CN110092764A

CN110092764A - 二氨基吩噻嗪鎓化合物包括甲基锍氯化物(mtc)的化学合成方法

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Publication number: CN110092764A
Application number: CN201910293813.7A
Authority: CN
Inventors: J·P·辛克莱; S·L·尼科尔; J·M·D·斯托里来
Original assignee: Wista Laboratories Ltd
Current assignee: Wista Laboratories Ltd
Priority date: 2013-10-07
Filing date: 2014-10-06
Publication date: 2019-08-06
Anticipated expiration: 2034-10-06
Also published as: CA3207522A1; AU2017206141B2; SG10201913293PA; MX363102B; EP3055291A1; TWI626237B; US10047062B2; EP4032880A2; CA3131803A1; BR112016007618A2; CN105683171A; US9765042B2; MY177815A; SI3055291T1; EP3415505A3; ES2903529T3; WO2015052496A1; MX2019002620A; PT3055291T; MX2016004229A

Abstract

本发明提供合成和纯化某些3,7‑二氨基‑吩噻嗪‑5‑鎓化合物(在本文中称为“二氨基吩噻嗪鎓化合物”)，包括甲基锍氯化物(MTC)(也称为亚甲蓝)的方法。

Description

二氨基吩噻嗪鎓化合物包括甲基锍氯化物(MTC)的化学合成方法

本申请是申请日为2014年10月6日、申请号为201480054610.8(国际申请号为PCT/GB2014/053007)、名称为“二氨基吩噻嗪鎓化合物包括甲基锍氯化物(MTC)的化学合成方法”的发明专利申请的分案申请。

技术领域

本发明一般地涉及化学合成和纯化领域，且更具体地涉及合成和纯化某些3,7-二氨基-吩噻嗪-5-鎓化合物(在本文中称为“二氨基吩噻嗪鎓化合物”)，包括甲基锍氯化物(Methylthioninium Chloride,MTC)(也称为亚甲蓝)的方法。本发明还涉及获得的(高纯度)化合物、包含这些化合物的组合物(例如，片剂、胶囊)，和其在使病原体灭活方法和医学治疗与诊断方法等中的用途，例如用于τ蛋白病(tauopathy)、阿尔茨海默病(Alzheimer'sdisease,AD)、皮肤癌、黑素瘤、病毒疾病、细菌疾病和原虫病。

背景技术

在整个说明书(包括任何随附权利要求)中，除非另有说明，术语“包含(或包括)”(“comprise”以及变化形式诸如“comprises”和“comprising”)应理解为包括所指出的整数或步骤，或整数组或步骤组，同时也不排除任何其它整数或步骤，或整数组或步骤组。

应注意的是，如本说明书和任何随后权利要求中所使用，除非上下文另有清楚指示，否则单数形式的“一种(a)”、“一个(an)”和“所述(the)”包括复数个所指对象。因此，举例来说，对于“药物载体”指代包括两种或更多种这样的载体的混合物等。

本文中的范围通常表达为从“约”一特定数值和/或至“约”另一特定数值。当用这样的范围表达时，另一个实施方案包括从一特定值和/或至另一特定值。类似地，当数值前用“约”表示其为近似值时，前缀“约”的使用应该理解为该具体数值形成了另一个实施方案。

甲基锍氯化物(MTC)(也称为亚甲蓝)

甲基锍氯化物(MTC)(也称为亚甲蓝(MB)；美蓝(methylthionine chloride)；四甲基硫堇氯化物(tetramethylthionine chloride)；3,7-二(二甲基氨基)吩噻嗪-5-鎓氯化物；C.I.碱性蓝9；四甲基硫堇氯化物；3,7-二(二甲基氨基)吩噻嗪鎓氯化物；亚甲蓝(Swissblue)；C.I.52015；C.I.亚甲蓝8(C.I.Solvent Blue 8)；苯胺紫(aniline violet)；和Urolene)是一种低分子量(319.86)、水溶性、三环有机化合物，具有以下化学式：

甲基锍氯化物(MTC)(也称为亚甲蓝)(可能是最公知的吩噻嗪染料和氧化还原指示剂)，其也被用作生物物理学系统的光学探针(optical probe)、用作纳米多孔材料的插入剂(intercalator)、用作氧化还原调节剂和用在光电成像(photoelectrochomicimaging)中。

举例来说，参见Colour Index(第4卷，第3版，1971)和Lillie等人，1979，和其中引用的参考文献。

MTC目前用于治疗高铁血红蛋白血症(methemoglobinemia)(这是一种当血液不能向身体需要氧的地方输送氧时发生的疾病)。MTC也用作医学染料(例如，在手术前或手术过程中对身体特定部位进行染色)；用于诊断(例如用作指示染料检测尿液中存在的特定化合物)；温和的泌尿器官抗菌剂；粘液表面刺激物；用于治疗和预防肾结石；用于诊断和治疗黑素瘤。

MTC已经用来治疗疟疾，用于单独治疗(Guttmann&Ehrlich，1891)或与氯喹联合用于治疗疟疾(Schirmer等人，2003；Rengelhausen等人，2004)。人类患有的疟疾是由如下疟原虫属的四种原生动物中的一种导致的：恶性疟原虫(P.falciparum)、间日疟原虫(P.vivax)、卵形疟原虫(P.ovale)或三日疟原虫(P.malariae)。所有种类疾病都是通过受感染的雌性阿诺菲力滋蚊(Anopheles mosquito)的叮咬传播的。偶尔会通过血液传播、器官移植传播、针头共用传播或先天地由母亲传染给胎儿。世界范围内有300-500百万疟疾感染者，每年约有1百万人死于该疾病。然而，耐药性是主要的因素，并且对于恶性疟原虫来说耐药性尤其显著，恶性疟原虫是导致几乎所有疟疾-相关死亡的主要疟原虫种类。目前推荐使用的、用于预防疟疾的药物或药物联合包括氯喹/盐酸氯胍、甲氟喹、多西环素和伯氨喹。

MTC(商品名Virostat，Bioenvision Inc.,New York)具有强效的体外杀病毒活性。具体地，Virostat在实验室级测试中能有效抗病毒如HIV和西尼罗河病毒(West NileVirus)。西尼罗河病毒感染(WNV)是感染中枢神经系统的潜在严重疾病。大部分感染者没有呈现出明显的症状或轻度流感样症状如发热或头痛。150人中约有1人会发展成严重症状包括震颤、惊厥、肌无力、视觉丧失、麻木、瘫痪或昏迷。通常，WNV是由感染蚊子叮咬传播的，但也可通过输血传播、器官移植传播、母乳喂养传播或妊辰期间由母亲传染给孩子。Virostat目前也出于临床试验阶段，用于治疗慢性丙型肝炎(Hepatitis C)。慢性丙型肝炎是肝脏的病毒感染。HCV病毒是急性肝炎和慢性肝病的主要病因，所述肝病包括肝硬化和肝癌。HCV主要是通过与人血液直接接触传播的。全世界范围内的HCV感染的主要病因是未经筛选的输血、没有经充分灭菌的针头和注射器的重复使用。世界卫生组织已经声明丙型肝炎是全球健康问题，世界人口的约3％感染了HCV，并且因地域的不同而发生显著变化。据估计，该疾病在美国的发病率为1.3％或约350万人患有该疾病。埃及约有6200万人口，是世界上丙型肝炎发病率最高的国家，据估计该国家的约6200万人中超过20％感染了该疾病。

当MTC与光联合使用时，MTC能阻止核酸(DNA或RNA)的复制。血浆、血小板和红细胞不含有核DNA或RNA。当将MTC引入到血液成分中时，其穿过细菌细胞壁或病毒膜到达核酸结构的内部。经光活化后，该化合物随之与病毒或细菌病原体的核酸结合，从而阻止DNA或RNA的复制。由于MTC可使病原体灭活，因此其具有减少试验仍然检测不出来的病原体传播带来的危险的潜力。

MTC及其衍生物(例如，“二氨基吩噻嗪鎓化合物”)已发现可用于治疗τ蛋白病(例如，阿尔茨海默病)(例如，参见Wischik，C.M.等人，1996，2002)。

在1877年的一份德国专利中(Badische Anilin-und Soda-Fabrik，1877)首次描述MTC。在该专利中，MTC通过以下步骤合成：将二甲基苯胺亚硝酰基化，随后还原形成N,N-二甲基-1,4-二氨基苯，随后在硫化氢(H₂S)和氯化铁(III)(FeCl₃)存在下氧化偶联。

Bernthsen描述了关于MTC和其合成方法的后续研究(参见Bernthsen，1885a，1885b，1889)。

Fierz-David和Blangley于1949年也描述了从二甲基苯胺合成MTC的方法，如以下方案所示：

方案1

在步骤(a)中，通过将二甲基苯胺用亚硝酸盐(NaNO₂)在酸(HCl)的水溶液中处理，制备亚硝基二甲基苯胺。在步骤(b)中，使用锌粉以额外酸(HCl)的水溶液还原亚硝酰基化合物，形成对氨基二甲基苯胺。通过过滤移除步骤(b)后的金属残余物，并在硫代磺酸、硫酸和非还原性氯化锌溶液存在下氧化该滤液，此为步骤(c)。在二甲基苯胺存在下进一步氧化得到宾雪德拉氏绿(Bindschedler's Green)的硫代磺酸，此为步骤(d)。随后使用二氧化锰或硫酸铜闭合环以形成亚甲蓝。更具体地，酸化(H₂SO₄)对氨基二甲基苯胺的澄清中性溶液，并添加非还原性氯化锌溶液(ZnCl₂与Na₂Cr₂O₇)。添加水性硫酸铝(Al₂(SO₄))和结晶硫代硫酸钠(Na₂S₂O₃)。添加水性重铬酸钠(Na₂Cr₂O₇)。通过干蒸汽加热混合物。随后添加含水酸性(HCl)二甲基苯胺。添加水性重铬酸钠(Na₂Cr₂O₇)。用干蒸汽加热混合物，且该混合物由于形成宾雪德拉氏绿的硫代磺酸而变成深绿-蓝色。添加二氧化锰或硫酸铜的含水浆液，并通过干蒸汽加热混合物，且染料从浓缩氯化锌溶液中析出。为了从混合物回收染料，该混合物经冷却和酸化(H₂SO₄)以溶解铝、锰和铬盐。进一步冷却混合物并通过过滤收集粗染料。用水、氯化钠和氯化锌纯化得到亚甲蓝的锌复盐，其为金红色结晶。

在Colour Index(第4卷，第3版，1971年)第4470页中描述非常类似的合成方法。

Masuya等人在1992年描述了某些吩噻嗪衍生物和其制备方法以及其在癌症的光动力疗法和采用化学发光的免疫测定中的用途。通过与上文讨论相似的途径制备这些化合物。

Leventis等人在1997年描述了某些MTC类似物的合成方法，这些方法采用吩噻嗪作为起始物质，并且通过卤化随后胺化而添加所需的3,7-取代基。作者主张MTC在商业上通过以下步骤合成：在Na₂S₂O₃存在下用Na₂Cr₂O₇氧化N,N-二甲基-对苯二胺，然后在N,N-二甲基胺存在下进一步氧化。

Fierz-David等人在1949年描述了MTC的氯化锌复盐的合成和通过以下步骤移除锌的方法：与碳酸钠螯合，然后过滤，产生不含锌的亚甲蓝。然而，作者认识到此技术不可大规模使用，这是因为其产率低。

在WO 2006/032879中已提出合成高纯度MTC和其衍生物的方法。根据以下方案合成这些化合物：

这些步骤可概括如下：(i)亚硝酰基化(nitrosylation,NOS)；(ii)亚硝酰基还原(nitrosyl reduction,NR)；(iii)硫代磺酸形成(thiosulfonic acid formation,TSAF)；(iv)氧化偶联(oxidative coupling,OC)；(v)环闭合(ring closure,RC)；和重结晶(recrystallisation；RX)。本发明还描述了变化形式，其中未通过过滤分离宾雪德拉氏绿中间体的硫代磺酸(化合物5)。

本发明人现已开发了合成二氨基吩噻嗪鎓化合物(包括尤其为MTC)的替代和改进方法。新方法得到较高产率，具有较短反应时间和较高产量，需要较少能量输入且产生较少废料。所获得的化合物具有高纯度水平。

发明内容

本发明的一方面涉及二氨基吩噻嗪鎓化合物的合成方法。

本发明的另一方面涉及通过本文所描述的方法获得的或可通过本文所描述的方法获得的二氨基吩噻嗪鎓化合物，且涉及包含这些化合物的组合物。另一方面涉及例如关于本文所讨论的任何疾病或适应症，通过疗法用于人或动物体的治疗方法中的这些化合物和/或组合物。

本发明还涉及以下实施方案：

1.一种合成方法，其包括以下次序的步骤：

亚硝酰基还原(NR)，其中N,N-二取代的-3-任选取代的-4-亚硝酰基苯胺，2，经还原形成所述N,N-二取代的-1,4-二氨基-5-任选取代的苯，3：

硫代磺酸形成(TSAF)，其中在硫代硫酸盐存在下氧化N,N-二取代的-1,4-二氨基-5-任选取代的苯，3，以得到所述硫代硫酸S-{2-(氨基)-3-(任选取代的)-5-(二取代的-氨基)-苯基}酯，4：

氧化偶联(OC)，其中使用Cr(VI)或包含Cr(VI)的氧化剂使硫代硫酸S-{2-(氨基)-3-(任选取代的)-5-(二取代的氨基)-苯基}酯，4，经氧化偶联至N,N-二取代的-3-任选取代的-苯胺，5，以得到[4-{2-(硫代硫酸根)-4-(二取代的氨基)-6-(任选取代的)-苯基-亚氨基}-3-(任选取代的)-环己-2,5-二烯亚基]-N,N-二取代的铵，6：

其中：

R¹和R⁹各自独立地选自：-H；C_1-4烷基；C_2-4烯基；和卤代C_1-4烷基；

R^3NA和R^3NB各自独立地选自：C_1-4烷基；C_2-4烯基；和卤代C_1-4烷基；

R^7NA和R^7NB各自独立地选自：C_1-4烷基；C_2-4烯基；和卤代C_1-4烷基；以及

和其中：

在单个反应容器中完成该亚硝酰基还原(NR)、硫代磺酸形成(TSAF)和氧化偶联(OC)步骤。

2.根据实施方案1的合成方法，其中所述硫代硫酸盐为Na₂S₂O₃或包含Na₂S₂O₃。

3.根据实施方案1或实施方案2的合成方法，其中所述硫代磺酸形成(TSAF)步骤中的所述氧化是通过与氧化剂反应，所述氧化剂为Cr(VI)或包含Cr(VI)。

4.根据上述实施方案任一项的合成方法，其中所述硫代磺酸形成(TSAF)步骤中的所述氧化是通过与氧化剂反应，所述氧化剂为Na₂Cr₂O₇或包含Na₂Cr₂O₇。

5.根据上述实施方案任一项的合成方法，其中所述亚硝酰基还原(NR)步骤中的所述还原是通过与还原剂反应，所述还原剂为Fe(O)或包含Fe(O)。

6.根据上述实施方案任一项的方法，其中所述亚硝酰基还原(NR)步骤中的所述还原是通过与还原剂反应，所述还原剂为金属铁或包含金属铁。

7.根据实施方案6的方法，其中过量使用金属铁，且其中在反应完成后未从所述反应混合物移除所述过量金属铁。

8.根据上述实施方案任一项的合成方法，其中在酸性条件下实施所述亚硝酰基还原(NR)步骤中的所述还原。

9.根据上述实施方案任一项的合成方法，其进一步包括，在所述亚硝酰基还原(NR)步骤前，以下的额外步骤：

亚硝酰基化(NOS)，其中N,N-二取代的-3-任选取代的苯胺，1，经4-亚硝酰基化以得到所述N,N-二取代的-3-任选取代的-4-亚硝酰基苯胺，2：

10.根据实施方案9的方法，其中使用亚硝酸盐实施所述亚硝酰基化。

11.根据实施方案10的合成方法，其中使用亚硝酸钠实施所述亚硝酰基化。

12.根据实施方案9至11任一项的合成方法，其中在酸性条件下实施所述亚硝酰基化。

13.根据实施方案9至12任一项的方法，其中在与所述亚硝酰基还原(NR)、硫代磺酸形成(TSAF)和氧化偶联(OC)步骤的同一反应容器中完成所述亚硝酰基化步骤(NOS)。

14.根据上述实施方案中任一项的合成方法，进一步包括在氧化偶联(OC)的步骤后，以下的步骤：

环闭合(RC)，其中所述分离和纯化的[4-{2-(硫代硫酸根)-4-(二取代的氨基)-6-(任选取代的)-苯基-亚氨基}-3-(任选取代的)-环己-2,5-二烯亚基]-N,N-二取代的铵，6，经历环闭合以得到3,7-二(二取代的-氨基)-1,9-(任选取代的)-吩噻嗪-5-鎓盐，7：

其中X为一或多个阴离子抗衡离子以实现电中性。

15.根据实施方案14的方法，其中在与所述亚硝酰基还原(NR)、硫代磺酸形成(TSAF)和氧化偶联(OC)步骤的同一反应容器中完成所述环闭合(RC)步骤。

16.根据实施方案1至15任一项的方法，其进一步包括在氧化偶联(OC)的步骤后和在若存在的环闭合(RC)步骤前，以下的步骤：

两性离子中间体的分离和纯化(IAPOZI)，其中分离和纯化所述[4-{2-(硫代硫酸根)-4-(二取代的氨基)-6-(任选取代的)-苯基-亚氨基}-3-(任选取代的)-环己-2,5-二烯亚基]-N,N-二取代的铵，6。

17.根据实施方案16的方法，其中分离和纯化通过过滤，然后洗涤。

18.根据实施方案14至17任一项的合成方法，其包括所述环闭合(RC)步骤和以下的后续额外步骤：

氯化物盐形成(CSF)，其中使所述3,7-二(二取代的-氨基)-1,9-(任选取代的)-吩噻嗪-5-鎓盐，7，与氯化物反应以得到3,7-二(二取代的-氨基)-1,9-(任选取代的)-吩噻嗪-5-鎓氯化物盐，8：

19.根据实施方案18的合成方法，其中所述氯化物为盐酸。

20.根据实施方案19的合成方法，其中在0-2的相对低pH实施氯化物盐形成(CSF)。

21.根据实施方案20的合成方法，其中在约1的相对低pH实施氯化物盐形成(CSF)。

22.根据实施方案19至21任一项的合成方法，其中在20-30℃的相对冷的温度实施氯化物盐形成(CSF)。

23.根据实施方案22的合成方法，其中在约25℃的相对冷的温度实施氯化物盐形成(CSF)。

24.根据实施方案18的合成方法，其中所述氯化物为氯化钠。

25.一种合成方法，其包括以下次序的步骤：

其中在同一反应容器中完成所有前述步骤，

26.一种合成方法，其包括以下次序的步骤：

其中在同一罐中完成所有前述步骤，

27.根据上述实施方案任一项的方法，进一步包括以下步骤：在所述硫代磺酸形成(TSAF)步骤之前或期间添加活化剂。

28.根据上述实施方案的方法，其中所述活化剂包含硫酸铝。

29.根据上述实施方案任一项的方法，其中将过滤剂添加至其中完成所述亚硝酰基还原(NR)、硫代磺酸形成(TSAF)和氧化偶联(OC)步骤的所述反应容器中。

30.根据上述实施方案的方法，其中所述过滤剂为纤维素或包含纤维素。

31.一种合成方法，其包括以下次序的步骤：

其中在所述硫代磺酸形成期间或之前添加活化剂，

其中：

X^-为卤素抗衡离子，

任选地条件是所述化合物并非ZnCl₂混盐。

32.根据实施方案31的方法，其中所述活化剂为Al(III)或包含Al(III)。

33.根据实施方案32的方法，其中所述活化剂为硫酸铝十六水合物或包含硫酸铝十六水合物。

34.根据实施方案31至33任一项的合成方法，进一步包括，在所述硫代磺酸形成(TSAF)步骤前，以下的额外步骤：

35.根据实施方案34的方法，其中所述亚硝酰基化(NOS)步骤、所述硫代磺酸形成(TSAF)步骤和所述氧化偶联(OC)步骤全部在同一罐中完成。

36.根据实施方案34或实施方案35的合成方法，进一步包括，在所述亚硝酰基还原(NR)步骤前，以下的额外步骤：

37.根据实施方案31至36任一项的方法，进一步包括，在所述氧化偶联(OC)步骤后，和在若存在的铬酸盐还原(CR)步骤后，和在所述环闭合(RC)步骤前，以下的步骤：

38.根据实施方案31至37任一项的合成方法，进一步包括，在所述环闭合(RC)步骤后，以下的额外步骤：

39.根据实施方案31至38任一项的方法，其中所述方法包括至少一个过滤，且其中在该过滤之前将过滤剂添加至所述反应罐中。

40.根据实施方案39的方法，其中所述过滤剂为纤维素或包含纤维素。

41.一种合成方法，其包括以下次序的步骤中的一步或多步：

Cr(VI)还原(CR)，其中所述氧化偶联(OC)步骤的产物经处理以将残余Cr(VI)转换成Cr(III)，

其中所述方法包括至少一个过滤，且其中在该过滤之前将过滤剂添加至所述反应罐中。

42.根据实施方案41的方法，其中所述过滤剂为纤维素或包含纤维素。

如本领域技术人员应了解的，本发明一个方面的特征和优选实施方案也将适于本发明的其他方面。

具体实施方式

化合物

一般而言，本发明涉及制备某些3,7-二氨基-吩噻嗪-5-鎓化合物(在本文中统称为“二氨基吩噻嗪鎓化合物”)的方法，所述化合物具有以下化学式：

其中：

R^7NA和R^7NB各自独立地选自：C_1-4烷基；C_2-4烯基；和卤代C_1-4烷基；且

X为一或多个阴离子抗衡离子以实现电中性。

上述结构仅为许多等价共振结构之一，其中一些结构如下所示，且上述结构意在涵盖所有这些结构：

在一些实施方案中，C_1-4烷基选自：线性C_1-4烷基，如-Me、-Et、-nPr、-iPr和-nBu；支链C_3-4烷基，如-iPr、-iBu、-sBu和-tBu；和环状C_3-4烷基，如-cPr和-cBu。

在一些实施方案中，C_2-4烯基选自线性C_1-4烯基，如-CH＝CH₂(乙烯基)和-CH₂-CH＝CH₂(烯丙基)。

在一些实施方案中，卤代C_1-4烷基选自：-CF₃、-CH₂CF₃和-CF₂CF₃。

在一些实施方案中，R¹和R⁹各自独立为-H、-Me、-Et或-CF₃。

在一些实施方案中，R¹和R⁹各自独立为-H、-Me或-Et。

在一些实施方案中，R¹和R⁹各自独立为-H。

在一些实施方案中，R¹和R⁹各自独立为-Me。

在一些实施方案中，R¹和R⁹各自独立为-Et。

在一些实施方案中，R¹与R⁹相同。

在一些实施方案中，R¹与R⁹不同。

在一些实施方案中，R^3NA和R^3NB各自独立为-Me、-Et、-nPr、-nBu、-CH₂-CH＝CH₂或-CF₃。

在一些实施方案中，R^3NA和R^3NB各自独立为-Me或-Et。

在一些实施方案中，R^3NA和R^3NB各自独立为-Me。

在一些实施方案中，R^3NA和R^3NB各自独立为-Et。

在一些实施方案中，R^3NA与R^3NB相同。

在一些实施方案中，R^3NA与R^3NB不同。

在一些实施方案中，R^7NA和R^7NB各自独立为-Me、-Et、-nPr、-nBu、-CH₂-CH＝CH₂或-CF₃。

在一些实施方案中，R^7NA和R^7NB各自独立为-Me或-Et。

在一些实施方案中，R^7NA和R^7NB各自独立为-Me。

在一些实施方案中，R^7NA和R^7NB各自独立为-Et。

在一些实施方案中，R^7NA与R^7NB相同。

在一些实施方案中，R^7NA与R^7NB不同。

在一些实施方案中，R^3NA与R^3NB和R^7NA与R^7NB相同。

在一些实施方案中，基团-N(R^3NA)(R^3NB)与-N(R^7NA)(R^7NB)相同。

在一些实施方案中，基团-N(R^3NA)(R^3NB)与-N(R^7NA)(R^7NB)相同，且选自：-NMe₂、-NEt₂、-N(nPr)₂、-N(Bu)₂、-NMeEt、-NMe(nPr)和-N(CH₂OH＝CH₂)₂。

在一些实施方案中，基团-N(R^3NA)(R^3NB)与-N(R^7NA)(R^7NB)相同，且选自：-NMe₂和-NEt₂。

在一些实施方案中，基团-N(R^3NA)(R^3NB)和-N(R^7NA)(R^7NB)不为-NMe₂。

在一些实施方案中，碳原子中的一或多者为¹¹C或¹³C。

在一些实施方案中，碳原子中的一或多者为¹¹C。

在一些实施方案中，碳原子中的一或多者为¹³C。

在一些实施方案中，氮原子中的一或多者为¹⁵N。

在一些实施方案中，基团R^3NA、R^3NB、R^7NA和R^7NB中的一或多者或全部的碳原子中的一或多者或全部为¹³C。

在一些实施方案中，基团-N(R^3NA)(R^3NB)和-N(R^7NA)(R^7NB)各自为-N(¹³CH₃)₂。

在一些实施方案中，R¹和R⁹各自为-H，和基团-N(R^3NA)(R^3NB)和-N(R^7NA)(R^7NB)各自为-N(¹³CH₃)₂。

在一些实施方案中，R¹和R⁹各自为-H；基团-N(R^3NA)(R^3NB)和-N(R^7NA)(R^7BN)各自为-N(¹³CH₃)₂；和X^-为Cl^-。

在一些实施方案中，X^-独立为卤素阴离子(即，卤化物)。

在一些实施方案中，X^-独立为Cl^-、Br^-或I^-。

在一些实施方案中，X^-独立为Cl^-。

在一些实施方案中，该化合物为混盐(例如，ZnCl₂混盐)的形式。

在一些实施方案中，X^-如上文所限定，除了该化合物并非ZnCl₂混盐之外。

这些化合物的实例包括下列：

纯度

本文所描述的方法可得到高纯度的二氨基吩噻嗪鎓化合物。

举例来说，许多本文所描述的方法得到非常高纯度的MTC，具有极低含量的有机杂质(例如，天青B和亚甲紫(Bernthsen)(MVB))和金属杂质(例如，满足或超过欧洲药典限度)。

因此，本发明的一个方面涉及通过本文所描述的方法获得的或可通过本文所描述的方法获得的本文所描述的二氨基吩噻嗪鎓化合物。在一些实施方案中，本发明涉及通过本文所描述的方法获得的或可通过本文所描述的方法获得的MTC。

在一些实施方案中，该化合物(例如，MTC)具有大于98％的纯度。

在一些实施方案中，该化合物(例如，MTC)具有大于97％的纯度。

在一些实施方案中，该化合物(例如，MTC)具有大于96％的纯度。

在一些实施方案中，该化合物(例如，MTC)具有大于95％的纯度。

在一些实施方案中，该化合物(例如，MTC)具有大于94％的纯度。

在一些实施方案中，该化合物(例如，MTC)具有大于93％的纯度。

在一些实施方案中，该化合物(例如，MTC)具有大于92％的纯度。

在一些实施方案中，该化合物具有少于6％的天青B杂质。

在一些实施方案中，该化合物具有少于5％的天青B杂质。

在一些实施方案中，该化合物具有少于4％的天青B杂质。

在一些实施方案中，该化合物具有少于3％的天青B杂质。

在一些实施方案中，该化合物具有少于2％的天青B杂质。

在一些实施方案中，该化合物具有少于1％的天青B杂质。

在一些实施方案中，该化合物具有少于0.15％的MVB杂质。

在一些实施方案中，该化合物具有少于0.14％的MVB杂质。

在一些实施方案中，该化合物具有少于0.13％的MVB杂质。

在一些实施方案中，该化合物具有少于0.10％的MVB杂质。

在一些实施方案中，该化合物具有少于0.05％的MVB杂质。

(除非另有指定，本文引用的所有百分比纯度以重量计。)

在一些实施方案中，化合物(例如，MTC)所具有的元素纯度(例如，针对Al、Cr、Zn、Cu、Fe、Mn、Ni、Mo、Cd、Sn和Pb)比欧洲药典(European Pharmacopoeia；EP)的限度更佳。

本文所提及的术语“元素纯度”涉及欧洲药典所指定的十一(11)种金属的量：Al、Cr、Zn、Cu、Fe、Mn、Ni、Mo、Cd、Sn和Pb。

下表列出本文所提及的欧洲药典限度：

在一些实施方案中，该化合物(例如，MTC)具有比欧洲药典(EP)限度的0.9倍更佳的元素纯度。

在一些实施方案中，该化合物(例如，MTC)具有比欧洲药典(EP)限度的0.5倍更佳的元素纯度。

在一些实施方案中，该化合物(例如，MTC)具有比欧洲药典(EP)限度的0.2倍更佳的元素纯度。

在一些实施方案中，该化合物(例如，MTC)具有比欧洲药典(EP)限度的0.1倍更佳的元素纯度。

(例如，最新欧洲药典(EP)限度的0.5倍为50μg/g Al、50μg/g Cr、50μg/g Zn等。)

本文披露了上述纯度级别的所有可行和适当的组合，如同特定且明确引用了每种个别组合。

合成方法

发明人已鉴别合成MTC和其他二氨基吩噻嗪鎓化合物的各种改进方法。具体地，发明人已鉴别WO2006/032879的方法的改进。

产率

本文所描述的合成方法得到二氨基吩噻嗪鎓化合物的高产率。

在一些实施方案中，产率大于35％。

在一些实施方案中，产率大于37.5％。

在一些实施方案中，产率大于40％。

在一些实施方案中，产率大于42.5％。

在一些实施方案中，产率大于45％。

在一些实施方案中，产率大于47.5％。

优选地，所报告的产率纯粹为二氨基吩噻嗪鎓化合物的产率，且因此考虑了样品的杂质分布和水分含量。在一些实施方案中，基于无水重量计算产率。

在本发明的一个方面中，提供二氨基吩噻嗪鎓化合物的合成的有效方法。

这些方法的一个重要特征在于可在同一反应容器中完成若干步骤。

举例来说，亚硝酰基还原(NR)步骤(ii)、硫代磺酸形成(TSAF)步骤(iii)和氧化偶联(OC)步骤(iv)可全部在同一反应容器中实施。在步骤(ii)与步骤(iii)之间无需实施过滤。

一般而言，当表示合成中的后续步骤发生在“同一反应容器”或“同一罐”中时，此意为反应步骤发生在同一容器中。仅将合成中的后续步骤的试剂添加至前一步骤的产物中，而无需将产物转移至另一容器中。具体地，不包括通过过滤器将反应产物转移至另一容器中。对于全部在同一反应容器中发生的反应，该反应可称为一锅法(1-pot method)。类似地，在存在从第一容器单次转移至第二容器的情况下，其可称为二锅法。存在两次转移的合成可称为三锅法等。

省略步骤(ii)与步骤(iii)之间的过滤节省了时间且因此增加了反应产量。这还意味着与现有技术方法相比而言需要更少的反应容器。产生较少废水，因为不存在对所过滤固体的洗涤。已另外观察到，相对于实施该过滤的反应而言，消除此过滤步骤导致MTC产物的产率增加。在优选情况中，未损失产物化合物的纯度。

(至少)在氧化偶联(OC)步骤中使用Cr(VI)。Cr(VI)为高毒性，且Cr(VI)污染在预定药用的产品中为不可接受的。进一步地，Cr(VI)可使两性离子中间体不稳定并阻碍后续环闭合(RC)步骤，从而减少最终二氨基吩噻嗪鎓化合物的产率。在WO 2006/032879方法中，因此需要通过添加连二亚硫酸钠(Na₂S₂O₄)或通过pH调节将残余Cr(VI)还原成Cr(III)。

在本发明方法中，省略NR与TSAF步骤间的过滤步骤意为未移除亚硝酰基还原(NR)中所使用的还原剂。本发明的发明人已意外发现，此还原剂可用于在氧化偶联(OC)后还原Cr(VI)。

因此，在一些情况中，可在与NR、TSAF和OC步骤的同一反应容器中进行氧化偶联后的铬酸盐还原步骤。在这些情况中，不必添加进一步还原剂(如Na₂S₂O₄)或调节pH。因此，使用更少的材料并产生更少的废料。在优选情况中，未损失产物化合物的纯度。

在一些情况中，亦可在与亚硝酰基还原(NR)、硫代磺酸形成(TSAF)和氧化偶联(OC)步骤的同一反应容器中完成亚硝酰基化步骤(NO)和/或环闭合(RC)。

在同一反应容器中完成环闭合(RC)步骤是特别有利的，这是由于其消除了WO2006/032879方法中的额外的过滤步骤，从而减少废料，增加产率并节省时间。进一步地，消除该过滤步骤意为不必将水性盐酸添加至绿色固体过滤产物中以形成浆液(如WO2006/032879的步骤(v)，如上文所示)。其进一步减少了材料使用和废料。

因此，在一些实施方案中，合成方法包括以下次序的步骤：

亚硝酰基还原(NR)；

硫代磺酸形成(TSAF)；

氧化偶联(OC)；

其中在同一反应容器中完成这些步骤。

在一些实施方案中，任选地，在经历环闭合步骤(RC)前，分离和纯化(例如，通过过滤)氧化偶联步骤(OC)中所形成的两性离子中间体。

在一些实施方案中，合成方法包括以下次序的步骤：

亚硝酰基化(NOS)；

亚硝酰基还原(NR)；

硫代磺酸形成(TSAF)；

氧化偶联(OC)；

其中在同一反应容器中完成这些步骤。

在一些实施方案中，合成方法包括以下次序的步骤：

亚硝酰基还原(NR)；

硫代磺酸形成(TSAF)；

氧化偶联(OC)；

环闭合(RC)；

其中在同一反应容器中完成这些步骤。

在一些实施方案中，合成方法包括以下次序的步骤：

亚硝酰基化(NOS)；

亚硝酰基还原(NR)；

硫代磺酸形成(TSAF)；

氧化偶联(OC)；

环闭合(RC)；

其中在同一反应容器中完成这些步骤。

在一些实施方案中，在第一反应容器中完成NO、NR、TSAF和OC步骤，在第二反应容器中完成环闭合(RC)步骤，且在第三反应容器中完成盐形成(CSF)(和任选地重结晶(RX))。换言之，此为“三锅”法。

在一些实施方案中，在第一反应容器中完成NO、NR、TSAF、OC和RC步骤，且在第二罐中完成盐形成(例如，氯化物盐形成CSF)(和任选地重结晶(RX))。换言之，此为“二锅法”。

在本发明的又一方面中，提供一种合成方法，该方法包括以下次序的步骤：

硫代磺酸形成(TSAF)；

氧化偶联(OC)；

环闭合(RC)；

其中在硫代磺酸形成步骤(TSAF)期间或该步骤前添加活化剂。

在一些实施方案中，合成方法包括以下次序的步骤：

亚硝酰基还原(NR)；

硫代磺酸形成(TSAF)；

氧化偶联(OC)；

环闭合(RC)；

其中在硫代磺酸形成步骤(TSAF)期间或该步骤前添加活化剂。

在一些实施方案中，合成方法包括以下次序的步骤：

亚硝酰基化(NOS)；

亚硝酰基还原(NR)；

硫代磺酸形成(TSAF)；

氧化偶联(OC)；

环闭合(RC)；

其中在硫代磺酸形成步骤(TSAF)期间或该步骤前添加活化剂。

任选地，在此方面中，二氨基吩噻嗪鎓化合物并非ZnCl₂复盐。

亚硝酰基化(NOS)

在此步骤中，N,N-二取代的-3-任选取代的苯胺，1，经4-亚硝酰基化以得到N,N-二取代的-3-任选取代的-4-亚硝酰基苯胺，2，如以下方案所示：

在一些实施方案中，N,N-二甲基苯胺，1’，经4-亚硝酰基化以得到N,N-二甲基-4-亚硝酰基苯胺，2’，如以下方案所示：

在一些实施方案中，使用亚硝酸盐实施亚硝酰基化。

在一些实施方案中，亚硝酸盐为NO₂ ^-或包含NO₂ ^-。

在一些实施方案中，亚硝酸盐为碱金属亚硝酸盐或包含碱金属亚硝酸盐。

在一些实施方案中，亚硝酸盐为亚硝酸钠或亚硝酸钾或包含亚硝酸钠或亚硝酸钾。

在一些实施方案中，亚硝酸盐为亚硝酸钠(NaNO₂)。

在一些实施方案中，亚硝酸盐与苯胺，1，的摩尔比为0.8至1.5。

在一些实施方案中，该摩尔比为1.0至1.5。

在一些实施方案中，该摩尔比为1.1至1.5。

在一些实施方案中，该摩尔比为1.1至1.3。

在一些实施方案中，在酸性条件下实施亚硝酰基化。

在一些实施方案中，在1或更小的pH实施亚硝酰基化。

在一些实施方案中，在1至-1的pH实施亚硝酰基化。

在一些实施方案中，在1至0的pH实施亚硝酰基化。

(除非另有指定，在室温测量所有pH值。)

在一些实施方案中，使用强酸获得酸性条件。

在一些实施方案中，使用HCl(HCl具有一个强酸质子)获得酸性条件。

在一些实施方案中，酸质子与苯胺，1，的摩尔比为1至4。

在一些实施方案中，该范围为2至4。

在一些实施方案中，该范围为3至4。

在一些实施方案中，该摩尔比为约3.2。

在一些实施方案中，该范围为2至3。

在一些实施方案中，该范围为2.25至2.75。

在一些实施方案中，该摩尔比为约2.5。

在一些实施方案中，在水性介质中实施该反应。

在一些实施方案中，反应温度为2至25℃。

在一些实施方案中，反应温度为2至15℃。

在一些实施方案中，反应温度为2至10℃。

在一些实施方案中，反应温度为约5℃。

在一些实施方案中，反应时间为10至240分钟。

在一些实施方案中，反应时间为30至120分钟。

在一些实施方案中，反应时间为约60分钟。

在一些实施方案中，在反应步骤期间搅拌反应混合物。

亚硝酰基还原(NR)

在此步骤中，N,N-二取代的-3-任选取代的-4-亚硝酰基苯胺，2，经还原形成N,N-二取代的-1,4-二氨基-5-任选取代的苯，3，如以下方案所示：

在一些实施方案中，N,N-二甲基-4-亚硝酰基苯胺，2’，经还原形成N,N-二甲基-1,4-二氨基-苯，3’，如以下方案所示：

在一些实施方案中，该还原是通过与还原剂反应。

在一些实施方案中，还原剂为Fe(O)或包含Fe(O)。

在一些实施方案中，还原剂为金属铁或包含金属铁。

在一些实施方案中，还原剂为金属铁。

可从商业上获得金属铁，例如为金属屑。

在一些实施方案中，Fe(O)与苯胺，1，的摩尔比为1.0至4.0。

在一些实施方案中，该范围为1.5至4.0。

在一些实施方案中，该范围为1.5至3.0。

在一些实施方案中，该范围为1.5至2.5。

在一些实施方案中，该范围为1.5至3.5。

在一些实施方案中，该范围为2.0至3.0。

在一些实施方案中，该摩尔比为约2.4。

在一些实施方案中，所使用的还原剂过量足以从后续氧化偶联(OC)步骤还原任何残余Cr(VI)。

在一些实施方案中，在酸性条件下实施反应。

在一些实施方案中，在1或更小的pH实施反应。

在一些实施方案中，在1至-1的pH实施反应。

在一些实施方案中，在1至0的pH实施反应。

在一些实施方案中，使用强酸获得酸性条件。

在一些实施方案中，酸质子与苯胺，1，的摩尔比为1至4。

在一些实施方案中，该范围为2至4。

在一些实施方案中，该范围为3至4。

在一些实施方案中，该摩尔比为约3.2。

在一些实施方案中，该范围为2至3。

在一些实施方案中，该范围为2.25至2.75。

在一些实施方案中，该摩尔比为约2.5。

在一些实施方案中，在水性介质中实施该反应。

在一些实施方案中，在2至35℃的温度实施反应。

在一些实施方案中，在10至30℃的温度实施反应。

在一些实施方案中，在约10℃的温度实施反应。

在一些实施方案中，实施该反应历时10至240分钟。

在一些实施方案中，实施该反应历时30至180分钟。

在一些实施方案中，实施该反应历时约120分钟。

在一些实施方案中，在反应步骤期间搅拌反应混合物。

与WO2006/032879的方法相比，当还原剂为金属铁时，在反应完成后并未通过过滤从反应混合物中移除过量金属铁。

硫代磺酸形成(TSAF)

在该步骤中，在硫代硫酸盐存在下氧化N,N-二取代的-1,4-二氨基-5-任选取代的苯，3，以得到硫代硫酸S-{2-(氨基)-3-(任选取代的)-5-(二取代的-氨基)-苯基}酯，4，如以下方案所示：

在一些实施方案中，在硫代硫酸盐存在下氧化N,N-二甲基-1,4-二氨基-苯，3’，以得到硫代硫酸S-{2-(氨基)-5-(二甲基氨基)-苯基}酯，4’，如以下方案所示：

硫代硫酸盐为S₂O₃ ^-2或包含S₂O₃ ^-2。

在一些实施方案中，硫代硫酸盐为Na₂S₂O₃或包含Na₂S₂O₃。

在一些实施方案中，硫代硫酸盐为Na₂S₂O₃或其水合物。

可从商业上获得Na₂S₂O₃，例如作为无水盐或为五水合物。

在一些实施方案中，硫代硫酸盐与二胺，3，的摩尔比为0.8至1.5。

在一些实施方案中，该摩尔比为1.0至1.5。

在一些实施方案中，该摩尔比为1.1至1.5。

在一些实施方案中，该摩尔比为1.1至1.3。

在一些实施方案中，该氧化是通过与氧化剂反应。

在一些实施方案中，氧化剂为Cr(VI)或包含Cr(VI)。

在一些实施方案中，氧化剂为Cr₂O₇ ^-2或包含Cr₂O₇ ^-2。

在一些实施方案中，氧化剂为Na₂Cr₂O₇或包含Na₂Cr₂O₇。

在一些实施方案中，氧化剂为Na₂Cr₂O₇或其水合物。

可从商业上获得Na₂Cr₂O₇，例如作为二水合物。

在一些实施方案中，Cr(VI)与二胺，3，的摩尔比为0.2至2.0。

在一些实施方案中，摩尔比为0.2至1.0。

在一些实施方案中，摩尔比为0.2至0.8。

在一些实施方案中，摩尔比为0.3至0.7。

在本文所描述的一些方法中，可在硫代磺酸形成步骤前或硫代磺酸形成步骤期间添加活化剂。其活化硫代硫酸根离子，从而增加其反应性。最终二氨基吩噻嗪鎓化合物的产率增加。在一些情况中，相对于省略活化剂的反应，存在活化剂的反应产率增加至少约10％，优选地约20％，和更优选约25％。

不希望受理论所局限，认为活化剂促进硫代硫酸根离子的亲核性，因此增加硫代磺酸的产率(在TSAF步骤中)。

活化剂可包含化合物或由化合物组成，该化合物包含铝阳离子。化合物优选为水溶性铝盐。假设阴离子并未干扰该反应，则阴离子的性质并非决定性的。所述化合物包括但不限于硫酸铝。不希望受理论所局限，认为硫代硫酸铝为高度解离以使得其作为游离硫代硫酸而有效地反应(参见Hans Eduard Fierz-David博士的“The Fundamental ProcessesOf Dye Chemistry”)。

举例来说，由硫酸铝十六水合物组成的活化剂可使产率增加约25％。

相对于试剂起始物质(即，N,N-二烷基苯胺)的摩尔数，优选地将约0.20与约2.0摩尔当量之间的活化剂添加至混合物中。

因此，在一些实施方案中，在活化剂的存在下实施反应。

在一些实施方案中，活化剂包含Al(III)。

在一些实施方案中，活化剂包含Al₂(SO₄)₃。

在一些实施方案中，活化剂包含Al₂(SO₄)₃的水合物。

在一些实施方案中，活化剂包含Al₂(SO₄)₃十六水合物。

在一些实施方案中，Al(III)与二胺的摩尔比为从约0.05至约2.0。

在一些实施方案中，Al(III)与二胺的摩尔比为从约0.10至约2.0。

在一些实施方案中，摩尔比为从约0.05至约1.0。

在一些实施方案中，摩尔比为从约0.10至约1.0。

在一些实施方案中，摩尔比为从约0.05至约0.8。

在一些实施方案中，摩尔比为从约0.10至约0.8。

在一些实施方案中，摩尔比为从约0.05至约0.6。

在一些实施方案中，摩尔比为从约0.10至约0.6。

在一些实施方案中，摩尔比为从约0.15至约0.5。

在一些实施方案中，摩尔比为约0.15。

在一些实施方案中，摩尔比为约0.5。

在一些实施方案中，在强酸的存在下实施该反应。

任选地，可将酸添加至氧化剂中。

可替换地，在用氧化剂处理前，可将酸添加至二胺中。

在一些实施方案中，强酸为硫酸(H₂SO₄)(硫酸具有两个强酸质子)。

在一些实施方案中，酸质子与二胺，15，的摩尔比为1.0至4.0。

在一些实施方案中，该范围为1.5至2.5。

在一些实施方案中，该范围为约2.0。

在一些实施方案中，在水性介质中实施该反应。

在一些实施方案中，反应温度为2至25℃。

在一些实施方案中，反应温度为2至15℃。

在一些实施方案中，反应温度为2至10℃。

在一些实施方案中，反应温度为约5℃。

在一些实施方案中，反应时间为10至240分钟。

在一些实施方案中，反应时间为30至120分钟。

在一些实施方案中，反应时间为约60分钟。

在一些实施方案中，在反应步骤期间搅拌反应混合物。

氧化偶联(OC)

在该步骤中，使用Cr(VI)或包含Cr(VI)的氧化剂使硫代硫酸S-{2-(氨基)-3-(任选取代的)-5-(二取代的氨基)-苯基}酯，4，经氧化偶联至N,N-二取代的-3-任选取代的-苯胺，5，以得到[4-{2-(硫代硫酸根)-4-(二取代的氨基)-6-(任选取代的)-苯基-亚氨基}-3-(任选取代的)-环己-2,5-二烯亚基]-N,N-二取代的铵，6，如以下方案所示：

在一些实施方案中，使用Cr(VI)或包含Cr(VI)的氧化剂使硫代硫酸S-{2-(氨基)-5-(二甲基氨基)-苯基}酯，4’，经氧化偶联至N,N-二甲基-苯胺，5'，以得到[4-{2-(硫代硫酸根)-4-(二甲基氨基)-苯基-亚氨基}-环己-2,5-二烯亚基]-N,N-二甲基铵，6’，如以下方案所示：

在一些实施方案中，先添加酯，4，然后添加苯胺，5。

在一些实施方案中，氧化剂为Cr₂O₇ ^2-或包含Cr₂O₇ ^2-。

在一些实施方案中，氧化剂为Na₂Cr₂O₇或包含Na₂Cr₂O₇。

在一些实施方案中，氧化剂为Na₂Cr₂O₇。

在一些实施方案中，酯，4，与苯胺，5，的摩尔比为0.5至1.5。

在一些实施方案中，该范围为0.8至1.2。

在一些实施方案中，该范围为约1.0。

在一些实施方案中，Cr(VI)与苯胺，5，的摩尔比为0.4至4.0。

在一些实施方案中，该范围为0.6至3.0。

在一些实施方案中，该范围为0.8至3.0。

在一些实施方案中，该范围为约1.0。

在一些实施方案中，在酸性条件下实施反应。

在一些实施方案中，在1或更小的pH实施反应。

在一些实施方案中，在1至-1的pH实施反应。

在一些实施方案中，在1至0的pH实施反应。

在一些实施方案中，在反应步骤结束时的pH为2至6。

在一些实施方案中，在反应步骤结束时的pH为3至5。

在一些实施方案中，在反应步骤结束时的pH为约4。

在一些实施方案中，在反应步骤结束时的pH为约3.94。

在一些实施方案中，使用强酸获得酸性条件。

在一些实施方案中，使用H₂SO₄(H₂SO₄具有两个强酸质子)获得酸性条件。

在一些实施方案中，酸质子与苯胺，5，的摩尔比为1.0至4.0。

在一些实施方案中，该范围为1.5至2.5。

在一些实施方案中，该范围为约2.0。

在一些实施方案中，在水性介质中实施该反应。

在一些实施方案中，反应温度为2至20℃。

在一些实施方案中，反应温度为2至15℃。

在一些实施方案中，反应温度为约5℃。

在一些实施方案中，反应时间为10分钟至12小时。

在一些实施方案中，反应时间为30分钟至4小时。

在一些实施方案中，反应时间为约2小时。

在一些实施方案中，在反应步骤期间搅拌反应混合物。

在一些实施方案中，苯胺，5，与苯胺，1，是相同的。

两性离子中间体的分离和纯化(IAPOZI)

在该步骤中，当存在时，分离和纯化两性离子中间体，6。

在一些实施方案中，分离和纯化是通过过滤。

在一些实施方案中，分离和纯化是通过过滤，然后洗涤。

在一些实施方案中，洗涤是用H₂O洗涤。

在一些实施方案中，洗涤是用H₂O和四氢呋喃(THF)洗涤。

在一些实施方案中，H₂O与THF的体积比为1:1至10:1，优选地4:1。

在一些实施方案中，分离和纯化是通过过滤，然后洗涤和干燥。

在一些实施方案中，干燥为风干。

在一些实施方案中，干燥为风干2至72小时。

在一些实施方案中，干燥为风干2至48小时。

在一些实施方案中，干燥为风干2至24小时。

在一些实施方案中，干燥为烘箱干燥。

在一些实施方案中，干燥为烘箱干燥2至72小时。

在一些实施方案中，干燥为烘箱干燥2至48小时。

在一些实施方案中，干燥为烘箱干燥2至24小时。

在一些实施方案中，干燥是在30至60℃烘箱干燥2至48小时。

举例来说，在一些实施方案中，将反应混合物过滤，并用H₂O(例如，4×250cm³)和/或THF(例如，100cm³)洗涤残余物(例如，约100mmol粗产物)，并随后风干过夜。

举例来说，在一些实施方案中，将反应混合物过滤(例如，在真空下通过布氏(Buchner)过滤器)，移除固体，添加至具有清水的另一容器中，剧烈搅拌混合物，并再次过滤。可将“过滤-回收-再悬浮”方法重复多次。可在后续步骤中使用最终获得的固体。

在一些实施方案中，在过滤前添加过滤剂。其可改进过滤的简易性并减少过滤中的产物损失。

合适的过滤剂包含纤维素或由纤维素组成。纤维素为再生原材料，且因此可在维持闭合CO₂循环的同时通过焚化处置纤维素。

在一些实施方案中，在过滤后，用“洗涤体积”的水洗涤所过滤的产物。

在一些所述实施方案中，洗涤总体积为小于约100倍体积(100vol.)的水(相对于苯胺的量)、小于约50vol.、小于约30vol.、小于约20vol.，或小于或约为10vol.。

在一些实施方案中，分批使用洗涤总体积(例如，4×10vol.以得到40vol.的洗涤总体积)。

应注意，这些洗涤体积比在WO2006/032879中的过滤期间所使用洗涤体积明显更低。

WO2006/032879方法针对反应使用总计大约250倍体积的水。使用本发明的方法，可能减少此体积至例如约53倍体积的水。

降低洗涤体积减少了反应结束时的废水且为有利的，这是因为其明显减小了废料体积。较小废料体积具有较易储存和运输的优势，且可因此表明成本节省。另外，较小洗涤体积意为过滤方案将总体更短，具有由此得到的时间和能量节省。另外，由于可针对该操作加热洗涤体积，较小总体积在能量和成本节省方面具有额外优势。

在一些实施方案中，在下一步骤中直接使用所过滤的残余物，无需进一步处理。

环闭合(RC)

在该步骤中，[4-{2-(硫代硫酸根)-4-(二取代的氨基)-6-(任选取代的)-苯基-亚氨基}-3-(任选取代的)-环己-2,5-二烯亚基]-N,N-二取代的铵，6，经历环闭合以得到3,7-二(二取代的-氨基)-1,9-(任选取代的)-吩噻嗪-5-鎓盐，7，如以下方案所示：

在一些实施方案中，[{2-(硫代硫酸根)-4-(二甲基氨基)-苯基-亚氨基}-环己-2,5-二烯亚基]-N,N-二甲基铵，6’，经历环闭合以得到3,7-二(二甲基氨基)-吩噻嗪-5-鎓盐，7’，如以下方案所示：

在一些实施方案中，用氧化剂处理实现环闭合。

在一些实施方案中，氧化剂为Cu(II)或包含Cu(II)。

在一些实施方案中，氧化剂为硫酸Cu(II)或包含硫酸Cu(II)。

在一些实施方案中，氧化剂为硫酸Cu(II)或其水合物。

可从商业上获得硫酸Cu(II)，例如作为五水合物。

不希望受任何特定理论所局限，认为Cu(II)在反应中转化为Cu(I)，且作为不溶性Cu₂O析出。

在一些实施方案中，在酸性条件下实施环闭合。

在一些实施方案中，在1至5的pH实施环闭合。

在一些实施方案中，在2至5的pH实施环闭合。

在一些实施方案中，在3至4.5的pH实施环闭合。

在一些实施方案中，在3.5至4.1的pH实施环闭合。

在一些实施方案中，在约3.8的pH实施环闭合。

在一些实施方案中，通过添加强酸获得所需pH。

在一些实施方案中，通过添加HCl获得所需pH。

在一些实施方案中，Cu(II)与铵，6，的摩尔比为0.02至0.15。

在一些实施方案中，该范围为0.03至0.12。

在一些实施方案中，该范围为约0.10。

在一些实施方案中，在水性介质中实施该反应。

在一些实施方案中，通过如下实施该反应：在盐酸水溶液中浆化[4-{2-(硫代硫酸根)-4-(二取代的氨基)-6-(任选取代的)-苯基-亚氨基}-3-(任选取代的)-环己-2,5-二烯亚基]-N,N-二取代的铵，6，(例如，从氧化偶联(OC)步骤中获得)，添加氧化剂且随后加热。

在一些这样的实施方案中，使用的浆液体积从约15至约30体积当量(15vol.至30vol.)，相对于苯胺(即，对于10.0g苯胺(大约10mL))，浆液体积将从约150至300mL。

在一些实施方案中，浆液体积为约25vol.。

此浆液体积与WO2006/032879方法中所使用的浆液体积相比明显减小。不希望受理论所局限，认为出于众多原因，该步骤中所使用的浆液体积明显减小可为有利的。首先，该减小具有减小所需反应器容量的益处，意为需要较小反应容器用于使用相同质量宾雪德拉氏绿中间体合成，或者在所使用的标准大小容器中可使用较大质量。这在产量方面可具有益处。其次，环闭合步骤发生在高温(85℃)，因此较小溶剂体积可为有利的，这是因为将耗费较短时间达到最佳温度，且需要较少能量输入来达到该温度，从而同时实现能量与成本的节省。使用较小浆液体积还可导致产物产率增加。如果在方案结束时最终获得较小体积的排出物，则还减小废料处置、处理和运输的成本。

在一些实施方案中，反应温度为30至95℃。

在一些实施方案中，反应温度为50至90℃。

在一些实施方案中，反应温度为60至90℃。

在一些实施方案中，反应温度为约85℃。

在一些实施方案中，反应时间为10至120分钟。

在一些实施方案中，反应时间为20至90分钟。

在一些实施方案中，反应时间为约60分钟。

在一些实施方案中，实施反应直至反应混合物变色，例如变成深蓝色。

在一些实施方案中，在反应步骤期间搅拌反应混合物。

在一些实施方案中，在反应后，将反应混合物过滤并收集滤液。(滤液在溶液中含有所需产物。)

在一些实施方案中，在接近反应温度的温度实施过滤，得到“热”滤液。

在一些实施方案中，先冷却反应混合物，并在约室温实施过滤，得到“冷”滤液。

在一些实施方案中，在过滤前添加过滤剂。这可改进过滤的简易性并减少过滤中的产物损失。

在一些所述实施方案中，洗涤总体积为小于约200倍体积(200vol.)的水(相对于苯胺的量)、小于约150vol.、小于约100vol.、小于约50vol.、小于约25vol.，或小于20vol.或约为20vol.。

在一些实施方案中，分批使用洗涤总体积(例如，4×10vol.以得到40vol.的洗涤总体积，或4×5vol.以得到20vol.的洗涤总体积)。

应注意，这些洗涤体积比在WO2006/032879中的过滤期间所使用的洗涤体积明显更小。

如上文所述，WO2006/032879方法针对反应使用共大约250倍体积的水。使用本发明的方法，可能减少该体积至例如约53倍体积的水。

降低洗涤体积减少了反应结束时的废水且为有利的，这是因为其明显减小了废料体积。较小废料体积具有较易储存和运输的优势，且可因此表明成本节省。另外，较小洗涤体积意为过滤方案将总体更短，具有由此得到的时间和能量的节省。另外，由于可针对该操作加热洗涤体积，较小总体积在能量和成本节省方面具有额外优势。

有利地，在一些实施方案中，在上文所描述的过滤后所获得的最终废滤液经调节至相关pH可用作后续反应中的该步骤的浆液溶剂，历经至少2个反应循环。其为有利的，这是因为其允许废产物再循环，并且引起产物的较高产率。

氯化物盐形成(CSF)

在此步骤中，使3,7-二(二取代的-氨基)-1,9-(任选取代的)-吩噻嗪-5-鎓盐，7，与氯化物反应以得到3,7-二(二取代的-氨基)-1,9-(任选取代的)-吩噻嗪-5-鎓氯化物盐，8，如以下方案所示：

在一些实施方案中，使3,7-二(二甲基氨基)-吩噻嗪-5-鎓盐，7’，与氯化物反应以得到3,7-二(二甲基氨基)-吩噻嗪-5-鎓氯化物盐，8’，(即，MTC)，如以下方案所示：

用盐酸作为氯化物源的处理：

在一些实施方案中，氯化物为盐酸。

在一些实施方案中，在相对较低pH实施该反应。

在一些实施方案中，相对较低pH为-1至3。

在一些实施方案中，相对较低pH为0至3。

在一些实施方案中，相对较低pH为0至2。

在一些实施方案中，相对较低pH为约1。

在一些实施方案中，将pH缓慢调节至相对较低pH。

在一些实施方案中，在5至120分钟的时间调节pH。

在一些实施方案中，在5至60分钟的时间调节pH。

在一些实施方案中，在5至30分钟的时间调节pH。

在一些实施方案中，在约10分钟的时间调节pH。

在一些实施方案中，在相对较冷温度实施该反应。

在一些实施方案中，相对较冷温度为2至40℃。

在一些实施方案中，相对较冷温度为2至30℃。

在一些实施方案中，相对较冷温度为5至30℃。

在一些实施方案中，相对较冷温度为10至30℃。

在一些实施方案中，相对较冷温度为15至30℃。

在一些实施方案中，相对较冷温度为20至30℃。

在一些实施方案中，相对较冷温度为约25℃。

在一些实施方案中，实施该反应直至反应混合物(最初例如为深蓝色)变成浅蓝色至无色。

在一些实施方案中，在反应步骤期间搅拌反应混合物。

用氯化物盐作为氯化物源的处理：

在一些实施方案中，氯化物为氯化物盐。

在一些实施方案中，氯化物为碱金属氯化物。

在一些实施方案中，氯化物为氯化钠。

在一些实施方案中，存在大摩尔过量的氯化物(氯化钠)。

在一些实施方案中，氯化物与盐，7，的摩尔比为5至200。

在一些实施方案中，摩尔比为10至150。

在一些实施方案中，摩尔比为10至100。

在一些实施方案中，摩尔比为约50。

在一些实施方案中，在水性介质中实施该反应。

在一些实施方案中，反应温度为20至95℃。

在一些实施方案中，反应温度为30至95℃。

在一些实施方案中，反应温度为50至80℃。

在一些实施方案中，反应温度为约65℃。

在一些实施方案中，反应温度为约室温。

在一些实施方案中，反应时间为10至30分钟。

在一些实施方案中，在反应步骤期间搅拌反应混合物。

在一些实施方案中，在添加氯化物后允许反应混合物冷却以得到作为析出物的产物。

在一些实施方案中，在沉淀/结晶后用含水酸洗涤最终二氨基吩噻嗪鎓化合物。

不希望受理论所局限，该额外酸洗可有助于移除无机盐污染物并因此可得到较纯二氨基吩噻嗪鎓产物。当处于过滤器上时，酸洗“脱水”二氨基吩噻嗪鎓产物，从而移除残余反应介质，该残余反应介质可含有高含量的盐和其他杂质。

在一些实施方案中，用盐酸水溶液实施酸洗。

在一些实施方案中，用5％盐酸水溶液实施酸洗。

在一些实施方案中，用盐酸水溶液实施酸洗。

在一些实施方案中，用从约1至约3倍体积(1vol.至3vol.)的酸水溶液实施酸洗。

在一些实施方案中，用约2倍体积(2vol.)的酸水溶液实施酸洗。

在一些实施方案中，用2×1vol.的酸水溶液实施酸洗。

在氯化物盐形成(CSF)步骤后，可实施一或多个额外处理或纯化步骤(即，ST、DT、CT、EDTAT、OE)，如下文将进一步描述。如果实施这些处理步骤中的两步或多步时，可以任何次序实施这些步骤。这些处理步骤得到改进的纯度，尤其是减小的金属含量和减小的有机杂质含量。

额外处理

在一些实施方案中，合成方法另外包括后续步骤，该后续步骤选自：

硫化物处理(ST)；

二甲基二硫代氨基甲酸盐处理(DT)；

碳酸盐处理(CT)；和

乙二胺四乙酸处理(EDTAT)。

硫化物处理(ST)；

二甲基二硫代氨基甲酸盐(DT)；

碳酸盐处理(CT)；

乙二胺四乙酸处理(EDTAT)；和

有机萃取(OE)。

硫化物处理(ST)；

二甲基二硫代氨基甲酸盐(DT)；

碳酸盐处理(CT)；和

乙二胺四乙酸处理(EDTAT)；

然后为以下后续步骤：

有机萃取(OE)。

硫化物处理(ST)；

然后为以下后续步骤：

有机萃取(OE)。

在一些实施方案中，合成方法另外包括以下后续步骤：

有机萃取(OE)。

在一些实施方案中，合成方法另外包括以下后续步骤：

重结晶(RX)。

因此，在一些实施方案中，合成方法包括以下次序的步骤：

亚硝酰基化(NOS)；

亚硝酰基还原(NR)；

硫代磺酸形成(TSAF)；

氧化偶联(OC)；

任选地，两性离子中间体的分离和纯化(IAPOZI)；

环闭合(RC)；

氯化物盐形成(CSF)；

以下的一或多者：

硫化物处理(ST)；

二甲基二硫代氨基甲酸盐(DT)；

碳酸盐处理(CT)；和

乙二胺四乙酸处理(EDTAT)；

有机萃取(OE)；

重结晶(RX)。

在一些实施方案中，实施选自ST、DT、CT和EDTAT的一或多个额外处理步骤，然后实施OE。

硫化物处理(ST)

在此步骤中，用硫化物处理3,7-二(二取代的-氨基)-1,9-(任选取代的)-吩噻嗪-5-鎓盐，7，或3,7-二(二取代的-氨基)-1,9-(任选取代的)-吩噻嗪-5-鎓氯化物盐，8。

在一些实施方案中，用硫化物处理盐，7。

在一些实施方案中，用硫化物处理氯化物盐，8。

硫化物为S^2-或包含S^2-。

在一些实施方案中，硫化物为金属硫化物。

在一些实施方案中，硫化物为碱金属硫化物。

在一些实施方案中，硫化物为Na₂S或包含Na₂S。

在一些实施方案中，硫化物为Na₂S。

在一些实施方案中，硫化物为过渡金属硫化物。

在一些实施方案中，硫化物为ZnS或包含ZnS。

在一些实施方案中，硫化物为ZnS。

在一些实施方案中，硫化物的量为0.01至0.20当量。

在一些实施方案中，该范围为0.05至0.15当量。

在一些实施方案中，该范围为约0.1当量。

在一些实施方案中，盐7或8的(初始)浓度为0.005至0.25M。

在一些实施方案中，该范围为0.02至0.30M。

在一些实施方案中，该范围为0.05至0.20M。

在一些实施方案中，(初始)浓度为约0.10M。

在一些实施方案中，该处理为用硫化物和氯化物处理。

在一些实施方案中，氯化物为NaCl或包含NaCl。

在一些实施方案中，氯化物为NaCl。

在一些实施方案中，存在摩尔过量的氯化物。

在一些实施方案中，氯化物的量为5至300当量。

在一些实施方案中，氯化物的量为5至40当量。

在一些实施方案中，氯化物的量为5至30当量。

在一些实施方案中，氯化物的量为约20当量。

在一些实施方案中，氯化物的量为约200当量。

在一些实施方案中，在2至20℃的温度实施处理。

在一些实施方案中，该温度范围为2至15℃。

在一些实施方案中，该温度范围为5至15℃。

在一些实施方案中，该温度为约10℃(例如，10±2℃)。

在一些实施方案中，在水性介质中实施处理。

在一些实施方案中，在碱性条件实施处理。

在一些实施方案中，在9至12的pH实施处理。

在一些实施方案中，在10至11的pH实施处理。

在一些实施方案中，在约10.5的pH实施处理。

在一些实施方案中，实施处理以使得反应混合物的pH达到至少9至12。

在一些实施方案中，实施处理以使得反应混合物的pH达到至少10至11。

在一些实施方案中，实施处理以使得反应混合物的pH达到至少约10.5。

在一些实施方案中，在约10℃(例如，10±2℃)的温度和约10.5的pH实施处理，或实施处理以使得反应混合物的pH达到至少约10.5。

在一些实施方案中，在反应步骤期间搅拌反应混合物。

举例来说，在一些实施方案中，在约65℃温度将粗MTC产物完全溶解于水中，溶液浓度为约0.1M。冷却溶液。任选地过滤冷却溶液。用约0.1当量的含水硫化钠或足以达到约10.5(例如，10.5±0.5)的pH的量的含水硫化钠处理溶液。将所得混合物搅拌(例如，约10分钟)、过滤并收集滤液。在一些实施方案中，在搅拌下将大量过剩氯化钠(例如，约23当量)添加至滤液中，并收集所得析出物。或者，在另一实施方案中，使用HCl将冷却(例如，约20℃)溶液的pH调节至约pH 1，并收集所得析出物。

在一些实施方案中，在用硫化物处理后(例如，和用氯化物处理前)，用有机溶剂另外洗涤产物(例如，溶液中的产物)。

在一些实施方案中，有机溶剂选自二氯甲烷、1,2-二氯乙烷、氯仿、乙酸乙酯、乙醚、氯苯、石油醚(例如，40:60)、苯、甲苯和乙酸甲酯。在一些实施方案中，有机溶剂为二氯甲烷。

在一些实施方案中，例如在用有机溶剂洗涤后，将所洗涤产物的溶液的pH调节到约4.5至约5.5或约5.0。在一些实施方案中，将溶液(例如，另外)加热/冷却至大约20℃且随后经历冷酸重结晶(例如，使用HCl将pH调节至约1，并收集所得析出物)。在可替换的实施方案中，将溶液(例如，另外)加热至大约65℃并经历热盐析。

举例来说，在一些实施方案中，在约60℃温度将粗MTC产物完全溶解于水中，溶液浓度为约0.06M。冷却溶液。任选地过滤冷却溶液。用约0.07当量含水硫化钠处理溶液。将所得混合物搅拌(例如，约15分钟)、过滤，并收集滤液。用二氯甲烷(例如，若干次)洗涤滤液。在一些实施方案中，将洗涤滤液加热至约60℃，并在搅拌下将大量过剩氯化钠(例如，约260当量)添加至(热)滤液中。允许非常缓慢地冷却热溶液，并收集(高度结晶)析出物(例如，“热盐析”)。或者，在另一实施方案中，使用HCl将冷却(例如，约20℃)洗涤滤液的pH调节至约pH 1，并收集所得析出物。

二甲基二硫代氨基甲酸盐处理(DT)

在此步骤中，用二甲基二硫代氨基甲酸盐处理3,7-二(二取代的-氨基)-1,9-(任选取代的)-吩噻嗪-5-鎓盐，7，或3,7-二(二取代的-氨基)-1,9-(任选取代的)-吩噻嗪-5-鎓氯化物盐，8。

在一些实施方案中，用二甲基二硫代氨基甲酸盐处理盐，7。

在一些实施方案中，用二甲基二硫代氨基甲酸盐处理氯化物盐，8。

二甲基二硫代氨基甲酸盐为(CH₃)₂NCS^2-或包含(CH₃)₂NCS^2-。

在一些实施方案中，二甲基二硫代氨基甲酸盐为(CH₃)₂NCS₂Na或包含(CH₃)₂NCS₂Na。

在一些实施方案中，二甲基二硫代氨基甲酸盐为(CH₃)₂NCS₂Na。

在一些实施方案中，二甲基二硫代氨基甲酸盐的量为0.01至0.20当量。

在一些实施方案中，该范围为0.05至0.15当量。

在一些实施方案中，该范围为约0.1当量。

在一些实施方案中，盐7或8的(初始)浓度为0.005至0.25M。

在一些实施方案中，该范围为0.02至0.30M。

在一些实施方案中，该范围为0.05至0.20M。

在一些实施方案中，(初始)浓度为约0.10M。

在一些实施方案中，该处理为用二甲基二硫代氨基甲酸盐和氯化物处理。

在一些实施方案中，氯化物为NaCl或包含NaCl。

在一些实施方案中，氯化物为NaCl。

在一些实施方案中，存在摩尔过量的氯化物。

在一些实施方案中，氯化物的量为5至40当量。

在一些实施方案中，氯化物的量为5至30当量。

在一些实施方案中，氯化物的量为约20当量。

在一些实施方案中，在水性介质中实施该处理。

在一些实施方案中，在反应步骤期间搅拌反应混合物。

举例来说，在一些实施方案中，在约65℃温度将粗MTC产物完全溶解于水中，溶液浓度为约0.1M。冷却溶液。任选地过滤冷却溶液。用约0.1当量水性二甲基二硫代氨基甲酸钠盐处理溶液。将所得混合物搅拌(例如，约10分钟)、过滤，并收集滤液。在搅拌下将大量过剩氯化钠(例如，约23当量)添加至滤液中，并收集所得析出物。

在一些实施方案中，在用二甲基二硫代氨基甲酸盐处理后(例如，和用氯化物处理前)，用有机溶剂另外洗涤产物(例如，溶液中的产物)，如上文对于硫化物处理所描述。

在一些实施方案中，例如在用有机溶剂洗涤后，将所洗涤产物的溶液的pH调节到约4.5至约5.5或约5.0，如上文对于硫化物处理所描述。

碳酸盐处理(CT)

在此步骤中，用碳酸盐处理3,7-二(二取代的-氨基)-1,9-(任选取代的)-吩噻嗪-5-鎓盐，7，或3,7-二(二取代的-氨基)-1,9-(任选取代的)-吩噻嗪-5-鎓氯化物盐，8。

在一些实施方案中，用碳酸盐处理盐，7。

在一些实施方案中，用碳酸盐处理氯化物盐，8。

碳酸盐为CO₃ ^2-或包含CO₃ ^2-。

在一些实施方案中，碳酸盐为碱金属碳酸盐或包含碱金属碳酸盐。

在一些实施方案中，碳酸盐为碳酸钠或包含碳酸钠。

在一些实施方案中，碳酸盐为碳酸钠。

在一些实施方案中，碳酸钠的量为0.01至0.20当量。

在一些实施方案中，该范围为0.05至0.15当量。

在一些实施方案中，该量为约0.1当量。

在一些实施方案中，盐7或8的(初始)浓度为0.005至0.25M。

在一些实施方案中，该范围为0.02至0.30M。

在一些实施方案中，该范围为0.05至0.20M。

在一些实施方案中，(初始)浓度为约0.10M。

在一些实施方案中，该处理为用碳酸盐和氯化物处理。

在一些实施方案中，氯化物为NaCl或包含NaCl。

在一些实施方案中，氯化物为NaCl。

在一些实施方案中，存在摩尔过量的氯化物。

在一些实施方案中，氯化物的量为5至40当量。

在一些实施方案中，氯化物的量为5至30当量。

在一些实施方案中，氯化物的量为约20当量。

在一些实施方案中，在水性介质中实施该处理。

在一些实施方案中，在反应步骤期间搅拌反应混合物。

举例来说，在一些实施方案中，在约65℃温度将粗MTC产物完全溶解于水中，溶液浓度为约0.1M。冷却溶液。任选地过滤冷却溶液。用约0.1当量水性碳酸钠处理溶液。将所得混合物搅拌(例如，约10分钟)、过滤，并收集滤液。在搅拌下将大量过剩氯化钠(例如，约23当量)添加至滤液中，并收集所得析出物。

在一些实施方案中，在用碳酸盐处理后(例如，和用氯化物处理前)，用有机溶剂另外洗涤产物(例如，溶液中的产物)，如上文对于硫化物处理所描述。

乙二胺四乙酸处理(EDTAT)

在该步骤中，用乙二胺四乙酸(EDTA)或EDTA盐处理3,7-二(二取代的-氨基)-1,9-(任选取代的)-吩噻嗪-5-鎓盐，7，或3,7-二(二取代的-氨基)-1,9-(任选取代的)-吩噻嗪-5-鎓氯化物盐，8。

在一些实施方案中，用EDTA或EDTA盐处理盐7。

在一些实施方案中，用EDTA或EDTA盐处理氯化物盐8。

在一些实施方案中，EDTA盐为EDTA碱金属盐或包含EDTA碱金属盐。

在一些实施方案中，EDTA盐为EDTA二钠盐或包含EDTA二钠盐。

在一些实施方案中，EDTA盐为EDTA二钠盐。

在一些实施方案中，EDTA的量为0.01至0.20当量。

在一些实施方案中，该范围为0.05至0.15当量。

在一些实施方案中，该量为约0.1当量。

在一些实施方案中，盐7或8的(初始)浓度为0.005至0.25M。

在一些实施方案中，该范围为0.02至0.30M。

在一些实施方案中，该范围为0.05至0.20M。

在一些实施方案中，(初始)浓度为约0.10M。

在一些实施方案中，该处理为用EDTA或EDTA盐和氯化物处理。

在一些实施方案中，氯化物为NaCl或包含NaCl。

在一些实施方案中，氯化物为NaCl。

在一些实施方案中，存在摩尔过量的氯化物。

在一些实施方案中，氯化物的量为5至40当量。

在一些实施方案中，氯化物的量为5至30当量。

在一些实施方案中，氯化物的量为约10当量。

在一些实施方案中，在水性介质中实施该处理。

在一些实施方案中，在反应步骤期间搅拌反应混合物。

举例来说，在一些实施方案中，在约65℃温度将粗MTC产物完全溶解于水中，溶液浓度为约0.1M。将溶液冷却至室温，且随后用约0.1当量水性EDTA二钠盐处理溶液。将所得混合物搅拌(例如，约1小时)、过滤，并收集滤液。在搅拌下将大量过剩氯化钠(例如，约10当量)添加至滤液中，并收集所得析出物。

在一些实施方案中，在用EDTA处理后(例如，和用氯化物处理前)，用有机溶剂另外洗涤产物(例如，溶液中的产物)，如上文对于硫化物处理所描述。

有机萃取(OE)

在此步骤中，用有机溶剂处理(例如，用有机溶剂洗涤)水溶液或悬浮液中的3,7-二(二取代的-氨基)-1,9-(任选取代的)-吩噻嗪-5-鎓盐，7，或3,7-二(二取代的-氨基)-1,9-(任选取代的)-吩噻嗪-5-鎓氯化物盐，8。

在一些实施方案中，用有机溶剂处理(例如，用有机溶剂洗涤)水溶液或悬浮液中的盐，7。

在一些实施方案中，用有机溶剂处理(例如，用有机溶剂洗涤)水溶液或悬浮液中的氯化物盐，8。

在一些实施方案中，有机溶剂为二氯甲烷(CH₂Cl₂,DCM)。

DCM为“II类”化学品，允许的每日暴露量(permitted daily exposure；PDE)为6毫克/日。

在一些实施方案中，盐7或8的水溶液或悬浮液与有机溶剂(例如，DCM)的体积比为0.1至10。

在一些实施方案中，体积比为0.5至5。

在一些实施方案中，体积比为0.5至2。

在一些实施方案中，使用多个等分试样的有机溶剂(例如，DCM)重复实施处理(例如，洗涤)。

举例来说，在一些实施方案中，用50mL DCM洗涤250mL盐7或8的水溶液五次，总体积为250mL DCM，且体积比为1。

在一些实施方案中，盐7或8的水溶液或悬浮液具有8至12的pH。

在一些实施方案中，pH范围为9至12。

在一些实施方案中，pH范围为9至11。

在一些实施方案中，pH范围为约10.8。

在一些实施方案中，在2至20℃的温度实施处理(例如，洗涤)。

在一些实施方案中，温度范围为2至15℃。

在一些实施方案中，温度为约10℃。

可例如使用反应容器实施处理(例如，洗涤)，该反应容器配备有与带桨的轴附接的顶置式机械搅拌器以及烧瓶底部的排泄接头。在容器中放置盐7或8的水溶液或悬浮液，并添加等分的有机溶剂(例如，DCM)并将非均匀混合物搅拌适宜时间。使层分离，并通过排泄接头弃去较低(有机溶剂)层。添加另一等分的有机溶剂(例如，DCM)并重复该方案例如若干次。

有机萃取(OE)在大大降低最终获得的固体(例如，结晶)产物的有机杂质含量方面特别有效。

在一些实施方案中，先实施选自ST、DT、CT和EDTAT的一或多个额外处理步骤，然后实施有机萃取(OE)。

重结晶(RX)

在此步骤中，使3,7-二(二取代的-氨基)-1,9-(任选取代的)-吩噻嗪-5-鎓盐，7，或3,7-二(二取代的-氨基)-1,9-(任选取代的)-吩噻嗪-5-鎓氯化物盐，8，重结晶。

在一些实施方案中，使盐7重结晶。

在一些实施方案中，使氯化物盐8重结晶。

重结晶步骤进一步改进纯度且还提供具有合适粒度(例如，适用于后续医药配制剂的粒度)的产物。

为了避免疑问，应注意，本文可互换使用“结晶”和“重结晶”，意为从溶液或悬浮液形成固体析出物(例如，结晶)，且术语“重结晶”中的“再”并不要求新结晶产物先前为固体或结晶形式。

在一些实施方案中，在重结晶后，将结晶产物过滤且随后用洗涤溶液在过滤器上洗涤该产物。

在一些实施方案中，洗涤溶液为稀的含水酸。

在一些实施方案中，洗涤溶液为冷却的酸化水。

在一些实施方案中，洗涤溶液为约1的pH。

在一些实施方案中，洗涤溶液处于约5℃的温度。

在一些实施方案中，用从约1至约5倍体积(1vol.至5vol.)的洗涤溶液实施洗涤。

在一些实施方案中，用约4倍体积(4vol.)的洗涤溶液实施酸洗。

在一些实施方案中，用2×4vol.的洗涤溶液实施酸洗。

冷酸性重结晶(RX-CAR)：

在一些实施方案中，重结晶为在相对较冷温度通过将pH调节至相对较低pH由水(例如，由水溶液或水悬液)重结晶(例如，“冷酸性结晶”)。

在一些实施方案中，使用HCl调节pH。

在一些实施方案中，相对较冷温度为2至40℃。

在一些实施方案中，相对较冷温度为2至30℃。

在一些实施方案中，相对较冷温度为5至30℃。

在一些实施方案中，相对较冷温度为10至30℃。

在一些实施方案中，相对较冷温度为15至30℃。

在一些实施方案中，相对较冷温度为20至30℃。

在一些实施方案中，相对较冷温度为约25℃。

在一些实施方案中，相对较低pH为-1至3。

在一些实施方案中，相对较低pH为0至3。

在一些实施方案中，相对较低pH为0至2。

在一些实施方案中，相对较低pH为约1。

在一些实施方案中，将pH缓慢调节至相对较低pH。

在一些实施方案中，在5至120分钟的时间调节pH。

在一些实施方案中，在5至60分钟的时间调节pH。

在一些实施方案中，在5至30分钟的时间调节pH。

在一些实施方案中，在约10分钟的时间调节pH。

冷酸性重结晶(RX-CAR)在大大减少所得固体(例如，结晶)产物的金属含量方面特别有效。

热盐析(RX-HSO)：

在一些实施方案中，重结晶为在氯化物(如氯化钠)存在下以初始高温由水(例如，由水溶液或水悬液)重结晶(例如，“热盐析”)。

在一些实施方案中，盐7或8的(初始)浓度为0.002至0.05M。

在一些实施方案中，该范围为0.005至0.04M。

在一些实施方案中，该范围为0.01至0.04M。

在一些实施方案中，(初始)浓度为约0.03M。

在一些实施方案中，初始高温为30至90℃。

在一些实施方案中，该范围为40至80℃。

在一些实施方案中，该范围为50至80℃。

在一些实施方案中，初始高温为约65℃。

在一些实施方案中，氯化物(氯化钠)的(初始)浓度为0.1至3.0M。

在一些实施方案中，该范围为0.5至2.5M。

在一些实施方案中，该范围为1.0至2.2M。

在一些实施方案中，(初始)浓度为约2.0M。

在一些实施方案中，存在大摩尔过量氯化物(氯化钠)。

在一些实施方案中，氯化物(氯化钠)与盐7或8的摩尔比为5至100。

在一些实施方案中，摩尔比为20至80。

在一些实施方案中，摩尔比为50至80。

在一些实施方案中，摩尔比为约65。

在一些实施方案中，重结晶包括重结晶(高度结晶)析出物的后续干燥，例如在适宜温度(例如，50至120℃)的烘箱中干燥适宜时间(例如，1至24小时)。

举例来说，在一些实施方案中，在大约65℃将粗MTC产物或经处理的粗MTC产物溶解于H₂O中，溶液浓度为约0.03M。任选地，过滤溶液。添加氯化钠。允许将混合物缓慢(例如，历经1至10小时)冷却(例如)至约室温。收集所得(高度结晶)析出物，且任选地例如在烘箱(例如，约75℃)中干燥适宜时间(例如，约16小时)。

研磨(RX-TRIT)：

在一些实施方案中，重结晶为在四氢呋喃(THF)存在下以初始高温由水(例如，由水溶液或水悬液)重结晶(例如，研磨)。

在一些实施方案中，盐7或8的(初始)浓度为0.002至0.20M。

在一些实施方案中，该范围为0.01至0.20M。

在一些实施方案中，该范围为0.05至0.15M。

在一些实施方案中，(初始)浓度为约0.13M。

在一些实施方案中，初始高温为30至90℃。

在一些实施方案中，该范围为40至80℃。

在一些实施方案中，该范围为50至80℃。

在一些实施方案中，初始高温为约65℃。

在一些实施方案中，水与THF的体积比为20:1至2:1。

在一些实施方案中，该范围为10:1至2:1。

在一些实施方案中，该范围为7:1至3:1。

在一些实施方案中，该比率为约5:1。

举例来说，在一些实施方案中，在大约65℃将粗MTC产物或处理的粗MTC产物溶解于水中，溶液浓度为约0.13M。任选地，过滤溶液。允许缓慢冷却混合物，且当温度达到约25℃时，以约5：1的水：THF体积比添加THF。再使混合物缓慢(例如，历经1至10小时)冷却(例如)至约5℃。收集所得(高度结晶)析出物，且任选地例如在烘箱(例如，约100℃)中干燥适宜时间(例如，约2小时)。

组合物

本发明的一个方面涉及组合物，这些组合物包含本文所描述的二氨基吩噻嗪鎓化合物。

本发明的一个方面涉及组合物，这些组合物包含通过本文所描述的方法获得的或可通过本文所描述的方法获得的二氨基吩噻嗪鎓化合物。

在一些实施方案中，组合物进一步包含药用载体、稀释剂或赋形剂。

灭活病原体的方法

本发明的一个方面涉及本文所描述的二氨基吩噻嗪鎓化合物在灭活样品(例如，血液或血浆样品)中病原体的方法中的用途，该方法包括向样品引入化合物并使样品暴露于光下。

本发明的一个方面涉及通过本文所描述的方法获得的或可通过本文所描述的方法获得的二氨基吩噻嗪鎓化合物在灭活样品(例如，血液或血浆样品)中病原体的方法中的用途，该方法包括向样品引入化合物和使样品暴露于光下。

医学治疗方法

本发明的一个方面涉及通过疗法用于人或动物机体的(例如，疾病病症)治疗方法中的本文所描述的二氨基吩噻嗪鎓化合物。

本发明的一个方面涉及通过疗法用于人或动物机体的(例如，疾病病症)治疗方法中的通过本文所描述的方法获得的或可通过本文所描述的方法获得的二氨基吩噻嗪鎓化合物。

本发明的一个方面涉及本文所描述的二氨基吩噻嗪鎓化合物在制备用于治疗疾病病症的药物中的用途。

本发明的一个方面涉及通过本文所描述的方法获得的或可通过本文所描述的方法获得的二氨基吩噻嗪鎓化合物在制备用于治疗疾病病症的药物中的用途。

本发明的一个方面涉及治疗患者疾病病症的方法，该方法包括向该患者施用治疗有效量的本文所描述的二氨基吩噻嗪鎓化合物。

本发明的一个方面涉及治疗患者疾病病症的方法，该方法包括向该患者施用治疗有效量的通过本文所描述的方法获得的或可通过本文所描述的方法获得的二氨基吩噻嗪鎓化合物。

疾病病症

在一些实施方案中，疾病病症为τ蛋白病。

“τ蛋白病”是其中τ蛋白(和其异常功能或处理)在其中起作用的病症。阿尔茨海默病是τ蛋白病的实例。神经变性疾病如匹克病(Pick’s disease)和进行性核上性麻痹(Progressive Supranuclear Palsy,PSP)的发病机理看起来与病理性截短的τ聚集体分别在新皮质的齿状回(dentate gyrus)和星状锥体细胞中的聚集相互关联。其它痴呆病包括额颞痴呆(fronto-temporal dementia,FTD)；与染色体相关的帕金森综合征(parkinsonism linked tochromosome 17,FTDP-17)；去抑制-痴呆-帕金森-萎缩综合征(disinhibition-dementia-parkinsonism-amyotrophycomplex,DDPAC)；核-脑桥-黑质变性(pallido-ponto-nigral degeneration,PPND)；ALS-关岛痴呆综合征(Guam-ALSsyndrome)；核-黑质-苍白球变性(pallido-nigro-luysian degeneration,PNLD)；皮质-基底变性(cortico-basal degeneration,CBD)及其它(例如，参见Wischik等人，2000年，尤其其中的表5.1)。所有这些疾病都称为“τ蛋白病”，该疾病的特征主要或部分为异常τ聚集。

在一些实施方案中，该疾病病症为阿尔茨海默病(AD)。

在一些实施方案中，该疾病病症为皮肤癌。

在一些实施方案中，该疾病病症为黑素瘤。

在一些实施方案中，该疾病病症为病毒、细菌或原虫病。

在一些实施方案中，原虫病病症为疟疾。在此实施方案中，治疗可与另一种抗微生物制剂联合，例如氯喹或阿托伐醌(atovaquone)。

在一些实施方案中，病毒疾病病症由丙型肝炎、HIV或西尼罗病毒所导致。

治疗

用在本发明治疗疾病语境中的术语“治疗”总体上与治疗和疗法有关，不管是针对人类还是动物(例如兽用)，其中获得某些所需的治疗效果，例如抑制病症发展，并包括减慢发展速度、使发展停止、病症消退、病症改善和病症治愈。也包括作为预防措施(即预防、防治)的治疗。

本文使用的术语“治疗有效量”涉及DAPTZ化合物的量或含有DAPTZ化合物的物质、组合物或剂型的量，当根据所述的治疗方案给药后所述量足以产生某些所需的治疗效果，与合理的益处/风险比例相称。

术语“处置或治疗”包括联合治疗和联合疗法，其中将两种或多种治疗剂或疗法例如连续或同时联合。治疗和疗法的实例包括但不限于化学疗法(给药活性制剂包括如药物、抗体(例如在免疫疗法中那样)、前药(例如光敏疗法中那样、GDEPT、ADEPT等)；外科手术；放射疗法和基因疗法。

给药途径

可通过任何便利的给药途径向受试者/患者施用二氨基吩噻嗪鎓化合物或包含该化合物的药物组合物，无论全身/外周或局部给药(即在所希望起作用的部位)都是可以的。

给药途径包括但不限于口服(例如摄入(ingestion))；含服；舌下；经皮(包括如通过贴剂(patch)、膏剂(plaster)等)；透粘膜(包括如通过贴剂、膏剂等)；鼻内(例如通过鼻腔喷雾)；眼部(例如通过滴眼剂)；肺部(例如通过例用如气溶胶的吸入或吹入疗法，如通过如嘴或鼻)；直肠(例如通过栓剂或灌肠剂)；阴道(例如通过阴道栓剂)；非肠道方式如通过注射包括皮下注射、皮内注射、肌内注射、静脉注射、动脉内注射、心内注射、膜内注射、椎内注射、囊内注射、囊下注射、眼眶内注射、腹膜内注射、气管内注射、表皮下注射、关节内注射、蛛网膜下注射和胸骨内注射(包括如内腔式注射到脑内)；通过埋入库(depot)或贮器(reservoir)，例如皮下或肌内埋入。

受试者/患者

受试者/患者可以是动物、哺乳动物、胎生哺乳动物、啮齿目动物(例如豚鼠、仑鼠、大鼠、小鼠)、鼠科动物(例如小鼠)、兔形目动物(例如家兔)、禽类(例如鸟)、犬类(例如狗)、猫科动物(例如猫)、马科动物(例如马)、猪科动物(例如猪)、羊族动物(例如绵羊)、牛族动物(例如母牛)、灵长类(动物)、猿类(例如猴子或猿)、猴子(例如狨猴、狒狒)、猿(例如大猩猩、黑猩猩、猩猩(orangutang)、长臂猿(gibbon))，或人类。

进一步，受试者/患者可以处于其成长的任何阶段，例如胎儿。

在一个优选实施方案中，受试者/患者为人。

制剂

尽管可单独使用(例如给药)二氨基吩噻嗪鎓化合物，但通常优选的是将其用在组合物或制剂中。

在一些实施方案中，所述组合物为含有本发明所述二氨基吩噻嗪鎓化合物和药用载体、稀释剂或赋型剂的药物组合物(例如制剂(formulation)、制品(preparation)、药物(medicament))。

在一些实施方案中，所述组合物为含有至少一个本发明所述二氨基吩噻嗪鎓化合物和一种或多种其它本领域技术人员已知的药用成分的药物组合物，所述药用成分包括但不限于药用载体、稀释剂、赋型剂、辅料、填充剂、缓冲剂、防腐剂、抗氧化剂、润滑剂、稳定剂、助溶剂、表面活性剂(例如润湿剂)、掩蔽剂、着色剂、调味剂和甜味剂。

在一些实施方案中，该组合物进一步包含其他活性剂，例如其他治疗或预防药物。

合适的载体、稀释剂、赋型剂等可在标准药物教材中找到。参见，例如Handbook of Pharmaceutical Additives，第2版(M.Ash和I.Ash编辑)，2001(Synapse InformationResources,Inc.，Endicott，New York,USA)，Remington's Pharmaceutical Sciences，第20版，Lippincott，Williams&Wilkins出版，2000；和Handbook of PharmaceuticalExcipients，第2版，1994。

本发明的另一方面涉及制备药物组合物的方法，包括将至少一种本发明所述的[¹¹C]-放射标记的吩噻嗪或吩噻嗪样化合物与一种或多种其它本领域技术人员已知的药用成分混合，所述药用成分如载体、稀释剂、赋型剂等。如果以单个单位(例如片剂等)进行配制，每个单位含有预定量(剂量)的活性化合物。

本发明使用的术语“药用的”涉及化合物、成分、物质、组合物、剂型等，其在合理的医学判断范围内适用于与出问题的受试者(例如人)的器官接触，而不会产生过量的毒性、刺激、过敏性应答或其它问题或病症，与合理的益处/风险比例相称。每一种载体、稀释剂、赋型剂等在与制剂的其它成分相容方面必须也是“可接受的”。

所述制剂可以通过制药领域已知的任何方法进行制备。这些包括如下步骤：将活性化合物与作为一种或多种附加成分的载体混合。通常，所述制剂是通过将活性化合物与载体(例如液体载体、细颗粒固体载体，等)均匀而又紧密(intimately)混合在一起，然后根据需要将产物成型。

所述制剂可经制备实现快速或缓慢释放；即释、延迟释放、定时释放或持续释放；或它们的组合。

适用于肠胃外给药(例如通过注射)的制剂包括含水或不含水、等渗、无热原、无菌液体、(例如溶液、悬浮液)，其中将所述活性化合物溶解、悬浮或以其它方式提供(例如采用微脂粒或其它微粒形式)。这些液体还含有其它药用成分，如抗氧化剂、缓冲剂、防腐剂、稳定剂、抑菌剂、助悬剂、增稠剂和使制剂与意在接受者的血液(或其它相关体液)等渗的溶质。赋型剂的例子包括如水、醇、多元醇、甘油、植物油等。用于这些制剂中的合适等渗载体包括氯化钠注射液、林格溶液或乳酸林格注射液。典型地，活性化合物在液体中的浓度为约1ng/ml至约10mg/ml，例如从约10ng/ml至约1mg/ml。所述制剂可置于单位剂量或多剂量密封容器中，例如置于安瓿瓶(ampoule)和小瓶(vial)中，并且可储存在冷冻干燥(冻干的)的条件下，此时仅需要在使用之前即时加入无菌液体载体，例如加入注射用水。临时注射溶液和悬浮液可由无菌粉末、颗粒和片剂制备。

优选制剂的实例

本发明一个方面涉及含有20至300mg本发明披露的二氨基吩噻嗪鎓化合物和药用载体、稀释剂或赋型剂的剂量单位(例如药物片剂或胶囊)(例如，通过本发明方法获得，或可通过本发明方法获得；具有本发明披露的纯度；等等)。

在一些实施方案中，剂量单位为片剂。

在一些实施方案中，剂量单位为胶囊。

在一些实施方案中，该量为30至200mg。

在一些实施方案中，该量为约30mg。

在一些实施方案中，该量为约60mg。

在一些实施方案中，该量为约100mg。

在一些实施方案中，该量为约150mg。

在一些实施方案中，该量为约200mg。

在一些实施方案中，所述药用载体、稀释剂或赋型剂为如下物质或包括如下物质的一种或两种都包括：甘油酯(例如Gelucire月桂酰聚乙二醇-32甘油酯PhEur,USP)和胶体二氧化硅(例如2％AerosilColliodal Silicon Dioxide PhEur,USP)。

剂量

本领域技术人员能够理解的是，二氨基吩噻嗪鎓化合物和含有该二氨基吩噻嗪鎓化合物的组合物的合适剂量会根据病人的不同而不同。最佳剂量的确定通常包括平衡治疗益处对任何风险或有害副反应的水平。所选择的剂量水平会依赖于各种因素，包括但不限于特定化合物的活性、给药途径、给药时间、化合物的代谢速度、治疗的持续时间、联合使用的其它药物，化合物和/或物质、疾病的严重程度和物种、患者的性别、年龄、体重、病状、一般健康状况和先前治疗史。化合物的量和给药途径最终由医生、兽医或临床医师决定，尽管总的来说，所选的剂量水平是为了能在作用部位实现局部浓度，该浓度能起到所需的效果而不产生大量有害或毒副反应。

在整个治疗阶段可采用一次剂量连续或间歇给药(例如以合适的间隔分份剂量)。确定最有效途径和给药剂量的方法是本领域技术人员已知的，并随用于治疗的制剂、治疗目的、进行治疗的目标细胞和进行治疗的受试者而变化。单一或多次给药可以根据由医生、兽医或临床医师选择的剂量水平和模式进行。

一般而言，活性化合物的适宜剂量在每日受试者每千克体重的约100ng至约25mg(更典型为约1μg至约10mg)的范围内。在活性化合物为盐、酯、酰胺、前药等的情况下，在母体化合物的基础上计算给药量，且因此成比例增加所使用的实际重量。

在一些实施方案中，根据以下剂量方案向人患者施用活性化合物(例如，MTC)：约100mg，每日3次。

在一些实施方案中，根据以下剂量方案向人患者施用活性化合物(例如，MTC)：约150mg，每日2次。

在一些实施方案中，根据以下剂量方案向人患者施用活性化合物(例如，MTC)：约200mg，每日2次。

实施例

提供以下实施例仅用于示例说明本发明且并不意在限制本文所描述的本发明的范围。

实施例1

以下为方案1中所描述的3-锅法。

方案1–通过3锅法的合成

表1概括了用于以10g规模(即，从10g二甲基苯胺开始)得到MTC的试剂和溶剂的量。

表1–在每个合成步骤使用的试剂的量

括号内的产率将起始物质和/或产物纯度考虑在内。

N,N-二甲基-对苯二胺的合成(化合物3，步骤一和步骤二)

向配备有滴液漏斗和温度计且固定在冰浴中的三颈1升圆底烧瓶中添加水(100mL)和二甲基苯胺(MW 121.18，10.00g，82.52mmol)。搅拌混合物直至温度为5℃(±2℃)，并在5分钟时间内添加浓盐酸(32％，24.00mL，2.4倍体积)。一旦温度返回到5℃(±2℃)，且二甲基苯胺完全溶解，向滴液漏斗中添加亚硝酸钠(MW 69.00，6.30g，91.30mmol)在水(50mL，5.0倍体积)中的溶液。在25分钟时间内滴加该无色溶液，从而使得反应混合物变为浑浊和橙色。在完成添加后，将混合物在5℃(±2℃)搅拌1小时。在该时期结束时开始步骤2。一次性向混合物添加浓盐酸(32％，24.0mL，2.4倍体积)。随后在25分钟时间内开始分批添加铁(MW 63.50，12.10g，190.55mmol)。在添加期间，在混合物的表面上观察到鼓泡泡沫且温度升至10℃。在完成铁添加后，将混合物留置搅拌，保持在10-12℃达2小时。通常，将该反应混合物搅拌过夜，并获得深红-褐色溶液。

N,N-二甲基-对苯二胺的硫代磺酸的合成(化合物4，步骤三)

在上文所描述的同一容器中继续反应，无需过滤铁残余物。将圆底烧瓶固定在冰浴中以将温度降低至5℃(±2℃)。作为干固体添加硫酸铝十六水合物(MW 630.39，7.80g，12.38mmol)，并将混合物留置搅拌5分钟以使得发生溶解。随后一次性添加硫代硫酸钠五水合物(MW 248.10，22.52g，90.77mmol)于水(25.0mL，2.5倍体积)中的溶液。随后向滴液漏斗中添加重铬酸钠二水合物(MW 298.00，10.08g，33.83mmol)在水(40.0mL，4.0倍体积)中的溶液，并在25分钟时间内将该溶液滴加到反应混合物中。在该操作期间，混合物温度略微增加(通常增至9℃)。在完成添加操作后，将反应混合物搅拌1小时。在该时期结束时，直接在同一烧瓶中实施下一步骤。

宾雪德拉氏绿的硫代磺酸的合成(化合物5，步骤四)

通过向二甲基苯胺和水的冰冷混合物中分批添加硫酸来制备二甲基苯胺(MW121.18，10.00g，82.52mmol)、水(10.0mL,1.0倍体积)和硫酸的溶液。在整个添加期间监测温度以使得温度不升到15℃以上。在添加酸的最后部分后，将溶液留置冷冻到5℃(±2℃)。随后一次性将溶液添加至反应混合物中，并向滴液漏斗中添加重铬酸钠二水合物(MW298.00,27.05g,90.77mmol)在水(70.0mL，7.0倍体积)中的溶液。在25分钟时间内实施重铬酸盐溶液的滴加，且该添加操作伴随有块状反应混合物中出现紫色表面光泽和绿色着色。随后将混合物在5℃(±2℃)留置搅拌2小时。在该时期结束时，向烧瓶中添加SCAR-O-FLOC纤维素过滤剂(10.0g)，并搅拌混合物直至形成匀和浆液。随后过滤浆液，并用水(100.0mL，10.0倍体积)洗涤残余物。在下一步骤中直接使用该残余物，无需进一步处理。

甲基锍氯化物的合成(化合物6，步骤五)

在0.01M盐酸(250.0mL，25.0倍体积)中使获得的绿色残余物再浆化并倒回至配备有温度计、冷凝器和挡块的1升圆底烧瓶中。向烧瓶中的浆液中添加硫酸铜五水合物(MW249.69，2.06g，8.25mmol)，并将深绿色混合物加热至85℃且保持1小时。在该时期结束时，混合物已变为深蓝色，表明已形成亚甲蓝。

通过“盐析”分离甲基锍氯化物(化合物6，步骤六)

(在85℃的反应温度)趁热过滤反应混合物，得到深蓝色滤液和深蓝色残余物。随后用热水(约60℃，4×100.0mL，4×10.0倍体积)洗涤残余物，并将合并的滤液添加至烧杯中。

向烧杯中的合并的滤液中添加氯化钠(MW 58.44，100.00g，1.71mol)并在温热但关闭的加热板上放置该混合物，并留置搅拌最少三小时，但通常搅拌过夜，以使得MTC结晶析出。

随后通过过滤分离产物，得到深绿/蓝/金色固体，历经16小时在50℃真空烘箱中干燥该固体。

以55％产率(52％)获得MTC。[括号内的产率将试剂和/或产物纯度考虑在内。]

实施例2

将实施例1的操作扩增至使用20g二甲基苯胺。在合成结束(使用氯化钠“盐析”操作)时，以63％产率(56％)获得MTC。[括号内的产率将试剂和/或产物纯度考虑在内。]

实施例3

使用实施例1的操作，除了通过以下操作实现MTC的分离(最后一步)之外。

(在85℃的反应温度)趁热过滤反应混合物，得到深蓝色滤液和深蓝色残余物。随后用热水(约60℃，4×100.0mL，4×10.0vol.)洗涤残余物，并将合并的滤液添加至烧杯中。

使用浓盐酸将合并的滤液的pH调节为pH＝1，并在环境温度将混合物留置搅拌最少三小时，但通常搅拌过夜，以使得MTC结晶析出。

以44％产率(39％)获得MTC。

实施例4

将实施例3的操作扩增至使用20g二甲基苯胺，除了在步骤五处利用25.0vol.的浆液体积之外。在合成结束(使用盐酸“盐析”操作)时，以56％产率(50％)获得MTC。

实施例5a

以下为方案2a所示的2-锅法：

方案2a:两个反应器的MTC法

表2a概括了使用实施例5a的方法用于以10g规模(即，由10g二甲基苯胺开始)得到MTC的试剂和溶剂的量。

表2a:试剂的量

向圆底烧瓶(RBF)中添加N,N-二甲基苯胺(C₆H₅N(CH₃)₂，MW 121.2，10g，0.0825mol)、水(150cm³)和HCl(32％，24cm³)。将混合物冷却至约5℃。在25分钟时间内向该混合物中滴加亚硝酸钠(NaNO₂，MW 69.0，6.3g，00.0913mol)在水(100cm³)中的水溶液。在低温(5-10℃)将所得悬浮液搅拌1小时。将混合物冷却至大约5℃。以一等分试样添加HCl(32％,24cm³)。以一等分试样部分添加铁屑(Fe，MW 55.85，12.1g，0.217mol)。在低于30℃的温度将混合物搅拌2小时。

将混合物冷却至大约5℃。用硫酸铝十六水合物(Al₂(SO₄)₃·16H₂O，MW 630.42，26g，0.412mol)处理混合物。用硫代硫酸钠五水合物(Na₂S₂O₃·5H₂O，MW 248.2，22.5g，0.0907mol)在水(25cm³)中的溶液处理混合物。在30分钟时间内滴加重铬酸钠二水合物(Na₂Cr₂O₇·2H₂O，MW 298.0，10.0g，0.0336mmol)在水(40cm³)中的溶液。随后在低温(约5℃)将溶液搅拌1小时。随后将N,N-二甲基苯胺(C₆H₅N(CH₃)₂，MW 121.2，10g，0.0825mol)、水(10cm³)和H₂SO₄(98％,8g)的均匀溶液添加至冷冻溶液中。随后，在30分钟时间内滴加重铬酸钠二水合物(Na₂Cr₂O₇·2H₂O，MW 298.0，26.0g，0.0872mmol)在水(70cm³)中的溶液。在约5℃将混合物搅拌2小时。

将硫酸铜(II)五水合物(CuSO₄·5H₂O，MW 249.7，2.06g，8.25mmol)添加至反应混合物中。使温度增至85℃。在该温度将混合物搅拌1小时。形成深蓝色。将混合物冷却至室温。过滤混合物。用水(2×80cm³)洗涤残余物。收集滤液。用盐酸处理滤液以获得1的pH，该使粗甲基锍氯化物析出。搅拌混合物直至深蓝色消失。将混合物过滤，得到粗甲基锍氯化物(MTC)，其为固体(10.62g，40％-基于干重)。

实施例5b

以下为方案2b所示的2-锅法：

方案2b:两个反应器的MTC法

表2b概括了使用实施例5b的方法用于以10g规模(即，由10g二甲苯胺开始)得到MTC的试剂和溶剂的量。

表2b:试剂的量

步骤i

1.将N,N-二甲基苯胺(10.0g,0.0825mol)添加至反应烧瓶中。

2.将32％盐酸(24cm³)和水(150cm³)的混合物添加至反应烧瓶中。

3.搅拌该溶液以确保均匀性。

4.将反应混合物冷却至5℃(±2℃)。

5.在30分钟内添加亚硝酸钠[(6.3g，0.0913mol)，在水(50cm³)中]水溶液。将观察到10℃的最高温度，在此期间获得褐色反应混合物和橙色析出物。

6.将反应混合物搅拌额外60分钟，同时维持5℃(±2℃)的温度。

步骤ii

7.添加32％盐酸(24cm³)。

8.在60分钟内添加铁屑(12.1g,0.217mol)，确保温度保持35℃以下。

9.在大约20℃将反应混合物搅拌大约17小时(±1小时)。在此期间，橙色析出物消失，反应混合物将出现泡沫且含有残余铁屑的均匀褐色反应液体保持不变。

[TLC法：用NaHCO₃中和反应混合物样品并萃取到乙酸乙酯中，用该乙酸乙酯层点样并用乙酸乙酯:己烷＝1:3实施TLC跑板。亚硝基跑板的Rf＝约0.3(橙色斑点)且二胺处于基线(褐色斑点)]。

步骤iii

10.将反应混合物冷却至5℃(±1℃)。

11.添加固体硫酸铝(26.0g,0.0423mol)。

12.将反应混合物搅拌5分钟。

13.以一等分试样添加硫代硫酸钠溶液[(22.5g，0.0907mol)，在水(25cm³)中]。

14.将反应混合物搅拌五分钟。

15.在30分钟内滴加重铬酸钠溶液[(10.0g，0.0336mol)，在水(40cm³)中]。维持温度不高于12℃(±1℃)。在该步骤期间呈现褐色析出物，该褐色反应混合物的颜色略微变淡。

16.在5℃(±2℃)将反应混合物搅拌1小时。

步骤iv

17.通过将硫酸滴加至冷冻N,N-二甲基苯胺和水混合物中制备N,N-二甲基苯胺[(10.0g，0.0825mol)，在水(10cm³)和硫酸(8g)中]溶液。在酸添加期间必须谨慎小心，因其极度放热。

18.随后作为一等分试样将N,N-二甲基苯胺[(10.0g，0.0825mol)，在水(10cm³)和硫酸(8g)中]溶液添加至反应烧瓶中。

19.在30分钟内滴加重铬酸钠溶液[(26.0g，0.0872mol)，在水(70cm³)中]，同时维持温度低于12℃。

20.在5℃(±2℃)将反应混合物搅拌额外2小时。

21.添加10g纤维素助滤剂(BW SCAR-O-FLOC)。

步骤v

22.添加硫酸铜(2.0g,8.03mmol)。

23.将反应混合物加热至85℃，并搅拌1小时。该反应混合物将变为金属紫色，随后蓝色。

24.通过保持85℃的同时过滤收集不溶物质。

25.用预先加热(60℃)的水(4×100cm³)洗涤滤饼。来自洗涤液的每种滤液与反应滤液合并。[在将洗涤液添加至过滤器中与通过滤饼引入洗涤液之间存在至少2分钟的静置时间，此静置允许滤饼彻底浸透。]

26.将合并的滤液冷却至20℃。

27.使用(32％)盐酸(大约12cm³)将滤液调节至pH 1。

28.将滤液搅拌额外18小时以确保完全结晶。

29.通过真空过滤收集结晶甲基锍氯化物。

30.用预先冷冻(5℃)、酸化(pH 1)的水(2×20cm³)洗涤滤饼。

31.历经18小时在40℃的烘箱中干燥结晶甲基锍氯化物。

产率＝48％(±3％)*

*(产率考虑到盐、有机杂质和水含量)

上文已描述了本发明的原理、优选实施方案和操作模式。然而，本发明不应理解为限于所讨论的特定实施方案。相反，上文所描述的实施方案应视为说明性而非限制性，且应了解，在不脱离本文描述的本发明的范围的情况下，本领域的技术人员可在这些实施方案中进行变化。

本发明不限于由随附的权利要求所涵盖的上述那些实施方案，所述实施方案仅涉及本发明的许多优选方面和实施方案中的一些。

Claims

1.一种合成方法，其包括以下次序的步骤：

其中在所述硫代磺酸形成期间或之前添加活化剂，

其中：

X^-为卤素抗衡离子，

任选地条件是所述化合物并非ZnCl₂混盐。

2.根据权利要求1的方法，其中所述活化剂为Al(III)或包含Al(III)。

3.根据权利要求2的方法，其中所述活化剂为硫酸铝十六水合物或包含硫酸铝十六水合物。

4.根据权利要求1至3任一项的合成方法，进一步包括，在所述硫代磺酸形成(TSAF)步骤前，以下的额外步骤：

5.根据权利要求4的方法，其中所述亚硝酰基化(NOS)步骤、所述硫代磺酸形成(TSAF)步骤和所述氧化偶联(OC)步骤全部在同一罐中完成。

6.根据权利要求4或权利要求5的合成方法，进一步包括，在所述亚硝酰基还原(NR)步骤前，以下的额外步骤：

7.根据权利要求1至6任一项的方法，进一步包括，在所述氧化偶联(OC)步骤后，和在若存在的铬酸盐还原(CR)步骤后，和在所述环闭合(RC)步骤前，以下的步骤：

8.根据权利要求1至7任一项的合成方法，进一步包括，在所述环闭合(RC)步骤后，以下的额外步骤：

9.根据权利要求1至8任一项的方法，其中所述方法包括至少一个过滤，且其中在该过滤之前将过滤剂添加至所述反应罐中。

10.根据权利要求9的方法，其中所述过滤剂为纤维素或包含纤维素。

11.一种合成方法，其包括以下次序的步骤中的一步或多步：

12.根据权利要求11的方法，其中所述过滤剂为纤维素或包含纤维素。