CN110106097A - 加快修复富营养化水体的菌种增殖方法 - Google Patents

加快修复富营养化水体的菌种增殖方法 Download PDF

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Abstract

本发明提供了一种加快修复富营养化水体的菌种增殖方法，不动杆菌、脱氮除磷菌、木糖氧化无色杆菌、酿酒酵母菌株、约翰逊不动杆菌和假单胞菌能够在水体中发挥不同的功能，协同作用，相互促进，有效脱去水体中的总氮、总磷，净化富营养化水体，同时还能够抑制病原菌增长；其中，培养基能够将休眠状态的不动杆菌、脱氮除磷菌、木糖氧化无色杆菌、酿酒酵母菌株、约翰逊不动杆菌和假单胞菌激活，促进繁殖；酵素利于不动杆菌、脱氮除磷菌、木糖氧化无色杆菌、酿酒酵母菌株、约翰逊不动杆菌和假单胞菌繁殖，延长其增生期，提高富营养化水体的净化速度。本发明提供的方法能够延长去富营养化菌种的增生期，加快繁殖，利于加快富营养化水体的修复速度。

Description

加快修复富营养化水体的菌种增殖方法
技术领域
本发明涉及菌种繁殖领域，尤其是一种加快修复富营养化水体的菌种增殖方法。
背景技术
富营养化是一个全球性的环境难题，虽然富营养的现象已广为所知，但对其机理还知之甚少，这给富营养化的防治增添了不少难度。在影响生产力的各种元素中，氮和磷是最常见的限制性营养因子，因此控制氮磷负荷成为许多水生生态系统富营养化防治的重点。目前控制富营养化最常用的措施是控制外源污染物的流入，虽然对点源污染的控制比较容易操作，但面源污染的控制很难完全得到实施，再加上沉积物(底泥)中氮和磷的释放，使得富营养问题在一定时期内很难得到解决。目前国内绝大多数水体，特别是城市周边的湖泊都存在着这一问题。
但常用的物理和化学修复方法一般投资昂贵、设备复杂且不适用于大面积水体污染的修复治理。而微生物修复技术则因菌落增生期短，繁殖速度慢生长等限制不能得到广泛应用。
发明内容
本发明提出一种加快修复富营养化水体的菌种增殖方法，能够延长去富营养化菌种的增生期，加快繁殖。
本发明的技术方案是这样实现的：
一种加快修复富营养化水体的菌种增殖方法，包括以下步骤：
a)将粒径为10～20目的苹果粉、番茄粉、金盏花粉和胡萝卜粉浸泡到水中1h后，加热至60～80℃，2～3h，冷却后过300～500目筛网，将得到的过滤液浓缩后与葡萄糖、琼脂、牛肉汤混合，并用pH调节剂将pH调节到6～8，得到培养基；
b)将培养基在高温高压下灭菌后，取6份，分别室温下培养不动杆菌、脱氮除磷菌、木糖氧化无色杆菌、酿酒酵母菌株、约翰逊不动杆菌和假单胞菌；
c)取步骤b)得到的各菌液，并混合，将混合菌剂加入到酵素中，室温培养。
优选地，所述不动杆菌的保藏号为CCTCC No.M2013247，脱氮除磷菌的保藏号为CGMCC No.3518，木糖氧化无色杆菌的保藏号为CGMCC No2964，酿酒酵母菌株的保藏号为CGMCC12927，约翰逊不动杆菌的保藏号为CCTCC M2014023，假单胞菌的保藏号为CGMCCNo.4169。
优选地，所述混合菌剂中所述不动杆菌的浓度为(2～3)×108CFU/mL，所述脱氮除磷菌的浓度为(2～3)×109CFU/mL，所述木糖氧化无色杆菌的浓度为(1～2)×107CFU/mL，所述酿酒酵母菌株的浓度为(3～4)×108CFU/mL，所述约翰逊不动杆菌的浓度为(1～1.5)×107CFU/mL，所述假单胞菌杆菌的浓度为(3～4)×107CFU/mL。
优选地，所述熊果叶、所述土豆、所述蓝莓、所述大麦仁、所述洋甘菊、所述卷柏、所述紫苜蓿、所述虾青素的质量比为(0.1～0.2)：(10～15)：(1～2)：(3～5)：(0.2～0.3)：(0.1～0.2)：(0.1～0.2)：(0.4～0.5)。
优选地，所述酿酒酵母菌的加入总量是所述浆液质量的0.6～0.8％，所述双歧杆菌和所述乳酸菌的加入总量是所述浆液质量的0.2～0.3％。
优选地，所述双歧杆菌和所述乳酸菌的活菌数量比为1：(1.5～1.8)。
本发明提供了一种加快修复富营养化水体的菌种增殖方法，不动杆菌、脱氮除磷菌、木糖氧化无色杆菌、酿酒酵母菌株、约翰逊不动杆菌和假单胞菌能够在水体中发挥不同的功能，协同作用，相互促进，有效脱去水体中的总氮、总磷，净化富营养化水体，同时还能够抑制病原菌增长；其中，培养基能够将休眠状态的不动杆菌、脱氮除磷菌、木糖氧化无色杆菌、酿酒酵母菌株、约翰逊不动杆菌和假单胞菌激活，促进繁殖；酵素利于不动杆菌、脱氮除磷菌、木糖氧化无色杆菌、酿酒酵母菌株、约翰逊不动杆菌和假单胞菌繁殖，延长其增生期，提高富营养化水体的净化速度。本发明提供的方法能够延长去富营养化菌种的增生期，加快繁殖，利于净化富营养化水体。
具体实施方式
本发明提出的一种加快修复富营养化水体的菌种增殖方法，包括以下步骤：
a)将粒径为10～20目的苹果粉、番茄粉、金盏花粉和胡萝卜粉浸泡到水中1h后，加热至60～80℃，2～3h，冷却后过300～500目筛网，将得到的过滤液浓缩后与葡萄糖、琼脂、牛肉汤混合，并用pH调节剂将pH调节到6～8，得到培养基；
b)将培养基在高温高压下灭菌后，取6份，分别在室温条件下培养不动杆菌、脱氮除磷菌、木糖氧化无色杆菌、酿酒酵母菌株、约翰逊不动杆菌和假单胞菌；
c)取步骤b)得到的各菌液，并混合，将混合菌剂加入到酵素中，室温培养。
本发明中，不动杆菌、脱氮除磷菌、木糖氧化无色杆菌、酿酒酵母菌株、约翰逊不动杆菌和假单胞菌能够在水体中发挥不同的功能，协同作用，相互促进，有效脱去水体中的总氮、总磷，净化富营养化水体，同时还能够抑制病原菌增长；其中，培养基能够将休眠状态的不动杆菌、脱氮除磷菌、木糖氧化无色杆菌、酿酒酵母菌株、约翰逊不动杆菌和假单胞菌激活，促进繁殖；酵素利于不动杆菌、脱氮除磷菌、木糖氧化无色杆菌、酿酒酵母菌株、约翰逊不动杆菌和假单胞菌繁殖，延长其增生期，提高富营养化水体的净化速度。本发明提供的方法能够延长去富营养化菌种的增生期，加快繁殖，利于净化富营养化水体。
本发明中，将苹果粉、番茄粉、金盏花粉和胡萝卜粉浸泡到水中2～3h后，加热至60～80℃，2～3h，冷却后过滤，将得到的过滤液与葡萄糖、琼脂、牛肉汤混合，并用pH调节剂将pH调节到6～8，得到培养基；该培养基能够将休眠状态的不动杆菌、脱氮除磷菌、木糖氧化无色杆菌、酿酒酵母菌株、约翰逊不动杆菌和假单胞菌激活，促进不动杆菌、脱氮除磷菌、木糖氧化无色杆菌、酿酒酵母菌株、约翰逊不动杆菌和假单胞菌繁殖。
需要说明的是，牛肉汤为北京雷根生物技术有限公司生产的型号为CM0375的肉汤培养基。
在本发明的实施例中，苹果粉、番茄粉、金盏花粉、胡萝卜粉、水、过滤液、葡萄糖、琼脂、牛肉汤的质量比为(5～10)：(3～5)：(1～2)：(10～12)：(100～150)：(3～5)：(1～2)：(0.4～0.5)：(8～10)。其中需要说明的是，浓缩后过滤液的体积与水的质量比为1：(10～15)。
苹果粉、番茄粉、金盏花粉、胡萝卜粉的粒径均为10～20目。
将培养基在高温高压下灭菌后，取6份，分别在20～25℃下黑暗条件下培养不动杆菌、脱氮除磷菌、木糖氧化无色杆菌、酿酒酵母菌株、约翰逊不动杆菌和假单胞菌；其中，不动杆菌、脱氮除磷菌、木糖氧化无色杆菌、酿酒酵母菌株、约翰逊不动杆菌和假单胞菌在20～25℃下黑暗条件下培养能够增加上述菌种的繁殖速度。
在本发明的实施例中，不动杆菌的保藏号为CCTCC No.M2013247，脱氮除磷菌的保藏号为CGMCC No.3518，木糖氧化无色杆菌的保藏号为CGMCC No2964，酿酒酵母菌株的保藏号为CGMCC12927，约翰逊不动杆菌的保藏号为CCTCC M2014023，假单胞菌的保藏号为CGMCCNo.4169。在优选的实施例中，混合菌剂中不动杆菌的浓度为(2～3)×108CFU/mL，脱氮除磷菌的浓度为(2～3)×109CFU/mL，木糖氧化无色杆菌的浓度为(1～2)×107CFU/mL，酿酒酵母菌株的浓度为(3～4)×108CFU/mL，约翰逊不动杆菌的浓度为(1～1.5)×107CFU/mL，假单胞菌杆菌的浓度为(3～4)×107CFU/mL。
上述菌种能够在水体中发挥不同的功能，协同作用，相互促进，有效脱去水体中的总氮、总磷，净化富营养化水体，同时还能够抑制病原菌增长。
取步骤b)得到的各菌液，并混合，将混合菌剂加入到酵素中，室温培养。在本发明的实施例中，酵素的制备方法，包括以下步骤：a)将熊果叶、土豆、蓝莓、大麦仁、洋甘菊、卷柏、紫苜蓿浸泡到水中2～3h；再进行破碎处理，打浆，得到浆液；b)向步骤a)得到的浆液中接入酿酒酵母菌，得到Ⅰ发酵液；c)向步骤b)得到的Ⅰ发酵液接入双歧杆菌和乳酸菌发酵，得到Ⅱ发酵液；d)将步骤c)得到的Ⅱ发酵液进行过滤加入虾青素，混合均匀即得酵素。在优选的实施例中，酿酒酵母菌的保藏号为CGMCCNO.7277，双歧杆菌的保藏号为CGMCC No.1085，乳酸菌的保藏号为CGMCC No.13457。在其他实施例中，酿酒酵母菌的加入总量是浆液质量的0.6～0.8％，双歧杆菌和乳酸菌的加入总量是浆液质量的0.2～0.3％。
其中双歧杆菌和乳酸菌的活菌数量比为1：(1.5～1.8)。
在本发明的实施例中，熊果叶、土豆、蓝莓、大麦仁、洋甘菊、卷柏、紫苜蓿、虾青素的质量比为(0.1～0.2)：(10～15)：(1～2)：(3～5)：(0.2～0.3)：(0.1～0.2)：(0.1～0.2)：(0.4～0.5)。
本发明采用熊果叶、土豆、蓝莓、大麦仁、洋甘菊、卷柏、紫苜蓿、虾青素作为发酵原料，利于不动杆菌、脱氮除磷菌、木糖氧化无色杆菌、酿酒酵母菌株、约翰逊不动杆菌和假单胞菌繁殖，延长其增生期，提高富营养化水体的净化速度。
为了进一步说明本发明，下面结合实施例对本发明提供的一种加快修复富营养化水体的菌种增殖方法进行详细地描述，但不能将它们理解为对本发明保护范围的限定。
实施例1～5中牛肉汤为北京雷根生物技术有限公司生产的型号为CM0375的肉汤培养基。
实施例1
加快修复富营养化水体的菌种增殖方法，包括以下步骤：
a)将粒径为10～20目的苹果粉、番茄粉、金盏花粉和胡萝卜粉浸泡到水中1h后，加热至60℃，3h，冷却后过300～500目筛网，将得到的过滤液浓缩后与葡萄糖、琼脂、牛肉汤混合，并用pH调节剂将pH调节到6，得到培养基；
苹果粉、番茄粉、金盏花粉、胡萝卜粉、水、过滤液、葡萄糖、琼脂、牛肉汤的质量比为5:5:1:12:100:5:1:0.5:8:1:10；浓缩后过滤液的体积与水的质量比为1：10。
b)将培养基在高温高压下灭菌后，取6份，分别室温下培养不动杆菌、脱氮除磷菌、木糖氧化无色杆菌、酿酒酵母菌株、约翰逊不动杆菌和假单胞菌；
不动杆菌的保藏号为CCTCC No.M2013247，脱氮除磷菌的保藏号为CGMCCNo.3518，木糖氧化无色杆菌的保藏号为CGMCC No2964，酿酒酵母菌株的保藏号为CGMCC12927，约翰逊不动杆菌的保藏号为CCTCC M2014023，假单胞菌的保藏号为CGMCCNo.4169；
混合菌剂中不动杆菌的浓度为2×108CFU/mL，脱氮除磷菌的浓度为3×109CFU/mL，木糖氧化无色杆菌的浓度为1×107CFU/mL，酿酒酵母菌株的浓度为4×108CFU/mL，约翰逊不动杆菌的浓度为1×107CFU/mL，假单胞菌杆菌的浓度为4×107CFU/mL；
c)取步骤b)得到的各菌液，并混合，将混合菌剂加入到酵素中，室温培养。
酵素的制备方法，包括以下步骤：
a)将熊果叶、土豆、蓝莓、大麦仁、洋甘菊、卷柏、紫苜蓿浸泡到水中2h。再进行破碎处理，打浆，得到浆液；熊果叶、土豆、蓝莓、大麦仁、洋甘菊、卷柏、紫苜蓿、虾青素的质量比为0.1:15:2:3:0.2:0.1:0.2:0.04；水的加入量是熊果叶、土豆、蓝莓、大麦仁、洋甘菊、卷柏、紫苜蓿总质量的2倍；
b)向步骤a)得到的浆液中接入保藏号为CGMCCNO.7277的酿酒酵母菌，得到Ⅰ发酵液；
c)向步骤b)得到的Ⅰ发酵液接入保藏号为CGMCC No.1085的双歧杆菌和保藏号为CGMCC No.13457的乳酸菌发酵，得到Ⅱ发酵液；
d)将步骤c)得到的Ⅱ发酵液进行过滤加入虾青素，混合均匀即得酵素。
酿酒酵母菌的加入总量是浆液质量的0.6％，双歧杆菌和乳酸菌的加入总量是浆液质量的0.2％。
实施例2
加快修复富营养化水体的菌种增殖方法，包括以下步骤：
a)将粒径为10～20目的苹果粉、番茄粉、金盏花粉和胡萝卜粉浸泡到水中1h后，加热至80℃，2h，冷却后过300～500目筛网，将得到的过滤液浓缩后与葡萄糖、琼脂、牛肉汤混合，并用pH调节剂将pH调节到8，得到培养基；
苹果粉、番茄粉、金盏花粉、胡萝卜粉、水、过滤液、葡萄糖、琼脂、牛肉汤的质量比为10:3:2:10:150:3:2:0.4:10:1:15；浓缩后过滤液的体积与水的质量比为1：15。
b)将培养基在高温高压下灭菌后，取6份，分别室温条件下培养不动杆菌、脱氮除磷菌、木糖氧化无色杆菌、酿酒酵母菌株、约翰逊不动杆菌和假单胞菌；
不动杆菌的保藏号为CCTCC No.M2013247，脱氮除磷菌的保藏号为CGMCCNo.3518，木糖氧化无色杆菌的保藏号为CGMCC No2964，酿酒酵母菌株的保藏号为CGMCC12927，约翰逊不动杆菌的保藏号为CCTCC M2014023，假单胞菌的保藏号为CGMCCNo.4169；
混合菌剂中不动杆菌的浓度为3×108CFU/mL，脱氮除磷菌的浓度为2×109CFU/mL，木糖氧化无色杆菌的浓度为2×107CFU/mL，酿酒酵母菌株的浓度为3×108CFU/mL，约翰逊不动杆菌的浓度为1.5×107CFU/mL，假单胞菌杆菌的浓度为3×107CFU/mL；
c)取步骤b)得到的各菌液，并混合，将混合菌剂加入到酵素中，室温培养。
酵素的制备方法，包括以下步骤：
a)将熊果叶、土豆、蓝莓、大麦仁、洋甘菊、卷柏、紫苜蓿浸泡到水中3h。再进行破碎处理，打浆，得到浆液；熊果叶、土豆、蓝莓、大麦仁、洋甘菊、卷柏、紫苜蓿、虾青素的质量比为0.2:10:1:5:0.3:0.2:0.1:0.05；水的加入量是熊果叶、土豆、蓝莓、大麦仁、洋甘菊、卷柏、紫苜蓿总质量的2倍；
b)向步骤a)得到的浆液中接入保藏号为CGMCCNO.7277的酿酒酵母菌，得到Ⅰ发酵液；
c)向步骤b)得到的Ⅰ发酵液接入保藏号为CGMCC No.1085的双歧杆菌和保藏号为CGMCC No.13457的乳酸菌发酵，得到Ⅱ发酵液；
d)将步骤c)得到的Ⅱ发酵液进行过滤加入虾青素，混合均匀即得酵素。
酿酒酵母菌的加入总量是浆液质量的0.8％，双歧杆菌和乳酸菌的加入总量是浆液质量的0.3％。
实施例3
加快修复富营养化水体的菌种增殖方法，包括以下步骤：
a)将粒径为10～20目的苹果粉、番茄粉、金盏花粉和胡萝卜粉浸泡到水中1h后，加热至70℃，2h，冷却后过300～500目筛网，将得到的过滤液浓缩后与葡萄糖、琼脂、牛肉汤混合，并用pH调节剂将pH调节到7，得到培养基；
苹果粉、番茄粉、金盏花粉、胡萝卜粉、水、过滤液、葡萄糖、琼脂、牛肉汤的质量比为8:4:1.5:11:120:4:1.5:0.45:9:1:12；浓缩后过滤液的体积与水的质量比为1：13。
b)将培养基在高温高压下灭菌后，取6份，分别室温下培养不动杆菌、脱氮除磷菌、木糖氧化无色杆菌、酿酒酵母菌株、约翰逊不动杆菌和假单胞菌；
不动杆菌的保藏号为CCTCC No.M2013247，脱氮除磷菌的保藏号为CGMCCNo.3518，木糖氧化无色杆菌的保藏号为CGMCC No2964，酿酒酵母菌株的保藏号为CGMCC12927，约翰逊不动杆菌的保藏号为CCTCC M2014023，假单胞菌的保藏号为CGMCCNo.4169；
混合菌剂中不动杆菌的浓度为2.5×108CFU/mL，脱氮除磷菌的浓度为2.5×109CFU/mL，木糖氧化无色杆菌的浓度为1.5×107CFU/mL，酿酒酵母菌株的浓度为3.5×108CFU/mL，约翰逊不动杆菌的浓度为1.2×107CFU/mL，假单胞菌杆菌的浓度为3.5×107CFU/mL；
c)取步骤b)得到的各菌液，并混合，将混合菌剂加入到酵素中，室温培养。
酵素的制备方法，包括以下步骤：
a)将熊果叶、土豆、蓝莓、大麦仁、洋甘菊、卷柏、紫苜蓿浸泡到水中2.5h。再进行破碎处理，打浆，得到浆液；熊果叶、土豆、蓝莓、大麦仁、洋甘菊、卷柏、紫苜蓿、虾青素的质量比为0.15:13:1.5:4:0.25:0.15:0.15:0.045；水的加入量是熊果叶、土豆、蓝莓、大麦仁、洋甘菊、卷柏、紫苜蓿总质量的2倍；
b)向步骤a)得到的浆液中接入保藏号为CGMCCNO.7277的酿酒酵母菌，得到Ⅰ发酵液；
c)向步骤b)得到的Ⅰ发酵液接入保藏号为CGMCC No.1085的双歧杆菌和保藏号为CGMCC No.13457的乳酸菌发酵，得到Ⅱ发酵液；
d)将步骤c)得到的Ⅱ发酵液进行过滤加入虾青素，混合均匀即得酵素。
酿酒酵母菌的加入总量是浆液质量的0.7％，双歧杆菌和乳酸菌的加入总量是浆液质量的0.25％。
从实施例1～3的混合菌液中取出总量为5×108cfu/mL左右的活菌，加入到实施例1～3得到的生物酵素中，搅拌均匀后，培养24h，记为实验组1～3；在从实施例3的混合菌液中取出总量为5×108cfu/mL左右的活菌，加入到去离子水中，充分混合搅拌均匀，记为对照组1；再从实施例3的混合菌液中取出总量为5×108cfu/mL左右的活菌，加入到培养基(培养基的ID号为73890，产品编号为11A10)中，充分混合搅拌均匀，记为对照组2。
实验组1～5与对照组培养条件完全相同，选取0h，1h，5h，10h，18h，24h这6个时间点，测定其菌落总数(cfu/mL)，结果见表1。
表1实验组1～5与对照组1～2的菌落总数
取出600mL污水，检测N35.78mg/L，TP8.56.55mg/L；将1.2L污水分为3份，每份200mL，分为实验组1～3；实验组1中加入实验组1培养24h得到的菌种，实验组2中加入实验组2培养24h得到的菌种，实验组3中加入实验组3培养24h得到的菌种；将实验组1～3放置在外界环境中2d后，分别检测总磷、总氮的去除率，结果见表2。
表2实验组1～3的总磷、总氮的去除结果
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精油神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (7)

1.一种加快修复富营养化水体的菌种增殖方法，其特征在于，包括以下步骤：
a)将粒径为10～20目的苹果粉、番茄粉、金盏花粉和胡萝卜粉浸泡到水中1h后，加热至60～80℃，2～3h，冷却后过300～500目筛网，将得到的过滤液浓缩后与葡萄糖、琼脂、牛肉汤混合，并用pH调节剂将pH调节到6～8，得到培养基；
b)将培养基在高温高压下灭菌后，取6份，分别室温下培养不动杆菌、脱氮除磷菌、木糖氧化无色杆菌、酿酒酵母菌株、约翰逊不动杆菌和假单胞菌；
c)取步骤b)得到的各菌液，并混合，将混合菌剂加入到酵素中，室温培养。
2.根据权利要求1所述的加快修复富营养化水体的菌种增殖方法，其特征在于，所述不动杆菌的保藏号为CCTCC No.M2013247，脱氮除磷菌的保藏号为CGMCC No.3518，木糖氧化无色杆菌的保藏号为CGMCC No2964，酿酒酵母菌株的保藏号为CGMCC12927，约翰逊不动杆菌的保藏号为CCTCC M2014023，假单胞菌的保藏号为CGMCC No.4169。
3.根据权利要求1所述的加快修复富营养化水体的菌种增殖方法，其特征在于，所述混合菌剂中所述不动杆菌的浓度为(2～3)×108CFU/mL，所述脱氮除磷菌的浓度为(2～3)×109CFU/mL，所述木糖氧化无色杆菌的浓度为(1～2)×107CFU/mL，所述酿酒酵母菌株的浓度为(3～4)×108CFU/mL，所述约翰逊不动杆菌的浓度为(1～1.5)×107CFU/mL，所述假单胞菌杆菌的浓度为(3～4)×107CFU/mL。
4.根据权利要求1所述的加快修复富营养化水体的菌种增殖方法，其特征在于，所述酵素的制备方法，包括以下步骤：a)将熊果叶、土豆、蓝莓、大麦仁、洋甘菊、卷柏、紫苜蓿浸泡到水中2～3h；再进行破碎处理，打浆，得到浆液；b)向步骤a)得到的浆液中接入酿酒酵母菌，得到Ⅰ发酵液；c)向步骤b)得到的Ⅰ发酵液接入双歧杆菌和乳酸菌发酵，得到Ⅱ发酵液；d)将步骤c)得到的Ⅱ发酵液进行过滤加入虾青素，混合均匀即得酵素。
5.根据权利要求4所述的加快修复富营养化水体的菌种增殖方法，其特征在于，所述熊果叶、所述土豆、所述蓝莓、所述大麦仁、所述洋甘菊、所述卷柏、所述紫苜蓿、所述虾青素的质量比为(0.1～0.2)：(10～15)：(1～2)：(3～5)：(0.2～0.3)：(0.1～0.2)：(0.1～0.2)：(0.4～0.5)。
6.根据权利要求4所述的加快修复富营养化水体的菌种增殖方法，其特征在于，所述酿酒酵母菌的加入总量是所述浆液质量的0.6～0.8％，所述双歧杆菌和所述乳酸菌的加入总量是所述浆液质量的0.2～0.3％。
7.根据权利要求4所述的加快修复富营养化水体的菌种增殖方法，其特征在于，所述双歧杆菌和所述乳酸菌的活菌数量比为1：(1.5～1.8)。
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