CN109975465A - 一种凤凰单枞茶的质量分析评价方法及应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及凤凰单枞茶质量分析技术领域，具体是一种凤凰单枞茶的质量分析评价方法，采用高效液相色谱法对茶叶样品进行分析检测，通过计算特征峰的相对保留时间进行质量评价，其步骤如下：a.高效液相色谱的色谱条件，固定相为十八烷基键合硅胶，流动相由乙腈和冰乙酸组成，检测波长280nm，柱温35℃；b.采集60分钟之内的色谱峰，呈现9个特征峰，并以EGCG作为参照峰，即峰S,规定值为1.000，计算9个特征峰与参照峰的相对保留时间，其相对保留时间在规定值的±5％之内。本发明解决了质量分析评价不够全面而且没有专属性的技术缺陷，建立一种以高效液相色谱为检验基础，应用指纹图谱技术对凤凰单枞茶及其产品进行整体的成分分析和评价方法。
Description
技术领域
本发明涉及凤凰单枞茶质量分析技术领域，具体是一种凤凰单枞茶的质量分析评价方法及应用。
背景技术
凤凰山位于粤东凤凰镇境内，海拔达一千多米，是粤东地区最高的山。凤凰山区具有山高日照短，云雾雨量多，冬春不严寒，盛夏无酷暑的天气特点，极适合茶树生长，茶树生长没有明显的休眠期，四季都可产茶。凤凰山主要的土壤类型为红壤和赤红壤，土层深厚，富含有机质和微量元素，pH值5.5-6.5，为茶树的生长提供了适宜的条件。凤凰单枞茶属于半发酵的乌龙茶，其外形条索粗壮，匀整挺直，色泽黄褐，油润有光，并有朱砂红点；冲泡清香持久，滋味浓醇鲜爽，润喉回甘，具有独特的山韵。茶叶中含有丰富的氨基酸、维生素、茶多酚和生物碱，对人体健康有很好的保健作用。茶味特有的花果香气物质是凤凰单丛茶的特征，传统上根据茶叶香气特有的品质将凤凰单丛茶分为蜜兰香型、八仙香型、黄枝香香型、芝兰香香型、贡香香型、杏仁香香型、银花香香型、肉桂香香型、桂花香香型、玉兰香香型等十大香型。
随着各种分析鉴定方法和仪器的发展，茶叶化学成分系统研究逐步深入，虽然中药指纹图谱的研究已经非常普遍，但将其移植到茶叶的研究和质量控制上比较鲜见。根据目前已发表文献发现，茶叶的指纹图谱研究主要集中在红茶、绿茶和普洱茶上，主要针对乌龙茶成分分析的指纹图谱研究较少，凤凰单枞茶的研究更是未见报道。现有茶叶指纹图谱主要是多酚类的单体和咖啡碱的基础研究，并没有对整体的分析和应用于现实生产和质量控制等方面。专门以凤凰单枞茶为研究对象的全面反映物质成分组成及比例的指纹图谱分析和应用并未见有相关研究和报道。目前并未对凤凰单枞茶质量制定相应的国家标准，传统的质量分析主要侧重于感官鉴别、评价以及卫生指标等项目，不足以说明凤凰单枞茶的内在品质。所以目前凤凰单枞茶的质量分析评价标准普遍存在主观检验项目为主、客观检验项目专属性不强、成分测定无限量要求、质量评价无全面分析方法等缺陷。
发明内容
本发明的目的在于提供一种凤凰单枞茶的质量分析评价方法及应用，以解决上述背景技术中提出的问题。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
一种凤凰单枞茶的质量分析评价方法，采用高效液相色谱法对茶叶样品进行分析检测，通过计算特征峰的相对保留时间进行质量评价，其步骤如下：
a.高效液相色谱的色谱条件，固定相为十八烷基键合硅胶，流动相由乙腈和冰乙酸组成，检测波长280nm，柱温35℃；
b.采集60分钟之内的色谱峰，呈现9个特征峰，并以EGCG作为参照峰，即峰S,规定值为1.000，计算9个特征峰与参照峰的相对保留时间，其相对保留时间在规定值的±5％之内。
作为本发明进一步的方案：9个特征峰的规定值分别为：特征峰1规定值为0.196、特征峰2规定值为0.246、特征峰3规定值为0.265、特征峰4规定值为0.702、特征峰5规定值为0.785、特征峰6规定值为1.000、特征峰7规定值为1.663、特征峰8规定值为1.943、特征峰9规定值为2.050。
作为本发明进一步的方案：步骤a中高效液相色谱流动相A为乙腈，流动相B为0.3％冰乙酸，洗脱条件为梯度洗脱:0-5min 5％乙腈，5-20min 14％乙腈，20-25min 14％乙腈，25-40min 15％乙腈，40-45min 17％乙腈，45-60min 25％乙腈，流速：0.5-1.0ml·min；进样量10μl。
作为本发明进一步的方案：茶叶样品的前处理方法为取供试品过40目筛的粉末0.25g,置于25ml具塞比色管中，加入20ml的70％甲醇,超声萃取30min，过滤后即得试品待测液。
作为本发明进一步的方案：参照物的处理方法：取EGCG对照品，加甲醇制成每1ml含EGCG 0.2mg的溶液，即得。
作为本发明进一步的方案：所述步骤a中的理论板数按咖啡因计算不低于3500。
作为本发明进一步的方案：用于凤凰单枞茶样品、凤凰加工品及含凤凰单枞茶30％以上的产品的质量分析。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：本发明解决了质量分析评价不够全面而且没有专属性的技术缺陷，建立一种以高效液相色谱为检验基础，应用指纹图谱技术对凤凰单枞茶及其产品进行整体的成分分析和评价方法。本发明涉及一种以凤凰单枞茶为研究对象，采用高效液相色谱分析的方法对凤凰单枞茶样品的成分进行整体的分析，本发明方法主要基于中药指纹图谱分析方法，凤凰单枞茶特征图谱的质量分析评价方法及其应用，对凤凰单枞茶样品进行成分分析。本发明方法可以拥有凤凰单枞茶产品或由凤凰单枞茶加工制成的产品的质量分析。通过对多批凤凰单枞茶成分的分析比对总结出了本发明拥有评价凤凰单枞茶相对质量的方法。
附图说明
图1为本发明的凤凰单枞茶标准指纹特征图谱。
图2为不同类茶样的HPLC图谱对比图。
图3为12种香型的凤凰单枞茶茶样的HPLC图谱相似度对比图。
具体实施方式
需要说明的是，在不冲突的情况下，本发明中的实施例及实施例中的特征可以相互组合。
在本发明的描述中，需要理解的是，术语“中心”、“纵向”、“横向”、“上”、“下”、“前”、“后”、“左”、“右”、“竖直”、“水平”、“顶”、“底”、“内”、“外”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系，仅是为了便于描述本发明和简化描述，而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本发明的限制。此外，术语“第一”、“第二”等仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性或者隐含指明所指示的技术特征的数量。由此，限定有“第一”、“第二”等的特征可以明示或者隐含地包括一个或者更多个该特征。在本发明的描述中，除非另有说明，“多个”的含义是两个或两个以上。
在本发明的描述中，需要说明的是，除非另有明确的规定和限定，术语“安装”、“相连”、“连接”应做广义理解，例如，可以是固定连接，也可以是可拆卸连接，或一体地连接；可以是机械连接，也可以是电连接；可以是直接相连，也可以通过中间媒介间接相连，可以是两个元件内部的连通。对于本领域的普通技术人员而言，可以通过具体情况理解上述术语在本发明中的具体含义。
下面将参考附图并结合实施例来详细说明本发明。
实施例一
本发明实施例中，一种凤凰单枞茶的质量分析评价方法，采用高效液相色谱法对茶叶样品进行分析检测，通过计算特征峰的相对保留时间进行质量评价，其步骤如下：
a.高效液相色谱的色谱条件，固定相为十八烷基键合硅胶，流动相由乙腈和冰乙酸组成，检测波长280nm，柱温35℃；
b.采集60分钟之内的色谱峰，呈现9个特征峰，并以EGCG作为参照峰，即峰S,规定值为1.000，计算9个特征峰与参照峰的相对保留时间，其相对保留时间在规定值的±5％之内。
9个特征峰的规定值分别为：特征峰1规定值为0.196、特征峰2规定值为0.246、特征峰3规定值为0.265、特征峰4规定值为0.702、特征峰5规定值为0.785、特征峰6规定值为1.000、特征峰7规定值为1.663、特征峰8规定值为1.943、特征峰9规定值为2.050。
步骤a中高效液相色谱流动相A为乙腈，流动相B为0.3％冰乙酸，洗脱条件为梯度洗脱:0-5min 5％乙腈，5-20min 14％乙腈，20-25min 14％乙腈，25-40min 15％乙腈，40-45min 17％乙腈，45-60min 25％乙腈，流速：0.5-1.0ml·min；进样量10μl。
茶叶样品的前处理方法为取凤凰单枞茶茶叶样品过40目筛的粉末0.25g,置于25ml具塞比色管中，加入20ml的70％甲醇,超声萃取30min，过滤后即得试品待测液。
参照物的处理方法：取EGCG对照品，加甲醇制成每1ml含EGCG 0.2mg的溶液，即得。
所述步骤a中的理论板数按咖啡因计算不低于3500。
记录谱图得到凤凰单枞茶的HPLC指纹图谱，见附图1。
实施例二
本发明实施例中，一种凤凰单枞茶的质量分析评价方法，采用高效液相色谱法对茶叶样品进行分析检测，通过计算特征峰的相对保留时间进行质量评价，其步骤如下：
a.高效液相色谱的色谱条件，固定相为十八烷基键合硅胶，流动相由乙腈和冰乙酸组成，检测波长280nm，柱温35℃；
b.采集60分钟之内的色谱峰，呈现9个特征峰，并以EGCG作为参照峰，即峰S,规定值为1.000，计算9个特征峰与参照峰的相对保留时间，其相对保留时间在规定值的±5％之内。
9个特征峰的规定值分别为：特征峰1规定值为0.196、特征峰2规定值为0.246、特征峰3规定值为0.265、特征峰4规定值为0.702、特征峰5规定值为0.785、特征峰6规定值为1.000、特征峰7规定值为1.663、特征峰8规定值为1.943、特征峰9规定值为2.050。
步骤a中高效液相色谱流动相A为乙腈，流动相B为0.3％冰乙酸，洗脱条件为梯度洗脱:0-5min 5％乙腈，5-20min 14％乙腈，20-25min 14％乙腈，25-40min 15％乙腈，40-45min 17％乙腈，45-60min 25％乙腈，流速：0.5-1.0ml·min；进样量10μl。
茶叶样品的前处理方法为取取龙井绿茶、碧螺春绿茶、祁门红茶、滇红茶、普洱茶砖、普洱饼茶、福建大红袍乌龙茶、凤凰单枞茶茶叶样品过40目筛的粉末0.25g,分别置于25ml具塞比色管中，加入20ml的70％甲醇,超声萃取30min，过滤后即得试品待测液。
参照物的处理方法：取EGCG对照品，加甲醇制成每1ml含EGCG 0.2mg的溶液，即得。
所述步骤a中的理论板数按咖啡因计算不低于3500。
记录谱图得到凤凰单枞茶的HPLC指纹图谱，见附图2，附图2中S1为凤凰单枞茶、S2为福建大红袍乌龙茶、S3为普洱茶砖、S4为普洱饼茶、S5为滇红茶、S6为祁门红茶、S7为碧螺春绿茶、S8为龙井绿茶。
实施例三
本发明实施例中，一种凤凰单枞茶的质量分析评价方法，采用高效液相色谱法对茶叶样品进行分析检测，通过计算特征峰的相对保留时间进行质量评价，其步骤如下：
a.高效液相色谱的色谱条件，固定相为十八烷基键合硅胶，流动相由乙腈和冰乙酸组成，检测波长280nm，柱温35℃；
b.采集60分钟之内的色谱峰，呈现9个特征峰，并以EGCG作为参照峰，即峰S,规定值为1.000，计算9个特征峰与参照峰的相对保留时间，其相对保留时间在规定值的±5％之内。
9个特征峰的规定值分别为：特征峰1规定值为0.196、特征峰2规定值为0.246、特征峰3规定值为0.265、特征峰4规定值为0.702、特征峰5规定值为0.785、特征峰6规定值为1.000、特征峰7规定值为1.663、特征峰8规定值为1.943、特征峰9规定值为2.050。
步骤a中高效液相色谱流动相A为乙腈，流动相B为0.3％冰乙酸，洗脱条件为梯度洗脱:0-5min 5％乙腈，5-20min 14％乙腈，20-25min 14％乙腈，25-40min 15％乙腈，40-45min 17％乙腈，45-60min 25％乙腈，流速：0.5-1.0ml·min；进样量10μl。
茶叶样品的前处理方法为取十二种主要香型的凤凰单枞茶样品，分别为蜜兰香型、八仙香型、黄枝香香型、芝兰香香型、贡香香型、杏仁香香型、凹富后香型、陂头香型、银花香香型、肉桂香香型、桂花香香型、玉兰香香型，样品过40目筛的粉末0.25g,分别置于25ml具塞比色管中，加入20ml的70％甲醇,超声萃取30min，过滤后即得试品待测液。
参照物的处理方法：取EGCG对照品，加甲醇制成每1ml含EGCG 0.2mg的溶液，即得。
所述步骤a中的理论板数按咖啡因计算不低于3500。
记录谱图得到凤凰单枞茶的HPLC指纹图谱，见附图3。附图3中S1为玉兰香香型、S2为桂花香香型、S3为肉桂香香型、S4为银花香香型、S5为陂头香型、S6为凹富后香型、S为7杏仁香香型、S8为贡香香型、S9为芝兰香香型、S10为黄枝香香型、S11为八仙香型、S12为蜜兰香香型。
本发明主要用于凤凰单枞茶样品、凤凰加工品及含凤凰单枞茶30％以上的产品的质量分析。本发明解决了质量分析评价不够全面而且没有专属性的技术缺陷，建立一种以高效液相色谱为检验基础，应用指纹图谱技术对凤凰单枞茶及其产品进行整体的成分分析和评价方法。本发明涉及一种以凤凰单枞茶为研究对象，采用高效液相色谱分析的方法对凤凰单枞茶样品的成分进行整体的分析，本发明方法主要基于中药指纹图谱分析方法，凤凰单枞茶特征图谱的质量分析评价方法及其应用，对凤凰单枞茶样品进行成分分析。本发明方法可以拥有凤凰单枞茶产品或由凤凰单枞茶加工制成的产品的质量分析。通过对多批凤凰单枞茶成分的分析比对总结出了本发明拥有评价凤凰单枞茶相对质量的方法。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (7)
1.一种凤凰单枞茶的质量分析评价方法，其特征在于，采用高效液相色谱法对茶叶样品进行分析检测，通过计算特征峰的相对保留时间进行质量评价，其步骤如下：
a.高效液相色谱的色谱条件，固定相为十八烷基键合硅胶，流动相由乙腈和冰乙酸组成，检测波长280nm，柱温35℃；
b.采集60分钟之内的色谱峰，呈现9个特征峰，并以EGCG作为参照峰，即峰S,规定值为1.000，计算9个特征峰与参照峰的相对保留时间，其相对保留时间在规定值的±5％之内。
2.根据权利要求1所述的一种凤凰单枞茶的质量分析评价方法，其特征在于，9个特征峰的规定值分别为：特征峰1规定值为0.196、特征峰2规定值为0.246、特征峰3规定值为0.265、特征峰4规定值为0.702、特征峰5规定值为0.785、特征峰6规定值为1.000、特征峰7规定值为1.663、特征峰8规定值为1.943、特征峰9规定值为2.050。
3.根据权利要求1或2所述的一种凤凰单枞茶的质量分析评价方法，其特征在于，步骤a中高效液相色谱流动相A为乙腈，流动相B为0.3％冰乙酸，洗脱条件为梯度洗脱:0-5min5％乙腈，5-20min14％乙腈，20-25min14％乙腈，25-40min15％乙腈，40-45min17％乙腈，45-60min25％乙腈，流速：0.5-1.0ml·min；进样量10μl。
4.根据权利要求1所述的一种凤凰单枞茶的质量分析评价方法，其特征在于，茶叶样品的前处理方法为取供试品过40目筛的粉末0.25g,置于25ml具塞比色管中，加入20ml的70％甲醇,超声萃取30min，过滤后即得试品待测液。
5.根据权利要求1所述的一种凤凰单枞茶的质量分析评价方法，其特征在于，参照物的处理方法：取EGCG对照品，加甲醇制成每1ml含EGCG0.2mg的溶液，即得。
6.根据权利要求1或5所述的一种凤凰单枞茶的质量分析评价方法，其特征在于，所述步骤a中的理论板数按咖啡因计算不低于3500。
7.一种如权利要求1-6任一项所述的一种凤凰单枞茶的质量分析评价方法，其特征在于，用于凤凰单枞茶样品、凤凰加工品及含凤凰单枞茶30％以上的产品的质量分析。
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