CN110108700A - 一种多胺检测试剂、多胺检测干化学试纸条及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
一种多胺检测试剂、多胺检测干化学试纸条及其制备方法,属于体外诊断试剂领域,解决了细菌性阴道病临床诊断检测的问题。该多胺检测试剂包括底物、显色液、缓冲液、辅助试剂;底物为苯酚、亚硝基铁氰化钠、亚硝基铁氰化钾中的一种或多种;显色液包括主成分和溶液,主成分为次氯酸钠或次氯酸钾,溶液为氢氧化钠溶液或氢氧化钾溶液;缓冲液选自磷酸氢二钠‑柠檬酸缓冲液、磷酸氢二钠‑磷酸二氢钠缓冲液、磷酸二氢钾‑氢氧化钠缓冲液中的一种或多种;辅助试剂选自还原剂、增色剂、分散剂中的一种或多种。本发明依据化学显色法原理,所需的原料和制备方法简单,与类似产品相比,具有操作简单、灵敏度及特异性均较好、适宜普及等优点。
Description
技术领域
本发明属于体外诊断试剂技术领域,涉及一种多胺检测试剂、多胺检测干化学试纸条及其制备方法。
背景技术
细菌性阴道病(Bacterial Vaginosis,简称BV)是育龄妇女最常见的阴道感染性疾病,占外阴阴道感染的40~50%,近年来研究发现细菌性阴道病不仅与盆腔炎、阴道炎、泌尿系感染等妇科疾病有关,还可以引起羊膜腔感染、胎膜早破、产褥感染、低出生体重、新生儿感染及新生儿黄疸等导致不良围产结局,因此越来越被人们重视。从病理角度分析,细菌性阴道病主要是由于女性阴道内正常菌群减少,厌氧菌和菌混合生长的临床症状群,临床发病率较高(10~15%),阴道中正常菌群的大量减少而失调,其主要被厌氧菌群(如加德纳杆菌、拟动弯杆菌等其他厌氧菌)侵蚀所造成,在这侵蚀的过程中会产生组织多胺。
经验认为BV的主要病原菌是阴道加德纳菌(GV),Amsel标准诊断以及以往报道的革兰染色法、脯氨酸氨基肽酶检测法等的检测原理主要也是针对阴道加德纳菌(GV)的。近年研究认为,除了阴道加德纳菌(GV)感染外,BV尚可因定植于阴道内的厌氧菌过度繁殖和/或支原体、阴道毛滴虫、阴道念珠菌等感染导致菌群失调而引起。对于多种微生物混合感染的BV来说,单一检测某一种细菌或其代谢产物,其局限性是难以避免的。
阴道加德纳菌(GV)在代谢过程中可产生胺类物质,支原体和某些厌氧菌等微生物也可因分解尿素或蛋白质而产生氨。早期Graham等学者通过检查人尿中的三甲胺浓度来诊断疾病,如果检测到人尿中的三甲胺浓度高和氧化三甲胺浓度降低到三甲胺浓度的55%以下,就可诊断病人是患有鱼腥味综合症。而后此方法继续进行改良,可制备成用于检测妇女阴道多胺成分的检测试剂盒。目前医学上使用多胺检测法就是基于经典的胺试验设计而成。BV患者阴道分泌物中的胺类,经提取液抽提,加KOH溶液反应,产物在检测板复式膜上经放大后,可显示颜色变化。临床受试365例患者中,多胺检测法得到阳性结果118例,Amsel标准诊断得到阳性结果107例,二法符合率92.6%,而多胺测试一定程度上提高了BV的阳性检出率。目前尚无新的统一的BV诊断标准,不能确切排除多胺检测法的假阳性可能,但患者的临床资料显示,多胺检测法阳性而Arnsel标准诊断阴性的11例均有不同程度的阴道炎临床症状。分析原因,可能与多胺检测法扩大了BV病原体检测范围有关。另外,发现合并有阴道毛滴虫、阴道念珠菌、淋病奈瑟菌和支原体感染时,多胺检测也有助于BV的辅助诊断,与Amsel标准诊断结果比较,符合率≥90%。
细菌性阴道病的典型临床症状为阴道异常分泌物明显增多,呈稀薄均质状或稀糊状,为灰白色、灰黄色或乳黄色,带有特殊的鱼腥臭味。由于碱性前列腺液可造成胺类释放,故表现为性交时或性交后臭味加重。月经期阴道PH值升高,故经期时或经期后臭味也可加重。患者外阴有不适感,包括不同程度的外阴瘙痒,一般无明显时间性,但在休息状态及心情紧张状态下痒感更加明显。尚有不同程度的外服灼热感,有的患者出现性交痛。极少数患者出现下腹疼痛、性交困难及排尿异常感。阴道粘膜上皮在发病时无明显充血表现。本病常可合并其它阴道性传播疾病,故其临床表现可受到合并症的影响而有所不同。如当合并淋球菌感染时,阴道分泌物可表现为明显脓性状,并可出现尿痛、排尿困难等尿路刺激症状;合并滴虫感染时,可出现泡沫状阴道分泌物,且瘙痒加剧,呈奇痒;合并念珠菌感染时,阴道分泌物可呈现为凝乳状或豆腐渣样。
Amsel法是目前作为诊断BV传统的使用方法,该方法提供了以下四点诊断标准并规定至少三点标准符合,则可诊断为BV:
(1)薄均质的阴道分泌物,粘附于阴道壁但易于擦拭;
(2)阴道PH大于4.7;
(3)在阴道分泌物中见到线索细胞(clue cell);
(4)氨气味试验(whifftest)阳性。
ES-chenbaeh认为,将PH提高到4.7诊断可能更准确。
Spiegel等提出Gram染色诊断BV:
(1)Gardner菌及其他致病菌存在;
(2)每个油镜视野乳酸杆菌≤5个。
Krohn等调查表明该实验特异性为95%,但敏感度只有62%,阳性预测值为76%。国产多胺快速检测试剂盒的原理是检测分泌物中胺的含量,但几乎所有的阴道感染都伴有胺的增加,其灵敏度可达98%,但特异性仅有50%左右。
公开号为CN101782572A的中国专利公开了一种用于检测尿液中多胺的尿多胺检测试剂盒,其采用化学发光方法制备的多胺检测试剂盒,制备过程需要多胺抗原、固相抗体树脂、异硫氰酸根合异鲁来诺等原料,不仅价格昂贵,而且制备工艺复杂,操作步骤较为繁琐。
发明内容
本发明的目的是提供一种多胺检测试剂、多胺检测干化学试纸条及其制备方法,以解决细菌性阴道病(BV)临床诊断检测的问题。
本发明为解决技术问题所采用的技术方案如下:
本发明的一种多胺检测试剂,包括:底物、显色液、缓冲液、辅助试剂;
所述底物为苯酚、亚硝基铁氰化钠、亚硝基铁氰化钾中的一种或多种;
所述显色液包括主成分和溶液,所述主成分为次氯酸钠或次氯酸钾,所述溶液为氢氧化钠溶液或氢氧化钾溶液;
所述缓冲液选自磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液、磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液、磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液中的一种或多种;
所述辅助试剂包括还原剂、增色剂和分散剂。
作为优选的实施方式,所述苯酚浓度为5.0~20.0mg/mL;所述亚硝基铁氰化钠浓度为1.0~5.0mg/mL;所述亚硝基铁氰化钾浓度为1.0~5.0mg/mL。
作为优选的实施方式,所述显色液中,主成分的含量为1.0~20.0%(v/v);溶液的浓度为0.1~3.0mg/mL。
作为优选的实施方式,所述缓冲液的浓度为0.05~2mM,pH为4~9。
作为优选的实施方式,所述还原剂浓度为0.1~3.0mg/mL,选自硫代硫酸钠、硫脲、二巯基苏糖醇中的一种或多种。
作为优选的实施方式,所述增色剂浓度为0.1~3.0mg/mL,选自腈黄、四号黄中的一种或两种。
作为优选的实施方式,所述分散剂浓度为1.0~5.0mg/mL,选自PVP-K30、PVP-K90、PEG-2000、PEG-4000、PEG-6000中的一种或多种。
本发明的一种多胺检测干化学试纸条,含有上述的一种多胺检测试剂。
本发明的一种多胺检测干化学试纸条的制备方法,包括以下步骤:
步骤一、配制药液
将缓冲液和辅助试剂混合均匀,加入底物配制成药液;
步骤二、干燥
采用浸渍干燥机自动化干燥方法进行干燥;
浸渍干燥机温度设定如下:
开机后将主加热温度设定为80℃,副加热温度设定60℃,待主加热温度达到80℃、各干燥室温度≥60℃时将滤纸进入药液中开始浸液;
浸渍干燥机走速设定如下:
A液:7.0~11.0Hz;
B液:10.0~15.0Hz。
作为优选的实施方式,所述滤纸为7218型滤纸、31ET型滤纸、3MM型滤纸、319滤纸或526型滤纸。
本发明的有益效果是:细菌性阴道病(BV)的发病原因主要是阴道中正常菌群的优势被厌氧菌群所取代,而多胺是阴道中厌氧菌侵蚀阴道细胞的过程中会产生的一类化合物。大多数人正常阴道分泌物中只能检测出少量的单胺。阴道感染时,正常菌群减少而导致生态失调,分泌物中可检出大量的单胺和多胺(如腐胺、尸胺、三甲胺等胺类化合物),这些胺类是阴道分泌物产生异味的主要原因,主要由阴道加德纳菌、支原体及其他厌氧型菌产生。因此检测有无组织多胺可以初步诊断BV感染与否,是BV的有效标记物。
经大量实验证明,细菌性阴道病(BV)检测试纸选取阴道分泌物的多胺作为检测指标,阴道分泌物中的多胺活性与BV之间存在一定的量的关系。其中多胺是由阴道菌群中厌氧菌分泌的,其活性与厌氧菌数量成正比,酶活性高反映阴道内厌氧菌过度生长,特异性较好。细菌性多胺可以作用于各种天然或合成的多胺糖结合底物,通过底物分解和显色剂的显色来只是多胺的活性高低。多胺检测结果呈阳性可初步断定阴道有细菌感染,由于胺是碱性的,也使分泌物pH增加。多胺检测结合pH检测、H2O2检测、唾液酸酶检测,测试结果相辅相成、相互佐证,对于细菌性阴道病(BV)的确诊具有重要意义。
本发明依据此原理研制成检测多胺的干化学试纸条,该干化学试纸条可作为细菌性阴道炎辅助评判指标,可反映阴道厌氧菌群诱发多种疾病的重要指标。
本发明主要依据化学显色法原理,所需的原料和制备方法简单,本发明的多胺检测干化学试纸条与类似产品相比,具有操作简单、灵敏度及特异性均较好、适宜普及等优点,可在妇科检查中得到广泛使用,并弥补现有技术的空白。
具体实施方式
本发明的一种多胺检测试剂,主要包括底物、显色液、缓冲液、辅助试剂。
其中的底物可以选自苯酚、亚硝基铁氰化钠、亚硝基铁氰化钾中的一种或多种。
所说的苯酚浓度可以为5.0~20.0mg/mL。
所说的亚硝基铁氰化钠浓度为1.0~5.0mg/mL。
所说的亚硝基铁氰化钾浓度为1.0~5.0mg/mL。
其中的显色液包括主成分和溶液,所说的主成分可以为次氯酸钠或次氯酸钾,其含量为1.0~20.0%(v/v);所说的溶液可以为0.1~3.0mg/mL氢氧化钠溶液或0.1~3.0mg/mL氢氧化钾溶液。氢氧化钾溶液或氢氧化钠溶液可以为检测过程提供一个良好的碱性反应环境。
其中的缓冲液带有缓冲能力,浓度为0.05~2mM(优选浓度为0.75~1.5mM),pH为4~9(优选pH为6~8,最优选pH为7),可以选自磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液、磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液、磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液中的一种或多种。缓冲体系为检测过程提供一个良好的反应环境。
其中的辅助试剂包括还原剂、增色剂和分散剂三种物料。
所说的还原剂浓度为0.1~3.0mg/mL,可以选自硫代硫酸钠、硫脲、二巯基苏糖醇中的一种或多种。
所说的增色剂浓度为0.1~3.0mg/mL,可以选自腈黄、四号黄中的一种或两种。使用增色剂可以增加试纸底色,有助于凸显显色后颜色反差。
所说的分散剂浓度为1.0~5.0mg/mL,可以选自PVP-K30、PVP-K90、PEG-2000、PEG-4000、PEG-6000中的一种或多种。分散剂PVP-K30、PVP-K90、PEG-2000、PEG-4000、PEG-6000单独或联合使用可以增加试纸的分散能力,有助于颜色的均匀分布,可提高检测的准确度。
本发明的一种多胺检测干化学试纸条,含有上述的多胺检测试剂。
本发明的一种多胺检测干化学试纸条的制备方法,主要包括以下步骤:
步骤一、配制药液
将缓冲液和辅助试剂混合均匀,加入底物配制成药液;
步骤二、干燥
采用浸渍干燥机自动化干燥方法进行干燥;
浸渍干燥机温度设定如下:
开机后将主加热温度设定为80℃,副加热温度设定60℃,待主加热温度达到80℃、各干燥室温度≥60℃左右时将滤纸进入药液中开始浸液。
所说的滤纸为7218型滤纸、31ET型滤纸、3MM型滤纸、319滤纸或526型滤纸。
浸渍干燥机走速设定如下:
A液:7.0~11.0Hz;
B液:10.0~15.0Hz。
浸渍干燥机走速的设定是根据试纸在验证过程中逐步确认,走速的快慢会影响试纸的干燥程度,对试纸的外观及准确度有一定影响。
本发明所采用的浸渍干燥机自动化干燥方法具有便捷、省时、可自动化的优势,有效控制试纸制备过程中人工误差带来的影响,浸渍干燥机主副加热,对温度全面进行监控,温度设定在规定的范围内,可以大大减少试纸批次之间的误差,保证试纸制备的准确性、稳定性及均一性。
本发明的一种多胺检测干化学试纸条的简易测定方法为:
取经过1.2mL细胞保存液稀释的样本,滴加一滴在多胺检测干化学试纸条上,于37℃温浴8~10min后,外加一滴显色液,可观察多胺试纸块的的颜色变化,试纸块由浅黄色/黄色变为浅绿色、绿色、深绿色,即判定为多胺阳性。
多胺法检测原理:阴道分泌物中多胺在10%的氢氧化钾作用下释放出氨气,生成的氨气在亚硝基铁氰化钠的催化作用下,与苯酚、次氯酸钠发生反应形成蓝色的靛酚蓝,颜色由黄色变为绿色,颜色深浅与多胺量呈比例关系。
下面将结合本发明实施例,对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
实施例1:多胺检测干化学试纸条的制备
药液:
10.0mg/mL苯酚;
2.5mg/mL亚硝基铁氰化钠;
0.5mg/mL硫代硫酸钠;
0.3mg/mL腈黄;
3.0mg/mLPEG-6000;
PH值为7.0;
滤纸类型:7218型滤纸;
配套显色液:5.0%(v/v)次氯酸钠;1.0mg/mL氢氧化钾溶液;
浸渍干燥机自动化干燥方法的参数设定:
开机后将主加热温度设定为80℃,副加热温度设定60℃,待主加热温度达到80℃、各干燥室温度达到60℃左右时将滤纸进入药液中开始浸液;浸渍干燥机走速设定为10.0Hz。
浸渍干燥机自动化干燥流程如下:
1、按开机流程将浸渍干燥机打开,根据实施例所设置的烘干温度、走纸速度,待温度达到设定温度,各干燥室温度达到规定温度才能进行浸液;
2、将浸液使用的滤纸进行悬挂,浸液槽安装好;
3、将配制好的药液倒入浸渍槽中,药液量应在浸渍槽的1/2处,然后将剩余的药液倒入盛药瓶中,调节药液注入的速度,将盛药罐密封;
4、开启走纸开关,用压纸轮将滤纸浸入药液中,记录药液位置高度;
5、浸液烘干过程注意观察药液剂量,干燥室温度符合实施案例要求;
6、浸液的滤纸全部从干燥室走出,关闭走纸开关,将滤纸做好标识,放入装有干燥剂的自封袋中并放入干燥器中待用。
实施例2:多胺检测干化学试纸条的制备
药液:
15.0mg/mL苯酚;
2.5mg/mL亚硝基铁氰化钠;
0.5mg/mL硫代硫酸钠;
0.3mg/mL腈黄;
3.0mg/mLPEG-6000;
PH值为7.0;
滤纸类型:7218型滤纸;
配套显色液:5.0%(v/v)次氯酸钠;1.0mg/mL氢氧化钾溶液;
浸渍干燥机自动化干燥方法的参数设定如实施例1。
浸渍干燥机自动化干燥流程如实施例1。
实施例3:多胺检测干化学试纸条的制备
药液:
20.0mg/mL苯酚;
2.5mg/mL亚硝基铁氰化钠;
0.5mg/mL硫代硫酸钠;
0.3mg/mL腈黄;
3.0mg/mLPEG-6000;
PH值为7.0;
滤纸类型:7218型滤纸
配套显色液:5.0%(v/v)次氯酸钠;1.0mg/mL氢氧化钾溶液;
浸渍干燥机自动化干燥方法的参数设定如实施例1。
浸渍干燥机自动化干燥流程如实施例1。
实施例4:多胺检测干化学试纸条的制备
药液:
15.0mg/mL苯酚;
2.5mg/mL亚硝基铁氰化钠;
0.5mg/mL硫代硫酸钠;
0.3mg/mL四号黄;
3.0mg/mLPEG-6000;
PH值为7.0;
滤纸类型:7218型滤纸;
配套显色液:5.0%(v/v)次氯酸钠;1.0mg/mL氢氧化钾溶液;
浸渍干燥机自动化干燥方法的参数设定如实施例1。
浸渍干燥机自动化干燥流程如实施例1。
实施例5:多胺检测干化学试纸条的制备
药液:
15.0mg/mL苯酚;
2.5mg/mL亚硝基铁氰化钠;
0.5mg/mL硫代硫酸钠;
0.3mg/mL四号黄;
3.0mg/mLPEG-6000;
PH值为7.0;
滤纸类型:7218型滤纸;
配套显色液:5.0%(v/v)次氯酸钠;1.0mg/mL氢氧化钾溶液;
浸渍干燥机自动化干燥方法的参数设定如实施例1。
浸渍干燥机自动化干燥流程如实施例1。
实施例6:多胺检测干化学试纸条的制备
药液:
20.0mg/mL苯酚;
2.5mg/mL亚硝基铁氰化钠;
0.5mg/mL硫代硫酸钠;
0.3mg/mL四号黄;
3.0mg/mLPEG-6000;
PH值为7.0;
滤纸类型:7218型滤纸;
配套显色液:5.0%(v/v)次氯酸钠;1.0mg/mL氢氧化钾溶液;
浸渍干燥机自动化干燥方法的参数设定如实施例1。
浸渍干燥机自动化干燥流程如实施例1。
实施例7:多胺检测干化学试纸条的制备
药液:
15.0mg/mL苯酚;
2.5mg/mL亚硝基铁氰化钠;
0.5mg/mL硫代硫酸钠;
0.3mg/mL四号黄;
3.0mg/mLPEG-4000;
PH值为7.0;
滤纸类型:7218型滤纸;
配套显色液:5.0%(v/v)次氯酸钠;1.0mg/mL氢氧化钾溶液;
浸渍干燥机自动化干燥方法的参数设定如实施例1。
浸渍干燥机自动化干燥流程如实施例1。
实施例8:多胺检测干化学试纸条的制备
药液:
15.0mg/mL苯酚;
2.5mg/mL亚硝基铁氰化钠;
0.5mg/mL硫代硫酸钠;
0.3mg/mL四号黄;
3.0mg/mLPEG-4000;
PH值为7.0;
滤纸类型:7218型滤纸
配套显色液:5.0%(v/v)次氯酸钠;1.0mg/mL氢氧化钾溶液;
浸渍干燥机自动化干燥方法的参数设定如实施例1。
浸渍干燥机自动化干燥流程如实施例1。
实施例9:多胺检测干化学试纸条的制备
药液:
20.0mg/mL苯酚;
2.5mg/mL亚硝基铁氰化钠;
0.5mg/mL硫代硫酸钠;
0.3mg/mL四号黄;
3.0mg/mLPEG-4000;
PH值为7.0;
滤纸类型:7218型滤纸;
配套显色液:5.0%(v/v)次氯酸钠;1.0mg/mL氢氧化钾溶液;
浸渍干燥机自动化干燥方法的参数设定如实施例1。
浸渍干燥机自动化干燥流程如实施例1。
实施例10:多胺检测干化学试纸条的制备
药液:
10.0mg/mL苯酚;
2.5mg/mL亚硝基铁氰化钠;
0.5mg/mL二巯基苏糖醇;
0.3mg/mL腈黄;
3.0mg/mLPEG-6000;
PH值为7.0;
滤纸类型:7218型滤纸;
配套显色液:5.0%(v/v)次氯酸钠;1.0mg/mL氢氧化钾溶液;
浸渍干燥机自动化干燥方法的参数设定如实施例1。
浸渍干燥机自动化干燥流程如实施例1。
实施例11:多胺检测干化学试纸条的制备
药液:
15.0mg/mL苯酚;
2.5mg/mL亚硝基铁氰化钠;
0.5mg/mL二巯基苏糖醇;
0.3mg/mL腈黄;
3.0mg/mLPEG-6000;
PH值为7.0;
滤纸类型:7218型滤纸;
配套显色液:5.0%(v/v)次氯酸钠;1.0mg/mL氢氧化钾溶液;
浸渍干燥机自动化干燥方法的参数设定如实施例1。
浸渍干燥机自动化干燥流程如实施例1。
实施例12:多胺检测干化学试纸条的制备
药液:
20.0mg/mL苯酚;
2.5mg/mL亚硝基铁氰化钠;
0.5mg/mL二巯基苏糖醇;
0.3mg/mL腈黄;
3.0mg/mLPEG-6000;
PH值为7.0;
滤纸类型:7218型滤纸;
配套显色液:5.0%(v/v)次氯酸钠;1.0mg/mL氢氧化钾溶液;
浸渍干燥机自动化干燥方法的参数设定如实施例1。
浸渍干燥机自动化干燥流程如实施例1。
实施例13:多胺检测干化学试纸条的制备
药液:
10.0mg/mL苯酚;
2.5mg/mL亚硝基铁氰化钾;
0.5mg/mL硫代硫酸钠;
0.3mg/mL腈黄;
3.0mg/mLPEG-6000;
PH值为7.0;
滤纸类型:7218型滤纸;
配套显色液:5.0%(v/v)次氯酸钠;1.0mg/mL氢氧化钾溶液;
浸渍干燥机自动化干燥方法的参数设定如实施例1。
浸渍干燥机自动化干燥流程如实施例1。
实施例14:多胺检测干化学试纸条的制备
药液:
15.0mg/mL苯酚;
2.5mg/mL亚硝基铁氰化钾;
0.5mg/mL硫代硫酸钠;
0.3mg/mL腈黄;
3.0mg/mLPEG-6000;
PH值为7.0;
滤纸类型:7218型滤纸;
配套显色液:5.0%(v/v)次氯酸钠;1.0mg/mL氢氧化钾溶液;
浸渍干燥机自动化干燥方法的参数设定如实施例1。
浸渍干燥机自动化干燥流程如实施例1。
实施例15:多胺检测干化学试纸条的制备
药液:
20.0mg/mL苯酚;
2.5mg/mL亚硝基铁氰化钾;
0.5mg/mL硫代硫酸钠;
0.3mg/mL腈黄;
3.0mg/mLPEG-6000;
PH值为7.0;
滤纸类型:7218型滤纸;
配套显色液:5.0%(v/v)次氯酸钠;1.0mg/mL氢氧化钾溶液;
浸渍干燥机自动化干燥方法的参数设定如实施例1。
浸渍干燥机自动化干燥流程如实施例1。
本发明公开了一种多胺检测试剂、多胺检测干化学试纸条及其制备方法,本领域技术人员可以借鉴本文内容,适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是,所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的,它们都被视为包括在本发明。本发明的产品已经通过较佳实施例进行了描述,相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的产品进行改动或适当变更与组合,来实现和应用本发明技术。
Claims (10)
1.一种多胺检测试剂,其特征在于,包括:底物、显色液、缓冲液、辅助试剂;
所述底物为苯酚、亚硝基铁氰化钠、亚硝基铁氰化钾中的一种或多种;
所述显色液包括主成分和溶液,所述主成分为次氯酸钠或次氯酸钾,所述溶液为氢氧化钠溶液或氢氧化钾溶液;
所述缓冲液选自磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液、磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液、磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液中的一种或多种;
所述辅助试剂包括还原剂、增色剂和分散剂。
2.根据权利要求1所述的一种多胺检测试剂,其特征在于,所述苯酚浓度为5.0~20.0mg/mL;所述亚硝基铁氰化钠浓度为1.0~5.0mg/mL;所述亚硝基铁氰化钾浓度为1.0~5.0mg/mL。
3.根据权利要求1所述的一种多胺检测试剂,其特征在于,所述显色液中,主成分的含量为1.0~20.0%(v/v);溶液的浓度为0.1~3.0mg/mL。
4.根据权利要求1所述的一种多胺检测试剂,其特征在于,所述缓冲液的浓度为0.05~2mM,pH为4~9。
5.根据权利要求1所述的一种多胺检测试剂,其特征在于,所述还原剂浓度为0.1~3.0mg/mL,选自硫代硫酸钠、硫脲、二巯基苏糖醇中的一种或多种。
6.根据权利要求1所述的一种多胺检测试剂,其特征在于,所述增色剂浓度为0.1~3.0mg/mL,选自腈黄、四号黄中的一种或两种。
7.根据权利要求1所述的一种多胺检测试剂,其特征在于,所述分散剂浓度为1.0~5.0mg/mL,选自PVP-K30、PVP-K90、PEG-2000、PEG-4000、PEG-6000中的一种或多种。
8.含有权利要求1至7中任意一项所述的一种多胺检测试剂的多胺检测干化学试纸条。
9.制备权利要求8所述的一种多胺检测干化学试纸条的方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤一、配制药液
将缓冲液和辅助试剂混合均匀,加入底物配制成药液;
步骤二、干燥
采用浸渍干燥机自动化干燥方法进行干燥;
浸渍干燥机温度设定如下:
开机后将主加热温度设定为80℃,副加热温度设定60℃,待主加热温度达到80℃、各干燥室温度≥60℃时将滤纸进入药液中开始浸液;
浸渍干燥机走速设定如下:
A液:7.0~11.0Hz;
B液:10.0~15.0Hz。
10.根据权利要求9所述的制备方法,其特征在于,所述滤纸为7218型滤纸、31ET型滤纸、3MM型滤纸、319滤纸或526型滤纸。
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