CN110025633A - 一种兔胆粉的制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明实施例公开了一种兔胆粉的制备方法，包括如下步骤：(a)将新鲜兔胆进行匀浆处理，得到混匀液；(b)将混匀液进行过滤、离心收集上清液；(c)向上清液中加入乙醇、静置过夜、离心去除沉淀得到混合液；(d)将混合溶液进行蒸馏、油水分离，收集水溶液；(e)向水溶液中添加活性炭、搅拌、过滤，收集滤液；(f)将滤液进行预冷过夜、冷冻干燥、粉碎，即得所述兔胆粉；本发明上述方法能够对兔胆中胆汁充分利用，并能够高效去除胆汁中的蛋白、脂肪和色素等杂质，进而提高了胆汁中有效成分的纯度，提高了制备兔胆粉中的胆酸含量和整体药效。

Description

一种兔胆粉的制备方法
技术领域
本发明实施例涉及胆粉制备技术领域，具体涉及一种兔胆粉的制备方法。
背景技术
中国中药历史悠久，且资源丰富，千百年来中药在中国的医疗卫生方面发挥了重要作用。然而动物胆汁作为中国的传统中药材，在防治疾病方面也有悠久历史。常见的有熊胆、蛇胆、牛胆、羊胆等，它们在止咳、清热解毒、提高免疫力等方面有着显著效果；但目前中国内外对胆汁理化性质及药理作用的研究主要集中在熊胆、蛇胆、猪胆等，对兔胆的研究尚有不足。
近年来，兔产业发展迅速，但是对于兔副产品的开发却很少，而兔胆作为兔副产品之一，对它的利用更是寥寥无几。大量的兔胆被作为废物丢弃，造成资源浪费。研究表明，兔胆具有和熊胆基本一致的药理作用，均具有止咳、止痛消炎、镇静、抗惊厥、保护心肌的作用，这为兔胆的开发利用提供了科学的理论基础。
现有兔胆的制备方法大多为在新鲜兔胆中获得兔胆汁，再进行过滤，随后干燥得到兔胆粉，但该方法存在胆汁利用率较低，而且杂质较多，胆酸含量较低的问题。
发明内容
为此，本发明实施例提供一种兔胆粉的制备方法，以解决现有技术制备兔胆粉存在的胆汁利用率较低、杂质多以及去氧胆酸含量较低的问题。
为了实现上述目的，本发明实施例提供如下技术方案：
根据本发明实施例的第一方面提供一种兔胆粉的制备方法，所述制备方法包括如下步骤：
(a)将新鲜兔胆进行匀浆处理，得到混匀液；
(b)将混匀液进行过滤、离心收集上清液；
(c)向上清液中加入乙醇、静置过夜、离心去除沉淀得到混合液；
(d)将混合溶液进行蒸馏、油水分离，收集水溶液；
(e)向水溶液中添加活性炭、搅拌、过滤，收集滤液；
(f)将滤液进行预冷过夜、冷冻干燥、粉碎，即得所述兔胆粉。
本发明通过上述方法，能够实现对兔胆中胆汁的充分利用，并通过乙醇的添加能够使的胆汁中的蛋白沉淀，进而实现去除胆汁中蛋白的目的，再通过油水分离，去除脂肪，随后，经过活性炭吸附能够去除胆汁中的色素等杂质，进而提高了胆汁中有效成分的纯度，提高了制备兔胆粉中的胆酸含量和整体药效。
进一步地，所述步骤(a)中，匀浆处理为将新鲜兔胆置入匀浆机中，在80-150r/min条件下匀浆8-12s。通过对上述参数的设置，能够保障胆汁充分的提取，并避免胆囊壁成分进入胆汁溶液，降低胆汁中有效成分的含量。
进一步地，所述步骤(b)中，过滤为采用单层纱布和双层纱布依次进行过滤。通过采用双重过滤，能够更好的去除胆囊碎片，降低制备兔胆粉中的杂质。
进一步地，所述步骤(b)和(c)中，离心速度为4500-5500r/min；离心时间为8-12min；离心样本温度为2-6℃。本发明通过上述参数的设置，能够保障胆汁中有效成分的稳定，并能够高效去除胆汁中存在的胆囊碎片和蛋白，进而提高胆汁中有效成分的含量。
进一步地，所述步骤(c)中，乙醇添加量为上清液的体积0.8-1.2倍。通过对乙醇添加量的限定，能够保障胆汁中的蛋白充分沉淀。
进一步地，所述步骤(d)中，蒸馏温度为33-38℃，时间为1.8-2.2h；优选蒸馏采用旋转蒸发仪进行。通过对蒸馏温度以及时间的限制，能够保障胆汁中有效成分的稳定性，避免温度过高造成有效成分的分解，同时保障将乙醇彻底去除。
进一步地，所述步骤(e)中，活性炭的添加量与水溶液的体积比为(2-3)∶25g/ml；搅拌时间为0.8-1.2h，搅拌速度为80-120r/min。通过对活性炭添加量的限定，能够充分去除胆汁中的色素以及细小颗粒杂质，并避免活性炭添加量太多对有效成分表面吸附，造成胆汁中有效成分的损失。
进一步地，所述步骤(f)中，预冷温度为﹣80℃-﹣60℃；冷冻干燥中样本温度为﹣30℃-﹣20℃，冷冻干燥时间为46-50h。通过对上述参数的设置，能够保障胆汁中有效成分的稳定性和活性。
进一步地，所述步骤(f)中，粉碎后的兔胆粉粒径为40-50μm。
进一步地，所述步骤(b)中，油水分离为将待分离溶液置入油水过滤器中，静置25-35min，收集水溶液。通过选择油水过滤器能够更好的去除胆汁中的脂肪，降低杂质含量。
本发明实施例具有如下优点：
(1)本发明上述方法能够实现对兔胆中胆汁的充分利用，并通过乙醇的添加能够使的胆汁中的蛋白沉淀，进而实现去除胆汁中蛋白的目的，再通过油水分离，去除脂肪，随后，经过活性炭吸附能够去除胆汁中的色素等杂质，进而提高了胆汁中有效成分的纯度，提高了制备兔胆粉中的胆酸含量和整体药效。
(2)本发明通过对匀浆参数的设置，能够保障胆汁充分的提取，并避免胆囊壁成分进入胆汁溶液，降低胆汁中有效成分的含量。
(3)本发明通过对蒸馏温度以及时间的限制，能够保障胆汁中有效成分的稳定性，避免温度过高造成有效成分的分解，同时保障将乙醇彻底去除。
(4)本发明通过对活性炭添加量的限定，能够充分去除胆汁中的色素以及细小颗粒杂质，并避免活性炭添加量太多对有效成分表面吸附，造成胆汁中有效成分的损失。
具体实施方式
以下由特定的具体实施例说明本发明的实施方式，熟悉此技术的人士可由本说明书所揭露的内容轻易地了解本发明的其他优点及功效，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
以下各实施例采用的原料如下：
油水过滤器：型号YK-YS型；来源山东金通达厨业；
匀浆机：型号JJ-2组织捣碎匀浆器；来源金坛友联仪器；
纱布：孔径20目，市购得到。
实施例1
本实施例为一种兔胆粉的制备方法，该包括如下步骤：
(a)将新鲜兔胆置入匀浆机中，在80r/min条件下匀浆12s，得到混匀液；
(b)将混匀液采用单层纱布和双层纱布依次进行过滤，随后在6℃、4500r/min条件下离心12min，收集上清液；
(c)向上清液中加入上清液体积1.2倍的乙醇，静置过夜，随后在2℃、5500r/min条件下离心8min，去除沉淀得到混合液；
(d)将混合溶液在38℃下蒸馏1.8h去除乙醇，再将去除乙醇后的溶液置入油水过滤器中，静置25min，收集水溶液；
(e)按照质量体积比为2∶25g/ml向水溶液中添加活性炭，以120r/min搅拌0.8h，再过滤，收集滤液；
(f)将滤液在﹣60℃下预冷过夜，随后在样本温度为﹣30℃下冷冻干燥50h，再进行粉碎至40-50μm，即得兔胆粉。
实施例2
本实施例为一种兔胆粉的制备方法，该包括如下步骤：
(a)将新鲜兔胆置入匀浆机中，在150r/min条件下匀浆8s，得到混匀液；
(b)将混匀液采用单层纱布和双层纱布依次进行过滤，随后在2℃、5500r/min条件下离心8min，收集上清液；
(c)向上清液中加入上清液体积0.8倍的乙醇，静置过夜，随后在6℃、4500r/min条件下离心12min，去除沉淀得到混合液；
(d)将混合溶液在33℃下蒸馏2.2h去除乙醇，再将去除乙醇后的溶液置入油水过滤器中，静置35min，收集水溶液；
(e)按照质量体积比为3∶25g/ml向水溶液中添加活性炭，以80r/min搅拌1.2h，再过滤，收集滤液；
(f)将滤液在﹣70℃下预冷过夜，随后在样本温度为﹣25℃下冷冻干燥46h，再进行粉碎至40-50μm，即得兔胆粉。
实施例3
本实施例为一种兔胆粉的制备方法，该包括如下步骤：
(a)将新鲜兔胆置入匀浆机中，在100r/min条件下匀浆10s，得到混匀液；
(b)将混匀液采用单层纱布和双层纱布依次进行过滤，随后在4℃、5000r/min条件下离心10min，收集上清液；
(c)向上清液中加入等体积的乙醇，静置过夜，随后在4℃、5000r/min条件下离心10min，去除沉淀得到混合液；
(d)将混合溶液在36℃下蒸馏2h去除乙醇，再将去除乙醇后的溶液置入油水过滤器中，静置30min，收集水溶液；
(e)按照质量体积比为1∶10g/ml向水溶液中添加活性炭，以100r/min搅拌1h，再过滤，收集滤液；
(f)将滤液在﹣80℃下预冷过夜，随后在样本温度为﹣20℃下冷冻干燥48h，再进行粉碎至40-50μm，即得兔胆粉。
对照例1
本对照例为一种兔胆粉的制备方法，该制备方法与实施例3的制备方法基本相同，区别仅在于步骤(e)为按照质量体积比为3.5∶25g/ml向水溶液中添加活性炭，以100r/min搅拌1h，再过滤，收集滤液。
对照例2
本对照例为一种兔胆粉的制备方法，该制备方法与实施例3的制备方法基本相同，区别仅在于步骤(c)为向上清液中加入上清液体积0.6倍的乙醇，静置过夜，静置过夜，随后在4℃、5000r/min条件下离心10min，去除沉淀得到混合液。
实验例
分别选取上述实施例1-3和对照例1-2制备得到的兔胆粉；
采用浓硫酸-冰醋酸紫外分光光度法分别检测上述兔胆粉中的胆酸含量，检测结果如表1所示；
采用光吸收680nm直接测定方法分别检测上述兔胆粉中的去氧胆酸含量，检测结果如表1所示；
采用BCA方法分别检测上述兔胆粉中的蛋白含量，检测结果如表1所示；
表1
组别 胆酸含量(％) 去氧胆酸含量(％) 蛋白含量(％)
实施例1 5.6±0.56 37±1.58 0.2±0.011
实施例2 6.1±0.48 38±2.21 0.17±0.014
实施例3 5.5±0.28 36.8±1.96 0.22±0.013
对照例1 3.9±0.35 30±1.53 0.94±0.06
对照例2 4.2±0.26 29.3±1.68 0.89±0.04
由表1可知：
本发明实施例制备得到的兔胆粉中胆酸含量、去氧胆酸含量较高于对照组，说明本发明制备方法制备得到的兔胆粉中有效成分含量较高，且蛋白杂质较低。
虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施例对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。

Claims (10)

1.一种兔胆粉的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
(a)将新鲜兔胆进行匀浆处理，得到混匀液；
(b)将混匀液进行过滤、离心收集上清液；
(c)向上清液中加入乙醇、静置过夜、离心去除沉淀得到混合液；
(d)将混合溶液进行蒸馏、油水分离，收集水溶液；
(e)向水溶液中添加活性炭、搅拌、过滤，收集滤液；
(f)将滤液进行预冷过夜、冷冻干燥、粉碎，即得所述兔胆粉。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(a)中，匀浆处理为将新鲜兔胆置入匀浆机中，在80-150r/min条件下匀浆8-12s。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(b)中，过滤为采用单层纱布和双层纱布依次进行过滤。
4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(b)和(c)中，离心速度为4500-5500r/min；离心时间为8-12min；离心样本温度为2-6℃。
5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(c)中，乙醇添加量为上清液的体积0.8-1.2倍。
6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(d)中，蒸馏温度为33-38℃，时间为1.8-2.2h。
7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(e)中，活性炭的添加量与水溶液的体积比为(2-3)∶25g/ml；搅拌时间为0.8-1.2h，搅拌速度为80-120r/min。
8.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(f)中，预冷温度为﹣80℃-﹣60℃；冷冻干燥中样本温度为﹣30℃-﹣20℃，冷冻干燥时间为46-50h。
9.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(f)中，粉碎后的兔胆粉粒径为40-50μm。
10.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(b)中，油水分离为将待分离溶液置入油水过滤器中，静置25-35min，收集水溶液。
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