CN109833483A - 基于小分子伴侣的索拉非尼纳米药物的制备 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种基于小分子伴侣的索拉非尼纳米药物及其制备方法，该方法基于小分子伴侣包括将小分子伴侣与索拉非尼混合，利用纳米沉淀法制得索拉非尼纳米药物，其中，所述小分子伴侣为两亲性脂质酸或其盐。该制备方法简单、载药量超高、重现性好、绿色环保，适合工业化大规模生产，并且得到的索拉非尼纳米药物溶解度好、稳定性高。

Description

基于小分子伴侣的索拉非尼纳米药物的制备

技术领域

本发明涉及药物制剂技术领域，具体涉及一种基于小分子伴侣的索拉非尼纳米药物的制备方法。

背景技术

索拉非尼是一种新型多靶点抗肿瘤药物，可同时抑制多种激酶，发挥多重抗肿瘤效应。索拉非尼溶解度差，疏水性强。为提高其在水中的溶解度，临床将其制成甲苯磺酸盐，索拉非尼的商品制剂为通用名为甲苯磺酸索拉非尼片，英文商品名为但其水溶性仍较差，口服生物利用度低，临床应用剂量大，副作用明显(包括高血压、手足皮肤反应以及包括胃出血在内的胃肠道反应)等限制其临床应用。

目前报道的索拉非尼递送系统主要有以下几种：脂质类纳米载体、聚合物纳米粒、胶束和无机纳米粒等。如专利CN104523607A公开了一种索拉非尼脂质体注射用冻干粉针剂及其制备方法，通过制备索拉非尼脂质体，提高索拉非尼在水溶液中的稳定性、溶解度和生物利用度；张洪等(索拉非尼半乳糖神经酰胺固体脂质纳米粒的研制，广东药学院学报，2013，29(5))公开了一种索拉非尼半乳糖神经酰胺固体脂质纳米粒，采用乳化蒸发-低温固化法制备脂质纳米粒子为类球形实体。但上述方式均涉及大量辅料的使用、存在载药量低、制备工艺复杂、重现性差、生产成高等问题。

因此，针对索拉非尼临床应用中存在的问题，使用最少的辅料，开发出物理及化学稳定的纳米药物，改善其溶解度和生物利用度，并提高其安全性、有效性以及实现靶向给药，具有重要应用价值。

发明内容

针对上述问题，发明人通过实验研究，利用小分子伴侣与索拉非尼分子间π-π、CH-π等强相互作用力，提供了一种基于小分子伴侣的索拉非尼纳米药物及其制备方法，本发明的制备方法简单、载药量超高、重现性好、绿色环保，适合工业化大规模生产，并且得到的索拉非尼纳米药物溶解度好、稳定性高、粒径均匀、分散性好。

本发明通过以下技术方案实现：

本发明提供了一种索拉非尼纳米药物的制备方法，所述方法基于小分子伴侣包括将小分子伴侣与索拉非尼混合，其中，所述小分子伴侣为两亲性脂质酸或其盐。

进一步地，所述方法基于小分子伴侣与索拉非尼分子间π-π、CH-π等强相互作用力，通过将小分子伴侣与索拉非尼混合，利用选自包括但不限于共沉淀法、高压匀质法、薄膜分散法等方法，优选共沉淀法制得索拉非尼纳米药物。

其中，本发明所述的索拉非尼药物为式I所示结构，其分子式为C₂₁H₁₆ClF₃N₄O₃，相对分子质量为464.8：

进一步地，所述小分子伴侣选自以下结构：

本发明的发明人通过实验研究发现，采用本发明如上所示的小分子伴侣，其由于自身的两亲性质，疏水部分可以与索拉非尼发生π-π，CH-π等强相互作用从而诱导索拉非尼分散并抑制晶型的形成，亲水部分则分散在外层，维持粒子的稳定。

进一步地，本发明所述的方法包括将索拉非尼药物和小分子伴侣混溶于有机溶剂中获得有机相溶液；将有机相溶液加入水相溶液中；除去有机溶剂，即得。

进一步地，所述索拉非尼与小分析伴侣的摩尔比为1:(0.1-10)，进一步为1:(0.5-2)，更进一步为1：1；

进一步地，所述索拉非尼在有机溶剂中的质量体积浓度为1-100mg/mL，进一步为10-50mg/mL,更进一步为20-25mg/mL，最优为25mg/mL；

进一步地，所述水相溶液选自注射用水、葡萄糖注射液、生理盐水或缓冲液；进一步为注射用水。

进一步地，所述有机相溶液与水相溶液的体积比为1：2-100，进一步1：2-50，更进一步为1：25；

进一步地，索拉非尼与水相溶液的质量体积比(g/L)为1：(0.5-2)，进一步为1：1；

进一步地，所述有机溶剂选自甲醇、乙醇、丙酮、DMSO和DMF中的一种或多种；

进一步选自DMSO和DMF，更进一步为DMF；

进一步地，所述有机相溶液加入水相溶液中的方式为滴入，其中，滴加速度为0.5-20mL/min，进一步为1-5mL/min，更进一步为1mL/min；

进一步地，所述方法包括将索拉非尼药物和小分子伴侣混溶于有机溶剂中获得有机相溶液；搅拌或超声条件下将有机相溶液加入水相溶液中；旋转蒸发或透析法除去有机溶剂，即得。

进一步地，所述搅拌速度为300-6000r/min，进一步为2000-6000r/min；

进一步地，将有机相溶液加入水相溶液中时的温度为15-50℃，优选为20-40℃，优选为室温。

其次，本申请还提供了根据上述方法制备得到的索拉非尼纳米药物。

进一步地，所述索拉非尼纳米药物为索拉非尼药物脂质纳米混悬剂，所述混悬剂中纳米粒子的平均粒径为20-700nm，进一步为70-150nm，更进一步为80-100nm。

进一步地，所述索拉非尼纳米药物的分散系数PDI为0.1-0.6，比如PDI可以为0.1-0.2、0.1-0.3、0.1-0.4、0.2-0.3、0.2-0.4、0.3-0.4、0.3-0.5、0.4-0.5、0.4-0.6；进一步地，PDI为0.1-0.5，进一步为0.1-0.4，进一步为0.1-0.3，进一步为0.1-0.2。

此外，本申请还提供了一种索拉非尼纳米药物的冻干制剂，其通过将上述方法制备得到的索拉非尼纳米药物干燥固化得到。

进一步地，所述干燥方式选自冷冻干燥、喷雾冷冻干燥或喷雾干燥；

进一步地，在干燥固化过程中需要加入冻干保护剂，所述冻干保护剂选自甘露醇、山梨醇、聚乙二醇、葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、乳糖、果糖、海藻糖、右旋糖酐、氨基酸、氨基酸盐、磷酸盐中的一种或多种；进一步为甘露醇。

进一步地，冻干保护剂在索拉非尼纳米药物中的浓度为0.005-0.2mg/mL，进一步为0.05-0.1mg/mL。

比如，将制备得到的索拉非尼纳米药物加入冻干保护剂(比如0.05mg/mL甘露醇)后装入西林瓶中，置冰箱中预冻(比如-80℃预冻24h)，转入冷冻干燥机中(比如-40℃，0.5bar下冷冻干燥48h)，得冻干制剂；该冻干制剂加入2mL注射用水经振摇可于lmin内完全复溶。

本发明取得了以下有益效果：

(1)本发明基于小分子伴侣的索拉非尼纳米药物，避免了大量大分子材料的引入，选用少量的小分子伴侣，避免大分子载体引起的代谢和毒副作用。

(2)本发明制剂外观形态呈类球形，平均粒径小且均匀，平均粒径约为80nm左右，稳定性良好，zeta电位约为-30mv左右。

(3)本发明的索拉非尼纳米药物处方简单，大大提高了索拉非尼载药量，所制得纳米药物载药量高达40％以上。

(4)结构明确、制备简单、重现性高、性质易控、成本更低、方法更加绿色环保。

(5)本发明所述制剂大大提高了索拉非尼在水中溶解度，改善了其体外释放行为。

此外，本发明的方法和传统的纳米制剂相比，此法具有很多优势：首先，由于利用本发明的小分子伴侣与索拉非尼间的强相互作用包载药物，很少引入其他大分子聚合物材料等，由此形成的纳米药物具有很高的载药量和肿瘤细胞杀伤效率，同时避免了大分子材料引入造成的代谢问题和毒副作用；其次，结构明确、制备简单、重现性高、性质易控、方法更加绿色环保；第三，仍然保留纳米制剂的优势，大大改善药物的稳定性、溶解性和药代动力学性质，从而有助于提高药物在肿瘤部位的蓄积，有助于增强抑瘤效果，降低毒副作用。

附图说明

以下，结合附图来详细说明本发明的实施方案，其中：

图1为本发明的基于小分子伴侣的索拉非尼纳米药物的透射电镜照片。

图2为本发明的基于小分子伴侣的索拉非尼纳米药物的粒径分布。

图3为本发明基于小分子伴侣的索拉非尼纳米药物电位。

具体实施方式

下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件或按照制造厂商所建议的条件。

除非另行定义，文中所使用的所有专业与科学用语与本领域熟练人员所熟悉的意义相同。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用于本发明方法中。文中所述的较佳实施方法与材料仅作示范之用。

实施例1

基于小分子伴侣6的索拉非尼纳米药物的制备

将索拉非尼与小分子伴侣6(摩尔比1：1)共同溶解于DMF(索拉非尼25mg/ml)中，室温下将40ul DMF溶液滴加至1000ul注射用水中，滴加速度为1mL/min，高速(2000r/min)涡旋搅拌，透析后除去有机溶剂得载索拉非尼纳米药物。通过透射电镜(TEM)，动态光散射粒度仪(DLS)分析测定。发现索拉非尼在6的作用下所形成的纳米粒为80-100nm，形态圆整，分散性良好如图1所示，分散系数PDI为0.1～0.2，电位为-30～-40mV，如图2所示。

实施例2-7

根据实施例1的方法与实施例1相同条件下分别制备不同小分子伴侣的索拉非尼纳米药物，结果见表1。

表1

实施例8-11

以小分子伴侣6为例，本实施例按照实施例1的方法制备基于小分子伴侣6的索拉非尼纳米药物，分别探索了不同的索拉非尼与小分子伴侣的摩尔比对制备得到的索拉非尼纳米药物的影响，结果见表2。

表2

实施例12-15

以小分子伴侣6为例，本实施例按照实施例1的方法制备基于小分子伴侣6的索拉非尼纳米药物，分别探索了不同的索拉非尼与有机溶剂的质量体积比(或者索拉非尼在有机溶剂中的质量体积浓度)对制备得到的索拉非尼纳米药物的影响，结果见表3。

表3

实施例16

以小分子伴侣6为例，本实施例按照实施例1的方法制备基于小分子伴侣6的索拉非尼纳米药物，分别探索了不同的有机相溶液与水相溶液的体积比对制备得到的索拉非尼纳米药物的影响，结果见表4。

表4

实施例22

以小分子伴侣6为例，本实施例按照实施例1的方法制备基于小分子伴侣6的索拉非尼纳米药物，分别探索了不同有机溶剂对制备得到的索拉非尼纳米药物的影响，结果见表5。

表5

实施例	有机溶剂	粒径，分散系数PDI
			1	DMF	80-100nm，0.1-0.2
22	DMSO	70-150nm，0.1-0.2

实施例23-24

以小分子伴侣6为例，本实施例按照实施例1的方法制备基于小分子伴侣6的索拉非尼纳米药物，分别探索了不同的将有机相溶液滴入水相溶液速度对制备得到的索拉非尼纳米药物的影响，结果见表6。

表6

实施例	滴加速度(mL/min)	粒径，分散系数PDI
			1	1	80-100nm，0.1-0.2
23	5	100-200nm，0.1-0.3
			24	20	100-200nm，0.1-0.4

实施例25基于小分子伴侣6的索拉非尼纳米药物的冻干制剂

将实施例制备得到的索拉非尼纳米药物加入0.05mg/mL甘露醇后装入西林瓶中，置冰箱中-80℃预冻24h，转入冷冻干燥机中-40℃，0.5bar，48h，得冻干制剂，该冻干制剂加入2mL注射用水经振摇可于lmin内完全复溶。

Claims (10)

1.一种索拉非尼纳米药物的制备方法，所述方法基于小分子伴侣包括将小分子伴侣与索拉非尼混合，其中，所述小分子伴侣为两亲性脂质酸或其盐。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述小分子伴侣选自以下结构：

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述方法包括将索拉非尼药物和小分子伴侣混溶于有机溶剂中获得有机相溶液；将有机相溶液加入水相溶液中；除去有机溶剂，即得。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其特征在于，所述索拉非尼与小分析伴侣的摩尔比为1:(0.1-10)，进一步为1:(0.5-2)，更进一步为1：1；

进一步地，所述索拉非尼在有机溶剂中的质量体积浓度为1-100mg/mL，进一步为10-50mg/mL,更进一步为20-25mg/mL，最优为25mg/mL；

进一步地，所述水相溶液选自注射用水、葡萄糖注射液、生理盐水或缓冲液；进一步为注射用水；

进一步地，所述有机相溶液与水相溶液的体积比为1：2-100，进一步1：2-50，更进一步为1：25；

进一步地，索拉非尼与水相溶液的质量体积比(g/L)为1：(0.5-2)，进一步为1：1。

5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述有机溶剂选自甲醇、乙醇、丙酮、DMSO和DMF中的一种或多种；

进一步选自DMSO和DMF，更进一步为DMF。

6.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述有机相溶液加入水相溶液中的方式为滴入，其中，滴加速度为0.5-20mL/min，进一步为1-5mL/min，更进一步为1mL/min。

7.根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其特征在于，所述方法包括将索拉非尼药物和小分子伴侣混溶于有机溶剂中获得有机相溶液；搅拌或超声条件下将有机相溶液加入水相溶液中；旋转蒸发或透析法除去有机溶剂，即得。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述搅拌速度为300-6000r/min，进一步为2000-6000r/min；

进一步地，将有机相溶液加入水相溶液中时的温度为15-50℃，优选为20-40℃。

9.根据权利要求1至8中任一项所述的方法得到的索拉非尼纳米药物；

进一步地，所述索拉非尼纳米药物为索拉非尼药物脂质纳米混悬剂，所述混悬剂中纳米粒子的平均粒径为20-700nm，进一步为70-150nm，更进一步为80-100nm。

10.一种索拉非尼纳米药物的冻干制剂，其通过将权利要求9中所述的索拉非尼纳米药物干燥固化得到；

进一步地，所述干燥方式选自冷冻干燥、喷雾冷冻干燥或喷雾干燥；

进一步地，在干燥固化过程中需要加入冻干保护剂，所述冻干保护剂选自甘露醇、山梨醇、聚乙二醇、葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、乳糖、果糖、海藻糖、右旋糖酐、氨基酸、氨基酸盐、磷酸盐中的一种或多种；进一步为甘露醇；

进一步地，冻干保护剂在索拉非尼纳米药物中的浓度为0.005-0.2mg/mL，进一步为0.05-0.1mg/mL。