白藜芦醇纳米醇质体的制备方法，包括以下步骤：S1称取大豆卵磷脂、蔗糖酯、白藜芦醇、吐温-80溶入乙醇中；S2将步骤S1的混合溶液在30℃水浴条件下以800r/min的转速搅拌5min；S3将步骤S2搅拌后的溶液密封，然后用注射器注入60mL的蒸馏水，使得大豆卵磷脂的质量百分含量为1.5%，白藜芦醇的质量百分含量为0.18%，乙醇的质量百分含量为28%，蔗糖酯的质量百分含量为0.08%，吐温-80的质量百分含量为1.2%；S4将步骤S3的混合液再以800r/min的转速搅拌8min；S5将步骤S4的液体在冰浴条件下超声 2.2min；S6使用微滤膜进行过滤，得到白藜芦醇纳米醇质体。
实施例2
一种白藜芦醇纳米醇质体的制备方法，包括以下步骤：S1称取大豆卵磷脂、蔗糖酯、白藜芦醇、吐温-80溶入乙醇中；S2将步骤S1的混合溶液在30℃水浴条件下以1500r/min的转速搅拌1min；S3将步骤S2搅拌后的溶液密封，然后用注射器注入80mL的蒸馏水，使得大豆卵磷脂的质量百分含量为1.5%，白藜芦醇的质量百分含量为0.22%，乙醇的质量百分含量为32%，蔗糖酯的质量百分含量为0.12% ，吐温-80的质量百分含量为1.7%；S4将步骤S3的混合液再以1500r/min的转速搅拌4min；S5将步骤S4的液体在冰浴条件下超声 2.5min；S6使用微滤膜进行过滤，得到白藜芦醇纳米醇质体。
实施例3
一种白藜芦醇纳米醇质体的制备方法，包括以下步骤：S1称取大豆卵磷脂、蔗糖酯、白藜芦醇、吐温-80溶入乙醇中；S2将步骤S1的混合溶液在30℃水浴条件下以1000r/min的转速搅拌2min；S3将步骤S2搅拌后的溶液密封，然后用注射器注入70mL的蒸馏水，使得大豆卵磷脂的质量百分含量为1.5%，白藜芦醇的质量百分含量为0.2%，乙醇的质量百分含量为30%，蔗糖酯的质量百分含量为0.1% ，吐温-80的质量百分含量为1.5%；S4将步骤S3的混合液再以1000r/min的转速搅拌2min；S5将步骤S4的液体在冰浴条件下超声 2.5min；S6使用微滤膜进行过滤，得到白藜芦醇纳米醇质体。
实施例4
一种白藜芦醇纳米醇质体的制备方法，包括以下步骤：S1称取大豆卵磷脂、蔗糖酯、白藜芦醇、吐温-80溶入乙醇中；S2将步骤S1的混合溶液在30℃水浴条件下以1000r/min的转速搅拌2min；S3将步骤S2搅拌后的溶液密封，然后用注射器注入70mL的蒸馏水，使得大豆卵磷脂的质量百分含量为1.5%，白藜芦醇的质量百分含量为0.2%，乙醇的质量百分含量为30%，蔗糖酯的质量百分含量为0.1%，吐温-80的制备百分含量为1.5%；S4将步骤S3的混合液再以1000r/min的转速搅拌2min；S5将步骤S4的液体在冰浴条件下超声 2.5min；S6使用微滤膜进行过滤。
上述白藜芦醇纳米醇质体的制备方法获得的白藜芦醇纳米醇质体。
将上述白藜芦醇纳米醇质体和面膜精华液混合均匀得到含有白藜芦醇纳米醇质体的面膜精华液。
实施例5
一种白藜芦醇纳米醇质体的制备方法，包括以下步骤：S1称取大豆卵磷脂、蔗糖酯、白藜芦醇、吐温-80溶入乙醇中，；S2将步骤S1的混合溶液在30℃水浴条件下以1000r/min的转速搅拌2min；S3将步骤S2搅拌后的溶液密封，然后用注射器注入70mL的蒸馏水，使得大豆卵磷脂的质量百分含量为1.5%，白藜芦醇的质量百分含量为0.2%，乙醇的质量百分含量为30%，蔗糖酯的质量百分含量为0.1% ，吐温-80的制备百分含量为1.5%；S4将步骤S3的混合液再以1000r/min的转速搅拌2min；S5将步骤S4的液体在冰浴条件下超声 2.5min；S6使用微滤膜进行过滤。
上述白藜芦醇纳米醇质体的制备方法获得的白藜芦醇纳米醇质体。
将上述白藜芦醇纳米醇质体和凝胶剂混合均匀得到含有白藜芦醇纳米醇质体的凝胶剂。
对比例1-4
一种白藜芦醇纳米醇质体的制备方法，包括以下步骤：S1称取大豆卵磷脂、蔗糖酯、白藜芦醇、吐温-80溶入乙醇中；S2将步骤S1的混合溶液在30℃水浴条件下以1000r/min的转速搅拌2min；S3将步骤S2搅拌后的溶液密封，然后用注射器注入70mL的蒸馏水，使得大豆卵磷脂的质量百分含量为1.5%，乙醇的质量百分含量为30%，蔗糖酯的质量百分含量为0.1% ，吐温-80的制备百分含量为1.5%；S4将步骤S3的混合液再以1000r/min的转速搅拌2min；S5将步骤S4的液体在冰浴条件下超声 2.5min；S6使用微滤膜进行过滤。
上述白藜芦醇纳米醇质体的制备方法获得的白藜芦醇纳米醇质体。
对比例1-4中白藜芦醇的质量百分含量分别为0.05%、0.1%、0.15%、0.25%。
对比例5-8
一种白藜芦醇纳米醇质体的制备方法，包括以下步骤：S1称取大豆卵磷脂、蔗糖酯、白藜芦醇、吐温-80溶入乙醇中；S2将步骤S1的混合溶液在30℃水浴条件下以1000r/min的转速搅拌2min；S3将步骤S2搅拌后的溶液密封，然后用注射器注入70mL的蒸馏水，使得大豆卵磷脂的质量百分含量为1.5%，白藜芦醇的质量百分含量为0.2%，蔗糖酯的质量百分含量为0.1% ，吐温-80的制备百分含量为1.5%；S4将步骤S3的混合液再以1000r/min的转速搅拌2min；S5将步骤S4的液体在冰浴条件下超声 2.5min；S6使用微滤膜进行过滤。
上述白藜芦醇纳米醇质体的制备方法获得的白藜芦醇纳米醇质体。
对比例5-8中乙醇的百分含量分别为25%、35%、40%、45%。
对比例9-12
一种白藜芦醇纳米醇质体的制备方法，包括以下步骤：S1称取大豆卵磷脂、蔗糖酯、白藜芦醇、吐温-80溶入乙醇中；S2将步骤S1的混合溶液在30℃水浴条件下以1000r/min的转速搅拌2min；S3将步骤S2搅拌后的溶液密封，然后用注射器注入70mL的蒸馏水，使得大豆卵磷脂的质量百分含量为1.5%，白藜芦醇的质量百分含量为0.2%，乙醇的质量百分含量为30% ，吐温-80的制备百分含量为1.5%；S4将步骤S3的混合液再以1000r/min的转速搅拌2min；S5将步骤S4的液体在冰浴条件下超声 2.5min；S6使用微滤膜进行过滤。
上述白藜芦醇纳米醇质体的制备方法获得的白藜芦醇纳米醇质体。
对比例9-12的蔗糖酯百分含量分别为0.05%、0.15%、0.2%、0.25%。
对比例13-16
一种白藜芦醇纳米醇质体的制备方法，包括以下步骤：S1称取大豆卵磷脂、蔗糖酯、白藜芦醇、吐温-80溶入乙醇中；S2将步骤S1的混合溶液在30℃水浴条件下以1000r/min的转速搅拌2min；S3将步骤S2搅拌后的溶液密封，然后用注射器注入70mL的蒸馏水，大豆卵磷脂的质量百分含量为1.5%，白藜芦醇的质量百分含量为0.2%，乙醇的质量百分含量为30%，蔗糖酯的质量百分含量为0.1% ，吐温-80的制备百分含量为1.5%；S4将步骤S3的混合液再以1000r/min的转速搅拌2min；S5将步骤S4的液体在冰浴条件下超声；S6使用微滤膜进行过滤。
上述白藜芦醇纳米醇质体的制备方法获得的白藜芦醇纳米醇质体。
对比例13-16步骤S5中超声时间分别为1min、1.5min、2min、3min。
对比例17-20
一种白藜芦醇纳米醇质体的制备方法，包括以下步骤：S1称取大豆卵磷脂、蔗糖酯、白藜芦醇、吐温-80溶入乙醇中；S2将步骤S1的混合溶液在30℃水浴条件下以1000r/min的转速搅拌2min；S3将步骤S2搅拌后的溶液密封，然后用注射器注入70mL的蒸馏水，使得大豆卵磷脂的质量百分含量为1.5%，白藜芦醇的质量百分含量为0.2%，乙醇的质量百分含量为30%，蔗糖酯的质量百分含量为0.1%，吐温-80的制备百分含量为1.5%；S4将步骤S3的混合液再以1000r/min的转速搅拌2min；S5将步骤S4的液体在冰浴条件下超声 2.5min；S6使用微滤膜进行过滤，得到白藜芦醇纳米醇质体。
对比例17-20中吐温-80的质量百分含量分别为0.5%、1%、2%、2.5%。
对比例21
一种白藜芦醇纳米醇质体的制备方法，包括以下步骤：S1称取大豆卵磷脂、白藜芦醇、吐温-80溶入乙醇中；S2将步骤S1的混合溶液在30℃水浴条件下以1000r/min的转速搅拌2min；S3将步骤S2搅拌后的溶液密封，然后用注射器注入70mL的蒸馏水，使得大豆卵磷脂的质量百分含量为1.5%，白藜芦醇的质量百分含量为0.2%，乙醇的质量百分含量为30%，吐温-80的制备百分含量为1.5%；S4将步骤S3的混合液再以1000r/min的转速搅拌2min；S5将步骤S4的液体在冰浴条件下超声 2.5min；S6使用微滤膜进行过滤，得到白藜芦醇纳米醇质体。
与实施例3相比，不同点在于稳定剂由吐温-80组成，不含蔗糖酯不同。
对比例22
一种白藜芦醇纳米醇质体的制备方法，包括以下步骤：S1称取大豆卵磷脂、蔗糖酯、白藜芦醇溶入乙醇中；S2将步骤S1的混合溶液在30℃水浴条件下以1000r/min的转速搅拌2min；S3将步骤S2搅拌后的溶液密封，然后用注射器注入70mL的蒸馏水，使得大豆卵磷脂的质量百分含量为1.5%，白藜芦醇的质量百分含量为0.2%，乙醇的质量百分含量为30%，吐温-80的质量百分含量为1.5%；S4将步骤S3的混合液再以1000r/min的转速搅拌2min；S5将步骤S4的液体在冰浴条件下超声 2.5min；S6使用微滤膜进行过滤，得到白藜芦醇纳米醇质体。
与实施例3相比，不同点在于稳定剂由蔗糖酯组成，不含吐温-80不同。
对比例23-24
一种白藜芦醇纳米醇质体的制备方法，包括以下步骤：S1称取大豆卵磷脂、蔗糖酯、白藜芦醇、吐温-80溶入乙醇中；S2将步骤S1的混合溶液在30℃水浴条件保存2min；S3将步骤S2搅拌后的溶液密封，然后用注射器注入70mL的蒸馏水，使得大豆卵磷脂的质量百分含量为1.5%，白藜芦醇的质量百分含量为0.2%，乙醇的质量百分含量为30%，稳定剂的质量百分含量为0.1% ，吐温-80的质量百分含量为1.5%，吐温-80的制备百分含量为1.5%；S4将步骤S3的混合液保存2min；S5将步骤S4的液体在冰浴条件下超声 2.5min；S6使用微滤膜进行过滤，得到白藜芦醇纳米醇质体。
对比例23步骤S2以1000r/min的转速搅拌；对比例24步骤S4以1000r/min的转速搅拌。实验例1
取适量实施例1至3和各对比例白藜芦醇纳米醇质体溶液于超滤离心管的内管中，设置离心机转速为12000rpm，温度为4℃，超滤离心20min，待离心完毕后，超滤离心管外管中为白藜芦醇醇质体溶液中的游离白藜芦醇，被包埋的白藜芦醇纳米醇质体则被截留在内管中，用甲醇对其进行破乳，测定包埋的白藜芦醇含量。游离的与包埋的白藜芦醇含量分别用福林酚法检测，根据标准曲线方程Y=0.0093X+0.1904，计算出白藜芦醇纳米醇质体的包封率（EE）。计算公式如下：
EE(%)=白藜芦醇包埋/(白藜芦醇包埋+白藜芦醇游离)×100%。
将各组制备的白藜芦醇纳米醇质体放置8个月，8个月之后再次按照上述方法测定包封率。
测试结果如下表所述：
Figure DEST_PATH_IMAGE001
从上表可以看出，各组份的含量对白藜芦醇纳米醇质体的包封率都有影响。而采用蔗糖酯和吐温-80复合稳定剂时白藜芦醇纳米醇质体的稳定最好，采用蔗糖酯或者吐温-80单独作为稳定剂时对纳米醇质体的稳定性明显减弱。经过8个月的放置以后采用复合稳定剂仍然具有良好的包封率。

Claims (7)

1.一种白藜芦醇纳米醇质体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1.称取大豆卵磷脂、稳定剂、白藜芦醇溶入乙醇中；
S2.将步骤S1的混合溶液在30~35℃水浴条件下以800~1500r/min的转速搅拌1~5min；
S3.将步骤S2搅拌后的溶液密封，然后加入60~80mL的蒸馏水，加入蒸馏水之后使得所述大豆卵磷脂的质量百分含量为1.2~1.8%，所述白藜芦醇的质量百分含量为0.18~0.22%，所述乙醇的质量百分含量为28~32%，所述稳定剂的质量百分含量为1.3~1.82%；所述稳定剂为蔗糖酯和吐温-80，所述蔗糖酯的质量百分含量为0.08%、0.1%和0.12%中的一种，所述吐温-80的质量百分含量为1.2-1.7%；
S4.将步骤S3的混合液再以800~1500r/min的转速搅拌2~8min；
S5.将步骤S4的液体在冰浴条件下超声2.2~2.5min；
S6.使用微滤膜进行过滤即得。
2.根据权利要求1所述白藜芦醇纳米醇质体的制备方法，其特征在于，所述步骤S3中加入蒸馏水以后，所述大豆卵磷脂的质量百分含量为1.2~1.5%，白藜芦醇的质量百分含量为0.18~0.21%，乙醇质量百分含量为28~31%，稳定剂质量百分含量为1.49~1.72%。
3.根据权利要求1所述白藜芦醇纳米醇质体的制备方法，其特征在于，所述步骤S3中加入蒸馏水以后，所述大豆卵磷脂的质量百分含量为1.5%，白藜芦醇的质量百分含量为0.2%，乙醇质量百分含量为30%，稳定剂质量百分含量为1.6%。
4.根据权利要求1所述白藜芦醇纳米醇质体的制备方法，其特征在于，所述步骤S5中超声时间为2.4~2.5min。
5.一种权利要求1所述白藜芦醇纳米醇质体的制备方法制备得到的白藜芦醇纳米醇质体。
6.权利要求5所述白藜芦醇纳米醇质体在制备化妆品中的应用。
7.权利要求5所述白藜芦醇纳米醇质体在制备皮肤给药类药物中的应用。
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