CN110044887B - 一种快速区分正常茶叶和可疑茶叶的方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种快速区分正常茶叶和可疑茶叶的方法。本发明利用酸性靛蓝二磺酸钠为指示剂，高锰酸钾为氧化剂，定量的高锰酸钾优先与提取液中的还原性物质进行反应，虽然提取液中含有除茶多酚外的其他还原性物质，但其总含量远小于茶多酚，同时，事实证明，提取液中的其他还原性物质并不会对区分结果产生太大的影响，本发明方法相比于国标方法，能够快速地区分正常茶叶和可疑茶叶，为市场质量检测提供可靠的依据，同时该方法操作简单易于实现。

Description

一种快速区分正常茶叶和可疑茶叶的方法

技术领域

本发明涉及检测领域，尤其涉及一种快速区分正常茶叶和可疑茶叶的方法。

背景技术

随着茶加工行业的不断发展，产生了越来越多的茶叶“废弃物”，包括加工企业的茶渣、茶园的废茶叶^[1]。经过浸泡、提取后，茶叶中的水溶性化学成分减少，其品质大大下降。茶渣的再加工本是对资源的充分利用，然而，有不法商家将提取后的茶渣重新加工，充当低档茶叶或茶叶原料，行为恶劣。

我国国家标准中，茶多酚、咖啡碱、氨基酸、水分和水浸出物是茶叶品质成分的测定指标，前三类化合物决定了茶叶的香气和滋味，是茶叶理化检测的重要指标^[2]。茶多酚在茶叶中含量最高，占鲜茶叶的18％～36％，茶叶经不同的制作工艺制成各品种茶后，其中的茶多酚含量有差异，其含量高低为：绿茶＞铁观音＞红茶＞普洱^[1]。受提取方法影响，茶多酚提取后仍有保留^[3.4]，但显著低于相应的茶叶^[1]。国家标准对红茶、绿茶两种茶叶的茶多酚含量制定了参考指标(GB/T 13738和GB/T 14456)，对于红茶最低限度为7％，绿茶为11％，若茶叶中茶多酚含量低于此限度，可能存在质量不过关的问题，为可疑茶叶。

目前，茶多酚的检测方法有紫外分光光度法、高效液相色谱法、红外光谱法、滴定法等^[5-8]，但测定茶多酚总量的方法以紫外法和滴定法为经典。目前，国家标准《GB/T 8313-2008》以福林酚显色、紫外测定的方法作为茶多酚的法定检测方法，但福林酚与茶多酚反应缓慢，达到颜色稳定耗时较长，需没食子酸标准品随行测定，难以在时间效率上取得进步^[9]。酒石酸亚铁显色法是另一种较常用的紫外测定法，利用颜色梯度制成比色卡，不使用仪器也能进行检测。然而，茶多酚是复合物，不同组分与铁离子的络合颜色并非完全一致，存在较大的误差^[8,10]。

因而有必要提供一种可靠且耗时短的茶多酚含量判定方法，以此进行快速区分正常茶叶和可疑茶叶。

参考文献：

[1]郑清梅,陈昆平,钟艳梅,等.4类茶叶及其茶渣主要成分的测定与分析[J].广东农业科学,2016(6):14-20.

[2]聂志矗.茶叶主要组份的光谱特性研究.2010.

[3]王海斌,陈晓婷,丁力,等.不同速溶茶茶叶原料与茶渣主要成分及金属离子含量分析[J].中国农学通报,2016,32(29):53-57.

[4]李海琳，成浩，王丽鸳，等.茶叶的药用成分、药理作用及开发应用研究进展[J].安徽农业科学,2014，42(31):10833-10835,10838.

[5]沈玫,胡江滨,闫超.绿茶中茶多酚的分析方法研究进展[J].药物评价研究,2013,36(5):389-393.

[6]王万方,张怀令,陈丽,等.不同加工形式茶叶茶多酚含量及抗氧化活性比较研究[J].大理学院学报,2014,13(10):18-21.

[7]贾有青,谷晶,闫书婷.茶叶中茶多酚含量的测定方法比较[J].中国茶叶,2014(01):20-21.

[8]王烨军,徐奕鼎,黄建琴,等.酒石酸亚铁比色法和高锰酸钾滴定法测定茶多酚的比较[J].茶业通报,2010.32(2):61-63.

[9]CN106353312A一种基于微流控纸芯片技术的茶多酚含量快速检测方法.

[10]CN106290341A茶饮料中茶多酚快速检测方法.

发明内容

本发明的目的在于提供一种快速区分正常茶叶和可疑茶叶的方法。本发明利用高锰酸钾氧化还原测定茶叶中茶多酚等还原性物质的含量，通过其含量测定能有效反映茶叶的品质。

本发明所采取的技术方案是：

本发明的目的在于提供一种快速区分正常茶叶和可疑茶叶的方法，包括如下步骤：

1)对茶叶进行提取，得提取液；

2)在提取液中加入水和酸性靛蓝二磺酸钠溶液，混匀，加入高锰酸钾溶液，混匀至半分钟内不褪色，得溶液A；

3)将溶液A与标准比色卡进行比对，若溶液A的颜色为蓝色、绿色或黄绿色，则判定所述茶叶为正常茶叶；若溶液A的颜色为淡黄色或黄色，则判定所述茶叶为可疑茶叶。

优选地，步骤1)中的茶叶还包括进行研磨机粉碎的步骤。

优选地，步骤1)中的茶叶研磨粉碎至过二号筛。

优选地，步骤1)中利用醇提法对茶叶进行提取，提取次数≥1次。

优选地，上述醇提法使用的醇溶液为质量分数为70～100％的醇溶液。

上述醇溶液优选为醇的水溶液。

优选地，步骤1)中每次使用醇提法对茶叶进行提取时，茶叶与醇溶液的质量体积比为1g：25mL。

优选地，步骤1)中每次使用醇提法对茶叶进行提取时的提取温度为70～90℃，提取时间为10～20min。

优选地，步骤1)中每次使用醇提法对茶叶进行提取时的提取温度为70～80℃，提取时间为10～15min。

更优选地，步骤1)中每次使用醇提法对茶叶进行提取时的提取温度为70℃，提取时间为10min。

优选地，步骤2)中加入水的体积为0.5～3mL；优选为1～2.5mL；更优选为2mL。

步骤2)中加入水的目的在于便于判断颜色变化。

优选地，步骤2)中，加入高锰酸钾的质量与提取液的体积比为0.00018g：0.1mL或0.00028g：0.1mL。

优选地，上述茶叶选自发酵茶叶、未发酵茶叶、后发酵茶叶、半发酵茶叶中的任意一种。

优选地，步骤2)中，若上述茶叶选自发酵茶叶或后发酵茶叶，则加入高锰酸钾的质量与提取液的体积比为0.00018g：0.1mL。

优选地，步骤2)中，若上述茶叶选自未发酵茶叶或半发酵茶叶，则加入高锰酸钾的质量与提取液的体积比为0.00028g：0.1mL。

优选地，上述茶叶选自发酵茶叶；优选地，发酵茶叶选自红茶；更优选地，红茶选自红碎茶、工夫红茶中的任意一种。

优选地，上述茶叶选自未发酵茶叶；优选地，未发酵茶叶选自绿茶；更优选地，绿茶选自炒青绿茶、烘青绿茶中的任意一种。

优选地，步骤2)中高锰酸钾的浓度为0.0004g/mL。

优选地，步骤2)中的酸性靛蓝二磺酸钠溶液中含有质量分数为0.1％的靛蓝二磺酸钠。

优选地，步骤2)中的酸性靛蓝二磺酸钠溶液中含有的氢离子浓度为1.5～2mol/L，更优选为1.88mol/L。

本发明中所述的正常茶叶指的是正常加工生产的茶叶，可疑茶叶为经过浸泡或提取成为茶渣后重新加工的茶叶。

本发明的有益效果是：

本发明利用酸性靛蓝二磺酸钠为指示剂，高锰酸钾为氧化剂，定量的高锰酸钾优先与提取液中的还原性物质进行反应，虽然提取液中含有除茶多酚外的其他还原性物质，但其总含量远小于茶多酚，同时，事实证明，提取液中的其他还原性物质并不会对区分结果产生太大的影响。本发明方法相比于国标方法，能够快速地区分正常茶叶和可疑茶叶，该方法操作简单易于实现，可为市场质量检测提供依据。

附图说明

图1：A为判断为正常茶叶的溶液颜色标准图；B为判断为可疑茶叶的溶液颜色标准图；

图2：为加入0.45mL或是0.7mL的0.0004g/mL高锰酸钾溶液后茶叶18的溶液颜色图；

图3为加入0.45mL或是0.7mL的0.0004g/mL高锰酸钾溶液后茶渣04的溶液颜色图；

图4为实施例1的溶液颜色图；

图5为实施例2的溶液颜色图。

具体实施方式

下面进一步列举实施例以详细说明本发明。同样应理解，以下实施例只用于对本发明进行进一步说明，不能理解为对本发明保护范围的限制，本领域技术人员根据本发明阐述的原理做出的一些非本质的改进和调整均属于本发明的保护范围。下述示例具体的工艺参数等也仅是合适范围中的一个示例，即本领域技术人员可以通过本文的说明做合适范围内的选择，而并非要限定于下文示例的具体数据。

试剂配制：

1、70％乙醇水溶液：在700mL纯乙醇中加入300mL水；

2、0.0004g/mL高锰酸钾溶液：称取0.2g高锰酸钾溶解于水中，并定容至500mL；

3、0.1％靛蓝二磺酸钠溶液：称取0.1g靛蓝二磺酸钠，加少量水溶解，加5mL浓硫酸(相对密度1.84)，冷却后加水定容至100mL。

验证利用高锰酸钾快速区分正常茶叶和可疑茶叶方法的可靠性

1)随机选取红茶或绿茶茶叶、茶包共39批，对茶叶随机编号为茶叶01～34，对茶包随机编号为茶包01～05；

2)从上述的茶叶、茶包中随机挑选10批进行如下冲泡烘干：

分别取2.5g茶叶于250mL锥形瓶中，加入纯化水250mL，置于80℃水浴中放置30min，弃去浸泡液，加入纯化水250mL再浸泡1次，取茶渣于85℃烘干，得干燥茶渣，随机编号为茶渣01～10，后进行检测；

检测方法：

A)提取：分别称取0.2g经粉碎处理过二号筛的上述茶叶01～34、茶包01～05、茶渣01～10的样品于15mL离心管中，分别加入5mL70％的乙醇水溶液，振摇30s，后于70℃中水浴提取10min，收集提取液，再分别加入5mL70％的乙醇水溶液，重复提取1次，合并两次提取液；

B)分别取0.1mL上述提取液于试管中，加入2mL水和0.2mL0.1％靛蓝二磺酸钠溶液混匀，若为红茶，则加入0.45mL浓度为0.0004g/mL的高锰酸钾溶液；若为绿茶，则加入0.7mL浓度为0.0004g/mL的高锰酸钾溶液，摇匀，半分钟内不褪色，得溶液A，后依据下述判断标准判断所检测的茶叶是正常茶叶还是可疑茶叶。

判断标准：

1、正常茶叶：当溶液A中的颜色显示为蓝色、绿色或黄绿色时(图1A，标准比色卡)，表明茶叶中的还原性物质的含量等于或大于限度(红茶的限度为7％，绿茶的限度为11％)，判断为正常茶叶；

2、可疑茶叶：当溶液A中的颜色显示为浅黄色、黄色时(图1B，标准比色卡)，表明茶叶中的还原性物质的含量小于限度，为可疑茶叶；

注：当茶叶中的还原性物质接近限度时，测试溶液为接近黄色的黄绿色，若溶液中的绿色在半分钟内全部退去则判定为小于限度值；当茶叶中的还原性物质含量低时，加入高锰酸钾过量使溶液呈橙红色，随后退去呈现为黄色；

茶叶中还原性物质多样，但以茶多酚为最主要成分，采用还原性物质的含量反映其茶多酚的含量具有一定的可靠性，因此为验证上述快速筛选方法的可靠性，利用国标《GB/T8313-2008茶叶中茶多酚和儿茶素类含量的检测方法》作为参比方法；

结果见下表1，同时，依据表1的结果分别以7％(红茶)为限度、11％(绿茶)为限度统计本申请的检测方法的灵敏度、特异性、假阴性率、假阳性率、正确率指标，结果分别见下表2和表3：

表1快筛测定结果和参比方法结果

表2为以7％(红茶)为限度进行判断的统计结果

表3为以11％(绿茶)为限度进行判断的统计结果

由表1、2、3可知：本申请的快速区分方法的结果基本与国标的检测筛选结果相同，同时，当无法判断茶叶是红茶还是绿茶时，参照红茶或绿茶两档判断限度，亦可准确地进行区分，这说明本申请的快速区分正常茶叶和可疑茶叶的方法可靠且具有很高的普适性，特别适合对绿茶和红茶中的正常茶叶和可疑茶叶进行快速区分。

上述茶叶18和茶渣04，不管是加入0.45mL或是0.7mL的0.0004g/mL的高锰酸钾溶液，茶叶18溶液A的颜色均为绿色(见图2)，为正常茶叶，而茶渣04溶液A的颜色均为黄色(见图3)，为可疑茶叶，均与国标检测结果一致。

实施例1

一种快速区分正常茶叶和可疑茶叶的方法，包括如下步骤：

1)称取0.2g商售的已粉碎处理过二号筛的红茶茶叶于15mL离心管中，分别加入5mL质量分数为70％的乙醇水溶液，振摇30s，于70℃下水浴提取10min，收集提取液，再加入5mL质量分数为70％的乙醇水溶液重复提取一次，合并两次提取液；

2)取0.1mL上述提取液于试管中，加入2mL水和0.2mL0.1％的靛蓝二磺酸钠溶液，混匀，后加入0.45mL浓度为0.0004g/mL的高锰酸钾溶液，摇匀，半分钟内不褪色，得溶液A，溶液A的颜色见图4；

3)依据判断标准判断上述茶叶为可疑茶叶；

上述茶叶依据国标的测定方法检测得到的茶多酚的含量为5.8％，即本申请的区分方法与国标的结果一致。

实施例2

一种快速区分正常茶叶和可疑茶叶的方法，包括如下步骤：

1)称取0.2g商售的已粉碎处理过二号筛的红茶茶叶于15mL离心管中，分别加入5mL质量分数为70％的乙醇水溶液，振摇30s，于70℃下水浴提取10min，收集提取液，再加入5mL质量分数为70％的乙醇水溶液重复提取一次，合并两次提取液；

2)取0.1mL上述提取液于试管中，加入2mL水和0.2mL0.1％的靛蓝二磺酸钠溶液，混匀，后加入0.45mL浓度为0.0004g/mL的高锰酸钾溶液，摇匀，半分钟内不褪色，得溶液A，溶液A的颜色见图5；

3)依据判断标准判断上述茶叶为正常茶叶；

上述茶叶依据国标的测定方法检测得到的茶多酚的含量为8.1％，即本申请的区分方法与国标的结果一致。

Claims (7)

1.一种快速区分正常茶叶和可疑茶叶的方法，其特征在于：包括如下步骤：

1）对茶叶进行提取，得提取液；

步骤1）中使用醇提法对茶叶进行提取，提取次数≥1次；所述醇提法使用的醇溶液为质量分数为70～100%的醇溶液；所述茶叶与所述醇溶液的质量体积比为1g：25mL；

所述提取的温度为70～90℃，提取时间为10～20min；

2）在提取液中加入水和酸性靛蓝二磺酸钠溶液，混匀，加入高锰酸钾溶液，混匀至半分钟内不褪色，得溶液A；

步骤2)中加入水的体积为0.5～3mL；

所述酸性靛蓝二磺酸钠溶液中含有质量分数为0.1%的靛蓝二磺酸钠；

步骤2）中，加入高锰酸钾的质量与提取液的体积比为0.00018 g：0.1 mL或0.00028 g：0.1 mL；所述高锰酸钾的浓度为0.0004 g/mL；

3）将溶液A与标准比色卡进行比对，若溶液A的颜色为蓝色、绿色或黄绿色，则判定所述茶叶为正常茶叶；若溶液A的颜色为淡黄色或黄色，则判定所述茶叶为可疑茶叶；

所述茶叶选自发酵茶叶、未发酵茶叶、后发酵茶叶、半发酵茶叶中的任意一种。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤2）中，若所述茶叶选自发酵茶叶或后发酵茶叶，则加入高锰酸钾的质量与提取液的体积比为0.00018 g：0.1 mL。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤2）中，若所述茶叶选自未发酵茶叶或半发酵茶叶，则加入高锰酸钾的质量与提取液的体积比为0.00028 g：0.1 mL。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述茶叶选自发酵茶叶。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：所述发酵茶叶选自红茶。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述茶叶选自未发酵茶叶。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：所述未发酵茶叶选自绿茶。

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