CN109929765A - 一株隐球酵母及其胞外多糖与应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一株隐球酵母及其胞外多糖与应用。该菌株是从南极土壤中获得的一株隐球酵母菌株Crytococcus heimaeyensis S20（CCTCC M 2018911）。隐球酵母S20在YM液体培养基培养后，经离心、乙醇沉降、酶解去蛋白、超滤、冻干后得到的胞外多糖提取物。对提取的胞外多糖进行抗肿瘤试验，发现高浓度的胞外多糖对人表皮癌细胞A431，肺癌细胞A549，人宫颈癌细胞HeLa，乳腺癌细胞MDA‑MB‑231，卵巢癌细胞SKOV‑3的生长均具有明显的抑制效果，且作用时间越长效果越好。本发明证明隐球酵母胞外多糖具有较好的广泛的抗肿瘤活性，可作为抗肿瘤药物的研发应用。
Description
技术领域
本发明属于生物技术领域，具体涉及一株隐球酵母菌株及其胞外多糖与应用。
背景技术
胞外多糖(Exopolysaccharide，EPS)是生物的一级或次级代谢产物，是分泌到体外周边环境中的由碳水化合物残基组成的高分子聚合物，其分子量大小在500到2000kDa不等。构成多糖的单糖种类不多，常见的有甘露糖、葡萄糖、木糖、半乳糖等，但这些单糖的不同组合、不同的构型以及不同的连接方式等使得多糖的结构变得复杂，研究起来也相对较难。胞外多糖具有很多生物活性，可以作为微生物的细胞聚集中心，可以作为营养物质为微生物提供营养，同时还可以保护细胞抵抗严峻的外界环境等。近年的研究发现细菌胞外多糖还具有抗氧化、抗辐射、免疫调节、降血糖、降血脂，以及抗肿瘤、抗肝炎病毒等特殊的生物学活性。
近年来，随着上世纪50年代真菌的胞外多糖被发现具有抗肿瘤活性以来，研究微生物胞外多糖的抗肿瘤作用越来越多。胞外多糖的抗肿瘤作用一般是通过介导肿瘤细胞的凋亡、提高免疫力或者直接杀死肿瘤细胞等方式来发挥作用的。Osama等发现从Bacillusmarinus分离得到的EPS对乳腺癌细胞(MCF-7)和人肺癌细胞A549具有很强的抑制作用[Osama H,EI S,EI Kader,et al.2015,7:200-8.]。Joo-Heon Hong等发现Paenibacilluspolymyxa分离的β-葡聚糖对肺癌细胞A549、人宫颈癌细胞HeLa、Hep3B具有抑制作用，且高分子量的β-葡聚糖要高于低分子量的作用效果[Joo-Heon Hong,Hee KJ.2014,57:102-112.]。从Lactobacillus plantarum中分离的胞外多糖具有一定的抗肿瘤作用，浓度为600μg/mL的EPS对肝癌细胞HepG2的抑制率达到了56.34％[Xingtao Zhou,Tao H,Qiang Y,etal.2017.]。大量的研究表明，胞外多糖具有增强免疫力、抗肿瘤作用，研制效果好、毒性低的抗肿瘤多糖药物，对于预防肿瘤、提高肿瘤的医疗效果具有重大意义。
隐球酵母可以定植在南极以及冰岛等寒冷地区的土壤中，它们通常可以在土壤环境中建立生长优势，有利于促进土壤聚合物的形成。隐球酵母因为生活在南极、冰岛等寒冷地区，该属的酵母通过产生胞外多糖等方式来适应寒冷的环境。目前关于该属多糖的研究主要集中在条件致病菌新型隐球酵母(Cryptococcus neoformans)和罗伦隐球酵母(Cryptococcus laurentii)的荚膜多糖的结构和提取条件优化等方面上。Cryptococcusneoformans的主要多糖组成是甘露糖(78.87％)、葡萄糖(7.75％)和木糖(10.9％)，Cryptococcus laurentii的主要多糖组成是木糖(45.2％)、甘露糖(33.6％)和葡萄糖(18.4％)[Susana F,Leonardo N,Nathan B,et al.2007,7:2.]。
对隐球酵母的代谢产物，尤其是其胞外多糖的抗人肿瘤方面的研究属于首次。
发明内容
为了克服上述现有技术的缺点，本发明的目的在于提供一株新的隐球酵母菌株和由该菌株所产生的胞外多糖，以及该胞外多糖的制备方法和应用。为探寻抗肿瘤药物开拓了新思路及新研究领域。
为了达到上述目的，本发明采取的技术方案为：
第一方面，提供一株隐球酵母菌株，其是保藏号为CCTCC NO：M 2018911的隐球酵母(Cryptococcus heimaeyensis)，命名为隐球酵母S20。
隐球酵母Cryptococcus heimaeyensis S20菌株菌体大小为2.7-4.0×4.0-5.3μm，在YM平板上形成的菌落白色、有光泽。
第二方面，提供上述保藏号为CCTCC NO：M 2018911的隐球酵母(Cryptococcusheimaeyensis)所产生的胞外多糖，其制备方法如下：
1)胞外多糖的提取：
(1)将5mL生长至对数期的隐球酵母S20接种到盛有300mL YM培养基的锥形瓶中，置于180rpm/min的20℃摇床中培养4-5天；
(2)将菌悬液12000rpm/min离心10min，去掉沉淀，取上清，加入3倍体积的无水乙醇，混匀后，置于4℃下静置24h；
(3)取出混合液，一般多糖呈絮状或者沉淀在底部，缓慢倒去大部分上清溶液，将下层液体离心去上清，获得的沉淀即是胞外多糖；
2)胞外多糖的初步纯化：
(1)酶解法去蛋白质：将多糖用去离子水溶解，加入15U/mL的复合蛋白酶，置于50℃摇床，180rpm/min摇5h，取出后，加入三倍体积的无水乙醇，沉淀多糖；
(2)超滤去除小分子物质：将去除蛋白质的多糖溶液加入到3kDa超滤管中，4000g离心20min，去除滤过的液体，将未滤过的多糖溶液转移至干净的50mL离心管中；
(3)冻干：将多糖溶液在4℃预冷半个小时，在-80℃超低温冰箱过夜，最后用真空冷冻干燥机抽干，即可得到隐球酵母S20胞外多糖(EPS)，为浅黄色固体，产量约为0.5g/L。
采用苯酚-硫酸法测得隐球酵母胞外多糖中糖含量为75.8％。
采用考马斯亮蓝法测得隐球酵母胞外多糖不含蛋白质。
通过DEAE-52纤维素的方式对胞外多糖进行分离纯化，得到一种含量较高的中性糖(EPS0)和三种含量相对较低的酸性多糖(EPS1,2,3)。
利用高效液相色谱法对所得隐球酵母胞外多糖进行分析检测，结果表明EPS0的单糖成分主要是葡萄糖(Glc)，所占比例达到92.1％，同时也存在少量甘露糖(Man)、木糖(Xyl)、半乳糖(Gal)和阿拉伯糖(Ara)。EPS1的单糖成分主要是是甘露糖(Man)、葡萄糖(Glc)、木糖(Xyl)，也有半乳糖(Gal)和阿拉伯糖(Ara)等成分。
利用核磁共振法对EPS0和EPS1成分的结构进行分析检测，结果表明EPS0主要糖苷键类型是4-Glcp,t-Glcp和4.6Glcp，分子量大小约为5000Da。EPS1为复杂的聚合体，主要的糖苷键的连接方式有t-Manp,2-Manp,2,6-Manp,4-Glcp。
第三方面，提供上述保藏号为CCTCC NO：M 2018911的隐球酵母(Cryptococcusheimaeyensis)所产生的胞外多糖在制备抗肿瘤药物中的应用。
与现有技术相比，本发明的优点在于：
对提取的隐球酵母胞外多糖进行抗肿瘤试验，发现其多糖对人正常胚肺成纤维细胞MRC-5的毒性作用小，而且高浓度的胞外多糖对人表皮癌细胞A431，肺癌细胞A549，人宫颈癌细胞HeLa，乳腺癌细胞MDA-MB-231，卵巢癌细胞SKOV-3的生长均具有明显的抑制效果，且作用时间越长效果越好；短期内对人肝癌细胞Huh7的生长抑制作用并不明显，但长期来看仍然有较为明显的抑制效果。本发明证明隐球酵母胞外多糖具有较好的广泛的抗肿瘤活性，可作为抗肿瘤药物的研发应用。
生物材料保藏信息：
本发明提供的隐球酵母(Cryptococcus heimaeyensis)菌株，已与2018年12月20日保藏在中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏地址：中国.武汉.武汉大学，邮编：430072。该菌株的保藏编号为：CCTCC NO：M 2018911，分类命名：隐球酵母S20CryptococcusheimaeyensisS20。
附图说明
图1加入EPS12天后肺胚成纤维细胞MRC-5的克隆形成实验(Clone formationassay)图a为空白对照，b为阳性对照氟尿嘧啶(5-Fu)(50μg/mL)，c、d、e、f依次表示多糖终浓度为500、250、125、62.5μg/mL.
图2加入EPS12天后人表皮癌细胞A431的克隆形成实验(Clone formation assay)图a为空白对照，b为加入阳性对照氟尿嘧啶(5-Fu)(50μg/mL)，c、d、e、f依次为加入多糖使其终浓度为500、250、125、62.5μg/mL.
图3加入EPS12天后肺癌细胞A549的克隆形成实验(Clone formation assay)图a为空白对照，b为加入阳性对照氟尿嘧啶(5-Fu)(50μg/mL)，c、d、e、f依次为加入多糖使其终浓度为500、250、125、62.5μg/mL.
图4加入EPS12天后人宫颈癌细胞HeLa的克隆形成实验(Clone formation assay)图a为空白对照，b为加入阳性对照氟尿嘧啶(5-Fu)(50μg/mL)，c、d、e、f依次为加入多糖使其终浓度为500、250、125、62.5μg/mL.
图5加入EPS12天后乳腺癌细胞MDA-MB-231的克隆形成实验(Clone formationassay)图a为空白对照，b为加入阳性对照氟尿嘧啶(5-Fu)(50μg/mL)，c、d、e、f依次为加入多糖使其终浓度为500、250、125、62.5μg/mL.
图6加入EPS12天后卵巢癌细胞SKOV-3的克隆形成实验(Clone formation assay)图a为空白对照，b为加入阳性对照氟尿嘧啶(5-Fu)(50μg/mL)，c、d、e、f依次为加入多糖使其终浓度为500、250、125、62.5μg/mL.
图7加入EPS12天后人肝癌细胞Huh7的克隆形成实验(Clone formation assay)图a为空白对照，b为阳性对照氟尿嘧啶(5-Fu)(50μg/mL)，c、d、e、f依次为加入多糖使其终浓度为500、250、125、62.5μg/mL.
图8隐球酵母胞外多糖的洗脱曲线
图9隐球酵母胞外多糖EPS0单糖组成谱图
图10隐球酵母胞外多糖EPS0糖苷键分析图
图11隐球酵母胞外多糖EPS1单糖组成图谱
图12隐球酵母胞外多糖EPS1糖苷键分析图
具体实施方式
通过以下详细说明结合附图可以进一步理解本发明的特点和优点。所提供的实施例仅是对本发明方法的说明，而不以任何方式限制本发明揭示的其余内容。下列实施例中未注明的具体实验条件和方法，通常按照常规条件如：J.萨姆布鲁克等主编，科学出版社，1992，分子克隆实验指南(第三版)；D.L.斯佩克特等。所用菌株为从南极土壤中分离获得的隐球酵母Cryptococcus heimaeyensis，命名为隐球酵母S20，该菌现保存于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，专利保藏号为CCTCC M 2018911。
使用透射电镜观察发现S20菌株菌体大小为2.7-4.0×4.0-5.3μm。其在YM平板上形成的菌落白色、有光泽。利用API 50CH系统分析发现其可以利用N-乙酰葡糖胺、L-阿拉伯糖醇、D-阿拉伯糖、D-葡萄糖、乳糖、麦芽糖、甘露糖等碳源。利用刚果红平板法鉴定其可以分泌胞外多糖。
【实施例1】株隐球酵母Cryptococcus heimaeyensis S20菌株的胞外多糖提取和检测
1.胞外多糖的提取：
(1)将5mL生长至对数期的酵母接种到盛有300mL YM培养基的锥形瓶中，置于180rpm/min的20℃摇床中培养4-5天。
(2)将菌悬液12000rpm/min离心10min，去掉沉淀，取上清，加入3倍体积的无水乙醇，混匀后，置于4℃下静置24h。
(3)取出混合液，一般多糖呈絮状或者沉淀在底部，缓慢倒去大部分上清溶液，将下层液体离心去上清，获得的沉淀即是胞外多糖。
2.胞外多糖的初步纯化：
(1)酶解法去蛋白质：将胞外多糖用去离子水溶解，加入15U/mL的复合蛋白酶，置于50℃摇床，180rpm/min摇5h，取出后，加入三倍体积的无水乙醇，沉淀多糖。
(2)超滤去除小分子物质：将去除蛋白质的多糖溶液加入到3kDa超滤管中，4000g离心20min，去除滤过的液体，将未滤过的多糖溶液转移至干净的50mL离心管中。
(3)冻干：将多糖溶液在4℃预冷半个小时，在-80℃超低温冰箱过夜，最后用真空冷冻干燥机抽干。即可得到Cryptococcus heimaeyensis S20胞外多糖(EPS)，为浅黄色固体，产量约为0.5g/L。
3.多糖的成分检测：
(1)采用苯酚-硫酸法测得隐球酵母胞外多糖中糖含量为75.8％。
(2)采用考马斯亮蓝法测得隐球酵母胞外多糖不含蛋白质。
(3)通过DEAE-52纤维素的方式对胞外多糖进行分离纯化，分别用去离子水、0.05MNaCl、0.15M NaCl、0.25M NaCl、0.35M NaCl对胞外多糖进行洗脱，每个洗脱10管，每管40mL。如图8所示，得到一种含量较高的中性糖(EPS0)和三种含量相对较低的酸性多糖(EPS1,2,3)。
(4)利用气质联用GC-MS对所得隐球酵母胞外多糖进行分析检测，如图9，结果表明EPS0的单糖成分主要是葡萄糖(Glc)，所占比例达到92.1％，同时也存在少量甘露糖(Man)、木糖(Xyl)、半乳糖(Gal)和阿拉伯糖(Ara)。如图11，EPS1的单糖成分主要是是甘露糖(Man)、葡萄糖(Glc)、木糖(Xyl)，也有半乳糖(Gal)和阿拉伯糖(Ara)等成分。
(5)利用PMAA法对EPS0和EPS1糖苷键进行分析检测，结果表明EPS0主要糖苷键类型是4-Glcp,t-Glcp和4.6Glcp(图10)。EPS1为复杂的聚合体，主要的糖苷键的连接方式有t-Manp,2-Manp,2,6-Manp,4-Glcp(图12)。
【实施例2】一株隐球酵母Cryptococcus heimaeyensis S20菌株的胞外多糖的应用
1.抗肿瘤活性检测步骤：
(1)胞外多糖的溶解：
根据隐球酵母胞外多糖溶解情况，用细胞培养液溶解样品并用0.22μm滤膜过滤除菌，分别配成含有500、250、125、62.5μg/mL的隐球酵母胞外多糖溶液。
(2)细胞株的培养：
细胞株：人表皮癌细胞A431，人卵巢癌细胞SKOV-3，人宫颈癌细胞HeLa，人乳腺癌细胞MDA-MB-231，人肺癌细胞A549、人肝癌细胞Huh7、人正常胚肺成纤维细胞肺胚成纤维细胞MRC-5。
肿瘤细胞于37℃、5％CO2及饱和湿度环境下培养于含10％新生牛血清的完全培养基，细胞呈对数增长时铺板，调整细胞浓度至5000个/孔接种100μl完全于96孔培养板。
(3)细胞生长抑制率的检测：
肿瘤细胞在37℃培养24h贴壁生长后，去掉上清液，加入包含氟尿嘧啶(5-Fu)(50μg/mL)和不同浓度的EPS培养液100μl。在加药后0h、24h、48h、72h每孔分别加入10ul CCK-8试剂，孵育3h后检测吸光度值，计算EPS以及氟尿嘧啶(5-Fu)对不同细胞的抑制率。
肿瘤细胞生长抑制率(％)＝(OD对照-OD实验)/(OD对照-OD空白)×100。
(4)细胞克隆形成实验(Clone formation assay)：
肿瘤细胞于37℃、5％CO2及饱和湿度环境下培养于含10％新生牛血清的完全培养基，细胞呈对数增长时铺板，调整细胞浓度至1000个/孔接种2mL于6孔培养板。37℃培养48h后，去掉上清液，加入包含氟尿嘧啶(5-Fu)(50μg/mL)和不同浓度的EPS培养液2mL。继续培养8-10天之后，用甲醇固定细胞，结晶紫染色观察结果。
结果显示：不同浓度隐球酵母胞外多糖对人体正常细胞如肺胚成纤维细胞MRC-5的细胞毒性比较低，相比起常用抗癌药物5-FU(50μg/mL)在作用72h之后抑制率达到54.43％，较高浓度的隐球酵母(500ug/mL)对肺胚成纤维细胞MRC-5的抑制率也仅有24.46％，具体见表1.
表1
克隆形成实验(Clone formation assay)表明12天后低浓度的EPS对肺胚成纤维细胞MRC-5细胞的毒性依旧不大，见图1.
不同浓度隐球酵母胞外多糖对人表皮癌细胞A431的抑制作用效果明显，具体见表2.
表2
克隆形成实验(Clone formation assay)表明12天后EPS对人表皮癌细胞A431的抑制效果依旧明显，见图2.
不同浓度隐球酵母胞外多糖对人肺癌细胞A549的抑制作用较为明显，具体见表3。
表3
克隆形成实验(Clone formation assay)表明12天后EPS对肺癌细胞A549的抑制效果依旧明显，见图3.
不同浓度隐球酵母胞外多糖对人宫颈癌细胞HeLa的抑制作用较为明显，具体见表4.
表4
克隆形成实验(Clone formation assay)表明12天后EPS对人宫颈癌细胞HeLa的抑制效果依旧明显，见图4。
不同浓度隐球酵母胞外多糖对乳腺癌细胞MDA-MB-231的抑制作用较为明显，具体见表5
表5
克隆形成实验(Clone formation assay)表明12天后EPS对乳腺癌细胞MDA-MB-231的抑制效果依旧明显，见图5。
不同浓度隐球酵母胞外多糖对卵巢癌细胞SKOV-3的抑制作用较为明显。具体见表6.
表6
克隆形成实验(Clone formation assay)表明12天后EPS对卵巢癌细胞SKOV-3的抑制效果依旧明显，见图6。
不同浓度隐球酵母胞外多糖对人肝癌细胞Huh7的抑制作用短期来看并不明显，具体见表7.
表7
但是克隆形成实验(Clone formation assay)表明，长期来看，EPS对人肺癌细胞人肝癌细胞Huh7的抑制效果依旧很明显。见图7。
Claims (4)
1.一株隐球酵母菌株，其特征在于，是保藏号为CCTCC NO：M 2018911的隐球酵母，命名为隐球酵母S20 Cryptococcus heimaeyensis S20。
2.权利要求1所述的隐球酵母菌株所产生的胞外多糖，其特征在于，通过以下制备方法制得：
1）胞外多糖的提取：
（1）将5mL生长至对数期的隐球酵母S20接种到盛有300mL YM培养基的锥形瓶中，置于180rpm/min的20℃摇床中培养4-5天；
（2）将菌悬液12000rpm/min离心10min，去掉沉淀，取上清，加入3倍体积的无水乙醇，混匀后，置于4℃下静置24h；
（3）取出混合液，一般多糖呈絮状或者沉淀在底部，缓慢倒去大部分上清溶液，将下层液体离心去上清，获得的沉淀即是胞外粗多糖；
2）胞外多糖的初步纯化：
（1）酶解法去蛋白质：将多糖溶液用去离子水溶解，加入15U/mL的复合蛋白酶，置于50℃摇床，180rpm/min摇5h，取出后，加入三倍体积的无水乙醇，沉淀多糖；
（2）超滤去除小分子物质：将去除蛋白质的多糖溶液加入到3kDa超滤管中，4000g离心20min，去除滤过的液体，将未滤过的多糖溶液转移至干净的50mL离心管中；
（3）冻干：将多糖溶液在4℃预冷半个小时，在-80℃超低温冰箱过夜，最后用真空冷冻干燥机抽干，即可得到隐球酵母S20胞外多糖。
3.权利要求2所述的隐球酵母菌株所产生的胞外多糖在制备抗肿瘤药物中的应用。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述的肿瘤为人表皮癌、肺癌、人宫颈癌、乳腺癌、卵巢癌。
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| CN (1) | CN109929765B (zh) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN113181222A (zh) * | 2021-04-26 | 2021-07-30 | 武汉大学 | 一株隐球酵母的胞外多糖代谢产物在抗病毒上的应用 |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2010074209A1 (ja) * | 2008-12-26 | 2010-07-01 | 味の素株式会社 | 変異型リパーゼとその応用 |
| CN102657674A (zh) * | 2012-04-11 | 2012-09-12 | 山东大学 | 一种具有抗癌活性拟康氏木霉胞外多糖的应用 |
| CN105441357A (zh) * | 2015-12-16 | 2016-03-30 | 北京工商大学 | 一株产抗肿瘤活性胞外多糖的植物乳杆菌 |
-
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Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2010074209A1 (ja) * | 2008-12-26 | 2010-07-01 | 味の素株式会社 | 変異型リパーゼとその応用 |
| CN102657674A (zh) * | 2012-04-11 | 2012-09-12 | 山东大学 | 一种具有抗癌活性拟康氏木霉胞外多糖的应用 |
| CN105441357A (zh) * | 2015-12-16 | 2016-03-30 | 北京工商大学 | 一株产抗肿瘤活性胞外多糖的植物乳杆菌 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| M. ENSHAEIEH等: "Optimizing of lipid production in Cryptococcusheimaeyensis through M32 array of Taguchi design", 《PROCESS SAFETY AND ENVIRONMENTAL PROTECTION》 * |
| 包怡红等: "产胞外多糖酵母菌株的筛选鉴定及发酵产糖", 《微生物学报》 * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN113181222A (zh) * | 2021-04-26 | 2021-07-30 | 武汉大学 | 一株隐球酵母的胞外多糖代谢产物在抗病毒上的应用 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN109929765B (zh) | 2020-10-13 |
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Legal Events
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| PB01 | Publication | ||
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| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
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| GR01 | Patent grant | ||
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