CN109966557A - 局部缓释Abaloparatide或相关多肽的GelMA水凝胶的制备方法及应用 - Google Patents

局部缓释Abaloparatide或相关多肽的GelMA水凝胶的制备方法及应用 Download PDF

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Abstract

发明涉及局部缓释Abaloparatide或相关多肽的GelMA水凝胶的制备方法及应用；称取甲基丙烯酸酐化明胶单体溶于PBS溶液中，在37～50℃避光条件下震荡溶解；称取苯基‑2,4,6‑三甲基苯甲酰基膦酸锂蓝光引发剂与配置好的GelMA溶液室温避光条件混合，用无菌过滤器将溶液过滤至无菌离心管中；将相关多肽或Abaloparatide加入到装有溶液的无菌离心管中，随后使用蓝光光源照射混合溶液，使其固化成任意形状的水凝胶。Abaloparatide和PTH1‑34药物的有效包载和释放，累积释放率在第12天达约86％。该水凝胶也应用于空洞局部填充支架材料或应用于修复骨质疏松骨折引起的骨缺损的填充。

Description

局部缓释Abaloparatide或相关多肽的GelMA水凝胶的制备方 法及应用
技术领域
本发明涉及一种可局部缓释Abaloparatide或相关多肽类似物的GelMA水凝胶的制备方法，该水凝胶可用作骨缺损填充材料。
背景技术
Abaloparatide是一种甲状旁腺激素相关蛋白[PTHrP(1-34)]类似物，与PTHrP(1-34)有76％的同源性，与PTH1-34有41％的同源性，能与甲状旁腺受体1结合，从而起到调节代谢，促进骨骼形成的作用，其用于治疗患有骨质疏松症风险的绝经后女性(Tella S H,Kommalapati A,Correa R.Profile of Abaloparatide and Its Potential in theTreatment of Postmenopausal Osteoporosis[J].Cureus,2017,9(5):e1300)。2017年4月28日，FDA批准了Tymlos(abaloparatide)用于治疗女性绝经后骨质疏松症，为患者提供了一种治疗骨质疏松的新策略。临床试验研究表明，Abaloparatide治疗骨质疏松症的最佳剂量为每日皮下注射80mcg(Miller PD,Hattersley G,Riis BJ,et al.Effect ofAbaloparatide vs Placebo on New Vertebral Fractures in Postmenopausal WomenWith Osteoporosis:A Randomized Clinical Trial.[J].Journal of the AmericanMedical Association,2016,316(7):722；3.Moreira C A,Fitzpatrick L A,Wang Y,etal.Effects of abaloparatide-SC(BA058)on bone histology and histomorphometry:The ACTIVE phase 3trial.[J].Bone,2016,97:314；Method of treating osteoporosiscomprising administration of PTHrP analog,US 7803770 B2,Sep.28,2010)。
其次作为PTH相关肽类似物之一的特立帕肽(PTH1-34)是重组人甲状旁腺素氨基端1-34活性片段(rhPTH(1-34))，PTH1-34与PTH具有相同的生理作用。有研究表明发现，PTH1-34可以作用于关节软骨细胞来抑制其终末分化，也能抑制木瓜蛋白酶所诱导的骨关节炎(Chang,J.K.,et al.,Parathyroid hormone 1-34inhibits terminal differentiationof human articular chondrocytes and osteoarthritis progression inrats.Arthritis Rheum,2009.60(10):p.3049-60)。PTH1-34在2002年首次被FDA批准用于人体皮下注射，又名为Forteo(teriparatide)，已有研究证实，PTH1-34可降低绝经后骨质疏松症妇女，男性骨质疏松症患者和糖皮质激素性骨质疏松症患者发生椎体或非椎体骨折的风险。
然而目前Abaloparatide和PTH1-34等小分子蛋白质药物用于治疗骨质疏松时需要每日进行皮下注射，药物局部浓度低，长期注射给病人带来治疗不便的同时也会给全身机体带来不良反应，如：恶心、头痛和眩晕。因此，开发一种能够延长Abaloparatide及其相关多肽类似物PTH1-34释放的载体尤为重要。局部药物释放体系可以实现病灶处药物的持续可控释放，获得较高的局部药物浓度，避免全身系统用药的毒副作用，还能对骨质疏松疾病引起的骨缺损空洞进行填充，是一种有效的骨缺损修复方法。
水凝胶是局部药物释放体系中研究和应用较为广泛的体系。水凝胶(Hydrogel)是以水为分散介质的凝胶，由于自身紧密的三维网状结构在三维细胞培养、生长因子释放、骨修复支架中得到广泛应用，尤其在作为药物、生长因子、基因等生物活性物质的控制释放载体上具有一定的优势。而且根据骨的特性可以选用力学性能优异的水凝胶作为骨填充支架材料。在有研究中设计一种透明质酸水凝胶用于PTH1-34的释放，其释放周期能达到10天(Method for controlled release of parathyroid hormone from cross-linkedHyaluronic acid hydrogel,US patent,US 8883862B2,Nov.11,2014)。与透明质酸水凝胶相比，明胶通过化学改性后制备的水凝胶具有更快的交联时间和优良的力学性能，在生长因子载体上和骨修复支架上具有优势，美国一专利利用化学改性的明胶制备的水凝胶作为促伤口愈合因子的可控释放载体，如EGF，TGF-C，FGFs，PDGFs，amphiregulin，HB-EGF，betacellulin，TGF-B，IGFs等生长因子，其累计释放效率在第200h时能达到80～90％(Medicaments based on polymers composed of methacrylamide-modified gelatin,US6458386B1,Oct.1,2002)，且该明胶水凝胶可作为很好的伤口敷料薄膜，可保持伤口周围的湿度。
甲基丙烯酸酐化明胶(GelMA)水凝胶具有优异的生物相容性，可通过可见光或紫外进行固化，形成适于细胞生长与分化且有一定强度的三维结构。其生物相容性与基质胶、纤维蛋白胶、胶原等传统三维细胞包被材料性能相近，但成形性能远优于传统材料，是替代这类材料的最佳选择。明胶最重要的氨基酸序列是精氨酸-甘氨酸-天门冬氨酸(RGD)序列，此序列可促进细胞粘附、增殖和分化。美国食品和药物管理局(FDA)认定明胶安全，且已将明胶用做等离子膨胀剂和稳定剂，包括疫苗等。不仅如此，GelMA不仅具有明胶的生物学活性，还具有光交联水凝胶的理化定制能力。目前利用该水凝胶作为甲状旁腺激素类的药物载体还未有研究，像Abaloparatide、PTH1-34等多肽小分子。
发明内容
目前临床上对Abaloparatide或PTH1-34等小分子蛋白药物的使用需要通过每日皮下注射实现，因此需要开发新的药物缓释方法。本发明提供了一种局部缓释Abaloparatide或PTH1-34及其相关肽类似物的方法，即以GelMA水凝胶负载Abaloparatide或相关肽类似物PTH1-34，通过GelMA水凝胶三维网络结构来促进对Abaloparatide或相关肽类似物的有效持续释放。可局部缓释Abaloparatide或相关肽类似物PTH1-34的GelMA水凝胶，是通过GelMA分子链和小分子蛋白药物之间的正负电荷作用实现的。该水凝胶也可应用于空洞局部填充支架材料以及修复骨质疏松骨折引起的骨缺损相关疾病领域。
本发明的目的通过下述技术方案予以实现：
一种局部缓释Abaloparatide或相关多肽的GelMA水凝胶的制备方法；包括如下步骤：
(1)称取甲基丙烯酸酐化明胶(GelMA)单体溶于PBS溶液中，GelMA的质量分数为5～30％，在37～50℃避光条件下震荡溶解；
(2)称取苯基-2,4,6-三甲基苯甲酰基膦酸锂(LAP)蓝光引发剂与步骤(1)配置好的GelMA溶液室温避光条件混合均匀，LAP光引发剂在溶液中的质量分数为0.1％～1％，用无菌过滤器将溶液过滤至无菌离心管中；
(3)将Abaloparatide或相关多肽加入到步骤(2)中装有溶液的无菌离心管中，室温下超声混合均匀后静置，随后使用蓝光光源照射混合溶液，使其固化成任意形状的水凝胶，其中，Abaloparatide或相关多肽在混合溶液中的浓度为0.5～5mg/mL。
所述相关多肽为Abaloparatide或PTH1-34。
所述步骤(1)中超声震荡溶解15～20min。
所述步骤(3)超声混合时间为20～60min，静置时间为3～24h。
所述步骤(3)使用蓝光光源的激发波长400～490nm。
所述步骤(3)照射混合溶液3～10s。
本发明制备的局部缓释Abaloparatide或相关多肽的GelMA水凝胶应用于空洞局部填充支架材料。
本发明制备制备的局部缓释Abaloparatide或相关多肽的GelMA水凝胶应用于修复骨质疏松骨折引起的骨缺损的填充。
本发明利用甲基丙烯酸酐化明胶(GelMA)水凝胶来负载多肽分子：Abaloparatide或PTH1-34。利用GelMA水凝胶包载多肽分子可以提高提高多肽的局部浓度，实现对多肽分子的有效缓释。
GelMA水凝胶对多肽分子Abaloparatide或PTH1-34的释放特性研究：
(1)将制备好的负载有Abaloparatide或PTH1-34的GelMA水凝胶置于离心管中，加入6～10倍的PBS((pH＝7.4))溶液，随后37℃下置于摇床上震荡；在指定的时间间隔内(0，24h，48h，72h，96h，120h，)，取出1～2倍的悬浮液，同时加入等量的新鲜PBS溶液。
(2)Abaloparatide和PTH1-34的含量是通过高效液相色谱法来测定；首先配置Abaloparatide和PTH1-34对照品溶液，溶度为0.1mg/ml，以常规高效液相色谱的方法来测试并计算步骤(1)的Abaloparatide或PTH1-34悬浮液中Abaloparatide和PTH1-34的含量。
通过高效液相色谱法测定的Abaloparatide和PTH1-34的累积释放效果图如附图4和附图5所示，在初始四天，GelMA水凝胶对Abaloparatide和PTH1-34药物有一个突释过程，效率高达约50％，最终累积释放率在第12天达约86％。
上述步骤中可替代的方案是：步骤中的PBS溶液可以替代为细胞培养液。
本发明的有益效果在于：本发明中设计一种利用GelMA水凝胶来包载Abaloparatide和PTH1-34，或是PTHrP，或是PTHrP其他的多肽序列，促进其局部有效缓释的方法。GelMA通过LAP交联固化，其固化时间很短，有利于对Abaloparatide和PTH1-34药物的有效包载和释放，累积释放率在第12天达约86％。该发明中的GelMA水凝胶不仅可以作为Abaloparatide及其相关肽类似物药物PTH1-34的可控释放载体，同时该水凝胶具有很好的生物相容性，也可促进MC3T3-E1细胞的生物学行为，该水凝胶也可应用于空洞局部填充支架材料以及修复骨质疏松骨折引起的骨缺损相关疾病。
附图说明
图1为本发明中所使用的GelMA单体合成示意图。
图2为本发明中多肽分子Abaloparatide和PTH1-34和GelMA分子链之间作用示意图。图中的分子链代表GelMA大分子链，其在PBS缓冲液中带负电荷；图中似黑色水滴图样代表Abaloparatide或是PTH1-34，其在PBS缓冲液中带正电荷，因此两者之间可以通过正负电荷作用相结合。
图3为本发明实施例1中通过SEM表征的负载有多肽分子Abaloparatide的GelMA水凝胶微观图。
图4为本发明实施例13中的GelMA水凝胶对Abaloparatide的累计释放图。
图5为本发明实施例14中的GelMA水凝胶对PTH1-34的累计释放图。
具体实施方式
下面对本方案的具体实施方法作进一步的详细说明。但本发明的实施方式不限于此。
本发明的可局部缓释Abaloparatide或相关多肽类似物的GelMA水凝胶的制备方法，包括如下步骤：
(1)称取甲基丙烯酸酐化明胶(GelMA)单体溶于PBS溶液中，GelMA的质量分数为5～30％，在37～50℃避光条件下震荡溶解15～20min；
(2)称取LAP蓝光引发剂与步骤(1)配置好的GelMA溶液室温避光条件混合均匀，LAP光引发剂在溶液中的质量分数为0.1％～1％，用无菌过滤器将溶液过滤至无菌离心管中；
(3)将Abaloparatide或PTH1-34溶于PBS溶液中，随后滴加到步骤(2)溶液中，室温下超声混合20～60min，静置3～24h，随后使用蓝光光源(激发波长400～490nm)照射混合溶液3～10s，使其固化成任意形状的水凝胶，其中，Abaloparatide或PTH1-34在混合溶液中的浓度为0.5～5mg/mL。
本发明通过利用GelMA水凝胶支架负载Abaloparatide及其相关多肽类似物PTH1-34，实现对Abaloparatide和PTH1-34的局部可控释放，该发明中可局部缓释Abaloparatide或相关多肽类似物的GelMA水凝胶的制备方法可应用于空洞局部填充支架材料以及用于修复骨质疏松骨折引起的骨缺损。
GelMA单体分子式如图1所示，由苏州智能制造研究院生产的GelMA单体是通过甲基丙烯酸酐改性明胶而来。
GelMA单体和LAP引发剂是由苏州智能制造研究院生产提供。
实施例1
可局部缓释Abaloparatide的GelMA水凝胶的制备：
(1)称取0.25g GelMA单体溶于5ml PBS溶液中，在37℃下震荡溶解15min(避光条件下)，配置质量分数为5％的GelMA溶液；
(2)称取0.005g LAP蓝光引发剂加入上述(1)的溶液中混合均匀(避光条件下)，随后利用0.22μm过滤膜将溶液过滤至新的无菌离心管中。
(3)将Abaloparatide溶于PBS溶液中，随后滴加到上述GelMA溶液中超声混合20min，其Abaloparatide在溶液中的最终浓度为0.5mg/mL，静置3h后使用蓝光光源(激发波长405nm)照射混合溶液，3s后即固化成胶。通过扫描电镜(SEM)测试(图3)可看出，Abaloapratide附着在水凝胶网格中，有利于实现水凝胶对Abaloparatide的缓慢释放。
实施例2
可局部缓释Abaloparatide的GelMA水凝胶的制备：
(1)称取0.25g GelMA单体溶于5ml PBS溶液中，在37℃下震荡溶解15min(避光条件下)，配置质量分数为5％的GelMA溶液；
(2)称取0.005g LAP蓝光引发剂加入上述(1)的溶液中混合均匀(避光条件下)，随后利用0.22μm过滤膜将溶液过滤至新的无菌离心管中。
(3)将Abaloparatide溶于PBS溶液中，随后滴加到上述GelMA溶液中超声混合40min，其Abaloparatide在溶液中的最终浓度为0.5mg/mL，静置10h后使用蓝光光源(激发波长405nm)照射混合溶液，5s使其固化成胶。
实施例3
可局部缓释Abaloparatide的GelMA水凝胶的制备：
(1)称取0.5g GelMA单体溶于5ml PBS溶液中，在37℃下震荡溶解15min(避光条件下)，配置质量分数为10％的GelMA溶液；
(2)称取0.025g LAP蓝光引发剂加入上述(1)的溶液中混合均匀(避光条件下)，随后利用0.22μm过滤膜将溶液过滤至新的无菌离心管中。
(3)将Abaloparatide溶于PBS溶液中，随后滴加到上述GelMA溶液中超声混合40min，其Abaloparatide在溶液中的最终浓度为1mg/mL，静置18h后使用蓝光光源(激发波长405nm)照射混合溶液，5s使其固化成胶。
实施例4
可局部缓释Abaloparatide的GelMA水凝胶的制备：
(1)称取0.5g GelMA单体溶于5ml PBS溶液中，在37℃下震荡溶解15min(避光条件下)，配置质量分数为10％的GelMA溶液；
(2)称取0.025g LAP蓝光引发剂加入上述(1)的溶液中混合均匀(避光条件下)，随后利用0.22μm过滤膜将溶液过滤至新的无菌离心管中。
(3)将Abaloparatide溶于PBS溶液中，随后滴加到上述GelMA溶液中超声混合60min，其Abaloparatide在溶液中的最终浓度为5mg/mL，静置18h后使用蓝光光源(激发波长405nm)照射混合溶液，10s使其固化成胶。
实施例5
可局部缓释Abaloparatide的GelMA水凝胶的制备：
(1)称取0.15g GelMA单体溶于5ml PBS溶液中，在37℃下震荡溶解15min(避光条件下)，配置质量分数为30％的GelMA溶液；
(2)称取0.025g LAP蓝光引发剂加入上述(1)的溶液中混合均匀(避光条件下)，随后利用0.22μm过滤膜将溶液过滤至新的无菌离心管中。
(3)将Abaloparatide溶于PBS溶液中，随后滴加到上述GelMA溶液中超声混合60min，其Abaloparatide在溶液中的最终浓度为1mg/mL，静置24h后使用蓝光光源(激发波长405nm)照射混合溶液，10s使其固化成胶。
实施例6
可局部缓释Abaloparatide的GelMA水凝胶的制备：
(1)称取0.15g GelMA单体溶于5ml PBS溶液中，在37℃下震荡溶解15min(避光条件下)，配置质量分数为30％的GelMA溶液；
(2)称取0.05g LAP蓝光引发剂加入上述(1)的溶液中混合均匀(避光条件下)，随后利用0.22μm过滤膜将溶液过滤至新的无菌离心管中。
(3)将Abaloparatide溶于PBS溶液中，随后滴加到上述GelMA溶液中超声混合60min，其Abaloparatide在溶液中的最终浓度为5mg/mL，静置24h后使用蓝光光源(激发波长405nm)照射混合溶液，5s使其固化成胶。
实施例7
可局部缓释PTH1-34的GelMA水凝胶的制备：
(1)称取0.25g GelMA单体溶于5ml PBS溶液中，在37℃下震荡溶解15min(避光条件下)，配置质量分数为5％的GelMA溶液；
(2)称取0.005g LAP蓝光引发剂加入上述(1)的溶液中混合均匀(避光条件下)，随后利用0.22μm过滤膜将溶液过滤至新的无菌离心管中。
(3)将PTH1-34溶于PBS溶液中，随后滴加到上述GelMA溶液中超声混合20min，其PTH1-34在溶液中的最终浓度为0.5mg/mL，静置3h后使用蓝光光源(激发波长405nm)照射混合溶液，3s后即固化成胶。
实施例8
可局部缓释PTH1-34的GelMA水凝胶的制备：
(1)称取0.25g GelMA单体溶于5ml PBS溶液中，在37℃下震荡溶解15min(避光条件下)，配置质量分数为5％的GelMA溶液；
(2)称取0.005g LAP蓝光引发剂加入上述(1)的溶液中混合均匀(避光条件下)，随后利用0.22μm过滤膜将溶液过滤至新的无菌离心管中。
(3)将PTH1-34溶于PBS溶液中，随后滴加到上述GelMA溶液中超声混合40min，其PTH1-34在溶液中的最终浓度为1mg/mL，静置18h后使用蓝光光源(激发波长405nm)照射混合溶液，5s使其固化成胶。
实施例9
可局部缓释PTH1-34的GelMA水凝胶的制备：
(1)称取0.5g GelMA单体溶于5ml PBS溶液中，在37℃下震荡溶解15min(避光条件下)，配置质量分数为10％的GelMA溶液；
(2)称取0.025g LAP蓝光引发剂加入上述(1)的溶液中混合均匀(避光条件下)，随后利用0.22μm过滤膜将溶液过滤至新的无菌离心管中。
(3)将PTH1-34溶于PBS溶液中，随后滴加到上述GelMA溶液中超声混合40min，其PTH1-34在溶液中的最终浓度为1mg/mL，静置18h后使用蓝光光源(激发波长405nm)照射混合溶液，10s使其固化成胶。
实施例10
可局部缓释PTH1-34的GelMA水凝胶的制备：
(1)称取0.5g GelMA单体溶于5ml PBS溶液中，在37℃下震荡溶解15min(避光条件下)，配置质量分数为10％的GelMA溶液；
(2)称取0.025g LAP蓝光引发剂加入上述(1)的溶液中混合均匀(避光条件下)，随后利用0.22μm过滤膜将溶液过滤至新的无菌离心管中。
(3)将PTH1-34溶于PBS溶液中，随后滴加到上述GelMA溶液中超声混合60min，其PTH1-34在溶液中的最终浓度为5mg/mL，静置24h后使用蓝光光源(激发波长405nm)照射混合溶液，5s使其固化成胶。
实施例11
可局部缓释PTH1-34的GelMA水凝胶的制备：
(1)称取0.15g GelMA单体溶于5ml PBS溶液中，在37℃下震荡溶解15min(避光条件下)，配置质量分数为30％的GelMA溶液；
(2)称取0.025g LAP蓝光引发剂加入上述(1)的溶液中混合均匀(避光条件下)，随后利用0.22μm过滤膜将溶液过滤至新的无菌离心管中。
(3)将PTH1-34溶于PBS溶液中，其溶度为1mg/ml，随后将其加入上述(2)的溶液中，搅拌混合均匀后后使用蓝光光源(激发波长405nm)照射混合溶液，10s使其固化成胶。
实施例12
可局部缓释PTH1-34的GelMA水凝胶的制备：
(1)称取0.15g GelMA单体溶于5ml PBS溶液中，在37℃下震荡溶解15min(避光条件下)，配置质量分数为30％的GelMA溶液；
(2)称取0.05g LAP蓝光引发剂加入上述(1)的溶液中混合均匀(避光条件下)，随后利用0.22μm过滤膜将溶液过滤至新的无菌离心管中。
(3)将PTH1-34溶于PBS溶液中，随后滴加到上述GelMA溶液中超声混合60min，其PTH1-34在溶液中的最终浓度为5mg/mL，静置24h后使用蓝光光源(激发波长405nm)照射混合溶液，10s使其固化成胶。
实施例13
GelMA水凝胶对多肽分子Abaloparatide的释放效果研究：
(1)将制备好的负载Abaloparatide的200μl GelMA水凝胶置于10ml离心管中，加入3mlPBS((pH＝7.4))，随后37℃下置于摇床上震荡。在指定的时间间隔内，取出2ml的悬浮液，同时加入等量的新鲜PBS溶液。每次取出的悬浮液避光低温保存，待测。
(2)Abaloparatide的含量是通过高效液相色谱法来测定。首先配置Abaloparatide的对照品溶液，溶度为0.1mg/ml，以高效液相色谱的方法来计算Abaloparatide的含量。图4为本发明中GelMA水凝胶对Abaloparatide的累计释放图。由数据可见，GelMA水凝胶对Abaloparatide在第1天有一个快速的释放，达到了约25％，最终在12天内释放达到约86％。
实施例14
GelMA水凝胶对多肽分子PTH1-34的释放效果研究：
(1)将制备好的负载PTH1-34的200μl GelMA水凝胶置于10ml离心管中，加入3mlPBS((pH＝7.4))，随后37℃下置于摇床上震荡。在指定的时间间隔内，取出2ml的悬浮液，同时加入等量的新鲜PBS溶液。每次取出的悬浮液避光低温保存，待测。
(2)PTH1-34的含量是通过高效液相色谱法来测定。首先配置PTH1-34的对照品溶液，溶度为0.1mg/ml，以高效液相色谱的方法来计算PTH1-34的含量。图5为本发明中的GelMA水凝胶对PTH1-34的累计释放图。由数据可见，GelMA水凝胶对PTH1-34在第1天有一个快速的释放，达到了约25％，最终在12天内释放达到约82％。
图4，图5中，即GelMA水凝胶对多肽分子Abaloparatdie和PTH1-34有类似的释放效果。从机理尚分析来看，如图2所示，GelMA在PBS溶液中是带负电荷的，而Abaloparatdie和PTH1-34在PBS溶液中是带正电荷的，通过正负电荷作用，Abaloparatdie和PTH1-34与GelMA分子链之间有很好的结合力，实现对其缓慢释放的效果。

Claims (8)

1.一种局部缓释Abaloparatide或相关多肽的GelMA水凝胶的制备方法；其特征是包括如下步骤：
(1)称取甲基丙烯酸酐化明胶(GelMA)单体溶于PBS溶液中，GelMA的质量分数为5～30％，在37～50℃避光条件下震荡溶解；
(2)称取苯基-2,4,6-三甲基苯甲酰基膦酸锂(LAP)蓝光引发剂与步骤(1)配置好的GelMA溶液室温避光条件混合均匀，LAP光引发剂在溶液中的质量分数为0.1％～1％，用无菌过滤器将溶液过滤至无菌离心管中；
(3)将Abaloparatide或相关多肽加入到步骤(2)中装有溶液的无菌离心管中，室温下超声混合均匀后静置，随后使用蓝光光源照射混合溶液，使其固化成任意形状的水凝胶，其中，Abaloparatide或相关多肽在混合溶液中的浓度为0.5～5mg/mL。
2.如权利要求1所述的方法，其特征是所述相关多肽为PTH1-34。
3.如权利要求1所述的方法，其特征是所述步骤(1)中超声震荡溶解15～20min。
4.如权利要求1所述的方法，其特征是所述步骤(3)超声混合时间为20～60min，静置时间为3～24h。
5.如权利要求1所述的方法，其特征是所述步骤(3)使用蓝光光源的激发波长400～490nm。
6.如权利要求1所述的方法，其特征是所述步骤(3)照射混合溶液3～10s。
7.权利要求1方法制备的局部缓释Abaloparatide或相关多肽的GelMA水凝胶应用于空洞局部填充支架材料。
8.权利要求1方法制备的局部缓释Abaloparatide或相关多肽的GelMA水凝胶应用于修复骨质疏松骨折引起的骨缺损的填充。
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