CN110152001B - 小分子化合物的用途及其组合物 - Google Patents

Abstract

本发明公开了小分子化合物的用途及其组合物，所述小分子化合物的用途具体为：3,5‑二叔丁基‑N‑{[3‑(2‑甲基苯基)氨基甲酰基]苯基}苯甲酰胺、或其药学、保健品学或食品学上可接受的盐或酯或衍生物、或它们的混合物用于制备治疗肿瘤、抑制肿瘤细胞生长、和/或诱导肿瘤细胞凋亡的物质，所述的组合物含有：(1)化合物3,5‑二叔丁基‑N‑{[3‑(2‑甲基苯基)氨基甲酰基]苯基}苯甲酰胺、或其药学、保健品学或食品学上可接受的盐或酯或衍生物、或它们的混合物；(2)致凋亡药物；(3)药学、保健品学、或食品学上可接受的载体或赋形剂。

Description

小分子化合物的用途及其组合物

技术领域

本发明属于生物技术和医学领域，具体涉及一种基于生物信息学和计算机技术，经虚拟筛选得到的特异性抑制NAC1蛋白的小分子化合物。本发明还涉及含有该小分子化合物的药物组合物，并公开了将该化合物药物用于疾病治疗的方法，特别是在恶性肿瘤的治疗中的用途。

背景技术

恶性肿瘤是危害人类健康的一类疾病。随着肿瘤分子生物学、基因组学、蛋白组学的发展，大量在肿瘤发生发展中起关键作用的调控因子被揭示。在此基础上，抗肿瘤药物研发理念的重大转变。研发焦点正从传统细胞毒药物向针对肿瘤发生发展过程中关键调控因子方向发展，这些靶点新药针对正常细胞和肿瘤细胞之间的差异，可达到高选择性、低毒性的治疗效果，从而克服传统细胞毒药物的选择性差、毒副作用强、易产生耐药性等缺点，为此，肿瘤靶向治疗学进入了一个崭新的研发阶段。近年来，随着分子生物学、X射线晶体学的发展，大量与肿瘤相关的生物大分子的三维结构被确定；计算科学的快速发展，计算机辅助药物设计应运而生，并渗透到新药研发的各个环节，极大地提高药物研发的成功率，降低研发成本，缩短研发周期，目前已成为创新药物研究的核心技术之一。

BTB/POZ家族基因NACC1基因编码细胞转录因子NAC1(nucleusaccumbens-1，伏隔核1)的表达，其定位于人染色体区Ch19p13.2，是新近发现的一个新的致癌因子。NAC1在多种妇科肿瘤中(例如卵巢癌、宫颈癌、子宫内膜癌、乳腺癌等)普遍高表达，而在正常组织未见表达。BTB结构域(也称为POZ结构域)是介导蛋白相互作用的重要结构域，NAC1的BZB结构域(1-129氨基酸序列)是形成NAC1二聚体复合物所必需的，形成的NAC1二聚体复合物可以参与多种生物功能调控：例如抗凋亡、促增殖、促侵袭转移、抗衰老等。

有实验表明，NAC1参与抑制顺铂、紫杉醇引起的卵巢癌细胞凋亡，而凋亡信号的逃逸与肿瘤的发生发展密切相关。既然NAC1只是特异性地在肿瘤细胞高表达，而且参与了肿瘤对凋亡信号的抵抗，因此针对该分子的小分子化合物可能能够取消其凋亡抑制功能，并将有可能和顺铂、紫杉醇等化疗药物联用，开辟一条肿瘤治疗新策略。

目前，虽然已经开发了一些抑制肿瘤生长的化合物，然而人们仍需要开发新的具有抑制肿瘤生长或诱导肿瘤细胞凋亡的化合物。

发明内容

本发明目的是提供一种具有抑制肿瘤细胞生长或诱导肿瘤细胞凋亡的化合物，本发明的另一目的是提供由所述化合物制成的药物组合物。

本发明的技术方案是：

3,5-二叔丁基-N-{[3-(2-甲基苯基)氨基甲酰基]苯基}苯甲酰胺、或其药学、保健品学或食品学上可接受的盐或酯或衍生物、或它们的混合物在制备用于治疗肿瘤、抑制肿瘤细胞生长、和/或诱导肿瘤细胞凋亡的药物中的用途。

进一步的，所述的用途在于制备人伏膈核1的抑制剂。

进一步的，所述的肿瘤或肿瘤细胞是表达人伏膈核1的肿瘤或肿瘤细胞。

进一步的，所述肿瘤或肿瘤细胞的人伏膈核1表达量高于正常细胞30％～50％。

进一步的，所述肿瘤选自下组：乳腺癌、肺癌、胃癌、前列腺癌、卵巢癌、结肠癌、肝癌、宫颈癌、子宫内膜癌或B淋巴系肿瘤，较佳的肿瘤选自下组：卵巢癌、宫颈癌、乳腺癌、子宫内膜癌；更佳的肿瘤选自下组：卵巢癌。

本发明的另一技术方案是：

提供—种组合物，所述的组合物含有：

(1)化合物3,5-二叔丁基-N-{[3-(2-甲基苯基)氨基甲酰基]苯基}苯甲酰胺、或其药学、保健品学或食品学上可接受的盐或酯或衍生物、或它们的混合物；

(2)致凋亡药物或肿瘤血管抑制药物；

(3)药学、保健品学、或食品学上可接受的载体或赋形剂。

进一步的，所述的致凋亡药物如卡铂、阿霉素、三苯氧胺、5-氟尿嘧啶、双呋喃氟尿嘧啶、三尖杉酯碱、阿糖胞苷、氟他胺、异环磷酰胺、脱氧氟尿苷、洛波钼、来屈唑、替尼泊甙、血管他丁、内皮他丁或阿瓦斯丁等，更优选顺铂或阿霉素。

进一步的，所述的3,5-二叔丁基-N-{[3-(2-甲基苯基)氨基甲酰基]苯基}苯甲酰胺和致凋亡药物之间重量比为1:1000至1000:1，优选重量比为1:500-500:1，更优选重量比为1:100-100:1，再优选重量比为1:50-50:1。

进一步的，所述的3,5-二叔丁基-N-{[3-(2-甲基苯基)氨基甲酰基]苯基}苯甲酰胺占组合物总重量的l-95wt％，优选5-90wt％，更优选10-80wt％。

进一步的，所述组合物的剂型是片剂、胶囊、粉末剂、颗粒剂、混悬剂或注射剂。在所述组合物为单位剂型或多剂型时，其中所述化合物、其药学上或保健品学上可接受的盐或酯、或它们的混合物的含量为0.05-50000mg/剂，优选0.1-10000mg/剂，更优选0.5-5000mg/剂。

本发明的优点是：

(a)本发明针对人NAC1蛋白所设计的小分子化合物，可有效靶向抑制抗凋亡分子----NAC1蛋白，从而用于癌症治疗；

(b)本发明的小分子化合物还可以与其它药物和治疗手段联合，用于恶性肿瘤的治疗；

(c)本发明的小分子化合物具有渗透性好，毒副作用小，结构简单，易于合成等优点。

附图说明

图1显示了化合物AK-918/40046747可抑制NAC1蛋白二聚体的形成；

图2A显示了化合物AK-918/40046747增强顺铂和阿霉素的细胞生长抑制，其中所用化合物浓度为10μM，顺铂和阿霉素浓度为0-40μM；

图2B显示了AK-918/40046747增强顺铂和阿霉素的细胞增殖抑制，其中所用化合物浓度为10μM，顺铂和阿霉素浓度为20μM；

图2C显示了化合物AK-918/40046747增强顺铂和阿霉素诱导的细胞凋亡，其中所用化合物浓度为10μM，顺铂和阿霉素浓度为20μM。

具体实施方式

经过广泛而深入的研究，发现部分肿瘤细胞内NAC1的表达往往升高，抑制NAC1的表达和功能可以抑制肿瘤细胞的增殖和体内外的致瘤活性。为此，本发明人借助计算机辅助药物设计从数十万个侯选化合物中筛出了若干个可能会和NAC1结合的小分子化合物，随后运用体外结合实验和MTT的方法对这些化合物进行了第二轮筛选，首次得到一个可以强烈增强顺铂对卵巢癌细胞系SKOV3增殖抑制作用的化合物AK-918/40046747，即小分子化合物3,5-二叔丁基-N-{[3-(2-甲基苯基)氨基甲酰基]苯基}苯甲酰胺。

具体而言，本发明人的研究表明，NAC1在卵巢癌肿瘤组织中的选择性高表达，而在正常卵巢上皮组织中未见表达，提示NAC1可能与肿瘤发生及生长密切相关。在低表达NAC1的ES2卵巢癌细胞系内，NAC1的过表达可明显抵抗顺铂诱导的凋亡，促进细胞生长，提示其可能是一个具有抗凋亡作用的分子。在高表达NAC1的卵巢癌肿瘤细胞内，抑制NAC1的表达可增强卵巢癌细胞对顺铂诱导凋亡的敏感性，抑制肿瘤细胞的克隆形成能力。提示NAC1很可能是治疗卵巢癌的作用靶点。本发明人的研究表明，抗凋亡作用的NAC1分子在细胞生长调控、细胞凋亡、肿瘤发生发展等过程中发挥重要的作用。因此，NAC1很可能在临床肿瘤的诊断和治疗中作为潜在的候选靶标。

在此基础上，本发明人筛选了大量的化合物，从而获得了一种可有效抑制肿瘤的小分子化合物，所述的小分子化合物特异性地在蛋白水平靶向抗凋亡分子—NAC1蛋白，对表达NAC1的肿瘤细胞的生物学行为进行干预，从而有效抑制NAC1的功能，达到抗肿瘤效果。

下面具体介绍：

如本文所用，术语“本发明的小分子化合物”、“化合物AK-918/40046747”或“本发明化合物”、“本发明的间酰胺基苯甲酰胺衍生物”可互换使用，都指出小分子化合物3,5-二叔丁基-N-{[3-(2-甲基苯基)氨基甲酰基]苯基}苯甲酰胺及其药学上可接受的盐和活性衍生物。

3,5-二叔丁基-N-{[3-(2-甲基苯基)氨基甲酰基]苯基}苯甲酰胺是一种靶向于人伏隔核1蛋白(NAC1)的先导化合物，其结构式如下：

3,5-二叔丁基-N-{[3-(2-甲基苯基)氨基甲酰基]苯基}苯甲酰胺是一种已知化合物，可从商业途径购买到(如可购自从荷兰Specs公司)，也可常规的有机合成方法制备获得。

1、活性成分

在本发明中，优选的“活性成分”指这样的小分子化合物：所述的化合物与人NAC1蛋白能够相互结合，并且所述的化合物与顺铂联合可使卵巢癌SKOV3细胞的生长降低到50％以下(即降低至少50％)，优选降低到38％以下，更优选降低到35％以下，或降低到以以上数值为端点的范围之间。

本发明中所用的间酰胺基苯甲酰胺衍生物可以由药学上或生理学可接受的酸或碱衍生的盐形式使用。这些盐包括(但不限于)：与如下无机酸形成的盐：如盐酸、硫酸、硝酸、或磷酸；与如下有机酸形成的盐，如乙酸、草酸、丁二酸或马来酸；以及其它盐，包括但不限于：与碱金属或碱土金属(如钠、钾、钙或镁)形成的盐。一类特别优选的盐是钠盐或钾盐。

本发明还包括以酯(例如氨基甲酸酯)或其它常规的“前体药物”的形式(当以这种形式给药时，在体内可转化成活性部分)存在的本发明化合物。

本发明的小分子化合物能有效抑制人NAC1蛋白的功能，从而抑制肿瘤细胞的增殖，促进肿瘤细胞的凋亡。具体地，本发明的小分子化合物在分子水平针对人NAC1蛋白，对阳性表达人NAC1蛋白的肿瘤细胞的生物学行为进行逆转。实验已证明：(1)抑制NAC1的表达和功能可抑制肿瘤细胞的增殖，促进肿瘤细胞凋亡；(2)体内抑制NAC1的表达和功能可抑制肿瘤细胞的体外致瘤性；(3)抑制NAC1的表达和功能可抑制肿瘤细胞体内的生长。

2、药物组合物

本发明还包括含有间酰胺基苯甲酰胺衍生物及其药学上可接受的盐或酯的药物组合物。本发明的间酰胺基苯甲酰胺衍生物及其药物组合物可用于治疗癌症肿瘤，即给哺乳动物施用安全有效量的间酰胺基苯甲酰胺衍生物。

本发明化合物可与其它化疗药联用，如紫杉醇、卡铂、阿霉素、三苯氧胺、5-氟尿嘧啶、双呋喃氟尿嘧啶、三尖杉酯碱、阿糖胞苷、氟他胺、异环磷酰胺、脱氧氟尿苷、洛波钼、来屈唑或替尼泊甙等；肿瘤血管抑制药物，如血管他丁、内皮他丁、阿瓦斯丁等，可通过抑制NAC1来控制、缓解或治愈疾病的治疗，例如卵巢癌等癌症。此外，本发明的化合物还可与抗肿瘤的中药(或其制剂)合用。

一种优选的药物组合物还含有致凋亡药物，如顺铂、阿霉素等。

当间酰胺基苯甲酰胺衍生物或其药学上可接受的盐或酯用于治疗肿瘤时，它可与一种或多种药学上可接受的载体或赋形剂混合，如溶剂、稀释剂等，从而形成药物组合物。

液态载体包括：无菌水、聚乙二醇、非离子型表面活性剂和食用油(如玉米油、花生油和芝麻油)。固态载体包括：淀粉、乳糖、磷酸氢钙、微晶纤维素、蔗糖和白陶土，只要适合活性成分的特性和所需的特定给药方式。在制备药物组合物中通常使用的佐剂也可有利地被包括，例如调味剂、色素、防腐剂和抗氧化剂如维生素E、维生素C、2,6-二叔丁基对甲酚(BHT)和叔丁基羟基茴香醚(BHA)。

通常，本发明的药物组合物包括以下剂型：口服给药剂型：如片剂、胶囊、可分散的粉末、颗粒或悬浮液(混悬剂)(含有如约0.05-5％悬浮剂(助溶剂))、糖浆(含有如约10-50％糖)、和酏剂(含有约20-50％乙醇)；或者以无菌可注射溶液或混悬剂形式(在等渗介质中含有约0.05-5％助溶剂)进行非肠胃道给药。这些药物制剂通常可含有与载体混合的约0.001-99.9wt％，优选0.5-99.5wt％，较佳地2.5-90wt％，更佳地5％-60wt％(重量)的活性成分(间酰胺基苯甲酰胺衍生物或其药学上可接受的盐或酯)，按组合物的总重量计。

在制备药物组合物时，通常，可将这些本发明的化合物配制于无毒的、惰性的和药学上可接受的水性载体介质中，其pH通常约为5-8，较佳的pH约为6-8，尽管pH值可随被配制物质的性质以及待治疗的病症而有所变化。

配制好的药物组合物可以通过常规途径进行给药，其中包括(但并不限于)：瘤内、肌内、腹膜内、静脉内、皮下、皮内、口服或局部给药。优选静脉给药方式。

本发明所用的间酰胺基苯甲酰胺衍生物也可肠胃外或腹腔内给药。也可在适当混合有表面活性剂(如羟丙基纤维素)的水中制备这些活性化合物(作为游离碱或药学上可接受的盐)的溶液或悬浮液。还可在甘油、液体、聚乙二醇及其在油中的混合物中制备分散液。在常规储存和使用条件下，这些制剂中含有防腐剂以防止微生物生长。

适应于注射的药物形式包括：无菌水溶液或分散液和无菌粉(用于临时制备无菌注射溶液或分散液)。在所有情况中，这些形式必须是无菌的且必须是流体以易于注射器排出流体。在制造和储存条件下必须是稳定的，且必须能防止微生物(如细菌和真菌)的污染影响。载体可以是溶剂或分散介质，其中含有如水、醇(如甘油、丙二醇和液态聚乙二醇)、它们的适当混合物和植物油。

在使用本发明所述的间酰胺基苯甲酰胺衍生物时，还可与其它肿瘤治疗手段(如放疗)或其它治疗剂(如顺铂、阿霉素等)联用。

所用活性成分的有效剂量可随给药的模式和待治疗的疾病的严重程度而变化。然而，通常当本发明化合物每天以约0.01-100mg/kg动物体重(较佳地0.02-20mg/kg体重，更佳地0.l-l0mg/kg体重给药)的剂量给予时，能得到令人满意的效果，较佳地每天以1-4次的剂量给予，或以缓释形式给药。对大部分大型哺乳动物而言，每天的总剂量约为5-5000mg或更高，较佳地10-1000mg。适用于内服的剂量形式，包含与固态或液态药学上可接受的载体混合的约0.5-500mg的活性化合物。可调节此剂量方案以提供最佳治疗反应。例如，由治疗状况的迫切要求，可每天给予若干次分开的剂量，或将剂量按比例地减少。

从易于制备和给药的立场看，优选的药物组合物是液态组合物。间酰胺基苯甲酰胺衍生物的静脉给药是优选的。

3、保健品组合物

除了制备药物组合物用于治疗肿瘤之外，在本发明中，还可将间酰胺基苯甲酰胺衍生物或其保健品学上可接受的盐或酯或提取物用于制备保健品组合物，从而用于辅助治疗肿瘤。

在本发明中，保健品组合物含有安全有效量(如0.01-99wt％)的间酰胺基苯甲酰胺衍生物或其保健品学上可接受的盐或酯、或提取物和保健品学上可接受的载体。

本发明的保健品组合物可与药物组合物一样含有相同含量的间酰胺基苯甲酰胺衍生物或其保健品学上可接受的盐或酯或提取物。通常，保健品组合物中间酰胺基苯甲酰胺衍生物的含量可略低一些，例如含0.01-50wt％间酰胺基苯甲酰胺衍生物或其保健品学上可接受的盐或酯。

本发明的保健品组合物，可以通过常规方法制成任何常规的制剂形式，优选的是片剂、口服液、颗粒剂和胶囊制剂。

4、食品添加剂

除了制备药物组合物用于治疗肿瘤之外和作为保健品组合物用于辅助治疗肿瘤以外，在本发明中，还可将间酰胺基苯甲酰胺衍生物或其食品学上可接受的盐或酯或提取物用于制备食品添加剂，从而用于加入食品中，提高对象的抗肿瘤能力并辅助治疗肿瘤。

在本发明中，食品添加剂可含有安全有效量(如0.01-99wt％)的间酰胺基苯甲酰胺衍生物或其食品学学上可接受的盐或酯或提取物，和食品学上可接受的载体。

本发明的食品添加剂可与药物组合物或保健品组合物一样含有相同含量的间酰胺基苯甲酰胺衍生物或其食品学上可接受的盐或酯或提取物。通常，食品添加剂中间酰胺基苯甲酰胺衍生物的含量可低于保健品中的含量，例如含0.01-50wt％间酰胺基苯甲酰胺衍生物或其食品学上可接受的盐或酯。

此外，在适当的情况下，将本发明的间酰胺基苯甲酰胺衍生物或其食品学上可接受的盐或酯或提取物直接作为食品添加剂使用也是可行的，只要它们不会影响食品的口味和/或外观。

本发明的食品添加剂，可以通过常规方法制成任何常规的形式，例如溶液、粉末、糖浆等。

为使本发明的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面结合实施例进一步说明本发明的技术方案。但是本发明不限于所列出的实施例，还应包括在本发明所要求的权利范围内其他任何公知的改变。

此处所称的“一个实施例”或“实施例”是指可包含于本发明至少一个实现方式中的特定特征、结构或特性。在本说明书中不同地方出现的“在一个实施例中”并非均指同一个实施例，也不是单独的或选择性的与其他实施例互相排斥的实施例。

下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，例如Sambrook等人，《分子克隆：实验室手册》(纽约，冷泉港实验室出版社，New York:Cold Spring HarborLaboratory Press,1989)中所述的条件，或按照制造厂商所建议的条件。

除非另外说明，否则百分比和份数按重量计算。除非另行定义，文中所使用的所有专业与科学用语与本领域熟练人员所熟悉的意义相同。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用于本发明中。文中所述的较佳实施方法与材料仅作示范之用。

细胞系

SKOV3细胞系：购自ATCC，这是一种阳性表达NAC1的卵巢癌肿瘤细胞系。

SKOV3细胞系的培养方法如下：将细胞接种于含10％小牛血清的DMEM(InVitrogen公司)培养液中，置于37摄氏度、体积分数为5％的CO2培养箱中常规培养，实验前无药培养两周。

实施例

1、小分子化合物(AK-918/40046747)的筛选

采用计算机辅助的虚拟筛选方法进行。

首先从RCSB PDB中获取NAC1的POZ domain的二聚体结构，分析二聚体的结合模式，使用MOE的SiteFinder功能对受体的表面形状和亲疏水性质等进行计算，确定最适合小分子抑制剂结合的活性位点，对SPECS化合物库的20万个化合物进行前处理，使用Oprea'sleadlikeness filter对化合物的ADMET性质进行过滤，保留适合作为先导化合物的分子。对每个化合物分别进行能量最小化，然后依次采用刚性和柔性对接方式，将小分子分别对接到受体的前述活性位点。计算结合自由能，取结合能低于-10kcal/mol的分子。计算分子的拓扑结构指纹，根据指纹间的Tanimoto相似度进行聚类分析，综合打分与结构多样性提取结构多样性子集，结合对受体-配体作用模式的可视化判断，挑选出最终的候选分子。

其中，AK-918/40046747小分子化合物结构式如式I所示，3,5-二叔丁基-N-{[3-(2-甲基苯基)氨基甲酰基]苯基}苯甲酰胺。

(式I)

2、小分子化合物(AK-918/40046747)可抑制靶标NAC1蛋白的二聚体形成。

对于选出的AK-918/40046747(购自荷兰Specs公司)，通过免疫沉淀技术、免疫印迹法检测小分子化合物对靶标NAC1蛋白的二聚体形成。

结果证实AK-918/40046747可抑制NAC1蛋白二聚体的形成，如图1所示。

3、小分子化合物(AK-918/40046747)对肿瘤细胞的生长和增殖抑制

本实施例采用了常规的MTT法。具体方法如下：

将SKOV3细胞以3000个细胞/孔的密度铺96孔板培养过夜。然后，把小分子化合物AK-918/4004674710μM联合不同浓度(1.25、2.5、5、10、的顺铂和阿霉素联合加入孔中。48小时后，在每孔中加入MTT(5mg/ml)10μl，37摄氏度孵育4小时后吸弃上清。用150μl二甲基亚砜溶解紫色结晶后，置于酶标仪(Bio-Rad公司)，检测570nm处的吸光度。

本实施例采用了常规的克隆集落形成实验法。具体方法如下：

10μM小分子化合物AK-918/40046747联合20μM顺铂和阿霉素对SKOV3细胞进行处理24后，用胰酶消化下来，细胞悬液反复吹打，使细胞充分分散，单个细胞百分率应在95％以上，在血球计数板上计数。按照每皿含2000个细胞的浓度分别接种2ml细胞悬液到培养皿中，使细胞分散均匀。37℃、5％CO₂中培养7～14天，中途不时更换新鲜培养基。在倒置显微镜下观察，待培养皿中出现肉眼可见的集落时，终止培养，弃去培养基，使用PBS润洗两遍。结晶紫染色20分钟。PBS洗脱2-3次后分析结果。

结果显示，AK-918/40046747可以在10uM终浓度显著增强顺铂和阿霉素对细胞生长和增殖的抑制，而其单独应用未对细胞造成显著的毒性作用，如图2A和2B所示。

4、小分子化合物(AK-918/40046747)对顺铂和阿霉素杀伤肿瘤细胞的增强效应的检测

将卵巢癌细胞系SKOV3细胞以20000个/孔的密度铺到24孔板中，孵育16-24小时后，加入AK-918/40046747至终浓度10μM。4小时后，再加入顺铂或阿霉素至终浓度20μM。作用48小时后，用免疫印迹法检测凋亡蛋白剪切的PARP表达。结果如图2C所示：联用了顺铂或阿霉素20μM和AK-918/40046747 10μM的凋亡蛋白表达显著性高于单独用顺铂或阿霉素的细胞。此外，与MTT结果一致：单独应用化合物并未引起显著的细胞的凋亡。

本发明的化合物可特异性抑制人伏隔核1蛋白二聚体的形成，因此可用于治疗高表达该蛋白的肿瘤，如卵巢癌。

本发明上述的实施例的结果表明，本发明化合物可稳定地抑制NAC1，协同顺铂或阿霉素杀伤肿瘤细胞。

需说明的的是，2-(4-叔丁基苯氧基)-N-(2-{[(4-叔丁基苯氧基)乙酰基]氨基}乙基)乙酰胺与AK-918/40046747是两个完全不同母核结构的化合物，前者以双酰化的乙二胺为主要效应结构，后者是酰化的间氨基苯甲酰胺为主要效应结构，两者不是简单的衍生物的关系，属于完全不同的结构类型。

综上所述，本发明公开了一种靶向于人伏隔核1抗肿瘤小分子化合物及其组合物，可有效靶向抑制抗凋亡分子----NAC1蛋白，从而用于癌症治疗；还可以与其它药物和治疗手段联合，用于恶性肿瘤的治疗；具有渗透性好，毒副作用小，结构简单，易于合成等优点。

应说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的精神和范围，其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。

Claims (8)

1.3,5-二叔丁基-N-{[3-(2-甲基苯基)氨基甲酰基]苯基}苯甲酰胺、或其药学、保健品学或食品学上可接受的盐与顺铂或阿霉素在制备用于治疗卵巢癌肿瘤、抑制卵巢癌肿瘤细胞生长、和/或诱导卵巢癌肿瘤细胞凋亡的药物中的用途，其中，所述3,5-二叔丁基-N-{[3-(2-甲基苯基)氨基甲酰基]苯基}苯甲酰胺和顺铂或阿霉素之间重量比为1:50-50:1。

2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于：所述药物用于抑制人伏膈核1。

3.根据权利要求1所述的用途，其特征在于：所述卵巢癌肿瘤细胞是表达人伏膈核1的肿瘤细胞。

4.根据权利要求3所述的用途，其特征在于：所述卵巢癌肿瘤细胞的人伏膈核1表达量高于正常细胞30％～50％。

5.根据权利要求1所述的用途，其特征在于：所述3,5-二叔丁基-N-{[3-(2-甲基苯基)氨基甲酰基]苯基}苯甲酰胺、或其药学、保健品学或食品学上可接受的盐的终浓度为10μM，顺铂或阿霉素终浓度为20μM。

6.一种组合物，其特征在于，所述的组合物含有：

(1)化合物3,5-二叔丁基-N-{[3-(2-甲基苯基)氨基甲酰基]苯基}苯甲酰胺、或其药学、保健品学或食品学上可接受的盐、或它们的混合物；

(2)致凋亡药物，其中，所述致凋亡药物为顺铂或阿霉素，所述化合物3,5-二叔丁基-N-{[3-(2-甲基苯基)氨基甲酰基]苯基}苯甲酰胺、或其药学、保健品学或食品学上可接受的盐、或它们的混合物和致凋亡药物之间重量比为1:50-50:1；

(3)药学、保健品学、或食品学上可接受的载体或赋形剂。

7.根据权利要求6所述的组合物，其特征在于，所述的3,5-二叔丁基-N-{[3-(2-甲基苯基)氨基甲酰基]苯基}苯甲酰胺占组合物总重量的10-80wt％。

8.根据权利要求6所述的组合物，其特征在于，所述组合物的剂型是片剂、胶囊、粉末剂、颗粒剂、混悬剂或注射剂。

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